Способ оценки эффективности антибактериальной терапии при диализном перитоните



Способ оценки эффективности антибактериальной терапии при диализном перитоните
Способ оценки эффективности антибактериальной терапии при диализном перитоните
Способ оценки эффективности антибактериальной терапии при диализном перитоните

 


Владельцы патента RU 2567732:

Государственное бюджетное учреждение здравоохранения Московской области "Московский областной научно-исследовательский клинический институт им. М.В. Владимирского" (ГБУЗ МО МОНИКИ им. М.Ф. Владимирского) (RU)

Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ оценки эффективности антибактериальной терапии при диализном перитоните, включающий введение антибактериальных препаратов в пакет с диализным раствором с последующим введением в брюшную полость, морфологическое исследование диализата, отличающийся тем, что после проведения цикла обмена диализирующего раствора проводят исследование диализата методом клиновидной дегидратации, при этом диализат центрифугируют при 1500 об/мин в течение 10-15 минут и отбирают 2 пробы - первую из верхней половины пробирки, вторую - из нижней, выявляют структуру кристаллов солей в диализате и при наличии линейных кристаллов в центральной зоне фаций обеих проб оценивают эффективность терапии как удовлетворительную и не требующую ее продолжения, при наличии линейных кристаллов только в первой пробе оценивают эффективность терапии как удовлетворительную и требующую ее продолжения, при их отсутствии - как неудовлетворительную. Применение способа позволяет ускорить оценку эффективности антибактериальной терапии и повысить точность оценки. 4 пр., 3 ил.

 

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано при диализном перитоните у пациентов с почечной недостаточностью, получающих лечение перитонеальным диализом в стационарных условиях.

Известно, что развитие диализного перитонита у пациентов, получающих лечение перитонеальным диализом, достигает почти 70% случаев в течение первых 6 месяцев лечения и зачастую сопровождается снижением клиренса уремических сольвентов, развитием гипоальбуминемии и гипергидратации, в результате чего снижется качество жизни, а также выживаемость пациентов, получающих этот вид заместительной почечной терапии, а также выживаемость метода (Pulliam J1 et al., Am J Kidney Dis., 2014 Jun 11).

Известно, что основным способом купирования диализного перитонита является применение антибактериальной терапии с обязательным выполнением бактериологического исследования как для идентификации микрофлоры, так и с целью определения чувствительности к антимикробным препаратам, а также оценки эффективности антибактериальной терапии (Camargo CH. Clin J Am Soc Nephrol. 2014 Jun 6;9(6):1074-81).

Недостатком использования бактериологического исследования с целью оценки результатов антибактериальной терапии является длительность исследования, составляющая 3 и более суток. Следует подчеркнуть, что необоснованно длительная антибактериальная терапия способствует развитию микотического поражения. Это обусловливает прекращение заместительной почечной терапии перитонеальным диализом и перевода пациентов на лечение гемодиализом, что существенно удорожает лечение.

Наиболее близким способом определения эффективности антибактериальной терапии при диализном перитоните является способ, включающий введение антибактериальных препаратов в пакет с диализным раствором с последующим введением в брюшную полость, морфологическое исследование диализата (http://www.kazmed.ru/bolezni-mochepolovoy-sistemy/peritonealnyy-dializ).

К недостаткам описанного способа относится невысокая достоверность диагностики диализного перитонита и неспецифичность исследования на цитоз.

Задачей предлагаемого изобретения является устранение указанных недостатков, повышение точности определения эффективности проводимого лечения, уменьшение сроков проведения исследований, и, следовательно, исключение необоснованно длительной терапии антибиотиками за счет получения объективной информации при исследовании диализирующего раствора, возможность быстрого получения результата исследования - в течение до 18 часов; создание технически простого и экономичного исследования.

Для этого при оценке эффективности антибактериальной терапии при диализном перитоните, включающей введение антибактериальных препаратов в пакет с диализным раствором с последующим введением в брюшную полость, морфологическое исследование диализата, предложено после проведения цикла обмена диализирующего раствора проводить исследование диализата методом клиновидной дегидратации. При этом диализат центрифугируют при 1500 об/мин в течение 10-15 минут и отбирают 2 пробы - первую из верхней половины пробирки, вторую - из нижней, выявляют структуру кристаллов солей в диализате и при наличии линейных кристаллов в центральной зоне фаций обеих проб оценивают эффективность терапии как удовлетворительную и не требующую ее продолжения. При наличии линейных кристаллов только в первой пробе оценивают эффективность терапии как удовлетворительную и требующую ее продолжения. При отсутствии линейных кристаллов в центральной зоне фаций обеих проб оценивают проводимую антибактериальную терапию как неудовлетворительную.

В последнем случае требуется срочная конверсия на лечение гемодиализом с обязательным удалением перитонеального катетера, являющегося в таких случаях источником инфекции в результате образования на его поверхности биопленки из продуктов бактериального метаболизма.

Исследование картины структур диализирующего раствора, полученного непосредственно из брюшной полости через указанное время проведения заместительной почечной терапии, является интегральным показателем взаимодействия органической составляющей и минерального вещества - соли. При хронической почечной недостаточности органическая составляющая в таком диализирующем растворе представлена детритом, т.е. продуктами распада бактериальных белков. В процессе дегидратации диализирующего раствора действие органического детрита на кристаллизацию соли проявляется разрушением ее структуры в виде системной фрагментации. При этом чем выше концентрация детрита, тем сильнее выражена фрагментация структур соли и степень ее упорядоченности. То есть наибольшая степень фрагментации структур солей и хаотичность их расположения свидетельствует о выведении из организма значительной концентрации продуктов распада белковых фракций, на что, собственно, и направлена заместительная почечная терапия у пациентов с почечной недостаточностью.

На фиг. 1а, б представлена структура проб диализата из верхней части пробирки (1) и из нижней части пробирки (2) после центрифугирования при осуществленной адекватной и эффективной терапии и не требующей ее продолжения; на фиг. 2а, б - структура проб диализата из верхней части пробирки (1) и из нижней части пробирки (2) после центрифугирования при оценке терапии как эффективной, но требующей ее продолжения; на фиг. 3а, б - структура проб диализата из верхней части пробирки (1) и из нижней части пробирки (2) после центрифугирования при неудовлетворительной терапии.

Способ осуществляется следующим образом.

Пациенту с подтвержденным клиническими исследованиями диализным перитонитом через перитонеальный катетер вводили диализирующий раствор, осмолярность которого составила 7,5% - экстранил, в который предварительно помещали раствор антибактериального препарата, например, ванкомицина с концентрацией 500-1000 мг, затем через 1 час с помощью шприца проводили аспирацию 10-15,0 мл диализата из брюшной полости и помещали в пробирки, диализат центрифугировали при 1500 об/мин в течение 10-15 минут и отбирали 2 пробы - первую из верхней половины пробирки, вторую - из нижней.

Полученные пробы диализирующего раствора наносили на пластиковую поверхность тест-карты в количестве 0,02 мл в форме капли и оставляли в условиях рабочей комнаты для дегидратации в стандартных условиях (температура 20-25°C, относительная влажность 55-60%, минимальная подвижность воздуха). Через 3-18 часов оценивали морфологическую картину полученной фации из первой и второй проб (после центрифугирования первая проба забирается из области верхней ½ пробирки, вторая - из нижней) при обычной микроскопии (×10-40) и давали результат исследования в виде заключения.

Так, при эффективном применении антибактериальной терапии, оцененной путем анализа структуры диализата с использованием метода клиновидной дегидратации, была получена структура, характеризующаяся наличием перпендикулярно расположенных относительно друг друга линейных фрагментов кристаллов солей в обеих пробах (фиг. 1).

В подобных случаях прекращали интраперитонеальное введение антибактериальных препаратов с продолжением диализного лечения в необходимом объеме с последующим переводом пациентов на амбулаторное наблюдение.

Определение линейных кристаллов только в первой пробе и отсутствие их во второй оценивалось как правильное, т.е. адекватно выбранное антибактериальное лекарственное средство, с помощью которого необходимо продолжить антибактериальную терапию. Повторное исследованием диализирующего раствора предлагаемым способом рекомендуется проводить через 5-7 суток.

Отсутствие линейных кристаллов в обеих пробах диализирующего раствора свидетельствовало о неэффективности текущей антибактериальной терапии и, как первый этап - необходимости смены антибактериального препарата на таковой другой группы, а в последующем при неэффективности лечения пациента с диализным перитонитом перевод его на лечение гемодиализом.

Для подтверждения результатов исследования по предлагаемому способу сравнивали с результатами исследований у контрольной группы, пациентам которой определяли содержание лейкоцитов в диализирующей жидкости, результаты бактериологического исследования, окраска пробы диализирующего раствора по Граму. Сравнительный анализ результатов клинического и бактериологического лабораторных исследований с результатами анализа структур внеклеточной жидкости, полученными путем клиновидной дегидратации диализирующего раствора, позволило выявить корреляцию определяемых параметров.

Пример 1.

Пациент В., 53 года. Поступил на стационарное лечение с диагнозом: хронический гломерулонефрит. Хроническая почечная недостаточность, терминальная стадия. Постоянный амбулаторный перитонеальный диализ в объеме 8 л в сутки низкоосмолярным диализирующим раствором в течение 1 года. Диализный перитонит.

Клинические проявления диализного перитонита: боли в животе без четкой локализации, мутный дренируемый диализирующий раствор. Была назначена антибактериальная терапия цефазолином, который был введен в мешок с диализирующим раствором.

Для оценки эффективности антибактериальной терапии был выполнен забор пробы 7,5% диализирующего раствора из брюшной полости через 1 час после его инфузии с помощью шприца в объеме 15,0 мл и помещен в пробирки для исследования по предлагаемому способу.

После центрифугирования в течение 10 минут при скорости 1500 оборотов в минуту полученный диализирующий раствор был нанесен на пластиковую поверхность тест-карты в количестве 0,03 мл в форме капли и оставлен в термостате для дегидратации. Через 5 часов при микроскопии образца диализирующего раствора, обработанного с применением метода клиновидной дегидратации, была получена морфологическая картина линейных кристаллов солей только в первой пробе (фиг. 2). Выбранный препарат был признан эффективным, и антибактериальная терапия была продолжена.

Через 5 суток повторно выполнен забор пробы 7,5% диализирующего раствора из брюшной полости через 1,5 часа после его инфузии с помощью шприца в объеме 10,0 мл и помещен в пробирки для повторного исследования.

Была получена морфологическая картина линейных кристаллов солей в обеих пробах (фиг. 1). Антибактериальная терапия прекращена.

Пациент был выписан в удовлетворительном состоянии на амбулаторное лечение на следующие сутки.

Пример 2.

Больной О., 44 года. Обратился амбулаторно с жалобами на умеренно выраженные боли в нижней части живота, дренируемый диализирующий раствор прозрачный со 2-х суток антибактериальной терапии. Эмпирическая антибактериальная терапия в течение трех суток.

Диагноз: поликистоз почек. Хроническая почечная недостаточность, терминальная стадия. Постоянный амбулаторный перитонеальный диализ в объеме 10 л в сутки средне- и низкоосмолярными диализирующими растворами (1:1) в течение 6 месяцев. Диализный перитонит.

С целью купирования диализного перитонита было назначено интраперитонеальное введение ванкомицина в суточной дозе 2 г.

После проведения цикла обмена диализирующего раствора с целью оценки необходимости продолжения антибактериальной терапии был выполнен забор пробы 7,5% диализирующего раствора из брюшной полости через 1,5 часа после его инфузии с помощью шприца в объеме 15,0 мл и помещен в пробирки для исследования по вышеописанной предлагаемой методике.

После центрифугирования в течение 12 минут при скорости 1500 оборотов в минуту полученные пробы диализирующего раствора были нанесены на пластиковую поверхность тест-карты в количестве 0,04 мл в форме капли и оставлены в термостате для дегидратации. Через 3 часа при микроскопии образца диализирующего раствора получена морфологическая картина линейных кристаллов солей в обеих пробах (фиг. 1). Антибактериальная терапия прекращена. Пациент переведен на амбулаторне лечение на следующие сутки.

Пример 3.

Пациент М., 26 лет. Госпитализирован с диагнозом: аномалия развития мочевыводящих путей. Хронический пиелонефрит. Хроническая почечная недостаточность, терминальная стадия. Постоянный амбулаторный перитонеальный диализ в объеме 8 л в сутки низкоосмолярным диализирующим раствором в течение 3 лет. Диализный перитонит.

Клинические проявления диализного перитонита: боли в животе без четкой локализации, мутный дренируемый диализирующий раствор. Назначена антибактериальная терапия цефазолином в дозе 2 г в сутки.

После проведения цикла обмена диализирующего раствора при микроскопии образцов диализата, обработанного с применением метода клиновидной дегидратации, было выявлено отсутствие линейной структуры кристаллов солей (фиг. 3).

Проведена смена антибактериального препарата, назначен абактал в суточной дозе 800 мг интраперитонеально.

После проведения цикла обмена диализирующего раствора повторно проведено исследование методом клиновидной дегидратации диализата для оценки эффективности лечения пациента с диализным перитонитом.

При микроскопии образцов диализата по предлагаемому способу было выявлено отсутствие линейной структуры кристаллов солей, получена морфологическая картина линейных кристаллов солей только в первой пробе (фиг. 2). Продолжено интраперитонеальное введение раствора абактала в прежней дозе.

Через 4 суток после очередного исследования диализата по предложенному способу проведено очередное исследование. При микроскопии получена морфологическая картина линейных кристаллов солей в обеих пробах (фиг. 1).

Антибактериальная терапия прекращена. Пациент выписан на амбулаторное лечение.

Пример 4.

Пациент М., 37 лет. Госпитализирован с диагнозом: хронический гломерулонефрит. Хроническая почечная недостаточность, терминальная стадия. Постоянный амбулаторный перитонеальный диализ в объеме 10 л в сутки низкоосмолярным диализирующим раствором в течение 3 лет. Диализный перитонит (повторный эпизод).

Клинические проявления диализного перитонита: боли в животе без четкой локализации, снижение прозрачности дренируемого диализирующего раствора. Эмпирическая антибактериальная терапия абакталом в дозе 1200 мг в сутки.

С целью оценки эффективности лечения при микроскопии образцов диализирующего раствора, обработанных с применением метода клиновидной дегидратации, было выявлено отсутствие линейной структуры кристаллов солей (фиг. 3).

Проведена смена антибактериального препарата, назначен ванкомицин в суточной дозе 3000 мг интраперитонеально.

На вторые сутки после смены антимикробного препарата было повторно проведено исследование методом клиновидной дегидратации диализата для оценки эффективности лечения пациента с диализным перитонитом.

При микроскопии образцов диализата, обработанных с применением метода клиновидной дегидратации, было выявлено отсутствие линейной структуры кристаллов солей (фиг. 3).

В связи с неэффективностью проведения антибактериальной терапии лечение перитонеальным диализом было завершено, перитонеальный катетер удален, проведена конверсия на гемодиализ.

Назначена комбинированная антимикробная терапия с антимикотиками. Через 3 суток отмечена положительная динамика. Пациент был выписан на амбулаторное лечение программным гемодиализом через 7 суток в удовлетворительном состоянии.

При клиническом лабораторном исследовании выявлен выраженный лейкоцитоз, при бактериологическом исследовании (через 5 суток) - отрицательный результат посева образца диализата на флору.

Применение предлагаемого способа для оценки эффективности антибактериальной терапии было выполнено у 26 пациентов, страдавших диализным перитонитом. В 18 случаях была подтверждена эффективность антибактериальной терапии, в 8 случаях - отсутствие целесообразности продолжения антимикробной терапии и бесперспективность лечения перитонеальным диализом, последние были переведены на лечение гемодиализом. Это позволило повысить выживаемость и качество жизни пациентов (18), получавших лечение перитонеальным диализом, а также этого вида заместительной почечной терапии, сократить стоимость лечения за счет своевременно (8) выполненной конверсии на гемодиализ и прекращения безрезультатного применения антибактериальной терапии.

Применение способа в клинической практике позволяет оценить эффективность антибактериальной терапии при диализном перитоните в течение 1-3 суток, подтверждение которой ведет к сокращению сроков госпитализации, а выявление признаков отсутствия эффективности лечения позволяет в короткие срок осуществить обоснованное завершение лечения перитонеальным диализом с переводом на лечение гемодиализом, что ведет к повышению качества жизни и выживаемости пациентов, получающих этот вид заместительной почечной терапии, снижению затрат на лечение этой категории пациентов.

Способ оценки эффективности антибактериальной терапии при диализном перитоните, включающий введение антибактериальных препаратов в пакет с диализным раствором с последующим введением в брюшную полость, морфологическое исследование диализата, отличающийся тем, что после проведения цикла обмена диализирующего раствора проводят исследование диализата методом клиновидной дегидратации, при этом диализат центрифугируют при 1500 об/мин в течение 10-15 минут и отбирают 2 пробы - первую из верхней половины пробирки, вторую - из нижней, выявляют структуру кристаллов солей в диализате и при наличии линейных кристаллов в центральной зоне фаций обеих проб оценивают эффективность терапии как удовлетворительную и не требующую ее продолжения, при наличии линейных кристаллов только в первой пробе оценивают эффективность терапии как удовлетворительную и требующую ее продолжения, при их отсутствии - как неудовлетворительную.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для определения глубины залегания липидных ядер, являющихся центром атеросклеротических бляшек. Изобретение представляет способ определения глубины залегания липидных ядер атеросклеротических бляшек методом ИК-Фурье спектроскопии, заключающийся в том, что подготавливаются срезы атеросклеротически измененного участка сосудистого русла, записываются инфракрасные спектры пропускания подготовленных срезов, идентифицируются характеристические пики поглощения, отличающийся тем, что определяется срез, имеющий максимальное поглощение в диапазоне 1720-1760 см-1, соответствующем валентным колебаниям связей C=O сложных эфиров холестерина, который отвечает глубине залегания липидного ядра.

Изобретение относится к биотехнологии и медицине, в частности иммунологии, и предназначено для определения аутоантител к прогестерону в сыворотке и плазме крови человека.

Изобретение относится к способу получения многослойных покрытий на основе полиэлектролитных микрокапсул, содержащих биологически активные материалы, для применения в областях диагностики и медицины.

Изобретение относится к медицине, а именно к способу оценки угрозы гибели ворсинок плаценты и неполноценного развития плода при обострении цитомегаловирусной инфекции в третьем триместре гестации.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и перинатологии, может быть использовано для прогнозирования развития инфекционно-воспалительных заболеваний у новорожденных.
Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике, и может быть использовано для оценки угрозы повреждения фетоплацентарного барьера при обострении цитомегаловирусной инфекции в третьем триместре гестации.

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и касается прогнозирования развития кардиоваскулярных осложнений острого коронарного синдрома с подъемом сегмента ST.

Изобретение относится к области медицины, а именно к онкологии, и описывает способ прогнозирования лимфогенного метастазирования при инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы.
Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии, и предназначено для диагностики ранений ободочной кишки, в частности ранений ее забрюшинного отдела. Пострадавшему с подозрением на повреждение ободочной кишки выполняют первичную хирургическую обработку раны с ее ревизией.

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу дифференциальной диагностики между туберкулезным плевритом, экссудативным плевритом при неспецифической пневмонии и плевритом на фоне рака легкого.

Изобретение относится к медицине, а именно к инфекционным болезням, и может быть использовано для прогноза тромбоцитопении у больных хроническим гепатитом С (ХГС) в результате проведения комбинированной противовирусной терапии (КПТ). У больных ХГС перед началом КПТ определяют уровень вирусной нагрузки (ВН, МЕ/мл). Определяют уровень фиброза по результатам непрямой фиброэластографии печени (F, кПа). Определяют количество тромбоцитов в крови перед началом КПТ (Трисходн, х109/л). На основании полученных данных проводят расчет прогнозируемой величины минимального количества тромбоцитов (Tpmin, х109/л) в крови с помощью метода множественной линейной регрессии. Значения Tpmin≤150,0х109/л свидетельствуют о наличии риска развития тромбоцитопении у больных ХГС, получающих КПТ. Причем значения Tpmin от 75,0х109/л до 150,0х109/л позволяют предполагать развитие легкой, от 50,0х109/л до 75,0х109/л - умеренной и <50,0х109/л - тяжелой степени тромбоцитопении. Способ позволяет точно, быстро и просто провести прогноз развития тромбоцитопении за счет комплексной оценки наиболее значимых факторов возникновения тромбоцитопении. 1 табл., 2 пр.
(57) Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для посмертной диагностики токсокароза плотоядных животных. Способ включает отбор проб массой 50,0 г. Пробу измельчают на мясорубке с диаметром решетки 3-4 мм. Приготовливают искусственный желудочный сок по следующей прописи: 11,0 см3 концентрированной соляной кислоты (удельная масса 1,2) доводят до 1000,0 см3 водопроводной водой, подогретой до 41-42°С, добавляют 7,0 г пищевого свиного пепсина. ИЖС заливают в реактор аппарата «Гастрос» и прогревают до 41-42°С. Помещают стакан с измельченной пробой и аппарат устанавливают в режим переваривания 50 мин с активным перемешиванием и временем отстоя перевара 10 мин. Осадок сливают в объеме 20,0 см3. Наличие личинок определяют под лупой. Для концентрации применяют метод центрифугирования при 5000 об/мин в течение 10 мин. Далее из пробирки аспирируют 10,0 см3 верхнего слоя жидкости. Оставшийся осадок с личинками сохраняют для дальнейших исследований замораживанием при -20°С. Заявленный способ позволяет эффективно обнаруживать возбудителя токсокароза при посмертной диагностике данной болезни. 1 пр.

Изобретение относится к медицине, в частности к терапии, и может быть использовано в гепатологии и гастроэнтерологии для диагностики фибротических процессов печени. Сущность неинвазивного способа диагностики степени фиброза печени: формируют группу условно здоровых обследуемых (F0), группу пациентов с установленной гистологически умеренной степенью фиброза (F1-F2) и группу пациентов с установленной гистологически выраженной степенью фиброза (F3-F4), измеряют средние скорости движения суспензии эритроцитов и минимальные, средние и максимальные диаметры эритроцитов в период воздействия переменного электрического поля у группы условно здоровых обследуемых (F0) и у групп пациентов с умеренной степенью фиброза (F1-F2) и с выраженной степенью фиброза (F3-F4). На основании полученных данных определяют электрические и вязкоупругие параметры эритроцитов, сравнивают электрические и вязкоупругие параметры эритроцитов группы условно здоровых обследуемых (F0) с группой пациентов с умеренной степенью фиброза (F1-F2) и группой пациентов с выраженной степенью фиброза (F3-F4). На основании полученных результатов формируют массив данных для диагностики степени фиброза печени. Затем проводят аналогичные измерения образцов проб эритроцитов пациента с неясной степенью фиброза с определением электрических и вязкоупругих параметров эритроцитов с последующим их сравнением с соответствующими значениями, определенными для группы условно здоровых обследуемых (F0), группы пациентов с умеренной степенью фиброза (F1-F2) и группы пациентов с выраженной степенью фиброза (F3-F4) и при наличии 60% и более отличающихся параметров от группы условно здоровых обследуемых (F0) и входящих в границы значений для групп пациентов с умеренной степенью фиброза (F1-F2) или с выраженной степенью фиброза (F3-F4) и выявляют степень фиброза печени для данного пациента. Использование способа позволяет более точно определить степень фиброза печени у пациента на ранних стадиях заболевания независимо от этиологии возникновения заболевания. 3 ил., 3 табл.

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу прогнозирования риска развития неблагоприятных сердечно-сосудистых событий у больных ишемической болезнью сердца с ишемической и/или постинфарктной дисфункцией миокарда на фоне хронической сердечной недостаточности. Сущность способа состоит в том, что при выявлении уровня тканевого ингибитора матриксных металлопротеиназ-1 более 242,8 нг/мл и сердечно-сосудистого сопряжения более 1,29 риск развития неблагоприятных сердечно-сосудистых событий оценивается как высокий. Использование заявленного способа позволяет точно осуществить прогноз риска развития неблагоприятных сердечно-сосудистых событий у больных ишемической болезнью сердца с ишемической и/или постинфарктной дисфункцией миокарда на фоне хронической сердечной недостаточности. 2 ил., 3 табл., 2 пр.
Изобретение относится к области ветеринарии и животноводства и может быть использовано при искусственном осеменении для выявления генетически неполноценных сперматозоидов. Способ включает добавление в пробы эякулята in vitro в среде для разбавления перекиси водорода в концентрации 0,5-1,0 мМоль с последующим выявлением и определением в сперматозоидах первичных морфологических признаков апоптоза, одноцепочечных разрывов и фрагментации ДНК, интенсивности процессов перекисного окисления липидов. При этом при выявлении низкого процента апоптотически гибнущих сперматозоидов до 10-15% достаточно яркого и выраженного свечения Гало, возрастания содержания ТБК-реактивных продуктов не более чем на 30-40% по отношению к контролю, оценивают сперматозоиды как генетически полноценные. Использование изобретения позволяет улучшить диагностику патологических нарушений в сперматозоидах на хроматиновом уровне.

Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии, и может быть использовано для количественного определения оксима пиностробина в плазме крови. Для этого проводят определение оксима пиностробина в плазме крови методом жидкостной хромато-масс-спектрометрии с использованием смеси плазмы крови с оксимом пиностробина и внутреннего стандарта - вещества, близкого по строению молекулы к анализируемому веществу. Разделение продуктов проводят методом обращенно-фазной хроматографии на колонке размером 4,6×100 мм, термостатируемой при 30°C, скорость элюирования 0,5 мл/мин. В качестве элюента используют смесь 10 мМ ацетата аммония и ацетонитрила в соотношении 10:90 соответственно. Пик оксима пиностробина детектируют по иону с m/z 269.10, образующемуся в результате фрагментации иона оксима пиностробина с m/z 286.10, а его концентрацию рассчитывают по формуле: Coxime=2,073299×RS, где Coxime - концентрация оксима пиностробина (мкг/мл); RS - отношение площади хроматографического пика оксима пиностробина к площади пика внутреннего стандарта. Изобретение обеспечивает метод количественного определения оксима пиностробина в плазме крови для использования в экспериментальной и клинической фармакокинетике. 2 табл., 6 ил.

Группа изобретений относится к анализу биологических жидкостей с помощью биосенсорных систем. Способ определения концентрации анализируемого вещества в образце включает: генерацию выходного сигнала, соответствующего концентрации анализируемого вещества в образце и входному сигналу; компенсацию выходного сигнала с помощью основной функции и первой функции невязки для определения скомпенсированного выходного сигнала, причем основная функция предназначена для компенсации основной ошибки в выходном сигнале, а первая функция невязки предназначена для компенсации оставшейся ошибки в выходном сигнале; и определение концентрации анализируемого вещества в образце по скомпенсированному выходному сигналу. Также описана биосенсорная система аналогичного назначения. Достигается повышение точности и надежности анализа. 2 н. и 28 з.п. ф-лы, 25 ил., 8 табл.

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для укупорки реакционных кювет, содержащих высушенные реагенты для биоаффинных исследований. Система (20) для биоанализа содержит картридж (4) для биоанализа с реакционной камерой (6) и прокалываемую герметичную крышку (2). Крышка (2) содержит верхний слой (8), средний слой (10), нижний слой (12) и места (14), предназначенные для прокалывания. Крышка (2) имеет в местах (14), предназначенных для прокалывания, полость (18) между верхним слоем (8) и нижним слоем (12), причем верхний слой (8) герметичен до прокалывания, а нижний слой (12) предварительно надрезан так, что при прокалывании иглой прокол не является газонепроницаемым, а позволяет газу свободно вытекать из реакционной камеры (6), и упомянутый слой (12) обеспечивает плотное смыкание следа иглы после отведения упомянутой иглы. Изобретение позволяет исключить перекрестное загрязнение, вызванное случайными переливами или испарением реагента. 7 з.п. ф-лы, 7 ил., 7 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии, гистологии и патологической анатомии, и может быть использовано для оценки анаболического действия лекарственных препаратов. Сущность заявляемого способа заключается в том, что дополнительно определяют интенсивность биосинтетических процессов в миосимпластах путем подсчета среднего количества гранул серебра на 1 ядро и определения процентного содержания ядер с 1, 2, 3 и более гранулами, на основании которого делают заключение об анаболическом действии лекарственных препаратов. Осуществление изобретения обеспечивает повышение точности морфологической оценки анаболического действия лекарственных препаратов за счет применения комплекса современных методов исследования (гистологического, гистохимического и морфометрического). Заявляемый способ обладает высокой точностью, прост в применении, эффективен и легко выполним в любой гистологической лаборатории. 2 пр.
Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ прогнозирования перинатального поражения ЦНС у недоношенных новорожденных, включающий исследование биологического материала, отличающийся тем, что в 10% гомогенате плаценты, взятой сразу после преждевременных родов, методом капиллярного электрофореза определяют содержание глутамата и агматина, рассчитывают их соотношение и при величине коэффициента, равного 1,70 и ниже, прогнозируют перинатальное поражение ЦНС у недоношенных новорожденных. Осуществление изобретения позволяет повысить точность прогнозирования перинатального поражения ЦНС у недоношенных новорожденных. 2 пр.
Наверх