Способ определения оксима пиностробина в плазме крови

Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии, и может быть использовано для количественного определения оксима пиностробина в плазме крови. Для этого проводят определение оксима пиностробина в плазме крови методом жидкостной хромато-масс-спектрометрии с использованием смеси плазмы крови с оксимом пиностробина и внутреннего стандарта - вещества, близкого по строению молекулы к анализируемому веществу. Разделение продуктов проводят методом обращенно-фазной хроматографии на колонке размером 4,6×100 мм, термостатируемой при 30°C, скорость элюирования 0,5 мл/мин. В качестве элюента используют смесь 10 мМ ацетата аммония и ацетонитрила в соотношении 10:90 соответственно. Пик оксима пиностробина детектируют по иону с m/z 269.10, образующемуся в результате фрагментации иона оксима пиностробина с m/z 286.10, а его концентрацию рассчитывают по формуле: Coxime=2,073299×RS, где Coxime - концентрация оксима пиностробина (мкг/мл); RS - отношение площади хроматографического пика оксима пиностробина к площади пика внутреннего стандарта. Изобретение обеспечивает метод количественного определения оксима пиностробина в плазме крови для использования в экспериментальной и клинической фармакокинетике. 2 табл., 6 ил.

 

Изобретение относится к области медицины, а именно к фармакологии, и может быть использовано для количественного определения оксима пиностробина в плазме крови методом жидкостной хромато-масс-спектрометрии.

Оксим пиностробина в экспериментах на лабораторных животных демонстрировал целый ряд фармакологических эффектов, а именно антиоксидантный, гепатопротекторный, иммуностимулирующий и др. (Sariev A.K., Abaimov D.A., et al. Experimental study of pinostrobine oxime biotransformation. Eksp Klin Farmakol., 2014; 77 (8): 39-44).

На сегодняшний день известен ряд работ по количественному хромато-масс-спектрометрическому определению неизмененного фитофлавоноида пиностробина, являющегося родительским веществом, из которого синтезируется оксим пиностробин (5-гидрокси-7-метокси-2-фенил-хромон-4-оксим). Однако указанные методы не могут быть применены для определения оксима пиностробина в плазме крови без существенных модификаций, поскольку оксим пиностробина отличается от своего прекурсора по физико-химическим свойствам, спектральным характеристикам и характеру фрагментации в масс-спектрометре (Salvador M.J., Sartori F.T., Sacilotto A.C., Pral E.M., Alfieri S.C., Vichnewski W: Bioactivity of flavonoids isolated from Lychnophora markgravii against Leishmania amazonensis amastigotes. Z Naturforsch C, 2009, 64 (7-8): 509-512; Alvarez-Ospina H., Rivero Cruz I., Duarte G., Bye R., Mata R: HPLC Determination of the Major Active Flavonoids and GC-MS Analysis of Volatile Components of Dysphania graveolens (Amaranthaceae), Phytochem Anal., 2012).

В патентной литературе способы определения оксима пиностробина в плазме крови также не выявлены.

Таким образом, техническим результатом заявляемого изобретения является создание биоаналитического метода количественного определения оксима пиностробина в плазме крови с высокой воспроизводимостью и точностью, адаптированного для решения задач экспериментальной и клинической фармакокинетики.

Технический результат достигается тем, что определение оксима пиностробина в плазме крови проводят путем анализа вещества высокоселективным методом хромато-масс-спектрометрии с использованием матрицы в виде плазмы крови с оксимом пиностробина и внутреннего стандарта - вещества, близкого по строению молекулы к анализируемому веществу, при этом разделение продуктов экстракции проводят на обращенно-фазной хроматографической колонке 4,6×100 мм, в качестве элюента применяют 10 мМ ацетат аммония и ацетонитрил, взятые в процентном соотношении 10:90 соответственно, с температурой разделения 30°C и скоростью подачи элюента 0,5 мл/мин, детектирование оксима пиностробина проводят по выбранному дочернему иону с m/z 269.10, образующемуся в результате фрагментации родительского молекулярного иона оксима пиностробина с m/z 286.10, а его концентрацию рассчитывают по формуле: Cоxime=2,073299×RS, где

Cоxime - концентрация оксима пиностробина (мкг/мл); RS - отношение площади хроматографического пика оксима пиностробина к площади пика внутреннего стандарта.

Способ осуществляется следующим образом.

Приготовление рабочих стандартных растворов. В качестве стандартного раствора используют рабочий стандартный раствор оксима пиностробина с концентрацией 1 мг/мл в метаноле. Из данного раствора методом последовательных разведений готовят рабочие стандартные растворы оксима пиностробина с концентрацией 50; 25; 12,5; 6,25; 3,12; 1,56 и 0,78 мкг/мл в метаноле. Все приготовленные растворы хранят в холодильнике при +4°C. Приготовленные стандартные растворы оксима пиностробина стабильны в течение всего периода исследования, начиная с момента разработки методики и до последнего дня анализа биологических образцов.

Приготовление модельных растворов в плазме крови. Модельные растворы в плазме крови готовят из рабочих стандартных растворов с концентрациями 50; 25; 12,5; 6.25; 3,12; 1,56 и 0,78 мкг/мл методом внесения 25 мкл аликвоты последних в 225 мкл интактной плазмы крови крыс с таким расчетом, чтобы конечная концентрация оксима пиностробина в плазме составляла 5; 2,5; 1,25; 0.625; 0.312; 0.156 и 0.078 мкг/мл.

Приготовление образцов для анализа. Для выделения оксима пиностробина из плазмы крови и очистки экстракта используют метод жидкостной экстракции. К 250 мкл плазмы крови, с предварительно внесенным внутренним стандартом - (4′-гидрокси-4-метокси-халкон 25 мкл, 100 мкг/мл), добавляют 500 мкл 0,2 М щелочного боратного буфера (pH 9,0) и перемешивают на вортекс-миксере в течение 5 минут при 2000 об/мин. К полученной смеси добавляют 6 мл этилацетата. Полученную смесь встряхивают на вортекс-миксере в течение 5 минут. После этого пробирки со смесью центрифугируют в течение 5 минут при 3000 об/мин до полного разделения слоев. Надосадочный органический слой декантируют, переносят в чистую пробирку и упаривают под вакуумом при температуре 60°C. Сухой остаток растворяют в 250 мкл метанола. Полученный раствор вводят в петлю прибора в объеме 10 мкл. Определение концентрации оксима пиностробина проводят методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием.

Для осуществления хромато-масс-спектрометрического анализа используют жидкостный хроматограф «Surveyor» производства «Thermo Fisher Scientific» (США), оснащенный насосом «Finnigan Surveyor LC Pump Plus», автосамплером «Finnigan Surveyor AS Plus» с колоночным термостатом и масс-спектрометрическим детектором «LCQ Fleet MS» (квадрупольная ионная ловушка). Масс-спектрометр работает в режиме регистрации ионов, положительно заряженных электроспреем (ESI), который создается напряжением в 5 кВ. Скорость потока газа-небулайзера (азота): 4 л/мин, давление на распылителе - 100 psi. Температура интерфейса капилляра составляет 350°C, температура нагревателя - 300°C. Амплитуда возбуждения на концевых электродах ловушки 0,1 В. Масс-спектрометрический анализ MS2 проводят в режиме мониторинга выбранных ионов (SRM).

Детектирование оксима пиностробина проводят по выбранному дочернему иону с m/z 269.10, образующемуся в результате распада родительского молекулярного иона оксима пиностробина (m/z 286.10) при нормализованной энергии соударений 24 eV. Масс-спектр второго порядка оксима пиностробина при нормализованной энергии соударений 24 eV. представлен на фигуре 1 (по вертикали интенсивность (Intensity) по горизонтали масса заряда (m/z).

Детектирование внутреннего стандарта - 4′-гидрокси-4-метокси-халкона (1-(4-гидроксифенил)-3-(4-метоксифенил)проп-2-ен-1-он) проводят по выбранному дочернему иону с m/z 161.00, образующемуся в результате распада родительского молекулярного иона халкона (m/z 255.20) при нормализованной энергии соударений 29 eV. Масс-спектр второго порядка внутреннего стандарта - 4′-гидрокси-4-метокси-халкона при нормализованной энергии соударений 29 eV представлен на фигуре 2.

В качестве демпфирирующего газа в ионной ловушке используют гелий. Данные обрабатываются с помощью программы Xcalibur 2.1 w/Foundation 1.0.1.

Разделение осуществляют на обращенно-фазной хроматографической колонке Hypersil Gold, 5 мкм, 4,6×100 мм. Температура разделения 30°C. Элюирование осуществляют в изократическом режиме. Подвижная фаза состоит из двух растворов: 10 мМ ацетата аммония (раствор А) и смеси ацетонитрил - 10 мМ ацетат аммония (90:10; v/v) (раствор Б), взятых в процентном соотношении 10:90 соответственно. Скорость потока подвижной фазы 0,5 мл/мин. Объем пробы 10 мкл. Время удерживания RT оксима пиностробина составляет в среднем 3,3±0,1 мин. Время анализа единичного образца составляет 5,0±0,5 минут.

На фигурах 3, 4, 5 представлены масс-хроматограммы экстрактов интактной плазмы крови и плазмы, содержащей оксим пиностробина в концентрациях 0,078 и 1,25 мкг/мл соответственно. На фигуре 3 показана масс-хроматограмма интактной плазмы крови (по вертикали относительное содержание (Relative abundance), по горизонтали время (Time) в минутах). На фигуре 4 представлена масс-хроматограмма экстракта плазмы крови, содержащей 0,078 мкг/мл оксима пиностробина. Пик с RT 3,28 мин - пик оксима пиностробина. Пик с RT 2,98 мин - пик внутреннего стандарта (4′-гидрокси-4-метокси-халкон). На фигуре 5 представлена масс-хроматограмма экстракта плазмы крови, содержащей 1,25 мкг/мл оксима пиностробина. Пик с RT 3,28 мин - пик оксима пиностробина. Пик с RT 3,00 мин - пик внутреннего стандарта (4′-гидрокси-4-метокси-халкон).

На фигуре 6 представлена калибровочная кривая зависимости концентрации оксима пиностробина от отношения площадей хроматографических пиков анализируемого вещества и внутреннего стандарта (Area Ratio).

Количественный анализ проводят методом внутреннего стандарта с использованием программного обеспечения «Quan Browser» компании «Termo Fisher Scientific». Калибровочную кривую получают в результате анализа проб плазмы с добавками известных количеств стандарта определяемого соединения (оксима пиностробина). Для построения калибровочной кривой готовят рабочий стандартный раствор оксима пиностробина в метаноле - 1 мг/мл. Из него далее методом последовательных разведений готовят серию стандартных растворов оксима пиностробина в плазме крови с концентрациями: 5; 2,50; 1,25; 0,625; 0,312; 0,156 и 0,078 мкг/мл. В каждый образец плазмы крови добавляют 25 мкл раствора внутреннего стандарта с концентрацией 100 мкг/мл. Для определения калибровочной зависимости применяют регрессионный метод наименьших квадратов. Калибровочная зависимость линейна в изучаемом диапазоне концентраций. График описывается линейным уравнением:

Y=0,482323×Х,

где Y - отношение площадей пиков оксима пиностробина к площадям пиков внутреннего стандарта в условных единицах интегрирования;

X - концентрация оксима пиностробина, мкг/мл.

Концентрация оксима пиностробина рассчитывается по формуле: Coxime=2,073299×RS,

где Coxime - концентрация оксима пиностробина (мкг/мл),

RS - отношение площади хроматографического пика оксима пиностробина к площади пика внутреннего стандарта. Предел количественного обнаружения в плазме без предварительного концентрирования - 0,078 мкг/мл. Для определения меньших концентраций применяли метод концентрирования - объем плазмы крови увеличивают до 1 мл, сухой остаток растворяют 100 мкл метанола.

Прецизионность и правильность методики оценивается по трем концентрационным уровням рабочих стандартных растворов оксима пиностробина после 6 определений каждого уровня (таблица 1). Для концентрации 0,078 мкг/мл ошибка метода не превышала 15%.

Каждый из образцов, предназначенных для контроля качества, анализируют в течение 1 рабочего дня (6 определений). Предел количественного определения для оксима пиностробина составляет 0,078 мкг/мл. Для 0,078 мкг/мл средняя точность составляет 3,09% C.V., средняя воспроизводимость - 0,64% dev. Остальные пробы с концентрациями 1,25 и 5 мкг/мл имеют точность от 1,44 до 4,21% C.V. Воспроизводимость варьирует от -0,80 до 2,67% dev. Результаты представлены в таблице 1.

Точность выражается в виде коэффициента вариации (% C.V.) для каждой серии образцов согласно уравнению:

где SD - стандартное отклонение серии определений в течение рабочего дня концентраций оксима пиностробина;

x ¯ - среднее арифметическое значение полученных концентраций оксима пиностробина.

Воспроизводимость измеряется как процент отклонения (% dev.) от теоретического значения по формуле:

где x - среднее арифметическое значение полученных концентраций оксима пиностробина;

μ ¯ - теоретическая концентрация оксима пиностробина.

Метрологические характеристики разработанной методики представлены в таблице 2. Относительная ошибка определения оксима пиностробина не превышает 15%.

x ¯ - среднее арифметическое значение полученных концентраций оксима пиностробина;

SD - стандартное отклонение серии определений концентраций оксима пиностробина;

S x ¯ - стандартное отклонение среднего значения серии определений концентраций оксима пиностробина;

Δ x ¯ - полуширина доверительного интервала (Р=0,95);

ε % - ошибка среднего результата полученных значений концентраций оксима пиностробина.

Таким образом, заявленный способ обладает высокой эффективностью, не требует проведения многочисленных предварительных химических реакций и не предусматривает использование большого количества химических реактивов.

Высокая точность и воспроизводимость биоаналитического метода количественного определения оксима пиностробина в плазме крови обеспечивает идентификацию вещества с установленными характеристиками погрешности, что позволяет использовать данную методику как в экспериментальной, так и клинической фармакокинетики.

Способ количественного определения оксима пиностробина в плазме крови, включающий анализ вещества высокоселективным методом хромато-масс-спектрометрии с использованием матрицы в виде плазмы крови с оксимом пиностробина и внутреннего стандарта - вещества, близкого по строению молекулы к анализируемому веществу, разделение продуктов экстракции проводят на обращенно-фазной хроматографической колонке 4,6×100 мм, при этом в качестве элюента применяют 10 мМ ацетат аммония и ацетонитрил, взятые в процентном соотношении 10:90 соответственно, с температурой разделения 30°C и скоростью подачи элюента 0,5 мл/мин, детектирование оксима пиностробина проводят по выбранному дочернему иону с m/z 269.10, образующемуся в результате фрагментации родительского молекулярного иона оксима пиностробина с m/z 286.10, а его концентрацию рассчитывают по формуле: Coxime = 2,073299×RS, где Coxime - концентрация оксима пиностробина (мкг/мл); RS - отношение площади хроматографического пика оксима пиностробина к площади пика внутреннего стандарта.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к области ветеринарии и животноводства и может быть использовано при искусственном осеменении для выявления генетически неполноценных сперматозоидов.

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу прогнозирования риска развития неблагоприятных сердечно-сосудистых событий у больных ишемической болезнью сердца с ишемической и/или постинфарктной дисфункцией миокарда на фоне хронической сердечной недостаточности.

Изобретение относится к медицине, в частности к терапии, и может быть использовано в гепатологии и гастроэнтерологии для диагностики фибротических процессов печени.
(57) Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для посмертной диагностики токсокароза плотоядных животных. Способ включает отбор проб массой 50,0 г.

Изобретение относится к медицине, а именно к инфекционным болезням, и может быть использовано для прогноза тромбоцитопении у больных хроническим гепатитом С (ХГС) в результате проведения комбинированной противовирусной терапии (КПТ).

Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ оценки эффективности антибактериальной терапии при диализном перитоните, включающий введение антибактериальных препаратов в пакет с диализным раствором с последующим введением в брюшную полость, морфологическое исследование диализата, отличающийся тем, что после проведения цикла обмена диализирующего раствора проводят исследование диализата методом клиновидной дегидратации, при этом диализат центрифугируют при 1500 об/мин в течение 10-15 минут и отбирают 2 пробы - первую из верхней половины пробирки, вторую - из нижней, выявляют структуру кристаллов солей в диализате и при наличии линейных кристаллов в центральной зоне фаций обеих проб оценивают эффективность терапии как удовлетворительную и не требующую ее продолжения, при наличии линейных кристаллов только в первой пробе оценивают эффективность терапии как удовлетворительную и требующую ее продолжения, при их отсутствии - как неудовлетворительную.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для определения глубины залегания липидных ядер, являющихся центром атеросклеротических бляшек. Изобретение представляет способ определения глубины залегания липидных ядер атеросклеротических бляшек методом ИК-Фурье спектроскопии, заключающийся в том, что подготавливаются срезы атеросклеротически измененного участка сосудистого русла, записываются инфракрасные спектры пропускания подготовленных срезов, идентифицируются характеристические пики поглощения, отличающийся тем, что определяется срез, имеющий максимальное поглощение в диапазоне 1720-1760 см-1, соответствующем валентным колебаниям связей C=O сложных эфиров холестерина, который отвечает глубине залегания липидного ядра.

Изобретение относится к биотехнологии и медицине, в частности иммунологии, и предназначено для определения аутоантител к прогестерону в сыворотке и плазме крови человека.

Изобретение относится к способу получения многослойных покрытий на основе полиэлектролитных микрокапсул, содержащих биологически активные материалы, для применения в областях диагностики и медицины.

Изобретение относится к медицине, а именно к способу оценки угрозы гибели ворсинок плаценты и неполноценного развития плода при обострении цитомегаловирусной инфекции в третьем триместре гестации.

Группа изобретений относится к анализу биологических жидкостей с помощью биосенсорных систем. Способ определения концентрации анализируемого вещества в образце включает: генерацию выходного сигнала, соответствующего концентрации анализируемого вещества в образце и входному сигналу; компенсацию выходного сигнала с помощью основной функции и первой функции невязки для определения скомпенсированного выходного сигнала, причем основная функция предназначена для компенсации основной ошибки в выходном сигнале, а первая функция невязки предназначена для компенсации оставшейся ошибки в выходном сигнале; и определение концентрации анализируемого вещества в образце по скомпенсированному выходному сигналу. Также описана биосенсорная система аналогичного назначения. Достигается повышение точности и надежности анализа. 2 н. и 28 з.п. ф-лы, 25 ил., 8 табл.

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для укупорки реакционных кювет, содержащих высушенные реагенты для биоаффинных исследований. Система (20) для биоанализа содержит картридж (4) для биоанализа с реакционной камерой (6) и прокалываемую герметичную крышку (2). Крышка (2) содержит верхний слой (8), средний слой (10), нижний слой (12) и места (14), предназначенные для прокалывания. Крышка (2) имеет в местах (14), предназначенных для прокалывания, полость (18) между верхним слоем (8) и нижним слоем (12), причем верхний слой (8) герметичен до прокалывания, а нижний слой (12) предварительно надрезан так, что при прокалывании иглой прокол не является газонепроницаемым, а позволяет газу свободно вытекать из реакционной камеры (6), и упомянутый слой (12) обеспечивает плотное смыкание следа иглы после отведения упомянутой иглы. Изобретение позволяет исключить перекрестное загрязнение, вызванное случайными переливами или испарением реагента. 7 з.п. ф-лы, 7 ил., 7 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии, гистологии и патологической анатомии, и может быть использовано для оценки анаболического действия лекарственных препаратов. Сущность заявляемого способа заключается в том, что дополнительно определяют интенсивность биосинтетических процессов в миосимпластах путем подсчета среднего количества гранул серебра на 1 ядро и определения процентного содержания ядер с 1, 2, 3 и более гранулами, на основании которого делают заключение об анаболическом действии лекарственных препаратов. Осуществление изобретения обеспечивает повышение точности морфологической оценки анаболического действия лекарственных препаратов за счет применения комплекса современных методов исследования (гистологического, гистохимического и морфометрического). Заявляемый способ обладает высокой точностью, прост в применении, эффективен и легко выполним в любой гистологической лаборатории. 2 пр.
Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ прогнозирования перинатального поражения ЦНС у недоношенных новорожденных, включающий исследование биологического материала, отличающийся тем, что в 10% гомогенате плаценты, взятой сразу после преждевременных родов, методом капиллярного электрофореза определяют содержание глутамата и агматина, рассчитывают их соотношение и при величине коэффициента, равного 1,70 и ниже, прогнозируют перинатальное поражение ЦНС у недоношенных новорожденных. Осуществление изобретения позволяет повысить точность прогнозирования перинатального поражения ЦНС у недоношенных новорожденных. 2 пр.
Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ прогнозирования перинатального поражения ЦНС у недоношенных новорожденных, включающий исследование биологического материала, отличающийся тем, что в 10% гомогенате плаценты, взятой сразу после преждевременных родов, методом капиллярного электрофореза определяют содержание глутамата и агматина, рассчитывают их соотношение и при величине коэффициента, равного 1,70 и ниже, прогнозируют перинатальное поражение ЦНС у недоношенных новорожденных. Осуществление изобретения позволяет повысить точность прогнозирования перинатального поражения ЦНС у недоношенных новорожденных. 2 пр.
Изобретение относится к области медицины, а именно к способу прогнозирования ишемически-геморрагических церебральных осложнений у новорожденных. Сущность способа состоит в том, что в пуповинной крови определяют уровни 6-keto-простагландина F1α (6-KetoPGF-1α) и тромбоксана В2 (ТХВ2) и рассчитывают их соотношение К=6-KetoPGF-1α/TXB2. При значении коэффициента К равном 0,04 и менее прогнозируют возникновение ишемически-геморрагических церебральных осложнений. Использование заявленного способа позволяет повысить эффективность прогнозирования ишемически-геморрагических церебральных осложнений у новорожденных из группы высокого перинатального риска. 2 пр.

Изобретение относится к области исследования и анализа биологических материалов и касается способа для подсчета биологических объектов в пробе и сканирующего цитометра на его основе. Для осуществления подсчета биологических объектов пробу помещают в прямоугольный капилляр, выполненный с возможностью отражения сигнала флуоресценции от верхней поверхности прямоугольного капилляра. Дополнительный сбор сигнала флуоресценции обеспечивают с помощью параболического отражателя, в фокусе которого устанавливают исследуемую зону капилляра, при этом смену исследуемых зон с биологическими объектами осуществляют за счет перемещения капилляра вдоль его оси. Детектируемый световой поток разделяют по длине волны и направляют на первый и второй фотоумножители, выходные сигналы которых пропорциональны световому потоку и сигналу флуоресценции. С выхода фотоумножителей сигналы поступают на амплитудный и фазовый преобразователи для одновременной обработки и последующего перемножения массивов данных, полученных с выходов амплитудного и фазового преобразователей сигналов в микропроцессоре. Технический результат заключается в повышении точности и упрощении способа измерений, а также в уменьшении габаритов и повышении мобильности устройства. 2 н. и 11 з.п. ф-лы, 4 ил.

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ диагностики этиологии рецидивирующих острых ринофарингитов и аденоидитов у детей раннего и дошкольного возраста, включающий определение в назальном секрете провоспалительных и проаллергических интерлейкинов, а именно интерлейкина-1-бэта (IL-1beta), интерлейкина-4 (IL-4), рецепторного антагониста интерлейкина-1 (IL-1RA), интерферона-альфа (INF-alpha) и фактора некроза опухоли - альфа (TNF-alpha), отличающийся тем, что увеличение содержания INF-alpha, TNF-alpha и IL-1beta более чем в 2 раза по отношению к нормальным значениям является диагностическим критерием вирусной этиологии рецидивирующих острых ринофарингитов и аденоидитов, а увеличение содержания IL-4 выше 26 нг/мл и IL-1RA выше 1000 нг/мл является диагностическим критерием для инфекционно-аллергической этиологии рецидивирующих острых ринофарингитов и аденоидитов. Осуществление изобретения обеспечивает повышение эффективности диагностики. 1 з.п. ф-лы, 4 ил., 3 табл., 2 пр.

Группа изобретений относится к электрохимическим датчикам и может быть использована для определения концентрации аналита в образце. Биосенсорная система включает в себя множество тестовых датчиков, контейнер. При этом каждый тестовый датчик включается в себя по меньшей мере два проводника и композицию реагентов, а контейнер содержит влагопоглотитель, поддерживающий остаточный уровень влаги. Данная биосеснорная система позволяет измерить концентрацию аналита с систематической ошибкой в пределах ±10 мг/дл или ±10%. Также раскрывается биосенсорная система, позволяющая сохранить по меньшей мере 75% активности окислительно-восстановительного фермента. Группа изобретений обеспечивает повышение срока годности биосенсора, повышение точности, воспроизводимости анализа, а также уменьшение времени его проведения. 2 н. и 23 з.п. ф-лы, 8 ил., 2 табл.

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу оценки эффективности диализной терапии при детоксикации, состоит в том, что после введения диализирующего раствора через 2-4 часа осуществляют забор пробы диализирующего раствора из брюшной полости, готовят пробы диализирующего раствора для исследования методом клиновидной дегидратации, проводят микроскопическое исследование в обычном свете, выявляют структуру кристаллов хлорида натрия. При определении преимущественно перпендикулярно расположенных линейных фрагментов кристаллов оценивают диализную терапию как неадекватную, при определении радиально расположенных фрагментов кристаллов оценивают диализную терапию как требующую корректировки, а при определении хаотично расположенных отдельных фрагментов кристаллов оценивают диализную терапию как адекватную. Использование заявленного способа позволяет повысить эффективность оценки диализной терапии при детоксикации. 3 ил., 3 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии, и может быть использовано для количественного определения оксима пиностробина в плазме крови. Для этого проводят определение оксима пиностробина в плазме крови методом жидкостной хромато-масс-спектрометрии с использованием смеси плазмы крови с оксимом пиностробина и внутреннего стандарта - вещества, близкого по строению молекулы к анализируемому веществу. Разделение продуктов проводят методом обращенно-фазной хроматографии на колонке размером 4,6×100 мм, термостатируемой при 30°C, скорость элюирования 0,5 млмин. В качестве элюента используют смесь 10 мМ ацетата аммония и ацетонитрила в соотношении 10:90 соответственно. Пик оксима пиностробина детектируют по иону с mz 269.10, образующемуся в результате фрагментации иона оксима пиностробина с mz 286.10, а его концентрацию рассчитывают по формуле: Coxime2,073299×RS, где Coxime - концентрация оксима пиностробина ; RS - отношение площади хроматографического пика оксима пиностробина к площади пика внутреннего стандарта. Изобретение обеспечивает метод количественного определения оксима пиностробина в плазме крови для использования в экспериментальной и клинической фармакокинетике. 2 табл., 6 ил.

Наверх