Способ снижения серопозитивности живых противобруцеллезных вакцин для сельскохозяйственных животных

Авторы патента:

Аразов Чарымырат Худайбердиевич (RU)

Искандарова Салмиханум Самурхановна (RU)

A61K39/10 - Brucella; Bordetella, например коклюша

Владельцы патента RU 2570630:

Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии имени Я.Р. Коваленко (ВИЭВ) Россельхозакадемии (RU)

Представленное изобретение относится к биотехнологии, в частности к ветеринарной микробиологии, и касается способа снижения серопозитивности живых противобруцеллезных вакцин из штаммов Brucella abortus 19 или Brucella melitensis Rev-1 для сельскохозяйственных животных. Охарактеризованный способ включает введение животному вакцины из штамма В. abortus 19 в дозе от 100 млн. м.к. до 40 тыс. м.к. или вакцины из штамма В. melitensis Rev-1 в дозе от 1 млн. м.к. до 10 тыс. м.к. с одновременным введением бруцеллезного антигена в дозе от 0,02 до 0,1 мг. Изобретение позволяет сократить длительность серопозитивности у вакцинированных животных, вплоть до недиагностической, без снижения напряженности иммунитета и может быть использовано для дифференциации инфицированных и вакцинированных животных диагностикумами при проведении оздоровления хозяйств от бруцеллезной инфекции. 13 табл., 35 пр.

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к ветеринарной микробиологии, и может быть использовано для профилактики бруцеллезной инфекции у сельскохозяйственных животных.

Бруцеллез - инфекционное заболевание, поражающее различные виды животных и человека. Заболевание передается только от животного к человеку или от животного к животному. Заболевание бруцеллезом наносит существенный экономический ущерб животноводству, так как вызывает уменьшение продуктивности, снижение жизнеспособности приплода, а проводимые ветеринарно-санитарные мероприятия требуют значительных материальных затрат.

Ущерб, причиняемый бруцеллезом, усугубляется заболеванием людей, которое ведет к потере трудоспособности и часто к пожизненной инвалидности.

Для профилактики бруцеллеза в настоящее время широко используют живые вакцины из штаммов, находящихся в стабильной S-форме, - В.abortus 19, B.melitensis Rev-1, которые служат эталоном при разработке других бруцеллезных вакцин.

Все применяемые вакцины из штаммов, находящихся в S-форме, имеют выраженные антигенные свойства и стимулируют продолжительный иммунитет (8-24 месяца). Однако их иммуногенность находится в прямой зависимости от остаточной вирулентности и приживаемости. Данные вакцины имеют выраженную серопозитивность, т.е. способность индуцировать специфические бруцеллезные антитела, которые длительно присутствуют в крови вакцинированных животных. Выявление больных животных основано на выявлении бруцеллезных антител в крови. В результате вакцинации в течение длительного времени затрудняется дифференциация вакцинированных животных от инфицированных.

Несмотря на целый ряд предложений, в настоящее время в ранние сроки после вакцинации невозможно отличать привитых животных от больных бруцеллезом.

Известны также способы снижения уровня серопозитивности за счет применения убитых вакцин (KB 17/100), живых вакцин из RS-штаммов бруцелл (из штамма 82, 75/79-АВ), вакцин на основе антигенов, выделенных из клеток бруцелл (бруцеллезная химическая вакцина). Данные вакцины наряду со сниженной серопозитивностью обладают слабой иммуногенностью (вакцины из убитых штаммов бруцелл и из антигенов), живые вакцины, полученные из RS-штаммов, обладают нестабильными свойствами и часто переходят в S-форму, что еще сильнее мешает дифференциальной диагностике (1, 2).

Наиболее близким способом, который можно принять за прототип, является использование вакцины из штамма 19 в малых дозах - 3 млрд. микробных клеток (3).

Использование вакцины из штамма 19 в малой дозе 3 млрд. микробных клеток также вызывает образование и длительную персистенцию специфических бруцеллезных антител, затрудняющих дифференцировку больных и вакцинированных животных, а дальнейшее уменьшение вакцинирующей дозы снижает ее иммуногенную активность.

Таким образом, применение уменьшенных доз вакцины полностью не решает проблему профилактической вакцинации и дифференциации вакцинированных животных от больных.

Задачей наших исследований является снижение негативных последствий (длительной серопозитивности) вакцинации домашних животных живыми противобруцеллезными вакцинами, мешающих дифференциации инфицированных и вакцинированных животных существующими коммерческими диагностикумами при проведении оздоровления хозяйств от бруцеллезной инфекции.

Техническим результатом является снижение титров специфических антител вплоть до недиагностического уровня и сокращение длительности серопозитивности у животных после проведения профилактической вакцинации.

Это достигается тем, что при введении живых вакцин из штамма В.abortus 19 в дозе от 100 млн. до 80 тыс. микробных клеток, из штамма B.melitensis Rev-1 в дозе 1 млн. до 10 тыс. микробных клеток совместно с бруцеллезным антигеном в дозе 0,005-2,0 мг/мл снижается индукция специфических бруцеллезных антител у крупного и мелкого рогатого скота, что позволяет проводить диагностические исследования и выявлять инфицированных животных в более ранние сроки по сравнению с другими вакцинами, созданными на основе живых штаммов бруцелл.

Возможность осуществления изобретения с реализацией указанного назначения иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Коммерческую вакцину из штамма 19, находящегося в S-форме, разводим физиологическим раствором с pH 7-7,2 до концентрации 25 млн. м.к. в мл. В 1 мл вакцины растворяем 0,05 мг антигена (антиген-ПА), полученного по А.С. СССР «Способ получения бруцеллезного антигена» №1256258, 1984 г.

Пример 2. Коммерческую вакцину из штамма 19, находящегося в S-форме, разводим физиологическим раствором с pH 7-7,2 до концентрации 2,5 млн. м.к. в мл. В 1 мл вакцины растворяем 0,01 мг антигена-ПА.

Пример 3. Коммерческую вакцину из штамма 19, находящегося в S-форме, разводим физиологическим раствором с pH 7-7,2 до концентрации 2,5 млн. м.к. в мл. В 1 мл вакцины растворяем 0,05 мг антигена-ПА.

Пример 4. Коммерческую вакцину из штамма 19, находящегося в S-форме, разводим физиологическим раствором с pH 7-7,2 до концентрации 20 тыс. м.к. в мл. В 1 мл вакцины растворяем 0,05 мг антигена-ПА.

Пример 5. Коммерческую вакцину из штамма 19, находящегося в S-форме, разводим физиологическим раствором с pH 7-7,2 до концентрации 2 тыс. м.к. в мл. В 1 мл вакцины растворяем 0,05 мг антигена-ПА.

Пример 6. Коммерческую вакцину из штамма 19, находящегося в S-форме, разводим физиологическим раствором с pH 7-7,2 до концентрации 1 тыс. м.к. в мл. В одном мл вакцины растворяем 0,05 мг антигена-ПА.

Пример 7. Аналогичен примеру №5, но антиген-ПА добавляем из расчета 0,01 мг на мл вакцины.

Пример 8. Аналогичен примеру №5, но антиген-ПА добавляем из расчета 1 мг на мл вакцины.

Пример 9. Аналогичен примеру №6, но антиген-ПА добавляем из расчета 0,01 мг на мл вакцины.

Пример 10. Аналогичен примеру №6, но антиген-ПА добавляем из расчета 0,005 мг на мл вакцины.

Пример 11. Аналогичен примеру №6, но антиген добавляем из расчета 0,2 мг на мл вакцины.

Пример 12. Аналогичен примеру №6, но антиген-ПА добавляем из расчета 1 мг на мл вакцины.

Пример 13. Аналогичен примеру №6, но антиген-ПА добавляем из расчета 2 мг на мл вакцины.

Пример 14. Коммерческую вакцину из штамма 19, находящегося в S-форме, разводим физиологическим раствором с pH 7-7,2 до концентрации 20 тыс. м.к. в мл. В 1 мл вакцины растворяем 0,05 мг глюкопротеидного антигена (антиген-ГА), полученного по методике, описанной в А.С. СССР «Способ получения бруцеллезного антигена» №691056.

Пример 15. Коммерческую вакцину из штамма 19, находящегося в S-форме, разводим физиологическим раствором с pH 7-7,2 до концентрации 2 тыс. м.к. в мл. В 1 мл вакцины растворяем 1 мг антигена-ГА.

Пример 16. Коммерческую вакцину из штамма 19, находящегося в S-форме, разводим физиологическим раствором с pH 7-7,2 до концентрации 1 тыс. м.к. в мл. В одном мл вакцины растворяем 0,5 мг белково-полисахаридного комплекса (антиген-БПК), полученного по А.С. СССР «Способ получения антигена» №467933.

Пример 17. Коммерческую вакцину из штамма РЕВ-1, находящегося в S-форме, разводим физиологическим раствором с pH 7-7,2 до концентрации 500 тыс. м.к. в мл. В одном мл вакцины растворяем 0,05 мг антигена-ПА.

Пример 18. Коммерческую вакцину из штамма РЕВ-1, находящегося в S-форме, разводим физиологическим раствором с pH 7-7,2 до концентрации 50 тыс. м.к. в мл. В одном мл вакцины растворяем 0,05 мг антигена-ПА.

Пример 19. Коммерческую вакцину из штамма РЕВ-1, находящегося в S-форме, разводим физиологическим раствором с pH 7-7,2 до концентрации 5 тыс. м.к. в мл. В мл вакцины растворяем 0,05 мг антигена-ПА.

Пример 20. Коммерческую вакцину из штамма РЕВ-1, находящегося в S-форме, разводим физиологическим раствором с pH 7-7,2 до концентрации 1 тыс. м.к. в мл. В одном мл вакцины растворяем 0,05 мг антигена-ПА.

Пример 21. Коммерческую вакцину из штамма РЕВ-1, находящегося в S-форме, разводим физиологическим раствором с pH 7-7,2 до концентрации 500 м.к. в мл. В одном мл вакцины растворяем 0,05 мг антигена-ПА.

Пример 22. Аналогичен примеру №18, но антиген добавляем из расчета 0,01 мг на мл вакцины.

Пример 23. Аналогичен примеру №18, но антиген-ПА добавляем из расчета 1 мг на мл вакцины.

Пример 24. Аналогичен примеру №19, но антиген-ПА добавляем из расчета 2 мг на мл вакцины.

Пример 25. Аналогичен примеру №19, но антиген-ПА добавляем из расчета 0,01 мг на мл вакцины.

Пример 26. Аналогичен примеру №19, но антиген-ПА добавляем из расчета 0,2 мг на мл вакцины.

Пример 27. Аналогичен примеру №20, но антиген-ПА добавляем из расчета 0,1 мг на мл вакцины.

Пример 28. Аналогичен примеру №21, но антиген-ПА добавляем из расчета 0,5 мг на мл вакцины.

Пример 29. Коммерческую вакцину из штамма РЕВ-1, находящегося в S-форме, разводим физиологическим раствором с pH 7-7,2 до концентрации 50 тыс. м.к. в мл. В одном мл вакцины растворяем 0,1 мг антигена-ГА.

Пример 30. Коммерческую вакцину из штамма РЕВ-1, находящегося в S-форме, разводим физиологическим раствором с pH 7-7,2 до концентрации 5 тыс. м.к. в мл. В одном мл вакцины растворяем 0,2 мг антигена-БПК.

Пример 31. Коммерческую вакцину из штамма РЕВ-1, находящегося в S-форме, разводим физиологическим раствором с pH 7-7,2 до концентрации 500 м.к. в мл. В одном мл вакцины растворяем 2 мг антигена-БПК.

Пример 32. Морские свинки весом 300-350 грамм, самки, по принципу аналогов были разделены на группы. Опытных морских свинок иммунизировали вакциной, полученной из штамма 19 в примерах 4-13, вакциной из штамма РЕВ-1, полученной по примерам 15-26. Через 30 дней по 5 морских свинок из каждой группы убивали и проводили бактериологическое исследование паренхиматозных органов и лимфатических узлов (всего 10 объектов) с целью определения расселяемости и приживаемости вакцинного штамма. Через 90 дней после иммунизации животных заражали вирулентным штаммом В.abortus 54 в дозе 10 ИД₁₀₀ и через 40 дней убивали и проводили бактериологическое исследование паренхиматозных органов и лимфатических узлов (всего 10 объектов) с целью определения уровня иммунитета у иммунизированных животных. В качестве контроля к каждой опытной группе служила группа животных, иммунизированных вакциной в той же концентрации микробных клеток, что и опытная, но без добавления антигена. В качестве контроля заражения использовали группу невакцинированных морских свинок и группу животных, вакцинированных одним антигеном. Через 15, 30, 60 и 90 дней после иммунизации у морских свинок брали кровь и проводили определение титра специфических антител в реакции агглютинации и реакции связывания комплемента с Антигеном бруцеллезным единым для РА, РСК, РДСК. Результаты бактериологических исследований представлены в таблицах 1 и 2, результаты серологических исследований представлены в таблицах 3 и 4.

Таблица 1
Результаты бактериологического исследование морских свинок, вакцинированных препаратами на основе вакцины из штамма 19
Препарат, полученный по примеру №	Доза препарата (мл)	Расселяемость вакцинного штамма, через 30 дней после иммунизации	% иммунных животных
Выделено культур вакцинного штамма	Индекс расселяемости
1	2	3	4	5
Пример 4	0,5 мл (10 тыс. м.к. + 0,025 мг ПА)	68	90,7	100
Вакцина из штамма 19	10 тыс м.к.	31	41,3	20
Пример 5	1,0 мл (2 тыс. м.к. + 0,025 ПА)	64	85,3	80
Вакцина из штамма 19	2 тыс. м.к.	27	36	0
Пример 6	0,5 мл (500 м.к. + 0,025 ПА)	40	53,3	80
Вакцина из штамма 19	500 м.к.	20	26,7	0
Пример 6	0,2 мл (200 м.к. + 0,01 ПА)	53	70,7	60
Вакцина из штамма 19	200 м.к.	11	14,7	0
Пример 6	0,1 мл (100 м.к. + 0,005 ПА)	37	49,3	60
Вакцина из штамма 19	100 м.к.	8	10,7	0
Пример 7	1,0 мл (2 тыс. м.к. + 0,01 мг ПА)	60	80	80
Пример 8	1,0 мл (2 тыс. м.к. + 1 мг МА)	69	92	100
Пример 9	0,5 мл (500 м.к. + 0,005 мг ПА)	28	73,3	80
Пример 10	0,2 мл (200 м.к. + 0,001 мг ПА)	42	56	60
Пример 11	0,1 мл (100 м.к. + 0,02 мг ПА)	43	57,3	60
Пример 12	0,2 мл (200 м.к. + 0,2 мг ПА)	56	74,7	80
Пример 13	0,5 мл (500 м.к. + 1,0 мг ПА)	47	62,7	80
Пример 14	0,5 мл (10 тыс. м.к. + 0,025 мг ГА)	51	68	100
Пример 15	1,0 мл (2 тыс. м.к. + 1,0 мг ГА)	73	97,3	80
Пример 16	0,5 мл (500 м.к. + 0,25 мг БПК)	45	60	100

1	2	3	4	5
Антиген-ПА	0,05 мг	-	-	20
Антиген-ПА	0,5 мг	-	-	30
Антиген-ГА	0,1 мг	-	-	20
Вакцина из штамма 19	1 млрд. м.к.	67	89,3	100
Контроль заражения	-	-	-	0

Таблица 2
Результаты бактериологического исследование морских свинок, вакцинированных препаратами на основе вакцины из штамма РЕВ-1
Препарат, полученный по примеру №	Доза препарата (мл)	Расселяемость вакцинного штамма, через 30 дней после иммунизации	% иммунных животных
Выделено культур вакцинного штамма	Индекс расселяемости
1	2	3	4	5
Пример 18	0,2 мл (10 тыс. м.к. + 0,01 мг ПА)	71	94,7	100
Вакцина из штамма РЕВ-1	10 тыс. м.к.	72	96	30
Пример 19	0,4 мл (2 тыс. м.к. + 0,02 мг ПА)	75	100	100
Вакцина из штамма РЕВ-1	2 тыс. м.к.	75	100	30
Пример 19	0,2 мл (1 тыс. м.к. + 0,01 мг ПА)	72	96	90
Вакцина из штамма РЕВ-1	1 тыс. м.к.	69	92	0
Пример 19	0,1 мл (500 м.к. + 0,005 мг ПА)	74	98,7	70
Вакцина из штамма РЕВ-1	500 м.к	61	81,3	0
Пример 20	0,2 мл (200 м.к. + 0,01 мг ПА)	75	100	70
Вакцина из штамма РЕВ-1	200 м.к.	48	64	0
Пример 20	0,1 мл (100 м.к. + 0,005 мг ПА)	68	90,7	60
Вакцина из штамма РЕВ-1	100 м.к.	21	28	0
Пример 21	0,1 мл (50 м.к. + 0,005 мг ПА)	71	94,7	40
Вакцина из штамма РЕВ-1	50 м.к.	12	16	0
Пример 22	0,2 мл (10 тыс. м.к. + 0,002 ПА)	75	100	100

1	2	3	4	5
Пример 23	0,2 мл (10 тыс. м.к. + 0,2 мг ПА)	72	96	100
Пример 24	0,1 мл (500 м.к. + 0,2 мг ПА)	70	93,3	80
Пример 25	0,4 мл (2 тыс. м.к. + 0,004 мг ПА)	71	94,7	50
Пример 26	0,2 мл (1 тыс. м.к. + 0,04 мг ПА)	74	98,7	60
Пример 27	0,2 мл (200 м.к. + 0,02 мг. ПА)	69	92	80
Пример 28	0,1 мл (50 м.к. + 0,05 мг ПА)	72	96	60
Пример 29	0,2 мл (10 тыс. м.к. + 0,02 мг ГА)	73	97,3	100
Пример 30	0,4 мл (2 тыс. м.к. + 0,08 мг БПК)	75	100	90
Пример 31	0,1 мл (50 м.к. + 0,2 мг БПК)	70	93,3	90
Антиген-ПА	2 мг	-	-	30
Антиген- ГА	1 мг	-	-	20
Антиген-БПК	0,5 мг	-	-	10
Антиген-БПК	0,05 мг	-	-	10
Вакцина из штамма Рев 1	100 млн. м.к.	74	98,7	100
Контроль заражения	-	-	-	0

Таким образом, как видно из таблиц 1 и 2, введение в состав пониженных доз живой противобруцеллезной вакцины антигена в концентрациях от 0,01 до 2 мг/мл позволяет увеличить расселяемость вакцинного штамма в организме морской свинки по сравнению с вакцинным штаммом, введенным без антигена. Иммунизация морских свинок вакциной из штамма 19 в дозах от 100 до 10 тыс. микробных клеток и вакциной из штамма Рев-1 в дозах от 50 до 10 тыс. микробных клеток вызывает иммунитет максимально у 30% животных. Антигены, выделенные из бруцелл, в дозах от 0,05 до 2 мг также индуцируют аналогичный иммунитет. Совместное применение живой противобруцеллезной вакцины и антигена в аналогичных дозах вызывают иммунитет у 60-100% животных. Уменьшение или увеличение вводимых концентраций вакцины и антигена не приводит к достижению поставленной цели.

Таблица 3
Серологические реакции у морских свинок, привитых препаратом на основе штамма 19
Препарат, полученный по примеру №	Доза препарата (мл)	Реакция агглютинации	Реакция связывания комплемента
15 дней	30 дней	60 дней	90 дней	15 дней	30 дней	60 дней	90 дней
1	2	3	4	5	6	7	8	9	10
Пример 4	0,5 мл (10 тыс. м.к. + 0,025 мг ПА)	13,7±4,9	8,7±3,5	-	-	Отр.	Отр.	Отр.	Отр.
Вакцина из штамма 19	10 тыс. м.к.	78,3±7,2	96,7±5,4	30	9	Отр.	Пол.	Пол.	Пол.
Пример 5	1,0 мл (2 тыс. м.к. + 0,025 ПА)	17,4±1,8	-	-	-	Отр.	Отр.	Отр.	Отр.
Вакцина из штамма 19	2 тыс. м.к.	65,3±4,8	30,7±6,3	7,2±4,1	5,4±3,7	Пол.	Пол.	Пол.	Пол.
Пример 6	0,5 мл (500 м.к. + 0,025 ПА)	-	-	-	-	Отр.	Отр.	Отр.	Отр.
Вакцина из штамма 19	500 м.к.	64,7±5,9	36,9±10,2	-	-	Отр.	Пол.	Пол.	Пол.
Пример 6	0,2 мл (200 м.к. + 0,01 ПА)	-	-	-	-	Отр.	Отр.	Отр.	Отр.
Вакцина из штамма 19	200 м.к.	26,9±6,3	32,3±4,7	7,7±5,6	-	Отр.	Пол.	Пол.	Пол.
Пример 6	0,1 мл (100 м.к. + 0,005 ПА)	-	-	-	-	Отр.	Отр.	Отр.	Отр.
Вакцина из штамма 19	100 м.к.	-	13,5±5,1	3,2±2,2	-	Отр.	Пол.	Пол.	Отр.
Пример 7	1,0 мл (2 тыс. м.к. + 0,01 мг ПА)	9,5±5,3	-	-	-	Отр.	Отр.	Отр.	Отр.
Пример 8	1,0 мл (2 тыс. м.к. + 1 мг ПА)	-	-	-	-	Отр.	Отр.	Отр.	Отр.

1	2	3	4	5	6	7	8	9	10
Пример 9	0,5 мл (500 м.к. + 0,0 05 мг ПА)	-	-	-	-	Отр.	Отр.	Отр.	Отр.
Пример 10	0,2 мл (200 м.к. + 0,001 м г ПА)	-	-	-	-	Отр.	Отр.	Отр.	Отр.
Пример 11	0,1 мл (100 м.к. + 0,02 мг ПА)	-	-	-	-	Отр.	Отр.	Отр.	Отр.
Пример 12	0,2 мл (200 м.к. + 0,2 мг ПА)	-	-	-	-	Отр.	Отр.	Отр.	Отр.
Пример 13	0,5 мл (500 м.к. + 1,0 мг ПА)	-	-	-	-	Отр.	Отр.	Отр.	Отр.
Пример 14	0,5 мл (10 тыс. м.к. + 0,025 м г ГА)	18,6+4,0	-	-	-	Отр.	Отр.	Отр.	Отр.
Пример 15	1,0 мл (2 тыс. м.к. + 1,0 мг ГА)	-	-	-	-	Отр.	Отр.	Отр.	Отр.
Пример 16	0,5 мл (500 м.к. + 0,25 мг БПК)	-	-	-	-	Отр.	Отр.	Отр.	Отр.
Антиген-ПА	0,05 мг	-	-	-	-	Отр.	Отр.	Отр.	Отр.
Антиген-ПА	0,5 мг	-	-	-	-	Отр.	Отр.	Отр.	Отр.
Антиген-ГА	0,1 мг	-	-	-	-	Отр.	Отр.	Отр.	Отр.
Вакцина из шт.19	1 млрд.м.к	453,9±47,7	326,4±51,3	233,8±41,9	70,2±21,4	Пол.	Пол.	Пол.	Пол.

Таблица 4
Серологические реакции у морских свинок, привитых препаратом на основе штамма РЕВ-1
Препарат, полученный по примеру №	Доза препарата (мл)	Реакция агглютинации	Реакция связывания комплемента
15 дней	30 дней	60 дней	90 дней	15 дней	30 дней	60 дней	90 дней
1	2	3	4	5	6	7	8	9	10
Пример 18	0,2 мл (10 тыс. м.к. + 0,01 мг ПА)	4,7±10,1	-	-	-	отр.	отр.	отр.	отр.
Вакцина из штамма РЕВ-1	10 тыс. м.к.	25,5±10,6	23,3±3,1	18,3±3,1	9,5±5,3	пол.	пол.	пол.	пол.
Пример 19	0,4 мл (2 тыс. м.к. + 0,02 мг ПА)	7,6±3,9	-	-	-	отр.	отр.	отр.	отр.
Вакцина из штамма РЕВ-1	2 тыс. м.к.	20,0±3,6	22,2±3,6	4,6±13,5	-	пол.	пол.	пол.	пол.
Пример 19	0,2 мл (1 тыс. м.к. + 0,01 мг ПА)	-	-	-	-	отр.	отр.	отр.	отр.
Вакцина из штамма РЕВ-1	1 тыс. м.к.	-	15,0±1,9	17,4±1,8	-	пол.	пол.	пол.	пол.
Пример 19	0,1 мл (500 м.к. + 0,005 мг ПА)	-	-	-	-	отр.	отр.	отр.	отр.
Вакцина из штамма РЕВ-1	500 м.к	-	-	13,1±4,5	17,6±4,2	пол.	пол.	пол.	пол.
Пример 20	0,2 мл (200 м.к. + 0,01 мг ПА)	-	-	0,6±0,4	-	отр.	отр.	отр.	отр.
Вакцина из штамма РЕВ-1	200 м.к.	-	9,2±5,4	14,3±4,7	-	пол.	пол.	пол.	пол.
Пример 20	0,1 мл (100 м.к. + 0,005 мг ПА)	-	-	-	-	отр.	отр.	отр.	отр.
Вакцина из штамма РЕВ-1	100 м.к.	4,2±2,6-	8,7±6,4	7,5±2,7	4,7±2,9	отр.	пол.	пол.	отр.
Пример 21	0,1 мл (50 м.к. + 0,005 мг ПА)	-	-	-	-	отр.	отр.	отр.	отр.
Вакцина из штамма РЕВ-1	50 м.к.	9,4±2,3	6,8±4,4	-	-	отр.	пол.	пол.	отр.
Пример 22	0,2 мл (10 тыс. м.к. + 0,002 ПА)	12,5±1,6	-	-	-	отр.	отр.	отр.	отр.
Пример 23	0,2 мл (10 тыс. м.к. + 0,2 мг ПА)	-	-	-	-	отр.	отр.	отр.	отр.
Пример 24	0,1 мл (500 м.к. + 0,2 мг ПА)	-	-	-	-	отр.	отр.	отр.	отр.

1	2	3	4	5	6	7	8	9	10
Пример 25	0,4 мл (2 тыс. м.к. + 0,004 мг ПА)	7,1±4,2	-	-	-	отр.	отр.	отр.	отр.
Пример 26	0,2 мл (1 тыс. м.к. + 0,04 мг ПА)	-	-	-	-	отр.	отр.	отр.	отр.
Пример 27	0,2 мл (200 м.к. + 0,02 мг ПА)	-	-	-	-	отр.	отр.	отр.	отр.
Пример 28	0,1 мл (50 м.к. + 0,05 мг ПА)	-	-	-	-	отр.	отр.	отр.	отр.
Пример 29	0,2 мл (10 тыс. м.к. + 0,02 мг ГА)	10,2±3,4	-	-	-	отр.	отр.	отр.	отр.
Пример 30	0,4 мл (2 тыс. м.к. + 0,08 мг ВПК)	-	-	-	-	отр.	отр.	отр.	отр.
Пример 31	0,1 мл (50 м.к. + 0,2 мг БПК)	-	-	-	-	отр.	отр.	отр.	отр.
Антиген-ПА	2 мг	-	-	-	-	отр.	отр.	отр.	отр.
Антиген-ГА	1 мг	-	-	-	-	отр.	отр.	отр.	отр.
Антиген-БПК	0,5 мг	2,7±1,4	-	-	-	отр.	отр.	отр.	отр.
Антиген-БПК	0,05 мг	-	-	-	-	отр.	отр.	отр.	отр.
Вакцина из штамма Рев 1	100 млн. м.к.	166,0±31	204±30	186±18	71±8	пол.	пол.	пол.	пол.

Как видно из таблиц 3 и 4, введение в состав антигена позволяет снизить уровень специфических бруцеллезных антител, регистрируемых коммерческими диагностикумами, без снижения уровня иммунитета.

Пример 33. Овец в возрасте 3-5 месяцев разбили на группы по 10 голов в каждой и привили противобруцеллезной вакциной из штамма 19, полученной по примерам 1-4. В качестве контроля служили группы, привитые вакциной в полной дозе 40 млрд. м.к., в малой 1,5 млрд. м.к., а также животные, которым вводили культуру бруцелл из штамма 19 в уменьшенных дозах, соответствующих использованным при приготовлении препарата в примерах 1-4. У животных на 7, 15, 30, 60, 90 день брали кровь и исследовали в серологических реакциях (РБП, PA, PCK). Результаты представлены в таблицах 5, 6, 7.

Таблица 5
Результаты серологического исследования сыворотки крови овец в реакции с Бенгальским розовым (РБП-проба)
Препарат, полученный по примеру №	Доза препарата (мл)	РБП
7 день	15 день	30 день	60 день	90 день
Пример 1	2 мл (50 млн. м.к + 0,1 мг ПА)	пол.	Пол.	Отр.	Отр.	Отр.
Вакцина из штамма 19	50 млн. м.к.	пол.	Отр.	Отр.	Отр.	Отр.
Пример 2	2 мл (5 млн. м.к. + 0,02 мг ПА)	отр.	Отр.	Отр.	Отр.	Отр.
Вакцина из штамма 19	5 млн. м.к.	пол.	Отр.	Отр.	Отр.	Отр.
Пример 3	2 мл (5 млн. м.к. + 0,1 мг ПА)	отр.	Отр.	Отр.	Отр.	Отр.
Пример 4	2 мл (40 тыс. м.к. + 0,1 мг ПА)	отр.	Отр.	Отр.	Отр.	Отр.
Вакцина из штамма 19	40 тыс. м.к.	пол.	Отр.	Отр.	Отр.	Отр.
Вакцина из штамма 19	40 млрд. м.к.	пол.	Отр.	Отр.	Отр.	Отр.
Вакцина из штамма 19	1,5 млрд. м.к.	пол.	Отр.	Отр.	Отр.	Отр.

Таблица 6
Результаты серологического исследования сыворотки крови овец в реакции агглютинации
Препарат, полученный по примеру №	Доза препарата (мл)	РА
7 день	15 день	30 день	60 день	90 день
1	2	3	4	5	6	7
Пример 1	2 мл (50 млн. м.к + 0,1 мг ПА)	67±23	34±8	-	-	-
Вакцина из штамма 19	50 млн. м.к.	520±134	360±45	178±28	117±28	73±25
Пример 2	2 мл (5 млн. м.к. + 0,02 мг ПА)	51±11	42±23	25±13	-	-
Вакцина из штамма 19	5 млн. м.к.	400±91	250±51	158±28	118±14	83,3±27
Пример 3	2 мл (5 млн. м.к. + 0,1 мг ПА)	47±19	31±17
Пример 4	2 мл (40 тыс. м.к. + 0,1 мг ПА)	34±12

1	2	3	4	5	6	7
Вакцина из штамма 19	40 тыс. м.к.	125±21	167±25	120±20	78±20	48,3±17
Вакцина из штамма 19	40 млрд. м.к.	7245±241	5169±356	800±210	590±179	479±115
Вакцина из штамма 19	1,5 млрд. м.к.	1040±194	1234±420	471±130	301±124	112±65

Таблица 7
Результаты серологического исследования сыворотки крови овец в реакции связывания комплемента
Препарат, полученный по примеру №	Доза препарата мл)	РСК
15 день	30 день	60 день	90 день
Пример 1	2 мл (50 млн. м.к + 0,1 мг ПА)	пол.	отр.	отр.	отр.
Вакцина из штамма 19	50 млн. м.к.	пол.	пол.	пол.	пол.
Пример 2	2 мл (5 млн. м.к. + 0,02 мг ПА)	отр.	отр.	отр.	отр.
Вакцина из штамма 19	5 млн. м.к.	пол.	пол.	пол.	пол.
Пример 3	2 мл (5 млн. м.к. + 0,1 мг ПА)	отр.	отр.	отр.	отр.
Пример 4	2 мл (40 тыс. м.к. + 0,1 мг ПА)	отр.	отр.	отр.	отр.
Вакцина из штамма 19	40 тыс. м.к.	пол.	пол.	пол.	пол.
Вакцина из штамма 19	40 млрд. м.к.	пол.	пол.	пол.	пол.
Вакцина из штамма 19	1,5 млрд. м.к.	пол.	пол.	пол.	пол.

Пример 34. Овец в возрасте 3-5 месяцев разбили на группы по принципу аналогов и привили противобруцеллезной вакциной из штамма РЕВ-1, полученной по примерам 14-16. В качестве контроля служили группы, привитые вакциной в полной дозе 2 млрд. м.к., в малой 20 млн. м.к., а также животные, которым вводили культуру бруцелл из штамма РЕВ-1 в уменьшенных дозах, соответствующих использованным при приготовлении препарата в примерах 14-16. У животных на 7, 15, 30, 60, 90 день брали кровь и исследовали в серологических реакциях (РБП, PA, PCK). Результаты представлены в таблицах 8, 9, 10.

Таблица 8
Результаты серологического исследования сыворотки крови овец в реакции с Бенгальским розовым (РБП-проба)
Препарат, полученный по примеру №	Доза препарата (мл)	РБП
7 день	15 день	30 день	60 день	90 день
Пример 17	2 мл (1 млн. м.к. + 0,1 мг ПА)	отр.	Отр.	Отр.	Отр.	Отр.
Вакцина из штамма РЕВ-1	1 млн. м.к.	пол.	Пол.	Пол.	Пол.	Пол.
Пример 18	2 мл (100 тыс. м.к. + 0,1 мг ПА)	отр.	Отр.	Отр.	Отр.	Отр.
Вакцина из штамма РЕВ-1	100 тыс. м.к.	пол.	Пол.	Пол.	Пол.	Пол.
Пример 19	2 мл (10 тыс. м.к. + 0,1 мг ПА)	отр.	Отр.	Отр.	Отр.	Отр.
Вакцина из штамма РЕВ-1	10 тыс. м.к.	пол.	Пол.	Пол.	Пол.	Пол.
Вакцина из штамма РЕВ-1	2 млрд. м.к.	пол.	Пол.	Пол.	Пол.	Пол.
Вакцина из штамма РЕВ-1	20 млн. м.к.	пол.	Пол.	Пол.	Пол.	Пол.

Таблица 9
Результаты серологического исследования сыворотки крови овец в реакции агглютинации
Препарат, полученный по примеру №	Доза препарата (мл)	РА
7 день	15 день	30 день	60 день	90 день
1	2	3	4	5	6	7
Пример 17	2 мл (1 млн. м.к. + 0,1 мг ПА)	-	18,7±13,5		-	-
Вакцина из штамма РЕВ-1	1 млн. м.к.	3,0±1,0	33,3±16,7	58,3±23,3	83,3±16,7	41,7±8,3
Пример 18	2 мл (100 тыс. м.к. + 0,1 мг ПА)	-	-	-	-	-
Вакцина из штамма РЕВ-1	100 тыс. м.к.	-	10,0±5,1	21,0±8,8	60,0±10,6	43,8±6,2
Пример 19	2 мл (10 тыс. м.к. + 0,1 мг ПА)	-	-	-	-	-

1	2	3	4	5	6	7
Вакцина из штамма РЕВ-1	10 тыс. м.к.	-	-	16,7±8,3	25,0±6,7	40,0±10,0
Вакцина из штамма РЕВ-1	2 млрд. м.к.	83,3±50,0	300,0±100,0	533,3±133,3	266,7±66,7	150,0±50,0
Вакцина из штамма РЕВ-1	20 млн. м.к.	100,0±50,0	114,5±21,0	216,0±58,0	107,5±15,0	100,0±9,3

Таблица 10
Результаты серологического исследования сыворотки крови овец в реакции связывания комплемента
Препарат, полученный по примеру №	Доза препарата (мл)	РСК
15 день	30 день	60 день	90 день
Пример 17	2 мл (1 млн. м.к. + 0,1 мг ПА)	отр.	пол.	отр.	отр.
Вакцина из штамма РЕВ-1	1 млн. м.к.	пол.	пол.	пол.	пол.
Пример 18	2 мл (100 тыс. м.к. + 0,1 мг ПА)	отр.	отр.	отр.	отр.
Вакцина из штамма РЕВ-1	100 тыс. м.к.	отр.	пол.	пол.	пол.
Пример 19	2 мл (10 тыс. м.к. + 0,1 мг ПА)	отр.	отр.	отр.	отр.
Вакцина из штамма РЕВ-1	10 тыс. м.к.	отр.	пол.	пол.	пол.
Вакцина из штамма РЕВ-1	2 млрд. м.к.	пол.	пол.	пол.	пол.
Вакцина из штамма РЕВ-1	20 млн. м.к.	пол.	пол.	пол.	пол.

Пример 35. Телок в возрасте 4-6 месяцев разбили на группы по 20 голов в каждой и привили противобруцеллезной вакциной из штамма 19, полученной по примерам 1-4. В качестве контроля служили группы, привитые вакциной в полной дозе 80 млрд. м.к., в малой 3 млрд. м.к., а также животные, которым вводили культуру бруцелл из штамма 19 в уменьшенных дозах, соответствующих примерам 1-4. У животных на 7, 15, 30, 60 и 90 день брали кровь и исследовали в серологических реакциях (РБП, PA, PCK). Результаты представлены в таблицах 11, 12, 13.

Таблица 11
Результаты серологического исследования сыворотки крови телок в реакции с Бенгальским розовым (РБП-проба)
Препарат, полученный по примеру №	Доза препарата (мл)	РБП
7 день	15 день	30 день	60 день	90 день
Пример 1	4 мл (100 млн. м.к. + 0,2 мг ПА)	отр.	отр.	отр.	отр.	отр.
Вакцина из штамма 19	100 млн. м.к.	пол.	пол.	пол.	пол.	пол.
Пример 2	4 мл (10 млн. м.к. + 0,04 мг ПА)	отр.	отр.	отр.	отр.	отр.
Вакцина из штамма 19	10 млн. м.к.	пол.	пол.	пол.	пол.	пол.
Пример 3	4 мл (10 млн. м.к. + 0,2 мг ПА)	отр.	отр.	отр.	отр.	отр.
Пример 4	4 мл (80 тыс. м.к. + 0,2 мг ПА)	отр.	отр.	отр.	отр.	отр.
Вакцина из штамма 19	80 тыс. м.к.	пол.	пол.	пол.	пол.	пол.
Вакцина из штамма 19	80 млрд. м.к.	пол.	пол.	пол.	пол.	пол.
Вакцина из штамма 19	3 млрд. м.к.	пол.	пол.	пол.	пол.	пол.

Таблица 12
Результаты серологического исследования сыворотки крови телок в реакции агглютинации
Препарат, полученный по примеру №	Доза препарата (мл)	РА
7 день	15 день	30 день	60 день	90 день
Пример 1	4 мл (100 млн. м.к. + 0,2 мг ПА)	-	-	2,5±1,0	-	-
Вакцина из штамма 19	100 млн. м.к.	42,8±2,8	170,0±40,0	492,0±129,5	382,5±101,1	200,0±55,0
Пример 2	4 мл (10 млн. м.к. + 0,04 мг ПА)	-	-	-	-	-
Вакцина из штамма 19	10 млн. м.к.	-	68,7±17,2	425,0±105,5	420,0±106,2	253,5±73,9
Пример 3	4 мл (10 млн. м.к. + 0,2 мг ПА)	-	-	-	-	-
Пример 4	4 мл (80 тыс. м.к. + 0,2 мг ПА)	-	-	-	-	-
Вакцина из штамма 19	80 тыс. м.к.	-	41,1±9,5	307,1±56,7	178,5±43,3	117,8±29,2
Вакцина из штамма 19	80 млрд. м.к.	215,3±204,8	1092,3±391,0	775,3±206,3	221,4±49,8	73,3±34,7
Вакцина из штамма 19	3 млрд. м.к.	307,1±56,7	552,9±142,4	178,5±43,3	411,0±9,5	30,0±8,6

Таблица 13
Результаты серологического исследования сыворотки крови телок в реакции связывания комплемента
Препарат, полученный по примеру №	Доза препарата (мл)	РСК
15 день	30 день	60 день	90 день
Пример 1	4 мл (100 млн. м.к. + 0,2 мг ПА)	отр.	отр.	отр.	отр.
Вакцина из штамма 19	100 млн. м.к.	пол.	пол.	пол.	пол.
Пример 2	4 мл (10 млн. м.к. + 0,04 мг ПА)	отр.	отр.	отр.	отр.
Вакцина из штамма 19	10 млн. м.к.	пол.	пол.	пол.	пол.
Пример 3	4 мл (10 млн. м.к. + 0,2 мг ПА)	отр.	отр.	отр.	отр.
Пример 4	4 мл (80 тыс. м.к. + 0,2 мг ПА)	отр.	отр.	отр.	отр.
Вакцина из штамма 19	80 тыс. м.к.	отр.	отр.	пол.	пол.
Вакцина из штамма 19	80 млрд. м.к.	пол.	пол.	пол.	пол.
Вакцина из штамма 19	3 млрд. м.к.	пол.	пол.	пол.	пол.

Таким образом, при введении живой вакцины В.abortus 19 в дозе от 100 млн. до 80 тыс. микробных клеток, живой вакцины из штамма B.melitensis Rev-1 в дозе 1 млн. до 10 тыс. микробных клеток совместно с бруцеллезным антигеном в дозе 0,005-2,0 мг/мл снижается индукция специфических бруцеллезных антител у крупного и мелкого рогатого скота, что позволяет проводить диагностические исследования и выявлять более полно инфицированных животных среди вакцинированных.

Представленные данные свидетельствуют о том, что введение антигена как одного из факторов агрессии в состав живой вакцины увеличивает остаточную вирулентность вакцинного штамма и, как следствие, уменьшает количество микробных клеток, необходимое для расселения в организме вакцинированного животного (табл. №1 и 2). В то же время параллельно с расселением и приживаемостью вакцинного штамма в организме развивается иммунный ответ на введенный антиген (который происходит быстрее, чем на живую вакцину, требующую для полноценного иммунного ответа время для расселения и приживаемости штамма), что, в свою очередь, ведет к сокращению длительности персистенции вакцинного штамма в организме и приводит к снижению серопозитивности у вакцинированных животных (табл. №3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13). Заявляемый диапазон доз антигена и вакцины при совместном их введении ведет к двоякому действию, что позволяет снизить концентрацию микробных клеток в одной профилактической дозе и одновременно уменьшить уровень специфических бруцеллезных антител у вакцинированных животных, вплоть до недиагностического, без снижения напряженности иммунитета (табл. №1, 2).

Предложенный способ апробирован с положительным результатом на лабораторных животных, 3500 овцах и на 800 головах крупного рогатого скота, работы проводили в период с 2000 по 2012 гг. на опытной базе ВИЭВа в Вышнем Волочке и в хозяйствах Туркменистана.

Данный способ снижения серопозитивности у живых противобруцеллезных вакцин может найти применение при проведении профилактической вакцинации сельскохозяйственных животных против бруцеллеза живыми вакцинами из штаммов В.abortus 19 и B.melitensis Rev-1.

Источники информации

1. Сборник научных трудов Сибирского отделения ВАСХНИЛ. - Новосибирск, 1984. - С.21-26.

2. Российский ветеринарный журнал. - М.: КолосС, 2006 г. - №4. - С.8-11.

3. Диссертация на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук «Бруцеллез животных в России: эпизоотологические особенности и совершенствование специфической профилактики», Искандаров М.И. Москва, 2012 г. С.382.

4. Тезисы докладов Всесоюзной конференции «Актуальные вопросы профилактики бруцеллеза и организации медицинской помощи больным», Новосибирск, 1989 г., с.145-146.

5. Книга «Патогенез и иммунология бруцеллеза». - М.: Медгиз, 1974 г., с.178-179.

6. А.С. СССР «Способ получения бруцеллезного антигена» №1256258, A61K 39/10, 1984 г.

7. А.С. СССР «Способ получения бруцеллезного антигена» №691056, A61K 39/10, 1974 г.

8. А.С. СССР «Способ получения антигена» №467933, A61K 39/10, 1977 г.

Способ снижения серопозитивности живых противобруцеллезных вакцин из штаммов Brucella abortus 19 или Brucella melitensis Rev-1 для сельскохозяйственных животных, включающий введение животному вакцины из штамма В. abortus 19 в дозе от 100 млн. м.к. до 40 тыс. м.к. или вакцины из штамма В. melitensis Rev-1 в дозе от 1 млн. м.к. до 10 тыс. м.к. с одновременным введением бруцеллезного антигена в дозе от 0,02 до 0,1 мг.

Изобретение относится к технологии иммунобиологических лекарственных препаратов, в частности к производству химической холерной вакцины. Изобретение раскрывает способ получения таблетированной формы холерной бивалентной химической вакцины, который включает подготовку и смешивание лиофилизированных антигенов - холерогена-анатоксина, О-антигенов серовара Инаба и серовара Огава с лактозы моногидратом, целлюлозой микрокристаллической, гранулирование таблеточной смеси методом псевдоожиженного слоя с распылением 10% водного раствора поливинилпирролидона сверху с последующим таблетированием и нанесением 20% водного раствора кишечнорастворимого покрытия.

Иммуногенные композиции bordetella bronchiseptica // 2554480

Настоящее изобретение относится к биотехнологии. Предложены вакцинная композиция, содержащая Bordetella bronchiseptica и выделенный пертактиновый антиген, и применение вакцинной композиции для лечения и предупреждения комплекса инфекционных респираторных заболеваний собак.

Способ иммунизации животных против бруцеллеза // 2554055

Изобретение относится к биотехнологии и касается способа иммунизации животных против бруцеллеза. Охарактеризованный способ включает использование инактивированной противобруцеллезной вакцины или бруцеллезного антигена, причем вакцинацию проводят ежедневно, перорально в течение 5-10 дней, через 7-15 дней после окончания вакцинации проводят однократную пероральную ревакцинацию антигеном или вакциной совместно с иммуностимулятором, причем вакцину или антиген вводят вместе с кормом или водой.

Штамм бактерии pseudomonas aeruginosa № 9 для изготовления вакцины против псевдомоноза свиней // 2553631

Изобретение относится к биотехнологии и ветеринарии и касается штамма возбудителя псевдомоноза свиней, коллекции ФГБУ ВГНКИ, депонированного под наименованием «Pseudomonas aeruginosa №9» и регистрационным номером «№9-ДЕП», предназначенного для изготовления вакцины против псевдомоноза свиней.

Штамм бактерий pseudomonas aeruginosa для изготовления вакцины против псевдомоноза свиней // 2553558

Изобретение относится к биотехнологии и ветеринарии. Штамм бактерий Pseudomonas aeruginosa №6-ДЕП депонирован в коллекции ФГБУ ВГНКИ.

Вакцина ассоциированная против эшерихиоза, стрептококкоза и стафилококкоза крупного рогатого скота // 2553556

Изобретение относится к области ветеринарной медицины и касается вакцины, ассоциированной против эшерихиоза, стрептококкоза и стафилококкоза крупного рогатого скота.

Штамм бактерий pseudomonas aeruginosa для изготовления вакцины против псевдомоноза свиней // 2553555

Изобретение относится к биотехнологии и ветеринарии. Штамм Pseudomonas aeruginosa №1 КВЛ-ДЕП депонирован в коллекции ФГБУ ВГНКИ.

Штамм бактерий pseudomonas aeruginosa для изготовления вакцины против псевдомоноза свиней // 2553554

Изобретение относится к биотехнологии и ветеринарии. Штамм бактерий Pseudomonas aeruginosa №25-ДЕП депонирован в коллекции ФГБУ ВГНКИ.

Штамм бактерий pseudomonas aeruginosa для изготовления вакцины против псевдомоноза свиней // 2553553

Изобретение относится к биотехнологии и ветеринарии. Штамм бактерий Pseudomonas aeruginosa №34-ДЕП депонирован в коллекции ФГБУ ВГНКИ.

Штамм бактерии pseudomonas aeruginosa // 2553306

Изобретение относится к биотехнологии и ветеринарии. Штамм Pseudomonas aeruginosa O11 депонирован в коллекции ФГБУ ВГНКИ под наименованием «Pseudomonas aeruginosa №10» и регистрационным номером «№10-ДЕП».

Способ лечения асимптоматической бактериоспермии // 2572713

Изобретение относится к медицине, а именно к урологии, и может быть использовано для лечения асимптоматической бактериоспермии. Для этого пациенту назначают Уро-ваксом по 1 капсуле 2 раза в день перорально в течение 1 месяца при бактериоспермии в титре более 103, а при титре 103 и менее - по 1 капсуле через день. Изобретение обеспечивает снижение титра микроорганизма или его полную эрадикацию. 2 пр.

Способ получения концентрата культуры клеток бруцелл из штамма brucella abortus 19 для приготовления бруцеллезных антигенов, бруцеллезные антигены (три варианта), способ изготовления бруцеллезной диагностической сыворотки и тест-системы для диагностики бруцеллеза животных (три варианта) // 2593712

Представленная группа изобретений касается способа получения концентрата культуры клеток бруцелл из штамма Brucella abortus 19 для приготовления бруцеллезных антигенов, способа получения концентрата клеток бруцелл из штамма Brucella abortus 19 для получения сыворотки бруцеллезной диагностической, способа получения единого бруцеллезного антигена РА, РСК и РДСК, способа получения бруцеллезного антигена для роз-бенгал пробы (РБП), способа получения бруцеллезного антигена для кольцевой реакции (КР) с молоком, способа получения сыворотки бруцеллезной диагностической, тест-системы для диагностики бруцеллеза животных в РА, РСК и РДСК, тест-системы для диагностики бруцеллеза животных в РБП и тест-системы для диагностики бруцеллеза животных в КР с молоком. Охарактеризованный способ получения концентрата культуры клеток бруцелл из штамма Brucella abortus 19 для приготовления бруцеллезных антигенов, используемых в диагностических тест-системах, включает получение посевного материала бактериальных клеток и их культивирование в глубинных условиях на жидкой питательной среде с регулированием уровня концентрации растворенного в культуральной среде кислорода на протяжении всего процесса культивирования, нактивацию выросших бактериальных клеток нагреванием с последующим их концентрированием. При этом процесс культивирования бактериальных клеток осуществляют при температуре 36-38°C, в процессе культивирования на этапе накопления бактериальных клеток от концентрации 1,5-2,5 млрд м.к./см3 до концентрации 10 млрд м.к./см3 выдерживают концентрацию растворенного кислорода в культуральной среде в интервале 20-25 мг/л, а свыше 10 млрд м.к./см3 и до достижения бактериальными клетками стационарной фазы роста обеспечивают концентрацию растворенного кислорода в культуральной среде в интервале значений 40-45 мг/л, а концентрирование выросших бактериальных клеток осуществляют посредством осаждения флокулянтом, в качестве которого используют натриевую соль карбоксиметилцеллюлозы (КМЦ), который добавляют в культуральную среду в количестве 0,1-0,15 г по сухому веществу на 1 литр культуральной среды, после чего сливают надосадок с получением концентрата инактивированных бактериальных клеток для последующего приготовления бруцеллезного антигена в РА, РСК, РДСК, антигена РБП; антигена КР с молоком. Изобретения могут быть использованы для диагностики бруцеллеза животных. 9 н. и 29 з.п. ф-лы, 5 пр.

Вакцины с живыми бактериальными изолятами для системного введения // 2593953

Настоящее изобретение относится к биотехнологии. Предложены вакцинная композиция, подходящая для системного введения, для защиты животного против клинического заболевания, возникающего из инфекции Bordetella bronchiseptica, и способы поддержки защиты псовых и животных против такого клинического заболевания путем системного введения вакцинной композиции. Вакцинная композиция включает живой аро-мутантный штамм Bordetella bronchiseptica и ароматическую добавку, содержащую тирозин, триптофан, фенилаланин, пара-аминобензойную и 2,3-дигидроксибензойную кислоты. Дополнительно вакцинная композиция может включать антиген вируса гриппа псовых и/или антиген вируса парагриппа псовых. Предложенная вакцинная композиция является безопасной и эффективной, при том что содержит уменьшенное количество живых аттенуированных бактерий, и может быть использована в медицине для системного введения животным для защиты против клинического заболевания, возникающего из инфекции Bordetella bronchiseptica. 3 н. и 8 з.п. ф-лы, 12 табл., 5 пр.

Комбинированная вакцина для профилактики коклюша, дифтерии, столбняка // 2596919

Изобретение относится к области медицины и касается комбинированной вакцины для профилактики коклюша, дифтерии и столбняка. Представленная вакцина содержит коклюшный компонент, дифтерийный и столбнячный анатоксины, адсорбированные на алюминия гидроксиде. В качестве коклюшного компонента используется вакцина коклюшная бесклеточная очищенная, при следующем соотношении ингредиентов в одной дозе (0,5 мл): Вакцина коклюшная бесклеточная очищенная 30-45 мкг Дифтерийный анатоксин 2,5-5 Lf Столбнячный анатоксин 2,5-5 Lf Алюминия гидроксид (в пересчете на алюминий Al3+) от 0,3 до 0,55 мг Охарактеризованная вакцина не является реактогенной, полностью соответствует требованиям, предъявляемым Всемирной Организацией Здравоохранения к препаратам такого класса, и может быть использована для бустерной вакцинации. 2 табл.

Повышение иммунного отклика у видов крупного рогатого скота // 2606855

Изобретение относится к области фармацевтики и касается композиции иммуномодулятора для лечения респираторного заболевания у крупного рогатого скота, которое вызвано Mannheimia haemolytica, которая включает катионное липосомное средство и молекулу нуклеиновой кислоты, где молекула нуклеиновой кислоты является выделенным, происходящим из бактерии E.coli некодирующим ДНК плазмидным вектором, содержащим 4242 пар оснований, без встроенного гена. Изобретение обеспечивает вызов системного, неспецифического и антигенспецифического иммунных откликов у животных для защиты против инфекционного респираторного заболевания. 10 з.п. ф-лы, 6 пр., 6 табл., 27 ил.

Комбинированная вакцина с цельноклеточным коклюшем // 2613295

Группа изобретений относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для получения комбинированной жидкой вакцины. Полностью жидкая стабильная комбинированная вакцина содержит антигены дифтерии (D), столбняка (Т), цельноклеточного коклюша (wP), IPV и Haemophilus influenzae (Hib). IPV антигены представляют собой Salk штаммы, выбранные из группы штаммов Mahoney тип 1, MEF тип 2 и Saukett тип 3 или Sabin, выбранные из группы Sabin 1 или 2. Антиген Hib конъюгирован с белком-носителем, выбранным из группы, содержащей анатоксин столбняка, анатоксин дифтерии, CRM 197 и наружный белок мембраны Neisseria meningitides. При этом D присутствует в количестве около 1-40 Lf, Т присутствует в количестве около 1-25 Lf, wP присутствует в количестве около 1-30 IOU на 0,5 мл и Hib b присутствует в количестве около 1-20 мкг на 0,5 мл. Группа изобретений относится также к способу производства вышеуказанной вакцины и способу индуцирования иммунологического ответа на любой антиген, выбранный из группы D, Т, Р, Hib, Hep или IPV, у субъекта. Использование данной группы изобретений позволяет получить полностью жидкую многокомпонентную вакцину с оптимизацией дозы антигенов, при этом в заявленной вакцине анатоксины D, Т адсорбированы на подходящем адъюванте на основе алюминия, в то время как компонент Hib не является адсорбированным на каком-либо адъюванте, в вакцине используется 2-феноксиэтанол в качестве консерванта. Разработана методика формирования индивидуальных антигенов в композиции вакцины с улучшенной антигенностью, применимостью и стабильностью, что позволяет использовать компонент Hib b не в отдельной лиофилизированной форме путем формирования состава вакцины непосредственно перед ее введением, а непосредственно в жидком состоянии вакцины.3 н. и 17 з.п. ф-лы, 4 пр., 5 табл.

Вакцина для защиты жвачных животных от пневмонии, вызываемой pasteurella multocida // 2613672

Заявленное изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для защиты жвачных животных от пневмонии, вызываемой P. Multocida. Заявленный способ включает введение вакцины, включающей живые аттенуированные бактерии P. multocida, в верхние отделы дыхательных путей жвачного животного путем интраназального распыления вакцины. Заявленный способ высокоэффективен для защиты жвачных животных от пневмонии, вызываемой P. Multocida. 4 з.п. ф-лы, 5 табл., 2 пр.

Способ получения бруцеллёзной моноспецифической сыворотки anti-melitensis // 2613901

Изобретение относится к области медицины, а именно к ветеринарии и иммунологии, и может быть использовано для получения бруцеллезной моноспецифической сыворотки. Для этого проводят иммунизацию кроликов разовой дозой штамма В. melitensis. Иммунизацию кроликов проводят подкожно в область подгрудка суспензией в объеме 1 мл, представляющую собой смесь: 200 млн. м.к. инактивированной культурой штамма В. melitensis16М с адъювантом MONTANIDE™ ISA 61 VG. На 14-16 день проводят пробное крововзятие, а на 21-45 дни осуществляют трехкратное взятие крови и на 60 день обескровливают. Получают сыворотку и инактивируют при 60-65°С в течение 1-1,5 часа. Проводят перекрестную адсорбцию бактериологической массой штамма В. abortus 544, полученной путем выращивания культуры в течение 70-72 ч. Центрифугируют с охлаждением осадка в течение 24-26 часов, добавляя к осадку физиологический раствор для получения бактериальной массы в количестве 3,5-3,7×109 КОЕ на 10 мл сыворотки. Далее инкубируют при 37°С в течение 2 часов и восстанавливают сыворотку путем центрифугирования с дальнейшим консервированием и фасовкой. Использование данного способа позволяет использовать инактивированную культуру бруцелл с получением моноспецифической сыворотки, а также брать кровь от каждого кролика минимум четырехкратно, повышая количество получаемой сыворотки. 2 пр., 8 табл.

Комбинированная вакцина для профилактики коклюша, дифтерии, столбняка, гепатита в и инфекции, вызываемой haemophilus influenzae тип в // 2626532

Изобретение относится к медицине, а именно к комбинированным вакцинам, содержащим в одном препарате несколько антигенов. Представленная комбинированная вакцина содержит в своем составе следующие компоненты: коклюшный, в качестве которого используется вакцина коклюшная бесклеточная очищенная 60-70 мкг, дифтерийный анатоксин - 15-20 Lf, столбнячный анатоксин 5-7,5 Lf, рекомбинантный поверхностный антиген вируса гепатита В (HBsAg) 5-10 мкг, вакцину Haemophilus influenzae тип b конъюгированную (Hib) 8-12 мкг, алюминия гидроксид (в пересчете на алюминий Al3+) от 0,3 до 0,55 мг. Охарактеризованная вакцина является высокоиммуногенным, нетоксичным препаратом, позволяющим одновременно проводить иммунизацию против коклюша, дифтерии, столбняка, гепатита В и инфекции, вызываемой Haemophilus influenzae тип b. Использование изобретения позволяет расширить арсенал средств для вакцинации детей в соответствии с Национальным календарем профилактических прививок России. 4 табл., 1 пр.