Способ оценки состояния цитоскелета эритроцитов



Способ оценки состояния цитоскелета эритроцитов
Способ оценки состояния цитоскелета эритроцитов
Способ оценки состояния цитоскелета эритроцитов

 


Владельцы патента RU 2572335:

Федеральное Государственное Бюджетное Образовательное Учреждение Высшего Профессионального Образования "Нижегородская Государственная Сельскохозяйственная Академия (ФГБОУ ВПО НГСХА) (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторным методам исследования изменения состояния цитоскелета эритроцитов. Для этого эритроциты отмывают от плазмы крови, помещают на водяную баню при 49,2°C и прогревают в течение 15 мин. После этого эритроциты фиксируют с помощью глутарового альдегида. Об изменении состояния цитоскелета эритроцитов судят по изменению морфологической картины. Способ обеспечивает определение состояния цитоскелета эритроцитов при различных заболеваниях человека. 3 ил., 3 пр.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторным методам исследований.

Известен способ исследования состояния цитоскелета эритроцитов, взятый за прототип (Mohandas et al., Blood. 1982. V.59. P.768-774), включающий выделение эритроцитов из крови, получение из них замкнутых теней и определение механической стабильности при высокой скорости сдвига. Однако способ трудоемок (получение замкнутых теней) и требует дорогого специального оборудования (эктацитометра).

Известен также способ оценки изменения состояния цитоскелета эритроцитов (см. патент №2413945) путем их выделения из крови и регистрации агрегации, индуцированной лантаном.

Задача создания нового, несложного, высокочувствительного, не требующего специального оборудования, способа исследования состояния цитоскелета эритроцитов является актуальной.

Задача достигается способом, который заключается в том, что эритроциты выделяют из крови, помещают на водяную баню и прогревают при 49.2°C в течение 15 мин. О состоянии цитоскелета эритроцитов судят по изменению морфологии эритроцитов.

Способ упрощает процедуру исследования состояния цитоскелета эритроцитов.

Способ осуществляется следующим образом. Эритроциты трижды отмывают от плазмы и белых клеток центрифугированием в 10-кратном объеме физиологического раствора. Отмытые эритроциты ресуспендируют в соотношении 1:200 в забуференном физиологическом растворе (10 мМ трис - HCl, 150 мМ NaCl, pH 7.4), после чего суспензию клеток помещают на водяную баню и прогревают при 49.2°C в течение 15 мин. После этого эритроциты фиксируют в 0.25% растворе глутарового альдегида, приготовленного на фосфатном буфере и изучают морфологию клеток.

Принцип способа исследования состояния цитоскелета эритроцитов основан на том, что в диапазоне температур от 49°C до 49.5°C происходит денатурация главного белка цитоскелета спектрина (Brandts et al., Biochemistry. 1977. Vol.16. P.3450-3454).

Известно, что эритроциты больных сахарным диабетом 2-го типа имеют нестабильное состояние цитоскелета (Стародубцева и др., Бюл. эксперим. биол. мед. 2008. №1. С. 106-111).

Пример 1. Суспензию нормальных эритроцитов помещали на водяную баню и прогревали при 49.2°C в течение 15 мин. После этого эритроциты фиксировали глутаровым альдегидом и с помощью светового микроскопа изучали морфологию эритроцитов. На рис. 1 видно образование сфероцитов. Нормальные эритроциты после прогревания образуют 5-15% сфероцитов.

Пример 2. Суспензию эритроцитов больного сахарным диабетом 2-го типа помещали на водяную баню и прогревали при 49.2°C в течение 15 мин. После этого эритроциты фиксировали глутаровым альдегидом и с помощью светового микроскопа изучали морфологию эритроцитов. На рис. 2 видно, что прогревание эритроцитов больных сахарным диабетом 2-го типа приводит к образованию 100% сфероцитов. Состояние цитоскелета эритроцитов нарушено в сторону снижения его стабильности.

Пример 3. Эритроциты обрабатывали нитритом натрия и прогревали при 49.2°C в течение 15 мин. После этого эритроциты фиксировали глутаровым альдегидом и с помощью светового микроскопа изучали морфологию эритроцитов. На рис. 3 видно, что прогревание эритроцитов, обработанных нитритом натрия, приводит к образованию 100% сфероцитов. Состояние цитоскелета эритроцитов нарушено в сторону его снижения.

Способ исследования состояния цитоскелета эритроцитов, включающий выделение эритроцитов из крови и их прогревание, отличающийся тем, что суспензию эритроцитов помещают на водяную баню, прогревают при 49,2°C в течение 15 мин и фиксируют с помощью глутарового альдегида, а об изменении состояния цитоскелета эритроцитов судят по морфологической картине.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и может использоваться для прогнозирования частой заболеваемости ОРВИ у детей раннего возраста со спастическими формами ДЦП.

Изобретение относится к медицине и касается способа получения растворимого фибриногена, заключающегося в том, что свежезамороженную плазму размораживают и центрифугируют, полученный криопреципитат солюбилизируют и подвергают обработке гидроокисью алюминия, полученную суспензию центрифугируют, образовавшийся осадок, содержащий нецелевые белки, отбрасывают, супернатант подвергают обработке полиэтиленгликолем, суспензию центрифугируют, надосадочную жидкость отбрасывают, а осадок солюбилизируют и подвергают вирусной инактивации, освобождают от продуктов вирусной инактивации, встряхивая с вазелиновым маслом и переосаждая глицином, процедуру осаждения повторяют дважды, полученный раствор фибриногена разливают и лиофильно высушивают.

Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для определения кислотной устойчивости эритроцитов. Способ заключается в том, что в пробирку с кровью добавляют антикоагулянт (трилон Б) из расчета 10 мкл на 2 мл крови.
Изобретение относится к области медицины и ветеринарии применительно к взятию, хранению и транспортировке проб крови или сыворотки с целью последующего проведения анализа материала на содержание биологически активных веществ.

Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике, и может быть использовано для установления формирования восстановленного глутатиона в эритроцитах беременной при обострении цитомегаловирусной инфекции.

Изобретение относится к медицине и биологии и может быть использовано для определения функционального состояния клетки. Для этого растровое изображение клетки и ее органелл получают в функции от оптической разности хода, представленной как фазовая толщина локального участка клетки или ее органелл, получают построчным последовательным сканированием каждого элемента клетки или ее органелл, попадающего в строку, с последующим переходом в следующую строку, расположенную под строкой, прошедшей сканирование.

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ прогнозирования исхода сепсиса, включающий определение абсолютного количества эозинофилов (КЭ), отличающийся тем, что КЭ определяют также в динамике на 3-5-е сутки пребывания в отделении реанимации и интенсивной терапии, и если в динамике на 3-5-е сутки КЭ увеличивается в два и более раза по сравнению с 1-2-ми сутками, то прогнозируют благоприятный исход с уже установленным диагнозом сепсис, если существенно не изменяется, то прогнозируют летальный исход у пациентов с сепсисом, при этом заключают, что риск развития летального исхода у пациентов с сепсисом при КЭ менее 120 кл./мкл увеличивается на 62,5% по сравнению с септическими пациентами, которые имеют КЭ более 120 кл./мкл.

Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии, и может быть использовано для прогнозирования поражения нервной системы в ранней стадии болезни Кавасаки.

Изобретение относится к медицине, а именно к биохимической лабораторной диагностике, и может быть использовано для определения жесткости сосудистой стенки у пациентов с артериальной гипертонией и абдоминальным ожирением.

Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ диагностики заболеваний с использованием элементов-индикаторов. Согласно изобретению у пациентов старше 18 лет выявляют в пробе крови содержание следующих элементов: Cr менее 0,0119±0,010 мг/кг; Eu менее 4,33*10-5±8,57*10-6 мг/кг; Tb менее 2,06*10-5±9,06*10-6 мг/кг; Er менее 2,27*10-5±9,96*10-6 мг/кг; Tm менее 1,31*10-5±9,85*10-6 мг/кг; Lu менее 1,25*10-5±1,04*10-5 мг/кг; Ta менее 2,31*10-5±2,11*10-5 мг/кг; Ba более 0,0152±0,009 мг/кг; V более 0,0122±0,0079 мг/кг; Pd более 0,000187±0,00013 мг/кг, определяют показатель: Y=(10-3*3*Cr+5*(Eu+Tb+Er+Tm+Lu+Ta))/(10-1*(V+4*Ba)+5*Pd) и диагностируют заболевание сердечно-сосудистой системы (ССС) и/или онкологическое заболевание при Y меньше 0,026 и их отсутствие при Y больше 0,093.

Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для определения функционального состояния яичников у самок сельскохозяйственных животных в условиях первой лактации. Способ включает забор крови из яремной вены, исследование содержания общего холестерина и показателя альбумино-глобулинового коэффициента и суждение о функциональном состоянии яичников у коров-первотелок. При значениях общего холестерина 5,2-7,8 ммоль/л и показателя альбумино-глобулинового коэффициента в пределах 1,0-1,8 дополнительно исследуют содержание общего белка, калия и магния. При достижении значений содержания общего белка более 65,6 г/л, концентраций калия 4,2-4,8 ммоль/л и магния 1,0-1,2 ммоль/л диагностируют активно функционирующие яичники с возможностью последующего оплодотворения. Когда величины указанных показателей не достигают вышеуказанных оптимальных значений общего белка, калия и магния, делают заключение о снижении функциональной активности яичников с прохождением неполноценных циклов у коров-первотелок. Способ позволяет доступно в условиях животноводческих и фермерских хозяйств на основе исследования в сыворотке крови общего белка, альбумино-глобулинового коэффициента, общего холестерина, калия и магния более точно определять функциональное состояние яичников и условия для формирования полноценных эстральных циклов у молодых коров в период первой лактации. 1 табл., 1 пр.

Изобретение относится к медицине и предназначено для предупреждения развития вариабельного иммунодефицита с поражением, преимущественно, клеток моноцитарно-макрофагальной системы иммунитета у детей, потребляющих питьевую воду с остаточными количествами продуктов гиперхлорирования. Осуществляют сочетанное применение курсом 2 раза в год лекарственных средств: Ликопид перорально по 1 мг внутрь 1 раз в сутки в течение 10 дней; Эслидин перорально в возрасте от 3 до 7 лет - по 1 капсуле 2 раза в сутки, старше 7 лет - по 1 капсуле 3 раза в сутки, в течение 21 дня. Способ позволяет повысить эффективность предупреждения развития у детей старше 3 лет вариабельного иммунодефицита с поражением, преимущественно, клеток моноцитарно-макрофагальной системы иммунитета, связанного с остаточными количествами токсикантов. 3 табл.

Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для диагностики наличия заболевания у животных по изменению лейкограммы после ультразвукового воздействия. Способ включает воздействие на образцы крови объемом от 1 мл до 1,5 мл, помещенные в кювету, непрерывной бегущей ультразвуковой волной частотой 880 кГц интенсивностью от 0,05 до 0,1 Вт/см2 с экспозицией воздействия на кровь животных от 15 с - 30 с, обработку образцов крови в абсолютно одинаковых условиях, поддержание постоянной температуры образцов в кюветах с проточным охлаждением и анализ морфологического состояния клеток методами световой микроскопии. При уменьшении числа лимфоцитов и изменении числа нейтрофилов диагностируют наличие заболевания. Изобретение позволяет регистрировать наличие ухудшения гематологических показателей больных животных и диагностировать наличие или отсутствие заболевания по изменению лейкограммы. 2 ил., 5 табл., 1 пр.

Изобретение относится к поглощающему изделию, выполненному с возможностью определения ионной силы мочи. Изделие включает непроницаемый для жидкости слой; проницаемый для жидкости слой; поглощающий внутренний слой, расположенный между непроницаемым для жидкости слоем и проницаемым для жидкости слоем; устройство с латеральным потоком, интегрированное в изделие и расположенное таким образом, что оно находится в жидкостном соединении с потоком мочи, выделяемой пользователем изделия. Устройство включает: буферную зону, которая содержит полиэлектролит и зону обнаружения или индикаторную зону, где зона обнаружения содержит недиффузионно иммобилизованные: буферный компонент, включающий слабую полимерную кислоту и слабое полимерное основание с pKa ≤ 10-3, и вещество из класса заряженных полимерных сурфактантов, чувствительных к относительным концентрациям ионов в растворе образца, и заряженный pH-индикатор, заряд которого противоположен заряду заряженного полимерного сурфактанта, где заряженный полимерный сурфактант растворим в количествах, превышающих или равных приблизительно 1 масс. % (≥ 1 масс. % растворенного вещества) в воде и водных растворах, имеющих низкую концентрацию ионов, составляющую ≤ 0,1 масс. % солей, но нерастворим (< 1 масс. % растворенного вещества) в водном растворе с высокой концентрацией ионов, составляющей > 0,1 масс. % солей. 7 з.п. ф-лы, 3 ил., 3 пр.
Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ диагностики туберкулеза, заключающийся в том, что выделяют мононуклеарные клетки периферической крови, культивируют их в питательной среде, получают образец супернатанта культуры мононуклеарных клеток периферической крови и проводят иммуноферментный анализ (ИФА), при этом перед проведением ИФА в лунки отрицательного контроля вносят питательную среду для культивирования клеток, а в лунки положительного контроля вносят сыворотку крови больного туберкулезом, заведомо содержащую анти-Mtb IgG и анти-Mtb IgA и разведенную 1:100, при ИФА используют в качестве сорбента раствор антигенов Mtb и определяют оптическую плотность образца супернатанта культуры мононуклеарных клеток периферической крови испытуемых ОПобр, образца отрицательного контроля К- и образца положительного контроля К+, после чего определяют критическое значение оптической плотности из соотношения ОПкр=К-+0,1 и при значениях ОПобр>ОПкр и К+>ОПкр устанавливают диагноз активный туберкулез, при значениях ОПобр<ОПкр и К+>ОПкр устанавливают отсутствие туберкулезной инфекции или латентную туберкулезную инфекцию, а при значениях К+<ОПкр и любых значениях ОПобр результат анализа считают недостоверным. Изобретение обеспечивает повышение эффективности диагностики туберкулеза при одновременном расширении области применения способа и для дифференциальной диагностики туберкулеза, и латентной инфекции. 6 пр.

Изобретение относится медицине и может быть использовано для определения степени энергизации Т-лимфоцита. Для этого проводят исследование отдельных лимфоцитов периферической крови пациента методом интерференционной микроскопии. При котором из суспензии мононуклеаров крови пациента выделяют пробу, микроскопируют в интерференционном микроскопе для получения изображения мононуклеара в виде топограммы, представляющей собой двумерное распределение фазовой толщины, отображающей проекцию отдельных органелл клетки в виде зон оптической плотности для вычисления значимых параметров, при этом в качестве значимых параметров используют границы зон в фазовом изображении одиночной клетки, которые соответствуют границам органелл и каждая из которых ограничивает участок в фазовом изображении одиночной клетки, толщина которого отличается от толщины смежно расположенного участка или участков, для построения характеристических прямых и интегральной функции по зависимости толщины участков в границах зон от фазового объема этих зон. Степень энергизации Т-лимфоцита одиночной клетки определяют путем сравнения величины параметра, полученного отношением тангенсов углов наклона характеристических прямых к участкам интегральной функции, находящихся в области ретикулума клетки, с нормой и крайними значениями параметра степени энергизации клетки. Изобретение обеспечивает увеличение информативности изображений клетки путем введения новых параметров. Один из таких параметров, имеющих высокий диагностический потенциал, может быть связан с состоянием ретикулума и рефрактерностью митохондрий, где происходит синтез молекулы АТФ, которая является единственным и универсальным источником энергии для процессов в клетках. 12 ил., 2 табл.

Группа изобретений относится к области медицины и может быть использована для определения концентрации аналита в образце. Способ определения концентрации анализируемого вещества в биологическом образце содержит этапы, на которых: генерируют выходной сигнал в ответ на реакцию окисления/восстановления анализируемого вещества в биологическом образце; генерируют вторичный выходной сигнал из биологического образца от дополнительного электрода в ответ на содержание гематокрита в образце; определяют по меньшей мере одну индексную функцию, зависящую от множества параметров ошибки и определяют концентрацию анализируемого вещества по меньшей мере по одному выходному сигналу и уравнению компенсации наклона, зависящему от индексной функции, причем уравнение компенсации наклона включает в себя опорную корреляцию и отклонение наклона. Группа изобретений относится также к системе биологического датчика для определения концентрации аналита в образце. Группа изобретений обеспечивает повышение точности анализа. 3 н. и 49 з.п. ф-лы, 7 ил., 2 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и может быть использовано для экспресс-диагностики резистентности и чувствительности к ацетилсалициловой кислоте (АСК). Для этого проводят забор крови у пациента до начала антитромбоцитарной терапии. В качестве антикоагулянта применяют 3,2% цитрата натрия, помещают 0,5 мл крови в опытную кювету, пропускают через образец крови короткий, порядка 10-5 с, импульс тока с последующей регистрацией функции спада поляризации образца, а затем выполняют Фурье-преобразование этой функции и рассчитывают параметры импеданс-годографов в диапазоне частот 0,1-125 кГц, используя диэлектрический Фурье-спектрометр. При значениях референтного интервала r0=4,518-4,551, x0=1,925-1,939, y0=-1,395--1,385 диагностируют чувствительность, а при значениях r0=4,504-4,517, х0=1,914-1,926, y0=-1,384--1,375 - резистентность к ацетилсалициловой кислоте. Изобретение позволяет быстро и достоверно осуществить диагностику резистентности к АСК у пациента до начала лечения, что предотвратит развитие нежелательных коронарных событий у больных ИБС. 2 ил., 2 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области медицины, в частности пульмонологии, и предназначено для скрининговой диагностики хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ) и бронхиальной астмы. Способ включает регистрацию выдыхаемого воздуха пациента и его анализ, для чего проводят регистрацию и анализ спектра поглощения выдыхаемого воздуха пациента, причем предварительно проводят измерения спектра поглощения выдыхаемого воздуха верифицированных групп пациентов с бронхолегочными заболеваниями, представляющими диагностический интерес, вычисляют средние значения квадрата расстояний Махаланобиса от спектра поглощения выдыхаемого воздуха каждого члена группы до спектров поглощения выдыхаемого воздуха остальных членов группы. Затем находят среднее значение от указанных средних значений и доверительный интервал. При значении в интервале от 1,28 до 2,29 диагностируют ХОБЛ, а при значении более 2,29 диагностируют бронхиальную астму. 5 табл., 2 пр.

Изобретение относится к медицине и предназначено для диагностики недифференцированной дисплазии соединительной ткани (нДСТ). Цель изобретения - создание удобного способа оценки риска развития недифференцированной дисплазии соединительной ткани, не требующего выполнения большого количества длительных и дорогостоящих диагностических исследований. Способ оценки риска развития недифференцированной дисплазии соединительной ткани включает определение концентраций оксипролина и ионов магния в суточной моче методом спектрофотометрии. Далее рассчитывают риск развития нДСТ по формуле: , где: Р - риск развития нДСТ, ОП - концентрация оксипролина в суточной моче, мкмоль/сут; Mg - концентрация магния в суточной моче, ммоль/сут; е - основание натурального логарифма. При Р≤15 риск развития нДСТ у пациента низкий; при значениях Р от 16 до 29 риск развития нДСТ у пациента средний; при Р от 30 до 49 риск развития нДСТ у пациента высокий; при Р≥50 риск развития нДСТ у пациента очень высокий.
Наверх