Способ моделирования церебрального сосудистого спазма при нетравматическом субарахноидальном кровоизлиянии in vivo



Способ моделирования церебрального сосудистого спазма при нетравматическом субарахноидальном кровоизлиянии in vivo
Способ моделирования церебрального сосудистого спазма при нетравматическом субарахноидальном кровоизлиянии in vivo
Способ моделирования церебрального сосудистого спазма при нетравматическом субарахноидальном кровоизлиянии in vivo
Способ моделирования церебрального сосудистого спазма при нетравматическом субарахноидальном кровоизлиянии in vivo

 


Владельцы патента RU 2572482:

Государственное бюджетное учреждение здравоохранения города Москвы Научно-исследовательский институт скорой помощи имени Н.В. Склифосовского Департамента здравоохранения г. Москвы (RU)

Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно нейрохирургии, патологической анатомии, и может быть использовано для изучения сосудистого спазма при нетравматических субарахноидальных кровоизлияниях. Способ включает введение в затылочную цистерну крысы свежей человеческой венозной крови. Причем перед введением выполняют пункцию или дренирование затылочной цистерны с выведением спинномозговой жидкости. После первого введения крови осуществляют повторное введение крови в затылочную цистерну через время, обеспечивающее постоянное присутствие крови с момента первого введения, необходимое для развития церебрального сосудистого спазма. Способ обеспечивает воспроизведение морфологических изменений интракраниальных сосудов, наиболее близких к таковым у человека, и возможность изучения сосудистой активности препаратов, специфичных к белкам крови человека. 8 з.п. ф-лы, 4 ил.

 

Область техники, к которой относится изобретение

Изобретение относится к области медицины, а именно нейрохирургии, патологической анатомии, и может быть использовано для изучения сосудистого спазма при нетравматических субарахноидальных кровоизлияниях в эксперименте и проведения исследований терапевтической эффективности препаратов для профилактики и лечения сосудистого спазма.

Уровень техники

Из уровня техники известен способ моделирования нетравматического субарахноидального кровоизлияния у крыс (Solomon R.A., Antunes J.L., Chen R.Y., Bland L., Chien S.: Decrease in cerebral blood flow in rat after experimental subarachnoid hemorrhage: a new animal model. Stroke 16:58-64, 1985). При данной методике авторы производили однократное пункционное введение свежей артериальной аутокрови в затылочную цистерну крысы и проводили последующую оценку церебральной перфузии в сроки до 2 часов.

Однако в известном способе производится однократное введение крови в затылочную цистерну, что позволяет наблюдать изменение церебрального кровотока в острую фазу спазма. В то же время при однократном способе введения изменения в отсроченном периоде эксперимента практически отсутствуют. Указанная модель не позволяет изучать терапевтическую эффективность препаратов, специфичных к белкам крови человека.

Из уровня техники известен также способ моделирования нетравматического субарахноидального кровоизлияния у крыс (Bederson J.B., Germano I.M., Guarino L.: Cortical blood flow and cerebral perfusion pressure in a new noncraniotomy model of subarachnoid hemorrhage in the rat. Stroke 26:1086-1092, 1995). При данной методике авторы осуществляли эндоваскулярную перфорацию внутренней сонной артерии у крысы и оценивали изменения церебрального кровотока в первые 24 часа от эксперимента.

Однако известный способ также не позволяет наблюдать отсроченные изменения сосудистого спазма и изучать терапевтическую эффективность препаратов, специфичных к белкам крови человека.

Одним из наиболее близких способов моделирования нетравматического субарахноидального кровоизлияния у крыс является метод двухкратного введения крови (Meguro Т., Clower B.R., Carpenter R., Parent A.D., Zhang J.H. Improved rat model for cerebral vasospasm studies. Neurol Res Oct 2001; 23(7):761-6). При данной методике авторы выполняли двухкратное введение свежей артериальной аутокрови в затылочную цистерну крысы с интервалом 48 часов между введениями и оценивали морфологические изменения интракраниальных сосудов в сроки до 7 суток.

Однако при всех перечисленных методиках невозможно апробировать профилактическое и лечебное воздействие препаратов, имеющих сродство к белкам крови человека, например, фибринолитическим препаратам группы рекомбинантной стафилокиназы, которые эффективны только у некоторых видов животных и человека, но неэффективны у крыс (Species Reactivity to Staphylokinase. Exp Biol Med (Maywood) June 1949 71:261-263, Lijnen H.R., De Cock F., Matsuo O. & Collen D. Comparative fibrinolytic and fibrinogenolytic properties of staphylokinase and streptokinase in plasma of different species in vitro. Fibrinolysis 6, 33-37 (1992)).

Раскрытие изобретения

Задачей изобретения является создание удобной, доступной биологической модели для изучения способов профилактики и лечения церебрального сосудистого спазма при нетравматических субарахноидальных кровоизлияниях с использованием препаратов, специфичных к белкам крови человека (например, препараты группы рекомбинантной стафилокиназы).

Техническим результатом, на достижение которого направлено заявленное изобретение, является воспроизведение морфологических изменений интракраниальных сосудов при сосудистом спазме у лабораторных белых крыс, наиболее близких к таковым у человека, обеспечивающих адекватное изучение терапевтической эффективности препаратов, специфичных к белкам крови человека.

Поставленная задача решается тем, что способ моделирования церебрального сосудистого спазма при нетравматическом субарахноидальном кровоизлиянии в эксперименте включает введение в затылочную цистерну крысы крови, при этом вводят свежую человеческую венозную кровь, причем перед введением выполняют пункцию или дренирование затылочной цистерны с выведением спинномозговой жидкости.

Пункцию и введение крови выполняют под контролем частоты и глубины дыхания животного. Выведение спинномозговой жидкости из субарахноидального пространства крысы осуществляют в объеме от 0,05 до 0,2 мл в течение 3-7 мин. Введение человеческой крови в затылочную цистерну осуществляют в объеме от 0,05 до 0,25 мл в течение 5-10 мин.

В одном из вариантов выполнения изобретения возможно повторное введение крови в затылочную цистерну через время, обеспечивающее постоянное присутствие крови с момента первого введения, необходимое для развития церебрального сосудистого спазма. Указанное время составляет 24-48 ч.

После введения крови выполняют послойное ушивание раны, включающее ушивание затылочной мембраны.

В одном из вариантов исполнения при введении крови в затылочную цистерну выполняют одновременную сенсибилизацию животного путем внутривенного введения человеческой крови в объеме, не приводящем к нарушению витальных функций у крысы. Указанный объем составляет 0,5-2 мл.

Перед введением крови выполняют гепаринизацию средств введения.

Для исключения агглютинации человеческих эритроцитов агглютининами крыс перед экспериментом у 10 произвольных животных была проведена оценка групповой принадлежности по системе АВО и резус-фактор с использованием цоликлонов и проведением пробы на индивидуальную совместимость со всеми группами человеческой крови. Помимо этого, перед каждым введением человеческой крови проводили пробу на индивидуальную совместимость. Агглютинации между сывороткой крысы и эритроцитами человека не наблюдали ни в одном случае, что позволяет предположить, что человеческие эритроциты не агглютинируют под воздействием плазмы крови крыс.

При сравнительной эффективности интрацистернального введения препаратов рекомбинантной стафилокиназы с последующим наружным дренированием цереброспинальной жидкости на модели с использованием свежей аутокрови у крыс нами были получены данные, говорящие об отсутствии фибринолитической активности как местно (в затылочной цистерне), так и системно (влияние на параметры гемостаза).

По предварительным данным интрацистернальное применение препаратов рекомбинантной стафилокиназы на модели введения человеческой крови в затылочную цистерну на 3-4-е сутки эксперимента с последующим наружным дренирование цереброспинальной жидкости в объеме, не приводящем к нарушению витальных функций крысы (0,3-1,5 мл спинномозговой жидкости в сутки), снижает выраженность морфологических изменений при сосудистом спазме как в стенке интракраниальных сосудов, так и в ткани мозга.

Краткое описание чертежей

Изобретение поясняется фотографиями изображения объекта исследования в эксперименте, где на фиг. 1 показана верификация САК: А - мозг интактного животного; Б - мозг изъят через 30 мин после введения 0,25 мл аутокрови в затылочную цистерну; на фиг. 2 - верхняя треть основной артерии (увеличение ×400), контроль, А - окраска гематоксилином и эозином, Б - окраска по Грамм-Вейгерту, на изображениях позициями обозначены: 1 - ядра эндотелиоцитов, 2 - ВЭМ, 3 - ГМК. Соответствует нормальному строению верхней трети основной артерии крысы; на фиг. 3 показана верхняя треть основной артерии на 5-е сутки после двухкратного введения крови (увеличение ×400), А - окраска гематоксилином и эозином, Б - окраска по Lie, на изображениях позициями обозначены: 1 - ядра эндотелиоцитов, 2 - ВЭМ, 3 - ГМК (имеются признаки вакуолизации цитоплазмы). Отмечается резкое сужение просвета сосуда, значительное утолщение стенки артерии, сближение ядер эндотелиоцитов. ВЭМ имеет выраженно извитые контуры, в цитоплазме ГМК - распространенная гидропическая дистрофия; на фиг. 4 представлено изображение верхних отделов моста крысы (окраска по Lie, увеличение ×1000), А - 3-и сутки после введения крови, Б - 7-е сутки после введения крови, на изображениях позициями обозначены: 4 - капилляры с сохраненным током крови (на фиг. А - полнокровные, на фиг. Б - со спавшимся просветом), 5 - зоны выраженного периваскулярного отека.

Осуществление изобретения

Ниже представлено подробное описание осуществления изобретения и результаты морфологических исследований полученной модели церебрального сосудистого спазма при двукратном введении в затылочную цистерну крысы свежей человеческой венозной крови. При этом данное подробное описание не ограничивает заявляемое изобретение, т.к. в эксперименте был получен заявленный результат и при однократном введении крови.

1. Анестезия

Обезболивание животных осуществляли по следующей методике.

Крысу помещали в замкнутую емкость, на дне которой уложена гигроскопичная вата, пропитанная диэтиловым эфиром. Через 1-2 мин крыса засыпала. После этого выполняли премедикацию для потенцирования основного наркоза: внутримышечно в область бедра инсулиновым шприцем вводили следующие препараты: дроперидол - 0,3 мг/кг массы тела (0,03 мл 0,25% раствора), димедрол 1,2 мг/кг массы тела (0,03 мл 1% раствора), атропин - 0,012 мг/кг массы тела (0,03 мл 0,1% раствора). Через 15 мин после премедикации в область бедра другой лапки крысы вводили следующие препараты: «золетил 100» - 24 мг/кг массы тела (0,06 мл раствора), ксилазин - 3,2 мг/кг массы тела (0,04 мл 2% раствора). Как правило, крыса засыпала в течение 5-15 мин. Оценку глубины анестезии проводили по выраженности корнеального рефлекса. При необходимости через 20 мин добавляли 0,02-0,04 мл «золетил 100».

2. Техника операции

Введение крови в затылочную цистерну (выполняли на 1-е и 2-е сутки эксперимента с интервалом между введениями 24 часа). Животное фиксировали на операционном столике и брили область операции. После обработки кожи растворами антисептиков выполняли срединный разрез от области затылочного возвышения до остистого отростка VI-VII шейного позвонков. Мышцы шеи для снижения кровоточивости и потенцирования наркоза инфильтрировали комбинированным местным анестетиком «Ультракаин ДС 1:200000» (артикаина гидрохлорид 40 мг/мл + эпинефрина гидрохлорид 6 мг/мл) в разведении с физиологическим раствором 1:5. Далее мышцы в месте их прикрепления к черепу отсекали и скелетировали чешую затылочной кости, атлантоокципитальную мембрану и дугу I шейного позвонка. Выполняли пункцию затылочной цистерны с выведением 0,05-0,2 мл спинномозговой жидкости в течение 3-7 мин под контролем частоты и глубины дыхания животного. После этого в затылочную цистерну в течение 5-10 мин вводили 0,05-0,2 мл свежей человеческой венозной крови под контролем частоты и глубины дыхания животного. Для того чтобы большая часть крови скапливалась в области базальных цистерн, животное оставляли на 20 мин с опущенным на 20°-30° головным концом. После этого рану послойно ушивали. При необходимости компенсации кровопотери подкожно вводили смесь 5% раствора глюкозы и 0,9% раствора хлорида натрия объемом до 5-10 мл.

3. Оценка неврологического статуса

Оценку неврологического статуса проводили 1 раз в сутки в течение 7 дней после введения крови по методике, предложенной J.B. Bederson с соавт. (1986) [Bederson J.B., Pitts L.H., Tsuji M., Nishimura M.C., Davis R.L., Bartkowski H.: Rat middle cerebral artery occlusion: Evaluation of the model and development of a neurologic examination. Stroke 17:472-476, 1986] по 4-балльной шкале:

0 баллов - отсутствие неврологических нарушений

1 балл - крыса малоподвижна, вяло реагирует на прикосновение. Очаговая неврологическая симптоматика отсутствует

2 балла - имеется изолированный парез одной конечности (при приподнимании животного за хвост активность движений в одной из конечностей снижена)

3 балла - имеется односторонний гемипарез (при подталкивании животного в бок оно заваливается на пораженную сторону)

4 балла - имеется односторонняя гемиплегия (животное не может активно передвигаться, при движении вперед отмечается выраженное отклонение в пораженную сторону - движение по кругу).

По нашим данным изменения неврологического статуса наблюдались в течение первых суток после любого вмешательства под наркозом до 1 балла и не были связаны с проявлением сосудистого спазма

4. Морфологическое исследование

Перед изъятием головного мозга животное усыпляли смесью препаратов «золетил 100» (0,4 мл), ксилазина гидрохлорид (0,3 мл 2% р-ра) и рокурония бромида (0,1 мл 1% р-ра). По имевшемуся разрезу рану вскрывали. Выполняли декапитацию на уровне III-IV шейного позвонков, вскрывали черепную коробку и, по возможности не травмируя твердую и мягкую мозговую оболочки, извлекали препарат головного мозга вместе с верхнешейным отделом спинного мозга. Далее препарат помещали на 24 ч в 5% р-р формалина и заливали в парафин. Для морфологического исследования использовали срезы на уровне верхней трети базилярной артерии.

Окраску парафиновых срезов осуществляли следующими способами:

- Обзорная: гематоксилином и эозином,

- Для оценки состояния эластических волокон стенки артерии: по Грамм-Вейгерту (определение морфологического типа стенки базилярной артерии),

- Для оценки состояния сократительного аппарата гладкомышечных клеток (миофибрилл): по Lie.

Описание микропрепаратов проводили на светооптическом микроскопе Leica DM 1000 при увеличении 400-1000 раз, микрофотосъемку выполняли на цифровой камере Leica ЕС 3.

Были получены прямые качественные признаки церебрального сосудистого спазма в виде характерных морфологических изменений интракраниальных сосудов и ишемических изменений ткани мозга.

При исследовании верхней трети базилярной артерии у крыс после двухкратного введения аутокрови в затылочную цистерну были выявлены следующие изменения:

4-е сутки - морфологически прослеживались признаки умеренного спадения просвета сосуда без значительного утолщения стенки основной артерии и изменений внутренней эластической мембраны (ВЭМ). При окрасках по Lie и MSB выявлялись признаки гиперконтрактурных изменений гладкомышечных клеток (ГМК).

5-е сутки - отмечали утолщение стенки сосуда, подчеркнутую извитость эластической мембраны с углублением ее складок, сужением межскладочных промежутков, сближением эндотелиоцитов с выступающими в просвет ядрами, ориентированными по верхушкам сладок ВЭМ. При гистохимической реакции (окраска по Lie) в цитоплазме ГМК появлялись признаки дистрофических изменений от очаговой до распространенной гидропической дистрофии цитоплазмы в виде перинуклеарной и внутриклеточной вакуолизации, а также признаки внутриклеточной фуксинофилии цитоплазмы, указывающие на гиперконтрактурные изменения сократительных миофибрилл.

6-е и 7-е сутки - отмечали умеренное спадение просвета сосуда с распространенными дистрофическими изменениями цитоплазмы ГМК, как проявления остаточных признаков нарушения сократительной способности миоцитов при разрешении спазма.

Помимо этого, были выявлены признаки нарушения капиллярного кровотока в ткани мозга крысы, что является прямым признаком ишемии мозга на микроциркуляторном уровне.

Предложенный способ может быть использован для апробации методов профилактики и лечения церебрального сосудистого спазма в эксперименте, в том числе при интратекальном введении препаратов и использовании препаратов, имеющих сродство к белкам крови человека.

1. Способ моделирования церебрального сосудистого спазма при нетравматическом субарахноидальном кровоизлиянии в эксперименте для изучения сосудистой активности препаратов, специфичных к белкам крови человека, включающий введение в затылочную цистерну крысы свежей крови, отличающийся тем, что вводят свежую человеческую венозную кровь, причем перед введением выполняют пункцию или дренирование затылочной цистерны с выведением спинномозговой жидкости, после первого введения крови осуществляют повторное введение крови в затылочную цистерну через время, обеспечивающее постоянное присутствие крови с момента первого введения, необходимое для развития церебрального сосудистого спазма.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что пункцию или дренирование затылочной цистерны и введение крови выполняют под контролем частоты и глубины дыхания животного.

3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что выведение спинномозговой жидкости из субарахноидального пространства крысы осуществляют в объеме от 0,05 до 0,2 мл в течение 3-7 мин.

4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что введение человеческой крови в затылочную цистерну осуществляют в объеме от 0,05 до 0,25 мл в течение 5-10 мин.

5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что повторное введение крови осуществляют через 24-48 ч после первого введения.

6. Способ по п. 1, отличающийся тем, что после введения крови выполняют послойное ушивание раны, включающее ушивание затылочной мембраны.

7. Способ по п. 1, отличающийся тем, что при введении крови в затылочную цистерну выполняют одновременную сенсибилизацию животного путем внутривенного введения человеческой крови в объеме, не приводящем к нарушению витальных функций у крысы.

8. Способ по п. 7, отличающийся тем, что указанный объем составляет 0,5-2 мл.

9. Способ по п. 1, отличающийся тем, что перед введением крови выполняют гепаринизацию средств введения.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной гинекологии и патофизиологии репродуктивной системы, и может быть использовано для моделирования и последующего изучения женского ановуляторного бесплодия.

Изобретение относится к медицине, биологии, ветеринарии, фармакологии и касается оценки биосовместимости скаффолдов в эксперименте. Проводят подкожную имплантацию скаффолда в межлопаточную область крысы.

Изобретение относится к экспериментальной медицине, эндокринной хирургии и онкологии, предназначено для установления возможных вариантов лимфо- и ангиоархитектоники щитовидной железы (ЩЖ) и может быть использовано для экспресс-диагностики вариантов метастазирования и выбора объема резекции при раке ЩЖ.

Изобретение относится к медицине, экспериментальной хирургии. Цирроз печени у кроликов воспроизводят путем подкожного введения тетрахлоруглерода.
Изобретение относится к области экспериментальной медицины, в частности к способу моделирования тромбообразования у мышей для изучения эффективности препаратов антикоагулянта.

Изобретение относится к медицине, в частности к офтальмологии, и предназначено для моделирования пролиферативной витреоретинопатии (ПВР). Для этого в оба глаза кролика осуществляют однократное интравитреальное введение 2000 Ε Интерлейкина 1-b в объеме 0.1 мл.

Изобретение относится к экспериментальной медицине, результаты которого могут быть использованы в области восстановительной медицины, геронтологии и гериатрии. В эксперименте используют белых беспородных крыс-самок предстарческого возраста, весом 290,7±31,6 г, содержащихся в стандартных условиях вивария.

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии, и может быть использовано для коррекции эндотелиальной дисфункции при гипоэстрогенемии.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и касается моделирования отграниченного перитонита для изучения патогенеза и тестирования новых средств профилактики и лечения этого заболевания.

Изобретение относится к медицине, в частности к нейрохимии, патофизиологии, неврологии и психиатрии, и касается выявления противосудорожного действия цитиколина.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной биологии, и может быть использовано для моделирования экспериментального амилоидоза у животных. Для этого проводят введение молодой мыши через день подкожно в течение 30 дней эксперимента белкового препарата, содержащего нативный яичный альбумин, при этом в качестве белкового препарата, содержащего нативный яичный альбумин, вводят 30% раствор нативного яичного альбумина в цельном обезжиренном молоке по 0,5 мл. Изобретение обеспечивает образование амилоидных масс преимущественно в печени, селезенке, почках у молодых мышей с целью дальнейшего использования их в экспериментах, например, при апробации способов лечения амилоидоза. 13 ил., 1 табл.

Изобретение относится к области медицины. В качестве экспериментальных животных используют самок крыс породы Wistar в возрасте не менее 10 месяцев, которым выполняют тотальную паратиреоидэктомию с одномоментной резекцией ткани щитовидной железы вглубь на расстояние 0,1-0,2 мм от капсул околощитовидных желез. На раневую поверхность щитовидной железы наносят медицинский клей «Сульфакрилат». Способ позволяет получить стабильную, стандартизированную со 100% воспроизводимостью модель гипокальциемии при отсутствии летальности экспериментальных животных. 6 ил., 2 табл., 1 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии, и может быть использовано для снижения нейротоксичности изониазида в эксперименте. Для этого в процессе лечения изониазидом дополнительно вводят витамин В6 и таурин в соотношении изониазид:витамин В6:таурин - 200:1,3-3,9:255. Изобретение обеспечивает профилактику и лечение нейротоксических реакций на противотуберкулезные препараты при разработке новых способов лечения туберкулеза в эксперименте. 3 табл.

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальному моделированию псориаза, и может найти использование при изучении механизмов патогенеза и разработки лечения этого заболевания. Моделирование псориаза проводят путем перорального выпаивания крыс в течение 21 суток культурой бактерий β-гемолитического стрептококка. Используют взвесь культуры в воде. Содержание бактерий составляет 105-109 КОЕ/мл. Вводят по 1 мл взвеси 1 раз в день. Способ обеспечивает создание адекватной модели псориаза при исключении летальности экспериментальных животных. 6 ил., 1 табл.

Изобретение относится к медицине и касается лечения головокружения или укачивания. Для этого проводят выбор на окуляре зон коррекции, определенных как угловые зоны в поле зрения субъекта. Причем зона коррекции включает точку коррекции (i), определяемую двухмерной системой координат. Точка коррекции (i) представляет собой точку в полярной системе координат, включающей полярный угол (Ǿi) и радиальную координату (ri). Полярный угол включает угол против часовой стрелки от горизонтальной линии (HL), соединяющей левый оптический центр (LOC) и правый оптический центр (ROC) субъекта. Радиальная координата включает расстояние до указанной точки от LOC или от ROC. При этом указанная угловая зона включает в себя комбинацию полярных углов 045 из центра левого глаза субъекта и 135 из центра правого глаза субъекта и радиальной координаты 14. Затем располагают на очках корректирующий элемент, представляющий собой метку с определенной геометрической формой в указанной одной или более чем одной зоне коррекции. Указанное расположение включает закрепление, включение или изображение одного или более чем одного корректирующего элемента на очках. Обеспечивают субъекта указанными очками для ношения. Аналогичным образом дополнительно подбирают зоны коррекции для лечения состояний, сопровождающих головокружение или укачивание. Способ обеспечивает коррекцию указанных состояний без применения лекарственных средств. 11 з.п. ф-лы, 4 пр., 4 табл., 10 ил.
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной офтальмологии, и может быть использовано для моделирования транзиторной ишемии сетчатки. Моделирование осуществляют путем введения в глаз крысы раствора эндотелина-1 (ЭТ-1). Для этого выполняют вкол инсулиновой иглы размером 0,4×13 мм (27G) при развороте среза иглы к верхнему веку в область экватора глаза верхне-наружного квадранта конъюнктивы. Проводят иглу субконъюнктивально не менее чем на половину ее длины в направлении заднего полюса глаза. Вводят по игле 0, 2 мл 4·10-6 М раствора ЭТ-1 в фосфатном буфере, имеющем pH 7,4. Способ обеспечивает адекватную воспроизводимость транзиторной ишемии сетчатки в эксперименте без повреждений тканей глаза и при уменьшении дозы вводимого препарата. 2 пр.

Изобретение относится к экспериментальной медицине, общей токсикологии и нанотоксикологии и касается критериев диагностики токсического действия наночастиц серебра, инкапсулированных в природную полимерную матрицу арабиногалактана (АГ), на ткань головного мозга крыс в отдаленном периоде. Способ включает воздействие на животных опытной группы токсикантом путем внутрижелудочного введения водного раствора АГ с наночастицами серебра (нано-Ag-АГ) из расчета 100 мкг серебра на килограмм массы в 0,5 мл дистиллированной воды на протяжении 9 дней. Животным контрольной группы осуществляют внутрижелудочное введение 0,5 мл дистиллированной воды также на протяжении 9 дней. Через 6 месяцев проводят изготовление срезов тканей коры головного мозга животных обеих групп. Окрашивают их на антитела к белку caspase-3 и проводят обзорную микроскопию полученных препаратов. При этом подсчитывают количество патологически измененных нейронов без экспрессии каспазы 3, число патологически измененных нейронов с экспрессией каспазы 3, количество нормальных нейронов без экспрессии каспазы 3, количество нормальных нейронов с экспрессией каспазы 3, общее количество нейронов на единицу площади среза. Вычисляют отношения этих показателей на препаратах опытной группы к аналогичным показателям на препаратах контрольной группы. При увеличении числа патологически измененных нейронов без экспрессии каспазы 3 в 1,6 раза по отношению к контрольной группе, увеличении числа патологически измененных нейронов с экспрессией каспазы 3 в 2,7 раз по отношению к контрольной группе, снижении числа нормальных нейронов без экспрессии каспазы 3 в 0,6 раз по отношению к контрольной группе, увеличении числа нормальных нейронов с экспрессией каспазы 3 в 2 раза по отношению к контрольной группе, а также снижении общего числа нейронов на единицу площади в 0,5 раз по отношению к контрольной группе делают заключение о развитии патологического процесса с преобладанием повреждений нейронов по типу апоптоза в ткани головного мозга в отдаленном периоде воздействия нано-Ag-АГ. Способ повышает точность верификации токсической энцефалопатии, в т.ч. за счет регистрации функциональных изменений по морфометрической характеристике нейронов. 1 табл., 1 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии, и может быть использовано для обучения практическим умениям по препарированию твердых тканей зуба с использованием симуляторов. При работе на симуляторе "CDS-100" оценивают: составление плана лечения, включающего выбор вида препарирования, необходимого для заданного вида пломбировочных материалов, выбор скоростного режима препарирования, выбор вида ротационного инструмента бора; объем препарирования: в области «дна» полости, в вестибулярной оральной и апроксимальной поверхностях, угла и рельефа препарирования; осложнения при препарировании: вскрытии пульповой камеры, травме соседнего зуба и перегрева тканей зуба. Причем оценку практических умений проводят по критериям из «Системы оценки приобретенных практических умений с использованием Стоматологического 3D-симулятора CDS-100». При этом рассчитывают коэффициент практических умений. Фиксируют результат уровня практических умений по окончании цикла из пяти занятий. В зависимости от полученной величины коэффициента делают вывод о выживаемости навыков в полном объеме в течение последующего семестра. Способ позволяет повысить уровень выживаемости знаний и практических навыков за счет использования системы оценки уровня практический умений для симулятора «CDS-100». 2 табл.
Изобретение относится к медицине, а именно к ортопедии и травматологии, и может быть использовано для моделирования очага хронического остеомиелита. Для этого формируют костный дефект у подопытного животного с помещением в этот дефект носителя штамма патогенного микроорганизма. В качестве носителя используют лавсановую ткань, контаминированную штаммом патогенного микроорганизма путем выдерживания полоски лавсановой ткани в суспензии возбудителя 1.5 McF(1*10∧8 КОЭ). После размещения полоски в дефекте кости его герметизируют костным воском, рану послойно ушивают. Удаление полоски производят на 7-е сутки. Способ обеспечивает течение хронического остеомиелита, в т.ч. за счет полного удаления носителя штамма патогенного микроорганизма из раны с сохранением клинической и морфологической картины заболевания. 2 з.п. ф-лы, 1 пр.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для моделирования хронического дефекта костной ткани со склерозированной стенкой. Для этого на медиальной поверхности проксимального метаэпифиза большеберцовой кости под острым углом относительно ее поверхности круговыми движениями формируют несквозной дефект цилиндрической формы с округлым дном глубиной до противоположной кортикальной пластинки. После этого в сформированный дефект костной ткани до остывания вводят нагретый до температуры не менее 100°C бор диаметром, соответствующим диаметру сформированного дефекта. После этого замешивают костный цемент на основе полиметилметакрилата. Формируют из него пластичный шарик объемом, достаточным для плотного заполнения сформированного дефекта. Затем его вводят в сформированный дефект костной ткани до момента окончательной полимеризации цемента. После этого рану промывают и ушивают. На 90-е сутки цемент удаляют. Способ обеспечивает получение модели дефекта костной ткани, хорошо визуализирующегося на рентгенограммах, пригодной для изучения репаративного остеогенеза и реакции костной ткани на имплантацию остеозамещающих материалов. 3 ил.
Наверх