Способ оценки влияния цитомегаловирусной инфекции на активность nad-зависимой малатдегидрогеназы в синцитиотрофобласте ворсинок плаценты на третьем триместре беременности



Способ оценки влияния цитомегаловирусной инфекции на активность nad-зависимой малатдегидрогеназы в синцитиотрофобласте ворсинок плаценты на третьем триместре беременности
Способ оценки влияния цитомегаловирусной инфекции на активность nad-зависимой малатдегидрогеназы в синцитиотрофобласте ворсинок плаценты на третьем триместре беременности

Владельцы патента RU 2574937:

Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания" (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для выявления нарушения энергетического обмена в синцитиотрофобласте плаценты беременных при обострении цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре гестации. Для этого в периферической крови определяют титр антител к цитомегаловирусу, выполняют гистохимическую реакцию на NAD-зависимую малатдегидрогеназу и при титре антител класса G к цитомегаловирусу 1:1600 и снижении активности NAD-малатдегидрогеназы до 41,6±2,81 усл. ед. выявляют нарушения энергетического обмена в синцитиотрофобласте плаценты, отрицательно влияющего на формирование плода в период гестации. 2 ил.

 

1. Цель изобретения - выявить характер влияния цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре гестации на активность NAD-зависимой малатдегидрогеназы в синцитиотрофобласте плаценты, приводящей к нарушению энергетических процессов в фетоплацентарном барьере.

2. Изобретение относится к медицине, а именно к разработке гистохимического способа диагностики снижения активности одного из этапов цикла трикарбоновых кислот - NAD-зависимой малатдегидрогеназы, доказывающего нарушение процессов клеточного энергообмена в синцитиотрофобласте ворсинок плаценты при обострении цитомегаловирусной инфекции в третьем триместре беременности.

3. Раскрытие изобретения

Малатдегидрогеназа является ключевым ферментом цикла трикарбоновых кислот, катализирующим окислительно-восстановительную реакцию превращения малата в оксалоацетат [7, 8]. Цикл трикарбоновых кислот считается центральным метаболическим процессом, который объединяет углеводный, липидный и аминокислотный обмен. Благодаря ему происходит образование восстановительных эквивалентов, которые поступают в дыхательную цепь, при функционировании которой синтезируется АТФ. Особого внимания малатдегидрогеназа заслуживает как наиболее активный источник NADH и участник челночного цикла переноса восстановительных эквивалентов через мембраны митохондрий, непроницаемые для NADH.

Снижение активности этого фермента указывает на уменьшение интенсивности работы цикла трикарбоновых кислот и, соответственно, аэробных энергетических процессов [6] в плаценте, что, в свою очередь, влияет на рост и развитие плода.

4. Новая техническая задача

Определять уровень активности NAD-малатдегидрогеназы, свидетельствующий о характере течения цикла трикарбоновых кислот, при обострении цитомегаловирусной инфекции у беременных на третьем триместре гестации с целью диагностировать состояние фетоплацентарного барьера во время беременности, от чего зависит нормальное развитие плода.

5. В доступной литературе имеются упоминания о способе прогноза тяжести обострения атопической бронхиальной астмы по активности НАД-зависимой малатдегидрогеназы в лимфоцитах периферической крови [5], способе дифференциальной диагностики нарушений ритма сердца у детей [2] по активности НАД-зависимой малатдегидрогеназы в лимфоцитах периферической крови, способе определения активности малатдегидрогеназы в гомогенате биологических тканей [3]. Особенности функционирования NAD-зависимой малатдегидрогеназы изучаются при ишемии миокарда [4]. Все они выполняются биохимическими методами.

В отличие от вышеприведенных прототипов в данной работе имеются существенные отличия: 1. Объектом исследования является плацента. 2. Изменения активности NAD-зависимой малатдегидрогеназы происходят под влиянием обострения цитомегаловирусной инфекции во время беременности. 3. Оценка активности NAD-зависимой малатдегидрогеназы выполняется гистохимическим методом. Метод прост в исполнении, не требует дорогостоящих реактивов, обладает хорошей разрешающей способностью и может быть рекомендован в проведении научно-исследовательских работ и лабораторной диагностики.

6. Осуществление изобретения

6.1. Обследованы 25 беременных женщин 18-25 лет с обострением хронической цитомегаловирусной инфекции в третьем триместре гестации, контрольную группу составили 20 беременных женщин с хронической цитомегаловирусной инфекцией в латентной стадии. У беременных женщин симптоматически цитомегаловирусная инфекция проявлялась в виде острого респираторного заболевания, сопровождающегося ринофарингитом. Клинический диагноз (обострение хронической цитомегаловирусной инфекции) устанавливается по результатам комплексного исследования периферической крови на наличие ДНК цитомегаловируса (ЦМВ), JgM или увеличение титра антител JgG в парных сыворотках (в 4 раза и более) в динамике через 10 суток, а также индекса авидности (более 65%). Исследования проводят с учетом требований Хельсинской декларации Всемирной медицинской ассоциации «Этические принципы проведения научных исследований с участием человека» с поправками 2008 г. и правилами клинической практики в РФ, утвержденными приказом Министерства РФ №266 от 19.06.2003 г.

6.2. Верификацию ЦМВ, определение типоспецифических антител, индекса авидности осуществляют методами ИФА на спектрофотометре «Stat Fax-2100» с использованием тест-систем ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск), ДНК ЦМВ выявляют методами ПНР на аппарате ДТ-96 с использованием наборов НПО «ДНК-технология» (Москва).

6.3. Активность малатдегидрогеназы гистохимически определяют на криостатных срезах свежезамороженной нефиксированной ткани плаценты следующим методом. Метод основан на восстановлении соли тетразолия в формазан электронами, акцептируемыми от субстрата через кофермент НАД [1]. Субстратом служит 0,1 М раствор натриевой соли яблочной кислоты (Sigma). Инкубационный раствор готовится на основе 0,1М фосфатного буфера рН 7,2-7,4 с добавлением нитросинего тетразолия фирмы «ICN Biomedicals» (США) в конечной концентрации 5 мМоль, НАД+ фирмы «Applichem» (Германия) - 1 мМоль, в присутствии ионов Mg2+ (ОДМ MgCl2·6H2O).

Состав инкубационной среды:

- 0,1 М фосфатный буфер рН 7,2-7,4 - 1 мл;

- нитросиний тетразолий - 1 мг;

- НАД+ - 1 мг;

- MgCl2·6H2O - 2 мг;

- натриевая соль яблочной кислоты - 17,8 мг.

6.4. В 1 мл инкубационного раствора помещают свежеприготовленные срезы ткани. Инкубацию проводят при 37°C в течение 30 минут. По окончании инкубации срезы промывают дистиллированной водой, фиксируют в 10%-м нейтральном формалине при комнатной температуре, вновь промывают дистиллированной водой, подсушивают и заключают в глицерин-желатин. Контрольные срезы инкубировали в среде, содержащей вместо раствора малата натрия адекватное количество фосфатного буфера. Полученные гистологические препараты изучают цитофотометрическим компьютерным методом с помощью программы Scion (США) на цифровом микроскопе МТ (Япония).

6.5. Статистический анализ и обработка данных проводится с использованием пакета прикладных программ «Statistica 6.0». Характеристика вариационных рядов: средняя арифметическая (М), стандартная ошибка (m), коэффициент вариации 95%, доверительный интервал для средних значений М±m, где t определялось по таблице граничных значений критерия Стьюдента при доверительном уровне 95% и числе степеней свободы F=n1+n2-2. Для определения достоверности различий используется непарный параметрический критерий Стьюдента. Принимаются во внимание р<0,05; 0,01; 0,001. Для определения достоверности различий в случае негауссовых распределений - непараметрические критерии Колмогорова-Смирнова и Манна-Уитни.

7. Полученные данные

В процессе исследования получены следующие результаты. Гистохимическая реакция выявления активности NAD-зависимой малатдегидрогеназы является достаточно специфичной, так как в отсутствие субстрата в инкубационной среде выпадение гранул формазана в тканевых структурах не наблюдается. На гистохимических препаратах плаценты женщин, перенесших обострение хронической цитомегаловирусной инфекции в третьем триместре гестации, при регистрации роста титра антител класса G к цитомегаловирусу до 1:1600 отмечается снижение активности NAD-зависимой малатдегидрогеназы до 41,6±2,81 усл. ед. (контроль - 65,4±2,98 усл. ед.) (фигура 1, 2).

Таким образом, снижение активности малатдегидрогеназы при нарастании титра антител класса G к цитомегаловирусу 1:1600 указывает на нарушение энергообмена в синцитиотрофобласте плаценты, влияющего на рост и развитие плода.

На фигуре 2 изображена гистохимическая реакция на NAD-малатдегидрогеназу в плаценте женщины контрольной группы (не болевшей на всем протяжении гестации). Интенсивность гистохимической реакции - 65,4±2,98 усл. ед. Увеличение - 10×100.

На фигуре 1 изображена гистохимическая реакция на NAD-малатдегидрогеназу в плаценте женщины, перенесшей на третьем триместре гестации обострение цитомегаловирусной инфекции с титром антител класса G 1:1600. Отмечается снижение активности гистохимической реакции до 41,6±2,81 усл. ед. Увеличение - 10×100.

Литература

1. Лойда З., Госсрау Р., Шиблер Т. Гистохимия ферментов. Лабораторные методы: пер. с англ. М.: Мир, 1982, 272 с.

2. Мякишев Е.В., Савченко А.А., Манчук В.Т. Способ дифференциальной диагностики нарушений ритма сердца у детей. Патент №2270448 РФ. Опубл. 20.02.2006. Бюл. №5.

3. Пахомова В.А., Крюкова Г.И., Козлянина Н.П. Способ определения активности малатдегидрогеназы в биологических тканях. Патент А.С. 930122 СССР. МКИ G01 33/48. Опубл. 23.05.82. Бюл. №19. 2 с.

4. Сафонова О.А., Попова Т.Н., Артюхов В.Г., Матасова Л.В. Особенности функционирования цитоплазматической NAD-малатдегидрогеназы из миокарда крысы в условиях ишемии // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2005. №7. С. 31-34.

5. Собко Е.А., Булыгин Г.В., Камзалакова Н.И. Способ прогноза тяжести обострения атопической бронхиальной астмы. Патент №2190217 РФ. Опубл. 27.09.2002.

6. Daniš P., Farkas R. Hormone-dependent and hormone-independent control of metabolic and developmental functions of malate dehydrogenase - review // Endocrine regulations. 2009. Vol. 43. 39-52.

7. Minárik P., Tomaskova N., Kollárová M., Antalík M. Malate dehydrogenases-structure and function // Gen Physiol. Biophys. 2002. Vol. 21, №3. P. 257-265.

8. Musrati R.A., Kollárová M., Mernik N., Mikulásová D. Malate dehydrogenase: distribution, function and properties // Gen Physiol. Biophys. 1998. Vol. 17, №3. P. 193-210.

Способ выявления нарушения энергетического обмена в синцитиотрофобласте плаценты беременных при обострении цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре гестации, включающий определение в периферической крови титра антител к цитомегаловирусу, выполнение гистохимической реакции на NAD-зависимую малатдегидрогеназу, и при титре антител класса G к цитомегаловирусу 1:1600, снижении активности NAD-малатдегидрогеназы до 41,6±2,81 усл. ед. выявляют нарушение энергетического обмена в синцитиотрофобласте плаценты, отрицательно влияющее на формирование плода в период гестации.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области медицины, в частности к кардиологии, и предназначено для оценки риска неблагоприятных сердечно-сосудистых событий у больных с клиническими проявлениями атеросклероза.

Изобретение относится к области медицины, а более конкретно к медицинской лабораторной диагностике, и описывает способ экспресс-диагностики женского эндокринного бесплодия.
Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ диагностики синдрома поликистозных яичников (СПКЯ) у подростков в возрасте от 14 до 17 лет включительно с помощью измерения соотношения 2-ОНЭ1/16α-ОНЭ1 в моче, отличающийся тем, что проводят количественное определение метаболитов эстрогенов 2-гидроксиэстрона и 16α-гидроксиэстрона в моче in vitro, вычисляют их соотношение и сравнивают полученные значения с установленными нормативами для здоровых сверстниц, при значении 0,71±0,03 диагностируют СПКЯ.

Изобретение относится к области медицины, а именно кардиологии, эндокринологии, и может быть использовано для прогнозирования неблагоприятного исхода в течение двенадцати месяцев у больных после эпизода острого коронарного синдрома с сопутствующим сахарным диабетом 2 типа.

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ ранней диагностики эндогенной интоксикации путем расчета раннего интегрального индекса интоксикации (РИИ), отличающийся тем, что РИИ для мужчин рассчитывается по формуле: а РИИ для женщин рассчитывается по формуле: где Гомоцист.
Изобретение относится к медицине и предназначено для иммунодиагностики заболеваний, вызванных Helicobacter pylori-инфекцией у лиц с аллергическими заболеваниями. Определяют в сыворотке крови slgE к Helicobacter pylori методом иммуноферментного анализа.
Изобретение относится к медицине, а именно к урологии, и может быть использовано для лечения асимптоматической бактериоспермии. Для этого пациенту назначают Уро-ваксом по 1 капсуле 2 раза в день перорально в течение 1 месяца при бактериоспермии в титре более 103, а при титре 103 и менее - по 1 капсуле через день.
Изобретение относится к медицине, а именно к онкогематологии, и может быть использовано для прогноза развития инфекционных осложнений у больных миеломной болезнью.
Изобретение относится к медицине, в частности к стоматологии и иммунологии, и может быть использовано для диагностирования и прогнозирования стоматита у пациентов с лейкозами.

Изобретение относится к медицине. Изобретение представляет способ прогнозирования прогрессии легкой цервикальной интраэпителиальной неоплазии у женщин юного и первого периода зрелого возраста, включающий забор исследуемого материала путем соскоба из шейки матки и его цитологический анализ.

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для диагностики пароксизмальной ночной гемоглобинурии. Для этого окрашивают исследуемый образец крови моноклональными антителами CD235a (FITC)/ CD59(PE)/CD71 (АРС). Наличие ПНГ-клона среди эритроцитов и ретикулоцитов оценивают по отсутствию защитного белка CD59 на мембране ретикулоцитов, выделенных по гейту CD235a - панэритроцитарному маркеру и CD71- рецептору к трансферрину. Для оценки ПНГ-клона среди ретикулоцитов в гейте CD71+ собирают не менее 20000 событий, в зависимости от гейта CD71+ строят график FSC(log) vs SSC(log), на котором с помощью дополнительного гейта CD71str выделяют ретикулоциты, очищая таким образом популяцию ретикулоцитов от дебриса и дуплетов методом последовательного гейтирования. При наличии 100% положительных по CD59 ретикулоцитов судят об отсутствии ПНГ-клона и диагностируют отсутствие заболевания пароксизмальной ночной гемоглобинурии. При выявлении у пациента с клиническими симптомами негативных CD59- ретикулоцитов и значении полученных показателей более 1% дают диагностическое заключение о наличии ПНГ-клона и для подтверждения диагностики пароксизмальной ночной гемоглобинурии рекомендуют дополнительное исследование по международному стандартизованному протоколу. При выявлении негативных по CD59-ретикулоцитов и значении полученных показателей 0,1-1% судят о наличии минорного ПНГ-клона и рекомендуют повторное определение ПНГ-клона через 6 мес на предмет увеличения его значения и развития пароксизмальной ночной гемоглобинурии, и при подтверждении такого размера клона диагностируют субклиническую форму пароксизмальной ночной гемоглобинурии без клинических признаков. Использование многопараметрического гейтирования CD71+ клеток позволяет добиться исключения из анализа дебриса, дублетов и от неспецифически связавшихся моноклональных антител. 1 ил.

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу диагностики острого лимфобластного лейкоза у пациента, включающий выявление признаков лейкоза, тестирование клеток крови на лейкоз, инкубирование клеток крови фактором, идуцирующим лейкоз, с тем, чтобы индуцировать экспрессию клеточных поверхностных маркеров, которые являются признаком лейкоза, где фактор, индуцирующий лейкоз - это супернатант Aspergillus flavus, EBV-инфицированный CCL87 супернатант, очищенная EBV культура или их комбинации. Тестирование клеток крови на клеточные поверхностные маркеры, где уровень клеточных поверхностных маркеров является признаком лейкоза или тестирование плазмы крови на лейкоз. Инкубирование фактора, индуцирующего лейкоз, на планшете c индуцирующим лейкоз фактором, инкубирование плазмы крови индуцирующим лейкоз фактором. Проведение иммунносорбентного анализа плазмы крови и определение IgG иммунореактивности в биологических образцах, где реактивность по отношению IgG является показателем лейкоза. Способ введения индуцирующего лейкоз фактора в мононуклеарные клетки. Использование заявленных способов позволяет эффективно диагностировать и выявлять острый лимфобластный лейкоз у пациентов. 2 н. и 12 з.п. ф-лы, 24 ил., 4 пр.

Изобретение относится к области вирусологии и касается штамма вируса африканской чумы свиней. Представленный штамм вируса африканской чумы свиней 8-го серотипа, семейства Asfarviridae, род Asfivirus, адаптирован к перевиваемой культуре клеток COS-1 и депонирован в Коллекции микроорганизмов ГНУ ВНИИВВиМ Россельхозакадемии под №.3096. Изобретение может быть использовано для разработки диагностических препаратов и проведения вирусологических, молекулярно-генетических исследований. 2 ил., 1 табл., 2 пр.
Изобретение касается способа выявления пациента с риском развития расстройства щитовидной железы в результате лечения в режиме, который истощает лимфоциты. Способ включает определение до лечения наличия антител, направленных против пероксидазы щитовидной железы или микросом щитовидной железы, у пациента. При наличии у пациента данных антител устанавливают, что пациент обладает повышенным риском развития расстройства щитовидной железы. Также изобретение касается способа лечения пациента, страдающего от иммуноопосредованных заболеваний, агентом который истощает лимфоциты, где этот способ включает: (1) идентификацию, имеет ли пациент риск развития расстройства щитовидной железы при лечении, посредством обнаружения антител, направленных против пероксидазы щитовидной железы или микросом щитовидной железы в биологическом образце, полученном от пациента до лечения, агентом, который истощает лимфоциты, где этот пациент находится в группе риска в отношении развития заболевания щитовидной железы, если биологический образец оказывается положительным по указанным антителам; (2) (i) введение агента пациенту, если пациент не имеет риска развития расстройства щитовидной железы после лечения; или (ii) введение агента пациенту, если пациент имеет риск развития расстройства щитовидной железы после лечения, и мониторинг увеличения риска развития щитовидной железы. 2 н. и 20 з.п. ф-лы, 2 пр., 2 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к способу диагностики in vitro повышенной чувствительности к псевдоаллергенам и подбору противоаллергических препаратов. Для этого формируют образцы, содержащие 0,95-1,05×106 лейкоцитов, и доводят их раствором Хенкса до объема 0,69 мл с получением проб крови. Тестируемый препарат добавляют в количестве 0,01 мл в полученные пробы крови, и их инкубируют при постоянном перемешивании в течение 45 минут при 37°C. При тестировании смеси препарата псевдоаллергена с противоаллергическим препаратом сначала в пробы крови вводят противоаллергический препарат, после чего инкубируют в течение 10 минут при 37°C при постоянном перемешивании. Одну часть полученных проб используют в качестве тестируемых, для чего в пробы вводят тестируемый препарат псевдоаллергена, а другую часть - в качестве контрольных, вводя разводящую жидкость для псевдоаллергена, и осуществляют повторное инкубирование в течение 45 минут при 37°C. В инкубированные пробы раздельно вводят активаторы люминол и люцегинин в количестве 2 мМ и хемилюминометром измеряют уровень спонтанной ХЛ для указанных активаторов, после чего в те же пробы вводят стимулятор свечения - сульфат бария в количестве 2 мг/мл, и регистрируют уровень стимулированной ХЛ также для указанных активаторов. Далее рассчитывают показатели для спонтанной и стимулированной люминол-зависимой и люцигенин-зависимой ХЛ для тестируемого и контрольного препаратов по формуле ИП=Sпa/Sк, где: Sпa; Sк - площадь под кривыми временной зависимости уровня спонтанной и стимулированной ХЛ для тестируемого и контрольного препаратов, соответственно. При этом повышенную чувствительность к псевдоаллергену диагностируют при значениях индекса ИП для люминол-зависимой и люцигенин-зависимой ХЛ ниже аналогичных значений ИП у здоровых доноров. Для подбора противоаллергических препаратов из перечня тавегил, зантак и интал рассчитывают индекс ИП*=Sxл опыт/Sхл контр; где: Sxл опыт - площадь под кривой временной зависимости уровня люминол-зависимой ХЛ пробы смеси псевдоаллергена с противоаллергическим препаратом; Sxл контр - то же, для контрольной пробы с противоаллергическим препаратом. Возможность назначения в качестве противоаллергического диагностируют для препарата тавегил при показателе ИП* выше 1,09 в пробах с метамизолом натрия; ИП* выше 1,0 в пробах с салицилатом натрия и ИП* выше 1,57 в пробах с диклофенаком. Для препарата зантак - при показателе ИП* выше 1,04 в пробах с метамизолом натрия, ИП* выше 0,99 в пробах с салицилатом натрия и ИП* выше 1,38 в пробах с диклофенаком. Для препарата интал - при показателе ИП* выше 1,08 в пробах с метамизолом натрия, ИП* выше 0,98 в пробах с салицилатом натрия и ИП* выше 1,51 в пробах с диклофенаком. Использование данного способа позволяет проводить индивидуальный подбор противоаллергических препаратов для лечения непереносимости НПВП. 6 з.п. ф-лы, 1 пр., 3 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно офтальмологии, и может быть использовано для диагностики стационарной миопии высокой степени. Для этого при хирургии выделяют фрагмент теноновой капсулы, который измельчают и замораживают в парах жидкого азота до -180°С. Для оценки на проточном цитофлюориметре распределения CD-маркеров на поверхности клеток теноновой капсулы замороженный материал размораживают в парах азота, переносят в центрифужную пробирку, отмывают физраствором и центрифугируют. Далее удаляют супернатант и отмывают второй раз физраствором, а затем добавляют к осадку физраствор и полученную тканевую суспензию измельчают с выделением клеточных элементов теноновой капсулы. В полученной суспензии определяют CD-маркеры и при превышении содержания CD49f+, CD49f+HLADR+, CD146+CD54-HLADR+, CD249+, CD45+CD14+HLADR+ клеток и снижения содержания CD45-CD14-CD44+, CD45-CD14-CD44+CD80+, CD207+, CD146+, CD146+CD54+HLADR-, CD146+CD34+ клеток диагностируют стационарную миопию высокой степени. Использование данного способа позволяет с помощью определения субпопуляций клеток теноновой капсулы диагностировать стационарную миопию высокой степени с прижизненным определением морфофункциональных характеристик соединительно-тканных оболочек глазного яблока. 1 табл.

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к способу проведения иммунохроматографического анализа. Способ включает регистрацию окрашенных коллоидным маркером специфических комплексов антиген-антитело на поверхности рабочей мембраны. Используют обратимую иммобилизацию иммунореагентов в аналитических зонах рабочей мембраны, для чего иммуноспецифические реагенты конъюгируют с магнитными наноразмерными носителями и удерживают в аналитических зонах наложением магнитного поля, что дает возможность снять ограничения по иммобилизации реагентов на рабочих мембранах и проводить специфическую реакцию вне тест-полоски. Предложенное изобретение позволяет обеспечить наилучшее детектирование и оценку результата, а также повысить чувствительность метода. 2 ил., 1 табл., 1 пр.
Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ прогнозирования раннего токсикоза тяжелой степени, включающий определение в крови беременных женщин концентрации лептина и фактора роста плаценты (ФРП), отличающийся тем, что дополнительно производят определение значения максимальной амплитуды агрегации тромбоцитов (МААТ), содержания лимфоцитов CD95+ (Л CD95+), уровня общего IgE и концентрации C-реактивного белка (СРБ), и при значении этих показателей в сроки 6-8 недель и 9-12 недель беременности соответственно: концентрации лептина (нг/мл) - 18,9±2,8 и 23,4±3,2; концентрации ФРП (пг/мл) - 55±4,1 и 91±6,2; значении МААТ (%) - 42,6±1,4 и 45,1±1,5; содержании Л CD95+ (%) - 44,2±3,5 и 49,7±3,8; уровня общего IgE (пг/мл) - 295±19 и 322±16; концентрации СРБ (мкг/мл) - 96±4,2 и 108±5,3 прогнозируют ранний токсикоз тяжелой степени. Осуществление изобретения обеспечивает повышение точности прогнозирования раннего токсикоза тяжелой степени. 2 пр.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к биотехнологии, и может быть использована для выявления in vitro антитела, обладающего эффекторной функцией. Для этого смешивают естественные клетки-киллеры и опухолевые клетки, добавляют примерно по 104 клеток на 200 мкл в лунки многолуночного планшета. Затем проводят центрифугирование многолуночного планшета и тем самым индукцируют образования трехмерного сфероида. Добавляют каждого из полученных антител в индивидуальную лунку многолуночного планшета и инкубируют в течение промежутка времени, составляющего от примерно 20 до примерно 72 ч. Анализируют клетки в лунках многолуночного планшета с помощью клеточного сортера с возбуждением флуоресценции и тем самым оценивают эффекторную функцию антитела. Выявляют антитела, обладающие эффекторной функцией, при применении которого обнаружено, что соотношение мертвых к жизнеспособным клеткам превышает 1. Группа изобретений относится также к применению трехмерного сфероида или агрегата, который содержит опухолевые клетки и естественные клетки-киллеры, для оценки эффекторной функции комбинации антител. 3 н. и 9 з.п. ф-лы, 7 ил., 5 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной биологии, экологии, токсикологии, и касается диагностики клеточного иммунодефицита у экспериментальных животных в условиях экспозиции стронцием. Для этого создают экспериментальную модель стронциевого иммунодефицита путем внутрижелудочного введения в течение 45 суток экспериментальному животному водного раствора хлорида стронция преимущественно концентрацией 10 мг/л, из расчета 1 мг/кг веса животного. Затем производят забор у этого животного пробы крови и последующее извлечение селезенки, извлекают иммунокомпетентные клетки из крови и клетки-спленоциты из гомогенизированного материала селезенки и определяют на мембранах указанных клеток уровень экспрессии CD62L+. Рассчитывают критериальный коэффициент экспрессии, равный отношению CD62L+ кровь/CD62L+ селезенка, и при его значении, равном 8 и менее, диагностируют клеточный иммунодефицит у экспериментальных животных в условиях экспозиции стронцием. Способ обеспечивает возможность изучения патогенетических механизмов токсического действия стронция на иммунную систему. 1 з.п. ф-лы, 1 табл., 2 пр.
© Патентный поиск, поиск патентов на изобретения - FindPatent.RU 2012-2024
Политика конфиденциальности 2016-02-10 2016-02-10T11:36:43
Наверх