Соединения, композиции и способы защиты здоровья головного мозга при нейродегенеративных расстройствах

Настоящее изобретение раскрывает способ лечения или предотвращения заболевания или болезненного состояния, выбранного из группы, состоящей из когнитивных расстройств, нейродегенеративных расстройств, связанных с амилоидозом состояний и болезни Альцгеймера, включающий этап введения нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества соединения, выбранного из группы, состоящей из Пуникалина (Punicalin) и Пуникалагина (Punicalagin). Изобретение эффективно в лечении или предотвращении когнитивных расстройств и нейродегенеративных расстройств, связанных с амилоидозом состояний и болезни Альцгеймера. 16 з.п. ф-лы, 31 ил., 6 пр.

 

РОДСТВЕННАЯ ЗАЯВКА

Настоящая заявка испрашивает приоритет на основании предварительной заявки на патент США 61/228374, поданной 24 июля 2009 года, содержание которой включено в настоящее описание посредством ссылки.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Нейродегенеративные расстройства и вопросы здоровья головного мозга принадлежат к числу основных назревающих проблем в области здравоохранения, с которыми сталкивается наше стареющее общество. Болезнь Альцгеймера (БА), безусловно, представляет собой наиболее распространенное из нейродегенеративных расстройств. Известно, что некоторые возрастные патологии, такие как болезнь Паркинсона, болезнь Хантингтона и боковой амиотрофический склероз (БАС), имеют некоторую схожесть по своей патофизиологии с болезнью Альцгеймера, включая нарушенную укладку (фолдинг) белка и окислительный стресс. Sayre, L.M., G.Perry, et al. (2008). "Oxidative stress and neurotoxicity." Chem Res Toxicol 21(1): 172-88.

Помимо селективной дегенерации нейронов, патология при БА характеризуется наличием двух ключевых видов поражений головного мозга: внеклеточных сенильных бляшек (SP) и внутринейронных нейрофибриллярных клубков (NFT). SP содержат β-амилоидные пептиды (Аβ), главным образом Аβ (1-42); тогда как NFT в основном состоят из ассоциированного с микротрубочками белка Tau в форме парных спиральных филаментов. Патофизиология БА также характеризуется повышенным образованием растворимых пептидов бета-амилоида - пептидов Аβ (1-40) и Аβ (1-42). Некоторые недавние исследования показывают, что токсичность нейронов и нарушенная синаптическая передача могут являться следствием повышенного образования растворимых олигомеров Аβ.

Существует потребность в соединениях и композициях, которые лечат нейродегенеративные расстройства и/или улучшают здоровье головного мозга. В идеальном варианте указанные соединения должны обладать хорошими фармацевтическими свойствами, такими как растворимость, биодоступность и/или малое число побочных эффектов.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Некоторые аспекты настоящего изобретения относятся к соединениям, экстрактам и композициям на их основе, а также способам их применения для лечения нейродегенеративных расстройств и/или улучшения здоровья головного мозга. В некоторых вариантах реализации указанные соединения представляют собой флавоноиды граната. В некоторых вариантах реализации указанные соединения, экстракты и/или композиции можно применять для лечения, контроля или предупреждения заболевания или состояния, связанного с повреждением, индуцированным образованием фибрилл или повышенным риском образования фибрилл.

В соответствии с одним из аспектов, настоящее изобретение относится к композиции, содержащей соединение или экстракт согласно настоящему изобретению, такой как фармацевтическая композиция, нутрицевтический состав, медицинский продукт питания (также известный как диетический продукт питания для специальных медицинских целей), функциональный продукт питания, добавка к продукту питания или диетическая добавка (также известная как фитомедицинский продукт), содержащая одно или более антиагрегационных соединений согласно настоящему изобретению. Указанные композиции также могут содержать дополнительный терапевтический агент или могут быть введены в комбинации с другим терапевтическим соединением. Другие аспекты настоящего изобретения относятся к упакованным продуктам, содержащим указанные композиции и этикетку и/или инструкции по применению для предупреждения агрегации у пациента группы риска, для лечения заболевания или состояния, связанного с повреждением головного мозга, связанным с типичными возрастными заболеваниями, и/или для предупреждения и/или контроля связанной с ним гибели клеток.

Дополнительные аспекты, варианты реализации и преимущества настоящего изобретения подробно рассмотрены ниже. Более того, приведенная выше информация и следующее подробное описание представляют собой лишь иллюстративные примеры различных аспектов и вариантов реализации настоящего изобретения и предназначены для обеспечения общего представления или основы для понимания существа и характера заявленных аспектов и вариантов реализации. Прилагаемые фигуры включены для дополнительного понимания различных аспектов и вариантов реализации; они включены в настоящее описание и являются его частью. Указанные фигуры вместе с остальной частью описания служат для пояснения принципов и действия описанных и заявленных аспектов и вариантов реализации. Различные аспекты по меньшей мере одного из вариантов реализации рассмотрены ниже со ссылкой на прилагаемые фигуры. Указанные фигуры приведены для иллюстрации и объяснения и не ограничивают объем настоящего изобретения.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

На Фиг.1 показаны выбранные соединения согласно настоящему изобретению.

На Фиг.2 показан спектр ¹H ЯМР Пуникалагина (Punicalagin).

На Фиг.3 показан масс-спектр Пуникалагина.

На Фиг.4 показан спектр ¹H ЯМР Пуникалина (Punicalin).

На Фиг.5 показан масс-спектр Пуникалина.

На Фиг.6 показан спектр ¹H ЯМР Теллимаграндина (Tellimagrandin).

На Фиг.7 показан масс-спектр Теллимаграндина.

На Фиг.8 показан спектр ¹Н ЯМР Соединения А.

На Фиг.9 показан масс-спектр Соединения А.

На Фиг.10 показан масс-спектр Педункулагина (Pedunculagin).

На Фиг.11 показаны результаты скрининговых анализов на предмет ингибирования агрегации с использованием Аβ_25-35 и флуоресценции ThT с различными фракциями, выделенными с использованием разных растворителей для экстракции.

На Фиг.12 показаны молекулы, идентифицированные в экстрактах как биологически активные, а также их значения IC₅₀ для ингибирования агрегации Аβ_25-35.

На Фиг.13 показаны результаты с применением Пуникалина в анализах дозозависимой флуоресценции in vitro с использованием Аβ_25-35.

На Фиг.14 показаны результаты с применением Педункулагина в анализах дозозависимой флуоресценции in vitro с использованием Аβ_25-35.

На Фиг.15 показаны результаты с применением Пуникалагина в анализах дозозависимой флуоресценции in vitro с использованием Аβ_25-35.

На Фиг.16 показаны результаты с применением Соединения А (3I) в анализах дозозависимой флуоресценции in vitro с использованием Аβ_25-35.

На Фиг.17 показаны результаты с применением Теллимаграндина в анализах дозозависимой флуоресценции in vitro с использованием Аβ_25-35.

На Фиг.18 показаны результаты с применением Корилагина (Corilagin) в анализах дозозависимой флуоресценции in vitro с использованием Аβ_25-35.

На Фиг.19 показаны результаты анализов клеток PC12, демонстрирующие ингибирование токсичности нейронов, индуцируемой Аβ, с использованием фракции из кожуры граната, которая, как показано, содержит Пуникалагин (дозирование 500 мкг/мл).

На Фиг.20 показаны характеристики ВЭЖХ (254 нм) нескольких экстрактов граната согласно настоящему изобретению.

На Фиг.21 показан анализ индуцируемой β-амилоидом гибели клеток в клетках РС12.

На Фиг.22 показаны характеристики ВЭЖХ нескольких субфракций Экстракта 1767. Данные характеристики получали с помощью аналитической системы ВЭЖХ Varian, оснащенной детектором на диодной матрице (DAD) с использованием колонки 250 мм × 4,6 мм ⌀ - 0,5 мкм «XRS C18» Varian. Используемый растворитель и градиент показаны на Фиг.23.

На Фиг.23 показан растворитель и градиент, используемый для получения следов ВЭЖХ; и график, демонстрирующий биологическую активность субфракций 1767 в отношении выживаемости клеток РС12 при токсичности Аβ. Все субфракции анализировали при 30 мкг/мл. Субфракции 1767-2 и 1767-3 проявляют самую высокую активность; поскольку они также демонстрируют большие сходства характеристик ВЭЖХ, их объединяли для дальнейшего фракционирования и анализа.

На Фиг.24 показан результат теста водного лабиринта Морриса в конце 3-месячного периода лечения экстрактом граната 31008 в модели БА у мыши (введение, начиная через четыре месяца).

На Фиг.25 показаны результаты окрашивания срезов головного мозга мышей на предмет диффузных амилоидных бляшек в конце 3-месячного периода лечения экстрактом граната 31008 в модели БА у мыши (введение, начиная через четыре месяца).

На Фиг.26 показан результат теста водного лабиринта Морриса в конце 3-месячного периода лечения пуникалагином или экстрактом граната 31008 (в двух разных дозах, низкой и высокой), экстрактом 61109 и экстрактом 71109 в модели БА у мыши (введение, начиная через два месяца).

На Фиг.27 показаны результаты исследования социального узнавания у старых крыс (в котором экстракт представляет собой 31008).

На Фиг.28 показаны результаты обратного теста водного лабиринта Морриса у старых крыс (в котором экстракт представляет собой 31008 и дозировка составляет 30 мкг/мл).

На Фиг.29 показано Соединение А.

На Фиг.30 показана блок-схема, демонстрирующая выполняемую с помощью ультразвука последовательную экстракцию из кожуры граната различными растворителями, имеющими увеличивающуюся полярность; и характеристики ВЭЖХ полученных экстрактов. Данные характеристики получали с помощью аналитической системы ВЭЖХ Varian, оснащенной детектором на диодной матрице (DAD) с использованием дифенильной колонки 250 мм × 4,6 мм, ⌀ 0,5 мм «XRS pursuit». Используемый растворитель и градиент показаны на Фиг.31.

На Фиг.31 показан растворитель и градиент, используемый для получения следов ВЭЖХ; и график, демонстрирующий биологическую активность субфракций кожуры в отношении выживаемости клеток PC12 при токсичности Аβ. Все субфракции анализировали при 500 мкг/мл. Фракция 1776 обладает самой высокой активностью и очень интересными характеристиками ВЭЖХ, отличными от характеристик 1777 и 1778, основные пики которых похожи на Пуникалагин. Данные результат может указывать на то, что другое соединение, отличное от пуникалагина, может быть способно защищать клетки PC12 от индуцируемой Аβ токсичности. Следовательно, 1776 отбирали для дальнейшего фракционирования. Теллимаграндин идентифицировали во фракции экстракта 1776.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Некоторые аспекты настоящего изобретения относятся к соединениям (а также экстрактам и композициям, содержащим указанные соединения) и способам эффективного введения указанных соединений, экстрактов или композиций нуждающемуся в этом субъекту.

Амилоидоз

В некоторых вариантах реализации соединения ингибируют сворачивание белка, вызывающее агрегацию пептида Аβ (т.е. образование амилоидных бляшек).

Ряд неизлечимых связанных со старением или дегенеративных заболеваний связывают с общим и фундаментальным патогенным процессом неправильного сворачивания и агрегации белка или пептида, называемым «амилоидозом». Данные заболевания включают болезнь Альцгеймера, Паркинсона и Хантингтона, и диабет II типа. Отложения амилоида, присутствующие при данных заболеваниях, состоят из конкретных пептидов, характерных для каждого из этих заболеваний, но независимо от их последовательности амилоидные фибриллы имеют характерную структуру β-складчатого слоя и общий путь агрегации. При каждом заболевании конкретный белок или пептид неправильно сворачивается, принимает структуру β-складчатого слоя и олигомеризуется с образованием растворимых промежуточных агрегатов на пути к образованию фибрилл, в конечном итоге образуя нерастворимые амилоидные волокна, бляшки или включения. Данные нерастворимые формы агрегированного белка или пептида превращаются за счет межмолекулярной ассоциации β-нитей в β-складчатые слои. Последние данные указывают на то, что растворимые амилоидные олигомеры могут являться основной причиной нейротоксичности.

Амилоидозы определяют как заболевания, при которых обычно растворимые белки накапливаются в различных тканях в виде нерастворимых отложений фибрилл, богатых структурой β-складчатого слоя и обладающих характерными свойствами связывания красителя. Несмотря на то, что конкретные полипептиды, составляющие указанные отложения, различны для каждого амилоидоза, у данных расстройств есть несколько общих ключевых признаков. Наиболее заметным из них является способность белков, которые высоко растворимы в биологических жидкостях, постепенно превращаться в нерастворимые волокнистые полимеры, обогащенные конформацией β-складчатого листа.

Кроме того, они склонны к образованию схожего молекулярного механизма (путем межмолекулярной ассоциации β-нитей с образованием расширенных β-складчатых слоев) и, таким образом, склонны иметь общую схожую молекулярную структуру и общую способность связывать определенные красители, такие как конго красный и Тиофлавин Т.

Данные заболевания и расстройства, которые в настоящем описании в общем называются «амилоидными заболеваниями», делятся на две основные категории: (а) заболевания, которые поражают головной мозг и другие отделы центральной нервной системы; и (b) заболевания, которые поражают другие органы или ткани по всему организму.

Примеры амилоидных заболеваний, которые подпадают под данные две категории, перечислены в следующих двух разделах; однако известны многие другие примеры редких наследственных амилоидных заболеваний, не включенные в настоящее описание, и дополнительные формы амилоидного заболевания, вероятно, будут открыты в будущем.

Нейродегенеративные заболевания, связанные с амилоидозом

Много разных нейродегенеративных заболеваний связано с неправильным сворачиванием и агрегацией конкретного белка или пептида в конкретной части головного мозга или другом участке центральной нервной системы в зависимости от конкретного заболевания. Далее следуют примеры указанных заболеваний.

Различные формы болезни Альцгеймера (БА), а также синдромом Дауна, наследственная церебральная геморрагия с амилоидозом (HCHWA, голландский тип), церебральная амилоидная ангиопатия и также возможно умеренное когнитивное нарушение, и другие формы деменции связаны с агрегацией пептида, состоящего из 40/42 остатков, называемого β-амилоидом, Аβ (1-40) или Аβ (1-42), который образует нерастворимые амилоидные волокна и бляшки в коре головного мозга, гиппокампе или другом участке головного мозга в зависимости от конкретного заболевания. Болезнь Альцгеймера также связана с образованием нейрофибриллярных клубков путем агрегации гиперфосфорилированного белка, называемого tau, что также происходит при лобно-височной деменции (болезнь Пика).

Болезнь Паркинсона (PD), деменция с тельцами Леви (DLB) и множественная системная атрофия (MSA) связаны с агрегацией белка, называемого α-синуклеином, которая приводит к образованию нерастворимых включений, называемых «тельцами Леви». Болезнь Хантингтона (HD), спинальная и бульбарная мышечная атрофия (SBMA, известная также как болезнь Кеннеди), дентаторубро-паллидолюисова атрофия (DRPLA), разные формы спинально-церебеллярной атаксии (SCA, типы 1, 2, 3, 6 и 7) и, возможно, некоторые другие наследственные нейродегенеративные заболевания связаны с агрегацией различных белков и пептидов, содержащих аномально протяженные повторы глутамина (расширенные участки полиглутамина). Болезнь Крейтцфельда-Якоба (CJD), губкообразная энцефалопатия крупного рогатого скота (BSE) у коров, скрепи у овец, куру, болезнь Герстманна-Штреусслера-Шейнкера (GSS), фатальная семейная бессонница и, возможно, все другие формы трансмиссивной энцефалопатии связаны с самопроизвольно распространяющимся неправильным сворачиванием и агрегацией белков прионов.

Боковой амиотрофический склероз (БАС), а также возможно некоторые другие формы болезни двигательного нейрона (БДН) связаны с агрегацией белка, называемого супероксиддисмутазой.

Семейная британская деменция (СБД) и семейная датская деменция (СДД) соответственно связаны с агрегацией пептидных последовательностей ABri и ADan, получаемых из белка BRI.

Наследственная церебральная геморрагия с амилоидозом (HCHWA, исландский тип) связана с агрегацией белка, называемого цистатином С.

Системные заболевания, связанные с амилоидозом

Помимо нейродегенеративных заболеваний, перечисленных выше, широкий спектр системных связанных со старением или дегенеративных заболеваний связан с неправильным сворачиванием и агрегацией конкретного белка или пептида в различных других тканях по всему организму (т.е. кроме головного мозга). Далее следуют примеры указанных заболеваний.

Диабет II типа (также известный как диабет зрелого возраста или инсулиннезависимый диабет) связан с агрегацией пептида, состоящего из 37 остатков, называемого островковым амилоидным полипептидом (IAPP или «амилин»), который образует нерастворимые отложения, связанные с прогрессирующим разрушением инсулин-продуцирующих β клеток в островках Лангерганса в поджелудочной железе.

Связанный с диализом амилоидоз (DRA) и амилоид предстательной железы связаны с агрегацией белка, называемого β₂-микроглобулином, либо в костях, суставах и сухожилиях при DRA, который развивается в течение длительных периодов гемодиализа, либо в предстательной железе в случае амилоида предстательной железы.

Первичный системный амилоидоз, системный AL-амилоидоз и связанный с миеломой амилоидоз связаны с агрегацией легкой цепи иммуноглобулина (или в некоторых случаях тяжелой цепи иммуноглобулина) с образованием нерастворимых отложений амилоида, которые постепенно накапливаются в различных основных органах, таких как печень, почки, сердце и желудочно-кишечный (ЖК) тракт.

Реактивный системный АА-амилоидоз, вторичный системный амилоидоз, семейная средиземноморская лихорадка и хроническое воспалительное заболевание связаны с агрегацией сывороточного белка амилоида А, который образует нерастворимые отложения амилоида, которые накапливаются в основных органах, таких как печень, почки и селезенка; Сенильный системный амилоидоз (SSA), семейная амилоидная полинейропатия (FAP) и семейная амилоидная кардиомиопатия (FAC) связаны с неправильным сворачиванием и агрегацией разных мутантов белка транстиретина (TTR), которые образуют нерастворимые включения в различных органах и тканях, таких как сердце (особенно при FAC), периферические нервы (особенно при FAP) и желудочно-кишечный (ЖК) тракт. Другая форма семейной амилоидной полинейропатии (FAP, тип II) связана с агрегацией аполипопротеина AI в периферических нервах; Семейный висцеральный амилоидоз и наследственный ненейропатический системный амилоидоз связаны с неправильным сворачиванием и агрегацией различных мутантов лизоцима, которые образуют нерастворимые отложения в основных органах, таких как печень, почки и селезенка.

Наследственный системный амилоидоз финского типа связан с агрегацией белка, называемого гельсолин, в глазах (в частности, в роговице).

Амилоидоз α-цепи фибриногена связан с агрегацией α-цепи фибриногена А, которая образует нерастворимые отложения амилоида в различных органах, таких как печень и почки.

Связанный с инсулином амилоидоз возникает при агрегации инсулина в месте инъекции у диабетиков.

Медуллярная карцинома щитовидной железы связана с агрегацией кальцитонина в окружающих тканях.

Изолированный амилоидоз предсердий связан с агрегацией предсердного натрийуретического пептида (ANP) в сердце.

Различные формы катаракты связаны с агрегацией белков γ-кристаллинов в хрусталике глаз.

Патогенный механизм амилоидных заболеваний

Тогда как все амилоидные заболевания имеют общий патогенный процесс амилоидоза, точные молекулярные механизмы, посредством которых данный общий процесс неправильного сворачивания и агрегации белка/пептида связан с прогрессирующей дегенерацией пораженных тканей, неясны. В некоторых случаях, включая многие системные амилоидные заболевания, считается, что чистая масса нерастворимого белка или пептида просто переполняет пораженные ткани, в конечном итоге приводя к острой недостаточности органа. В других случаях, включая большинство нейродегенеративных заболеваний, перечисленных выше, симптомы заболевания развиваются с появлением лишь очень маленьких агрегатов. Следовательно, было высказано предположение, что нерастворимые отложения по своей природе токсичны и могут вызывать прогрессирующее разрушение клеток, например, вызывая воспаление и окислительный стресс, или путем прямого нарушения клеточных мембран или других клеточных компонентов, или процессов.

Недавно было установлено, что конкретные белки и пептиды, вовлеченные по меньшей мере в некоторые из данных амилоидных заболеваний, образуют различные растворимые олигомерные формы при агрегации, которые варьируются по размеру от димеров и тримеров до гораздо более крупных форм, содержащих десятки или даже сотни, или тысячи мономеров белка или пептида. Более того, указанные олигомеры по своей природе токсичны для клеток in vitro в отсутствии нерастворимых агрегатов и они, по-видимому, обладают общим структурными признаком, т.к. все они могут быть распознаны одним и тем же антителом, несмотря на то, что они могут быть образованы белками или пептидами с сильно отличающимися аминокислотными последовательностями.

Молекулярная структура данных токсичных растворимых олигомеров не известна и точный механизм, посредством которого они убивают клетки, также неясен, но было предложено несколько теорий. Согласно одной из теорий, называемой «гипотеза канала», олигомеры образуют гетерогенные поры или пропускающие ионные каналы, которые позволяют ионам свободно проходить через клеточные мембраны, тем самым нарушая их целостность, что в конечном итоге вызывает гибель клеток. В качестве альтернативы или дополнительно, олигомеры могут образовывать протофибриллы, убивающие клетки посредством схожего или другого механизма.

Однако независимо от точного патогенного механизма, к настоящему времени собрано огромное количество данных, показывающих, что общий процесс агрегации белка/пептида представляет собой основную причину этих и, возможно, других амилоидных заболеваний.

Настоящее изобретение относится к химическим соединениям, экстрактам и композициям, которые представляют собой ингибиторы связанной с амилоидом токсичности и, соответственно, будут полезны в лечении амилоидных заболеваний и расстройств.

Раннее выявление амилоидных заболеваний и расстройств

Всегда желательно выявлять заболевания на раннем этапе их развития. Раннее выявление позволяет рано начать лечение, что, в целом, было доказано, обеспечивает больший успех в лечении различных заболеваний. Недавно было обнаружено, что анализ глаз людей и, в частности, хрусталиков глаз может выявлять признаки различных типов заболеваний. Например, было показано, что измерения светорассеяния внутри глаза дают полезную диагностическую информацию для выявления и контроля развития таких заболеваний, таких как болезнь Альцгеймера. Публикация заявки на патент США 2008/0088795 и патент США 7107092, полное содержание которых включено в настоящее описание посредством ссылки. Кроме того, изменения в головном мозге, измеряемые с помощью МРТ и ПЭТ, анализов ИФА и метода дифракционно-улучшенного получения изображений (diffraction-enhanced imaging, DEI), отдельно или в комбинации с тестами на запоминание и детектированием белков риска в жидкостях организма, также могут приводить к более ранней и более точной диагностике болезни Альцгеймера.

Соединения согласно настоящему изобретению

Один из аспектов настоящего изобретения относится к соединениям, которые при введении приводят к лечению или предупреждению нейродегенеративных расстройств и/или улучшению здоровья головного мозга. Как более подробно рассмотрено ниже, в некоторых вариантах реализации указанное введение соединения приводит к меньшему количеству отложений амилоидных фибрилл в головном мозге животных, которым давали композиции, содержащие одно или более соединений согласно настоящему изобретению; и приводило к улучшению или восстановлению памяти у животных, которым давали композиции, содержащие одно или более соединений согласно настоящему изобретению.

Например, соединения согласно настоящему изобретению включают Пуникалин, Пуникалагин, Педункулагин, Теллимаграндин, Корилагин, Гранатин A (Granatine A), Гранатин Б, Терминалин (Terminalin), Галлагилдилактон (Gallagyldilactone) и Соединение А, а также их фармацевтически приемлемые соли, биологически активные метаболиты, сольваты, гидраты, пролекарства, энантиомеры или стереоизомеры.

Настоящее изобретение также относится к чистому и выделенному соединению или его фармацевтически приемлемой соли, биологически активному метаболиту, сольвату, гидрату, пролекарству, энантиомеру или стереоизомеру; при этом указанное соединение представлено формулой I:

где независимо для каждого случая

Х представляет собой или ; и

каждый из R¹, R² и R³ независимо представляет собой водород, алкил, аралкил, алкилкарбокси или сахар; или

R¹ представляет собой водород, алкил, аралкил, алкилкарбокси, , или сахар, R² представляет собой водород или , и R³ представляет собой ; или

R¹ представляет собой водород, алкил, аралкил, алкилкарбокси или сахар, а R² и R³ вместе представляют собой .

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных соединений, где Х представляет собой .

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных соединений, где Х представляет собой .

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных соединений, где R¹ представляет собой водород.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных соединений, где R¹ представляет собой сахар, выбранный из группы, состоящей из аллозы («All»), альтрозы («Alt»), арабинозы («Ara»), эритрозы, эритрулозы, фруктозы («Fru»), фукозамина («FucN»), фукозы («Fuc»), галактозамина («GalN»), галактозы («Gal»), галлоил-β-глюкозы, глюкозамина («GlcN»), глюкозаминита («GlcN-ol»), глюкозы («Glc»), глицеральдегида, 2,3-дигидроксипропаналя, глицерина («Gro»), пропан-1,2,3-триола, глицерона («1,3-дигидроксиацетон»), 1,3-дигидроксипропанона, гулозы («Gul»), идозы («Ido»), ликсозы («Lyx»), маннозамина («ManN»), маннозы («Man»), псикозы («Psi»), хиновозы («Qui»), хиновозамина, рамнита («Rha-ol»), рамнозамина («RhaN»), рамнозы («Rha»), рибозы («Rib»), рибулозы («Rul»), рутинозы, сиаловой кислоты («Sia» или «Neu»), сорбозы («Sor»), тагатозы («Tag»), талозы («Tal»), винной кислоты, эритраровой/треаровой кислоты, треозы, ксилозы («Xyl») или ксилулозы («Xul»).

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных соединений, где R² представляет собой водород.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных соединений, где R² представляет собой сахар, выбранный из группы, состоящей из аллозы («All»), альтрозы («Alt»), арабинозы («Ara»), эритрозы, эритрулозы, фруктозы («Fru»), фукозамина («FucN»), фукозы («Fuc»), галактозамина («GalN»), галактозы («Gal»), галлоил-β-глюкозы, глюкозамина («GlcN»), глюкозаминита («GlcN-ol»), глюкозы («Glc»), глицеральдегида, 2,3-дигидроксипропаналя, глицерина («Gro»), пропан-1,2,3-триола, глицерона («1,3-дигидроксиацетон»), 1,3-дигидроксипропанона, гулозы («Gul»), идозы («Ido»), ликсозы («Lyx»), маннозамина («ManN»), маннозы («Man»), псикозы («Psi»), хиновозы («Qui»), хиновозамина, рамнита («Rha-ol»), рамнозамина («RhaN»), рамнозы («Rha»), рибозы («Rib»), рибулозы («Rul»), рутинозы, сиаловой кислоты («Sia» или «Neu»), сорбозы («Sor»), тагатозы («Tag»), талозы («Tal»), винной кислоты, эритраровой/треаровой кислоты, треозы, ксилозы («Xyl») или ксилулозы («Xul»).

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных соединений, где R³ представляет собой водород.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных соединений, где R³ представляет собой сахар, выбранный из группы, состоящей из аллозы («All»), альтрозы («Alt»), арабинозы («Ara»), эритрозы, эритрулозы, фруктозы («Fru»), фукозамина («FucN»), фукозы («Fuc»), галактозамина («GalN»), галактозы («Gal»), галлоил-β-глюкозы, глюкозамина («GlcN»), глюкозаминита («GlcN-ol»), глюкозы («Glc»), глицеральдегида, 2,3-дигидроксипропаналя, глицерина («Gro»), пропан-1,2,3-триода, глицерона («1,3-дигидроксиацетон»), 1,3-дигидроксипропанона, гулозы («Gul»), идозы («Ido»), ликсозы («Lyx»), маннозамина («ManN»), маннозы («Man»), псикозы («Psi»), хиновозы («Qui»), хиновозамина, рамнита («Rha-ol»), рамнозамина («RhaN»), рамнозы («Rha»), рибозы («Rib»), рибулозы («Rul»), рутинозы, сиаловой кислоты («Sia» или «Neu»), сорбозы («Sor»), тагатозы («Tag»), талозы («Tal»), винной кислоты, эритраровой/треаровой кислоты, треозы, ксилозы («Xyl») или ксилулозы («Xul»).

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных соединений, где R¹, R² и R³ каждый независимо представляет собой водород, алкил, аралкил, алкилкарбокси или сахар.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных соединений, где R¹, R² и R³ представляют собой водород.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных соединений, где R¹ представляет собой водород, алкил, аралкил, алкилкарбокси, или сахар, R² представляет собой водород или , и R³ представляет собой .

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных соединений, где R¹ представляет собой водород, R² представляет собой , и R³ представляет собой .

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных соединений, где R¹ представляет собой .

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных соединений, где R¹ представляет собой , R² представляет собой водород, и R³ представляет собой .

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных соединений, где R¹ представляет собой водород, алкил, аралкил, алкилкарбокси или сахар, а R² и R³ вместе представляют собой .

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных соединений, где R¹ представляет собой водород, a R² и R³ вместе представляют собой .

Настоящее изобретение также включает мультимеры формулы I, такие как димеры, в которых два мономера формулы связаны, как описано в Reed, J.D., С.G.Krueger, et al. (2005). "MALDI-TOF mass spectrometry of oligomeric food polyphenols." Phytochemistry 66(18): 2248-63. Указанные димеры представляют собой встречающиеся в природе димеры эллагитаннинов; их подробные структуры не полностью объяснены, но они содержат основной структурный остов, идентифицированный в настоящем изобретении. Тримеры, тетрамеры и более крупные олигомеры также включены в настоящее изобретение. Другими словами, мультимеры, например, с двумя, тремя, четырьмя, пятью, шестью, семью, восемью, девятью, десятью или более повторами включены в настоящее изобретение.

Некоторые соединения согласно настоящему изобретению, содержащие кислые заместители, могут существовать в виде солей с фармацевтически приемлемыми кислотами или основаниями. Многие из соединений согласно настоящему изобретению могут быть получены в виде солей с фармацевтически совместимыми противоионами (т.е. фармацевтически приемлемых солей). Термин «фармацевтически приемлемая соль» означает любую нетоксичную соль, которая при введении реципиенту способна образовывать либо напрямую, либо опосредовано соединение или пролекарство соединения согласно настоящему изобретению. «Фармацевтически приемлемый противоион» представляет собой ионную часть соли, которая нетоксична при высвобождении из указанной соли при введении реципиенту. Фармацевтически совместимые соли могут быть образованы многими кислотами, включая, но не ограничиваясь ими, соляную, серную, уксусную, молочную, винную, яблочную, янтарную и т.д. Соли более растворимы в водных или других протонных растворителях, чем соответствующие формы свободного основания.

Кислоты, обычно используемые для образования фармацевтически приемлемых солей, включают неорганические кислоты, такие как гидродисульфид, соляная, бромистоводородная, йодистоводородная, серная и фосфорная кислота, а также органические кислоты, такие как пара-толуолсульфоновая, салициловая, винная, дивинная, аскорбиновая, малеиновая, бензолсульфоновая, фумаровая, глюконовая, глюкуроновая, муравьиная, глутаминовая, метансульфоновая, этансульфоновая, бензолсульфоновая, молочная, щавелевая, пара-бромфенилсульфоновая, угольная, янтарная, лимонная, бензойная и уксусная кислота, и другие неорганические и органические кислоты. Таким образом, указанные фармацевтически приемлемые соли включают сульфат, пиросульфат, бисульфат, сульфит, бисульфит, фосфат, моногидрофосфат, дигидрофосфат, метафосфат, пирофосфат, хлорид, бромид, йодид, ацетат, пропионат, деканоат, каприлат, акрилат, формиат, изобутират, капрат, гептаноат, пропиолат, оксалат, малонат, сукцинат, суберат, себацат, фумарат, малеат, бутан-1,4-диоат, гексин-2,5-диоат, бензоат, хлорбензоат, метилбензоат, динитробензоат, гидроксибензоат, метоксибензоат, фталат, терефталат, сульфонат, ксиленсульфонат, фенилацетат, фенилпропионат, фенилбутират, цитрат, лактат, бета-гидроксибутират, гликолят, малеат, тартрат, метансульфонат, пропансульфонат, нафталин-1-сульфонат, нафталин-2-сульфонат, манделат и подобные соли. Типичные фармацевтически приемлемые соли присоединения кислоты включают соли, образованные минеральными кислотами, такими как соляная кислота и бромистоводородная кислота, и, в частности, соли, образованные органическими кислотами, такими как малеиновая кислота.

Подходящие основания для образования фармацевтически приемлемых солей с кислотными функциональными группами включают, но не ограничиваются ими, гидроксиды щелочных металлов, таких как натрий, калий и литий; гидроксиды щелочноземельных металлов, таких как кальций и магний; гидроксиды других металлов, таких как алюминий и цинк; аммиак и органические амины, такие как не содержащие заместители или содержащие в качестве заместителей гидроксигруппу моно-, ди- или триалкиламины; дициклогексиламин; трибутиламин; пиридин; N-метил, N-этиламин; диэтиламин; триэтиламин, моно-, бис- или трис-(2-гидрокси-низший алкил-амины), такие как моно-, бис- или трис-(2-гидроксиэтил)амин, 2-гидрокси-трет-бутиламин или трис-(гидроксиметил)метиламин, N,N-ди-алкил-N-(гидроксиалкил)-амины, такие как N,N-диметил-N-(2-гидроксиэтил)амин или три-(2-гидроксиэтил)амин; N-метил-D-глюкамин; и аминокислоты, такие как аргинин, лизин и т.п.

Некоторые соединения согласно настоящему изобретению и их соли могут существовать в более чем одной кристаллической форме и настоящее изобретение включает каждую индивидуальную кристаллическую форму и их смеси.

Некоторые соединения согласно настоящему изобретению и их соли также могут существовать в форме сольватов, например, гидратов, и настоящее изобретение включает каждый сольват и их смеси.

Некоторые соединения согласно настоящему изобретению могут содержать один или более хиральных центров и существовать в разных оптически активных формах. Когда соединения согласно настоящему изобретению содержат один хиральный центр, указанные соединения существуют в двух энантиомерных формах и настоящее изобретение включает как энантиомеры, так и смеси энантиомеров, такие как рацемические смеси. Энантиомеры могут быть разделены способами, известными специалисту в данной области техники, например, путем образования диастереоизомерных солей, которые могут быть разделены, например, путем кристаллизации; путем образования диастереоизомерных производных или комплексов, которые могут быть разделены, например, путем кристаллизации, газожидкостной или жидкостной хроматографии; селективной реакции одного энантиомера с энантиомер-специфичным реагентом, например, ферментативной этерификации, или газожидкостной или жидкостной хроматографии в хиральном окружении, например, на хиральном носителе, например, кварце, со связанным хиральным лигандом или в присутствии хирального растворителя. Очевидно, что когда необходимый энантиомер превращают в другое химическое соединение одним из способов разделения, описанных выше, можно использовать дополнительный этап для высвобождения необходимой энантиомерной формы. В качестве альтернативы, конкретные энантиомеры могут быть синтезированы с помощью асимметрического синтеза с использованием оптически активных реагентов, субстратов, катализаторов или растворителей, или путем превращения одного энантиомера в другой путем асимметрической трансформации.

Когда соединение согласно настоящему изобретению содержит более одного хирального центра, оно может существовать в диастереоизомерных формах. Диастереоизомерные соединения могут быть разделены способами, известными специалисту в данной области техники, например, путем хроматографии или кристаллизации, и индивидуальные энантиомеры могут быть разделены, как описано выше. Настоящее изобретение включает каждый диастереомер соединений согласно настоящему изобретению и их смеси.

Некоторые соединения согласно настоящему изобретению могут существовать в разных таутомерных формах или в виде разных геометрических изомеров, и настоящее изобретение включает каждый таутомер и/или геометрический изомер соединений согласно настоящему изобретению и их смеси.

Некоторые соединения согласно настоящему изобретению могут существовать в разных стабильных конформационных формах, которые могут быть разделяемыми. Торсионная асимметрия вследствие ограниченного вращения вокруг асимметричной одинарной связи, например, из-за стерического препятствия или напряжения кольца может позволять разделять разные конформеры. Настоящее изобретение включает каждый конформационный изомер соединений согласно настоящему изобретению и их смеси.

Некоторые соединения согласно настоящему изобретению могут существовать в цвиттер-ионной форме и настоящее изобретение включает каждую цвиттер-ионную форму соединений согласно настоящему изобретению и их смеси.

В настоящем описании термин «пролекарство» относится к агенту, который превращается в исходное лекарственное средство in vivo в результате определенного физиологического химического процесса (например, пролекарство при физиологическом рН превращается в необходимую лекарственную форму). Пролекарства часто полезны, поскольку в некоторых ситуациях их может быть легче вводить, чем исходное лекарственное средство. Например, они могут быть биодоступны путем перорального введения, тогда как исходное лекарственное средство нет. Пролекарство также может обладать улучшенной растворимостью в фармакологических композициях по сравнению с исходным лекарственным средством. Например, без ограничения, пролекарство будет представлять собой соединение согласно настоящему изобретению, при этом его вводят в виде сложного эфира («пролекарство») для облегчения «передачи» через клеточную мембрану, где растворимость в воде неблагоприятна, но затем он метаболически гидролизуется в карбоновую кислоту при попадании в клетку, где растворимость в воде благоприятна. Пролекарства обладают многими полезными свойствами. Например, пролекарство может быть лучше растворимо в воде, чем конечное лекарственное средство, что тем самым облегчает внутривенное введение лекарственного средства. Пролекарство также может обладать более высоким уровнем биодоступности при пероральном введении, чем конечное лекарственное средство. После введения пролекарство ферментативно или химически расщепляется с доставкой конечного лекарственного средства в кровь или ткань.

Типичные пролекарства при расщеплении высвобождают соответствующую свободную кислоту и указанные образующие гидролизуемый сложный эфир остатки соединений согласно настоящему изобретению включают, но не ограничиваются ими, заместители карбоновых кислот (например, -С(O)₂Н или фрагмент, содержащий карбоновую кислоту), в которых свободный водород замещен на (С₁-С₄)алкил, (С₂-С₁₂)алканоилоксиметил, (С₄-С₉)1-(алканоилокси)этил, 1-метил-1-(алканоилокси)-этил, содержащий от 5 до 10 атомов углерода, алкоксикарбонилоксиметил, содержащий от 3 до 6 атомов углерода, 1-(алкоксикарбонилокси)этил, содержащий от 4 до 7 атомов углерода, 1-метил-1-(алкоксикарбонилокси)этил, содержащий от 5 до 8 атомов углерода, N-(алкоксикарбонил)аминометил, содержащий от 3 до 9 атомов углерода, 1-(N-(алкоксикарбонил)амино)этил, содержащий от 4 до 10 атомов углерода, 3-фталидил, 4-кротонолактонил, гамма-бутиролактон-4-ил, ди-N,N-(С₁-С₂)алкиламино(С₂-С₃)алкил (такой как β-диметиламиноэтил), карбамоил-(С₁-С₂)алкил, N,N-ди(С₁-С₂)-алкилкарбамоил-(С₁-С₂)алкил и пиперидино-, пирролидино- или морфолино(С₂-С₃)алкил.

Типичные пролекарства высвобождают гидроксил соединения согласно настоящему изобретению, при этом свободный водород гидроксила замещен на (C₁-С₆)алканоилоксиметил, 1-((С₁-С₆)алканоилокси)этил, 1-метил-1-((С₁-С₆)алканоилокси)этил, (С₁-С₆)алкоксикарбонилоксиметил, N-(C₁-С₆)алкоксикарбониламинометил, сукциноил, (С₁-С₆)алканоил, α-амино(С₁-С₄)алканоил, арилацил и α-аминоацил или α-аминоацил-α-аминоацил, где указанные α-аминоацильные группы независимо представляют собой любую из встречающихся в природе L-аминокислот, обнаруживаемых в белках, -Р(O)(ОН)₂, -Р(O)(O(С₁-С₆)алкил)₂ или гликозил (радикал, полученный в результате отщепления гидроксила полуацеталя углевода).

Соединение может быть выделено и экстрагировано (т.е. отделено от соединений, с которыми оно встречается в природе) или оно может быть получено синтетически (т.е. получено с использованием способа синтеза) так, что в любом случае уровень загрязняющих соединений или примесей не снижает или отрицательно влияет на эффективность указанного соединения согласно настоящему изобретению.

Некоторые соединения согласно настоящему изобретению могут быть экстрагированы из природных источников, таких как сок, листья, кора, околоплодник или кожура граната обыкновенного (Punica granatum). Lansky, E.P. and R.A.Newman (2007). "Punica granatum (pomegranate) and its potential for prevention and treatment of inflammation and cancer." J Ethnopharmacol 109(2): 177-206. Некоторые соединения также могут быть выделены от грецких орехов, Эускафиса японского (Euscaphis japonica), гравилата японского Thunb. var. китайского (Geum japonicum Thunb. var. chinense), Ежевики (Rubus sp.). грецкого ореха (Juglans regia), Пименты двудомной (Pimenta dioica), Дуба (Quercus), Клена, Дерена лекарственного (Cornus officinalis), Эмблики лекарственной (Emblica officinalis) (амла), плодов Миробалана чебуля (Terminalia chebula Retz) и индийского миндаля (Terminalia catappa L), а также других подобных видов.

Например, Пуникалин, Пуникалагин, Педункулагин и Теллимаграндин были ранее выделены и охарактеризованы. Tanaka, К., G. Nonaka, et al. (1986). "Tannins and Related Compounds. XLI. 1) Isolation and Charactherization of Novel Ellagitannins, Punicacorteins A, В. C, and Punigluconin from the bark of Punica granatum L." Chem. Pharm. Bull 34(2): 656-663: Tanaka. K., G. Nonaka, et al. (1986). "Tannins and Related Compounds. XLI. 1). Revision of the Structures of Punicalin and Punicalagin, and Isolation and Charactherization of 2-0-Galloylpunicalin from the Bark of Punica granatum L." Chem. Pharm. Bull 34(2): 650-655; и Satomi, H., K. Umemura, et al. (1993). "Carbonic anhydrase inhibitors from the pericarps of Punica granatum L." Biol Pharm Bull 16(8): 787-90.

В некоторых вариантах реализации соединение согласно настоящему изобретению является по меньшей мере примерно на 1% - 99% чистым. В некоторых вариантах реализации соединение согласно настоящему изобретению является по меньшей мере примерно на 10% чистым. В некоторых вариантах реализации соединения являются по меньшей мере примерно на 20% чистыми. В некоторых вариантах реализации соединения являются по меньшей мере примерно на 30% чистыми. В некоторых вариантах реализации соединения являются по меньшей мере примерно на 40% чистыми. В некоторых вариантах реализации соединения являются по меньшей мере примерно на 50% чистыми. В некоторых вариантах реализации соединения являются по меньшей мере примерно на 60% чистыми. В некоторых вариантах реализации соединения являются по меньшей мере примерно на 70% чистыми. В некоторых вариантах реализации соединения являются по меньшей мере примерно на 80% чистыми. В некоторых вариантах реализации соединения являются по меньшей мере примерно на 90% чистыми. В некоторых вариантах реализации соединения являются по меньшей мере примерно на 95% чистыми. В некоторых вариантах реализации соединения являются по меньшей мере примерно на 99% чистыми. В некоторых вариантах реализации указанные экстракты, содержащие одно или более соединений согласно настоящему изобретению с любым из указанных количеством примесей, также могут подходить для применения в качестве функциональных продуктов питания и диетических добавок или в функциональных продуктах питания и пищевых добавках. Указанные экстракты более подробно рассмотрены ниже.

Один из аспектов настоящего изобретения относится к соединению или его фармацевтически приемлемой соли, биологически активному метаболиту, сольвату, гидрату, пролекарству, энантиомеру или стереоизомеру, дающему спектры на Фиг.2 и 3.

Один из аспектов настоящего изобретения относится к соединению или его фармацевтически приемлемой соли, биологически активному метаболиту, сольвату, гидрату, пролекарству, энантиомеру или стереоизомеру, дающему спектры на Фиг.4 и 5.

Один из аспектов настоящего изобретения относится к соединению или его фармацевтически приемлемой соли, биологически активному метаболиту, сольвату, гидрату, пролекарству, энантиомеру или стереоизомеру, дающему спектры на Фиг.6 и 7.

Один из аспектов настоящего изобретения относится к соединению или его фармацевтически приемлемой соли, биологически активному метаболиту, сольвату, гидрату, пролекарству, энантиомеру или стереоизомеру, дающему спектры на Фиг.8 и 9.

Один из аспектов настоящего изобретения относится к соединению или его фармацевтически приемлемой соли, биологически активному метаболиту, сольвату, гидрату, пролекарству, энантиомеру или стереоизомеру, дающему спектр на Фиг.10.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных соединений, при этом указанное соединение или его фармацевтически приемлемая соль, биологически активный метаболит, сольват, гидрат, пролекарство, энантиомер или стереоизомер получали путем экстракции из растительного материала, как указано в настоящем описании. Например, один из аспектов настоящего изобретения относится к соединению, полученному способом, включающим этапы использования адсорбента для связывания указанного соединения; и элюирования связанного соединения из указанного адсорбента.

Выделение/получение

Как указано выше, экстракты, обогащенные одним или более соединениями согласно настоящему изобретению, могут быть извлечены из растительного материала, при этом указанный растительный материал может включать плоды, кожуру, сок, листья, древесные стебли и т.п. Растения, подходящие для экстракции, включают гранат обыкновенный. Способы очистки описаны в публикации заявки на патент США 2008/0318877 Seeram et al., полное содержание которой включено в настоящее описание посредством ссылки.

Суспензия вещества из растительного материала может быть получена различными способами, известными в данной области техники, например, смешиванием и водной экстракцией. Растительный материал может быть подвергнут ферментной обработке, включая, но не ограничиваясь ими, экстрактазу (extractase), пектиназу и т.п. Водный раствор, содержащий соединения согласно настоящему изобретению, помещают в колонку с полимерным адсорбентом, которую затем промывают водным буфером с удалением несвязанного вещества. Представляющие интерес соединения связываются со смолой и могут быть элюированы полярным растворителем, например, водой, этанолом, метанолом и ацетоном.

Смола имеет поверхность, на которой адсорбируются соединения. Класс адсорбционных смол представляет собой полимерные сшитые смолы, состоящие из стирола и дивинилбензола, такие как, например, серия смол АМБЕРЛИТ (AMBERLITE), например, АМБЕРЛИТ XAD-16, коммерчески доступные от Rohm & Haas Co., Филадельфия, штат Пенсильвания. Другие полимерные перекрестносшитые стирол-дивинилбензольные адсорбционные смолы, подходящие для применения согласно настоящему изобретению, представляют собой XFS-4257, XFS-4022, XUS-40323 и XUS-40322, все из которых изготавливает The Dow Chemical Company, Мидленд, штат Мичиган.

Можно использовать коммерчески доступную, одобренную Управлением по контролю за качеством пищевых продуктов и лекарственных средств (FDA) стирол-дивинилбензольную (SDVB) сшитую сополимерную смолу (например, АМБЕРЛИТ XAD-16, описанную в патенте США 4297220, включенном в настоящее описание посредством ссылки). Данная смола представляет собой неионную гидрофобную сшитую полистирол-дивинилбензольную адсорбирующую смолу. АМБЕРЛИТ XAD-16 имеет макросетчатую структуру как с непрерывной полимерной фазой, так и с непрерывной фазой пор. В некоторых вариантах реализации смола, используемая согласно настоящему изобретению, имеет размер частиц в диапазоне от 100-200 микрон.

Другие адсорбенты, такие как адсорбенты в серии адсорбентов АМБЕРЛИТ XAD, содержащие гидрофобные макросетчатые зерна смолы с размером частиц в диапазоне 100-200 микрон, также могут быть эффективны в способах согласно настоящему изобретению. Более того, различные варианты АМБЕРЛИТОВ, такие как серия адсорбентов АМЕРХРОМ CG (AMERCHROM CG), используемые с размером частиц в диапазоне 100-200 микрон, также могут подходить для применения согласно настоящему изобретению.

Смолы промывают, например, водой или водным буфером с удалением несвязанного вещества из экстракта. Для удаления адсорбированных соединений может быть использован растворитель, такой как этилацетат или бутанол.

Элюированные соединения по существу очищены по сравнению с исходным веществом и могут быть дополнительно очищены, например, путем хроматографии и т.д., или могут быть напрямую использованы в представляющих интерес составах. Конечную композицию можно обогащать, фильтровать, подвергать диализу и т.д. с использованием способов, известных в данной области техники.

В некоторых вариантах реализации в соответствии с настоящим изобретением предложено соединение согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемая соль, биологически активный метаболит, сольват, гидрат, пролекарство, энантиомер или стереоизомер, по существу не содержащий другие соединения, встречающиеся в растительном материале, из которого его экстрагируют. В настоящем описании термин «по существу не содержащий» означает, что соединение состоит из значительно большей доли соединения согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли, биологически активного метаболита, сольвата, гидрата, пролекарства, энантиомера или стереоизомера по сравнению с соединением, встречающимся в растительном материале, из которого его экстрагируют, или его экстрактах.

В некоторых вариантах реализации в соответствии с настоящим изобретением предложено соединение согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемая соль, биологически активный метаболит, сольват, гидрат, пролекарство, энантиомер или стереоизомер в количестве от примерно 1 масс.% до примерно 99 масс.%.

В некоторых вариантах реализации получают соединение согласно настоящему изобретению с химической чистотой более примерно 2%. В некоторых вариантах реализации получают соединение согласно настоящему изобретению с химической чистотой более примерно 10%. В некоторых вариантах реализации получают соединение согласно настоящему изобретению с химической чистотой более примерно 20%. В некоторых вариантах реализации получают соединение согласно настоящему изобретению с химической чистотой более примерно 30%. В некоторых вариантах реализации получают соединение согласно настоящему изобретению с химической чистотой более примерно 40%. В некоторых вариантах реализации получают соединение согласно настоящему изобретению с химической чистотой более примерно 50%. В некоторых вариантах реализации получают соединение согласно настоящему изобретению с химической чистотой более примерно 75%. В некоторых вариантах реализации получают соединение согласно настоящему изобретению с химической чистотой более примерно 80%. В некоторых вариантах реализации получают соединение согласно настоящему изобретению с химической чистотой более примерно 85%. В некоторых вариантах реализации получают соединение согласно настоящему изобретению с химической чистотой более примерно 90%.

В некоторых вариантах реализации получают соединение согласно настоящему изобретению с химической чистотой от примерно 2% до 10%. В некоторых вариантах реализации получают соединение согласно настоящему изобретению с химической чистотой от примерно 10% до 30%. В некоторых вариантах реализации получают соединение согласно настоящему изобретению с химической чистотой от примерно 20% до примерно 40%. В некоторых вариантах реализации получают соединение согласно настоящему изобретению с химической чистотой от примерно 30% до примерно 50%. В некоторых вариантах реализации получают соединение согласно настоящему изобретению с химической чистотой от примерно 40% до примерно 60%. В некоторых вариантах реализации получают соединение согласно настоящему изобретению с химической чистотой от примерно 50% до примерно 70%. В некоторых вариантах реализации получают соединение согласно настоящему изобретению с химической чистотой от примерно 75% до 95%.

В других вариантах реализации соединение согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемая соль, биологически активный метаболит, сольват, гидрат, пролекарство, энантиомер или стереоизомер содержит не более примерно 50 процентов площади ВЭЖХ других компонентов растительного материала, из которого его экстрагируют, относительно общей площади хроматограммы ВЭЖХ. В других вариантах реализации соединение согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемая соль, биологически активный метаболит, сольват, гидрат, пролекарство, энантиомер или стереоизомер содержит не более примерно 25 процентов площади ВЭЖХ других компонентов растительного материала, из которого его экстрагируют, относительно общей площади хроматограммы ВЭЖХ. В других вариантах реализации соединение согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемая соль, биологически активный метаболит, сольват, гидрат, пролекарство, энантиомер или стереоизомер содержит не более примерно 20 процентов площади ВЭЖХ других компонентов растительного материала, из которого его экстрагируют, относительно общей площади хроматограммы ВЭЖХ. В других вариантах реализации соединение согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемая соль, биологически активный метаболит, сольват, гидрат, пролекарство, энантиомер или стереоизомер содержит не более примерно 15 процентов площади ВЭЖХ других компонентов растительного материала, из которого его экстрагируют, относительно общей площади хроматограммы ВЭЖХ. В других вариантах реализации соединение согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемая соль, биологически активный метаболит, сольват, гидрат, пролекарство, энантиомер или стереоизомер содержит не более примерно 10 процентов площади ВЭЖХ других компонентов растительного материала, из которого его экстрагируют, относительно общей площади хроматограммы ВЭЖХ. В других вариантах реализации соединение согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемая соль, биологически активный метаболит, сольват, гидрат, пролекарство, энантиомер или стереоизомер содержит не более примерно 9 процентов площади ВЭЖХ других компонентов растительного материала, из которого его экстрагируют, относительно общей площади хроматограммы ВЭЖХ. В других вариантах реализации соединение согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемая соль, биологически активный метаболит, сольват, гидрат, пролекарство, энантиомер или стереоизомер содержит не более примерно 8 процентов площади ВЭЖХ других компонентов растительного материала, из которого его экстрагируют, относительно общей площади хроматограммы ВЭЖХ. В других вариантах реализации соединение согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемая соль, биологически активный метаболит, сольват, гидрат, пролекарство, энантиомер или стереоизомер содержит не более примерно 7 процентов площади ВЭЖХ других компонентов растительного материала, из которого его экстрагируют, относительно общей площади хроматограммы ВЭЖХ. В других вариантах реализации соединение согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемая соль, биологически активный метаболит, сольват, гидрат, пролекарство, энантиомер или стереоизомер содержит не более примерно 6 процентов площади ВЭЖХ других компонентов растительного материала, из которого его экстрагируют, относительно общей площади хроматограммы ВЭЖХ. В других вариантах реализации соединение согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемая соль, биологически активный метаболит, сольват, гидрат, пролекарство, энантиомер или стереоизомер содержит не более примерно 5 процентов площади ВЭЖХ других компонентов растительного материала, из которого его экстрагируют, относительно общей площади хроматограммы ВЭЖХ. В некоторых вариантах реализации указанный растительный источник представляет собой гранат обыкновенный.

Кроме того, соединения согласно настоящему изобретению могут быть получены полусинтетическими способами, используя в качестве исходных веществ другие соединения, встречающиеся в экстрактах. Это можно осуществлять путем либо химического, либо биологического превращения выделенного соединения или фракции экстракта, или смеси соединений. Химическое превращение можно осуществлять путем, но не ограничиваясь ими, воздействия температурой, рН и/или действия различными растворителями. Биологическое превращение можно осуществлять путем, но не ограничиваясь ими, обработки выделенного соединения или фракции экстракта, или смеси соединений растительной тканью, экстрактами растительной ткани, другими микробиологическими организмами или выделенным ферментом любого организма.

Экстракты

Один их аспектов настоящего изобретения относится к экстракту, содержащему указанное соединение или соединения, или их фармацевтически приемлемые соли, биологически активные метаболиты, сольваты, гидраты, пролекарства, энантиомеры или стереоизомеры.

Другой аспект настоящего изобретения относится к экстракту, содержащему от примерно 1% до примерно 10% указанного соединения или соединений, или их фармацевтически приемлемых солей, биологически активных метаболитов, сольватов, гидратов, пролекарств, энантиомеров или стереоизомеров.

Другой аспект настоящего изобретения относится к экстракту, содержащему от примерно 10% до примерно 20% указанного соединения или соединений, или их фармацевтически приемлемых солей, биологически активных метаболитов, сольватов, гидратов, пролекарств, энантиомеров или стереоизомеров.

Другой аспект настоящего изобретения относится к экстракту, содержащему от примерно 20% до примерно 30% указанного соединения или соединений, или их фармацевтически приемлемых солей, биологически активных метаболитов, сольватов, гидратов, пролекарств, энантиомеров или стереоизомеров.

Другой аспект настоящего изобретения относится к экстракту или композиции, содержащей от примерно 30% до примерно 40% указанного соединения или соединений, или их фармацевтически приемлемых солей, биологически активных метаболитов, сольватов, гидратов, пролекарств, энантиомеров или стереоизомеров.

Другой аспект настоящего изобретения относится к экстракту или композиции, содержащей от примерно 40% до примерно 50% указанного соединения или соединений, или их фармацевтически приемлемых солей, биологически активных метаболитов, сольватов, гидратов, пролекарств, энантиомеров или стереоизомеров.

Другой аспект настоящего изобретения относится к экстракту или композиции, содержащей от примерно 50% до примерно 60% указанного соединения или соединений, или их фармацевтически приемлемых солей, биологически активных метаболитов сольватов, гидратов, пролекарств, энантиомеров или стереоизомеров.

Другой аспект настоящего изобретения относится к экстракту или композиции, содержащей от примерно 60% до примерно 70% указанного соединения или соединений, или их фармацевтически приемлемых солей, биологически активных метаболитов, сольватов, гидратов, пролекарств, энантиомеров или стереоизомеров.

Другой аспект настоящего изобретения относится к экстракту или композиции, содержащей от примерно 70% до примерно 80% указанного соединения или соединений, или их фармацевтически приемлемых солей, биологически активных метаболитов, сольватов, гидратов, пролекарств, энантиомеров или стереоизомеров.

Другой аспект настоящего изобретения относится к экстракту или композиции, содержащей от примерно 80% до примерно 90% указанного соединения или соединений, или их фармацевтически приемлемых солей, биологически активных метаболитов, сольватов, гидратов, пролекарств, энантиомеров или стереоизомеров.

Другой аспект настоящего изобретения относится к экстракту или композиции, содержащей от примерно 90% до примерно 95% указанного соединения или соединений, или их фармацевтически приемлемых солей, биологически активных метаболитов, сольватов, гидратов, пролекарств, энантиомеров или стереоизомеров.

Другой аспект настоящего изобретения относится к экстракту или композиции, содержащей от примерно 95% до примерно 99% указанного соединения или соединений, или их фармацевтически приемлемых солей, биологически активных метаболитов, сольватов, гидратов, пролекарств, энантиомеров или стереоизомеров.

В некоторых вариантах реализации указанный экстракт представляет собой экстракт граната обыкновенного.

Композиции

Соединения и экстракты согласно настоящему изобретению можно применять для получения лекарственных препаратов, нутрицевтиков, лекарственных средств растительного происхождения, лекарственных средств на основе трав, добавки к продукту питания, функциональных продуктов питания, медицинских продуктов питания, пищевых продуктов, косметических средств, напитков и т.п.

Соединения и/или экстракты согласно настоящему изобретению могут быть получены в виде композиции с фармацевтически приемлемым носителем. Указанные лекарственные формы содержат физиологически приемлемые носители, которые по своей природе нетоксичны и не обладают терапевтическим действием. Примеры указанных носителей включают растительные белки, соевые белки, ионообменные вещества, софт-гели, масла, оксид алюминия, стеарат алюминия, лецитин, сывороточные белки, такие как сывороточный альбумин человека, буферные вещества, такие как фосфаты, глицин, сорбиновая кислота, сорбат калия, смеси неполных глицеридов насыщенных растительных жирных кислот, воду, соли или электролиты, такие как протаминсульфат, динатрийгидрофосфат, дикалийгидрофосфат, хлорид натрия, соли цинка, коллоидный диоксид кремния, трисиликат магния, поливинилпирролидон, вещества на основе целлюлозы и ПЭГ. Носители для топических лекарственных форм и лекарственных форм на основе геля включают полисахариды, такие как натрийкарбоксиметилцеллюлоза или метилцеллюлоза, поливинилпирролидон, полиакрилаты, полиоксиэтилен-полиоксипропиленовые блок-сополимеры, ПЭГ и древесные восковые спирты. Для всех типов введения подходящим образом применяют традиционные депо-формы. Указанные формы включают, например, микрокапсулы, нанокапсулы, липосомы, пластыри, ингаляционные формы, спреи для носа, подъязычные таблетки и препараты с замедленным высвобождением.

В некоторых вариантах реализации соединения и/или экстракты могут быть получены в указанных носителях в концентрации от примерно 0,01 мкг/мл до примерно 200 мг/мл. В некоторых вариантах реализации соединения и/или экстракты могут быть получены в указанных носителях в концентрации от примерно 1 мкг/мл до примерно 250 мкг/мл. В некоторых вариантах реализации соединения и/или экстракты могут быть получены в указанных носителях в концентрации от примерно 250 мкг/мл до примерно 500 мкг/мл. В некоторых вариантах реализации соединения и/или экстракты могут быть получены в указанных носителях в концентрации от примерно 500 мкг/мл до примерно 750 мкг/мл. В некоторых вариантах реализации соединения и/или экстракты могут быть получены в указанных носителях в концентрации от примерно 750 мкг/мл до примерно 1 мг/мл. В некоторых вариантах реализации соединения и/или экстракты могут быть получены в указанных носителях в концентрации от примерно 1 мг/мл до примерно 25 мг/мл. В некоторых вариантах реализации соединения и/или экстракты могут быть получены в указанных носителях в концентрации от примерно 25 мг/мл до примерно 50 мг/мл. В некоторых вариантах реализации соединения и/или экстракты могут быть получены в указанных носителях в концентрации от примерно 50 мг/мл до примерно 100 мг/мл. В некоторых вариантах реализации соединения и/или экстракты могут быть получены в указанных носителях в концентрации от примерно 100 мг/мл до примерно 125 мг/мл. В некоторых вариантах реализации соединения и/или экстракты могут быть получены в указанных носителях в концентрации от примерно 125 мг/мл до примерно 150 мг/мл, В некоторых вариантах реализации соединения и/или экстракты могут быть получены в указанных носителях в концентрации от примерно 150 мг/мл до примерно 175 мг/мл. В некоторых вариантах реализации соединения и/или экстракты могут быть получены в указанных носителях в концентрации от примерно 175 мг/мл до примерно 200 мг/мл.

В некоторых вариантах реализации соединения, композиции и/или экстракты согласно настоящему изобретению могут быть комбинированы с лекарственными средствами на основе трав. Представляющие интерес лекарственные средства на основе трав включают, но не ограничиваются ими, активные фракции некоторых растительных препаратов, таких как крапива (крапива двудомная (Urtica dioica)), куркума (куркума длинная (Curcuma longa)), чай; продукты морских или наземных животных, например, биологически активные липиды новозеландского зеленого губчатого моллюска (Perna canaliculus) или эму (Dromaius nova hollandiae).

В некоторых вариантах реализации соединения, композиции и/или экстракты согласно настоящему изобретению могут быть получены в виде лекарственных средств растительного происхождения. В настоящем описании термин «лекарственное средство растительного происхождения» представляет собой продукт, состоящий из веществ растительного происхождения, которые могут включать растительные вещества, водоросли, макроскопические грибки или их комбинации, который предназначен для применения в диагностике, излечении, смягчении, лечении или предупреждении заболевания у людей. В некоторых вариантах реализации лекарственное средство растительного происхождения может быть доступно в виде (но не ограничено ими) раствора (например, чай), порошка, таблетки, капсулы, эликсира, топического средства или инъекции.

В некоторых вариантах реализации соединения, композиции и/или экстракты согласно настоящему изобретению могут быть получены в виде нутрицевтиков. Представляющие интерес составы нутрицевтиков включают продукты питания для применения в ветеринарии или у людей, включая батончики для здорового питания, напитки и добавки к напиткам, и т.п.Данные продукты усилены включением биологически активного соединения, композиции и/или экстракта согласно настоящему изобретению. Например, при лечении нейродегенеративных заболеваний, таких как болезнь Альцгеймера, обычный рацион питания пациента может быть дополнен составом нутрицевтиков, принимаемым регулярно. Указанные нутрицевтики могут содержать или не содержать калории.

В настоящем описании термин «нутрицевтическая композиция» включает продукт питания, пищевой продукт, диетическую добавку, питательную добавку или композицию добавок для продукта питания или пищевого продукта. Таким образом, в другом варианте реализации настоящее изобретение относится к нутрицевтику, при этом указанный нутрицевтик представляет собой продукт питания, пищевой продукт, диетическую добавку, питательную добавку или композицию добавок для продукта питания или пищевого продукта.

В настоящем описании термин «продукт питания» относится к любой пище или корму, подходящему для потребления людьми или животными. Продукт питания может представлять собой готовый и упакованный продукт питания (например, майонез, заправка к салату, хлеб или сыр) или корм для животных (например, экструдированный и гранулированный корм для животных, грубый смешанный корм или пищевая композиция для домашних животных). В настоящем описании термин «пищевой продукт» относится к любому веществу, пригодному для потребления человеком или животным. Продукты питания или пищевые продукты, например, представляют собой напитки, такие как безалкогольные и алкогольные напитки, а также жидкий состав для добавления в питьевую воду и жидкую пищу, безалкогольные напитки представляют собой, например, прохладительные напитки, спортивные напитки, фруктовые соки, такие как, например, апельсиновый сок. яблочный сок и грейпфрутовый сок; лимонады, чаи, ароматизированные напитки, молоко, заменители молока и другие молочные напитки, такие как, например, йогуртовые напитки, и диетические напитки. В другом варианте реализации продукты питания или пищевые продукты относятся к твердым или полужидким продуктам питания, содержащим композицию согласно настоящему изобретению. Данные формы могут включать, но не ограничиваются ими, хлебобулочные изделия, такие как батончики, торты, печенье, пудинги, молочные продукты, кондитерские изделия, закуски или замороженные кондитерские изделия, или новинки (например, мороженое, молочные коктейли), готовые замороженные блюда, сладости, закуски (например, чипсы), жидкую пищу, такую как супы, пастообразные продукты, соусы, заправки к салатам, готовые мясные продукты, сыр, йогурт и любые другие продукты, содержащие жир или масло, и компоненты пищевых продуктов (например, пшеничная мука). Термин «продукты питания» или «пищевые продукты» также включает функциональные продукты питания и готовые продукты питания, при этом последние относятся к любому заранее упакованному продукту питания, одобренному для потребления человеком.

В некоторых вариантах реализации нутрицевтический состав может дополнительно содержать куркумин или катехины чая, такие как галлат эпигаллокатехина (EGCG), L-тианины и ресвератрол. В некоторых вариантах реализации нутрицевтический состав может содержать экстракты ягоды асаи, черники, клюквы, ежевики, малины, бузины, зверобоя, гинкго билобы, кавы, какао, винных сортов винограда, экстракты виноградных косточек, экстракты сои, фитоэстрогены сои или комбинации указанных веществ.

В некоторых вариантах реализации соединения, композиции и/или экстракты согласно настоящему изобретению могут быть получены в виде диетических добавок. Диетические добавки согласно настоящему изобретению могут быть доставлены в любом подходящем формате. В некоторых вариантах реализации диетические добавки приготавливают для пероральной доставки. Компоненты диетической добавки согласно настоящему изобретению содержатся в приемлемых наполнителях и/или носителях для перорального потребления. Фактическая форма носителя и, таким образом, самой диетической добавки, не имеет критического значения. Носитель может представлять собой жидкость, гель, желатиновую капсулу, капсулу, порошок, твердую таблетку (с покрытием или без покрытия), чай и т.п.диетическая добавка предпочтительно находится в форме таблетки или капсулы и наиболее предпочтительно в форме твердой (с оболочкой) желатиновой капсулы. Подходящие наполнители и/или носители включают мальтодекстрин, карбонат кальция, дикальцийфосфат, трикальцийфосфат, микрокристаллическую целлюлозу, декстрозу, рисовую муку, стеарат магния, стеариновую кислоту, кроскармеллозу натрия, натрия крахмала гликолят, кросповидон, сахарозу, растительные камеди, лактозу, метилцеллюлозу, повидон, карбоксиметилцеллюлозу, кукурузный крахмал и т.п.(включая смеси указанных веществ). Типичные носители включают карбонат кальция, стеарат магния, мальтодекстрин и смеси указанных веществ. Различные компоненты и наполнитель и/или носитель смешивают и формуют с получением необходимой формы с применением традиционных технологий. На таблетку или капсулу согласно настоящему изобретению может быть нанесено энтеросолюбильное покрытие, растворяющееся при pH примерно от 6,0 до 7,0. Подходящее энтеросолюбильное покрытие, растворяющееся в тонком кишечнике, а не в желудке, представляет собой ацетатфталат целлюлозы. Дополнительное подробное описание технологий получения и введения можно найти в последнем издании Remington's Pharmaceutical Sciences (Maack Publishing Co., Easton, Pa.).

В других вариантах реализации диетическую добавку получают в виде порошка или жидкости, подходящей для добавления потребителем в продукт питания или напиток. Например, в некоторых вариантах реализации диетическая добавка может быть введена индивидууму в форме порошка, например, для использования путем смешивания с напитком или путем перемешивания с полужидким продуктом питания, таким как пудинг, топпинг, соус, пюре, каша или заправка к салатам, например, или путем иного добавления в пищу; например, заключенная в крышки контейнеров для пищевого продукта или напитка для высвобождения непосредственно перед потреблением. Диетическая добавка может содержать один или более инертных компонентов, в частности, если необходимо ограничивать количество калорий, добавляемых в рацион питания посредством указанной диетической добавки. Например, пищевая добавка согласно настоящему изобретению также может содержать дополнительные компоненты, включая, например, травы, витамины, минералы, усилители, красители, подсластители, ароматизаторы, инертные компоненты и т.п.

В некоторых вариантах реализации диетические добавки дополнительно содержат витамины и минералы, включая, но не ограничиваясь ими, фосфат или ацетат кальция, трехосновный; фосфат калия, двухосновный; сульфат или оксид магния; соль (хлорид натрия); хлорид или ацетат калия; аскорбиновую кислоту; ортофосфат железа (III); ниацин; никотинамид; сульфат или оксид цинка; пантотенат кальция; глюконат меди; рибофлавин; бета-каротин; гидрохлорид пиридоксина; мононитрат тиамина; фолиевую кислоту; биотин; хлорид или пиколонат хрома; йодид калия; селенат натрия; молибдат натрия; филлохинон; витамин D3; цианокобаламин; селенит натрия; сульфат меди; витамин А: витамин С; инозит; йодид калия; L-триптофан, никотиновую кислоту, никотинамид, никотинамидрибозид; жирную кислоту омега-3 (такую как DHA, ЕРА и ALA); антоцианы; изофлавоны; холин; уридинмонофосфат (УМФ); фосфолипиды сои; фосфатидилсерин; S-аденозилметионин (SAM); ацетил-L-карнитин (ALCAR); соли магния; ацетат магния; хлорид магния; цитрат магния; лактат магния; глюконат магния; и пидолат магния.

В других вариантах реализации согласно настоящему изобретению предложены питательные добавки (например, энергетические батончики или батончики, или напитки, представляющие собой заменители пищи), содержащие соединение, композицию и/или экстракт согласно настоящему изобретению. Питательная добавка может служить в качестве заменителя пищи или закуски и, как правило, обеспечивает калориями. Однако, как указано выше, также могут быть использованы добавки, не содержащие калории. В некоторых вариантах реализации питательные добавки обеспечивают углеводами, белками и жирами в сбалансированных количествах. Питательная добавка может дополнительно содержать углевод, простой, со средней длиной цепи, или полисахариды, или их комбинацию. Простой сахар может быть подобран в отношении необходимых органолептических свойств. Сырой кукурузный крахмал является одним из примеров сложного углевода. Если необходимо, чтобы он сохранял структуру с высокой молекулярной массой, его следует включать только в пищевые составы или их части, которые не готовят или не подвергают тепловой обработке, т.к. тепло будет расщеплять сложный углевод на простые углеводы, при этом указанные простые углеводы представляют собой моно- или дисахариды. Питательная добавка содержит, в одном из вариантов реализации, комбинации источников углевода с тремя уровнями длины цепей (простые, средние и сложные; например, сахароза, мальтодекстрины и сырой кукурузный крахмал).

Источники белка для включения в питательную добавку согласно настоящему изобретению могут представлять собой любой подходящий белок, используемый в питательных составах, и могут включать сывороточной белок молока, концентрат сывороточного белка молока, сухую молочную сыворотку, яйцо, соевую муку, соевый белок соевого молока, изолят соевого белка, казеинат (например, казеинат натрия, казеинат натрия кальция, казеинат кальция, казеинат калия), белок животного и растительного происхождения, и их гидролизаты или смеси. Соевый белок имеет почти идеальный PDCAA, коэффициент усвояемости белка, скорректированный по аминокислотному составу (PDCAAS) и по данному критерию соевый белок является питательным эквивалентом мяса и яиц для роста и здоровья человека. Данные белки имеют высокую биологическую ценность; т.е. они содержат высокую долю незаменимых аминокислот. См. Modern Nutrition in Health and Disease, eighth edition, Lea & Febiger, publishers, 1986. в частности, том 1, страницы 30-32. Питательная добавка также может содержать другие компоненты, такие как один из или комбинация других витаминов, минералов, антиоксидантов, волокна и других диетических добавок (например, белок, аминокислоты, холин, лецитин, омега-3 жирные кислоты и другие, рассмотренные в настоящем описании). Выбор одного или нескольких данных компонентов является вопросом приготовления состава, внешнего вида, предпочтений потребителя и конечного потребителя. Количества данных компонентов, добавляемых в пищевые добавки согласно настоящему изобретению, известны специалисту. Дополнительные витамины и минералы, которые могут быть добавлены, включают, но не ограничиваются ими, фосфат или ацетат кальция, трехосновный; фосфат калия, двухосновный; сульфат или оксид магния; соль (хлорид натрия); хлорид или ацетат калия; аскорбиновую кислоту; ортофосфат железа (III); антоцианы; никотинамидрибозид; соли магния; никотинамид; сульфат или оксид цинка; пантотенат кальция; глюконат меди; рибофлавин; бета-каротин; гидрохлорид пиридоксина; мононитрат тиамина; фолиевую кислоту; биотин; хлорид или пиколонат хрома; йодид калия; селенат натрия; молибдат натрия; филлохинон; витамин D3; цианокобаламин; селенит натрия; сульфат меди; витамин А; витамин С; инозит; йодид калия.

Питательная добавка может быть получена в различных формах и множеством способов получения. В одном из вариантов реализации для получения пищевого батончика готовят жидкие компоненты; сухие компоненты добавляют с жидкими компонентами в миксер и смешивают до получения теста; указанное тесто помещают в экструдер и экструдируют; экструдированное тесто разрезают с получением подходящих длин; и продукт охлаждают. Батончики могут содержать другие питательные вещества и наполнители для усиления вкуса помимо компонентов, в частности, перечисленных в настоящем описании.

Для специалиста в данной области техники очевидно, что другие компоненты могут быть добавлены к компонентам, указанным в настоящем описании, например, наполнители, эмульгаторы, консерванты для обработки или получения питательной добавки.

Кроме того, ароматизаторы, красители, специи, орехи и т.п., могут быть включены в составы, указанные в настоящем описании. Ароматизаторы могут находиться в форме ароматизированных экстрактов, эфирных масел, шоколадных ароматизаторов, ароматизатора арахисовое масло, крошек печенья, хрустящего риса, ванили или любого коммерчески доступного ароматизатора. Примеры подходящего ароматизатора включают, но не ограничиваются ими, чистый экстракт аниса, имитирующий экстракт банана, имитирующий экстракт вишни, шоколадный экстракт, чистый экстракт лимона, чистый экстракт апельсина, чистый экстракт мяты, имитирующий экстракт ананаса, имитирующий экстракт рома, имитирующий экстракт клубники или чистый экстракт ванили; или эфирные масла, такие как мелиссовое масло, лавровое масло, бергамотовое масло, кедровое масло, масло грецкого ореха, вишневое масло, коричное масло, гвоздичное масло или масло перечной мяты.

Эмульгаторы могут быть добавлены для стабильности составов. Примеры подходящих эмульгаторов включают, но не ограничиваются ими, лецитин (например, яйца или сои) и/или моно- и диглицериды. Другие эмульгаторы очевидны специалисту в данной области техники и выбор подходящего эмульгатора (эмульгаторов) будет отчасти зависеть от состава и конечного продукта. Консерванты также могут быть добавлены в составы для продления срока годности продукта. Например, используют консерванты, такие как сорбат калия, сорбат натрия, бензоат калия, бензоат натрия или кальций-динатриевая соль ЭДТА.

Помимо углеводов, описанных выше, составы могут содержать натуральные или искусственные (предпочтительно низкокалорийные) подсластители, например, сахариды, цикламаты, аспартамин, аспартам, ацесульфам К и/или сорбит. Указанные искусственные подсластители могут быть необходимы, если питательная добавка предназначена для потребления индивидуумом с избыточным весом или ожирением, или индивидуумом с диабетом II типа, склонным к гипергликемии.

Более того, поливитаминная и минеральная добавка может быть добавлена в составы согласно настоящему изобретению для получения подходящего количества необходимого питательного вещества, которое отсутствует в некоторых рационах питания. Указанная поливитаминная и минеральная добавка также может подходить для предупреждения заболеваний и защиты от потерь и дефицитов питательных веществ, обусловленных образом жизни.

Доза и соотношения соединения (соединений) согласно настоящему изобретению, вводимых посредством указанных составов, конечно, будут варьироваться в зависимости от известных факторов, таких как физиологические характеристики конкретной композиции и режим и способ ее введения; возраст, состояние здоровья и масса тела реципиента; характер и степень симптомов; вид сопутствующего лечения; частота лечения; и желаемый эффект, который может быть определен экспертом в данной области с помощью обычных исследований или с помощью обычного представления относительно получения нутрицевтических композиций.

В некоторых вариантах реализации состав содержит в одной порции количество от 1 мг до 10000 мг активного компонента (компонентов), например, соединения или соединений согласно настоящему изобретению. В некоторых вариантах реализации состав содержит в одной порции количество от 1 мг до 2500 мг активного компонента (компонентов). В некоторых вариантах реализации состав содержит в одной порции количество от 2500 мг до 5000 мг активного компонента (компонентов). В некоторых вариантах реализации состав содержит в одной порции количество от 5000 мг до 7500 мг активного компонента (компонентов). В некоторых вариантах реализации состав содержит в одной порции количество от 7500 мг до 10000 мг активного компонента (компонентов).

Для косметических составов соединения, композиции и/или экстракты согласно настоящему изобретению могут содержать полезные для кожи вещества. Указанные вещества включают эстрадиол; прогестерон; прегнанолон (pregnanalone); коэнзим Q10; метилсоланометан (methylsolanomethane) (MCM); пептид меди (экстракт меди); экстракт планктона (фитосома); гликолевую кислоту; койевую кислоту; аскорбилпальмитат; полностью-транс-ретинол; азелаиновую кислоту; салициловую кислоту; бропароэстрол (broparoestrol); эстрон; андростендион; андростандиолы и т.д. Стероиды, как правило, будут присутствовать в концентрации всего менее примерно 2% от массы композиции, тогда как другие полезные для кожи вещества могут присутствовать на более высоких уровнях, например, примерно от 10 до 15%.

Соединения, композиции и/или экстракты согласно настоящему изобретению могут содержать косметически приемлемый носитель для выполнения функции разбавителя, диспергатор или носитель для облегчения распределения при нанесении композиции на кожу. Носители, помимо или в дополнение к воде могут включать жидкие или твердые смягчающие вещества, растворители, увлажняющие вещества, загустители и порошки.

Косметически приемлемый носитель, как правило, будет составлять от 0,1% или 5% до 99,9%, предпочтительно от 25% до 80% от массы композиции и может при отсутствии других косметических вспомогательных веществ составлять баланс композиции.

В соответствии с настоящим изобретением соединение, композиция и/или экстракт согласно настоящему изобретению могут быть получены в виде фармацевтических композиций, таких как композиции, которые, в частности, могут подходить для лечения нейродегенеративных заболеваний. Указанные композиции содержат соединение согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемую соль, биологически активный метаболит, сольват, гидрат, пролекарство, энантиомер или стереоизомер, и фармацевтически приемлемый носитель и/или наполнитель.

Композиции согласно настоящему изобретению могут быть введены различными способами в зависимости от предполагаемого применения, как хорошо известно в данной области техники. Например, если композиции согласно настоящему изобретению предназначены для перорального введения, они могут быть получены в виде таблеток, капсул, гранул, порошков или сиропов. В качестве альтернативы, составы согласно настоящему изобретению могут быть введены парентерально в виде инъекций (внутривенных, внутримышечных или подкожных), препаратов для капельного вливания или суппозиториев. Для применения способом введения через слизистую оболочку глаза, композиции согласно настоящему изобретению могут быть получены в виде глазных капель или глазных мазей. Данные составы могут быть получены традиционными способами и, при необходимости, композиции могут быть смешаны с любой традиционной добавкой, такой как наполнитель, связующее вещество, разрыхлитель, смазывающее вещество, корригирующее вещество, солюбилизирующий агент, суспензионное вспомогательное вещество, эмульгатор или вещество для нанесения покрытия.

В составах согласно настоящему изобретению смачивающие агенты, эмульгаторы и смазывающие вещества, такие как лаурилсульфат натрия и стеарат магния, а также красители, разделительные вещества, вещества для нанесения покрытия, подсластители, ароматизаторы и отдушки, консерванты и антиоксиданты могут присутствовать в полученных агентах.

Рассматриваемые составы могут подходить для перорального, назального, топического (включая трансбуккальное и сублингвальное), ректального, вагинального введения, введения посредством аэрозолей и/или парентерального введения. Составы могут быть удобно представлены в дозированной лекарственной форме и могут быть получены любыми способами, хорошо известными в области фармации. Количество композиции, которая может быть комбинирована с веществом-носителем для получения однократной дозы, будет варьироваться в зависимости от вылечиваемого субъекта и конкретного способа введения.

Способы получения данных составов включают этап приведения композиций согласно настоящему изобретению в ассоциацию с носителем и, возможно, одним или более дополнительными компонентами. В целом, составы получают путем равномерного и тщательного приведения агентов в ассоциацию с жидкими носителями или тонкоизмельченными твердыми носителями, или обоими, а затем, при необходимости, путем формования продукта.

Составы, подходящие для перорального введения, могут находиться в форме капсул, крахмальных капсул, пилюль, таблеток, пастилок (с использованием ароматизированной основы, как правило, сахарозы и камеди или трагаканта), порошков, гранул или в виде раствора, или суспензии в водной или неводной жидкости, или в виде жидкой эмульсии масло-в-воде или вода-в-масле, или в виде эликсира или сиропа, или в виде пастилок (с использованием инертной основы, такой как желатин и глицерин, или сахароза и камедь), при этом каждая из указанных форм содержит заранее определенное количество рассматриваемой композиции в качестве активного компонента. Композиции согласно настоящему изобретению также могут быть введены в виде болюса, электуария или пасты.

В твердых лекарственных формах для перорального введения (капсулах, таблетках, пилюлях, драже, порошках, гранулах и т.п.) рассматриваемая композиция находится в смеси с одним или более фармацевтически приемлемыми носителями, такими как цитрат натрия или дикальцийфосфат, и/или с любым из следующих веществ: (1) наполнители или сухие разбавители, такие как крахмалы, лактоза, сахароза, глюкоза, маннит и/или кремниевая кислота; (2) связующие вещества, такие как, например, карбоксиметилцеллюлоза, альгинаты, желатин, поливинилпирролидон, сахароза и/или камедь; (3) увлажняющие вещества, такие как глицерин; (4) разрыхлители, такие как агар-агар, карбонат кальция, картофельный или тапиоковый крахмал, альгиновая кислота, некоторые силикаты и карбонат натрия; 5) ингибиторы растворения, такие как парафин; (6) ускорители абсорбции, такие как соединения четвертичного аммония; (7) смачивающие агенты, такие как, например, ацетиловый спирт и моностеарат глицерина; (8) абсорбенты, такие как каолиновая и бентонитовая глина; (9) смазывающие вещества, такие как тальк, стеарат кальция, стеарат магния, твердые полиэтиленгликоли, лаурилсульфат натрия и смеси указанных соединений; и (10) красители. В случае капсул, таблеток и пилюль композиции также могут содержать буферные агенты. Твердые композиции схожего типа также можно применять в качестве наполнителей в мягких и твердых желатиновых капсулах с применением таких наполнителей, как лактоза или молочный сахар, а также высокомолекулярные полиэтиленгликоли и т.п.

Таблетка может быть получена путем прессования или формования, возможно совместно с одним или более дополнительными компонентами. Прессованные таблетки могут быть получены с использованием связующего вещества (например, желатина или гидроксипропилметилцеллюлозы), смазывающего вещества, инертного разбавителя, консерванта, разрыхлителя (например, натрия крахмала гликолята или сшитой натрийкарбоксиметилцеллюлозы), поверхностно-активного или диспергирующего вещества. Формованные таблетки могут быть получены путем формования в подходящем устройстве смеси рассматриваемой композиции, смоченной инертным жидким разбавителем. Таблетки и другие твердые лекарственные формы, такие как драже, капсулы, пилюли и гранулы, могут представлять собой таблетки с рисками или могут быть получены с покрытиями и оболочками, такими как энтеросолюбильные покрытия и другие покрытия, хорошо известные в области получения фармацевтических препаратов.

Жидкие лекарственные формы для перорального введения включают фармацевтически приемлемые эмульсии, микроэмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры. Помимо рассматриваемой композиции, указанные жидкие лекарственные формы могут содержать инертные разбавители, обычно применяемые в данной области техники, такие как, например, вода или другие растворители, солюбилизирующие агенты и эмульгаторы, такие как этиловый спирт, изопропиловый спирт, этилкарбонат, этилацетат, бензиловый спирт, бензилбензоат, пропиленгликоль, 1,3-бутиленгликоль, масла (в частности, хлопковое, арахисовое, кукурузное, масло ростков, оливковое, касторовое и кунжутное масло), глицерин, тетрагидрофуриловый спирт, полиэтиленгликоли и сорбитановые эфиры жирных кислот, и смеси указанных веществ.

Суспензии помимо рассматриваемой композиции могут содержать суспендирующие агенты такие как, например, этоксилированные изостеариловые спирты, полиоксиэтиленсорбит и сорбитановые эфиры, микрокристаллическая целлюлоза, метагидроксид алюминия, бентонит, агар-агар и трагакант, и смеси указанных веществ.

Составы для ректального или вагинального введения могут быть представлены в виде суппозитория, который может быть получен путем смешивания рассматриваемой композиции с одним или более подходящими нераздражающими наполнителями или носителями, включая, например, масло какао, полиэтиленгликоль, воск для суппозиторий или салицилат, и который является твердыми при комнатной температуре, но становится жидким при температуре тела, а, следовательно, будет плавиться в полости тела и высвобождать активный агент. Составы, подходящие для вагинального введения, также включают пессарии, тампоны, кремы, гели, пасты, пены или составы в виде спрея, содержащие указанные носители, которые, как известно в данной области техники, являются подходящими.

Лекарственные формы для трансдермального введения рассматриваемой композиции включают порошки, спреи, мази, пасты, кремы, лосьоны, гели, растворы, пластыри и ингаляционные препараты. Активный компонент может быть смешан в стерильных условиях с фармацевтически приемлемым носителем и любыми консервантами, буферами или пропеллентами, которые могут быть необходимы.

Помимо рассматриваемой композиции, указанные мази, пасты, кремы и гели могут содержать наполнители, такие как жиры животного и растительного происхождения, масла, воски, парафины, крахмал, трагакант, производные целлюлозы, полиэтиленгликоли, силиконы, бентониты, кремниевая кислота, тальк и оксид цинка или смеси указанных веществ.

Помимо рассматриваемой композиции, порошки и спреи могут содержать наполнители, такие как лактоза, тальк, кремниевая кислота, гидроксид алюминия, силикаты кальция и полиамидный порошок или смеси данных веществ. Спреи могут дополнительно содержать традиционные пропелленты, такие как хлорфторуглеводороды и летучие не содержащие заместители углеводороды, такие как бутан и пропан.

Композиции согласно настоящему изобретению в качестве альтернативы могут быть введены посредством аэрозоля. Это осуществляют путем получения водного аэрозоля, липосомального препарата или твердых частиц, содержащих соединение. Может быть использована неводная (например, с фторуглеродным пропеллентом) суспензия. Можно применять ультразвуковые распылители, т.к. они минимизируют подвергание агента сдвигу, который может приводить к распаду соединений, содержащихся в рассматриваемый композициях.

Обычно, водный аэрозоль получают путем получения водного раствора или суспензии рассматриваемой композиции совместно с традиционными фармацевтически приемлемыми носителями и стабилизаторами. Указанные носители и стабилизаторы варьируются в зависимости от требований конкретной рассматриваемой композиции, но, как правило, включают неионные поверхностно-активные вещества (Твины (Tweens), Плюроники® (Pluronics®) или полиэтиленгликоль), безопасные белки, такие как сывороточный альбумин, сорбитановые эфиры, олеиновую кислоту, лецитин, аминокислоты, такие как глицин, буферы, соли, сахара или сахарные спирты. Аэрозоли, как правило, получают из изотонических растворов.

Композиции согласно настоящему изобретению, подходящие для парентерального введения, содержат рассматриваемую композицию в комбинации с одним или более фармацевтически приемлемыми стерильными изотоническими водными или неводными растворами, дисперсиями, суспензиями или эмульсиями, или стерильными порошками, которые могут быть восстановлены с получением стерильных растворов или дисперсий для инъекций непосредственно перед применением, которые могут содержать антиоксиданты, буферы, бактериостаты, растворенные вещества, приводящие состав в состояние изотоничности с кровью предполагаемого реципиента, или суспендирующие агенты или загустители.

Примеры подходящих водных и неводных носителей, которые могут быть использованы в композициях согласно настоящему изобретению, включают воду, этанол, полиолы (такие как глицерин, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль и т.п.) и подходящие смеси указанных веществ, растительные масла, такие как оливковое масло, и органические эфиры для инъекций, такие как этилолеат. Подходящая текучесть может быть сохранена, например, путем применения материалов для покрытия, таких как лецитин, путем поддержания необходимого размера частиц в случае дисперсий и путем применения поверхностно-активных веществ.

В некоторых вариантах реализации композиции получают в виде таблетки, пилюли, капсулы или другого подходящего состава для приема внутрь с получением терапевтической дозы в 10 составах для приема внутрь или меньше. В другом примере терапевтическую дозу получают в 20, 15, 10, 5 или 3 составах для приема внутрь.

Композиции согласно настоящему изобретению могут находиться в форме дисперсного сухого порошка для доставки через легкие. Композиции сухих порошков могут быть получены способами, известными в данной области техники, такими как лиофилизация и размол на струйной мельнице, описанные в публикации международной заявки WO 91/16038 и описанные в патенте США 6921527, оба из которых включены в настоящее описание посредством ссылки. Композиция согласно настоящему изобретению может быть помещена в подходящий контейнер для дозы в количестве, достаточном для обеспечения субъекта лечением однократными дозами. Указанный контейнер для дозы может представлять собой контейнер, который подходит для помещения в подходящее устройство для ингаляции для обеспечения аэрозолизации композиции сухого порошка путем диспергирования в потоке газа с образованием аэрозоля, а затем удерживания полученного таким образом аэрозоля в камере с присоединенным загубником для последующего вдыхания субъектом, нуждающимся в лечении. Указанный контейнер для дозы включает любой контейнер, содержащий композицию, известный в данной области техники, такой как желатиновые или пластиковые капсулы со съемной частью, которая позволяет направлять поток газа (например, воздуха) в контейнер для диспергирования композиции сухого порошка. Примерами указанных контейнеров служат контейнеры, представленные в патенте США 4227522; патенте США 4192309; и патенте США 4105027. Подходящие контейнеры также включают контейнеры, используемые совместно с порошковым ингалятором марки Glaxo's Ventolin® Rotohaler или порошковым ингалятором марки Fison's Spinhaler®. Другой подходящий контейнер для однократных доз, обеспечивающий превосходную защиту от влаги, получают из ламината из алюминиевой фольги и пластика. Порошок на основе лекарственного средства помещают по массе или по объему при пониженном давлении в формуемую фольгу и герметично закрывают покрывающим ламинатом из фольги и пластика. Указанный контейнер для использования с устройством для ингаляции порошка описан в патенте США 4778054 и его используют с Glaxo's Diskhaler® (патенты США 4627432; 4811731; и 5035237); всех четыре из указанных патентов США, приведенных в этом предложении, включены в настоящее описание посредством ссылки.

Термины «трансдермальная система доставки», «трансдермальный пластырь» или «пластырь» относятся к адгезивной системе, помещаемой на кожу для доставки дозы лекарственного средства (средств) с замедленным высвобождением путем перехода из указанной лекарственной формы через кожу для распространения посредством большого круга кровообращения. Трансдермальные пластыри представляют собой общепринятую технологию, используемую для доставки широкого спектра лекарственных средств, включая, но не ограничиваясь ими, скополамин от укачивания, нитроглицерин для лечения стенокардии, клофелин от гипертонии, эстрадиол при показаниях в периоде постменопаузы и никотин для прекращения курения. Пластыри, подходящие для применения согласно настоящему изобретению, включают, но не ограничиваются ими, (1) пластырь матричного типа; (2) пластырь резервуарного типа; (3) многослойный пластырь типа «лекарственное средство в адгезиве»; и (4) цельный пластырь типа «лекарственное средство в адгезиве»; TRANSDERMAL AND TOPICAL DRUG DELIVERY SYSTEMS, стр.249-297 (Tapash К. Ghosh et al. eds, 1997), включенный в настоящее описание посредством ссылки. Данные пластыри хорошо известны в данной области техники и, в целом, коммерчески доступны.

В некоторых вариантах реализации фармацевтическая композиция содержит любое рассматриваемое соединение и/или экстракт, полученный в количестве, достаточном для лечения умеренного когнитивного нарушения, болезни Альцгеймера, улучшения долговременной памяти, кратковременной памяти, декларативной памяти, процедурной памяти или когнитивных процессов, таких как внимание, исполнительная функция, время реакции или процесс обучения у пациента на статистически значимую величину при оценке стандартизированным тестом на определение показателей.

В некоторых вариантах реализации фармацевтическая композиция содержит одно или более рассматриваемых соединений и/или экстрактов, полученных в количестве, достаточном для улучшения долговременной памяти у пациента на статистически значимую величину при оценке посредством одного или более из следующих тестов: Тест Рея на слухоречевое заучивание (Rey Auditory and Verbal Learning Test, RAVLT), Кембриджская батарея тестов нейропсихологической оценки (Cambridge Neuropsychological Test Automated Battery, CANTAB); Детская шкала оценки памяти (Children's Memory Scale, CMS); Тест для оценки контекстуальной памяти (Contextual Memory Test); Тест для оценки непрерывной опознающей памяти (Continuous Recognition Memory Test, CMRT); Нейропсихологическая шкала памяти Денманна (Denman Neuropsychology Memory Scale); Оценка памяти (Fuld Object Memory Evaluation, FOME); Тест «Память на фигуры» Грэхема-Кендалла (Graham-Kendall Memory for Designs Test); Тест для оценки памяти (Guild Memory Test); Батарея тестов обучения и памяти (Learning and Memory Battery, LAMB); Клиническая шкала самооценки памяти (Memory Assessment Clinic Self-Rating Scale, MAC-S); Шкалы оценки памяти (Memory Assessment Scales, MAS); Тест Рендта для оценки памяти (Randt Memory Test); Тест для оценки опознающей памяти (Recognition Memory Test, RMT); Поведенческий тест оценки памяти Ривермид (Rivermead Behavioral Memory Test); Вариант Рассела шкалы памяти Векслера (Russell's Version of the Wechsler Memory Scale, RWMS); Тест для оценки памяти и обучения (Test of Memory and Learning, TOMAL); Шкала памяти Вермонта (Vermont Memory Scale, VMS); Шкала памяти Векслера (Wechsler Memory Scale); и Батарея оценки памяти и обучения (Wide Range Assessment of Memory and Learning, WRAML); Ассоциация имя-фамилия (First-Last Name Association) (Youngjohn J. R., et al. Archives of Clinical Neuropsychology 6: 287-300 (1991)); Ассоциация имя-человек (Name-Face Association); Пересмотренная шкала памяти Векслера (Wechsler Memory Scale-Revised); (Wechsler, D, Wechsler Memory Scale-Revised Manual, NY, N.Y., The Psychological Corp. (1987)); Калифорнийский тест вербального научения - второе издание (California Verbal Learning Test-Second Edition) (Delis, D.C., et al., The Californian Verbal Learning Test, Second Edition, Adult Version, Manual, San Antonio, Тех.: The Psychological Corporation (2000)); Распознавание лиц (Facial Recognition) (с задержкой, несоответствие образцу (delayed non-matching to sample)); Компьютеризированная система оценки когнитивных процессов (Cognitive Drug Research (CDR) Computerized Assessment Battery-Wesnes;); Тест Бушке на селективное запоминание (Buschke's Selective Reminder Test) (Buschke, H., et al., Neurology 24: 1019-1025 (1974)); Тест набора номера телефона (Telephone Dialing Test); и Переработанный краткий зрительно-пространственный тест на запоминание (Brief Visuospatial Memory Test-Revised).

Наборы

В соответствии с настоящим изобретением также предложены наборы для удобного и эффективного осуществления способов согласно настоящему изобретению. Указанные наборы содержат любое рассматриваемое соединение, композицию и/или экстракт, и средство для облегчения соблюдения способов согласно настоящему изобретению. Указанные наборы обеспечивают удобные и эффективные средства для гарантии того, что вылечиваемый субъект принимает подходящее активное вещество в правильной дозировке надлежащим образом. Данные средства соблюдения в указанных наборах включают любое средство, облегчающее введение активных веществ в соответствии со способом согласно настоящему изобретению. Указанные средства соблюдения включают инструкции, упаковку и средства дозирования, и их комбинации. Компоненты набора могут быть упакованы либо для ручного, либо частично или полностью автоматизированного осуществления указанных способов. В других вариантах реализации, включающих наборы, настоящее изобретение предусматривает набор, содержащий композиции согласно настоящему изобретению и, возможно, инструкции по их применению.

Например, согласно настоящему изобретению также предложены наборы, содержащие по меньшей мере одну дозу рассматриваемого соединения, композиции и/или экстракта и часто много доз, и другие материалы для схемы лечения. Например, в одном из вариантов реализации набор согласно настоящему изобретению содержит достаточное количество рассматриваемой композиции на пять-тридцать дней и, возможно, устройство и вспомогательные материалы, необходимые для измерения одного или более показателей, относящихся к схеме лечения. В другом варианте реализации наборы согласно настоящему изобретению содержат все вещества и вспомогательные материалы, включая рассматриваемые композиции, для осуществления любых способов согласно настоящему изобретению. В еще одном варианте реализации наборы согласно настоящему изобретению, описанные выше, дополнительно содержат инструкции по применению и введению рассматриваемых композиций.

В одном из вариантов реализации настоящее изобретение представляет собой фармацевтический набор, содержащий одно или более рассматриваемых соединений, композиций и/или экстрактов в количестве, достаточном для улучшения долговременной памяти у пациента, фармацевтически приемлемый носитель и инструкции (письменные и/или иллюстрированные) по применению рассматриваемого соединения, композиции и/или экстракта для улучшения памяти.

Доза

Доза любого соединения, композиции и/или экстракта согласно настоящему изобретению будет варьироваться в зависимости от симптомов, возраста и массы тела пациента, характера и тяжести вылечиваемого расстройства, способа введения и формы рассматриваемой композиции. Любой из рассматриваемых составов может быть введен в однократной дозе или в виде разделенных доз. Эффективные дозы композиций согласно настоящему изобретению могут быть легко определены способами, известными специалисту в данной области техники, или как указано в настоящем описании. Доза может быть выбрана так, чтобы облегчать расстройство у субъекта таким образом, чтобы обеспечивать по меньшей мере частичное облегчение, если не полное облегчение. Специалист может определить данное количество, как указано в настоящем описании, а также с использованием других способов, известных в данной области техники.

Терапевтически эффективное количество (т.е. доза) соединения согласно настоящему изобретению может быть определена способами, известными в данной области техники. Терапевтически эффективные количества будут зависеть от возраста и от общего физиологического состояния пациента, способа введения и используемого фармацевтического состава. В некоторых вариантах реализации терапевтические дозы могут составлять от примерно 10 мг/сутки до 10000 мг/сутки, от примерно 100 мг/сутки до 2500 мг/сутки или от 250 мг до примерно 1000 мг/сутки. В других вариантах реализации могут быть использованы другие диапазоны, включая, например, 50-250 мг/сутки, 250-500 мг/сутки и 500-750 мг/сутки. Количество соединения, необходимое для профилактического лечения, называемое профилактически-эффективной дозой, в целом, такое же, что и описанное для терапевтического лечения.

В некоторых вариантах реализации вводят терапевтически низкую дозу соединения или композиции согласно настоящему изобретению. В некоторых вариантах реализации терапевтически эффективная доза составляет от примерно 50 мг/сутки до примерно 150 мг/сутки. В некоторых вариантах реализации терапевтическая доза составляет от примерно 10 мг/сутки до примерно 20 мг/сутки. В некоторых вариантах реализации терапевтическая доза составляет от примерно 20 мг/сутки до примерно 30 мг/сутки. В некоторых вариантах реализации терапевтическая доза составляет от примерно 30 мг/сутки до примерно 40 мг/сутки. В некоторых вариантах реализации терапевтическая доза составляет от примерно 40 мг/сутки до примерно 50 мг/сутки. В некоторых вариантах реализации терапевтическая доза составляет от примерно 50 мг/сутки до примерно 60 мг/сутки. В некоторых вариантах реализации терапевтическая доза составляет от примерно 60 мг/сутки до примерно 70 мг/сутки. В некоторых вариантах реализации терапевтическая доза составляет от примерно 70 мг/сутки до примерно 80 мг/сутки. В некоторых вариантах реализации терапевтическая доза составляет от примерно 80 мг/сутки до примерно 90 мг/сутки. В некоторых вариантах реализации терапевтическая доза составляет от примерно 90 мг/сутки до примерно 100 мг/сутки. В некоторых вариантах реализации терапевтическая доза составляет от примерно 100 мг/сутки до примерно 110 мг/сутки. В некоторых вариантах реализации терапевтическая доза составляет от примерно 110 мг/сутки до примерно 120 мг/сутки. В некоторых вариантах реализации терапевтическая доза составляет от примерно 120 мг/сутки до примерно 130 мг/сутки. В некоторых вариантах реализации терапевтическая доза составляет от примерно 130 мг/сутки до примерно 140 мг/сутки. В некоторых вариантах реализации терапевтическая доза составляет от примерно 140 мг/сутки до примерно 150 мг/сутки. Введение можно осуществлять один раз в сутки, дважды в сутки или чаще, и можно уменьшать во время поддерживающей фазы лечения заболевания или расстройства, например, один раз в два или три дня, вместо введения каждый день или дважды в день. Доза и частота введения будут зависеть от клинических признаков, подтверждающих поддержание фазы ремиссии при уменьшении или отсутствии по меньшей мере одного или более клинических признаков острой фазы, известных специалисту в данной области техники.

Может быть необходимо идентифицировать эффективную дозу или количество и любые возможные влияния на время введения состава для каждой конкретной композиции согласно настоящему изобретению. Это можно осуществлять путем проведения рутинного эксперимента, указанного в настоящем описании, с использованием одной или более групп животных, или в испытаниях с участием человека при необходимости. Эффективность любой рассматриваемой композиции и способа лечения может быть оценена путем введения указанной композиции и оценки влияния указанного введения путем измерения одного или более соответствующих показателей и сравнения значений данных показателей после лечения со значениями тех же показателей до лечения.

Точное время введения и количество любой конкретной рассматриваемой композиции, которое обеспечит наиболее эффективное лечение у данного пациента, будет зависеть от активности, фармакокинетики и биодоступности рассматриваемой композиции, физиологического состояния указанного пациента (включая возраст, пол, тип и стадию заболевания, общее физическое состояние, чувствительность к данной дозе и вид лекарственного препарата), способа введения и т.п.

Во время лечения субъекта за состоянием его или ее здоровья можно наблюдать путем измерения одного или более соответствующих показателей в заранее определенные моменты времени в течение периода лечения. Лечение, включая композицию, количества, время введения и состав, может быть оптимизировано в соответствии с результатами указанного наблюдения. Периодически можно проводить переоценку пациента с определением степени улучшения путем измерения тех же параметров. На основе данных переоценок можно осуществлять корректировку вводимого количества (количеств) рассматриваемой композиции и, возможно, времени введения.

Лечение можно начинать с более низких доз, которые меньше оптимальной дозы соединения. Затем дозу можно повышать маленькими приращениями до достижения оптимального терапевтического эффекта.

Применение рассматриваемых композиций может снижать необходимую дозу каждого индивидуального агента, содержащегося в указанных композициях, т.к. начало и продолжительность действия разных агентов могут быть дополняющими.

Токсичность и терапевтическую эффективность рассматриваемых композиций можно определять посредством стандартных фармацевтических процедур в культурах клеток или у экспериментальных животных, например, для определения LD₅₀ и ED₅₀.

Данные, полученные в результате анализов культур клеток и исследований у животных, могут быть использованы при разработке диапазона доз для применения у людей. Доза любой рассматриваемой композиции, как правило, лежит в диапазоне циркулирующих концентраций, включающих ED₅₀ с небольшой токсичностью или отсутствием токсичности. Доза может варьироваться в пределах данного диапазона в зависимости от используемой лекарственной формы и используемого способа введения.

Способы применения

Некоторые аспекты настоящего изобретения относятся к лечению субъекта, имеющего нарушение памяти и/или когнитивной способности. Указанный субъект может иметь нарушение консолидации памяти (процесс хранения новой информации в долговременной памяти), нарушение процессов кратковременной памяти, нарушение долговременной памяти, нарушение декларативной памяти или нарушение процедурной памяти. Субъектов лечат соединениями, указанными в настоящем описании, для повышения, защиты и/или восстановления функции и показателей долговременной памяти, например, для улучшения процесса хранения новой информации в долговременной памяти у людей (консолидации памяти) или для улучшения кратковременной памяти.

Один из аспектов настоящего изобретения относится к способу, включающему этап введения субъекту количества экстракта граната; при этом

указанный экстракт содержит активную фракцию, содержащую по меньшей мере один полифенол; и

указанный экстракт получали:

путем отжима сока и приготовления, возможно с последующим фракционированием путем центрифугирования и/или ультрафильтрации, перед высушиванием;

путем отжима сока и приготовления, возможно с последующим фракционированием путем центрифугирования и/или ультрафильтрации, перед адсорбцией на полимерной хроматографической смоле, промывкой водой и элюированием растворителем; или

путем отжима сока и приготовления, возможно с последующим фракционированием путем центрифугирования и/или ультрафильтрации, перед адсорбцией на полимерной хроматографической смоле, промывкой водой, элюированием растворителем и последующей сушкой.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором экстракт получали путем отжима сока и приготовления, возможно с последующим фракционированием путем центрифугирования и/или ультрафильтрации, перед высушиванием.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором экстракт получали путем отжима сока и приготовления, возможно с последующим фракционированием путем центрифугирования и/или ультрафильтрации перед адсорбцией на полимерной хроматографической смоле, промывкой водой и элюированием растворителем.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором экстракт получали путем отжима сока и приготовления, возможно с последующим фракционированием путем центрифугирования и/или ультрафильтрации перед адсорбцией на полимерной хроматографической смоле, промывкой водой, элюированием растворителем и последующей сушкой.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором экстракт сушат путем сушки распылением.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором экстракт сушат под вакуумом (например, 40°С при 50 мбар).

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором экстракт фракционируют путем центрифугирования.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором экстракт фракционируют путем ультрафильтрации.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором растворитель представляет собой спирт (например, этанол).

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором указанная смола представляет собой поливинилстирол-дивинилбензольную смолу. В некоторых вариантах реализации концентрация в указанных смолах может быть достигнута посредством адсорбции в воде при нормальном давлении или под вакуумом с последующей обильной промывкой водой с удалением высокополярных составляющих, таких как сахара, волокна и минералы. За элюированием сахаров в ходе этапов промывки следят с помощью стандартного рефрактометра и измеряют содержание Брикса. Затем инициируют элюирование путем изменения буфера на более полярный растворитель, такой как этанол, метанол или смесь этанола в воде. Кроме того, в некоторых вариантах реализации полное элюирование молекул может сопровождаться УФ-детектированием при 205 нм, например. См., например, раздел «Очистка эллагитаннинов» ("Purification of Ellagitannins") патента США 7638640, включенного в настоящее описание посредством ссылки в отношении указанного раздела и в полном объеме.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором смола представляет собой Амберлит XAD-16 (Rohm & Haas).

Другой аспект настоящего изобретения относится к способу, включающему этап введения соединения согласно настоящему изобретению субъекту.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором соединение является чистым и выделенным.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором соединение вводят в составе экстракта.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором соединение вводят в составе экстракта; и указанный экстракт по существу не содержит полифенолы, отличные от указанного соединения.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором соединение вводят в составе экстракта; и молярное соотношение молей соединения и общего числа молей полифенолов в указанном экстракте больше примерно 0,99. В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором соединение вводят в составе экстракта; и молярное соотношение молей соединения и общего числа молей полифенолов в указанном экстракте больше примерно 0,9. В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором соединение вводят в составе экстракта; и молярное соотношение молей соединения и общего числа молей полифенолов в указанном экстракте больше примерно 0,85. В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором соединение вводят в составе экстракта; и молярное соотношение молей соединения и общего числа молей полифенолов в указанном экстракте больше примерно 0,8. В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором соединение вводят в составе экстракта; и молярное соотношение молей соединения и общего числа молей полифенолов в указанном экстракте больше примерно 0,75.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором экстракт представляет собой экстракт целого плода 1766.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором экстракт представляет собой экстракт кожуры 1767.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором экстракт представляет собой экстракт 31008.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором экстракт представляет собой экстракт 31008-L или 31008-Н.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором экстракт представляет собой экстракт 61109.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором экстракт представляет собой экстракт 71109.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором экстракт представляет собой экстракт 1767-1.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором экстракт представляет собой экстракт 1767-2.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором экстракт представляет собой экстракт 1767-3.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором экстракт представляет собой экстракт 1767-4.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором экстракт представляет собой экстракт 1767-5.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором экстракт представляет собой экстракт 1767-6.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором соединение вводят в составе нутрицевтической композиции.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором соединение вводят в составе функционального продукта питания и функционального пищевого продукта.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором соединение вводят в составе медицинского продукта питания или медицинского пищевого продукта.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором соединение вводят в составе пищевой добавки.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором соединение вводят в составе фармацевтической композиции.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором субъект представляет собой человека.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором указанный человек является человеком пожилого возраста.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором указанный человек не является человеком пожилого возраста.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором указанному человеку меньше 20 лет.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором указанному человеку от 20 до 40 лет.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором указанному человеку от 40 до 60 лет.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором указанному человеку от 60 до 80 лет.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором указанному человеку от 80 до 100 лет.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором указанному человеку от 100 до 120 лет.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором указанный человек здоров.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором указанный человек нездоров.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором субъект представляет собой млекопитающее.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором указанное млекопитающее представляет собой животное.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором улучшают общую когнитивную способность у субъекта.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором улучшают память субъекта.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором поддерживают общую когнитивную способность у субъекта.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором поддерживают память субъекта.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором защищают нейрон или множество нейронов у указанного субъекта.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором нейроны субъекта защищают частично или по существу.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, при этом указанный способ обеспечивает лечение или предупреждение нейродегенеративного расстройства.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором снижают скорость прогрессирования указанного нейродегенеративного расстройства.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором отсрочивают возникновение указанного нейродегенеративного расстройства.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, при этом указанный способ обеспечивает лечение или предупреждение метаболическго синдрома, диабета II типа, дислипидемии или ожирения.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, при этом указанный способ обеспечивает лечение или предупреждение связанного с амилоидозом состояния у указанного субъекта.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором указанное связанное с амилоидозом состояние представляет собой умеренное когнитивное нарушение (MCI) или возрастное нарушение памяти (AAMI).

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, при этом указанный способ обеспечивает лечение или предупреждение БАС, болезни Хантингтона, болезни Паркинсона или синдрома Дауна.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, при этом указанный способ обеспечивает лечение или предупреждение болезни Альцгеймера.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, при этом указанный способ обеспечивает лечение нарушения памяти у человека.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором указанное нарушение памяти является следствием одного или более из: возрастное нарушение памяти, минимальное когнитивное нарушение, амнезия, деменция, неспособность к обучению, нарушение памяти, связанное токсическим воздействием, черепно-мозговая травма, аневризма головного мозга, болезнь Паркинсона, травма головы, болезнь Хантингтона, болезнь Пика, болезнь Крейтцфельда-Якоба, инсульт, шизофрения, эпилепсия, задержка умственного развития, болезнь Альцгеймера, возраст, возрастное нарушение памяти, умеренное когнитивное нарушение, синдром дефицита внимания, синдром дефицита внимания с гиперактивностью, рассеянный склероз, синдром передней соединительной артерии или связанная со СПИДом деменция.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором память улучшается у человека после указанного введения.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором указанное улучшение памяти представляет собой улучшение по меньшей мере одного показателя, выбранного из группы, состоящей из улучшения кратковременной памяти, долговременной памяти, консолидации памяти, процедурной памяти и декларативной памяти.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором внимание у человека улучшается после указанного введения.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором исполнительная функция у человека улучшается после указанного введения.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором время реакции у человека улучшается после указанного введения.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором процесс обучения у человека улучшается после указанного введения.

Специалист в данной области техники может представить субъектов, которым способы, указанные в настоящем описании, могут быть полезны. Например, указанный субъект включает людей с подозрением на нарушение памяти типа болезни Альцгеймера, MCI, AAMI, болезни Паркинсона или БАС. Предупредительное действие соединений согласно настоящему изобретению также может быть полезно для здорового пожилого субъекта, демонстрирующего признак когнитивного нарушения. Для специалиста в данной области техники очевидно, что практикующий врач может использовать разные критерии для определения признаков нарушения памяти. Указанные критерии включают, но не ограничиваются ими. Руководство по диагностике и статистике психических расстройств, третье издание (Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders, DSM-III) Центр диагностики и лечения болезни Альцгеймера (Alzheimer's Disease Diagnostic and Treatment Center, ADDTC), Международную статистическую классификацию болезней 10-го пересмотра (International Statistical Classification of Diseases, ICD-IO), Национальный институт по изучению неврологических нарушений и инсульта - Международная ассоциация по исследованию и обучению в области наук о нервной системе (National Institute of Neurological Disorders and Stroke-Association Internationale pour la Recherche et Enseignment en Neurosciences, NINDS-AIREN) и Руководство по диагностике и статистике психических расстройств, четвертое издание (DSM-IV). См. Pohjasvaara et al, Stroke 2000, 31, 2952-2957. Клиническая характеристика пациента с умеренным когнитивным нарушением находится в рамках компетенции практикующего врача. Указанное тестирование пациента для выявления указанного состояния включает проведение ряда тестов умственных способностей. Способы клинической диагностики широко рассмотрены и обсуждены, например, в Petersen et al. Arch Neurol. 1999, 56, 303-308.

Кроме того, существует растущее количество данных о том, что диабет II типа является фактором риска развития болезни Альцгеймера у людей; поэтому, превентивное лечение, которое замедляет прогрессирование нейродегенеративных заболеваний, может оказать полезный эффект людям с предрасположенностью к диабету II типа. Но, L., W.Qin, et al. (2004). "Diet-induced insulin resistance promotes amyloidosis in a transgenic mouse model of Alzheimer's disease." FASEB J 18(7): 902-4; и Kojro, E. and R.Postina (2009). "Regulated Proteolysis of RAGE and AbetaPP as Possible Link Between Type 2 Diabetes Mellitus and Alzheimer's Disease." J Alzheimers Dis 16(4): 865-78.

Другой аспект настоящего изобретения относится к способу ингибирования агрегации пептида или белка, включающему этап приведения указанного пептида или белка в контакт с эффективным количеством соединения согласно настоящему изобретению.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором указанное соединение представляет собой соединение согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемую соль, биологически активный метаболит, сольват, гидрат, пролекарство, энантиомер или

стереоизомер.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором соединение является чистым и выделенным.

В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к любому из указанных способов, в котором соединение представляет собой экстракт. Комбинированная терапия

В соответствии с одним из аспектов настоящего изобретения, соединение согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемая соль, биологически активный метаболит, сольват, гидрат, пролекарство, энантиомер или стереоизомер, или экстракт, или композиция, содержащая указанное соединение, могут быть использованы отдельно или в комбинации с другим терапевтическим агентом для лечения заболеваний. Следует понимать, что соединения согласно настоящему изобретению могут быть использованы отдельно или в комбинации с дополнительным агентом, например, терапевтическим агентом, при этом указанный дополнительный агент выбирает специалист по назначению. Например, дополнительный агент может представлять собой терапевтический агент, который известен в данной области техники как подходящий для лечения заболевания или состояния, вылечиваемого соединением согласно настоящему изобретению. Дополнительный агент также может представлять собой агент, который придает полезное свойство терапевтической композиции, например, агент, влияющий на вязкость композиции.

Комбинированная терапия, предусмотренная настоящим изобретением, включает, например, введение соединения согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли и дополнительного агента (агентов) в одном фармацевтическом составе, а также введение соединения согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли и дополнительного агента (агентов) в отдельных фармацевтических составах. Иными словами, совместное введение означает введение по меньшей мере двух агентов субъекту так, чтобы обеспечивать полезные эффекты комбинации обоих агентов. Например, указанные агенты могут быть введены одновременно или последовательно в течение периода времени.

Также следует понимать, что указанные комбинации, включенные в настоящее изобретение, представляют собой комбинации, подходящие по назначению. Комбинация также может содержать более одного дополнительного агента, например, два или три дополнительных агента, если указанная комбинация является такой, что образуемая композиция может выполнять определенную функцию. В некоторых вариантах реализации дополнительный агент может представлять собой другое соединение согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемую соль, биологически активный метаболит, сольват, гидрат, пролекарство, энантиомер или стереоизомер.

В некоторых вариантах реализации соединения, композиции и/или экстракты согласно настоящему изобретению могут быть введены по меньшей мере один раз в сутки в комбинации с прописанным лекарственным средством. Например, композиция согласно настоящему изобретению может быть введена совместно с существующими антихолинэстеразными лекарственными средствами, прописываемыми в настоящее время для лечения болезни Альцгеймера, с различными противовоспалительными агентами или со статинами. В некоторых вариантах реализации указанное прописанное лекарственное средство представляет собой ингибитор холинэстеразы. В некоторых вариантах реализации прописанное лекарственное средство выбрано из группы, состоящей из Наменды® (мемантин) (Namenda®, memantine), Реминила® (галантамин) (Reminyl®, galantamine). Экселона® (ривастигмин) (Exelon®, rivastigmine), Арисепта® (донепезил) (Aricept®, донепезил), Когнекса® (такрин) (Cognex®, tacrine), Карбекса® (селегилин) (Carbex®. selegiline) и Элдеприла® (селегилин) (Eldepryl®, selegiline).

В соответствии с другим аспектом композицию согласно настоящему изобретению вводят по меньшей мере один раз в сутки в комбинации с диетической или питательной добавкой, которая как считают, обладает полезными эффектами для здоровья. Примеры диетических или питательных добавок, с которыми соединение, композиция и/или экстракт могут быть комбинированы, приведены ниже.

Коэнзим Q10 (также известный как CoQ10, Q10, витамин Q10, убихинон и убидекаренон (ubidecarenone)). соединение бензохинона, синтезируемое естественным образом организмом человека, используется клетками организма в окислительном метаболизме или клеточном дыхании, и в качестве эндогенного антиоксиданта. «Антиоксидант» представляет собой вещество, которое по меньшей мере частично защищает клетки от свободных радикалов, которые представляют собой высокореакционоспособные химические вещества, часто содержащие атомы кислорода, которые способны повреждать важные компоненты клетки, такие как ДНК и липиды. Уровень CoQ10 в плазме был использован в исследованиях в качестве меры окислительного стресса, ситуации, при которой нормальные уровни антиоксидантов снижены. В различных исследованиях изучали пригодность CoQ10 в качестве средства для лечения заболеваний, включая, но не ограничиваясь ими, рак и сердечно-сосудистое заболевание.

Идебенон, синтетический аналог CoQ10, был исследован на пожилых пациентах с деменцией. Исследования показывают, что он может уменьшать повреждение нервных клеток вследствие ишемии и способствовать памяти и процессу обучения.

Гуперзин А, природный ингибитор ацетилхолинэстеразы, получаемый из китайской травы Баранец пильчатый (Huperzia serrata), обладает антиоксидантными и нейропротекторными свойствами, и был предложен в качестве модифицирующего заболевание лечения БА.

Галантамин, ингибитор ацетилхолинэстеразы, используют для лечения симптомов БА.

Винкамин и винпоцетин, полусинтетическое производное винкамина, алкалоид, получаемый из растения Барвинок малый (Vina minor L), используют в Европе, Японии и Мексике в качестве фармацевтических агентов для лечения цереброваскулярных и когнитивных расстройств.

Было показано, что ацетил-L-карнитин, ацетилированное производное карнитина, способствует бета-окислению жирных кислот в печени и предупреждает замедление скорости проводимости двигательного нерва у крыс, страдающих диабетом.

Дегидроэпиандростерон (DHEA), стероид, исследуют в предупреждении рака. В организме он является предшественником, продуцируемым надпочечником, и превращается в тестостерон или эстрогены.

Фосфатидилхолин, фосфолипид, который представляет собой основной компонент клеточных мембран, обладает предполагаемой активностью в качестве усилителя когнитивной способности и при восстановлении клеточной мембраны.

Гинкго, трава, обладает предполагаемыми свойствами в качестве нейропротекторного агента, антиоксиданта, акцептора свободных радикалов, стабилизатора мембраны и ингибитора фактора активации тромбоцитов. Sherpina, V.S., et al., American Family Physician 68(5) 923-926 (2003). Было показано, что экстракт гинкго также ингибирует отложение бета-амилоида. Id.

Куркумин, активный компонент куркумы, входящей в карри, предположительно обладает противовоспалительными и снижающими холестерин свойствами.

Берберин представляет собой соль четвертичного аммония из группы изохинолиновых алкалоидов. Он встречается в таких растениях как Барбарис, Желтокорень (Гидрастис канадский (Hydrastis canadensis)) и Коптис китайский (Coptis chmensis), как правило, в корнях, корневищах, стеблях и коре. В качестве традиционной медицинской или пищевой добавки, берберин продемонстрировал некоторую активность в отношении грибковых инфекций, кандиды белой (Candida Albicans), дрожжей, паразитов и бактериальных/вирусных инфекций.

Женьшень, китайскую траву, использовали на протяжении веков в Азии в качестве лекарственного средства от многих болезней.

Исследование показало, что витамин Е (DL-альфа-токоферол), необходимый витамин, выполняющий функцию антиоксиданта, может помогать предупреждать сердечно-сосудистое заболевание и повышать иммунный ответ. Была выдвинута гипотеза о том, что витамин Е и его аналоги и производные могут предупреждать повреждение клеток головного мозга путем разрушения токсичных свободных радикалов. Термин «токол», в целом, относится к 2-метил-2-(4,8,12-триметилтридецил)хроман-6-олу; термин «токоферол», в целом, относится ко всем моно-, ди- и триметилтоколам, включая, но не ограничиваясь ими, альфа-токоферол (5,7,8-триметилтокол), бета-токоферол (5,8-диметилтокол), гамма-токоферол (7,8-диметилтокол), дельта-токоферол (8-метилтокол), термин «токотриенол» относится к 2-метил-2-(4,8,12-триметилтридека-3,7,11-триенил)хроман-6-олу; и термин «витамин Е», в целом, относится ко всем производным токола и токотриенола, качественно демонстрирующим биологическую активность альфа-токоферола.

Хорошо известно, что N-ацетил-цистеин (NAC) способствует образованию клеточного глутатиона и, таким образом, уменьшает или даже предупреждает опосредуемое окислителем повреждение. Лечение с помощью NAC обеспечивает полезные эффекты в ряде дыхательных, сердечно-сосудистых, эндокринных, инфекционных и других заболеваний.

Известно, что витамины группы В, такие как фолиевая кислота, снижают уровни гомоцистеина, аминокислоты, уже связанной на высоких уровнях с повышенным риском сердечных приступов, инсультов и болезни Альцгеймера.

Лецитин, липидное вещество, состоящее из холина и инозита, представляет собой основной компонент клеточных мембран. Употребляемый производителями лецитина для коммерческого использования термин «лецитин» относится к сложной смеси фосфатидов и других веществ, содержащих фосфатидилхолин.

Холин (триметилэтаноламин), четвертичный насыщенный амин, отнесенный к необходимому питательному веществу Комиссией по продовольствию и питанию института медицины (Food and Nutrition Board of the Institute of Medicine), представляет собой компонент лецитина. Холин необходим организму для образования нейромедиатора ацетилхолина.

Омега-3 жирные кислоты представляют собой семейство ненасыщенных жирных кислот, общим для которых является наличие конечной двойной связи углерод-углерод в положении n-3; т.е. третьей связи от метального конца жирной кислоты. Имеющие важное значение с точки зрения питания жирные кислоты n-3 включают α-линоленовую кислоту (ALA), эйкозапентаеновую кислоту (EPA) и докозагексаеновую кислоту (DHA), все из которых являются полиненасыщенными. Некоторые эксперты считают, что данные соединения могут помогать регулировать уровень холестерина в организме. Они также могут помогать защищать головной мозг от когнитивных проблем, связанных с болезнью Альцгеймера.

Омега-6 жирные кислоты представляют собой семейство ненасыщенных жирных кислот, общим для которых является наличие конечной двойной связи углерод-углерод в положении n-6, т.е. шестой связи, считая от конца, противоположного карбоксильной группе. Биологические эффекты жирных кислот n-6 в значительной степени опосредованы их превращением в эйкозаноиды n-6, которые связываются с различными рецепторами, встречающимися в каждой ткани организма. Превращение арахидоновой кислоты ткани (20:4n-6) в простагландин n-6 и лейкотриеновые гормоны n-6 обуславливает множество объектов для разработки фармацевтических лекарственных средств и лечения для уменьшения повышенного действия n-6 при атеросклерозе, астме, артрите, заболевании сосудов, тромбозе, иммунных воспалительных процессах и пролиферации опухоли. Конкурентные взаимодействия с жирными кислотами n-3 влияют на относительное накопление, мобилизацию, превращение и действие предшественников эйкозаноида n-3 и n-6.

Депренил (селегилин, Элдеприл®), ингибитор моноаминоксидазы, назначают для лечения болезни Паркинсона на ранней стадии и сенильной деменции.

Составы согласно настоящему изобретению можно применять отдельно или в комбинации с другими фармацевтическими препаратами или препаратами на основе трав для продления психического здоровья, для поддержания или улучшения когнитивного функционирования или памяти, или для сохранения психического и физического благополучия и здоровья. Указанные составы также можно применять для предупреждения или лечения последствий ряда заболеваний, включая, но не ограничиваясь ими, болезнь Альцгеймера; болезнь Паркинсона; болезнь сердца; артрит; возрастную дегенерацию; функциональные нарушения; диабет; рак и другие заболевания, влияющие на когнитивную функцию.

Эффективность композиций и способов согласно настоящему изобретению можно анализировать с помощью множества протоколов. Результаты улучшения когнитивной способности у субъекта, представляющего собой человека, можно определять способами, рутинными для специалиста в данной области техники, включая, но не ограничиваясь ими, как тесты «бумага-карандаш», так и компьютерные тесты. Специалист в данной области техники также может напрямую измерять уровни метилирования РР2А, уровни фосфорилирования белка tau, образование нейрофибриллярных клубков и нейродегенерацию в моделях у животных.

Комбинированная терапия, предусмотренная настоящим изобретением, включает, например, введение соединения согласно настоящему изобретению и дополнительного агента (агентов) в одном составе, а также введение соединения согласно настоящему изобретению и дополнительного агента (агентов) в отдельных составах. Иными словами, совместное введение означает введение по меньшей мере двух агентов субъекту так, чтобы обеспечивать полезные эффекты комбинации обоих агентов. Например, указанные агенты могут быть введены одновременно или последовательно в течение периода времени.

Также следует понимать, что указанные комбинации, включенные в настоящее изобретение, представляют собой комбинации, подходящие по назначению. Комбинация также может содержать более одного дополнительного агента, например, два или три дополнительных агента, если указанная комбинация является такой, что образуемая композиция может выполнять предусмотренную функцию.

Типичные тесты для оценки когнитивной способности

Существует множество тестов для оценки когнитивной способности, в частности, тестирование обучения и памяти (см., например, публикацию заявки на патент США 2010/0010097). Тесты обучения и/или памяти включают, например, тест запрещающего избегания (также называемый в настоящем описании «Тест пассивного избегания»), контекстуальную выработку условного рефлекса страха (contextual fear conditioning), визуальное несоответствие образцу с задержкой (visual delay non-match to sample), пространственное несоответствие образцу с задержкой (spatial delay non-match to sample), визуальное различение (visual discrimination), круговой лабиринт Барнса (Barnes circular maze), водный лабиринт Морриса (Morris water maze), тесты с радиальным рукавным лабиринтом (radial arm maze tests). Тест Рея на слуховизуальное заучивание (Ray Auditory-Visual Learning Test), Тест для оценки логической памяти Векслера (Wechsler Logical Memory Test) и Тест для оценки опознающей памяти (Providence Recognition Memory Test).

В типичном Тесте запрещающего избегания (Inhibitory Avoidance Test) используют установку, состоящую из освещенной камеры, которая может быть отделена от темной камеры раздвижной дверью. При обучении животное помещают в освещенную камеру на некоторое время и открывают дверь. Животное перемещается в темную камеру после небольшой задержки - через этап задержки (step-through latency) - который фиксируют. После попадания в темную камеру дверь закрывают и производят электроболевое раздражение лап. Сохранение в памяти опыта определяют через разные интервалы времени, например, 24 или 48 часов, путем повторения теста и фиксирования задержки. Указанный протокол является одним из многих вариантов процедур пассивного избегания (для ознакомления см. Rush (1988) Behav. Neural. Biol. 50:255).

Вариантом типичного тестирования с использованием лабиринта является тест для оценки рабочей памяти с использованием водного лабиринта. В целом, в данном способе используют установку, состоящую из круглой емкости для воды. Воду в указанной емкости делают мутной путем добавления сухого молока. Прозрачную платформу из оргстекла с опорой на подвижное основание, опирающееся на дно емкости, погружают чуть ниже поверхности воды. Как правило, плывущая крыса не может чувствовать расположение платформы, но она может вспомнить его из предыдущего опыта и обучения, если она не страдает от нарушения памяти. Измеряют время, занимаемое на определение местоположения платформы, и оно называется задержкой. В ходе данного эксперимента все ориентационные сигналы, такие как верхний свет и т.д., остаются неизменными. Более длительные задержки, как правило, наблюдают у крыс с некоторым нарушением памяти.

Другой тест для оценки памяти включает тест выработки условно-рефлекторного мигания, включающий использование белого шума или непрерывного звука, который предшествует мягкому порыву воздуха, стимулирующему мигание субъекта. При обучении звукового ориентира достаточно для стимуляции реакции мигания. Данная реакция нарушена при наличии дефицита памяти.

Еще один тест для оценки памяти, который можно использовать, представляет собой выработку условного рефлекса страха, например, либо «сигнальную», либо «контекстуальную» выработку условного рефлекса страха. В одном из вариантов реализации монитор для наблюдения за замиранием дает последовательность стимулов (звуки, удар), а затем фиксирует серию задержек, измеряя восстановление от индуцированного ударом замирания животного.

Другой тест для оценки памяти у пораженных животных представляет собой тест «норковая камера» (holeboard test), в котором используют вращающуюся норковую установку, содержащую (четыре) открытых отверстия, расположенные в 4-х угловой конфигурации в дне тестового корпуса. Мышь обучают просовывать голову в отверстие и доставать пищевое вознаграждение из отверстия «с приманкой», содержащего вознаграждение в каждом испытании. Пищевое вознаграждение (например. Fruit Loops®) находится в каждом открытом отверстии, которое делают недоступным путем помещения под экран. Указанный экран позволяет запаху вознаграждения исходить из отверстия, но не обеспечивает доступ к подкрепляющему стимулу. Когда отдельное отверстие является приманкой, вознаграждение помещают на верхнюю часть экрана, где оно досягаемо. Вся установка опирается на вращающуюся платформу так, что ее можно легко поворачивать для устранения зависимости от проксимальных (например, обонятельных) ориентиров. Исходную трубку помещают в центре установки. Субъект выпускают из указанной трубки и позволяют обнаружить отверстие с приманкой («правильное»). На показатели мыши в данном анализе влияет нарушение памяти.

В другой модели для измерения нарушения памяти используют животных с повреждением свода головного мозга для тестирования способности соединений модулировать консолидацию памяти, а также побочных эффектов и токсичности. В целом, в рассматриваемом способе используют животное, на которое воздействовали таким образом, чтобы получить по меньшей мере частичное нарушение опосредуемой сводом головного мозга передачи сигнала в гиппокамп, нарушение, влияющее на консолидацию памяти и поведение, приобретенное в результате научения, у указанного животного. Животное тренируют в режиме обучения и памяти, который приводит к поведению, приобретенному в результате научения, у млекопитающего при отсутствии повреждения свода головного мозга. Соединения вводят животному для оценки их влияния на консолидацию памяти. Улучшение поведения, приобретенного в результате научения, по сравнению с отсутствием тестируемых агентов, показывает, что вводимая комбинация улучшает консолидацию памяти.

Другой тест для оценки памяти, специально разработанный для использования в фармацевтических исследованиях, представляет собой тест для оценки опознающей памяти (Providence Recognition Memory Test). Данный тест состоит из одной иллюстративной и одной вербальной оценки долговременной декларативной памяти. В каждом из двух режимов пациент видит стимулы на экране компьютера, а позже его просят узнать данные стимулы в формате принудительного выбора между двумя альтернативными вариантами. Режим иллюстративной оценки состоит из двух частей: фазы изучения и фазы узнавания. В фазе изучения пациенты смотрят серию из 120 картинок, каждую в течение 3 секунд. Им говорят смотреть на указанные картинки и запоминать их, чтобы они могли узнать их позже. В фазе узнавания пациенты смотрят картинки по две и их просят указать путем нажатия кнопки какую из двух картинок они видели в фазе изучения. Тестирование опознающей памяти происходит через десять минут, один час и 24 часа после окончания фазы изучения. Режим вербальной оценки состоит из двух частей: фазы изучения и фазы узнавания. В фазе изучения пациенты смотрят серию из 60 предложений по одному. Их просят читать вслух указанные предложения и запоминать их, чтобы они могли узнать их позже. Каждое предложение остается на экране компьютера, пока пациент не закончит читать его вслух. Если пациенты читают слова неправильно, исследователь ставит правильное слово или слова. В фазе узнавания пациенты смотрят предложения по два и их просят указать путем нажатия кнопки какое из двух предложений они видели в фазе изучения. Тестирование опознающей памяти происходит через десять минут, один час и 24 часа после окончания фазы изучения.

В способах согласно настоящему изобретению может быть определено сохранение в памяти поведения, приобретенного в результате научения, например, через по меньшей мере примерно 12-24 часа, 14-22 часа, 16-20 часов и/или 18-19 часов после завершения фазы обучения для определения способствуют ли агенты консолидации памяти. В конкретном варианте реализации сохранение в памяти поведения, приобретенного в результате научения, может быть определено через 24 часа после завершения фазы процесса обучения.

Помимо моделей для исследования консолидации памяти были использованы модели для оценки побочных действий соединений амфетамина на поведение, включая модели локомоторной активности. В типичном тесте локомоторной активности используют установку, состоящую из клеток с фотоэлементом для измерения активности с решеткой пучков фотоэлементов, расположенной вокруг клетки. Животных помещают в отдельные клетки для измерения активности за некоторое время до введения агентов. Локомоторную активность измеряют по количеству прерываний фотоэлектрического луча в течение данного периода времени.

В настоящем описании «контрольное млекопитающее» может представлять собой млекопитающее с повреждением, не получающее лечение (т.е. млекопитающее с повреждением, не получающее агенты или получающее не те же комбинации для оценки), обученное контрольное млекопитающее (т.е. млекопитающее, которое подвергают обучению для демонстрации поведения, приобретенного в результате научения, без какого-либо повреждения) и/или необученное контрольное млекопитающее (т.е. млекопитающее с повреждением или без него, не получающее обучение, для демонстрации поведения, приобретенного в результате научения).

Определения

Следует понимать, что все определения, сформулированные и употребляемые в настоящем описании, проверены в соответствии со словарными определениями, определениями в документах, включенных посредством ссылки, и/или общепринятыми значениями определяемых терминов.

Следует понимать, что единственное число, употребляемое в настоящем описании и в формуле изобретения, если явным образом не указано противоположное, означает «по меньшей мере один».

Следует понимать, что термин «и/или», употребляемый в настоящем описании и в формуле изобретения, означает «любой из или оба» элемента, соединенные таким образом, т.е. элементы, которые вместе присутствуют в одних случаях и по отдельности присутствуют в других случаях. Многочисленные элементы, перечисленные с помощью «и/или» следует толковать таким же образом, т.е. «один или более» элементов, соединенных таким образом. Помимо элементов, специально определенных термином «и/или», могут присутствовать другие элементы, независимо от того, связаны они с указанными специально определенными элементами или не связаны. Таким образом, в качестве неограничивающего примера, ссылка на «А и/или В» при употреблении в связи с неограниченным термином, таким как «содержащий», может относиться в одном из вариантов реализации только к А (возможно, включая элементы, отличные от В); в другом варианте реализации только к В (возможно, включая элементы, отличные от А); в еще одном варианте реализации как к А, так и к В (возможно, включая другие элементы); и т.д.

Следует понимать, что в настоящем описании и в формуле изобретения «или» имеет то же значение, что и «и/или», как определено выше. Например, при разделении элементов в перечне, термин «или» или «и/или» следует рассматривать как включающий, т.е. включающий по меньшей мере один, а также включающий более одного из числа или перечня элементов, и возможно дополнительные неперечисленные элементы. Только термины, явным образом указанные иначе, такие как «только один из» или «точно один из», или при употреблении в формуле изобретения «состоящий из», будут относиться к включению только одного элемента из ряда или перечня элементов. В целом, в настоящем описании термин «или» следует рассматривать только как указывающий на исключающие альтернативы (т.е. «один или другой, но не оба»), когда ему предшествуют термины исключительности, такие как «либо», «один из», «только один из» или «точно один из». Термин «по существу состоящий из» при употреблении в формуле изобретения имеет обычное значение, используемое в области патентного права.

Следует понимать, что в настоящем описании и в формуле изобретения термин «по меньшей мере один» в отношении перечня одного или более элементов означает по меньшей мере один элемент, выбранный из любого одного или более элементов в указанном перечне элементов, но необязательно включает по меньшей мере один из всех без исключения элементов, специально перечисленных в перечне элементов, и не исключает любые комбинации элементов в данном перечне элементов. Данное определение также предусматривает, что могут присутствовать элементы, отличные от элементов, специально определенных в данном перечне элементов, к которым относится термин «по меньшей мере один», независимо от того, связаны они с указанными специально определенными элементами или не связаны. Таким образом, в качестве неограничивающего примера, термин «по меньшей мере один из А и В» (или эквивалент «по меньшей мере один из А или В», или эквивалент «по меньшей мере один из А и/или В») может относиться в одном из вариантов реализации к по меньшей мере одному, возможно включая более одного, А при отсутствии В (и возможно включая элементы, отличные от В); в другом варианте реализации к по меньшей мере одному, возможно включая более одного, В при отсутствии А (и возможно включая элементы, отличные от А); в еще одном варианте реализации к по меньшей мере одному, возможно включая более одного, А и по меньшей мере одному, возможно включая более одного, В (и возможно включая другие элементы); и т.д.

Также следует понимать, что, если явным образом не указано противоположное, в любых способах, заявленных в настоящем описании, включающих более одного этапа или действия, порядок указанных этапов или действий указанного способа необязательно ограничивается порядком, в котором перечислены указанные этапы или действия способа.

Следует понимать, что в формуле изобретения, а также в описании выше все переходные термины, такие как «содержащий», «включающий», «несущий», «имеющий», «имеющий в своем составе», «заключающий», «удерживающий», «состоящий из» и т.п. являются неограниченными, т.е. «включающими, но не ограничивающимися». Только переходные термины «состоящий из» и «по существу состоящий из» будут представлять собой закрытые или полузакрытые переходные термины соответственно, как указано в Руководстве по проведению патентной экспертизы Патентного ведомства США.

Для целей настоящего изобретения химические элементы идентифицированы в соответствии с Периодической таблицей элементов, версия CAS, Handbook of Chemistry and Physics, 67th Ed., 1986-87, внутренняя сторона обложки.

В настоящем описании термин «антиагрегационное соединение» относится к соединению, проявляющему антиагрегационные свойства, т.е. ингибирующему образование белкового или пептидного растворимого или нерастворимого агрегата in vitro и/или in vivo. Для целей данного определения, указанный эффект может быть количественно определен и протестирован in vitro, как известно в данной области техники, например, как описано в примерах в следующих документах, каждый из которых включен в настоящее описание посредством ссылки. Ono, К., Y.Yoshiike, et al. (2003). "Potent anti-amyloidogenic and fibril-destabilizing effects of polyphenols in vitro: implications for the prevention and therapeutics of Alzheimer's disease." J Neurochem 87(1): 172-81; Riviere, С., Т.Richard, et al. (2007). "Inhibitory activity of stilbenes on Alzheimer's beta-amyloid fibrils in vitro." Bioorg Med Chem 15(2): 1160-7; и Riviere, С., Т.Richard, et al. (2008). "New polyphenols active on beta-amyloid aggregation." Bioorg Med Chem Lett 18(2): 828-31.

В настоящем описании термин «лечение» относится к любому лечению или предупреждению, или подавлению расстройства или заболевания у субъекта и включает в качестве примера: (а) предупреждение заболевания или расстройства у субъекта, который может быть предрасположен к указанному заболеванию или расстройству, но у которого оно еще не диагностировано; (b) подавление заболевания или расстройства, т.е. остановку или задержку его прогрессирования; или (с) ослабление или облегчение заболевания или расстройства, т.е. достижение ремиссии.

В настоящем описании термин «гетероатом» известен в данной области техники и относится к атому любого элемента, отличного от углерода или водорода. Типичные гетероатомы включают бор, азот, кислород, фосфор, серу и селен.

Термин «алкил» означает алифатический или циклический углеводородный радикал, содержащий от 1 до 12 атомов углерода. Типичные примеры алкила включают, но не ограничиваются ими, метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, втор-бутил, изобутил, трет-бутил, н-пентил, изопентил, неопентил, н-гексил, 2-метилциклопентил и 1-циклогексилэтил.

Термин «алкилен» известен в данной области техники и в настоящем описании относится к бидентатной группе, полученной путем удаления двух атомов водорода алкильной группы, определенной выше.

В настоящем описании термин «алкенил» означает линейный или разветвленный углеводород, содержащий от 2 до 10 атомов углерода и содержащий по меньшей мере одну двойную связь углерод-углерод, образованную путем удаления двух атомов водорода. Типичные примеры алкенила включают, но не ограничиваются ими, этенил, 2-пропенил, 2-метил-2-пропенил, 3-бутенил, 4-пентенил, 5-гексенил, 2-гептенил, 2-метил-1-гептенил и 3-деценил.

В настоящем описании термин «алкинил» означает линейную или разветвленную углеводородную группу, содержащую от 2 до 10 атомов углерода и содержащую по меньшей мере одну тройную связь углерод-углерод. Типичные примеры алкинила включают, но не ограничиваются ими, ацетиленил, 1-пропинил, 2-пропинил, 3-бутинил, 2-пентинили 1-бутинил.

В настоящем описании термин «карбоциклил» означает моноциклические или полициклические (например, бициклические, трициклические и т.д.) углеводороды, содержащие от 3 до 12 атомов углерода, полностью насыщенные или содержащие одну или более ненасыщенных связей, и во избежание неопределенности, степень ненасыщенности не приводит к ароматической кольцевой системе (например, фенил). Примеры карбоциклильных групп включают 1-циклопропил, 1-циклобутил, 2-циклопентил, 1-циклопентенил, 3-циклогексил, 1-циклогексенили 2-циклопентенилметил.

В настоящем описании термин «гетероциклил» включает неароматические кольцевые системы, включая, но не ограничиваясь ими, моноциклические, бициклические и трициклические кольца, которые могут быть полностью насыщенными или которые могут содержать один или более ненасыщенных элементов, и во избежание неопределенности, степень ненасыщенности не приводит к ароматической кольцевой системе, и содержат от 3 до 12 атомов, включая по меньшей мере один гетероатом, такой как азот, кислород или сера. Для пояснения на примерах, которые не должны рассматриваться как ограничивающие объем настоящего изобретения, далее следуют примеры гетероциклических колец: азепины, азетидинил, морфолинил, оксопиперидинил, оксопирролидинил, пиперазинил, пиперидинил, пирролидинил, хинуклидинил, тиоморфолинил, тетрагидропиранил и тетрагидрофуранил. Гетероциклильные группы согласно настоящему изобретению содержат 0, 1, 2, 3, 4 или 5 заместителей, независимо выбранных из группы, состоящей из алкила, алкенила, алкинила, галогена, галогеналкила, фторалкила, гидрокси, алкокси, алкенилокси, алкинилокси, карбоциклилокси, гетероциклилокси, галогеналкокси, фторалкилокси, сульфгидрила, алкилтио, галогеналкилтио, фторалкилтио, алкенилтио, алкинилтио, сульфоновой кислоты, алкилсульфонила, галогеналкилсульфонила, фторалкилсульфонила, алкенилсульфонила, алкинилсульфонила, алкоксисульфонила, галогеналкоксисульфонила, фторалкоксисульфонила, алкенилоксисульфонила, алкинилоксисульфонила, аминосульфонила, сульфиновой кислоты, алкилсульфинила, галогеналкилсульфинила, фторалкилсульфинила, алкенилсульфинила, алкинилсульфинила, алкоксисульфинила, галогеналкоксисульфинила, фторалкоксисульфинила, алкенилоксисульфинила, алкинилоксисульфинила, аминосульфинила, формила, алкилкарбонила, галогеналкилкарбонила, фторалкилкарбонила, алкенилкарбонила, алкинилкарбонила, карбокси, алкоксикарбонила, галогеналкоксикарбонила, фторалкоксикарбонила, алкенилоксикарбонила, алкинилоксикарбонила, алкилкарбонилокси, галогеналкилкарбонилокси, фторалкилкарбонилокси, алкенилкарбонилокси, алкинилкарбонилокси, алкилсульфонилокси, галогеналкилсульфонилокси, фторалкилсульфонилокси, алкенилсульфонилокси, алкинилсульфонилокси, галогеналкоксисульфонилокси, фторалкоксисульфонилокси, алкенилоксисульфонилокси, алкинилоксисульфонилокси, алкилсульфинилокси, галогеналкилсульфинилокси, фторалкилсульфинилокси, алкенилсульфинилокси, алкинилсульфинилокси, алкоксисульфинилокси, галогеналкоксисульфинилокси, фторалкоксисульфинилокси, алкенилоксисульфинилокси, алкинилоксисульфинилокси, аминосульфинилокси, амино, амидо, аминосульфонила, аминосульфинила, циано, нитро, азидо, фосфинила, фосфорила, силила, силилокси и любых из указанных заместителей, связанных с гетероциклильной группой через алкиленовую группу (например, метилен).

В настоящем описании термин «арил» означает фенильную группу, нафтильную или антраценильную группу. Арильные группы согласно настоящему изобретению могут содержать 1, 2, 3, 4 или 5 заместителей, независимо выбранных из группы, состоящей из алкила, алкенила, алкинила, галогена, галогеналкила, фторалкила, гидрокси, алкокси, алкенилокси, алкинилокси, карбоциклилокси, гетероциклилокси, галогеналкокси, фторалкилокси, сульфгидрила, алкилтио, галогеналкилтио, фторалкилтио, алкенилтио, алкинилтио, сульфоновой кислоты, алкилсульфонила, галогеналкилсульфонила, фторалкилсульфонила, алкенилсульфонила, алкинилсульфонила, алкоксисульфонила, галогеналкоксисульфонила, фторалкоксисульфонила, алкенилоксисульфонила, алкинилоксисульфонила, аминосульфонила, сульфиновой кислоты, алкилсульфинила, галогеналкилсульфинила, фторалкилсульфинила, алкенилсульфинила, алкинилсульфинила, алкоксисульфинила, галогеналкоксисульфинила, фторалкоксисульфинила, алкенилоксисульфинила, алкинилоксисульфинила, аминосульфинила, формила, алкилкарбонила, галогеналкилкарбонила, фторалкилкарбонила, алкенилкарбонила, алкинилкарбонила, карбокси, алкоксикарбонила, галогеналкоксикарбонила, фторалкоксикарбонила, алкенилоксикарбонила, алкинилоксикарбонила, алкилкарбонилокси, галогеналкилкарбонилокси, фторалкилкарбонилокси, алкенилкарбонилокси, алкинилкарбонилокси, алкилсульфонилокси, галогеналкилсульфонилокси, фторалкилсульфонилокси, алкенилсульфонилокси, алкинилсульфонилокси, галогеналкоксисульфонилокси, фторалкоксисульфонилокси, алкенилоксисульфонилокси, алкинилоксисульфонилокси, алкилсульфинилокси, галогеналкилсульфинилокси, фторалкилсульфинилокси, алкенилсульфинилокси, алкинилсульфинилокси, алкоксисульфинилокси, галогеналкоксисульфинилокси, фторалкоксисульфинилокси, алкенилоксисульфинилокси, алкинилоксисульфинилокси, аминосульфинилокси, амино, амидо, аминосульфонила, аминосульфинила, циано, нитро, азидо, фосфинила, фосфорила, силила, силилокси и любых из указанных заместителей, связанных с арильной группой через метиленовую, этиленовую и пропиленовую группу.

Термин «арилен» известен в данной области техники и в настоящем описании относится к бидентатной группе, полученной путем удаления двух атомов водорода от смежных атомов углерода арильного кольца, определенного выше.

В настоящем описании термин «арилалкил» или «аралкил» означает арильную группу, определенную в настоящем описании, присоединенную к исходному молекулярному фрагменту через алкильную группу, определенную в настоящем описании. Типичные примеры аралкила включают, но не ограничиваются ими, бензил, 2-фенилэтил, 3-фенилпропил и 2-нафт-2-илэтил.

В настоящем описании термин «гетероарил» включает ароматические кольцевые системы, включая, но не ограничиваясь ими, моноциклические, бициклические и трициклические кольца, содержащие от 3 до 12 атомов, включая по меньшей мере один гетероатом, такой как, азот, кислород или сера. В качестве примеров, которые не должны рассматриваться как ограничивающие объем настоящего изобретения: азаиндолил, бензо(b)тиенил, бензимидазолил, бензофуранил, бензоксазолил, бензотиазолил, бензотиадиазолил, бензотриазолил, бензоксадиазолил, фуранил, имидазолил, имидазопиридинил, индолил, индолинил, индазолил, изоиндолинил, изоксазолил, изотиазолил, изохинолинил, оксадиазолил, оксазолил, пуринил, пиранил, пиразинил, пиразолил, пиридинил, пиримидинил, пирролил, пирроло[2,3-d]пиримидинил, пиразоло[3,4-d]пиримидинил, хинолинил, хиназолинил, триазолил, тиазолил, тиофенил, тетрагидроиндолил, тетразолил, тиадиазолил, тиенил, тиоморфолинил, триазолил или тропанил. Гетероарильные группы согласно настоящему изобретению содержат 0, 1, 2, 3, 4 или 5 заместителей, независимо выбранных из группы, состоящей из алкила, алкенила, алкинила, галогена, галогеналкила, фторалкила, гидрокси, алкокси, алкенилокси, алкинилокси, карбоциклилокси, гетероциклилокси, галогеналкокси, фторалкилокси, сульфгидрила, алкилтио, галогеналкилтио, фторалкилтио, алкенилтио, алкинилтио, сульфоновой кислоты, алкилсульфонила, галогеналкилсульфонила, фторалкилсульфонила, алкенилсульфонила, алкинилсульфонила, алкоксисульфонила, галогеналкоксисульфонила, фторалкоксисульфонила, алкенилоксисульфонила, алкинилоксисульфонила, аминосульфонила, сульфиновой кислоты, алкилсульфинила, галогеналкилсульфинила, фторалкилсульфинила, алкенилсульфинила, алкинилсульфинила, алкоксисульфинила, галогеналкоксисульфинила, фторалкоксисульфинила, алкенилоксисульфинила, алкинилоксисульфинила, аминосульфинила, формила, алкилкарбонила, галогеналкилкарбонила, фторалкилкарбонила, алкенилкарбонила, алкинилкарбонила, карбокси, алкоксикарбонила, галогеналкоксикарбонила, фторалкоксикарбонила, алкенилоксикарбонила, алкинилоксикарбонила, алкилкарбонилокси, галогеналкилкарбонилокси, фторалкилкарбонилокси, алкенилкарбонилокси, алкинилкарбонилокси, алкилсульфонилокси, галогеналкилсульфонилокси, фторалкилсульфонилокси, алкенилсульфонилокси, алкинилсульфонилокси, галогеналкоксисульфонилокси, фторалкоксисульфонилокси, алкенилоксисульфонилокси, алкинилоксисульфонилокси, алкилсульфинилокси, галогеналкилсульфинилокси, фторалкилсульфинилокси, алкенилсульфинилокси, алкинилсульфинилокси, алкоксисульфинилокси, галогеналкоксисульфинилокси, фторалкоксисульфинилокси, алкенилоксисульфинилокси, алкинилоксисульфинилокси, аминосульфинилокси, амино, амидо, аминосульфонила, аминосульфинила, пиано, нитро, азидо, фосфинила, фосфорила, силила, силилокси и любых из указанных заместителей, связанных с гетероарильной группой через алкиленовую группу (например, метилен).

Термин «гетероарилен» известен в данной области техники и в настоящем описании относится к бидентатной группе, полученной путем удаления двух атомов водорода от смежных атомов гетероарильного кольца, определенного выше.

В настоящем описании термин «гетероарилалкил» или «гетероаралкил» означает гетероарил, определенный в настоящем описании, присоединенный к исходному молекулярному фрагменту через алкильную группу, определенную в настоящем описании. Типичные примеры гетероарилалкила включают, но не ограничиваются ими, пиридин-3-илметил и 2-(тиен-2-ил)этил.

Термин «галогено» или «галоген» означает -Cl, -Br, -I или -F.

Термин «галогеналкил» означает алкильную группу, определенную в настоящем описании, в которой по меньшей мере один атом водорода замещен на галоген, определенный в настоящем описании. Типичные примеры галогеналкила включают, но не ограничиваются ими, хлорметил, 2-фторэтил, трифторметил, пентафторэтил и 2-хлор-3-фторпентил.

Термин «фторалкил» означает алкильную группу, определенную в настоящем описании, в которой все атомы водорода замещены на атомы фтора.

В настоящем описании термин «гидрокси» означает группу -ОН.

В настоящем описании термин «алкокси» означает алкильную группу, определенную в настоящем описании, присоединенную к исходному молекулярному фрагменту через атом кислорода. Типичные примеры алкоксигрупп включают, но не ограничиваются ими, метокси, этокси, пропокси, 2-пропокси, бутокси, трет-бутокси, пентилокси и гексилокси. Термины «алкенилокси», «алкинилокси», «карбоциклилокси» и «гетероциклилокси» определены подобным образом.

В настоящем описании термин «галогеналкокси» означает алкоксигруппу, определенную в настоящем описании, в которой по меньшей мере один атом водорода замещен на атом галогена, определенный в настоящем описании. Типичные примеры галогеналкоксигрупп включают, но не ограничиваются ими, хлорметокси, 2-фторэтокси, трифторметокси и пентафторэтокси. Термин «фторалкилокси» определен подобным образом.

В настоящем описании термин «арилокси» означает арильную группу, определенную в настоящем описании, присоединенную к исходному молекулярному фрагменту через атом кислорода. В настоящем описании термин «гетероарилокси» означает гетероарильную группу, определенную в настоящем описании, присоединенную к исходному молекулярному фрагменту через атом кислорода. Термин «гетероарилокси» определен подобным образом.

В настоящем описании термин «арилалкокси» или «арилалкилокси» означает арилалкильную группу, определенную в настоящем описании, присоединенную к исходному молекулярному фрагменту через атом кислорода. Термин «гетероарилалкокси» определен подобным образом. Типичные примеры арилокси и гетероарилалкокси включают, но не ограничиваются ими, 2-хлорфенилметокси, 3-трифторметилфенилэтокси и 2,3-диметилпиридинилметокси.

В настоящем описании термин «сульфгидрил» или «тио» означает группу -SH.

В настоящем описании термин «алкилтио» означает алкильную группу, определенную в настоящем описании, присоединенную к исходному молекулярному фрагменту через атом серы. Типичные примеры алкилтио включают, но не ограничиваются ими, метилтио, этилтио, трет-бутилтио и гексилтио. Термины «галогеналкилтио», «фторалкилтио», «алкенилтио», «алкинилтио», «карбоциклилтио» и «гетероциклилтио» определены подобным образом.

В настоящем описании термин «арилтио» означает арильную группу, определенную в настоящем описании, присоединенную к исходному молекулярному фрагменту через атом серы. Термин «гетероарилтио» определен подобным образом.

В настоящем описании термин «арилалкилтио» или «аралкилтио» означает арилалкильную группу, определенную в настоящем описании, присоединенную к исходному молекулярному фрагменту через атом серы. Термин «гетероарилалкилтио» определен подобным образом.

В настоящем описании термин «сульфонил» относится к группе -S(=O)₂-.

В настоящем описании термин «сульфоновая кислота» относится к -S(=O)₂OH.

В настоящем описании термин «алкилсульфонил» означает алкильную группу, определенную в настоящем описании, присоединенную к исходному молекулярному фрагменту через сульфонильную группу, определенную в настоящем описании. Типичные примеры алкилсульфонила включают, но не ограничиваются ими, метилсульфонил и этилсульфонил. Термины «галогеналкилсульфонил», «фторалкилсульфонил», «алкенилсульфонил», «алкинилсульфонил», «карбоциклилсульфонил», «гетероциклилсульфонил», «арилсульфонил», «аралкилсульфонил», «гетероарилсульфонил» и «гетероаралкилсульфонил» определены подобным образом.

В настоящем описании термин «алкоксисульфонил» означает алкоксигруппу, определенную в настоящем описании, присоединенную к исходному молекулярному фрагменту через сульфонильную группу, определенную в настоящем описании. Типичные примеры алкоксисульфонила включают, но не ограничиваются ими, метоксисульфонил, этоксисульфонил и пропоксисульфонил. Термины «галогеналкоксисульфонил», «фторалкоксисульфонил», «алкенилоксисульфонил», «алкинилоксисульфонил», «карбоциклилоксисульфонил», «гетероциклилоксисульфонил», «арилоксисульфонил», «аралкилоксисульфонил», «гетероарилоксисульфонил» и «гетероаралкилоксисульфонил» определены подобным образом.

Термины «трифлил», «тозил», «мезил» и «нонафлил» известны в данной области техники и относятся к трифторметансульфонильным, n-толуолсульфонильным, метансульфонильным и нонафторбутансульфонильным группам соответственно. Термины «трифлат», «тозилат», «мезилат» и «нонафлат» известны в данной области техники и относятся к функциональным группам трифторметансульфонатного эфира, n-толуолсульфонатного эфира, метансульфонатного эфира и нонафторбутансульфонатного эфира и молекулам, содержащим указанные группы, соответственно.

В настоящем описании термин «аминосульфонил» означает аминогруппу, определенную в настоящем описании, присоединенную к исходному молекулярному фрагменту через сульфонильную группу.

В настоящем описании термин «сульфинил» относится к группе -S(=O)-. Сульфинильные группы являются такими, как определено выше для сульфонильных групп. В настоящем описании термин «сульфиновая кислота» относится к -S(=O)OH.

Термин «окси» относится к группе -O-

В настоящем описании термин «карбонил» означает группу -С(=O)-.

В настоящем описании термин «тиокарбонил» означает группу -C(=S)-.

В настоящем описании термин «формил» означает группу -С(=O)Н.

В настоящем описании термин «алкилкарбонил» означает алкильную группу, определенную в настоящем описании, присоединенную к исходному молекулярному фрагменту через карбонильную группу, определенную в настоящем описании. Типичные примеры алкилкарбонила включают, но не ограничиваются ими, ацетил, 1-оксопропил, 2,2-диметил-1-оксопропил, 1-оксобутил и 1-оксопентил. Термины «галогеналкилкарбонил», «фторалкилкарбонил», «алкенилкарбонил», «алкинилкарбонил», «карбоциклилкарбонил», «гетероциклилкарбонил», «арилкарбонил», «аралкилкарбонил», «гетероарилкарбонил» и «гетероаралкилкарбонил» определены подобным образом.

В настоящем описании термин «карбокси» означает группу -СО₂Н.

В настоящем описании термин «алкоксикарбонил» означает алкоксигруппу, определенную в настоящем описании, присоединенную к исходному молекулярному фрагменту через карбонильную группу, определенную в настоящем описании. Типичные примеры алкоксикарбонила включают, но не ограничиваются ими, метоксикарбонил, этоксикарбонил и трет-бутоксикарбонил. Термины «галогеналкоксикарбонил», «фторалкоксикарбонил», «алкенилоксикарбонил», «алкинилоксикарбонил», «карбоциклилоксикарбонил», «гетеропиклилоксикарбонил», «арилоксикарбонил», «аралкилоксикарбонил», «гетероарилоксикарбонил» и «гетероаралкилоксикарбонил» определены подобным образом.

В настоящем описании термин «алкилкарбонилокси» означает алкилкарбонильную группу, определенную в настоящем описании, присоединенную к исходному молекулярному фрагменту через атом кислорода. Типичные примеры алкилкарбонилокси включают, но не ограничиваются ими, апетилокси, этилкарбонилокси и трет-бутилкарбонилокси. Термины «галогеналкилкарбонилокси», «фторалкилкарбонилокси», «алкенилкарбонилокси», «алкинилкарбонилокси», «карбоциклилкарбонилокси», «гетероциклилкарбонилокси», «арилкарбонилокси», «аралкилкарбонилокси», «гетероарилкарбонилокси» и «гетероаралкилкарбонилокси» определены подобным образом.

В настоящем описании термин «алкилсульфонилокси» означает алкилсульфонильную группу, определенную в настоящем описании, присоединенную к исходному молекулярному фрагменту через атом кислорода. Термины «галогеналкилсульфонилокси», «фторалкилсульфонилокси», «алкенилсульфонилокси», «алкинилсульфонилокси», «карбоциклилсульфонилокси», «гетероциклилсульфонилокси», «арилсульфонилокси», «аралкилсульфонилокси», «гетероарилсульфонилокси», «гетероаралкилсульфонилокси» «галогеналкоксисульфонилокси», «фторалкоксисульфонилокси», «алкенилоксисульфонилокси», «алкинилоксисульфонилокси», «карбоциклилоксисульфонилокси», «гетероциклилоксисульфонилокси», «арилоксисульфонилокси», «аралкилоксисульфонилокси», «гетероарилоксисульфонилокси» и «гетероаралкилоксисульфонилокси» являются его примерами.

В настоящем описании термин «амино» относится к группе -NH₂ и содержащим заместители производным указанной группы, в которых один или оба атома водорода независимо замещены на заместители, выбранные из группы, состоящей из алкила, галогеналкила, фторалкила, алкенила, алкинила, карбоциклила, гетероциклила, арила, аралкила, гетероарила, гетероаралкила, алкилкарбонила, галогеналкилкарбонила, фторалкилкарбонила, алкенилкарбонила, алкинилкарбонила, карбоциклилкарбонила, гетероциклилкарбонила, арилкарбонила, аралкилкарбонила, гетероарилкарбонила, гетероаралкилкарбонила и сульфонильных, и сульфинильных групп, определенных выше; или когда оба атома водорода вместе замещены на алкиленовую группу (с образованием кольца, содержащего азот). Типичные примеры включают, но не ограничиваются ими, метиламино, ацетиламино и диметиламино.

В настоящем описании термин «амидо» означает аминогруппу, определенную в настоящем описании, присоединенную к исходному молекулярному фрагменту через карбонил.

В настоящем описании термин «циано» означает группу -C=N. В настоящем описании термин «нитро» означает группу -NO₂. В настоящем описании термин «азидо» означает группу -N₃.

В настоящем описании термин «фосфинил» включает группу -РН₃ и содержащие заместители производные указанной группы, в которых один, два или три атома водорода независимо замещены на заместители, выбранные из группы, состоящей из алкила, галогеналкила, фторалкила, алкенила, алкинила, карбоциклила, гетероциклила, арила, аралкила, гетероарила, гетероаралкила, алкокси, галогеналкокси, фторалкилокси, алкенилокси, алкинилокси, карбоциклилокси, гетероциклилокси, арилокси, аралкилокси, гетероарилокси, гетероаралкилокси и амино.

В настоящем описании термин «фосфорил» относится к группе -Р(O)ОН₂ и содержащим заместители производным указанной группы, в которых один или оба гидроксила независимо замещены на заместители, выбранные из группы, состоящей из алкила, галогеналкила, фторалкила, алкенила, алкинила, карбоциклила, гетероциклила, арила. аралкила, гетероарила, гетероаралкила, алкокси, галогеналкокси, фторалкилокси, алкенилокеи, алкинилокси, карбоциклилокси, гетероциклилокси, арилокси, аралкилокси, гетероарилокси, гетероаралкилокси и амино.

В настоящем описании термин «силил» включает группу H₃Si- и содержащие заместители производные указанной группы, в которых один, два или три атома водорода независимо замещены на заместители, выбранные из алкила, галогеналкила, фторалкила, алкенила, алкинила, карбоциклила. гетероциклила, арила, аралкила, гетероарила и гетероаралкила. Типичные примеры включают триметилсилил (TMS), трет-бутилдифенилсилил (TBDPS), трет-бутилдиметилсилил (TBS/TBDMS), триизопропилсилил (TIPS) и [2-(триметилсилил)этокси]метил (SEM).

В настоящем описании термин «силилокси» означает силильную группу, определенную в настоящем описании, присоединенную к исходной молекуле через атом кислорода.

Сокращения Me, Et, Ph, Tf, Nf, Ts и Ms обозначают метил, этил, фенил, трифторметансульфонил. нонафторбутансульфонил, n-толуолсульфонил и метансульфонил соответственно. Более полный перечень сокращений, используемых химиками-органиками в данной области техники, приведен в первом выпуске каждого тома Journal of Organic Chemistry: данный перечень, как правило, представлен в таблице под названием «Стандартный перечень аббревиатур» {Standard List of Abbreviations).

В настоящем описании «углевод» (или эквивалентно «сахар») представляет собой сахарид (включая моносахариды, олигосахариды и полисахариды) и/или молекулу (включая олигомеры или полимеры), полученную из одного или более моносахаридов, например, путем восстановления карбонильных групп, путем окисления одной или более концевых групп карбоновых кислот, путем замещения одной или более гидроксигрупп на атом водорода, аминогруппу, тиольную группу или схожие гетероатомные группы и т.д. Термин «углевод» также включает производные данных соединений. В некоторых случаях углевод может представлять собой пентозу (т.е. содержащую 5 атомов углерода) или гексозу (т.е. содержащую 6 атомов углерода); и в некоторых случаях углевод может представлять собой олигосахарид, содержащий звенья пентозы и/или гексозы, например, включая описанные выше.

В настоящем описании термин «углевод» и «сахар» также включает миметики Сахаров и подобные сахарам группы. Миметики Сахаров хорошо известны специалисту в данной области техники и включают миметики, подробно описанные в "Essentials of Glycobiology" Edited by Varki, A., et al, Cold Spring Harbor Laboratory Press. Cold Spring Harbor, N. Y. 2002. Например, группы миметиков Сахаров, предусмотренные настоящим изобретением, включают циклитолы, такие как циклоалкан, содержащие одну гидроксильную группу на каждом из трех или более атомах кольца, как определено конвенцией IUPAC. В других вариантах реализации указанные соединения циклитола включают инозиты, такие как сцилло-инозитол. Подходящие подобные сахарам соединения включают ациклические группы Сахаров. Указанные группы включают линейные алкитолы и эритритолы, например. Очевидно, что группы сахаров могу существовать либо в циклической, либо в ациклической форме. Соответственно, ациклические формы группы сахара предусмотрены настоящим изобретением как подходящие подобные сахарам группы.

Термин «эквиваленты галловой кислоты» представляет собой хорошо известный термин в данной области техники и относится к использованию галловой кислоты в качестве стандарта для количественного определения содержания фенолов различных аналитов путем анализа Фолина-Чикальтеу.

В настоящем описании термин «экстракт» или «растительный экстракт» относится к продукту, полученному путем отделения химическим или физическим способом активных с лечебной точки зрения частей растения от неактивных или инертных компонентов.

В настоящем описании термин «когнитивная способность» относится к способности выполнять задачи на умственную деятельность, такие как мышление, процесс обучения, оценка, запоминание, вычисление, контроль двигательных функций и т.п. Термин «устойчивость когнитивной способности» относится к способности функциональных элементов когнитивной способности противостоять ухудшению со временем.

В настоящем описании термины «терапевтически эффективное количество», «улучшающее память количество» и «усиливающее когнитивную способность количество» являются взаимозаменяемыми и относятся к количеству композиции согласно настоящему изобретению, которое обеспечивает терапевтический или полезный эффект, включая ощущение субъектом здоровья или общего состояния здоровья, после его введения указанному субъекту.

В частности, термин «усиливающее когнитивную способность количество» относится к такому количеству композиции согласно настоящему изобретению, которое будет заметно влиять на способность выполнять задачи на умственную деятельность, измеряемую тестами для оценки памяти, вычисления, внимания или другого свойства умственной или когнитивной деятельности, или согласно ощущению индивидуума его или ее способностей в данных областях.

В настоящем описании термины «пищевая добавка» и «питательная добавка» являются взаимозаменяемыми и обозначают (1) продукт, предназначенный для дополнения рациона питания, который обладает или содержит один или более из следующих пищевых компонентов: (А) витамин, (В) минерал, (С) трава или другое растительное вещество, (D) аминокислота, (Е) пищевое вещество для использования человеком для дополнения рациона питания путем увеличения общего потребления с пищей; и/или (F) концентрат, метаболит, составляющая, экстракт или комбинация любого компонента, описанного в пункте (А), (В), (С), (D) или (Е); и (2) продукт, который (A) (i) предназначен для приема внутрь; (В) не представлен для использования в качестве традиционного продукта питания или в качестве единственного элемента питания или рациона питания; и (С) промаркирован как пищевая добавка.

В настоящем описании термин «продукт питания» относится к (1) изделиям, используемым для питания или питья для человека или животных; (2) жевательной резинке; и (3) изделиям, служащим в качестве компонентов любого указанного изделия. Термин «функциональный продукт питания» или «функциональный пищевой продукт» относится к продукту питания или пищевому продукту, который продается (например, в супермаркете или online) без каких-либо ограничений. Термин «медицинский продукт питания» или «медицинский пищевой продукт» относится к продукту питания или пищевому продукту, прописанному врачом. Продукты питания или пищевые продукты могут представлять собой твердые продукты питания, жидкости, гели, порошки или газы. Примерами твердых продуктов питания являются напитки на основе фруктов, напитки на основе кофе, напитки на основе чая, спортивные напитки, питательные батончики, закуски, жевательные резинки, зерновые продукты, сладости, детское питание, энергетические напитки, питательные напитки для взрослых, полезные для здоровья напитки и другие продукты питания. Термин «спортивный напиток» относится к напитку, предназначенному для восполнения воды у спортсменов, а также восстанавливающему электролиты, сахар и другие питательные вещества, например, Гаторейд (Gatorade), Пауэрейд (POWERade) и AU Sport. В настоящем описании термин «энергетический напиток» относится к напитку, включая, но не ограничиваясь ими, Джольт Кола (Jolt Cola), Ред Булл (Red Bull) и схожие продукты, содержащие разрешенные стимуляторы, витамины и минералы; данные продукты разработаны для обеспечения потребителя приливом энергии. В настоящем описании термин «питательный напиток для взрослых» относится к таким продуктам, как Эншуэ (Ensure), Лонджетикс® (Longetics®), или схожему продукту. Термин «полезный для здоровья напиток» относится к любому напитку, заявленному как оказывающий полезные эффекты для здоровья, включающие, но не ограничивающиеся ими, уменьшение воспаления; поддержание иммунной системы; нейтрализация инфекционных агентов; предупреждение закупорки артерий, сохранение когнитивной способности и ингибирование роста раковой опухоли.

ПРИМЕРЫ

Настоящее изобретение будет более понятно на основе следующих примеров, которые включены только в целях иллюстрации некоторых аспектов и вариантов реализации настоящего изобретения и не ограничивают настоящее изобретение.

Пример 1: Скрининговый анализ на предмет соединений граната, ингибирующих агрегацию Аβ (25-35)

Мономерный Аβ (25-35), приобретенный у Bachem Pharma, растворяли в дистиллированной стерильной воде при 4°С, затем обрабатывали ультразвуком в течение примерно 1 минуты. Затем исходный раствор пептида делили на аликвоты и хранили при -20°С. Все этапы проводили при 4°С для предотвращения полимеризации Аβ (25-35).

Все фракции полифенолов стандартизировали до 10 мг/мл перед оценкой и хранили при -20°С. Измерение ингибирования проводили в соответствии с кинетикой полимеризации Аβ (25-35) в реакционной смеси, содержащей 70 мкл фосфатного буфера, 10 мкл Тиофлавина-Т (100 мкМ исходный раствор), 10 мкл МеОН (конечная концентрация 10 мМ) рН 7,2 и 10 мкл Аβ (25-35) (конечная концентрация 100 мкМ), используя известные в данной области техники процедуры. LeVine, H., 3rd (1993). "Thioflavine T interaction with synthetic Alzheimer's disease beta-amyloid peptides: detection of amyloid aggregation in solution." Protein Sci. 2(3): 404-10. После добавления Аβ (25-35) к буферному раствору, раствор обрабатывали ультразвуком в течение еще одной минуты.

Для исследования ингибирующей активности фракций экстракты разводили до конечной концентрации в МеОН и к смеси добавляли 10 мкл при 4°С. Флуоресцентную спектроскопию регистрировали с возбуждением при 450 нм и эмиссией при 490 нм. Кинетику полимеризации контролировали при 25°С в диапазоне от 0 до 120 минут. IC₅₀ рассчитывали с использованием подбора методом наименьших квадратов для сопоставления экспериментальных данных с сигмоидальной кривой. IC₅₀ представляла собой дозу эффективной концентрации соединения, ингибирующую образование фибрилл Аβ на 50% от контрольного значения.

Гранат (Гранат обыкновенный, сорт Wonderful) экстрагировали с использованием трех различных буферов с получением фракций, обогащенных молекулами повышенной полярности. Гранат смешивали и экстрагировали водой, бутанольным и этилацетатными буферами. Три фракции тестировали в анализе, описанном в Примере 1, каждая 10 мг/мл. Результаты показывали, что этилацетатная фракция обладала наибольшей активностью, могла ингибировать более 65% агрегации (Фиг.11).

С помощью центрифужной распределительной хроматографии получали дополнительные субфракции этилацетатной, бутанольной и водной фракции и чистые соединения выделяли с применением стандартных методов ВЭЖХ. Молекулы идентифицировали с применением исследований ВЭЖХ/МС и ЯМР. Каждую молекулу применяли с чистотой более 90% в анализе агрегации, описанном в Примере 1. Результаты показаны на Фиг.12-18 и обобщены ниже.

Фракция A3J ингибировала агрегацию с IC₅₀, составляющей 10 мкМ, и ЯМР подтверждал идентичность указанной молекулы Пуникалину; фракция A1D ингибировала агрегацию с IC₅₀, составляющей 11 мкМ. Данные МС подтверждали идентичность указанной молекулы Педункулагину; фракция W12 ингибировала агрегацию с IC₅₀, составляющей 6 мкМ, и подтверждали, что она представляла собой Пуникалагин; и фракция A3I ингибировала агрегацию с IC₅₀, составляющей 9,3 мкМ. Наконец, фракция A3G ингибировала агрегацию с IC₅₀, составляющей 6,8 мкМ, и данные ЯМР и МС подтверждали идентичность указанной молекулы Теллимаграндину. Корилагин ингибировал агрегацию с IC₅₀, составляющей 65 мкМ.

Пример 2: Измерение ингибирования индуцируемой олигомером Аβ гибели нейронных клеток

Фракции, способные ингибировать образование олигомеров, также тестировали на предмет способности ингибировать индуцируемую олигомером Аβ гибель нейронных клеток с применением клеток Р12, хорошо известной и общепринятой модели культуры нейронных клеток.

Трифторацетатную соль бета-амилоидного пептида (Аβ) 25-35 (номер Н-1192, серия 2000718) приобретали у Bachem (Bubebdorf, Швейцария). Тиазолил синий тетразолий бромид, (МТТ, номер М2128) приобретали у Sigma-Aldrich (Saint-Quentin Fallvier, Франция). Фракцию V бычьего альбумина (BSA, номер 160069) приобретали у MPBio (Irvine, США).

Клетки: клетки феохромоцитомы крысы (PC12) держали в DMEM (Среде Игла в модификации Дульбекко) (глюкоза 4,5 г/л) с добавлением 10% лошадиной сыворотки (HS), 5% фетальной бычьей сыворотки (ФБС) и 100 ед/мл пенициллина и 100 мкг/мл стрептомицина при 37°С в атмосфере 5% CO₂.

Получение Aβ (25-35): существуют данные о том, что олигомеры Аβ более токсичны для нейронов, чем мономеры. Следовательно, Аβ (25-35), который применяли для данного исследования, предварительно агрегировали перед применением. Аβ растворяли до 1 мМ в воде и хранили при -20°С. Аβ (25-35) инкубировали при 37°С в течение 3 дней с индуцированном агрегации непосредственно перед применением.

Определение способности водно-спиртовых экстрактов граната защищать клетки PC12 от поражения Аβ: способность экстрактов граната защищать клетки PC12 от индуцируемой олигомером Аβ (25-35) токсичности определяли путем измерения восстановления МТТ (3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолиум бромид) до формазана МТТ, которое отражает жизнеспособность клеток. Клетки PC12 высевали в 96-луночные культуральные планшеты и когда клетки становились конфлюэнтными их предварительно обрабатывали разными концентрациями экстрактов граната (0,1% ДМСО) в течение 1 часа в DMEM 0,1% BSA. Затем клетки инкубировали совместно с или без предварительно агрегированного Аβ (25-35) в концентрации 10 мкМ в течение еще 24 часов. Через 24 часа, раствор МТТ 300 мкг/мл в культуральной среде (исходный раствор 3 мг/мл в ФСБ) добавляли в течение 2 часов при 37°С. Затем среду удаляли и кристаллы формазана растворяли в 100 мкл ДМСО. Уровень восстановления МТТ и, таким образом, жизнеспособность клеток определяли путем колориметрического анализа, измеряя оптическую плотность при 595 нм с использованием микропланшетного ридера (BioTek EL808).

Как показано на Фиг.24, Экстракты 1766 и 1767 были способны защищать нейронные клетки PC12 от токсичности олигомеров Аβ (25-35). Экстракт 1766 представляет собой водно-спиртовой экстракт целого плода граната, Экстракт 1767 представляет собой водно-спиртовой экстракт кожуры граната. Для экстракции целые плоды и кожуру отделяли и разрезали, измельчали и помещали в смеситель. Полученные части инкубировали в водно-спиртовом растворе (EtOH/вода), 80/20) и подвергали встряхиванию при комнатной температуре в течение 4 часов. После дополнительной мацерации в защищенных от света условиях растворы фильтровали и сушили под вакуумом (40°С при 50 мбар), а затем хранили при -20°С до применения для дополнительного фракционирования. Получали субфракции Экстракта 1767 и тестировали на предмет способности защищать от индуцируемой Аβ цитотоксичности в клетках PC12. Было показано, что фракции 1767-2 и 1767-3 наиболее активны. Дополнительный анализ, концентрирование и тестирование данных двух фракций приводили к идентификации пуникалагина как природного соединения, ответственного за наблюдаемую активность. ДМСО использовали в качестве носителя и он не мешал проведению данного анализа.

Пример 3: Процедура экстракции

Экстракт граната 31008, содержащий конкретные молекулы, получали с применением процедуры экстракции, основанной на адсорбции полифенолов в стандартной колонке на основе адсорбции полимера, как описано. Из гранатов (например, сорт Mollar) отжимали сок стандартным путем отжима сока и приготовления и осветляли путем центрифугирования перед адсорбцией на полимерной хроматографической смоле с получением чистого сока. Смолу Амберлит XAD-16 (Rohm & Haas) помещали в полупрепаративные колонки и загружали экстрагированным соком. Колонку промывали водой для удаления сахаров до завершения (уровни Брикса были ниже 0,1%). Полифенолы элюировали 100% этанолом. Остаточный этанол выпаривали под вакуумом с получением концентрированного экстракта, содержащего всего 4,5 г полифенола на литр, как определено с применением анализа Фолина для определения общего содержания полифенолов. Было показано, что Экстракт 31008 содержит молекулы Пуникалагина, Пуникалина, Теллимаграндина и Педункулагина с использованием идентификации соединений путем ВЭЖХ-МС, описанных выше. Данная технология представляет собой модификацию способов, известных в данной области техники, как описано в опубликованном отдельном способе очистки полифенолов из различных растений и ягод. Tuck, К.L. and P.J.Hayball (2002). "Major phenolic compounds in olive oil: metabolism and health effects." J Nutr Biochem 13(11): 636-644; и Schieber, A., P.Hilt, et al. (2003). "A new process for the combined recovery of pectin and phenolic compounds from apple pomace." InnoVations Food Sci. Emerging Technol. 4: 99-107.

Пример 4: Испытание на животных - водный лабиринт Морриса

Экстракт 31008 тестировали на модели болезни Альцгеймера у животных, экспрессирующей как мутации London мутанта амилоида, так и мутацию пренисилина-1 человека. У животных в данной модели появляются бляшки к 4 месяцам и дефицит памяти к 6 месяцам. Плотная нагрузка бляшками (plaque load) видна через 7 месяцев.

В одной серии экспериментов четырехмесячным трансгенным мышам APP-PS1 давали фиксированную дозу приблизительно 97 мг общих полифенолов/кг/сутки экстракта через питьевую воду. Через 3 месяца введения доз, мышей (на тот момент 7-месячных) тестировали с помощью теста водного лабиринта Морриса на пространственную ориентацию.

Тест водного лабиринта Морриса проводили на 84-87 день лечения. Бассейн (белая круглая емкость 1 м в диаметре) содержала воду при 20°С с диоксидом титана в качестве нетоксичной добавки без запаха для того, чтобы скрыть «спасательную» платформу (1 см ниже уровня воды). Плавание каждой мыши записывали на видеопленку и анализировали (Ethovision, Noldus information Technology, Вагенинген, Нидерланды). Перед обучением каждую мышь помещали на верхнюю часть платформы на 15 секунд. Для тестов перемещения к месту, мышей обучали определять местоположение скрытой платформы в пяти блоках трех испытаний в течение трех последовательных дней. Каждое испытание состоит из теста принудительного плавания в течение максимум 120 секунд с последующими 60 секундами отдыха. Время, необходимое каждой мыши для определения местоположения платформы, измеряли в ходе пяти последовательных блоков обучения с определением кривой обучения для каждой мыши.

Через 24 часа после последнего обучения каждое животное подвергали пробному испытанию с извлеченной платформой. Мышам позволяли искать отсутствующую платформу в течение 60 секунд и измеряли время поиска, проведенное в каждом секторе бассейна, а также число пересечений исходного положения платформы. Как показано на Фиг.24, мыши, которым давали экстракт 31008, демонстрировали повышенные показатели в пробном тесте, о чем свидетельствует повышенная частота пересечений области, где формально находилась платформа.

Пример 5: Испытание на животных - нагрузка амилоидными бляшками

Поскольку было показано, что нагрузка амилоидными бляшками коррелирует с развитием связанных с амилоидом заболеваний, исследовали эффекты лечения экстрактом 31008. Мышей умерщвляли и их головной мозг забирали и готовили к иммунной гистохимии с использованием стандартных способов. Делали сагиттальные вибратомные срезы (40 мкм) для свободноплавающих инкубации и хранили при 4°С до окрашивания в ФСБ с 0,1% азидом натрия. Для окрашивания выбирали тридцать последовательных срезов каждого головного мозга в области опорной структуры (латеральные от 2,18 до 1,08 мм). Срезы 1, 7, 13, 19, 25 окрашивали с помощью иммуногистохимии (IHC) на предмет Аβ (анти-амилоид). Используемые срезы всех животных рандомизировали для окрашивания и слепого количественного определения.

Свободноплавающие срезы инкубировали в лунках Nett с окрашиванием всех срезов в одном анализе и минимизацией вариации интенсивности. Срезы дважды промывали в ФСБ и инкубировали в течение 15 минут в пероксиде водорода 1,5% в ФСБ и метаноле (1:1) с устранением эндогенной активности пероксидазы. После промывки срезов три раза в ФСБ, содержащем 0,1% Triton Х100 (ФСБТ), срезы блокировали в течение 30 минут в 10% фетальной телячьей сыворотке (FCS) в ФСБТ с последующей инкубацией в течение ночи с биотинилированным первичным антителом в ФСБТ с 10% FCS (анти-амилоидное к N-концевой области Аβ, меченное биотином, с использованием разведения 1:2800). После промывки срезы инкубировали в 0,01% трипсине в ФСБ в течение 15 минут при 37°С с последующей инкубацией с комплексом авидин-биотин-пероксидаза (Vectastain Elite ABC, Vector, Burlingame, CA). Сигнал получали с помощью таблеток 3,3'-диаминобензидина тетрагидрохлорида (DAB, ICN, 1 таблетка/10 мл Tris-HCl с 3 мкл Н₂О₂ на 10 мл). Срезы контрастно окрашивали гематоксилином Майера, дегадратировали в пять этапов (50, 70, 95 и 2 × 100%) в этаноле и ксилоле (Merck Eurolab) и заключали в Depex (заливочная среда Depex, BDH Laboratory).

Как показано на Фиг.25, у мышей, которым давали указанный экстракт, происходило значительное снижение нагрузки амилоидными бляшками в головном мозге в соответствии с влиянием идентифицированных молекул на агрегацию.

Во второй серии экспериментов двухмесячным трансгенным мышам APP-PS1 давали фиксированную дозу приблизительно 90 мг (Экстракт 31008-L-) и 800 мг (Экстракт 31008-Н-) общих полифенолов/кг/сутки высокообогащенного Пуникалагином экстракта, Экстракта 31008, через питьевую воду. Другой группе также давали высокообогащенный Пуникалагином экстракт, Экстракт 61109 в дозировке 468 мг/кг/сутки. Последней группе давали полученный из кожуры граната экстракт 71109 в дозировке 120 мг/кг/сутки. Через 4 месяца введения доз мышей (на тот момент примерно 6,5-месячных) тестировали с помощью теста водного лабиринта Морриса на пространственную ориентацию.

Как показано на Фиг.26, мыши, которым давали экстракт 31008 в дозировке 97 мг/сутки, демонстрировали увеличение показателей во время пробного теста, как видно по увеличению времени, проведенного в зоне платформы. С другой стороны, мыши, которым давали экстракт 31008 в дозировке 828 мг/сутки, не демонстрировали изменения показателей по сравнению с контрольными трансгенными мышами, которым вводили изокалорийный носитель. Данный результат показывает влияние дозы на улучшение памяти с помощью используемого экстракта граната. Мыши, получающие экстракты 61109 и 71109, демонстрировали значительно улучшенные показатели в пробном тесте (Р<0,05 с помощью критерия множественного сравнения Тьюки по сравнению с носителем hAPP-Tg).

Пример 6: Тестирование на животных - старые крысы

Исследовали влияние перорального введения полифенолов из экстрактов граната на когнитивную способность у старых крыс. Данную систему модели выбирали для оценки эффектов лечения у животных, демонстрирующих нарушенную функцию головного мозга вследствие процесса старения, для выявления потенциальных полезных эффектов, которые могут быть недетектируемыми у нормальных людей молодого возраста. Лечение начинали у самцов крыс линии Sprague-Dawley в возрасте 19 месяцев, приблизительно соответствующем появлению нарушений когнитивной способности (см. Martinez-Serrano A, Björklund A. "Ex vivo nerve growth factor gene transfer to the basal forebrain in presymptomatic middle-aged rats prevents the development of cholinergic neuron atrophy and cognitive impairment during aging" Proc Natl Acad Sci USA. 1998 Feb 17; 95(4): 1858-63; и Bisson JF, Nejdi A, Rozan P, Hidalgo S, Lalonde R, Messaoudi M. "Effects of long-term administration of a cocoa polyphenolic extract (Acticoa powder) on cognitive performances in aged rats" Br J Nutr. 2008 Jul; 100(1): 94-101, Epub 2008 Jan 8). Показатели животных главным образом контролировали с использованием поведенческих тестов обучения плаванию и оценки памяти социального узнавания.

Полифенолы вводили перорально путем разведения в питьевой воде для воспроизведения в конечном счете целевого способа доставки. В экспериментах сравнивали две дозы обогащенных полифенолами экстрактов граната.

а) Социальное узнавание. В задаче на различение социального узнавания каждую старую крысу помещали в домашнюю клетку вместе с молодым самцом крысы линии Sprague-Dawley (<5 недель) на 5 минут. Через тридцать минут точно такую же процедуру повторяли с тем же молодым самцом с определением второй раз степени взаимодействия между указанными двумя животными. У животных с правильно функционирующей памятью ожидают меньшего контакта, т.к. два животных имели ранние взаимодействия. Через тридцать минут после второго представления новую молодую крысу помещали на 5 минут вместе со старой крысой для измерения того, может ли указанное животное различить два разных молодых индивидуума. В течение каждого периода взаимодействия между двумя животными измеряли общее время контакта для оценки социального узнавания. Данный тест проводили после 2,5-3 месяцев лечения.

Как показано на Фиг.27, у старых крыс, которым давали низкую дозу экстракта 31008 (15 мг эквивалента галловой кислоты/кг/сутки), наблюдаемое уменьшение времени, проведенного с молодой крысой #1 во время второго представления, показывало улучшенные показатели опознающей памяти вследствие лечения. При последующем представлении новой молодой крысы #2, время взаимодействия увеличивалось у старых крыс, получавших лечение экстрактом при 15 мг эквивалента галловой кислоты/кг/сутки, что показывает, что получавшие лечение старые крысы могут различать двух разных молодых крыс и обладают функционирующей памятью. С другой стороны, получавшие лечение изокалорийным контролем старые крысы демонстрируют сопоставимое время взаимодействия для первого и второго представления молодой крысы #1, что указывает на нарушение опознающей памяти. Контрольные старые крысы, которым представляют молодую крысу #2, демонстрируют сопоставимое время взаимодействия со всеми предыдущими представлениями молодой крысы #1, что указывает на то, что контрольные животные не могут различать данные взаимодействия, признак сниженной когнитивной способности и ухудшения памяти. (N=12 для изокалорийных контролей, N=14 для группы, получавшей лечение экстрактом). Старые крысы, получавшие лечение экстрактом в дозировке 75 мг эквивалента галловой кислоты/кг/сутки (N=10), в отличие от крыс, получавшие лечение 15 мг GAE, демонстрируют показатели, схожие с группой изокалорийного контроля при представлении второй раз молодой крысы #1 или новой молодой крысы #2, таким образом, демонстрируя важное значение дозирования в данном эффекте.

b) Водный лабиринт Морриса: обратный тест. Старых крыс непрерывно лечили экстрактом 31008 (15 мг эквивалента галловой кислоты/кг/сутки) или изокалорийным контролем в течение 3 месяцев, начиная с возраста 19 месяцев. Старых крыс тестировали на предмет показателей при обратной задаче: после обучения и пробного теста платформу помещали в противоположный сектор (ЗАПАД→ВОСТОК) и животное подвергали трем сеансам обучения. В данном тесте быстрота реадаптации к новому месту положения платформы при подобной задаче дополнительно оценивает способность животных к обучению.

Как показано на Фиг.28, старые крысы, которых лечили экстрактом при 15 мг эквивалента галловой кислоты/кг/сутки, демонстрировали значительно большую эффективность при определении местоположения платформы в обратном тесте по сравнению со старыми крысами, получавшими изокалорийный контроль (однофакторный дисперсионный анализ (one-way ANOVA), Р<0,02; изокалорийный контроль N=11; экстракт: N=14). Это иллюстрирует полезные эффекты низкой дозы экстракта (15 мг эквивалента галловой кислоты/кг/сутки) в отношении улучшения памяти и защиты по сравнению с естественным ухудшением памяти, наблюдаемым у контрольных, не получавших лечение старых крыс. Наблюдаемые эффекты 15 мг эквивалента галловой кислоты/кг/сутки согласуются с наблюдениями при оценке памяти социального узнавания и важным значением правильного дозирования для достижения улучшений памяти.

ВКЛЮЧЕНИЕ ПОСРЕДСТВОМ ССЫЛКИ

Содержание всех патентов США и публикаций заявок на патент США, приведенных в настоящем описании, включено в настоящее описание посредством ссылки.

ЭКВИВАЛЕНТЫ

Для специалиста в данной области техники многие эквиваленты конкретных вариантов реализации настоящего изобретения, описанных в настоящем документе, будут очевидны или их можно будет определить путем не более чем рутинного проведения экспериментов. Предполагается, что указанные эквиваленты находятся в рамках настоящего изобретения.

1. Способ лечения или предотвращения заболевания или болезненного состояния, выбранного из группы, состоящей из когнитивных расстройств, нейродегенеративных расстройств, связанных с амилоидозом состояний и болезни Альцгеймера, включающий этап введения нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества соединения, выбранного из группы, состоящей из Пуникалина (Punicalin) и Пуникалагина (Punicalagin).

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанное соединение является чистым и выделенным.

3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что соединение вводят в составе нутрицевтической композиции.

4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что соединение вводят в составе фармацевтической композиции.

5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что соединение вводят в составе функционального продукта питания или функционального пищевого продукта.

6. Способ по п. 1, отличающийся тем, что соединение вводят в составе медицинского продукта питания или медицинского пищевого продукта.

7. Способ по п. 1, отличающийся тем, что соединение вводят в составе диетической
добавки.

8. Способ по п. 1, отличающийся тем, что соединение вводят в составе лекарственного средства растительного происхождения.

9. Способ по п. 1, отличающийся тем, что субъект представляет собой млекопитающее.

10. Способ по п. 1, отличающийся тем, что субъект представляет собой человека.

11. Способ по п. 1, отличающийся тем, что субъект представляет собой животное.

12. Способ по п. 1, отличающийся тем, что заболевание или болезненное состояние представляет собой когнитивное расстройство.

13. Способ по п. 1, отличающийся тем, что заболевание или болезненное состояние представляет собой нейродегенеративное расстройство.

14. Способ по п. 1, отличающийся тем, что заболевание или болезненное состояние представляет собой связанное с амилоидозом состояние.

15. Способ по п. 1, отличающийся тем, что заболевание или болезненное состояние представляет собой болезнь Альцгеймера.

16. Способ по любому из пп. 1-15, отличающийся тем, что указанное соединение представляет собой Пуникалин (Punicalin).

17. Способ по любому из пп. 1-15, отличающийся тем, что указанное соединение представляет собой Пуникалагин (Punicalagin).