Способ лечения заболеваний глаз, сопровождающихся окислительным стрессом



Способ лечения заболеваний глаз, сопровождающихся окислительным стрессом
Способ лечения заболеваний глаз, сопровождающихся окислительным стрессом
Способ лечения заболеваний глаз, сопровождающихся окислительным стрессом
Способ лечения заболеваний глаз, сопровождающихся окислительным стрессом
Способ лечения заболеваний глаз, сопровождающихся окислительным стрессом
Способ лечения заболеваний глаз, сопровождающихся окислительным стрессом
Способ лечения заболеваний глаз, сопровождающихся окислительным стрессом

 

A61F9/00 - Способы и устройства для лечения глаз; приспособления для вставки контактных линз; устройства для исправления косоглазия; приспособления для вождения слепых; защитные устройства для глаз, носимые на теле или в руке (шапки, кепки с приспособлениями для защиты глаз A42B 1/06; смотровые стекла для шлемов A42B 3/22; приспособления для облегчения хождения больных A61H 3/00; ванночки для промывки глаз A61H 33/04; солнцезащитные и другие защитные очки с оптическими свойствами G02C)

Владельцы патента RU 2577236:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Московский научно-исследовательский институт глазных болезней имени Гельмгольца" Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова" (RU)

Изобретение относится к медицине, в частности к офтальмологии, и предназначено для лечения заболеваний глаз, сопровождающихся окислительным стрессом. Супероксиддисмутазу вводят в состав кальций-фосфатных биодеградируемых наночастиц, покрытых дисахаридами, с радиусом до 350 нм и в диапазоне ферментативной активности от 20 до 500 кЕД/мл и инсталлируют в конъюнктивальную полость глаза. Способ позволяет увеличить терапевтическую эффективность супероксиддисмутазы за счет усиления способности этого фермента снижать выраженность окислительного стресса при глазных заболеваниях. 6 пр.

 

Изобретение относится к медицине, в частности к офтальмологии и фармации, и предназначено для лечения заболеваний глаз, сопровождающихся окислительным стрессом. Роль свободнорадикальных процессов в патологии впервые была установлена отечественными учеными в 60-х годах 20 века [Тарусов Б.Н. Физико-химические механизмы биологического действия ионизирующих излучений// Успехи совр. биологии, 1957, 44, 2, 171-185; Эммануэль Н.М., Липчина Л.П. Лейкоз у мышей и особенности его развития при воздействии ингибиторов цепных окислительных процессов // Доклады АН, 1958, 121, 1, 141-144]. Но и в настоящее время контроль образования свободных радикалов при лечении широкого круга заболеваний остается актуальной проблемой медицины, в том числе в офтальмологии. Свободные радикалы - это атомы или молекулы с неспаренными электронами на внешних электронных оболочках, которые обладают высокой реакционной способностью. В организме в норме процессы образования свободных радикалов строго регулируются системой антиоксидантной защиты, которая включает ферментные и неферментные антиоксиданты. К числу ферментных антиоксидантов относятся супероксиддисмутаза (СОД), каталаза, глутатион-пероксидазы.

Под окислительным стрессом понимают усиление свободнорадикальных процессов на фоне ослабления собственной антиоксидантной системы, которое приводит к повреждению практически всех компонентов тканевых структур, нарушению метаболических процессов и структуры тканей [Зенков Н.К., Ланкин В.З., Меньшикова Е.Б. Окислительный стресс: Биохимический и патофизиологический аспекты. 2001, М.: МАИК «Наука Интерпериодика»]. Высокая вероятность свободнорадикального повреждения тканей глаза обусловливается несколькими причинами. Во-первых, ткани глаза постоянно подвергаются действию света, что приводит к фотоинициированию перекисного окисления липидов (ПОЛ). Во-вторых, липиды, входящие в состав внутриглазных тканей, по своему составу являются чрезвычайно легко окисляемым субстратом для ПОЛ. Так, в мембранных структурах сетчатки более половины фосфолипидов содержат полиеновые остатки жирных кислот, восприимчивые к атаке активированными кислородными метаболитами. Кроме того, в фоторецепторах присутствует много митохондрий, в которых проходит постоянное потребление кислорода, сопровождающееся образованием активных форм кислорода, что делает их уязвимыми в отношении окислительного стресса.

Практически нет такой офтальмологической патологии, при которой не было бы установлено усиления свободнорадикальных процессов. Например, показана их важная роль в патогенезе глаукомы [Зиангирова Г.Г., Антонова О.В. Перекисное окисление липидов в патогенезе первичной открытоугольной глаукомы // Вестн. Офтальмол., 2003, 4, 54-55], катаракты [Gamer В., Davies V.J., Truscott R.J. W. Formation of hydroxyl radicals in the human lens is related to the severity of nuclear cataract // Exp. Eye Res., 2000, 70, 81-88], псевдоэксфолиативного синдрома [Koliakos G.G., Konstas A., Schlotzer-Schrehardt U., Hollo G., Katsimbris I.E., Georgiadis N., Ritch R. 8-Isoprostaglandin F2a and ascorbic acid concentration in the aqueous humour of patients with exfoliation syndrome// Br. J. Ophthalmol., 2003, 87, 3, 353-356], внутриглазных кровоизлияний [Ромащенко А.Д., Гундорова Р.А., Касавина Б.С. Роль перекисного окисления липидов в патогенезе развития травматического гемофтальма // Вестн. Офтальмол., 1981, 2, 51-53], ожоговой болезни глаз [Гулидова О.В., Любицкий О.Б., Клебанов Г.И., Чеснокова Н.Б. Изменение антиокислительной активности слезной жидкости при экспериментальной ожоговой болезни глаз. Бюлл. Экспер. Биол. Мед.// 1999, 128, 11, 571-574], диабетической ретинопатии [Булатова О.С., Кондратьев Я.Ю., Миленькая Т.М. Окислительный стресс: клинико-метаболические показатели и полиморфный маркер гена каталазы при развитии ретинопатии у больных сахарным диабетом II типа. Клин. Эндокринол.// 1999, 45, 4, 3-7]. По мнению ряда авторов для многих глазных болезней характерна активация ПОЛ на уровне всего организма [Бабенкова И.В., Теселкин Ю.О., Макашова Н.В., Гусева М.Р. Антиоксидантная активность гистохрома и некоторых лекарственных препаратов, применяемых в офтальмологии. Вестн. Офтальмол. // 1999, 4, 22-24].

В условиях окислительного стресса клетки продуцируют в очень больших количествах супероксид-анион. Супероксид - это молекулярный кислород с неспаренным электроном на внешнем уровне. Супероксид может реагировать с молекулами воды с образованием очень агрессивного гидроксильного радикала, а также с оксидом азота с образованием высокотоксичного пероксинитрита. Гидроксильные радикалы могут легко реагировать с органическими и неорганическими молекулами, способны разрушать практически все структурные и функционально активные компоненты тканей, приводят к образованию органических свободных радикалов. Образующиеся в большом количестве свободные радикалы способствуют возникновению различных нарушений в иммунной системе, а также вызывают образование токсических веществ, что приводит к усугублению нарушений микроциркуляции в тканях, приводящее к ишемизации и гипоксии тканей [CarubelliR., Nodrquist R.E., Rowsey J.J. Role of active oxygen species in corneal ulceration. Effect of hydrogen peroxide generated in situ // Cornea, 1990, 9, 161-169; Yadav U.C. S., Kalariya N.M., Ramana K.V. Emerging role of antioxidants in the protection of uveitis complications// Curr. Med. Chem., 2011, 18, 931-942].

В организме контроль концентрации супероксид-аниона, играющего важную роль в запуске окислительного стресса, в основном осуществляет антиоксидантный фермент супероксиддисмутаза (СОД). Супероксиддисмутаза катализирует реакцию дисмутации супероксидных кислородных радикалов в кислород и перекись водорода согласно следующим реакциям.

Имеется несколько изоформ СОД, которые находятся в разных клеточных структурах, а также во внеклеточном пространстве, где эти ферменты осуществляют контроль уровня супероксид-аниона.

Действие препаратов на основе СОД направлено на усиление собственной защитной реакции организма при окислительном стрессе. В данной работе предлагается применение в виде глазных капель препарата, действующим началом которого является СОД, внедренная в кальций-фосфатные наночастицы (КФЧ), с целью увеличения проникновения фермента во внутренние структуры глаза.

Известен способ того же назначения, предусматривающий инстилляции в конъюнктивальную полость антиоксидантного препарата на основе рекомбинантной супероксиддисмутазы (фармацевтический препарат «Рексод-ОФ», ЛСР-006689/10 от 15.07.10). Показаниями к его применению являются первичная открытоугольная глаукома, аденовирусное поражение глаз, вторичная кератопатия.

Известным недостатком препаратов, применяемых для закапывания в глаз, является их плохое проникновение во внутренние структуры глаза. Помимо этого, лекарственный препарат легко смывается слезой с поверхности глаза, а также поступает в носослезный канал. В среднем только около 5% от вводимого лекарственного вещества способно проникнуть через роговую оболочку и достичь внутриглазных тканей [Ahmad I., Patton Т. Importance of thenon and corneal absorption routes in topical ophthalmic drug delivery // Invest. Ophtalm. Vis. Sci., 1985, 26, 584-587]. В итоге, необходимую концентрацию лекарственной субстанции в препарате необходимо повышать, что усиливает нежелательные побочные эффекты как локальные, так и системные, связанные с последующим попаданием этих препаратов в кровоток.

Препарат Рексод-ОФ выпускается в виде лиофилизата СОД. Перед употреблением содержимое флакона 0,8 млн ЕД разводят в 2 мл воды и полученный раствор (глазные капли) хранят в холодильнике при 4-10°С в течение не более 3 дней. Данному препарату присущи все вышеперечисленные недостатки использования капельного метода введения в виде сложности создания требуемой концентрации действующего вещества во внутренних тканях глаза, что вызывает необходимость его частого закапывания - до 8 раз в сутки.

Перспективным подходом к решению проблемы проникновения лекарственного препарата внутрь глаза является использование наночастиц в качестве систем доставки, так как они способны значительно увеличивать биодоступность лекарственного препарата и повышать концентрацию вещества в тканях без изменения исходной концентрации препарата [Araujo J., Gonzalez Е., Egea М.А., Garcia M.L., Souto E.B. Nanomedicines for ocular NSAIDs: safety on drug delivery // Nanomedicine, 2009, 5, 394-401; Sahoo S.K., Dilnawaz F., Krishnakumar S. Nanotechnology in ocular drug delivery // Drug Discov. Today, 2008, 13, 144-151]. Серьезной проблемой в разработке глазных лекарственных форм на основе наночастиц является сложность получения этих препаратов. Наночастицы должны быть биосовместимы, хорошо выводиться из организма, не оказывать токсического действия. Так, при включении СОД в полимерные наночастицы на основе сшитого метокси-поли(этиленгликоль)-поли(L-лизин) блок-сополимера и целевых добавок [Патент RU 2012130852/15, 19.07.2012; Patent US 2014/0120075 A1, May 1, 2014] экспериментально было показано усиление терапевтического действия СОД. Однако с технологической точки зрения получение данного блок-сополимера, обладающего, кстати, немалой стоимостью, является достаточно сложным и трудно масштабируемым процессом. Поэтому не снят вопрос о поиске других наночастиц - носителей СОД для применения в фармации.

В качестве альтернативы органическим частицам к использованию предложены неорганические, в частности, кальций-фосфатные частицы (КФЧ). Методика получения КФЧ была впервые упомянута и запатентована в 2002 году [US Patent №6,355,271 B1, 12 March 2002]. Кальций-фосфатные наночастицы хорошо выводятся из организма и обладают хорошей биосовместимостью ввиду схожести по составу с гидроксиапатитом Са10(PO4)6(ОН)2, который является основным компонентом костей и зубов человека [Не Q., Chu T. - C, Potter D. Biodegradable Calcium Phosphate Nanoparticles as a New Vehicle for Ocular Delivery of a Potential Ocular Hypotensive Agent // J. Ocular Pharmacol, and Therap., 2002, V. 18, P. 507-514].

Была показана способность КФЧ при инсталляциях в глаз кроликов проникать во внутренние среды глаза [Шимановская Е.В., Безнос О.В., Клячко Н.Л., Кост О.А., Никольская И.И., Павленко Т.А., Чеснокова Н.Б., Кабанов А.В. Получение кальций-фосфатных наночастиц, содержащих тимолол, и оценка их влияния на внутриглазное давление в эксперименте // Вестн. Офтальмол., 2012, 3, 15-18; патент RU №: 2472471, 20.01.2013; Шимановская Е.В., Никольская И.И., Биневский П.В., Безнос О.В., Клячко Н.Л., Павленко Т.А., Чеснокова Н.Б., Кост О.А. Лизиноприл в составе кальций-фосфатных наночастиц как перспективный антиглаукомный препарат // Российские нанотехнологии. 2014, Т. 9, №3-4, 100-106]. В этих работах были продемонстрированы повышение эффективности и пролонгация эффекта снижения внутриглазного давления в экспериментах in vivo на кроликах при включении в КФЧ низкомолекулярных соединений - адреноблокатора тимолола и ингибитора ангиотензин-превращающего фермента лизиноприла.

Эксперименты по внедрению в КФЧ ингибитора карбоангидразы, который эффективно снижает ВГД, показали, что такой препарат снижает ВГД намного эффективнее не только водного раствора этого вещества, но и коммерческого препарата бринзоламида. При этом никаких побочных эффектов при использовании частиц выявлено не было [X. Zhang, W. Yaun, D. Zhau, J. Wu. Lyceum Chinense and calcium phosphate nanoparticles for ophthalmic drug delivery // Nanotech., 2008, V. 2, P. 401-404].

В настоящее время в литературе нет данных по внедрению в КФЧ ферментов различной природы.

Техническим результатом предлагаемого способа является увеличение терапевтической эффективности СОД, связанное с усилением способности СОД снижать выраженность окислительного стресса при глазных заболеваниях.

Технический результат достигается за счет инсталляций в конъюнктивальную полость СОД в составе кальций-фосфатных биодеградируемых наночастиц, покрытых дисахаридом, с радиусом 50-350 нм и в диапазоне ферментативной активности от 20 до 500 кЕД/мл.

Частицы получали по модифицированной нами методике, предложенной впервые в 2002 году [US Patent №6,355,271 B1, 12 March 2002]. В этой работе после смешивания растворов хлорида кальция и фосфата калия частицам давали состариться в течение 48 часов перед воздействием ультразвука. В этом случае помимо частиц с радиусом 50-200 нм образуются также частицы с радиусом около 500 нм и более. Мы использовали метод, при котором смешивание эквимолярных растворов хлорида кальция и фосфата калия проводилось одновременно с ультразвуковым воздействием продолжительностью 30 мин. После этого частицы оставляли стабилизироваться. В результате мы получали частицы с радиусом только до 350 нм. Для повышения стабильности частиц было использовано покрытие их 0,5% раствором целлобиозы или лактозы. Для приготовления препарата мы внедряли супероксиддисмутазу в КФЧ на стадии их получения. Была показана стабильность определяющих параметров КФЧ (размер, дзета-потенциал) при хранении в течение как минимум 6 месяцев. Показано, что активность СОД в составе КФЧ при хранении в виде водной суспензии при 4C° падает не более чем на 30% в течение 2 месяцев. Показано, что водные суспензии КФЧ, содержащие СОД, можно подвергать концентрированию на мембранных фильтрах без потери ими ферментативной активности и изменения размера и поверхностного заряда. Важно с технологической точки зрения, что СОД-содержащие КФЧ не теряют своих свойств в результате лиофилизации. Лиофильно высушенные КФЧ, содержащие СОД, могут храниться при -20°, по крайней мере, в течение полугода без изменения свойств.

Сравнительное изучение терапевтического действия СОД в растворе и СОД в составе КФЧ мы проводили на моделях воспалительного процесса, сопровождающегося окислительным стрессом, во внутренних (иммуногенный увеит - воспаление сосудистой оболочки глаза) и внешних (ожог роговицы) структурах глаза кроликов.

При увеите имеется высокая степень корреляции между выраженностью воспаления и окислительным стрессом. Ранее нами было показано, что инсталляции СОД при увеите у кроликов по своему терапевтическому действию не уступают общепринятому методу лечения увеитов с помощью дексаметазона, который вызывает много побочных эффектов. Кроме того, в отличие от дексаметазона, СОД в значительной степени снижает уровень окислительного стресса во внутренних средах глаза при увеите [Чеснокова Н.Б., Нероев В.В., Безнос О.В., Бейшенова Г.А., Никольская И.И., Кост О.А., Биневский П.В., Шехтер А.Б. Окислительный стресс при увеите и его коррекция антиоксидантным ферментом супероксиддисмутазой // Вестн. Офтальмол. 2014, т.30, №5, 30-36]. При ожоге глаза развивается воспалительный процесс, сопровождающийся значительным снижением антиоксидантного потенциала, что свидетельствует об истощении собственной антиоксидантной системы при окислительном стрессе [Гулидова О.В., Любицкий О.Б., Клебанов Г.И., Чеснокова Н.Б. Изменение антиокислительной активности слезной жидкости при экспериментальной ожоговой болезни глаз // Бюл. Эксп. Биол. Мед., 1999, 128, 11, 571-574].

Работа выполнена на 30 кроликах (60 глаз) породы шиншилла массой 2,0-2,5 кг. В первой серии экспериментов у 15 животных воспроизводили увеит путем двукратного введения нормальной лошадиной сыворотки: первую дозу (5 мл) вводили подкожно, вторую (0,07 мл) - интравитреально на 10-е сутки после первой [Нероев В.В., Давыдова Г.А., Перова Т.С. Моделирование иммуногенного увеита у кроликов // Бюл. Эксп. Биол. Мед., 2006, 142, 11, 598-600]. Во второй серии экспериментов 15 кроликам наносили дозированный ожог центральной области роговицы с помощью круга из хлопчатобумажной ткани диаметром 5 мм, пропитанного 1н. NaOH, с временем экспозиции 40 сек.

Для лечения использовали препарат Рексод-ОФ (ООО ′′НПП Ферментные технологии′′, Россия), представляющий собой рекомбинантную СОД человека (400 кЕД в 1 мг), и полученный нами препарат СОД в составе КФЧ, содержащий СОД с такой же активностью.

Кролики в каждой серии экспериментов были разбиты на 3 группы по 5 животных. Первой группе ежедневно в течение 7 дней при увеите и 14 дней при ожоге проводили инсталляции Рексод-ОФ 3 раза в день по 30 мкл в оба глаза, второй - раствор СОД в составе КФЧ в том же режиме, третьей - плацебо (буферный раствор рН 7,4).

Клиническую оценку течения увеита проводили ежедневно в течение 8 дней после начала, а ожогового процесса на 1, 3, 7, 14, 21 и 28 сутки после травмы путем биомикроскопии с помощью щелевой лампы. В условных баллах по принятой в лаборатории шкале оценивали выраженность следующих признаков: 1) при увеите - отек радужки, отек роговицы, количество фибрина в передней камере глаза, наличие задних синехий, помутнение хрусталика, интенсивность неоваскуляризации роговицы; 2) при ожоге роговицы - отек роговицы, площадь и глубину язв роговицы, интенсивность неоваскуляризации роговицы.

Результаты показали преимущество заявленного препарата СОД, внедренного в кальций-фосфатные наночастицы, по сравнению с коммерческим водным раствором СОД при местном применении при лечении заболеваний как внутренних, так и внешних структур глаза, сопровождающихся окислительным стрессом. При воспалении внутренних структур глаза, имеющем место при иммуногенном увеите у кроликов, преимущество применения СОД в КФЧ по сравнению с простым раствором СОД выражается в снижении интенсивности воспаления, снижении отека роговицы в острый период увеита в среднем на 20%, снижении на 40% количества фибриновых сгустков в передней камере глаза на протяжении всего периода наблюдения, что способствует сохранению прозрачности сред глаза и снижению вероятности возникновения осложнений, например, вторичной глаукомы вследствие закрытия фибриновыми сгустками путей оттока внутриглазной жидкости. Полученные данные могут напрямую свидетельствовать об улучшении проникновения СОД в составе КФЧ во внутренние структуры глаза (увеличение биодоступности) с сохраненной ферментативной активностью. На примере ожога роговицы глаза (оценивался воспалительный процесс во внешних структурах глаза) показана более высокая эффективность СОД в КФЧ по сравнению с простым раствором СОД, которая выражалась в более эффективном противоспалительном и противоязвенном действии, повышении прозрачности роговицы, снижении величины площади ее изъязвления в среднем на 22% и глубины язв на 27%. Полученные результаты свидетельствуют о более эффективном действии на течение постожогового воспалительного процесса СОД в КФЧ по сравнению с СОД в простом растворе, что может быть связано с лучшим проникновением СОД в составе наночастиц в ткань роговицы.

В рамках данной работы было показано, что включение в кальций-фосфатные частицы супероксиддисмутазы повышает эффективность действия фермента без повышения его концентрации. Это важно, поскольку позволяет снизить частоту закапывания препарата, а также снизить концентрацию действующей субстанции, что снижает вероятность побочного действия препарата и улучшает качество жизни пациента.

Способ осуществляют следующим образом. Суспензию СОД, внедренной в кальций-фосфатные наночастицы с радиусом 50-350 нм, в диапазоне активности от 20 до 500 кЕД/мл применяют местно в виде капель для снижения окислительного стресса (интенсивности свободнорадикальных процессов). Режим лечения зависит от вида и характера течения патологического процесса. Частота введения может варьировать от 2 до 5 закапываний в сутки. Лечение при острых процессах следует продолжать до достижения эффекта снижения клинических проявлений, а при хронических заболеваниях лечение следует проводить курсами по 2 недели 2-6 раз в год.

Апробация на экспериментальных моделях является необходимым этапом обоснования и внедрения любого нового метода лечения. Нами были выбраны модели воспалительных процессов у кроликов: в основном внешних (ожог) и в основном внутренних (увеит) структур глаза. Модель ожога глаза у кроликов воспроизводит все проявления и стадии ожоговой болезни глаз у человека, сопровождается локальным усилением свободнорадикальных процессов [Burgalassi S, Nicosia N, Monti D, Falcone G, Boldrini E, Fabiani O, Lenzi C, Pirone A, Chetoni P. Arabinogalactan as active compound in the management of corneal wounds: in vitro toxicity and in vivo investigations on rabbits // Eye Res., 2011, 36, 1, 21-28; Гулидова O.B., Любицкий О.Б., Клебанов Г.И., Чеснокова Н.Б. Изменение антиокислительной активности слезной жидкости при экспериментальной ожоговой болезни глаз // Бюл. Экспер. Биол. Мед., 1999, 128, 11, 571-574]. Патогенетические механизмы развития иммуногенного увеита у кроликов соответствуют закономерностям развития увеита у человека, и поэтому эта модель используется для обоснования новых методов лечения увеита. Показана роль окислительного стресса при увеите у кроликов и у человека [Yadav U.С.S., Kalariya N.М., Ramana К.V. Emerging role of antioxidants in the protection of uveitis complications // Curr. Med. Chem., 2011, 18, 931-942]. Поэтому полученные нами результаты экспериментального исследования, в которых было показано увеличение терапевтической эффективности СОД, внедренной в кальций-фосфатные наночастицы, по сравнению с простым раствором фермента, можно использовать для обоснования целесообразности применения этого метода доставки СОД в глаз человека.

Способ поясняется следующими примерами.

Оценка клинической картины показала, что у кролика №14 в течение всего периода наблюдения признаки увеита были ярко выражены: конъюнктива отечна и гиперемирована, развивались прогрессирующие отек роговицы, отек и гиперемия радужки, во влаге передней камеры в большом количестве обнаруживался фибрин, формировались задние синехии, в большинстве случаев круговые, хрусталик становился диффузно мутным, стекловидное тело сквозь него не визуализировалось, отмечалась выраженная неоваскуляризация роговицы.

У кролика №7 признаки конъюнктивита были выражены незначительно, перикорнеальная инъекция конъюнктивы - умеренно. Отек роговицы был локальным, не резко выраженным и со временем уменьшался, как и отек радужки. Количество фибрина в передней камере и неоваскуляризация роговицы были менее выражены, чем у кролика №14. Во время лечения отмечался регресс задних синехий и частичное восстановление реакции зрачка на свет. Помутнение хрусталика было незначительным. Таким образом, лечение препаратом Рексод, содержащим фермент в виде простого водного раствора, привело к существенному снижению выраженности всех проявлений увеита по сравнению с кроликом, получавшим плацебо.

У кролика №13, получавшего инсталляции СОД в наночастицах, проявления увеита были еще меньше выражены, чем у кролика №7, получавшего фермент в растворе. Отек и гиперемия век были очень незначительны. Самые большие различия заключались в существенно меньшем содержании фибрина в передней камере глаза, что способствует лучшему сохранению прозрачности оптических сред глаза и снижению вероятности развития вторичной глаукомы вследствие закупорки путей оттока внутриглазной жидкости.

Сразу после ожога на месте нанесения травмы образовался дефект эпителия, который в течение 3-х дней закрывался, но в последующие дни вновь обнажалась строма роговицы, в которой начинался процесс ее изъязвления. Максимальная интенсивность изъязвления достигалась на 14-21 сутки, при этом на одном глазу образовалось десцеметоцеле (язва роговицы до десцеметовой базальной мембраны), создающее угрозу перфорации роговицы, а на 28 сутки на месте ожога оставалось точечное изъязвление. Наблюдался отек роговицы, рост в ней новообразованных сосудов, в обоих глазах отмечен гипопион (наличие гноя в передней камере глаза). Отмечался значительный отек век, отек и гиперемия конъюнктивы. Отек области роговицы, окружающей ожог, делал ее полностью непрозрачной.

У кролика №24, получавшего Рексод, отек век, отек и гиперемия конъюнктивы были меньше, чем у кролика №17, получавшего плацебо. Через область роговицы, окружающей ожог, можно было различить радужку, что свидетельствует о меньшей отечности этой ткани. Существенно ниже была интенсивность изъязвления роговицы, в передней камере глаза гипопиона не отмечалось. К 28 суткам формировалась рубцовая ткань без признаков изъязвления.

У кролика №29, получавшего СОД в наночастицах, на всем протяжении наблюдения отек и гиперемия век и конъюнктивы были менее выражены, чем у кролика №24, получавшего СОД в простом растворе. Степень изъязвления роговицы также снижалась и по глубине и площади не превышала умеренного уровня, на 28 сутки формировалась более нежная рубцовая ткань без признаков изъязвления. Через полупрозрачную область роговицы, окружающей ожог, хорошо просматривался рисунок радужки. Гноя в передней камере глаза не было.

Таким образом, применение супероксиддисмутазы, внедренной в кальций-фосфатные наночастицы, в виде местных инсталляций для лечения ожога глаз позволяет снизить выраженность воспалительной реакции тканей глаза, снизить интенсивность изъязвления роговицы по сравнению с применением простого раствора СОД, что приводит к образованию более нежной рубцовой ткани, что, в свою очередь, улучшает оптические свойства роговицы и позволяет лучше сохранить зрение.

Внедрение СОД в кальций-фосфатные наночастицы позволяет обеспечить усиление терапевтического эффекта при лечении заболеваний глаза, сопровождающихся окислительным стрессом как во внешних, так и внутренних структурах глаза. В данном исследовании мы сравнивали одинаковые режимы и дозы введения СОД в растворе и СОД в КФЧ. Полученные данные, свидетельствующие о большей терапевтической эффективности фермента в составе наночастиц, позволяют полагать, что его можно применять менее часто и в меньшей дозе, чем препарат в простом растворе. В то же время выбор дозы и режима применения должен зависеть от тяжести, локализации, характера течения патологии.

Показанием к применению супероксиддисмутазы в составе кальций-фосфатных наночастиц является широкий круг глазных болезней, в патогенезе которых большую роль играет усиление процессов свободнорадикального окисления. Это воспалительные процессы любой этиологии и локализации, нейродегенеративные процессы в сетчатке, включая глаукому и возрастную дистрофию сетчатки, диабетическая ретинопатия, профилактика катаракты. Метод получения СОД в составе КФЧ достаточно прост, не требует применения органических растворителей, сами частицы биосовместимы и биодеградируемы, обладают высокой биодоступностью и позволяют создать в тканях высокую концентрацию активного фермента.

Способ лечения заболеваний глаз, сопровождающихся окислительным стрессом, включающий инсталляции в конъюнктивальную полость препарата на основе супероксиддисмутазы (СОД), отличающийся тем, что СОД вводят в составе кальций-фосфатных биодеградируемых наночастиц, покрытых дисахаридами, с радиусом до 350 нм и в диапазоне ферментативной активности от 20 до 500 кЕД/мл.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к фармацевтической композиции для профилактики или лечения макулярной дегенерации, содержащее бензопирановые производные формулы 1 или их фармацевтически приемлемые соли в качестве активного компонента, где R1 соответствует H, CN, NO2 или NH2, R2 соответствует , R3 и R4 независимы друг от друга и соответствуют H, Cl, Br, F, C1~C3 алкильному радикалу с линейной или разветвленной цепью, ORb, CF3, OCF3, NO2 или CO2Rb, Ra соответствует C1~C4 алкильному радикалу с линейной или разветвленной цепью, Rb соответствует H или C1~C3 алкильному радикалу, и * соответствует хиральному центру.

Изобретение относится к органическим солям бромфенака, которые являются диэтиламиновой или трометамоловой солью бромфенака и имеют структуру, представленную приведенными ниже формулами II или III.

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и предназначено для лечения метаболических поражений тканей глаза. Фармацевтическая композиция в виде геля для лечения метаболических поражений тканей глаза содержит карнозин синтетический, консервант, гиалуроновую кислоту в качестве гелеобразующего препарата и воду.
Группа изобретений относится к медицине, а именно к офтальмологии, и предназначена для лечения отека желтого пятна. Глазные капли в виде эмульсии для лечения отека желтого пятна содержат эффективное количество дифлупредната в качестве активного ингредиента и фармацевтически приемлемые вещества.

Изобретение относится к соединениям формулы (I), где R1 представляет собой водород или C1-C6алкил; R2 представляет собой водород и R3 представляет собой гидрокси(C1-C6)алкил; или их фармацевтически приемлемым солям.

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и касается системы доставки офтальмологического лекарственного препарата. Эта система включает средство доставки, содержащее фосфолипид или смесь фосфолипидов, холестерин, и терапевтический агент в определенных массовых соотношениях.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к офтальмологии, и предназначена для лечения офтальмологических нарушений у пациента. Офтальмологическая композиция суспензии на водной основе для местного применения содержит карбоксивиниловый полимер в концентрации от 0,1 до 0,5% (вес./об.), галактоманнан в концентрации от 0,1 до 0,4% (вес./об.), борат в концентрации от 0,4 до 2,0% (вес./об.) и труднорастворимое соединение в виде частиц, представляющее собой непафенак в концентрации от 0,25 до 0,35% (вес./об.).

Группа изобретений относится к медицине, а именно к оториноларингологии, и предназначена для лечения ушных инфекций, обусловленных хинолон-резистентными микробами, в частности Ципрофлоксацин резистентными микробами.

Изобретения относятся к области биотехнологии. Предложены: варианты моноклонального антитела против VEGF или его антигенсвязывающего фрагмента, которые характеризуются тем, что содержат 6 CDR и при этом возможно замену Т51А в CDR-L2, а также имеют одну или комбинацию замен по сравнению с антителом бевацизумабом, а именно: 1.

Изобретение относится к медицине, в частности к офтальмологии, и может быть использовано для консервативного лечения инволюционных заболеваний глаз. Проводят курс оптико-рефлекторных тренировок цилиарной и глазодвигательных мышц с использованием сферических и сферо-призматических линз одновременно с инъекционным лечением за 5-60 минут до инъекции, начиная с третьего дня курса.

Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для лечения и профилактики кетоза у коров. Лекарственное средство включает лизин гидрохлорид, гистидин, метионин.

Изобретение относится к области неорганической химии. Предложен продукт в виде агломератов оксигидроксидов металлов, выбранных из группы, состоящей из Al, Fe, Mg, Ti или их смеси.

Изобретение относится к области медицины, а именно к травматологии и ортопедии, и может быть использовано при лечении приобретенных дефектов, таких как кисты, ложные суставы, переломы костей, сопровождающиеся образованием дефектов, а также атрофии костной ткани.
Изобретение относится к области медицины, в частности к стоматологии. Предлагаемый способ лечения пародонтита включает два этапа.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и представляет собой энтеросорбент в форме таблетки, содержащей диоксид кремния коллоидный, микрокристаллическую целлюлозу, декстрозу, кроскармелозу натрия, тальк фармакопейный и стеарат магния, причем компоненты в энтеросорбенте находятся в определенном соотношении в масс.%.
Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для лечения анемии у беременных. Для этого определяют концентрации сывороточного железа в крови.
Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для лечения аллергических заболеваний. Для этого вводят утром натощак ½ суточной дозы энтеросорбента ежедневно в течение 1-3 месяцев за 2-3 часа до еды.

Группа изобретений относится к фармацевтической композиции для адсорбирования фосфата в организме и/или из биологических жидкостей при внутреннем или наружном применении и к биологически активной пищевой добавке.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к пероральной фармацевтической композиции, содержащей полисахариды из кладодия Opuntia Ficus Indica, экстракт из листьев Olea Europeae, альгинат и бикарбонат натрия в определенном соотношении.
Изобретение относится к области медицины и предназначено для интраоперационной и ранней постоперационной инфузионной терапии. Способ включает введение кристаллоидного сбалансированного раствора стерофундина изотонического и сбалансированного коллоидного раствора тетраспана.

Изобретение относится к офтальмологии и предназначено для оптимизации измерения длины ПЗО у пациентов со зрелой катарактой. Для измерения передне-задней оси (ПЗО) глаза при зрелой катаракте сначала для локализации ФЗ выполняют аксиальное В-сканирование глаза, используя высокочастотный линейный датчик 10-16 МГц, с получением одновременного изображения роговицы, передней и задней поверхности хрусталика, заднего полюса глаза, зрительного нерва.
Наверх