Способ прогнозирования риска развития преэклампсии



Способ прогнозирования риска развития преэклампсии
Способ прогнозирования риска развития преэклампсии
Способ прогнозирования риска развития преэклампсии
G01N33/50 - химический анализ биологических материалов, например крови, мочи; испытания, основанные на способах связывания биоспецифических лигандов; иммунологические испытания (способы измерения или испытания с использованием ферментов или микроорганизмов иные, чем иммунологические, составы или индикаторная бумага для них, способы образования подобных составов, управление режимами микробиологических и ферментативных процессов C12Q)

Владельцы патента RU 2578425:

Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Белгородский государственный национальный исследовательский университет" (RU)

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу прогнозирования вероятности риска возникновения преэклампсии у женщин русской национальности, являющихся уроженками Центрально-Черноземного региона России. Сущность способа состоит в том, что осуществляют забор венозной крови, выделение ДНК из периферической венозной крови, анализ полиморфизма гена по локусу -344С/Т CYР11 В2 в сочетании с другими предикторами развития данного осложнения беременности. Прогнозируют риск развития преэклампсии по результатам уравнения Р=еy/(1+еy), где е - математическая константа, равная 2,72, а y находят из уравнения бинарной логистической регрессии следующего вида: y=16,462+0,820*x1+0,680*x2-2,470*х3-2,444*х4-0,132*х5, где x1 - генетический вариант по локусу - 344С/Т CYР11 В2, где СС или ТС - 1, ТТ - 0; х2 - курение: да - 0, нет - 1; х3 - наличие ПЭ у родственников: да - 0, нет - 1; х4 - наличие патологии со стороны сердечно-сосудистой системы: да - 0, нет - 1; х5 - САД до беременности, мм рт.ст. Использование заявленного способа позволяет эффективно спрогнозировать вероятность риска возникновения преэклампсии у женщин русской национальности, являющихся уроженками Центрально-Черноземного региона России. 2 табл., 1 ил., 2 пр.

 

Изобретение относится к области медицинской диагностики, может быть использовано в акушерстве и гинекологии для прогнозирования вероятности риска возникновения преэклампсии (далее ПЭ).

Преэклампсия или гестоз - это осложнение гестационного процесса, проявляющееся полиорганной и полисистемной недостаточностью, в основе которой лежат расстройства функций центральной и вегетативной нервной, сердечно-сосудистой, эндокринной систем, а также нарушения микроциркуляции, обменных процессов, иммунного ответа и других функций организма [Сидорова, И.С. Эндотелиальная дисфункция в развитии гестоза [Текст]. / И.С. Сидорова, И.Л. Галинова // Вопросы гинекологии, акушерства и перинатологии. - 2006. - Т. 5, №1. - С. 75-81; Characterization of five marker levels of the hemostatic system and endothelial status in normotensive pregnancy and pre-eclampsia [Text]. / М. Hayashi, T. Inoue, K. Hoshimoto [et al.] // Eur. J. Haematol. - 2007. - Vol. 69, №5-6. - P. 297-302].

ПЭ характеризуется триадой типичных клинических симптомов: артериальной гипертензией, протеинурией, отеками, а также глубокими расстройствами функции сосудистой системы, гемостаза, иммунитета, гемодинамики и микроциркуляции, фетоплацентарной недостаточностью, нарушением функции почек, печени, легких, по сути, при тяжелых формах преэклампсии развивается тяжелая полиорганная недостаточность и эндогенная интоксикация.

Частота преэклампсии практически не снижается на протяжении последних двадцати лет и составляет по данным разных авторов 7-20% [Novel approaches for mechanistic understanding and predicting preeclampsia [Text]. / S. Kalkunte, Z. Lai, W. Norris [et al.] // J. Reprod. Immunol. - 2009. - Vol. 83, №1-2. - P. 134-138; Качалина, Т.С. Антиоксидантная терапия плацентарной недостаточности при гестозе [Текст]. / Т.С. Качалина, Н.В. Лебедева, Л.Н. Ильина // Практическая медицина. - 2010. - №43. - С. 98-99; Радзинский, В.Е. Иммунохимическая оценка перинатального риска [Текст]. / В.Е. Радзинский, С.Г. Морозов, Л.А. Чугунова // Вестник Российского университета дружбы народов. Сер. Медицина. - 2010. - №5. - С. 7-12].

В настоящее время к факторам риска возникновения данной патологии беременности относятся: преэклампсия при предыдущей беременности, возраст, первая беременность, многоплодие, генетические факторы, социальные аспекты, профессиональные вредности, вредные привычки, неудовлетворительная экологическая обстановка, недостаточное и несбалансированное питание, осложненный акушерско-гинекологический анамнез, воспалительные заболевания гениталий, которые, как правило, сочетаются с поражением мочевыводящих путей, патология сосудистой системы [Сидорова, И.С. Эндотелиальная дисфункция в развитии гестоза [Текст]. / И.С. Сидорова, И.Л. Галинова // Вопросы гинекологии, акушерства и перинатологии. - 2006. - Т. 5, №1. - С. 75-81; Айламазян Э.К., Мозговая Е.В. [Текст] Гестоз: теория и практика. М.: МЕДпресс-информ, 2008. 272 с.; Risk factors for a prolonged length of stay in women hospitalized for preeclampsia in Texas. / Z.D. Mulla, B.S. Nuwayhid, К.M. Garcia [et al.] [Text] // Hypertens Pregnancy. 2010. Vol. 29, №1. P. 54-68].

В настоящее время известно свыше 30 генов-кандидатов преэклампсии. Локальные генные сети преэклампсии включают гены метаболизма, гены эндотелиальной дисфункции, гены сосудистой системы, гены ростовых факторов и цитокинов, гены эндокринной системы, гены главного комплекса гистосовместимости [Генетический паспорт - основа индивидуальной и предиктивной медицины [Текст]: [коллектив. моногр. / В.С. Баранов, А.С. Глотов, Т.Э. Иващенко и др.]; под ред. В.С. Баранова. - Санкт-Петербург: Изд-во Н-Л, 2009. - 527 с.: ил.]. К настоящему времени выявлены ассоциации различных генетических полиморфизмов с преэклампсией [A low СОМТ activity haplotype is associated with recurrent preeclampsia in a Norwegian population cohort (HUNT2) [Text]. / L.T. Roten, M.H. Fenstad, S. Forsmo [et al.] // Mol. Hum. Reprod. - 2011. - Vol. 17, №7. - P. 439-446; Young, В.C. Pathogenesis of preeclampsia [Text]. / В.C. Young, R.J. Levine, S.A. Karumanchi // Annu Rev. Pathol. - 2010. - Vol. 5. - P. 173-192].

Ген CYP11B2 расположен на хромосоме 08q21. Был исследован полиморфизм, связанный с заменой в промоторе цитозина на тимин в положении - 344 (- 344С/Т CYP11B2).

С практической точки зрения представляется крайне необходимым выделение критериев индивидуального прогнозирования риска возникновения ПЭ на основании исследованных полиморфных вариантов генов вазоактивных гормонов и других возможных факторов риска с целью выявления беременных, предрасположенных к преэклампсии.

В изученной научно-медицинской и доступной патентной литературе авторами не было обнаружено способа прогнозирования низкого риска преэклампсии на основе данных о полиморфизме гена вазоактивных гормонов - 344С/Т CYP11 B2 в сочетании с другими предикторами развития данного осложнения беременности.

Для оценки сложившейся патентной ситуации был выполнен поиск по охранным документам за период с 1990 по 2012 гг. Анализ документов производился по направлению: способ прогнозирования развития преэклампсии на основе молекулярно-генетических данных в зависимости от полиморфных маркеров генов вазоактивных гормонов.

Известен патент РФ №2478960 по заявке РФ №2011116693/15, 28.04.2011 «СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ВОЗНИКНОВЕНИЯ ГЕСТОЗА У БЕРЕМЕННЫХ» (Лапина Владлена Георгиевна (RU), Качалина Татьяна Симоновна (RU), Каткова Надежда Юрьевна (RU)). Способ включает забор крови и определение содержания неоптерина в сыворотке крови в сроки 16-18 недель гестации. Недостаток метода заключается в сложности анализа, его неспособности диагностировать ПЭ при прегравидарной подготовке.

Наиболее близкое техническое решение известно из статьи «АССОЦИАЦИИ МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИХ МАРКЕРОВ С МОРФОЛОГИЧЕСКИМИ ХАРАКТЕРИСТИКАМИ ПЛАЦЕНТЫ У БЕРЕМЕННЫХ С ПРЕЭКЛАМПСИЕЙ» (Елыкова А.В.) // Журнал «Медицина и образование в Сибири», №5, 2012, http://ngmu.ru/cozo/mos/article/pdf.php?id=802, в котором описан способ ассоциации молекулярно-генетических маркеров с морфологическими характеристиками плаценты у беременных женщин русской национальности, которые являются уроженками Центрально-Черноземного региона России, путем забора венозной крови, выделения геномной ДНК, проведения полимеразной цепной реакции синтеза ДНК и исследование гена CYP11B2, в результате которого установлено, что фактором риска развития легкой степени тяжести преэклампсии является генотип - 344ТТ CYP11B2.

Задачей настоящего исследования является расширение арсенала способов диагностики, а именно создание способа прогнозирования вероятности риска возникновения по данным о генетическом полиморфизме - 344С/Т CYP11 B2 в сочетании с другими предикторами развития данного осложнения беременности.

Технический результат использования изобретения - получение критериев оценки вероятности риска возникновения преэклампсии.

В соответствии с поставленной задачей был разработан способ прогнозирования вероятности риска возникновения преэклампсии, включающий:

- забор крови;

- выделение ДНК из периферической венозной крови;

- исследование гена CYP11B2;

- анализ полиморфизма гена - 344С/Т CYP11 B2;

- прогнозирование вероятности риска возникновения ПЭ у беременных в зависимости от выявленного варианта по локусу - 344С/Т CYP11 B2 в сочетании с такими предикторами развития данного осложнения беременности, как наличие ПЭ у родственников, систолическое артериальное давление (далее САД) до беременности, курение, наличие патологии со стороны сердечно-сосудистой системы;

- прогнозирование вероятности риска возникновения преэклампсии по результатам уравнения

P=ey/(1+ey),

где P - вероятность возникновения преэклампсии,

e - математическая константа, равная 2,72,

y находят из уравнения бинарной логистической регрессии следующего вида:

y=16,462+0,820*x1+0,680*x2-2,470*x3-2,444*x4-0,132*x5,

где x1 - генетический вариант по локусу - 344С/Т CYP11 B2, а именно СС или ТС - 1, ТТ - 0;

x2 - курение: да - 0, нет - 1;

x3 - наличие ПЭ у родственников: да - 0, нет - 1;

x4 - наличие патологии со стороны сердечно-сосудистой системы: да - 0, нет - 1;

x5 - САД до беременности, мм рт.ст.

Новизна и изобретательский уровень заключается в том, что из уровня техники не известна возможность прогноза вероятности риска возникновения преэклампсии у беременных по наличию генетического варианта локуса - 344С/Т CYP11 B2 в сочетании с такими предикторами развития данного осложнения беременности, как наличие ПЭ у родственников, САД до беременности, курение, наличие патологии со стороны сердечно-сосудистой системы.

Способ осуществляют следующим образом.

ДНК выделяют из образцов периферической венозной крови пациентки в 2 этапа. На первом этапе к 4 мл крови добавляют 25 мл лизирующего буфера, содержащего 320 мМ сахарозы, 1% тритон Х-100, 5 мМ MgCl2, 10 мМ трис-HCl (pH=7,6). Полученную смесь перемешивают и центрифугируют при 4°C, 4000 об/мин в течение 20 минут. После центрифугирования надосадочную жидкость сливают, к осадку добавляют 4 мл раствора, содержащего 25 мМ ЭДТА (pH=8,0) и 75 мМ NaCl, ресуспензируют. Затем прибавляют 0,4 мл 10% SDS, 35 мкл протеиназы К (10 мг/мл) и инкубируют образец при 37°C в течение 16 часов.

На втором этапе из полученного лизата последовательно проводят экстракцию ДНК равными объемами фенола, фенол-хлороформа (1:1) и хлороформа с центрифугированием при 4000 об/мин в течение 10 минут. После каждого центрифугирования производят отбор водной фазы. ДНК осаждают из раствора двумя объемами охлажденного 96% этанола. Сформированную ДНК растворяют в бидистиллированной, деионизованной воде и хранят при -20°C.

Выделенную ДНК затем подвергают полимеразной цепной реакции с использованием стандартных олигонуклеотидных праймеров.

Анализ локуса CYP11B2 (rs1799998) проводят методом полимеразной цепной реакции синтеза ДНК с использованием локусспецифичных олигонуклеотидных праймеров (табл. 1).

Структура и температура отжига праймеров, концентрация MgCl2, ферменты рестрикции, использованные для генотипирования ДНК-маркеров методами ПЦР

Реакцию осуществляют в 12,5 мкл общего объема смеси, содержащей 33,5 мМ трис-HCl (pH=8,8), 1,25 тмМ MgCl2, 0,5 мкг геномной ДНК, по 5 пМ каждого праймера, по 100 мкМ dATP, dGTP, dCTP, dTTP и 1 единицу активной Taq-полимеразы. После денатурации (5 мин при 95°C) выполняют 35 циклов амплификации по схеме: денатурация - 1 мин при 95°C; отжиг праймеров - 1 мин при 63°C; элонгация - 1 мин при 72°C. Затем пробы выдерживают 6 мин при 72°C и охлаждают. Продукты амплификации визуализируют в 2%-ном агарозном геле, приготовленном на основе ТВЕ-буфера, окрашенном раствором бромистого этидия (0,01%), в течение 20 минут при 200 V. В качестве электрофорезного буфера используют трис-ацетатный буфер 1хТА. Затем пробы идентифицируют в проходящем УФ-свете.

Амплификат, наработанный при ПЦР, подвергают рестрикции путем добавления к 12,5 мкл амплификата 5 ед. активности эндонуклеазы рестрикции Нае III "СибЭнзим"и инкубируют в термостате при температуре 37°C в течение 16 часов.

Продукты ПДРФ-анализа оценивают путем разделения при помощи электрофореза в 3%-ном агарозном геле, в течение 1 ч при 120 V. Визуализацию фореграмм осуществляют в темном боксе с трансиллюминатором фирмы UVP (Швеция). Аллелю -344С соответствуют фрагменты длиной 118, 81 и 71 п. н. Фрагменты длиной 189 и 81 п. н. соответствуют аллелю -344Т (фиг. 1).

Изобретение характеризуется фиг. 1, на которой представлен результат электрофоретического разделения продуктов рестрикции гена альдостеронсинтазы -44С/Т CYP11B2, где 2, 12 - гомозигота по аллелю -344С; 1, 4, 7, 8, - гомозигота по аллелю -344Т; 3, 5, 6, 9-11 - гетерозигота -344СТ.

Возможность использования предложенного способа для оценки вероятности риска возникновения преэклампсии подтверждает анализ результатов обследования 452 женщин: 249 беременных с диагнозом ПЭ и контрольная группа из 209 женщин с нормальным течением беременности.

В исследуемые выборки включались индивидуумы русской национальности, являющиеся уроженками Центрально-Черноземного региона России и не имеющие родства между собой. Средний возраст основной группы 27,11±6,42 лет (варьировался от 18 до 44 лет), в контрольной - 26,5±6,36 года (варьировался от 18 до 42 лет) (p>0,05). Таким образом, группа популяционного контроля не отличалась от основной группы по возрасту, полу, национальности и месту рождения.

Все клинические и клинико-лабораторные исследования проводились на базе Перинатального центра Белгородской областной клинической больницы Святителя Иоасафа, с информированного согласия пациенток на использование материалов лечебно-диагностических мероприятий, проводимых за период госпитализации и после, связанной с ПЭ, для научно-исследовательских целей, и протоколировались по стандартам этического комитета Российской Федерации. Типирование молекулярно-генетических маркеров осуществлялось в лаборатории «Молекулярной генетики человека» медицинского факультета Белгородского государственного национального исследовательского университета. Формирование базы данных и статистические расчеты осуществлялись с использованием программы «STATISTICA 6.0». Прогнозирование вероятности риска возникновения ПЭ осуществлялось с использованием дискриминантного анализа [Реброва, О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA [Текст]. / О.Ю. Реброва. - [3-е изд.]. - Москва: Медиа Сфера, 2006. - 305 с.: ил.; Боровиков, В.П. Statistica: искусство анализа данных на компьютере [Текст]. / В.П. Боровиков. - 2-е изд. - Санкт-Петербург: Питер, 2003. - 688 с.].

На первом этапе данного исследования методом бинарной логистической регрессии построена статистическая модель прогнозирования вероятности риска возникновения преэклампсии с учетом более двадцати пяти признаков, характеризующих медико-биологический статус женщин до беременности (возраст возникновения беременности, показатели артериального давления, отягощенность соматопатологией, семейный анамнез и др.), наличие вредных привычек (курение, алкоголь) и генетические характеристики по исследуемому локусу вазоактивных гормонов. Среди всех оцененных моделей наиболее прогностически ценным в отношении риска возникновения ПЭ была модель, включающая следующие предикторы: курение, наличие ПЭ у родственников, наличие патологии сердечно-сосудистой системы, систолическое артериальное давление до беременности, генетический вариант по локусу -344С/Т CYP11 B2. Параметры логистической регрессионной модели представлены в таблице 2.

Уровни значимости коэффициентов регрессии для всех предикторов были менее 0,05, т.е. каждый из них оказывал статистически значимое влияние на риск возникновения ПЭ. Величина отношения шансов для представленной регрессионной модели составляет 12,43, демонстрируя, что при увеличении на единицу значения i-го признака шанс возникновения ПЭ увеличивается более чем в 12 раз. Указанная модель корректно предсказывает в 87% случаев вероятность возникновения ПЭ и в 64% случаев правильно классифицирует здоровых индивидуумов.

Логистическая регрессионная модель прогнозирования вероятности риска возникновения преэклампсии

Конкретные примеры использования заявленного способа.

Пример 1. У беременной пациентки Е. русской национальности, являющейся уроженкой Центрально-Черноземного региона России, определены следующие показатели: курение - нет, наличие патологии сердечно-сосудистой системы - да, наличие ПЭ у родственников - да, САД до беременности - 120 мм рт.ст., генетический вариант локуса -344С/Т CYP11 В2 - ТТ. Подставив значения в уравнение регрессии, получим для беременной Е.:

y=16,462+0,820*0+0,680*1-2,470*0-2,444*0-0,132*120=1,3,

соответственно P=2,721,3/(1+2,721,3)=0,78, т.е. вероятность риска возникновения ПЭ у беременной Е. высока. Дальнейшее обследование беременной Е. выявило у нее преэклампсию.

Пример 2. У беременной пациентки В. русской национальности, являющейся уроженкой Центрально-Черноземного региона России, были определены следующие показатели: курение - да, наличие патологии сердечно-сосудистой системы - нет, наличие ПЭ у родственников - нет, САД до беременности - 120 мм рт.ст., генетический вариант локуса -344С/Т CYP11B2 - СС. Подставив значения в уравнение регрессии, получим для беременной В.:

y=16,462+0,820*1+0,680*0-2,470*1-2,444*1-0,132*120=-3,472,

соответственно P=2,72-3,472/(1+2,72-3,472) или (1/2,723,472)/1+(1/2,723,472)=0,03, т.е. вероятность риска возникновения ПЭ у пациентки В. крайне мала. При дальнейшем клиническом и клинико-лабораторном обследовании этой беременной преэклампсии выявлено не было.

Таким образом, можно заключить, что предложенный способ позволяет эффективно прогнозировать вероятность риска возникновения преэклампсии у женщин русской национальности, являющихся уроженками Центрально-Черноземного региона России, что позволит улучшить качество прегравидарной подготовки женщин и будет способствовать эффективной реализации своевременных лечебно-профилактических мероприятии по предупреждению формирования ПЭ.

Способ прогнозирования вероятности риска возникновения преэклампсии у женщин русской национальности, являющихся уроженками Центрально-Черноземного региона России, включающий забор венозной крови, выделение геномной ДНК, проведение полимеразной цепной реакции синтеза ДНК и исследование гена CYP11B2, отличающийся тем, что проводят анализ генетического варианта по локусу -344С/Т CYP11 B2 и прогнозируют вероятность риска возникновения преэклампсии по результатам уравнения
P=ey/(1+ey),
где P - вероятность возникновения преэклампсии,
е - математическая константа, равная 2,72,
у находят из уравнения бинарной логистической регрессии следующего вида:
y=16,462+0,820*x1+0,680*x2-2,470*x3-2,444*x4-0,132*x5,
где x1 - генетический вариант по локусу - 344С/Т CYP11 В2 (СС или ТС - 1, ТТ - 0),
x2 - курение: да - 0, нет -1;
x3 - наличие ПЭ у родственников: да - 0, нет - 1;
x4 - наличие патологии со стороны сердечно-сосудистой системы: да - 0, нет - 1;
x5 - систолическое артериальное давление (САД) до беременности, мм рт.ст.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к медицине и касается способа очистки гозерелина, включающего растворение гозерелина-сырца в водном растворе уксусной кислоты, фильтрование полученного раствора и последующую трехстадийную хроматографическую очистку: жидкостную хроматографию низкого давления на колонне с полистиролдивинилбензольным сорбентом, ионообменную хроматографию низкого давления и ВЭЖХ.

Предложенная группа изобретений относится к области медицины. Предложен способ прогнозирования у пациента с влажной возрастной дегенерацией желтого пятна (AMD) повышенной вероятности эффекта от лечения высокоаффинным антителом против VEGF, в частности, ранибизумабом.

Изобретение относится к области клинико-лабораторной диагностики и предназначено для прогнозирования вероятности получения незрелых ооцитов в программах вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) с использованием молекулярно-генетических маркеров.

Изобретение относится к медицине, а именно к способу диагностики дисбиотических нарушений в биоптатах слизистых носа и глотки у детей раннего и дошкольного возраста с постоянно рецидивирующими острыми респираторными инфекциями.

Изобретение относится к области медицины и предназначено для ПЦР-диагностики гена резус-фактора плода по крови беременной женщины. Предложен набор с лиофилизированными праймерами, содержащий готовые к амплификации реакционные пробирки с лиофилизированными праймерами и праймерами-зондами для экзонов RHD-5 и RHD-7 гена RHD.

Изобретение относится к области онкологии и касается комплекса, включающего сочетания полиинозинполицитидиловой кислоты (pIC) и полиэтиленимина (PEI), и его применения в качестве средства для лечения рака, в частности меланомы.
Изобретение относится к области медицины, а именно к способу неинвазивной диагностики развития тубулоинтерстициального фиброза (ТИФ) у пациентов с фокально-сегментарным гломерулосклерозом (ФСГС).
Изобретение относится к медицине, в частности к кардиологии. Изобретение представляет cпособ диагностики предрасположенности к прогрессированию атеросклероза у больных с хронической ишемической болезнью сердца, включающий анализ образца для определения содержания интерлейкин-10-продуцирующих T-лимфоцитов, отличающийся тем, что из периферической венозной крови выделяют мононуклеарную фракцию клеток с последующей активацией клеток в культуре, фенотипированием лимфоцитов с использованием моноклональных антител к CD4 и интерлейкину-10 (ИЛ-10), меченных флуоресцентными метками, и цитофлуориметрией в потоке, при этом содержание ИЛ-10-продуцирующих T-лимфоцитов (CD4+ИЛ-10+ клеток), выраженное в процентном (%) отношении от CD4+ лимфоцитов, менее 3,5% свидетельствует о высоком риске прогрессирования атеросклероза.

Настоящее изобретение относится к биотехнологии и представляет собой способ мониторинга экспрессии представляющего интерес гена полипептида CADM1, Rb, ZMYND10, RASSF5, PTEN, SERPINB5, EPB41L3 или DAPK1 для определения терапевтического эффекта соединения при лечении заболевания, связанного с экспрессией указанного представляющего интерес гена полипептида.
Изобретение относится к медицине, а именно к способу диагностики возможности заражения новорожденных вирусными гепатитами В и С у беременных женщин, больных этой инфекцией или носителей вирусов.
Изобретение относится к медицине и представляет собой способ прогнозирования риска развития осложнений ХИЭ у индивидуумов русской национальности, уроженцев Центрального Черноземья РФ, отличающийся тем, что способ включает выделение ДНК из периферической венозной крови, анализ генетического полиморфизма лимфотоксина α(+250A/G Ltα) в сочетании с такими предикторами, как наличие очагов хронической инфекции и уровень лейкоцитов, прогноз риска развития осложнений по уравнениям линейной дискриминантной функции следующего вида: у1=-114,015+108,475x1+1,267x2+2,743x3 у2=-114,720+103,793x1+2,370x2+3,399x3, где x1 - наличие очагов хронической инфекции (да - 1; нет - 2), x2 - уровень лейкоцитов (1012/л), x3 - генетический вариант по локусу+250 A/G Ltα: AA - x3=1; AG - x3=2; GG - x3=3. Прогнозируют риск развития осложнений, таких как вторичная грибковая и бактериальная инфекции ХИЭ в случае, если значение у2 больше значения у1. Прогнозируют отсутствие риска развития осложнений ХИЭ, в случае, если значение у1 больше значения у2. Изобретение позволяет получить критерии оценки риска развития осложнений хронической истинной экземы. 2 табл.
Изобретение относится к медицине и представляет собой способ оценки эффективности процедуры радиочастотной симпатической денервации почечных артерий у пациентов с медикаментозно-резистентной артериальной гипертензией, характеризующийся тем, что пациенту в условиях стационара проводят измерение β-адренореактивности эритроцитарных мембран периферической крови до и через 7 дней после процедуры, и при снижении значения β-адренореактивности мембран на 10 условных единиц и более процедуру оценивают как эффективную. Осуществление изобретения обеспечивает расширение арсенала способов оценки эффективности процедуры радиочастотной симпатической денервации почечных артерий. 2 пр.

Изобретение относится к медицине и предназначено для диагностики рака желудка. В сыворотке крови определяют концентрации фактора роста эндотелия сосудов, раково-эмбрионального антигена и пепсиногена-1. При соблюдении одного из следующих условий: значения VEGF больше или равны 226-360 пг/мл, СЕА больше или равны 2,8 нг/мл, PG-1 меньше 30 мкг/л; значения VEGF больше 360 пг/мл, СЕА больше или равны 5,2 нг/мл, PG-1 меньше 49 мкг/л; значения VEGF больше 1000 пг/мл, СЕА больше или равны 5,0 нг/мл, PG-1 больше или равны 105 мкг/л, устанавливают наличие онкотрансформации желудочного эпителия. Способ позволяет повысить точность раннего выявления у пациентов с заболеваниями гастродуоденальной зоны онкотрансформации желудочного эпителия. 1 табл., 3 пр.
Изобретение относится к области медицины, а именно к способу определения типа энтеровируса, явившегося причиной развития менингита у детей. В крови заболевших детей в период с 1 по 7-й день болезни определяют X- значение уровня лимфоцитов, на поверхности которых находятся СD3+IL4+ маркеры, рассчитывают значение Y по формуле 1,12+9,32*X. При значении Y выше критического значения 1,28 делают заключение, что возбудителем заболевания являются вирусы Коксаки группы В, если Y ниже критического значения 1,28, то делают заключение, что возбудителем являются вирусы ЕСНО. Использование заявленного способа позволяет повысить эффективность определения типа энтеровируса, явившегося причиной развития менингита у детей. 1 пр.

Изобретение относится к области медицины, в частности к хирургии, и может быть использовано для прогнозирования эндогенной интоксикации у больных острым перитонитом. Способ осуществляют следующим образом: начиная с первых суток после оперативного лечения в динамике определяют содержание молекул средней массы и малонового диальдегида, на основе которых рассчитывают индекс прогнозирования эндогенной интоксикации по определенной формуле. При значении индекса прогнозирования эндогенной интоксикации до 0,95 констатируют положительную динамику эндогенной интоксикации, при значении от 0,95 до 1,34 - низкую степень вероятности прогрессирования эндогенной интоксикации, при значении 1,35 и выше - высокую степень вероятности прогрессирования эндогенной интоксикации. Изобретение позволяет точно и адекватно отражать вероятность прогрессирования эндогенной интоксикации путем определения индекса прогнозирования эндогенной интоксикации больных острым перитонитом, что позволяет судить о направленности (прогрессирование или купирование) течения синдрома эндогенной интоксикации и оценивать в динамике эффективность оперативного лечения, а также действия дезинтоксикационной и эфферентной терапии. 2 пр., 3 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии, молекулярно-генетической диагностики и молекулярной биологии. Предложен набор, содержащий два олигодезоксирибонуклеотидных праймера и флуоресцентно-меченый ДНК-зонд. Изобретение обеспечивает эффективную амплификацию и детекцию эндогенного внутреннего контроля при исследованиях биологического материала крупного рогатого скота методом ПЦР в режиме «реального времени» и уменьшает частоту недостоверных результатов. 2 ил., 3 табл., 1 пр.

Изобретение относится к биохимии. Описан набор олигонуклеотидных праймеров и флуоресцентно-меченого зонда для идентификации генетического материала риккетсий методом ПЦР в реальном времени. Набор содержит последовательности олигонуклеотидов, видоспецифичных к риккетсиям: прямой праймер (PrF_gltA) 5`→3`: 5'-GGCTTCGGTCATCGTGT-3' (17 н); обратный праймер (PrR_gltA) 5`→3`: 5'-TTGCTATTTGTAAGAGCGGATTG-3' (23 н); флуоресцентно-меченый ДНК-зонд Z(ROX)_gltA 5`→3`: ROX-CCACGTGCCGCAGTACTTAAAGAAAC-BHQ2' (26 н). Техническим результатом заявляемого изобретения является создание набора специфичных олигонуклеотидных праймеров и зонда для выявления генетического материала риккетсий, в том числе R. tarasevichiae и R. raoultii, в гомогенатах клещей, клинических образцах и биологических жидкостях, распространенных на территории Российской Федерации методом ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме реального времени. 1 ил., 3 табл., 3 пр.

Изобретение относится к флуоресцентной иммуноцитохимической диагностике метастатического поражения лимфатических узлов. Сущность способа состоит в том, что для получения клеточной суспензии клеточный материал помещают в питательную среду накопления, состоящую из растворов: Хенкса, реоплиглюкина и альбумина, смешанных в равных количествах, хорошо перемешанную клеточную суспензию вносят по 100 мл на дно каждой пробирки с питательной средой, добавляют 5 мкл моноклонального антитела Ber ЕР4 FITC и перемешивают 5 с, после этого материал инкубируют 20 мин в холодильнике при t° 2-8 C, полученную взвесь клеток распределяют по 50-100 мкл в контейнеры центрифуги и центрифугируют при 1000 об/мин в течение 5 мин, полученные препараты окрашивают ядерным флюоресцентным красителем и осуществляют флуоресцентную микроскопию. Использование заявленного способа не требует сложной предподготовки материала и значительных временных затрат и позволяет повысить эффективность флуоресцентной иммуноцитохимической диагностики метастатического поражения лимфатических узлов. 1 ил., 2 пр.

Изобретение относится к области медицины. Предложен способ выявления мутации p.Q368X (с.1102С>Т) в гене MYOC, сопровождающейся развитием наследственной формы первичной открытоугольной глаукомы (ПОУГ). Осуществляют выделение ДНК из лимфоцитов периферической крови методом фенольно-хлороформной экстракции и проведение полимеразной цепной реакции в реальном времени с последующей детекцией пика кривой плавления в конечной точке. Амплификацию участка гена MYOC проводят в присутствии двух последовательностей олигонуклеотидов с красителем EvaGreen. Изобретение обеспечивает эффективную диагностику развития ПОУГ у пациентов из семей с отягощенной наследственностью. 1 ил., 2 табл., 2 пр.

Изобретение относится к медицине, в частности к способу прогнозирования эффективности лечения злокачественного заболевания у субъекта цисплатином. Способ состоит в том, что у пациентов определяют аллельные варианты полиморфизмов rs1142345 гена ТРМТ и rs3219484 гена MUTYH и в зависимости от аллельного статуса одного или обоих указанных полиморфизмов прогнозируют эффективность лечения цисплатином, где благоприятный прогноз определяется наличием у пациента двух аллелей дикого типа полиморфизма rs1142345 гена ТРМТ (генотип АА) и/или комбинации из аллелей дикого и мутантного типов полиморфзма rs3219484 гена MUTYH (генотип GA). Осуществление изобретения обеспечит выявление вариаций, которые могут стать основой для индивидуализации использования препаратов платины в противоопухолевой терапии. 2 з.п. ф-лы, 2 табл.
© Патентный поиск, поиск патентов на изобретения - FindPatent.RU 2012-2024
Политика конфиденциальности 2016-03-27 2016-03-27T21:15:58
Наверх