Способ прогнозирования развития тяжёлого гнойного трахеобронхита при термоингаляционном поражении дыхательных путей

Изобретение относится к медицине, в частности к фибробронхоскопии, и описывает способ прогнозирования развития тяжелого гнойного трахеобронхита при термоингаляционном поражении дыхательных путей методом хемилюминесценции. Способ характеризуется тем, что во время бронхоскопии производят забор биоптатов слизистой, в которых определяют светосумму Fe2+- индуцированной хемилюминесценции (Sind-1), Н2O2 - индуцированной люминолзависимой хемилюминесценции (Sind-2) и максимум амплитуды Н2О2 - индуцированного люминолзависимого свечения (Н). В случае, если значение Sind-1 - 0,500 у.е. и более, Sind-2 - 0,400 у. е. и более и H - 0,300 у. е. и более, прогнозируется развитие тяжелого гнойного трахеобронхита III степени интенсивности воспаления, в случае, если полученные одновременно по всем трем показателям Sind-1 -0,499 у. е. и менее, Sind-2 - 0,399 у. е. и менее и H - 0,299 у. е. и менее, прогнозируется развитие катарального или гнойного трахеобронхита I-II степени интенсивности воспаления. Предложенный способ позволяет быстро (в течение 30 минут) и в ранние сроки прогнозировать развитие гнойного трахеобронхита после термоингаляционного поражения дыхательных путей и обосновать необходимость проведения многократных ежедневных санационных бронхоскопий. 1 табл., 4 пр.

 

Изобретение относится к медицине и, в частности, к фибробронхоскопии с применением метода хемилюминесценции и может быть использовано для прогнозирования развития тяжелого гнойного трахеобронхита у пациентов с термоингаляционным поражением дыхательных путей.

Представление о том, что живые клетки человека и животных могут излучать слабый свет в ультрафиолетовой области спектра, было впервые сформулировано русским ученым Александром Гавриловичем Гурвичем и названо им митогенетиченским излучением (Гурвич А. Г., 1945). Важным этапом в этой серии исследований были работы Роберта Эллана, открывшего в 1973 г. сверхслабое свечение стимулированных бактериями лейкоцитов крови человека и предложившего люминол в качестве активатора хемилюминесценции макрофагов (Allen R. S. et al, 1976). Люминол - органическое соединение, способное к хемилюминесценции, испускает синее свечение при взаимодействии с некоторыми окислителями. Хемилюминесцентные свойства люминола проявляются в присутствии окислителей. Для этой цели используют пероксид водорода (H2O2) в растворе щелочи.

Наиболее распространенная реакция, сопровождающаяся хемилюминесценцией в клетках и тканях животных и человека, - это реакция перекисного окисления липидов, которая представляет собой частный случай реакции цепного окисления органических соединений молекулярным кислородом (Владимиров Ю.Α., Проскурнина Е.В., 2009). Скорость перекисного окисления пропорциональна концентрации свободных радикалов и связана с интенсивностью хемилюминесценции. Свободные радикалы - важные участники регуляторных процессов в живых клетках, но, одновременно, и причина повреждения клеточных структур. Дисбаланс между активностью радикалпродуцирующей и антиоксидантной систем приводит к избытку свободных радикалов, которые играют роль циркулирующих патологических сигналов, и лежит в основе поражения легких и других внутренних органов (Величковский Б.Т., 2000; Chen L. W. et al., 2003). Факторами инициации свободнорадикального окисления при различных формах патологии инфекционной и неинфекционной природы может служить недостаточность ферментного звена антиоксидантной системы. Регистрируя интенсивность хемилюминесценции, можно следить за изменением во времени скорости перекисного окисления липидов (Владимиров Ю.Α., Азизова О.Α., 1992).

В патогенезе многих болезней и патологических процессов играет важную роль оксидативный стресс. Термин оксидативный стресс был введен Хельмунтом Зисом в 1991 году и официально вошел в словарь Mesh Pubmed в 1995 году. Согласно этому определению оксидативный стресс - это нарушение баланса прооксидантов и антиооксидантов в пользу первых, приводящий к повреждению. Оксидативный стресс проявляется в накоплении продуктов окисления белков, накоплении поврежденных оснований ДНК, снижении уровня антиоксидантов, что ведет к повреждению клеток (Владимиров Ю.Α., Проскурнина Е.В., 2009). Метод хемилюминесценции позволяет измерять уровень свободных радикалов, когда непосредственно определяется не коцентрация радикалов, а скорость реакции, при которой они образуются. Хемилюминесценция успешно применяется при изучении иммунных нарушений, дисфункции эндотелия, онкологических и воспалительных заболеваний и многих других болезней, патогенез которых связан оксидативным стрессом (Зенков Н.К., Ланкин В.З., 2001). Изучение локального свободнорадикального статуса при термоингаляционном поражении дыхательных путей имеет важное значение для раннего прогнозирования развития гнойного трахеобронхита III степени интенсивности воспаления.

Существует метод оценки тяжести термоингаляционных поражений слизистой дыхательных путей методом хромобронхоскопии, позволяющий косвенно оценить глубину повреждения слизистой, ориентируясь на интенсивность накопления окрашивающего вещества на поверхности эпителия. Недостатками этого метода являются субъективизм исследования, зависимость результатов от особенностей оборудования и окрашивающего вещества, а также низкая прогностическая ценность (Шлаков И.Ф., 1999).

Также существуют методы оценки тяжести и прогнозирования летального исхода ожоговой болезни при ожогах кожных покровов путем определения антисеротониновой активности эритроцитов, активности антитромбина III, концентрации растворимых фибрин-мономерных комплексов и состояния ХIIIа-зависимого фибринолиза (Патент РФ №2157544 от 21.04.1999 «Способ прогнозирования летального исхода ожоговой болезни»). Недостатком этих методов является их неприменимость для оценки тяжести пациентов с термоингаляционными поражениями дыхательных путей, так как одним из наиболее опасных для жизни осложнений, приводящих к тяжелому течению ожоговой болезни, является гнойный трахеобронхит III степени интенсивности воспаления.

Наиболее близким прототипом предлагаемого изобретения является метод прогнозирования течения бронхиальной астмы методом хемилюминесценции (Патент РФ №2012884 от 15.05.1994). Метод хемилюминесценции для прогнозирования развития гнойного трахеобронхита III степени интенсивности воспаления при термоингаляционном поражении дыхательных путей ранее не применялся.

Задача - предложить способ раннего прогнозирования развития тяжелого гнойного трахеобронхита как осложнения термоингаляционной травмы дыхательных путей для коррегирования интенсивности лечения.

Технический результат состоит в возможности объективного раннего прогнозирования развития тяжелого гнойного трахеобронхита после термоингаляционного поражения дыхательных путей с помощью предлагаемого способа.

Технический результат достигается тем, что во время проведения стандартной бронхоскопии производят забор биоптатов слизистой трахеобронхиального дерева у пациентов с термоингаляционным поражением дыхательных путей. Для этого используют незаявляемый фибробронхоскоп и незаявляемые биопсийные щипцы для бронхоскопа. Перед исследованием проводят стандартную местную анестезию раствором лидокаина 2% - 10,0 мл. С помощью незаявляемых биопсийных щипцов в области наиболее выраженных патологических изменений препарируют слизистую оболочку трахеобронхиального дерева, получают образец объемом 1,0 мм3, помещают этот биоптат в 0,9% раствор хлорида натрия.

Взятые пробы по стандартной процедуре взвешивают, отбирают 1 мг образца и гомогенизируют в течение 1 минуты при температуре 4°C в охлажденной среде гомогенизирования, при этом соотношение ткань-среда составляет 1:40 в соответствии с инструкцией к аппарату - люминесцентный спектрометр LS-50B «Perkin Elmer» (USA).

В качестве среды гомогенизирования используют незаявляемый фосфатный буфер, содержащий 20 мМ KH2PO4 и 105 мМ KCl (pH 7,45).

Полученные исследуемые образцы центрифугируют в микропробирках в рефрижераторной центрифуге при температуре -10°C при 3000 оборотах в минуту в течение 10 минут и отбирают аликвоты супернатанта для проведения хемилюминесцентного анализа в соответствии с инструкцией к аппарату - люминесцентный спектрометр LS-50B «Perkin Elmer» (USA).

Процессы свободнорадикального окисления исследуют стандартным методом спонтанной и индуцированной хемилюминесценции. В качестве хемилюминометра используют люминесцентный спектрометр LS-50B «Perkin Elmer» (USA). Стандартизацию сигнала и математическую обработку кривых хемилюминесценции выполняют с помощью встроенной программы «Finlab».

В измерительную кювету по стандартной методике вносят 3 мл фосфатного буфера (20 мМ KH2PO4 и 105 мМ KCl, pH 7,45) и 0,1 мл супернатанта. Регистрируют Ssp - светосумму за 1 минуту спонтанной хемилюминисценции, величина которой прямо коррелирует с интенсивностью процессов свободнорадикального окисления. Добавляют в кювету 0,15 мл 50 мМ раствора FeSO4×7H2O и определяют следующие показатели:

Sind-1 - светосумму за 4 минуты Fe2+ - индуцированной хемилюминисценции, отражающую скорость образования перекисных радикалов.

Для анализа общей антиоксидантной антирадикальной активности и перекисной резистентности применяют метод люминолзависимой перекись-индуцированной хемилюминесценции. Для этого в измерительную кювету вносят 1,5 мл фосфатного буфера (20 мМ KH2PO4 и 105 мМ KCl, pH 7,45), 0,3 мл супернатанта, 0,6 мл 0,1 Мм раствора люминола, инкубируют в течение одной минуты и после добавления 0,6 мл 2% раствора H2O2 регистрируют:

Sind-2 - светосумму за 2 минуты H2O2 - индуцированной люминол-зависимой хемилюминисценции, величина которой обратно коррелирует с активностью антиоксидантной антирадикальной системы защиты;

Η - максимум амплитуды H2O2 - индуцированного люминол-зависимого свечения, величина которого обратно коррелирует с перекисной резистентностью субстрата.

Интенсивность хемилюминесценции, измеренную в милливольтах, перерассчитывают на 1 мг образца и выражают в относительных/условных единицах.

При выявлении одновременно по трем показателям значений Sind-1 0,500 и более у. е., Sind-2 0,400 и более у. е. и H 0,300 у. е. со 100% вероятностью прогнозируется тяжелое течение термоингаляционной травмы дыхательных путей с развитием тяжелого гнойного трахеобронхита. В случае, если полученные одновременно по всем трем показателям данные Sind-1 - 0,499 у. е. и менее, Sind-2 - 0,399 у. е. и менее и H - 0,299 у. е. и менее, то прогнозируется развитие катарального или гнойного трахеобронхита I-II степени интенсивности воспаления.

Данные, получены в ходе исследования, представлены в таблице 1. При анализе представленных в таблице 1 результатов установлено, что:

- из 7 больных с Sind-1 более 0,500 у.е. тяжелый гнойный трахеобронхит развился у всех (100%),

- из 2 больных с Sind-1 от 0,400 до 0,500 у.е. тяжелый гнойный трахеобронхит развился у 1 (50%),

- из 6 больных с Sind-1 от 0,300 до 0,400 у.е. тяжелый гнойный трахеобронхит развился у 1 (17%),

- из 1 больных с Sind-1 менее 0,300 у.е. тяжелый гнойный трахеобронхит не развился не у кого (0%).

Также, на основании анализа полученных данных из таблицы 1, было установлено, что:

- из 7 больных с Sind-2 более 0,400 у.е. тяжелый гнойный трахеобронхит развился у всех (100%),

- из 3 больных с Sind-1 от 0,300 до 0,400 у.е. тяжелый гнойный трахеобронхит развился у 2 (66%),

- из 6 больных с Sind-1 менее 0,300 у.е. тяжелый гнойный трахеобронхит не развился не у кого (0%).

Также на основании анализа полученных данных из таблицы 1 было установлено, что:

- из 7 больных с H более 0,300 у.е. тяжелый гнойный трахеобронхит развился у всех (100%),

- из 6 больных с H от 0,200 до 0,300 у.е. тяжелый гнойный трахеобронхит развился у 2 (33%),

- из 3 больных с H менее 0,200 у.е. тяжелый гнойный трахеобронхит не развился не у кого (0%)

Данный метод позволяет с высокой степенью достоверности в ранние сроки прогнозировать развитие тяжелого гнойного трахеобронхита, а в дальнейшем свидетельствовать о высоком риске летального исхода.

Преимущества предлагаемого способа:

- параметры перекисного окисления липидов позволяют в ранние сроки прогнозировать развитие гнойного трахеобронхита после термоингаляционного поражения дыхательных путей и степень интенсивности воспаления;

- достоверный метод раннего прогнозирования развития тяжелого гнойного трахеобронхита III степени интенсивности воспаления, который позволяет в более ранние сроки обосновать необходимость проведения многократных ежедневных санационных бронхоскопий;

- возможность применения метода в любые сроки после полученной термоингаляционной травмы дыхательных путей;

- быстрое, в течение 30 минут, получение результатов исследования.

Пример 1

Больной И., 44 лет, был доставлен в отделение интенсивной терапии краевой клинической больницы №2 г. Хабаровска 21.11.2009 г. через 2,5 часа после получения травмы при пожаре в квартире. При поступлении установлен диагноз: «Термический ожог пламенем 55% поверхности тела (глубокие ожоги - 15%). Ожог дыхательных путей. Тяжелый ожоговый шок». После проведенной противошоковой и инфузионной терапии состояние больного стабилизировалось. Через 25 часов от момента травмы в связи с нарастающей дыхательной недостаточностью пациент был переведен на искусственную вентиляцию легких, проведена фибробронхоскопия, при которой оценена тяжесть поражения дыхательных путей. По бронхоскопическим критериям Endorf and Gamelli (2007), используемым при термоингаляционных поражениях дыхательных путей, было выявлено их поражение II-III степени (умеренно-тяжелое). Проведено исследование взятых биоптатов методом хемилюминесценции. Результаты хемилюминисцентного анализа: Sind 1 - 0,558 у.е.; Sind 2 - 0,502 у.е.; Н-0,413 у.е. Больному по результатам проведенного исследования назначены санационные фибробронхоскопии с антисептическими растворами 2-3 раза в сутки. К концу четвертых суток от поступления при фибробронхоскопии было отмечено появление гнойного содержимого в просвете трахеобронхиального дерева, а на фибробронхоскопии диагностирован гнойно-фибринозный трахеобронхит III степени интенсивности воспаления. Несмотря на проведенные эндоскопическое лечение и интенсивную консервативную терапию, пациент умер на фоне явлений прогрессирующей полиорганной недостаточности на 13 сутки от поступления в стационар.

Пример 2

Больной М., 41 года, поступил в реанимационное отделение краевой клинической больницы №2 г. Хабаровска 25.02.2008 г. спустя 4 часа после получения послеожоговой травмы и термоингаляционного поражения при пожаре на производстве. При поступлении установлен диагноз: «Термический ожог пламенем 45% поверхности тела (глубокие ожоги - 10%). Ожог дыхательных путей. Ожоговый шок средней степени тяжести». При поступлении больной находится в тяжелом состоянии, отмечалась тахипноэ до 50 дыхательных движений в минуту, тахикардия до 130 ударов в минуту. Носовые ходы, язык и полость рта покрыты копотью, склеры инъецированы.

Больной был госпитализирован в реанимационное отделение и переведен на искусственную вентиляцию легких. Ему была выполнена фибробронхоскопия через нос по стандартной методике под местной анестезией. При фибробронхоскопии установлено, что слизистая оболочка гортани и трахеобронхиального дерева покрыта фрагментами копоти, сухая, бронхиальный секрет не определяется, рефлексы гортани и трахеобронхиального дерева не определяются. При санации с антисептическим раствором копоть частично отмыта, слизистая оболочка под ней сухая, бледная, сероватого цвета. По бронхоскопическим критериям Endorf and Gamelli (2007) выявлена II-III степень (умеренно-тяжелое) поражения дыхательных путей. Проведено исследование взятых биоптатов из бронхиального дерева методом хемилюминесценции. Результаты хемилюминесценции: Sind 1 - 0,306 у.е.; Sind 2 - 0,235 у.е.; H - 0,191 у.е.

Пациент переведен в отделение реанимации на искусственную вентиляцию легких, а через сутки от поступления больному была выполнена трахеостомия для продолжения искусственной вентиляции легких. Санационные фибробронхоскопии выполнялись 1 раз в сутки в течение недели. У больного сохранялись явления катарального трахеобронхита на протяжении 8 дней. Спустя 9 дней от поступления больной был переведен в отделение термических поражений на долечивание и на 17 сутки от поступления в удовлетворительном состоянии выписан на амбулаторное лечение.

Пример 3

Больной Т., 50 лет, поступил в реанимационное отделение Краевой клинической больницы №2 г. Хабаровска 15.02.2008 г. через 2 часа после получения ожоговой травмы при пожаре. При поступлении установлен диагноз: «Термический ожог пламенем 40% поверхности тела (глубокие ожоги - 10%) головы, туловища, конечностей. Ожог дыхательных путей. Ожоговый шок средней степени. Алкогольное опьянение». При поступлении больной находился в тяжелом состоянии, в сознании. Гемодинамические показатели: частота сердечных сокращений - 96 в мин, частота дыханий - 32 в мин, АД -160/100 мм рт.ст.

Больной был госпитализирован в реанимационное отделение и переведен на искусственную вентиляцию легких. Была выполнена фибробронхоскопия через нос по стандартной методике под местной анестезией. При фибробронхоскопии установлено, что слизистая оболочка гортани и трахеобронхиального дерева резко гиперемирована, отечная, с контактной кровоточивостью, бронхиальный секрет слизистый, рефлексы гортани и трахеобронхиального дерева выражены плохо. При санации с антисептическим раствором из нижне-базальных отделов в смывных водах определяются фрагменты копоти. По бронхоскопическим критериям Endorf and Gamelli (2007) выявлена I-III степень (умеренно-тяжелое) поражения дыхательных путей. Проведено исследование взятых биоптатов из бронхиального дерева методом хемилюминесценции. Результаты хемилюминесценции: Sind 1 - 0,437 у.е.; Sind 2 - 0,346 у.е.; H - 0,281 у.е.

После выведения из шока у пострадавшего отмечалось развитие пневмонии, миокардита, что было связано с тяжелым отравлением угарным газом. С 2 суток от поступления больному проводились плановые лечебно-санационные фибробронхоскопии 1 раз в сутки в течение 4-5 дней. У больного сохранялись явления катарального эндотрахеобронхита, которые были купированы к 7 дню лечения. Через 8 дней от поступления больной был переведен в отделение термических поражений на долечивание и на 22 сутки от поступления в удовлетворительном состоянии выписан на амбулаторное лечение.

Пример 4

Больной Α., 58 лет, поступил в реанимационное отделение Краевой клинической больницы №2 г. Хабаровска 12.01.2009 г. через 6 часов после получения ожоговой травмы при пожаре. Установлен диагноз: «Термический ожог пламенем 6% поверхности головы, верхних конечностей. Тяжелое поражение дыхательных путей, отравление угарным газом». При поступлении состояние расценивалось как тяжелое.

В связи с прогрессированием дыхательной недостаточности (частота дыханий до 40 в мин) произведена интубация трахеи, больной переведен на искусственную вентиляцию легких, проводилась активная инфузионная терапия. В конце 2 суток была выполнена фибробронхоскопия через эндотрахеальную трубку по стандартной методике. При фибробронхоскопии установлено, что слизистая оболочка трахеобронхиального дерева гиперемирована, с налетом копоти, бронхиальный секрет скудный, вязкий, при промывании антисептическим раствором отмывается большое количество черной копоти. По бронхоскопическим критериям Endorf and Gamelli (2007) выявлена III степень (тяжелая) поражения дыхательных путей. Через 5 дней от поступления были взяты биоптаты из бронхиального дерева для исследования методом хемилюминесценции. Результаты хемилюминесценции: Sind 1 - 0,432 у.е.; Sind 2 - 0,300 у.е.; H - 0,237 у.е.

У больного при фибробронхоскопии на протяжении 7 дней отмечались явления гнойного трахеобронхита II степени. В течение этого времени больному проводились плановые санационные фибробронхоскопии 2 раза в сутки. К 8 дню от поступления эндоскопические проявления гнойного эндобронхита и клиническая картина обструктивного синдрома купировались. На 11 сутки от поступления при проведении контрольной фибробронхоскопии установлено, что слизистая трахеобронхиального дерева розовая, признаков трахеобронхита не выявлено. Больной переведен в отделение термических поражений. На 22 сутки от поступления в удовлетворительном состоянии выписан на амбулаторное лечение.

Способ прогнозирования развития тяжелого гнойного трахеобронхита при термоингаляционном поражении дыхательных путей методом хемилюминесценции, включающий определение светосуммы за 4 минуты Fe2+ - индуцированной хемилюминесценции (Sind-1), светосуммы за 2 минуты Н2О2-индуцированной люминол-зависимой хемилюминесценции (Sind-2) и максимума амплитуды Н2О2 - индуцированного люминол-зависимого свечения (Н) в биоптатах трахеобронхиального дерева у пациентов с термоингаляционным поражением дыхательных путей, характеризующийся тем, что интенсивность хемилюминесценции измеряют в милливольтах, перерасчитывают на 1 мг образца и выражают в относительных/условных единицах (у.е.), полученные данные интерпретируют одновременно по трем показателям следующим образом: при значениях Sind-1 - 0,500 у.е. и более, Sind-2 - 0,400 у.е. и более и H - 0,300 у.е. и более, прогнозируется развитие тяжелого гнойного трахеобронхита III степени интенсивности воспаления, а при значениях Sind-1 - 0,499 у.е. и менее, Sind-2 - 0,399 у.е. и менее и H - 0,299 у.е. и менее, прогнозируется развитие катарального или гнойного трахеобронхита I-II степени интенсивности воспаления.



 

Похожие патенты:

Группа изобретений относится к области мониторинга здоровья по части функции иммунной системы и измерения эффектов токсинов и других воздействий. Способ включает в себя предоставление аппарата, предоставление образца крови, установление базового значения молекулярного кислорода, приложение воздействия на упомянутый образец, получение данных об изменении концентрации молекулярного кислорода и скорости ее изменения, а также сравнение полученных данных с данными здорового индивидуума.

Предложен способ определения антиоксидантной активности вещества, предусматривающий приготовление контрольных проб, содержащих буферный раствор и биолюминесцентный сенсор, определения исходной интенсивности биолюминесценции.
Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ прогнозирования перинатального поражения ЦНС у недоношенных новорожденных, включающий исследование биологического материала, отличающийся тем, что в 10% гомогенате плаценты, взятой сразу после преждевременных родов, методом капиллярного электрофореза определяют содержание глутамата и агматина, рассчитывают их соотношение и при величине коэффициента, равного 1,70 и ниже, прогнозируют перинатальное поражение ЦНС у недоношенных новорожденных.

Изобретение относится к медицине, а именно к оториноларингологии, и может быть использовано при выборе тактики лечения гипертрофии глоточной миндалины и хронического аденоидита.

Изобретение относится к ветеринарии и предназначено для оценки степени нарушения рубцового пищеварения у жвачных животных. Определяют в содержимом рубца количество веществ, имеющих «средний» (500-5000 D) диапазон молекулярной массы.
Изобретение относится к медицине, а именно к способу определения адаптационной способности пациента с новообразованиями челюстно-лицевой области к съемным пластиночным конструкциям ортопедических протезов.
Изобретение относится к медицине, а именно к способу определения адаптационной способности пациента с новообразованиями челюстно-лицевой области к съемным пластиночным конструкциям ортопедических протезов.

Изобретение относится к области медицины, а именно к педиатрии, и описывает способ диагностики муковисцидоза. Способ характеризуется тем, что определяют концентрации Na, В и Pb в пробоподготовленных волосах детей раннего возраста методами атомной эмиссионной спектрометрии с индукционно связанной аргоновой плазмой и/или масс-спектрометрии с индуктивно связанной аргоновой плазмой, при этом у больных муковисцидозом относительно контрольной группы увеличивается содержание Na и В соответственно в 8,5; 3,3 раза и уменьшается содержание Pb в 1,3 раза.

Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования ранней гипогалактии - перед родами у беременных женщин при анализе анамнеза, течения настоящей беременности выявляют факторы риска гипогалактии.
Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для использования при экспериментальных паразитологических исследованиях в лабораторных условиях. Способ включает отбор только живых, половозрелых самок Trichuris vulpis из толстой, слепой кишок спонтанно зараженных трихоцефалами при исследовании гельминтологическими методами на вскрытии диких или/и домашних хищных в отдельные пробирки с официнальным изотоническим раствором (0,9%) хлорида натрия (solutio Natrii chlorati isotonica) и экспозицией пробирок с самками Trichuris vulpis при t=37,5°C - 39°C в течение 5 часов в условиях термостата.

Настоящее изобретение относится к области биоаналитических исследований и представляет собой способ анализа цитохрома С в интактных митохондриях с помощью спектроскопии гигантского комбинационного рассеяния (ГКР), включающий подготовку митохондрий и их нанесение на подложку на основе диэлектрического химически инертного материала с наноструктурированным покрытием толщиной 1-10 мкм в виде кольцевых наноструктур серебра, при этом ободки серебряных колец состоят из сообщающихся друг с другом пористых агрегатов серебра, на поверхности которых расположены округлые наночастицы серебра размером 2-90 нм, с последующей иммобилизацией митохондрий на данные наноструктурированные покрытия, детектирование спектров ГКР с последующей расшифровкой характеристических колебаний анализируемой пробы спектров ГКР с использованием стандартного программного обеспечения. Осуществление изобретения позволяет расширить область применимости ГКР и проводить исследования в интактных функционирующих митохондриях. 11 з.п. ф-лы, 4 пр., 1 ил.

Изобретение относится к области измерений для диагностических целей. Блок датчиков для проведения диагностических измерений, размещенных на поверхности тела, включает основание, содержащее выемку, в которой закреплен пьезоэлемент датчика давления. Блок также включает гибкую мембрану, установленную на основании и перекрывающую упомянутую выемку. К мембране с наружной стороны прикреплены первый и второй электроды. Первый электрод установлен напротив выемки с возможностью перемещения вместе с мембраной. Вокруг первого электрода выполнен второй неподвижный электрод. Между первым электродом и пьезоэлементом установлена центральная опора. Первый и второй электроды установлены с возможностью контакта с кожной поверхностью тела, причем к первому и второму электродам подсоединены электрические выводы датчика для измерения импеданса. Обеспечивается уменьшение габаритов блока датчиков. При этом повышается стабильность работы датчиков при увеличении их чувствительности. 10 з.п. ф-лы, 7 ил.

Группа изобретений относится к медицине и касается системы детекции для электрохимического выявления белкового аналита, включающей наноструктурированный микроэлектрод, содержащий линкер на своей поверхности, где линкер присоединен к антителу или его фрагменту, способным связывать белковый аналит; и редокс-репортер, способный к переносу электронов с указанным наноструктурированным микроэлектродом, где связывание белкового аналита с указанными антителом или его фрагментом препятствует переносу электронов между указанным редокс-репортером и указанным наноструктурированным микроэлектродом. Группа изобретений также касается способа электрохимической детекции белкового аналита; способа электрохимической детекции множества белковых аналитов; способа мониторинга прогрессирования или ответа у субъекта, имеющего злокачественную опухоль; набора для электрохимической детекции белкового аналита. Группа изобретений обеспечивает создание простого и надежного анализа белков на основе электрохимической детекции. 5 н. и 65 з.п. ф-лы, 3 пр., 5 ил., 1 табл.

Заявленное изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для ранней диагностики мастита у коров. Способ заключается в том, что молоко в объеме 100-200 мкл наносят на предметное стекло и проводят дегидратацию препарата в потоке теплого воздуха при температуре 40-50°С и влажности 20-30% в течение 15-20 минут в горизонтальном положении. При обнаружении в образце многочисленных хаотично расположенных разломов краевой зоны и кристаллических элементов с выраженной деструкцией в центральной зоне фации диагностируют мастит. Заявленное изобретение позволяет быстро и точно диагностировать мастит у коров. 2 ил., 1 пр.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для определения массы микрочастицы в суспензии. Для этого осуществляют формирование измерительного объема между двумя электродами, соединенными с источником переменного напряжения и расположенными в камере с жидкостью, диспергирование в этот объем частицы, измерение параметров взаимодействия частицы с электрическим полем и последующее вычисление ее массы. При этом между электродами формируют неоднородное переменное электрическое поле, а в качестве жидкости используют жидкую среду с низкой электропроводностью с заданной температурой и характеристиками, не меняющими биохимические свойства и физические параметры частицы. Частицу приводят в возвратно-поступательное движение с заданной амплитудой, равной (0,5-0,6) расстояния между электродами в измерительном объеме под действием неоднородного переменного электрического поля со средней напряженностью E~104-106 В/м, напряжением 4-8 В и частотой в диапазоне 1-18 Гц. Проводят съемку видеоизображения возвратно-поступательного перемещения частицы между электродами в измерительном объеме. Обрабатывают видеоизображение компьютерной программой с получением данных о радиусе частицы, частоте и амплитуде ее колебания между электродами. Рассчитывают программными средствами скорость возвратно-поступательного движения частицы. В качестве жидкой среды используют дистиллированную воду или 0,3 М раствор сахарозы. Микрочастица представляет собой латексную частицу, отдельную спору бактерий, отдельный эритроцит животных или отдельную вегетативную клетку бактерий. Изобретение позволяет определить массу микрочастицы в суспензии. 1 з.п. ф-лы, 2 табл., 2 ил.
Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для диагностики нематодозов жвачных животных. Способ сбора и фиксации нематод, паразитирующих в сычуге и тонком кишечнике жвачных животных, включает извлечение сычуга и тонкого кишечника с содержимым во время патологоанатомического вскрытия. Их выдерживают в течение 1 часа при температуре +4°C. Содержимое и соскобы слизистых оболочек сычуга и тонкого кишечника помещают в ведро или другую емкость, смешивая с водой в соотношении 1:1. Отстаивают 10-15 минут, сливают надосадочную жидкость с повтором цикла 3-5 раз, пока надосадочная жидкость не становится прозрачной. Далее фиксируют осадок 96%-ным этанолом в соотношении 1:1. У собранных и зафиксированных нематод морфологические структуры сохраняются пригодными для микроскопирования и проведения ДНК-исследований. Изобретение позволяет упростить процесс сбора паразитических нематод во время патологоанатомического вскрытия жвачных, уменьшить потери образцов при сборе, исключить смешивание образцов от разных животных, обеспечить возможность исследования ДНК собранных нематод. 3 пр.
Изобретение относится к медицине, в частности гастроэнтерологии, и касается способа диагностики тяжести течения хронического гастрита у детей. Сущность способа заключается в изучении клинических, морфологических и иммуногистохимических показателей слизистой оболочки желудка на наличие антигенов простого герпеса, цитомегаловируса и вируса Эпштейн-Барр. Поводят оценку числа микрососудов слизистой оболочки желудка и их эндотелий, неравномерность толщины стенки микрососудов, наличие разрастания соединительной ткани в их стенке, изменения ядер, ядерно-цитоплазматического индекса и наличие периваскулярного отека. При обнаружении вирусной моноинфекции с изменениями эндотелия до 40% микрососудов в виде неравномерного увеличения толщины их стенок, а также гиперхроматоза ядер эндотелиоцитов диагностируют легкое течение. При обнаружении не менее двух вирусных инфекций с увеличением числа микрососудов от 30% до 50% и изменением эндотелия в 45%-60% микрососудов диагностируют течение средней тяжести. При наличии вирусно-бактериальной инфекции с увеличением числа микрососудов более чем на 50% и тотальными изменениями эндотелия более 60% микрососудов диагностируют тяжелое течение хронического гастрита. Использование способа позволяет с высокой точностью оценить тяжесть течения хронического гастрита у детей. 3 пр.

Настоящее изобретение относится к области медицины, а именно к ветеринарии, и предназначено для оценки готовности иммунной системы к вакцинации. Для оценки функциональной зрелости иммунной системы молодняка сельскохозяйственной птицы в брюшную полость цыплят в возрасте 3, 7, 12, 17 и 28 суток инъецируют маркер "Трипановый синий" в дозе не более 0,5 мл. Через час осуществляют бескровный убой цыплят и вскрывают их брюшную полость, вырезают брыжейку или брюшину. Помещают на камеру Горяева, закрывают покровным стеклом и помещают под микроскоп с окуляром, увеличивающим объект исследования не менее в 15 раз, и объективом 9×0,20. Полученный результат фотографируют с помощью цифрового фотоаппарата и изображение вводят в компьютер, используя программное обеспечение Microsoft Office Power Point. Определяют количество окрашенных макрофагов расположенных на 4 больших квадратах камеры Горяева, общая площадь которых 0,16 мм2, проводят анализ, обработку данных, строят график динамики развития макрофагов по их количеству в зависимости от возраста цыплят. Определяют период стабилизации развития макрофагов, в течение которого осуществляют вакцинацию цыплят. Использование изобретения позволяет повысить сохранность цыплят. 3 ил.

Изобретение относится к медицине, хирургии, интраоперационной дифференциальной диагностике объемных образований щитовидной железы (ЩЖ). В режиме реального времени проводят конфокальную лазерную микроскопию ткани ЩЖ. При получении изображения в виде сетки с ячейками округлой или полигональной формы диаметром 20-200 мкм с перегородкой толщиной 0,2 мкм диагностируют отсутствие объемных образований ЩЖ. При регистрации сетчатого изображения с диаметром ячеек более 200 мкм диагностируют узловой коллоидный зоб. При получении изображения с ячейками диаметром 20-200 мкм с толщиной перегородки 10-30мкм и участками фиброза диагностируют аденому ЩЖ. При регистрации изображения с бесструктурными массами с неровными изъеденными краями по всему полю зрения с просветлениями, расположенными в хаотичном порядке, диагностируют рак ЩЖ. Способ обеспечивает быструю и точную диагностику образований ЩЖ в режиме реального времени, интраоперационно. 1 з.п. ф-лы, 3 ил.
Изобретение относится к области медицины и касается способа диагностики микробного фактора при хроническом неспецифическом эндометрите. Сущность способа заключается в том, что у больной на 7-9-й день менструального цикла берут бактериологический посев из полости матки и цервикального канала с помощью внутриматочной цитощетки. При выявлении Lactobacillus spp., Enterococcus faecali, Streptococcus viridans, Streptococcus agalactiae диагностируют микробный фактор при хроническом неспецифическом эндометрите. Использование способа позволяет с высокой точностью диагностировать микробный фактор при хроническом неспецифическом эндометрите. 3 пр.

Изобретение относится к медицине, в частности к фибробронхоскопии, и описывает способ прогнозирования развития тяжелого гнойного трахеобронхита при термоингаляционном поражении дыхательных путей методом хемилюминесценции. Способ характеризуется тем, что во время бронхоскопии производят забор биоптатов слизистой, в которых определяют светосумму Fe2+- индуцированной хемилюминесценции, Н2O2 - индуцированной люминолзависимой хемилюминесценции и максимум амплитуды Н2О2 - индуцированного люминолзависимого свечения. В случае, если значение Sind-1 - 0,500 у.е. и более, Sind-2 - 0,400 у. е. и более и H - 0,300 у. е. и более, прогнозируется развитие тяжелого гнойного трахеобронхита III степени интенсивности воспаления, в случае, если полученные одновременно по всем трем показателям Sind-1 -0,499 у. е. и менее, Sind-2 - 0,399 у. е. и менее и H - 0,299 у. е. и менее, прогнозируется развитие катарального или гнойного трахеобронхита I-II степени интенсивности воспаления. Предложенный способ позволяет быстро и в ранние сроки прогнозировать развитие гнойного трахеобронхита после термоингаляционного поражения дыхательных путей и обосновать необходимость проведения многократных ежедневных санационных бронхоскопий. 1 табл., 4 пр.

Наверх