Способ детекции проникновения углеродных нанотрубок в биологическую ткань



Способ детекции проникновения углеродных нанотрубок в биологическую ткань
Способ детекции проникновения углеродных нанотрубок в биологическую ткань
Способ детекции проникновения углеродных нанотрубок в биологическую ткань

 


Владельцы патента RU 2582286:

Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт неорганической химии им. А.В. Николаева Сибирского отделения Российской академии наук (ИНХ СО РАН) (RU)
Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт молекулярной и клеточной биологии Сибирского отделения Российской академи наук (ИМКБ СО РАН) (RU)
Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт автоматики и электрометрии Сибирского отделения Российской академии наук (ИАиЭ СО РАН) (RU)

Изобретение относится к области нанотехнологий и молекулярной биологии. Предложен способ детекции проникновения углеродных нанотрубок (УНТ) в биологическую ткань, геном клеток которой содержит промотор гена теплового шока, сшитый с кодирующей областью дрожжевого транскрипционного фактора Gal4, и генетическую репортерную конструкцию UAS-GFP. Вывод о наличии или отсутствии проникновения отдельных УНТ в ткань образца делают на основе распределения флуоресценции в клетках образца. Изобретение обеспечивает эффективную детекцию проникновения УНТ в биологическую ткань. 3 ил., 3 пр.

 

Изобретение относится к области нанотехнологий, а также молекулярной биологии, а именно к исследованию и анализу углеродных наноструктур, содержащихся в биологическом материале, и может быть использовано для детекции углеродных нанотрубок проникающих в различные биологические ткани.

В последние годы наноматериалы получают все большее применение в индустрии, и необходимость исследования их биологического действия обусловлена вопросами безопасности. С другой стороны ожидается, что контролируемое воздействие наночастиц на клетки или организмы в целом может быть использовано для создания новых медицинских методов лечения заболеваний [Омельянчук Л.В., Гурова О.А., Окотруб А.В. Генотоксическое действие неорганических наночастиц на клетку. // Российские нанотехнологий 2014. Т. 9, N 3-4. С. 90-97]. Проникновение наночастиц в клетку изучают двумя способами: 1. при помощи флуоресцентно меченых наноматериалов и визуального наблюдения во флуоресцентном микроскопе [Kam N.W., Liu Z., Dai Н. // Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 2006. V. 45. P. 577-581.], 2. с помощью электронной микроскопии [Asharani P.V., Xinyi N., Hande M.P., Valiyaveettil S. // Nanomedicine. 2010. V. 5. N 1. P. 51-64]. Первый способ требует высоких концентраций наноматериалов, для того, чтобы флуоресцентный сигнал можно было наблюдать. Кроме того, для введения флуоресцентной метки, поверхность наночастицы должна подвергаться химической модификации, а это, как видно из наших исследований, искажает картину проникновения наноматериалов в клетки. При втором способе наноматериалы в клетке потенциально можно видеть в виде единичной частицы. Однако процедура приготовления срезов биологических тканей для электронной микроскопии трудоемка и число клеток, которые можно исследовать при высоком разрешении микроскопа столь невелико, требование по разрешению определяется размерами частицы, что исследование широкого набора различных наноматериалов этим способом не представляется возможным хотя бы из соображений высокой стоимости анализа.

Поиск более простых способов детекции проникновения углеродных нанотрубок в биологическую ткань для создания новых медицинских методов лечения заболеваний является актуальным. Так известно изобретение «Детектирование углеродных нанотрубок с помощью микроволнового нагревания» заявка [US №2013259085. Detection of Carbon Nanotubes by Microwave-Induced Heating], опубл. 2013.10. 03, МПК G01N 25/00, где детекцию в биологических образцах (тканях) осуществляют путем сравнения количества тепла при нагреве в микроволновом диапазоне ткани содержащей нанотрубки и ткани в отсутствие нанотрубок. Выделяющееся тепло измеряют с помощью термопары, которую вводят непосредственно в ткань образца. Заметим, что этот способ не позволяет видеть распределение нанотрубок по ткани, кроме того способ является достаточно сложным, так для предотвращения возгорания образца требуется дополнительная продувка азотом и не ясно можно ли в этих условиях достаточно точно обеспечить равный теплоотвод в опыте с трубками и контроле без трубок.

Наиболее близким по технической сущности прототипом является статья [Е. Miyako, Т. Deguchi, Y. Nakajima, М. Yudasaka, Y. Hagihara, M. Horie, M. Shichiri, Y. Higuchi, F. Yamashita, M. Hashida, Y, Shigeri, Y. Yoshida, S. Iijima «Photothermic regulation of gene expression triggered by laser-induced carbon nanohorns» PNAS 2012 vol. 109 no. 19 p. 7523-7528]. Она посвящена решению задачи управления экспрессией гена с помощью лазерного луча и в качестве примера рассмотрен случай индукции экспрессии GFP в тканях трансгенной рыбы Medaka, содержащей конструкцию olphsp70.1-hRluc-Venus, т.е. промотор hsp70 и вариант GFP, называемый Venus, при введении в ее организм нанохорнов и нагревании лазером в области прозрачности ткани (Рис. 2C, 1-6). Заметим, однако, что в статье рассматривается управление экспрессией гена только одного вида углеродного наноматериала (нанохорнов) и не проводились исследования проникновения наночастиц в разные ткани Medaka, кроме того представленные в статье данные не позволяют оценить чувствительность метода - не ясно, детектируют ли они проникновение единичного - нанохорна, поскольку наблюдаемая окраска hs-GFP (Venus) у них достаточно равномерна по тканям и не видно единичных GFP положительных клеток. Такая конструкция, которую используют в статье, менее чувствительна, чем предлагаемая в изобретении.

Задача изобретения: найти способ детектирования проникновения углеродных наноматериалов в клетку с использованием генетических конструкций с техническим результатом позволяющим повысить как чувствительность детекции, так и позволяющим видеть распределение нанотрубок в ткани, а также способ позволяет качественно оценить наличие и уровень проникновения углеродных нанотрубок (УНТ) в исследуемых образцах.

Технический результат достигается тем, что в способе детекции проникновения углеродных нанотрубок в биологическую ткань, в которой геном клеток, входящих в биологическую ткань содержит промотор гена теплового шока, сшитый с кодирующей областью дрожжевого транскрипционного фактора Gal4, и генетическую репортерную конструкцию UAS-GFP, включающий добавление в биологическую ткань углеродных нанотрубок, нагревание образца биологической ткани инфракрасным излучением, после чего проводят детекцию проникновения нанотрубок путем визуального наблюдения индукции экспрессии репортерной конструкции, регистрируемой по флуоресценции наработанного белка GFP в клетках образца, где на основе распределения флуоресценции в клетках образца делают вывод о наличии или отсутствии проникновения отдельных углеродных нанотрубок в ткань образца.

Отличительные признаки изобретения:

- геном клеток, входящих в биологическую ткань содержит промотор гена теплового шока, сшитый с кодирующей областью дрожжевого транскрипционного фактора Gal4, и генетическую репортерную конструкцию UAS-GFP,

- добавление в биологическую ткань углеродных нанотрубок,

- на основе распределения флуоресценции в клетках образца делают вывод о наличии или отсутствии проникновения отдельных углеродных нанотрубок в ткань образца.

Принцип действия предлагаемого способа детектирования проникновения наноматериалов основан на высоком уровне поглощения света углеродными наноматериалами - углеродными нанотрубками (УНТ). Для нагревания углеродных наноматериалов - нанотрубок (УНТ) используют инфракрасное излучение (ИК) с длиной волны в «области прозрачности» биологических тканей. При этом инфракрасное излучение локально разогревает участок клетки, где расположена проникшая в клетку нанотрубка; в результате этого в клетке срабатывает механизм запуска реакции теплового шока, который является естественной стрессовой реакцией клетки на повреждающий фактор. Включение реакции теплового шока, регистрируют по индукции экспрессии генетического репортера (генетической репортерной конструкции UAS-GFP), которая, в свою очередь, регистрируется по наличию флуоресценции GFP в клетках органа, наблюдаемого, например, под флуоресцентным микроскопом. Если изучаемый орган содержит клетки в которые проникли нанотрубки и клетки не содержащие нанотрубок, то в органе будет наблюдаться свечение только части клеток. Что позволяет видеть дифференциальное распределение нанотрубок по ткани (проникновение отдельных нанотрубок в разные ткани).

Использование двух конструкций: P{w[+mC]=GAL4-Hsp70.PB}89-2-1 и P{w[+mC]=UAS-GFP.nls}8 - система hs-Gal4; UAS-GFP более чувствительна за счет использования промежуточного транскрипционного фактора Gal4 усиливающего сигнал, что позволяет повысить чувствительность способа и возможность видеть проникновение отдельных нанотрубок в разные ткани образца, что невозможно в рамках прототипа. При этом плотность мощности для нагревания нанотрубок ИК лазером, проникающих в ткани исследуемого образца составляет 10-100 мВт на квадратный миллиметр, а для ИК лампы 10-20 мВт, что является оптимальным при использовании инфракрасного излучение (ИК) с длиной волны λ~600-1100 нм, которая соответствует «области прозрачности» биологических тканей", и было найдено экспериментальным путем.

Детекцию осуществляют следующим образом: личинок Drosophila melanogaster, содержащий в геноме две конструкции: P{w[+mC]=GAL4-Hsp70.PB}89-2-1 и P{w[+mC]=UAS-GFP.nls}8 подвергают действию наночастиц - УНТ, добавленных в корм, затем нагревают инфракрасным светом лазера или лампы в прозрачной кювете с плотностью мощности 10-100 мВт на квадратный миллиметр для лазера или 10-20 мВт на квадратный миллиметр для лампы в течение 30-40 мин. Через несколько часов, после того, как в результате активации промотора теплового шока Hsp70 наработается GFP репортер, из личинок извлекают органы и наблюдают в них свечение GFP репортера. (Одна из генетических конструкций представляет собой промотор одного из генов теплового шока (Hsp70), сшитый с кодирующей областью дрожжевого транскрипционного фактора Gal4. Вторая конструкция представляет собой UAS дрожжевой промотор дрожжей, на который способен связываться с Gal4, сшитый с кодирующей областью зеленого флуоресцентного белка GFP.) Флуоресценцию GFP можно видеть во флуоресцентном микроскопе. В результате облучения, разогрева нанотрубок и передачи тепла клетке, происходит ее нагрев и нарабатывается белок Gal4, далее он садится на промотор UAS, с которого далее нарабатывается белок GFP, который видно во флуоресцентном микроскопе. Уровень проникновения нанотрубок осуществляют путем визуального наблюдения индукции экспрессии генетического репортера путем наличия флюоресценции, например, во флуоресцентном микроскопе и на основе анализа полученных изображений делают вывод о наличии или отсутствии проникновения углеродных наноматериалов - нанотрубок (УНТ) прошлом в клетки и/или образцы биологической ткани.

Пример 1.

Партию личинок Drosophila melanogaster всего 30 особей, по 5 особей в одной кювете, содержащих в геноме две конструкции: 1) промотор одного из генов теплового шока (Hsp70) сшитый с кодирующей областью дрожжевого транскрипционного фактора Gal4 (драйверная конструкция) - P{w[+mC]=GAL4-Hsp70.PB}89-2-1 и 2) репортерную конструкцию P{w[+mC]=UAS-GFP.nls}8 подвергают действию или кормят кормом в течение 2 дней, в который добавлены многослойные окисленные УНТ длиной ~1.5 мкм, при этом концентрация УНТ в корме составляла 32 мкг на мл. Далее личинок в прозрачной кювете нагревают инфракрасным излучением лазера (λ=1063 нм) с плотностью мощности 20 мВт на квадратный миллиметр в течение 30 мин. Через 3 часа, после того, как в результате активации промотора теплового шока Hsp70 наработается GFP репортер из личинок извлекают имагинальные диски, и наблюдают в них наличие флуоресценции GFP репортера во флуоресцентном микроскопе, по которой делают качественный вывод о наличии УНТ в ткани образца.

На Рис. 1 приведены результаты эксперимента с окисленными УНТ длиной ~1.5 мкм:

(А, Б) Контроль 1 - крыловой имагинальный диск личинки третьего возраста, которая содержалась на корме с УНТ без облучения ИК (А - изображение диска с окрашенными ядрами (DAPI), Б - флуоресценция диска в канале GFP. GFP сигнал отсутствует).

(В, Г) Контроль 2 - крыловой имагинальный диск личинки третьего возраста, которая содержалась на корме без УНТ, но была облучена ИК лазером. GFP сигнал отсутствует.

(Д, Е) Опыт - крыловой имагинальный диск личинки третьего возраста, которых кормили УНТ и облучили ИК лазером. Видна флуоресценция части клеток имагинального диска (некоторые из них показаны стрелками), которая свидетельствует о том, что УНТ прошли через стенку кишечника, внедрились в некоторые клетки имагинального диска и вызвали активацию GFP репортера.

Пример 2.

Партию личинок Drosophila melanogaster всего 30 особей, по 5 особей в одной кювете, содержащих в геноме две конструкции: 1) промотор одного из генов теплового шока (Hsp70) сшитый с кодирующей областью дрожжевого транскрипционного фактора Gal4 (драйверная конструкция) - P{w[+mC]=GAL4-Hsp70.PB}89-2-1 и 2) репортерную конструкцию P{w[+mC]=UAS-GFP.nls}8 подвергают действию или кормят кормом, содержащим многослойные УНТ длиной ~100 мкм, в течение 2 дней, при этом концентрация УНТ в корме составляла 32 мкг/мл. Далее личинок в прозрачной кювете нагревают инфракрасным излучением лазера (λ=1063 нм) с плотностью мощности 20 мВт на квадратный миллиметр в течение 30 мин. Через 3 часа, после того, как в результате активации промотора теплового шока Hsp70 наработается GFP репортер из личинок извлекают имагинальные диски и наблюдают в них наличие флуоресценции GFP репортера во флуоресцентном микроскопе, по которой делают качественный вывод о наличии УНТ в ткани образца.

На Рис. 2 (А1, Б1) приведены результаты эксперимента. Крыловой имагинальный диск личинки третьего возраста, которая содержалась с УНТ и была нагрета (обработана) ИК лазером. Видна флуоресценция части клеток имагинального диска (некоторые из них показаны стрелками), которая свидетельствует о том, что УНТ прошли через стенку кишечника, внедрились в некоторые клетки имагинального диска и вызвали активацию GFP репортера.

Пример 3.

Партию личинок Drosophila melanogaster всего 30 особей, по 5 особей в одной кювете, содержащих в геноме две конструкции: 1) промотор одного из генов теплового шока (Hsp70) сшитый с кодирующей областью дрожжевого транскрипционного фактора Gal4 (драйверная конструкция) - P{w[+mC]=GAL4-Hsp70.PB}89-2-1 и 2) репортерную конструкцию P{w[+mC]=UAS-GFP.nls}8 подвергают действию или кормят кормом в течение 2 дней, в который добавлены многослойные модифицированные УНТ длиной ~100 мкм, при этом концентрация УНТ в корме составляла 32 мкг на мл. Далее личинок в прозрачной кювете нагревают инфракрасным излучением инфракрасной лампы со спектром излучения в диапазоне λ~600-1000 нм и плотностью мощности 10 мВт на квадратный миллиметр в течение 30 мин. Через 3 часа, после того, как в результате активации промотора теплового шока Hsp70 наработается GFP репортер из личинок извлекают имагинальные диски, и наблюдают в них наличие флуоресценции GFP репортера во флуоресцентном микроскопе, по которой делают качественный вывод о наличии УНТ в клетках и/или ткани образца.

На Рис. 3 (А3, Б3) приведены результаты эксперимента. Обозначения те же, что и на Рис. 1. Крыловой имагинальный диск личинки третьего возраста, которая содержалась с УНТ и была облучена инфракрасным излучением ИК лампы. Видна флуоресценция части клеток имагинального диска (некоторые из них показаны стрелками), которая свидетельствует о том, что УНТ прошли через стенку кишечника, внедрились в некоторые клетки имагинального диска и вызвали активацию GFP репортера.

Приведенные примеры демонстрируют, что в тканях личинок, которых кормили УНТ, регистрируется свечение отдельных клеток органа, это означает, что клетки различаются по количеству нанотрубок, которые в них проникли. Эффект теплового шока вызывается либо отдельными нанотрубками, либо их агломератами. Наиболее вероятно, что эффект теплового шока в наших условиях наблюдается когда в клетке формируется агломерат, содержащий около 100 нанотрубок. В сравнении с прототипом наш метод чувствительнее на несколько порядков (от 102 до 108 раз). Кроме того, из экспериментальных данных следует, что свечение отдельных клеток органа личинок, которых кормили УНТ, появляется вне зависимости от длины и химического состояния поверхности УНТ.

Способ детекции проникновения углеродных нанотрубок в биологическую ткань, в которой геном клеток, входящих в биологическую ткань, содержит промотор гена теплового шока, сшитый с кодирующей областью дрожжевого транскрипционного фактора Gal4, и генетическую репортерную конструкцию UAS-GFP, включающий добавление в биологическую ткань углеродных нанотрубок, нагревание образца биологической ткани инфракрасным излучением, после чего проводят детекцию проникновения нанотрубок путем визуального наблюдения индукции экспрессии репортерной конструкции, регистрируемой по флуоресценции наработанного белка GFP в клетках образца, где на основе распределения флуоресценции в клетках образца делают вывод о наличии или отсутствии проникновения отдельных углеродных нанотрубок в ткань образца.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной хирургии, и может быть использовано для прогнозирования течения энтеральной недостаточности при остром перитоните в эксперименте.

Изобретение относится к клинической биохимии и представляет собой способ экспресс-определения резистентности к окислению липопротеинов низкой плотности сыворотки крови путем обработки буфером, содержащим поливинилпирролидон (ПВП) с последующей турбидиметрической регистрацией смеси, отличающийся тем, что обработку сыворотки или плазмы крови человека ведут 15% раствором ПВП-12600 в 0,01М Трис-HCl-буфере, pH 7,4, содержащем 0,15М NaCl, при объемном соотношении сыворотка : ПВП (1 : 6), инкубируют 10 и 20 мин при комнатной температуре, измеряют светопоглощение спектрофотометрически при длине волны 450 нм в опытной и контрольной пробах, вычисляют разность между ними и при отсутствии разницы констатируют нормальную резистентность к окислению ЛНП в сыворотке крови человека.

Изобретение относится к клинической биохимии и представляет собой способ определения литической активности множественно модифицированных липопротеинов низкой плотности (ммЛНП) путем обработки сыворотки крови 20% раствором поливинилпирролидона с молекулярной массой 35000 (ПВП-35000) при объемном соотношении сыворотка: ПВП (1:0,84), инкубируют 10 мин при комнатной температуре, агрегаты ммЛНП осаждают центрифугированием, декантируют, осадок ммЛНП растворяют в буфере без ПВП, добавляют аутологичные отмытые стандартизованные эритроциты человека, инкубируют в течение 48 часов при комнатной температуре, измеряют оптическую плотность на фотометре при длине волны 620 нм, по калибровочному графику определяют степень лизиса и при лизисе более 10% констатируют повышенную литическую активность ммЛНП.

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для неинвазивного определения сахара в крови. Для этого осуществляют подготовку рабочего прибора для определения сахара в крови, в котором используют пробу и реагент, при этом в качестве пробы применяют дозу слюны пациента, а в качестве реагента используют первичный конгломерат монореактива Глюкоза-Ново, где глюкозооксидаза дополнительно содержит мутаротазу.

Изобретение относится к поглощающему изделию, выполненному с возможностью определения ионной силы мочи. Изделие включает непроницаемый для жидкости слой; проницаемый для жидкости слой; поглощающий внутренний слой, расположенный между непроницаемым для жидкости слоем и проницаемым для жидкости слоем; устройство с латеральным потоком, интегрированное в изделие и расположенное таким образом, что оно находится в жидкостном соединении с потоком мочи, выделяемой пользователем изделия.

Настоящее изобретение относится к биотехнологии, генной инженерии и представляет собой бактериальную клетку, способную реплицироваться в среде, содержащей по меньшей мере один тяжелый металл, выбранный из ртути, кадмия, цинка и свинца.

Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для определения кислотной устойчивости эритроцитов. Способ заключается в том, что в пробирку с кровью добавляют антикоагулянт (трилон Б) из расчета 10 мкл на 2 мл крови.

Группа изобретений относится к медицине и описывает композицию реактивов для измерения количества лития в биологических образцах, отличающуюся тем, что указанная композиция реактивов для измерения количества лития представляет собой водный раствор, содержащий соединение, которое имеет структуру, представленную формулой (I), смешиваемый с водой органический растворитель, выбранный из диметилсульфоксида (DMSO), диметилформамида (DMF) и диметилацетамида (DMA), и модификатор pH для доведения pH до значения в диапазоне от pH 5 до pH 12, концентрация соединения формулы (I) составляет от 0,1 до 1,0 г/л.

Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству и гинекологии, и предназначено для выявления риска развития преэклампсии у женщин с неотягощенной наследственностью.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и предназначено для выявления риска развития и степени тяжести преэклампсии. Для прогнозирования риска возникновения преэклампсии тяжелого течения у женщин русской национальности, уроженок Центрального Черноземья, выделяют ДНК из периферической венозной крови и анализируют генетические полиморфизмы: -308 G/A TNFα (rs1800629), +36 A/G TNFR1 (rs767455), -801 G/A SDF 1(rs1801157), C/G MCP-1 (rs285765).

Изобретение относится к области неразрушающего контроля и может быть использовано для активного одностороннего теплового контроля металлических, композиционных и др.

Изобретение относится к области неразрушающего контроля и может быть использовано при проведении наружной тепловизионной съемки для диагностики состояния строительных сооружений и энергетических объектов.

Изобретение относится к области наноэлектроники и может быть использовано в различных областях наноиндустрии. Заявлен способ исследования температурной зависимости электрического сопротивления пленочных образцов при нагреве.

Изобретение относится к устройству для оценки термомеханической усталости материала, который подвергается воздействию горячего теплового потока. Устройство содержит образец для испытаний, имеющий "горячую" стенку с наружной поверхностью, которая подвергается воздействию теплового потока, и внутренней поверхностью, от которой отходят параллельные полосы, прикрепленные к этой внутренней поверхности и образующие между собой параллельные каналы; промежуточную часть, имеющую параллельные ребра, форма и размеры которых обеспечивают возможность их вставки в указанные каналы между полосами с образованием прохода в области внутренней поверхности горячей стенки для циркуляции охлаждающей жидкости.

Изобретение относится к области исследования материалов строительных конструкций здания с помощью тепловых средств. Способ выявления параметров локального пожара включает проведение технического осмотра строительных конструкций деревянного перекрытия здания, подвергавшихся действию термического градиента в условиях локального пожара; выявление схемы огневого воздействия на составные элементы перекрытия; установление породы и сорта строительной древесины, показателей ее плотности и влажности в естественном состоянии, массивности элементов деревянного перекрытия, нахождение нормативного сопротивления строительной древесины на изгиб и скорости ее выгорания, отличающийся тем, что технический осмотр деревянного перекрытия здания дополняют инструментальными измерениями геометрических размеров площади горения, назначают контрольную ячейку перекрытия в очаге пожара, измеряют площадь поперечного сечения проемов ячейки перекрытия, вычисляют показатель проемности ячейки перекрытия; определяют толщину слоя обугливания поперечного сечения элементов деревянного перекрытия; вычисляют величину горючей загрузки, массовую скорость выгорания строительной сосновой древесины в ячейке перекрытия и коэффициент снижения скорости выгорания сосновой древесины, затем выявляют длительность локального пожара и максимальную температуру локального пожара, которые вычисляют из заданных соотношений.

Изобретение относится к области технологии строительного производства и заключается в количественном определении аммиака в бетонных конструкциях, используемых в жилом строительстве.

Изобретение относится к технике экспериментального исследования огнезащитной обработки древесины и может быть использовано для определения качества огнезащитной обработки непосредственно на месте выполнения работ по огнезащите деревянных конструкций.

Настоящее изобретение относится к способу повышения термоокислительной стабильности смазочных масел, по которому пробы смазочного масла термостатируют нагреванием в герметичном стакане без перемешивания в течение постоянного времени при атмосферном давлении и фиксированной температуре, которую при каждом термостатировании новой пробы ступенчато повышают в диапазоне температур, определяемых назначением смазочного масла, после нагревания проводят отбор и испытание термостатированных проб на сопротивляемость окислению, при этом отбирают пробу постоянной массы, которую затем нагревают в присутствии воздуха с перемешиванием в течение установленного времени в зависимости от базовой основы смазочного масла при постоянной температуре и постоянной скорости перемешивания, окисленные пробы фотометрируют, определяют коэффициент поглощения светового потока, строят графическую зависимость изменения параметра оценки термоокислительной стабильности от температуры термостатирования, по которой определяют оптимальную температуру термостатирования, обеспечивающую наибольшее сопротивление окислению, отличающемуся тем, что критерием оценки термоокислительной стабильности смазочнного масла принимают ресурс работоспособности термостатированного масла, причем при испытании каждой новой термостатированной пробы на сопротивляемость окислению отбирают пробу окисленного масла через равные промежутки времени, фотометрированием определяют коэффициент поглощения светового потока, строят графические зависимости коэффициента поглощения светового потока от времени окисления термостатированных масел при каждой температуре термостатирования, по которым определяют время достижения коэффициента поглощения светового потока выбранного значения для каждого окисленного термостатированного масла при разных температурах, строят графическую зависимость времени достижения выбранного значения коэффициента поглощения светового потока окисленных термостатированных масел от температуры термостатирования, и по точке этой зависимости с максимальной ординатой, характеризующей ресурс работоспособности, определяют температуру термостатирования, обеспечивающую наибольшее сопротивление окислению.

Изобретение относится к испытательной технике, а именно к устройствам для исследования термической усталости конструкционных материалов, и может быть использовано для экспериментального подтверждения расчетного прогноза малоцикловой прочности конструкционных материалов.

Изобретение относится к способам анализа образцов пористых материалов и может быть использовано для количественного исследования ухудшения свойств околоскважинной зоны нефте/газосодержащих пластов из-за проникновения в нее полимеров, содержащихся в буровом растворе.

Гигрометр // 2587527
Изобретение относится к аналитическому приборостроению и предназначено для измерения объемной доли влаги (ОДВ) в газах. Гигрометр предназначен для измерения объемной доли влаги, использующий кулонометрическую ячейку. При этом при определении объемной доли влаги в газе, имеющем примеси, взаимодействующие с фосфорным ангидридом, перед кулонометрической ячейкой установлена пневматическая емкость, имеющая входной и выходной штуцер в нижней части емкости и штуцер, расположенный в верхней части емкости, предназначенный для подачи газа в кулонометрическую ячейку. Техническим результатом является возможность увеличения срока службы гигрометра. 1 ил.
Наверх