Способ очистки микафунгина



Способ очистки микафунгина
Способ очистки микафунгина
Способ очистки микафунгина
Способ очистки микафунгина
Способ очистки микафунгина
Способ очистки микафунгина
Способ очистки микафунгина
Способ очистки микафунгина
Способ очистки микафунгина
Способ очистки микафунгина
Способ очистки микафунгина
Способ очистки микафунгина
Способ очистки микафунгина
Способ очистки микафунгина

 


Владельцы патента RU 2583262:

КСЕЛЛИЯ ФАРМАСЬЮТИКАЛЗ АПС (DK)

Изобретение относится к способу очистки микафунгина. Способ включает нанесение исходного сырья микафунгина на подложку гидрофобной адсорбирующей смолы, воздействие на связанный микафунгин водного раствора растворенной фармацевтически приемлемой соли, элюирование растворенной фармацевтически приемлемой соли микафунгина раствором, содержащим органический растворитель, смешивающийся с водой, при этом исходное сырьё или водный раствор содержат органический растворитель, смешивающийся с водой. Изобретение обеспечивает упрощение способа при сохранении высокой степени очистки. 4 н. и 23 з.п. ф-лы, 9 ил., 9 пр.

 

ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к улучшенному способу очистки соли микафунгина, в частности микафунгина натрия.

ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Микафунгин представляет собой активный фармацевтический ингредиент в Mycamine®. Согласно FDA (Управление США по надзору за качеством пищевых продуктов и лекарственных средств), химическая структура микафунгина натрия представлена формулой (I):

Микафунгин также известен как пневмокандин А0, 1-[(4R,5R)-4,5-дигидрокси-N2-[4-[5-[4-(пентилокси)фенил]-3-изоксазолил]бензоил]-L-орнитин]-4-[(4S)-4-гидрокси-4-[4-гидрокси-3-(сульфоокси)фенил]-L-треонин]. Микафунгин натрия, кроме того, известен как FK-463. Назначенный регистрационный номер Chemical Abstracts для микафунгина - 235114-32-6 и для микафунгина натрия - 208538-73-2.

Микафунгин представляет собой эхинокандин, который ингибирует синтазу 1,3-β-D-глюкана и, таким образом, приводит к лизису грибной клетки. Микафунгин, таким образом, является полезным в качестве противогрибкового агента при лечении инфекций, вызванных штаммами, например, Aspergillus, Cryptococcus, Candida, Mucor, Actinomyces, Histoplasma, Dermatophyte, Malassezia и Fusarium. Микафунгин является активным ингредиентом в одобренных лекарственных средствах Mycamine® и Funguard®, которые используют в лечении и профилактике инфекций, вызванных Candida.

Специалисту известны разные способы получения и очистки микафунгина, см., например, US 6107458 и US 7199248. Более конкретно, в US 7199248 раскрыт способ, где неочищенную DIPEA (диизопропилэтиламин) соль микафунгина очищают фильтрованием и хроматографическим разделением с использованием регенерировавшей γ-окиси алюминия в колонке 1350-L и элюирования микафунгина DIPEA метанолом. Фракцию, содержащую микафунгин, далее очищают и переводят в натриевую соль микафунгина, среди прочего, посредством ионообменной хроматографии с использованием регенерировавшей ионообменной смолы UBK510L. Микафунгин натрия элюируют водным метанолом. Наконец, для осаждения микафунгина натрия используют ацетон и этилацетат.

В данной области хорошо известно, что диизопропилэтиламиновая (DIPEA) соль микафунгина является более стабильной, чем натриевая соль микафунгина. Следовательно, в способах предшествующего уровня техники, таких как способ, раскрытый выше, в качестве промежуточного соединения при получении микафунгина натрия часто использовали DIPEA соль. Это, например, описано Ohigashi et al. в диссертации по общим вопросам "Process Development of Micafungin, a Novel Lipopeptide Antifungal Agent" в Journal of Synthetic Organic Chemistry, Japan, vol. 64, No. 12, Dec. 2006. В Ohigashi et al., описан способ, в котором примеси, присутствующие в DIPEA соли микафунгина, удаляют посредством применения смол. DIPEA соль, очищенную посредством применения колонки со смолой на основе окиси алюминия согласно Ohigashi et al., затем подвергают ионообменной хроматографии для превращения DIPEA соли микафунгина до натриевой соли микафунгина.

Очевидно, что способы получения микафунгина натрия предшествующего уровня техники, как упомянуто выше, включают две последовательные стадии хроматографии, т.е., во-первых, очистку микафунгина DIPEA на смоле для хроматографии с обращенной фазой (RPC), и, во-вторых, превращение DIPEA соли до натриевой соли, т.е. замену соли, на ионообменной смоле. Применение двух последовательных стадий хроматографии для получения желательной натриевой соли микафунгина является трудоемким, и предложение улучшенного способа, включающего меньше стадий обработки, меньше реактивов и оборудования, было бы полезным как с экономической точки зрения, так и с точки зрения заботы об окружающей среде и сокращения трудоемкости.

Таким образом, все еще имеется потребность в более эффективных способах получения очищенного микафунгина и его производных, таких как натриевая соль микафунгина.

КРАТКОЕ ИЗЛОЖЕНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Целью настоящего изобретения является предложение улучшенного способа очистки соли микафунгина, такой как микафунгин натрия.

Как было упомянуто выше, способы предшествующего уровня техники, среди прочего, сопровождались недостатком наличия двух последовательных стадий хроматографии. Настоящее изобретение основано на неожиданном открытии того, что две стадии (замену соли и очистку) можно осуществить в одной и той же операции. Способ по настоящему изобретению, таким образом, включает несколько самоочевидных преимуществ, как экологического, так и экономического характера, таких как пониженное потребление реактивов, более короткая продолжительность производственного цикла и использование меньшего количества оборудования.

Согласно одному воплощению изобретения предложен способ получения фармацевтически приемлемой соли микафунгина, где указанный способ включает следующие стадии:

а) нанесение исходного сырья микафунгина на подложку в виде гидрофобной адсорбирующей смолы;

б) воздействие на связанный микафунгин водного раствора растворенной фармацевтически приемлемой соли;

в) элюирование растворенной фармацевтически приемлемой соли микафунгина раствором, содержащим смешивающийся с водой органический растворитель;

при условии, что по меньшей мере один из

i) исходного сырья на стадии а)

ii) или водного раствора на стадии б)

содержит смешивающийся с водой органический растворитель.

Согласно одному аспекту приведенного выше воплощения предложен способ, который дополнительно включает стадию, на которой связанный микафунгин со стадии б), кроме того, один или более чем один раз подвергают воздействию водного раствора, содержащего органический растворитель, смешивающийся с водой, для удаления примесей.

Согласно другому аспекту приведенного выше воплощения предложен способ, в котором исходное сырье на стадии а) содержит органический растворитель, смешивающийся с водой, в интервале 0-30% об./об.

Согласно другому аспекту приведенного выше воплощения предложен способ, в котором исходное вещество на стадии а) содержит органический растворитель, смешивающийся с водой, в интервале 5-15% об./об.

Согласно другому аспекту приведенного выше воплощения предложен способ, в котором исходное вещество на стадии а) содержит органический растворитель, смешивающийся с водой, в интервале 10% об./об.

Согласно другому аспекту приведенного выше воплощения предложен способ, в котором водный раствор на стадии б) содержит органический растворитель, смешивающийся с водой, в интервале 0-40% об./об.

Согласно другому аспекту приведенного выше воплощения предложен способ, в котором водный раствор на стадии б) содержит органический растворитель, смешивающийся с водой, в интервале 20% об./об.

Согласно другому аспекту приведенного выше воплощения предложен способ, в котором органический растворитель, смешивающийся с водой, выбран из группы, состоящей из разветвленных или неразветвленных С1-С3 спиртов, С3-С6 кетонов и полярных апротонных органических растворителей.

Согласно другому аспекту приведенного выше воплощения предложен способ, в котором органический растворитель, смешивающийся с водой, выбран из группы, состоящей из метанола, этанола, пропанола, изопропанола, ацетона и ацетонитрила.

Согласно другому аспекту приведенного выше воплощения предложен способ, в котором водный раствор на стадии в) содержит по меньшей мере 30% об./об. ацетонитрила в качестве органического растворителя, смешивающегося с водой.

Согласно другому аспекту приведенного выше воплощения предложен способ, в котором органический растворитель, смешивающийся с водой, представляет собой метанол.

Согласно другому аспекту приведенного выше воплощения предложен способ, в котором водный раствор на стадии в) содержит по меньшей мере 70% об./об. метанола, как, например, по меньшей мере 90% об./об. метанола, как, например, по меньшей мере 95% об./об. метанола в качестве органического растворителя, смешивающегося с водой.

Согласно другому аспекту приведенного выше воплощения предложен способ, в котором исходное вещество на стадии а), водный раствор на стадии б) и промывочный раствор на стадии в) содержат органический растворитель, смешивающийся с водой.

Согласно другому воплощению изобретения предложен способ получения фармацевтически приемлемой соли микафунгина, при котором указанный способ включает следующие стадии:

а) нанесение исходного сырья микафунгина на подложку в виде гидрофобной адсорбирующей смолы;

б) воздействие на связанный микафунгин водного раствора растворенной фармацевтически приемлемой соли;

в) возможно воздействие на связанную соль микафунгина, полученную на стадии б), один или более чем один раз водного раствора, содержащего органический растворитель, смешивающийся с водой, для удаления примесей;

г) элюирование растворенной фармацевтически приемлемой соли микафунгина раствором, содержащим органический растворитель, смешивающийся с водой;

при условии, что, когда стадия в) не проводится, тогда исходное сырье микафунгина и/или водный раствор на стадии б) содержит органический растворитель, смешивающийся с водой.

Согласно одному воплощению исходное сырье микафунгина или водный раствор на стадии б) настоящего способа содержит 2-30% об./об. органического растворителя, смешивающегося с водой.

Согласно одному воплощению исходное сырье микафунгина и водный раствор на стадии б) настоящего способа содержат 2-30% об./об. органического растворителя, смешивающегося с водой.

Согласно одному воплощению водный раствор на стадии в) настоящего способа содержит 30-50% об./об. органического растворителя, смешивающегося с водой.

Согласно другому воплощению катион, присутствующий в исходном сырье микафунгина по настоящему изобретению, представляет собой DIPEA.

Согласно еще одному другому воплощению смола, используемая согласно настоящему способу, представляет собой HP20SS.

Согласно другому воплощению исходное сырье микафунгина и водный раствор на стадии б) настоящего способа содержит органический растворитель, смешивающийся с водой.

Согласно еще одному другому воплощению исходное сырье микафунгина и водный раствор на стадии б) настоящего способа содержат метанол.

Согласно еще одному другому воплощению настоящего способа органический растворитель, смешивающийся с водой, присутствующий в исходном сырье микафунгина и/или в водном растворе на стадии б), представляет собой метанол.

Согласно еще одному другому воплощению настоящего способа водный раствор на стадии б) содержит метанол.

Согласно последнему воплощению настоящего изобретения предложен способ, в котором фармацевтически приемлемая соль микафунгина представляет собой натриевую соль, и смола представляет собой HP20SS, и исходное сырье микафунгина содержит микафунгин DIPEA и 10% об./об. метанола, и раствор на стадии б) содержит 20% об./об. метанола и 80% об./об. 3 M NaCl, 0,1 NaCH3COO, и раствор на стадии в) содержит 40% об./об. метанола, и раствор на стадии г) содержит 90% об./об. метанола.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

На Фиг. 1-9 проиллюстрирован профиль элюции DIPEA и микафунгина натрия из HP20SS согласно соответствующим Примерам 1-9. В соответствующих таблицах показан уровень DIPEA в элюированных фракциях (CV обозначает объемы колонок).

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Согласно настоящему изобретению микафунгин представляет собой любое соединение, содержащее структуру

или его соли. Подразумевается, что выражение «его соли» охватывает любые соли микафунгина, которые могут быть полезными для цели получения и/или очистки микафунгина или любых фармацевтически приемлемых солей микафунгина, полезных в качестве активного ингредиента в медицинской композиции. В данном отношении неограничивающим списком солей микафунгина являются натриевая соль, калиевая соль, диизопропилэтиламиновая (DIPEA) соль и т.д.

Микафунгин представляет собой полусинтетическое производное FR901379, продукт ферментации, полученный из Coleophoma empetri F-11899 (депонированный как FERM BP-2635).

Микафунгин можно получать деацилированием продукта ферментации FR901379, получая соединение, названное здесь пептидным кором микафунгина, и последующим связыванием боковой цепи микафунгина - 4-[5-(4-пентилоксифенил)изоксазол-3-ил]бензойной кислоты с указанным пептидным кором. Регистрационным номером указанной боковой цепи, назначенным Chemical abstracts, является 179162-55-1. Она также известна под наименованием FR195752.

Деацилирование FR901379 можно проводить ферментами, продуцируемыми определенными микроорганизмами из семейства Actinoplanaceae, например Actinoplanes utahensis IF0-13244, Actinoplanes utahensis АТСС 12301, Actinoplanes missourienses NRRL 12053. Деацилированный пептидный кор представлен здесь формулой II. Натриевая соль деацилированного пептидного кора была названа FR133303 (см. EP 462531).

Повторное ацилирование пептидного кора, представленного формулой II, можно проводить, как раскрыто в US 7199248.

Пептидный кор микафунгина представлен формулой II.

Согласно настоящему изобретению предложен способ получения очищенной соли микафунгина. Согласно одному воплощению изобретения соль микафунгина, полученная согласно настоящему изобретению, представляет собой натриевую соль микафунгина. Следует понимать, что настоящим способом также можно получать другие фармацевтически приемлемые соли микафунгина, такие как, например, калиевую соль микафунгина.

Согласно настоящему изобретению предложен способ очистки и получения фармацевтически приемлемой соли микафунгина, в котором исходное сырье микафунгина адсорбируется на твердую подложку, адсорбированный микафунгин подвергается действию и промывается водным раствором, содержащим растворенную соль, и, наконец, полученная таким образом фармацевтически приемлемая соль микафунгина элюируется с использованием элюирующего раствора, содержащего органический растворитель, смешивающийся с водой.

Согласно настоящему изобретению термин «исходное сырье микафунгина» обозначает водный раствор, содержащий растворенную соль микафунгина. Исходное сырье микафунгина обеспечивает адсорбцию соли микафунгина на твердой подложке таким образом, что за одну стадию можно осуществить и замену соли, и очистку.

Исходное сырье микафунгина содержит соль микафунгина, подходящую для адсорбции на твердой подложке. При адсорбции указанной соли на твердой подложке и при дальнейшем воздействии раствора растворенной фармацевтически приемлемой соли становится возможной замена соли. Исходные катионы, ассоциированные с микафунгином в исходном сырье микафунгина, затем могут быть удалены промывкой водным раствором, возможно, содержащим органический растворитель, смешивающийся с водой. Наконец, фармацевтически приемлемую соль микафунгина можно элюировать водным раствором, содержащим органический растворитель, смешивающийся с водой.

Соль микафунгина, присутствующая в исходном сырье, таким образом, отличается от соли микафунгина, элюируемой из твердой подложки после замены соли и очистки. Соль микафунгина, присутствующая в исходном веществе микафунгина согласно предпочтительному воплощению изобретения, представляет собой DIPEA соль микафунгина.

Согласно одному аспекту настоящего изобретения предложен способ, в котором конечная соль микафунгина по существу не содержит катион соли микафунгина, присутствующей в исходном сырье микафунгина. Термин «по существу не содержит» в контексте настоящего изобретения означает то, что указанный катион не детектируется в конечной соли микафунгина. Термин «не детектируется» в контексте настоящего изобретения означает то, что катион исходного сырья микафунгина, например DIPEA, не может быть детектирован следующим анализом ВЭЖХ (высокоэффективная жидкостная хроматография):

Параметры системы
Колонка Kinetex C18, 2,6 мкм, 100 мм × 2,1 мм, 100A
Скорость тока 0,8 мл/мин
Температура колонки 30°C
Избыточное давление приблизительно 24,132 МПа
Подвижная фаза A 99% вода MilliQ,
1% ацетонитрила,
0,1% (06./06.) TFA (трифторуксусная кислота)
Подвижная фаза Б 1% воды MilliQ,
99% ацетонитрила,
0,1% (об./об.) TFA

Время записи хроматограммы 15 мин
Инъекционный объем 5 мкл
Температура автосэмплера 5°C
Установки интегратора % площади пика
Время удерживания, DIPEA: приблизительно 4,6 мин

Детектор: детектор Corona Cad

Приготовление образца:

Аккуратно взвесить 50 мг образца в 10-мл мерную колбу. Растворить в ней и развести до заданного объема разбавляющим раствором (вода с 0,1% TFA). Инъецировать 5 мкл.

Согласно другому аспекту настоящего изобретения предложен способ, в котором конечная соль микафунгина по существу не содержит катион соли микафунгина, присутствующий в исходном сырье микафунгина. Термин «по существу не содержит» в контексте настоящего изобретения означает то, что уровень катиона из исходного сырья микафунгина, сохраняющийся в конечной соли микафунгина, составляет менее 300 млн-1. Например, согласно одному воплощению настоящего способа уровень DIPEA в образующемся микафунгине натрия составляет меньше чем 300 млн-1.

Согласно одному аспекту настоящего изобретения предложен способ получения микафунгина натрия, при котором полученный микафунгин натрия по существу не содержит DIPEA.

Согласно одному аспекту настоящего изобретения предложен способ получения микафунгина натрия, при котором полученный микафунгин натрия по существу не содержит DIPEA.

Согласно еще одному другому аспекту изобретения исходное сырье микафунгина представляет собой водный раствор растворенной соли микафунгина, который, кроме того, содержит органический растворитель, смешивающийся с водой. Присутствие органического растворителя, смешивающегося с водой, будет в дальнейшем облегчать адсорбцию соли микафунгина, присутствующей в исходном сырье микафунгина, с твердой подложкой таким образом, что за одну стадию можно провести и очистку, и замену соли. Более конкретно, исходное сырье микафунгина может содержать водный раствор растворенного микафунгина диизопропилэтиламина (DIPEA) и органический растворитель, смешивающийся с водой.

Соль микафунгина, присутствующую в исходном сырье микафунгина, можно получать согласно способам, хорошо известным специалисту. Например, микафунгин DIPEA формулы

можно получать согласно способам, раскрытым в US 6170458 или US 7199248. Соль микафунгина, полезную в качестве исходного сырья согласно настоящему изобретению, также можно получать, как описано в Ohigashi et al., приведенной выше.

Следует понимать, что термин «органический растворитель, смешивающийся с водой», который, возможно, может присутствовать в исходном сырье микафунгина, представляет собой растворитель, который дополнительно облегчает связывание микафунгина, присутствующего в исходном сырье микафунгина, таким образом, что лишь за одну хроматографическую стадию можно проводить замену соли, помимо очистки микафунгина. Неограничивающий список подходящих органических растворителей, смешивающихся с водой, включает разветвленные или неразветвленные С1-С3 спирты, С3-С6 кетоны и полярные апротонные органические растворители (например, метанол, этанол, пропанол, изопропанол, ацетон и ацетонитрил). Согласно одному воплощению настоящего изобретения органический растворитель, смешивающийся с водой, представляет собой метанол.

Специалист будет знать правильное количество органического растворителя, смешивающегося с водой, которое должно присутствовать в исходном сырье микафунгина, на основе идеи настоящего изобретения и его/ее обычных общих знаний. Более конкретно, специалист поймет, что можно использовать любое количество органического растворителя, смешивающегося с водой, которое облегчает связывание соли микафунгина, содержащейся в исходном веществе, и дальнейшую замену соли, очистку и элюирование желательной соли микафунгина.

Количество органического растворителя, смешивающегося с водой, присутствующего в исходном сырье, будет зависеть от типа используемого растворителя. Согласно одному воплощению настоящего изобретения количество органического растворителя, смешивающегося с водой, которое может присутствовать в исходном сырье микафунгина, используемом согласно настоящему изобретению, составляет от 0 до 30% об./об. Согласно другому воплощению настоящего изобретения количество органического растворителя, смешивающегося с водой, которое может присутствовать в исходном сырье микафунгина, используемом согласно настоящему изобретению, составляет от 5 до 15% об./об. Согласно еще одному другому воплощению настоящего изобретения количество органического растворителя, смешивающегося с водой, в исходном сырье микафунгина, используемом согласно настоящему изобретению, составляет примерно 10% об./об.

Твердая подложка согласно настоящему изобретению может быть любым веществом, обеспечивающим адсорбцию соли микафунгина, присутствующей в исходном сырье, с указанной подложкой, т.е. связывание указанной соли посредством гидрофобного взаимодействия таким образом, что связанная соль микафунгина может превращаться в другую соль, например, облегчая превращение микафунгина DIPEA до микафунгина натрия. Такое превращение одной соли соединения в другую соль указанного соединения обычно известно как «замена соли».

Кроме того, твердая подложка также должна обеспечивать связывание соли микафунгина, присутствующей в исходном сырье, таким образом, что, помимо указанной замены соли, до элюции желательной фармацевтически приемлемой соли микафунгина могут быть удалены примеси.

Еще одной другой характеристикой твердой подложки, помимо приведенной выше, является то, что она, наконец, должна облегчать обратимое связывание соли микафунгина по усмотрению специалиста, т.е. обеспечивая элюцию желательной соли, полученной после замены соли, и очистку микафунгина.

Более конкретно, твердая подложка согласно изобретению представляет собой подложку на основе гидрофобной адсорбирующей смолы, включающую модифицированный диоксид кремния, полистирольные или акриловые вещества, но не ограничивающуюся ими, и она включает, например, полиамидный адсорбент Polyamide С6 (Macherey Nagel), акриловый адсорбент XAD7HP® (Rohm & Haas) или HP2MG® (Diaion) и полистирольные дивинилбензольные адсорбенты XAD1600 (Rohm & Haas), HP20SS (Diaion), SP20SS (Diaion). Наиболее предпочтительной смолой является HP20SS.

Замену соли проводят путем воздействия на соль микафунгина исходного сырья, адсорбированную на твердой подложке, водного раствора желательной фармацевтически приемлемой соли, такого как, например, водный раствор натриевой или калиевой соли. Согласно одному воплощению изобретения на адсорбированную соль микафунгина, например, на DIPEA соль микафунгина, воздействуют водным раствором NaCl и/или Na-ацетатного буфера с pH 4-6. Водный раствор фармацевтически приемлемой соли также может включать органический растворитель, смешивающийся с водой. Органический растворитель, смешивающийся с водой, может быть таким же растворителем, который может присутствовать в исходном сырье микафунгина, как определено выше.

Согласно одному воплощению на адсорбированную соль микафунгина воздействуют водным раствором фармацевтически приемлемой соли и 10% об./об. метанола. Согласно другому воплощению на адсорбированную соль микафунгина воздействуют водным раствором фармацевтически приемлемой соли, содержащей 20% об./об. метанола. pH водного раствора фармацевтически приемлемой соли микафунгина, подлежащей получению на данной стадии, должен быть выбран так, чтобы избежать деградации указанной соли микафунгина. Предпочтительно pH указанного раствора является кислым. Например, pH водного раствора растворенной фармацевтически приемлемой соли может составлять примерно 4,5.

Дальнейшую очистку микафунгина можно проводить путем промывки твердой подложки раствором, содержащим органический растворитель, смешивающийся с водой, либо ступенчато, либо с использованием градиента. Например, промывочный раствор, содержащий 40% об./об. метанола, может удалять значительные количества примесей (таких как побочные продукты или продукты деградации) из смолы HP20SS. В общем, побочные продукты и продукты деградации с аналогичными свойствами связывания/элюции, что и желательная соль микафунгина, могут быть селективно удалены путем нанесения промывочного раствора, содержащего более высокий уровень органического растворителя, смешивающегося с водой. В данном контексте фраза «более высокий» означает то, что уровень органического растворителя, смешивающегося с водой, выше по сравнению с уровнем органического растворителя, смешивающегося с водой, присутствующего в исходном сырье микафунгина или в растворе, содержащем фармацевтически приемлемую соль микафунгина (т.е. стадия б) настоящего способа). Использование последовательно возрастающих уровней органического растворителя, смешивающегося с водой, на протяжении всех стадий а)-г) настоящего способа предполагает, что он является таким же типом органического растворителя, смешивающегося с водой, который используется на всех стадиях а)-г), всякий раз когда данные стадии включают присутствие указанного растворителя. Такие реагенты, как, например, побочные продукты и продукты деградации, присутствующие в исходном сырье согласно настоящему изобретению, таким образом, можно удалять с использованием более высоких концентраций такого же растворителя, который присутствует в исходном сырье микафунгина.

Образующуюся соль микафунгина, например, натриевую соль микафунгина, связанную с твердой подложкой, полученную посредством замены соли и возможной стадии промывки (очистки), можно элюировать путем нанесения водного раствора, содержащего органический растворитель, смешивающийся с водой, где уровень органического растворителя, смешивающегося с водой, в элюционном растворе выше, по сравнению с количеством органического растворителя, смешивающегося с водой, присутствующим на предыдущих стадиях настоящего способа. Органический растворитель, смешивающийся с водой, может быть такого же типа, что и присутствующий в исходном сырье микафунгина. Т.е. неограничивающий список подходящих органических растворителей, смешивающихся с водой, подлежащих применению при элюировании желательной соли микафунгина из твердой подложки согласно настоящему изобретению, включает разветвленные или неразветвленные С1-С3 спирты, С3-С6 кетоны и полярные апротонные органические растворители, такие как метанол, этанол, пропанол, изопропанол, ацетон и ацетонитрил. Согласно одному воплощению настоящего изобретения органический растворитель, смешивающийся с водой, представляет собой метанол.

Количество органического растворителя, смешивающегося с водой, присутствующее в элюционном растворе, является достаточным количеством для элюции микафунгина. Количество органического растворителя, смешивающегося с водой, присутствующее в элюционном растворе, будет зависеть от полярности растворителя и гидрофобности гидрофобной адсорбирующей смолы подложки. Например, фармацевтически приемлемую соль микафунгина можно элюировать из HP20SS водным раствором, содержащим больше чем 30% об./об. ацетонитрила. Фармацевтически приемлемую соль микафунгина можно элюировать из HP20SS водным раствором, содержащим больше, чем 70% об./об. метанола. Квалифицированный специалист сможет определить подходящее количество органического растворителя, смешивающегося с водой, в водном элюирующем растворе на основе его общих знаний разных гидрофобных адсорбирующих смол подложки, которые используются согласно настоящему изобретению, и посредством общепринятых экспериментов.

Согласно предпочтительному воплощению настоящего изобретения микафунгин натрия элюируют нанесением водного раствора, содержащего метанол, в концентрации 70-95% об./об.

Соль микафунгина, полученную согласно настоящему изобретению, можно использовать в изготовлении фармацевтической композиции, полезной для лечения и предупреждения инфекционных заболеваний у млекопитающих, включая человека и животных. Указанную фармацевтическую композицию можно получать с использованием стандартных методик, хорошо известных в данной области. Фармацевтическую композицию также можно подвергать традиционным фармацевтическим операциям, таким как стерилизация.

Например, фармацевтическую композицию можно получать в дозированной лекарственной форме, содержащей заданное количество очищенного микафунгина, одного или в комбинации с другим активным ингредиентом, и вместе с фармацевтически приемлемыми эксципиентами. Термин «фармацевтически приемлемый эксципиент» относится к одному или более чем одному веществу композиции, подходящему для осуществления или улучшения доставки микафунгина, содержащегося в фармацевтической композиции, пациентам, нуждающимся в этом. «Фармацевтически приемлемый эксципиент» также может характеризоваться присутствием адъювантов, таких как консерванты, стабилизаторы, увлажнители, эмульгаторы, буферы и тому подобное. Лактоза является примером подходящего стабилизатора для микафунгина, особенно в лиофилизированной форме. Специалист будет хорошо знать разные фармацевтические эксципиенты, доступные для получения фармацевтических композиций, содержащих противогрибковые соединения, подобные микафунгину. Композицию согласно настоящему изобретению можно приготовить так, чтобы обеспечить парентеральное введение, например, внутривенное введение.

Пациенту, нуждающемуся в композиции согласно настоящему изобретению, можно вводить подходящую дозировку микафунгина. Подходящая суточная доза для человека или млекопитающего может широко варьировать, в зависимости от состояния пациента и других факторов. Суточная доза может быть определена специалистом с использованием общепринятых способов определения дозы, подходящей для каждого пациента, например, на основе доз, обычно используемых для лечения и предупреждения инфекций при введении Mycamine®.

Специалист узнает из следующих примеров многие преимущества настоящего изобретения. Следует понимать, что приведенные ниже эксперименты и результаты служат лишь в качестве неограничивающих примеров.

ПРИМЕРЫ

В следующих примерах хроматографическую колонку (15 мл, внутренний диаметр 1,1 см) набивали гидрофобной смолой HP20SS (Diaion). Добавляли в колонку (0,5 мл/мин) 1,125 г исходного сырья микафунгина (100 мг микафунгина/мл). Колонку промывали раствором 3 M NaCl/0,1 M NaAc, pH 5,5 с добавлением или без добавления метанола (150 мл). Затем колонку промывали водным раствором, содержащим 40% метанола (90 мл). Микафунгин натрия элюировали из колонки 90%-ным метанолом.

Раствор 3 M NaCl/0,1 M NaAc, pH 5,5 готовили путем растворения 350,64 г NaCl в 1988,5 мл RO воды и добавления 11,44 мл уксусной кислоты. pH доводили до 5,5 NaOH (раств.).

Пример 1: органический растворитель в загрузке и промывке

На колонку HP20SS наносили водный раствор, содержащий неочищенную DIPEA соль микафунгина и 10% об./об. метанола.

Колонку сперва промывали водным раствором, содержащим 90% об./об. 3 M NaCl/0,1 M NaAc, pH 5,5 и 10% об./об. метанола.

Колонку затем промывали водным раствором, содержащим 40% об./об. метанола.

Микафунгин натрия элюировали раствором, содержащим 90% об./об. метанола и 10% об./об. воды.

Как видно на Фиг. 1, раствор микафунгина натрия, элюируемый в 18-20 CV, по существу не содержит DIPEA.

Пример 2: органический растворитель в загрузке

На колонку HP20SS наносили водный раствор, содержащий неочищенную DIPEA соль микафунгина и 10% об./об. метанола.

Колонку промывали водным раствором, содержащим 3 M NaCl/0,1 M NaAc, pH 5,5.

Микафунгин натрия элюировали раствором, содержащим 90% об./об. метанола и 10% об./об. воды.

Как видно на Фиг. 2, раствор микафунгина натрия, элюируемый в 18-20 CV, по существу не содержит DIPEA.

Пример 3: органический растворитель в загрузке и промывке

На колонку HP20SS наносили водный раствор, содержащий неочищенную DIPEA соль микафунгина и 10% об./об. метанола.

Колонку сперва промывали водным раствором, содержащим 90% об./об. 3 M NaCl/0,1 M NaAc, pH 5,5 и 10% об./об. метанола.

Колонку затем промывали водным раствором, содержащим 40% об./об. метанола.

Микафунгин натрия элюировали раствором, содержащим 90% об./об. метанола и 10% об./об. воды.

Как видно на Фиг. 3, раствор микафунгина натрия, элюируемый в 18-20 CV, по существу не содержит DIPEA.

Пример 4: органический растворитель в загрузке

На колонку HP20SS наносили водный раствор, содержащий неочищенную DIPEA соль микафунгина и 10% об./об. метанола.

Колонку сперва промывали водным раствором, содержащим 3 M NaCl/0,1 M NaAc, pH 5,5.

Колонку затем промывали водным раствором, содержащим 40% об./об. метанола.

Микафунгин натрия элюировали раствором, содержащим 90% об./об. метанола и 10% об./об. воды.

Как видно на Фиг. 4, раствор микафунгина натрия, элюируемый в 18-20 CV, по существу не содержит DIPEA.

Пример 5: нет органического растворителя в загрузке

На колонку HP20SS наносили водный раствор, содержащий неочищенную DIPEA соль микафунгина и 3 M хлорид натрия, 0,1 M ацетат натрия, pH 5,5.

Колонку сперва промывали водным раствором, содержащим 3 M NaCl/0,1 M NaAc, pH 5,5.

Колонку затем промывали водным раствором, содержащим 40% об./об. метанола.

Микафунгин натрия элюировали раствором, содержащим 90% об./об. метанола и 10% об./об. воды.

Как видно на Фиг. 5, раствор микафунгина натрия, элюируемый в 18-20 CV, по существу не содержит DIPEA.

Пример 6: нет органического растворителя в загрузке

На колонку HP20SS наносили водный раствор, содержащий неочищенную DIPEA соль микафунгина.

Колонку сперва промывали водным раствором, содержащим 3 M NaCl/0,1 M NaAc, pH,5.

Колонку затем промывали водным раствором, содержащим 40% об./об. метанола.

Микафунгин натрия элюировали раствором, содержащим 90% об./об. метанола и 10% об./об. воды.

Как видно на Фиг. 6, раствор микафунгина натрия, элюируемый в 18-20 CV, по существу не содержит DIPEA.

Пример 7: органический растворитель в загрузке и промывке

На колонку HP20SS наносили водный раствор, содержащий неочищенную DIPEA соль микафунгина и 10% об./об. метанола.

Колонку сперва промывали водным раствором, содержащим 80% об./об. 3 M NaCl, 1 M NaAc, pH 5,5 и 20% об./об. метанола.

Колонку затем промывали водным раствором, содержащим 70% 3 M хлорида натрия, 0,1 M ацетата натрия, pH 5,5 и 30% об./об. метанола.

Колонку затем промывали водным раствором, содержащим 40% об./об. метанола.

Микафунгин натрия элюировали раствором, содержащим 90% об./об. метанола и 10% об./об. воды.

Как видно на Фиг. 7, раствор микафунгина натрия, элюируемый в 18-20 CV, по существу не содержит DIPEA.

Пример 8: органический растворитель в загрузке и промывке

На колонку HP20SS наносили водный раствор, содержащий неочищенную DIPEA соль микафунгина и 10% об./об. метанола.

Колонку сперва промывали водным раствором, содержащим 60% об./об. 3 M NaCl/0,1 M NaAc, pH 5,5 и 40% об./об. метанола.

Колонку затем промывали водным раствором 40% об./об. метанола.

Микафунгин натрия элюировали раствором, содержащим 90% об./об. метанола и 10% об./об. воды.

Как видно на Фиг. 8, раствор микафунгина натрия, элюируемый в 18-20 CV, по существу не содержит DIPEA.

Пример 9: органический растворитель в загрузке и промывке

Хроматографическую колонку (72 мл, внутренний диаметр 2,6 см) набивали гидрофобной смолой HP20SS (Diaion). Добавляли в колонку (2,4 мл/мин) 5,4 г исходного сырья микафунгина (100 мг микафунгина/мл).

На колонку HP20SS (54 мл) наносили водный раствор, содержащий неочищенную DIPEA соль микафунгина и 10% об./об. метанола.

Колонку сперва промывали водным раствором, содержащим 80% об./об. 3 M NaCl/0,1 M NaAc, pH 5,5 и 20% об./об. метанола (576 мл).

Колонку затем промывали водным раствором 40% об./об. метанола (288 мл).

Микафунгин натрия элюировали раствором, содержащим 90% об./об. метанола и 10% об./об. воды.

Как видно на Фиг. 9, раствор микафунгина натрия, элюируемый в 15-17 GV, по существу не содержит DIPEA.

1. Способ получения фармацевтически приемлемой соли микафунгина, включающий следующие стадии:
а) нанесение исходного сырья микафунгина на подложку гидрофобной адсорбирующей смолы;
б) воздействие на связанный микафунгин водного раствора растворенной фармацевтически приемлемой соли;
в) элюирование растворенной фармацевтически приемлемой соли микафунгина раствором, содержащим органический растворитель, смешивающийся с водой;
при условии, что по меньшей мере один из
i) исходного сырья на стадии а)
ii) или водного раствора на стадии б)
содержит органический растворитель, смешивающийся с водой.

2. Способ по п. 1, дополнительно включающий стадию, на которой связанный микафунгин со стадии б), кроме того, один или более чем один раз подвергается воздействию водного раствора, содержащего органический растворитель, смешивающийся с водой, для удаления примесей.

3. Способ по п. 1, в котором исходное сырье на стадии а) содержит органический растворитель, смешивающийся с водой, в интервале 0-30% об./об.

4. Способ по п. 3, в котором исходное сырье на стадии а) содержит органический растворитель, смешивающийся с водой, в интервале 5-15% об./об.

5. Способ по п. 3, в котором исходное сырье на стадии а) содержит органический растворитель, смешивающийся с водой, в интервале 10% об./об.

6. Способ по п. 1, в котором водный раствор на стадии б) содержит органический растворитель, смешивающийся с водой, в интервале 0-40% об./об.

7. Способ по п. 6, в котором водный раствор на стадии б) содержит органический растворитель, смешивающийся с водой, в интервале 20% об./об.

8. Способ по п. 1, в котором органический растворитель, смешивающийся с водой, выбран из группы, состоящей из разветвленных или неразветвленных C1-C3 спиртов, C3-C6 кетонов и полярных апротонных органических растворителей.

9. Способ по п. 8, в котором органический растворитель, смешивающийся с водой, выбран из группы, состоящей из метанола, этанола, пропанола, изопропанола, ацетона и ацетонитрила.

10. Способ по п. 9, в котором водный раствор на стадии в) содержит по меньшей мере 30% об./об. ацетонитрила в качестве органического растворителя, смешивающегося с водой.

11. Способ по п. 9, в котором органический растворитель, смешивающийся с водой, представляет собой метанол.

12. Способ по п. 11, в котором водный раствор на стадии в) содержит по меньшей мере 70% об./об. метанола, как, например, по меньшей мере 90% об./об. метанола, как, например, по меньшей мере 95% об./об. метанола в качестве органического растворителя, смешивающегося с водой.

13. Способ по п. 1, в котором исходное сырье на стадии а), водный раствор на стадии б) и промывочный раствор на стадии в) содержат органический растворитель, смешивающийся с водой.

14. Способ по любому из пп. 1-12, в котором фармацевтически приемлемая соль микафунгина представляет собой натриевую соль, смола представляет собой HP20SS, исходное сырье микафунгина содержат макафунгин DIPEA и 10% об./об. метанола, раствор на стадии б) содержит 20% об./об. метанола и 80% об./об. 3 М NaCl, 0,1 М NaCH3COO, раствор на стадии в) содержит 40% об./об. метанола, и раствор на стадии г) содержит 90% об./об. метанола.

15. Способ получения фармацевтически приемлемой соли микафунгина, включающий следующие стадии:
а) нанесение исходного сырья микафунгина на подложку гидрофобной адсорбирующей смолы;
б) воздействие на связанный микафунгин водного раствора растворенной фармацевтически приемлемой соли;
в) возможно воздействие один или более чем один раз на связанную соль микафунгина, полученную в б), водного раствора, содержащего органический растворитель, смешивающийся с водой, для удаления примесей;
г) элюирование растворенной фармацевтически приемлемой соли микафунгина раствором, содержащим органический растворитель, смешивающийся с водой;
при условии, что, когда стадия в) не проводится, тогда исходное сырье микафунгина и/или водный раствор на стадии б) содержит органический растворитель, смешивающийся с водой.

16. Способ по любому из пп. 1 или 15, в котором исходное сырье микафунгина или водный раствор на стадии б) настоящего способа содержит 2-30% об./об. органического растворителя, смешивающегося с водой.

17. Способ по любому из пп. 1 или 15, в котором исходное сырье микафунгина и водный раствор на стадии б) настоящего способа содержат 2-30% об./об. органического растворителя, смешивающегося с водой.

18. Способ по п. 15, в котором водный раствор на стадии в) настоящего способа содержит 30-50% об./об. органического растворителя, смешивающегося с водой.

19. Способ по любому из пп. 1 или 15, в котором катион, присутствующий в исходном сырье микафунгина по настоящему изобретению, представляет собой DIPEA.

20. Способ по любому из пп. 1 или 15, в котором смола, используемая согласно настоящему способу, представляет собой HP20SS.

21. Способ по любому из пп. 1 или 15, в котором исходное сырье микафунгина и водный раствор на стадии б) настоящего способа содержит органический растворитель, смешивающийся с водой.

22. Способ по любому из пп. 1 или 15, в котором исходное сырье микафунгина и водный раствор на стадии б) настоящего способа содержат метанол.

23. Способ по любому из пп. 1 или 15, в котором органический растворитель, смешивающийся с водой, присутствующий в исходном сырье микафунгина и/или в водном растворе на стадии б), представляет собой метанол.

24. Способ по любому из пп. 1 или 15, в котором водный раствор на стадии б) содержит метанол.

25. Способ по п. 15, в котором фармацевтически приемлемая соль микафунгина представляет собой натриевую соль, смола представляет собой HP20SS, исходное сырье микафунгина содержит макафунгин DIPEA и 10% об./об. метанола, раствор на стадии б) содержит 20% об./об. метанола и 80% об./об. 3 М NaCl, 0,1 М NaCH3COO, раствор на стадии в) содержит 40% об./об. метанола, и раствор на стадии г) содержит 90% об./об. метанола.

26. Фармацевтическая композиция, содержащая фармацевтически приемлемую соль микафунгина, полученную согласно любому из пп. 1-25.

27. Фармацевтически приемлемая соль микафунгина, полученная согласно любому из пп. 1-25, для применения в профилактическом или терапевтическом лечении инфекционных заболеваний у млекопитающих.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к новым пептидомиметическим макроциклам и способам применения таких макроциклов для модуляции активности p53 и/или HDM2, HDMX. 4 н.

Изобретение относится к однореакторному способу приготовления Микафунгина. Способ включает в себя ацилирование пептидного ядра Микафунгина без изолирования активированной боковой цепи Микафунгина из ее реакционной смеси.

Изобретение относится к циклическому соединению, содержащему аминокислотную последовательность GQRETPEGAEAKPWY в дополнение к одной или двум дополнительным аминокислотам, и не имеющему C-концевую карбоксильную группу и/или N-концевую аминогруппу, где одна из аминокислот является неприродной аминокислотой и где замыкание цикла происходит между боковой цепью одной аминокислоты и C-концом другой аминокислоты или замыкание цикла происходит посредством неприродной аминокислоты; способу его получения и его применению для регуляции векторных ионных каналов, для лечения заболеваний, связанных с функцией легких, и для лечения отеков.

Изобретение относится к способу очистки циклического липопептида формулы I или его соли. Способ включает стадии: (1) экстракции ферментативного бульона, содержащего соединение формулы I или его соль, с получением экстракта 1 после фильтрации или центрифугирования; (2) разбавления или концентрирования экстракта 1 в вакууме со снижением содержания органического растворителя, с получением экстракта 2; (3) загрузки экстракта 2 в макропористую адсорбционную смолу; (4) промывки макропористой адсорбционной смолы водой или смесью воды и органического растворителя в качестве промывного раствора и (5) элюирования соединения формулы 1 из макропористой адсорбционной смолы смесью воды и органического растворителя в качестве элюента.

Изобретение относится к способу очистки циклических липопептидов или их солей. Предложенный способ включает стадии: (1) загрузки неочищенного соединения Формулы I в макропористую адсорбционную смолу; (2) промывки макропористой адсорбционной смолы водой, органическим растворителем или смешанным раствором органического растворителя и воды в качестве промывной жидкости; и (3) элюирование соединения Формулы I из макропористой адсорбционной смолы с помощью воды, органического растворителя или смешанного раствора органического растворителя и воды в качестве элюента, где на стадии (1) раствор, содержащий неочищенное соединение Формулы I, содержит способные к ионизации соли; и макропористая адсорбционная смола выбрана из неполярной ароматической адсорбционной смолы, полимеризованной из стирола и дивинилбензола, или метакриловой адсорбционной смолы средней полярности с остатками метакрилата в структуре.

Предложен способ очистки соединения формулы 1, включающий следующие этапы: (1) загрузку неочищенного соединения 1 в макропористую адсорбционную смолу, (2) промывку макропористой адсорбционной смолы при помощи водного раствора, органического растворителя или смешанного раствора органического растворителя и воды, (3) элюирование при помощи водного раствора, органического растворителя или смешанного раствора органического растворителя и воды.

Изобретение относится к способу очистки даптомицина, включающий стадии а) загрузки частично очищенного даптомицина в анионообменную хроматографическую колонку и последующие стадии очистки б) и в) в обращено-фазовых хроматографических колонках, где элюирующий буфер на стадии а) представляет собой раствор одновалентной соли и элюирующий буфер на стадии б) и в) представляет собой водный спирт.

Изобретение относится к новому полипептидному соединению, обладающему противогрибковой активностью. .

Изобретение относится к способу выделения триптофана из водных смесей веществ, прежде всего из уже частично подвергнутых переработке ферментационных бульонов, путем хроматографии с псевдодвижущимся слоем.

Изобретение относится к усовершенствованному способу солюбилизации и выделения карбоновых кислот с использованием солюбилизирующего соединения общей формулы (I) или (II), в которых значения для групп Х, L, R'', R, R' приведены в формуле изобретения, из водных или органических растворов, эмульсий, суспензий, образующихся при лекарственной терапии, в аналитических методах медицины, в аналитических методах пищевой промышленности, при промышленной переработке продуктов питания, при промышленной переработке масел, при анализах масел, при промышленной переработке топлива, при модификации химических или физико-химических взаимодействий, для солюбилизации плохо растворимых молекул, в аналитических методах фармацевтической или химической промышленности или науки, для удаления карбоновых кислот из сточных вод после частных, коммерческих или промышленных чисток, для удаления карбоновых кислот из биореакторных процессов, при органожелировании или наноэмульсификации карбоновых кислот, где указанное солюбилизирующее соединение содержит по меньшей мере одну амидиногруппу и/или по меньшей мере одну гуанидиногруппу и где солюбилизирующее соединение имеет коэффициент разделения смеси н-октанол-вода KOW < 6,30, при этом использование указанного солюбилизирующего соединения приводит к образованию микро- или наноэмульсий указанных карбоновых кислот и обеспечивает их выделение посредством комплексообразования, адсорбции, абсорбции, диффузии, осмоса, диализа, фильтрации, нанофильтрации, дистилляции, жидкость-жидкостной экстракции или сверхкритической жидкостной экстракции, за счет создания концентрационного градиента, термического градиента, электрического градиента, физико-химического градиента или их комбинаций.

Изобретение относится к способу адсорбционного разделения компонента из потока, предпочтительно ароматических углеводородов. Поток исходного материала и поток десорбента вводят в два разных порта через две разные линии передачи вдоль камеры адсорбционного разделения с множеством слоев.

Изобретение относится к способу адсорбционного отделения компонента, преимущественно ароматического углеводорода, из сырьевого потока. Согласно способу поток сырья, содержащий преимущественно адсорбируемый компонент и не преимущественно адсорбируемый компонент, и поток десорбента вводят в два разных порта через две разные соответствующие линии передачи по направлению к камере адсорбционного разделения.

Изобретение относится к вариантам способа регулирования расхода одного или нескольких циркулирующих потоков и сохранения энергии при его/их перекачке. В свою очередь один из вариантов предусматривает использование в способе отделения при постоянном давлении адсорбированного соединения из потока сырья, который содержит два или больше химических соединений, путем адсорбционного разделения в псевдодвижущемся слое, находящемся в одной или нескольких камерах с несколькими слоями адсорбента, которые имеют множество точек доступа, где каждый поток сырья и поток десорбента вводятся внутрь, а поток экстракта, который содержит указанное адсорбированное соединение, и поток рафината каждый индивидуально выводятся из одной или нескольких камер с адсорбентом в ходе цикла переработки через сдвигающиеся индивидуальные точки доступа.

Изобретение относится к области противоточного адсорбционного разделения компонентов. Способ разделения включает введение потока сырья и потока десорбента в две различные точки с помощью двух передаточных линий.

Группа изобретений относится к области биотехнологии. Предложены способы получения биологически активного ботулинического нейротоксина с использованием хроматографии, по существу без использования продуктов животного происхождения.

Изобретение относится к адсорбционному выделению компонентов из потока сырья. Адсорбцию осуществляют в системе с псевдодвижущимся слоем адсорбента.

Изобретение относится к области получения и выделения однодоменных молекул (SDAB). Описан способ выделения или очистки SDAB молекулы, которая представляет собой трехвалентную молекулу нанотела ATN-103, направленную на TNFα и HAS, из смеси, содержащей указанную SDAB молекулу и одно или более загрязняющих веществ.

Изобретение относится к способу получения сухого прополиса. Указанный способ включает измельчение сырья, экстракцию этиловым спиртом 96% при температуре +20-25°С с применением вакуум-ультразвукового устройства, фильтрацию, очистку от тяжелых металлов и других примесей с использованием угольного сорбента, и последующее выпаривание.

Изобретение относится к области фармацевтики. Описан способ получения микрокапсул лекарственных препаратов путем диспергирования капсулируемого вещества в растворе полимера и осаждения полимера на поверхности частиц дисперсии.
Наверх