Применение препарата "семакс" в качестве средства активации адаптивного иммунитета



Применение препарата семакс в качестве средства активации адаптивного иммунитета
Применение препарата семакс в качестве средства активации адаптивного иммунитета
Применение препарата семакс в качестве средства активации адаптивного иммунитета
Применение препарата семакс в качестве средства активации адаптивного иммунитета
Применение препарата семакс в качестве средства активации адаптивного иммунитета

 


Владельцы патента RU 2584234:

Закрытое акционерное общество "Инновационный научно-производственный центр "Пептоген" (RU)

Изобретение относится к медицине и касается применения пептида Семакс в качестве средства, активирующего адаптивный иммунитет для коррекции иммунного статуса и устранения дисбаланса провоспалительных и противовоспалительных факторов при заболеваниях центральной нервной системы, сопровождающихся нарушением иммунного ответа, включая инсульт. Изобретение обеспечивает воздействие на иммунную систему при ишемическом инсульте за счет активации приобретенного специфического иммунитета. 1 пр., 3 табл., 1 ил.

 

Изобретение относится к медицине и касается использования пептида Семакс в качестве препарата, активирующего адаптивный иммунитет для коррекции иммунного статуса и устранения дисбаланса провоспалительных и противовоспалительных факторов при заболеваниях центральной нервной системы, сопровождающихся нарушением иммунного ответа, включая инсульт.

Семакс - синтетический аналог АКТГ(4-7) - гептапептид (формула Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro), являющийся стимулятором памяти пролонгированного действия (патент СССР №939440, C07C 103/52, 1981 г. ), обладает нейропротекторным свойством и в настоящее время используется в качестве субстанции для приготовления ноотропного лекарственного средства (Патент РФ №2045958, A61K 37/02, 1994 г. ). В настоящее время пептидный препарат Семакс успешно используется для лечения инсульта.

Ишемический инсульт является одной из ведущих причин смертности и инвалидизации населения в мире. Это заболевание возникает как следствие критического снижения кровотока в тканях мозга, которое ведет к массовой гибели нейронов, а также формированию некротического ядра и области пенумбры. Как показали исследования, Семакс способствует выживанию нейронов в условиях гипоксии (Kaplan, Koshelev, Nezavibat′ko, & Ashmarin, 1992) и в условиях глутаматной нейротоксичности (Storozhevykh et al., 2007). Он обладает нейропротективными свойствами и способствует устойчивости митохондрий в условиях стресса, вызванного дисрегуляцией потока ионов кальция (Storozhevykh et al., 2007), обладает ноотропной активностью (De Wied, 1997), воздействует на экспрессию генов нейротрофических факторов и их рецепторов в условиях экспериментальной ишемии мозга крыс (Dmitrieva et al., 2010; Stavchansky et al., 2011). Иммунобиохимическое исследование содержания основных триггеров воспалительного ответа (интерлейкина 1-β, фактора некроза опухолей α, С-реактивного белка), а также противовоспалительных цитокинов (ИЛ-10 и трансформирующего ростового фактора β) в спинномозговой жидкости больных, перенесших инсульт и принимавших Семакс, позволило предположить об иммуномодуляторной активности препарата (Мясоедов и др., 1999). Семакс участвовал в сдвиге баланса пептидергических систем мозга в сторону преобладания противовоспалительных защитных факторов над факторами, поддерживающими воспалительную реакцию. Эти свойства препарата были использованы в офтальмологии (Курышева и др., 2001).

Авторами впервые обнаружена способность Семакса воздействовать на иммунную систему при ишемическом инсульте за счет активации приобретенного специфического (адаптивного) иммунитета.

Задачей создания предлагаемого решения является реализация его назначения. Для решения такой задачи предлагается применить гептапептид формулы Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro (Семакс) в качестве средства, активирующего адаптивный (приобретенный) иммунитет, в частности, при инсульте.

Изобретение поясняется схемой участия генов в регуляции синтеза иммуноглобулинов (Рис. 1).

Нижеследующее описание содержит пример, подтверждающий возможность реализации заявленного назначения.

Принципиально, возможность реализации такого назначения была выявлена по результатам исследования глобальных изменений транскриптома в мозге крыс в условиях экспериментальной ишемии, получавших препарат Семакс. В частности, был выявлен эффект воздействия пептидного препарата на экспрессию генов, обеспечивающих как гуморальное, так и клеточное звено адаптивного иммунитета: генов иммуноглобулинов; генов главного комплекса гистосовместимости; генов, влияющих на активность клеток иммунной системы, а также ряда других генов иммунной системы. Гены иммунной системы, статистически значимо изменившие уровень экспрессии под действием Семакса, представлены в таблице 1.

Пример 1. В исследованиях, проводимых на самцах белых крыс линии Вистар массой 200-250 г, изучали изменение транскриптома в мозге крыс в ответ на внутрибрюшинное введение Семакса в условиях экспериментальной церебральной ишемии. Была применена модель «фокальной ишемии мозга», заключающаяся в электрокоагуляционной окклюзии дистального участка левой средней мозговой артерии (СМА). Крыс содержали в условиях естественного освещения и свободного доступа к еде и воде. Операцию проводили под действием хлоралгидратного наркоза (300 мг/кг). Животные были поделены на группы: 1) «ишемия» и 2) «ишемия + Семакс». Все животные подвергались окклюзии левой средней мозговой артерии. В течение эксперимента животные группы «ишемия + Семакс» внутрибрюшинно получали Семакс (100 мкг/кг), тогда как животным группы «ишемия» вводили физраствор. Введение Семакса и физраствора осуществляли через 15 мин, 1, 4 и 8 ч после окклюзии СМА. Животных выводили из эксперимента под эфирным наркозом путем декапитации через 3 и 24 ч после операции. В каждой временной точке было не менее 5 животных соответствующей группы. У каждого животного выделяли лобно-теменную долю коры, где, согласно гистологическим исследованиям (предыдущие наши исследования), располагается очаг ишемии (Dmitrieva et al., 2008). Из тканей выделяли суммарную РНК и синтезировали комплементарную ДНК (кДНК) с использованием набора «RevertAid™ First Strand cDNA Synthesis Kit» (Fermentas, Lithuania) в соответствии с приложенным протоколом. Суммарную РНК выделяли из образцов тканей с использованием гуанидин-тиоцианата (Chomczynski & Sacchi, 1987). Целостность РНК оценивали сравнением полос рРНК, полученных методом электрофореза в агарозном геле при денатурирующих условиях. Количество РНК рассчитывалось с помощью Nanodrop, а качество оценено с использованием Agilent RNA 6000 наночипа. 400 нг суммарной РНК были амплифицированы с помощью набора Illumina® TotalPrep™ (Ambion, USA). Амплифицированная РНК была гибридизована с биочипами RatRef-12 (Illumina, USA) в соответствии с инструкциями производителя. Биочипы содержали олигонуклеотидные пробы, соответствующие 22226 последовательностям NCBI. Для считывания данных применяли Bead Array Reader. Анализировали материал программным обеспечением GenomeStudio (Illumina, USA), используя модуль генной экспрессии.

Для дальнейшего анализа были отобраны только те гены, уровень транскриптов которых изменился не менее чем в 1.5 раза, пороговый уровень значения p составил 0.05. В каждой из временных точек (3 и 24 ч) сравнивали данные по изменению экспрессии генов под влиянием пептида с экспрессией генов контрольной группы «ишемия». В ответ на введение Семакса через 3 ч после начала ишемии по сравнению с контролем изменили экспрессию 96 генов, через 24 ч - 68 генов. В число этих генов вошли гены иммунной системы. Спустя 3 и 24 ч после окклюзии изменилась экспрессия ряда генов главного комплекса гистосовместимости (МНС), спустя 24 ч - генов иммуноглобулинов и хемокинов (Табл. 1). Следует отметить, что через 24 ч после окклюзии СМА влияние Семакса на иммунный ответ существенно усилилось. Гены, участвующие в этом ответе, составили более 50% от всего количества генов, изменивших экспрессию. Для большинства генов иммунного ответа под влиянием препарата выявлено увеличение уровня транскриптов. Наиболее заметную группу из числа генов иммунного ответа составили гены иммуноглобулинов, при этом амплитуда изменения экспрессии половины из них является самой высокой среди всех генов, на уровень транскриптов которых повлияло введение пептида (табл. 1).

В ряде работ было показано, что иммуноглобулины, введенные внутривенно, (IVIG) обладают сильным нейропротективным действием против ишемического повреждения головного мозга (Arumugam, Selvaraj, Woodruff, & Mattson, 2008). Считается, что применение IVIG является одной из концепций лечения острого инсульта (Walberer et al., 2010). Через 24 ч после окклюзии СМА под действием Семакса в участке мозга животных, включающем очаг поражения, активно экспрессируются и другие важные участники адаптивного иммунного ответа - хемокины. Большое количество работ свидетельствует о том, что продуцировать хемокины способны как астроциты и микроглия, так и нейроны (De Haas, Van Weering, De Jong, Boddeke, & Biber, 2007). Широко известно, что некоторые хемокины и их рецепторы вовлечены в разнообразные нейродегенеративные заболевания (Bajetto, Bonavia, Barbero, & Schettini, 2002), включая ишемическое повреждение мозга (Minami & Satoh, 2003).

Недавние исследования показали, что хемокины представляют уникальный класс нейромедиаторов, обеспечивающих взаимодействия между нейронами и клетками, составляющими окружающую их микросреду (Rostène et al., 2011). В соответствии с этим, деление хемокинов на про- и противовоспалительные факторы является слишком упрощенным и порождает много противоречащих друг другу фактов о нейропротективньгх и нейродегенеративных функциях хемокинов (Jaerve & Müller, 2012). Увеличение экспрессии генов, кодирующих хемокины, является дополнительным свидетельством активации приобретенного иммунитета Семаксом в условиях фокальной церебральной ишемии головного мозга. Увеличение экспрессии генов семейства МНС спустя 3 и 24 ч после окклюзии СМА также свидетельствует об активации адаптивного иммунитета (табл. 1).

С использованием технологии полногеномных экспрессионных кДНК-микрочипов, нами также проведено исследование изменения экспрессии транскриптома мозга крыс спустя 24 ч относительно 3 ч в условиях ишемии под воздействием Семакса или при введении физиологического раствора. Число генов, статистически достоверно изменивших экспрессию в ответ на введение Семакса, спустя 24 ч после окклюзии по сравнению с 3 ч составило 857, при введении физиологического раствора - 769 генов. Анализ генов, изменивших экспрессию в ответ на периодическое введение Семакса ишемизированным животным, с помощью он-лайн программы (Ingenuity® Systems, http://www.ingenuity.com) позволил идентифицировать биологические процессы, ассоциированные с выявленными изменениями экспрессии генов. Наряду с жизненно важными процессами, связанными с функционированием мозга, выживанием нейронов, памятью и обучением, были выявлены процессы, связанные с функционированием иммунной системы. К числу таких процессов относятся иммунный ответ, развитие и привлечение лейкоцитов, развитие лимфоцитов, активация микроглии и др. На рис. 1 представлены гены, участвующие в регуляции синтеза иммуноглобулинов, изменившие экспрессию спустя 24 ч относительно 3 ч после окклюзии СМА крыс при введении физраствора, а также при введении Семакса. Наряду с 15 генами, изменившими экспрессию при ишемии (введение физраствора), были выявлены гены (указаны в пересекающихся областях), изменившие экспрессию как в условиях ишемии, так и под воздействием пептида при ишемии. Для большей части этих генов уровни транскрипции изменились схожим образом и были обусловлены, по-видимому, действием повреждения. Однако для нескольких генов воздействие пептида сопровождалось более высоким уровнем экспрессии ряда генов, чем действие ишемии (таблица 2). Кроме того, 11 генов изменили экспрессию под воздействием Семакса, но не отреагировали на ишемическое повреждение при введении физраствора. Согласно полученным данным, Семакс участвует в регуляции генов, обеспечивающих синтез иммуноглобулинов.

Анализ глобальных изменений транскриптома на биочипах с использованием крупномасштабных баз данных позволил нам выявить несколько сигнальных и метаболических путей, участвующих в активации иммунной системы в ответ на введение нейропептида Семакс в условиях экспериментальной ишемии мозга крыс. В табл. 3 представлены сигнальные и метаболические пути, участвующие в них гены, их количество, а также уровень значимости ассоциации p. Перечень сигнальных путей расположен в порядке увеличения значения p.

Среди сигнальных путей, участвующих в клеточном ответе, следует выделить Антигенпредставляющий Сигнальный Путь (Antigen Presentation Pathway, р=4.4Е-11), получивший наивысший бал в системе ранжирования BioRank (программа Ingenuity iReport, Ingenuity® Systems). Эта система опирается не только на количество представленных генов, значительность их перекрытия со схемами сигнальных путей в библиотеке данных Ingenuity iReport, но и учитывает, какую роль (ключевую роль или вспомогательную) играют анализируемые гены в функционировании сигнальных путей, ассоциированных с представленным набором генов. К данному сигнальному пути были отнесены 13 генов (см. таблицу 3 - сигнальные и метаболические пути, участвующие в активации иммунной системы в ответ на введение нейропептида Семакс в условиях экспериментальной ишемии мозга крыс).

Семакс увеличил экспрессию всех упомянутых генов к концу первых суток на фоне ишемического повреждения тканей головного мозга. Данный путь отображает молекулярные события, которые приводят к представлению внутриклеточных антигенов и внеклеточных антигенов (полученных за пределами клеточной мембраны), на поверхности CD4+ и CD8+ Т-клеток соответственно.

Таким образом, приведенные данные подтверждают наличие у пептида Семакс свойства активации приобретенного иммунитета.

Применение гептапептида формулы Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro (Семакс), в качестве средства, активирующего адаптивный иммунитет.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области ветеринарной паразитологии и предназначено для терапии фасциолеза бычков. Способ включает использование политрема ас и иммуномодулятора - риботана по схеме: политрем ас в дозе 0,2 г/кг массы тела животного перорально с концентрированным кормом однократно, риботан подкожно в область средней трети шеи в течение 5 дней подряд в дозе 5,0 мл на голову.

Настоящее изобретение относится к биохимии, в частности к применению антигенной композиции, включающей антигенный пептид, происходящий из амилоидного белка или амилоидоподобного белка для лечения заболевания, состояния или расстройства, которое вызвано или связано с указанным белком, в популяции пациентов, страдающих от недостаточности Т-клеток при индукции иммунного ответа.

Группа изобретений относится к медицине и касается применения производного Аллоферона-1 Phe(p-NH2)-Gly-Val-Ser-Gly-His-Gly-Gln-His-Gly-Val-His-Gly в качестве средства, обладающего высокой иммуномодулирующей и противовирусной активностью.
Изобретение относится к фармацевтической промышленности и представляет собой питательную композицию для стимулирования у человека по меньшей мере одного типа клетки врожденного иммунитета, содержащую источник жиров или липидов, источник белков и лактоферрин, присутствующий на уровне по меньшей мере 10 мг/100 ккал и произведенный отличным от человеческого организма источником, при этом лактоферрин характеризуется по меньшей мере 48% гомологией с аминокислотной последовательностью AVGEQELRKCNQWSGL в фрагменте (349-364) HLf, где введение питательной композиции стимулирует по меньшей мере один тип клетки врожденного иммунитета, выбранной из группы, состоящей из макрофагов, нейтрофилов, дендритных клеток и их комбинаций.

Группа изобретений относится к медицине и касается композиции для подкожного введения, содержащей ПЭГинтерферон альфа и вспомогательные вещества, в частности, динатрия эдетата дигидрат, натрия ацетата тригидрат, уксусную кислоту ледяную, осмотический агент.

Изобретение относится к новым соединениям формулы (I), которые обладают свойствами ингибитора HCV NS5B РНК-полимеразы. Соединения могут быть использованы для лечения или профилактики инфекции, вызванной вирусом гепатита С (HCV). В формуле (I) : X представляет собой СН или N, R1 выбран из группы, состоящей из R1a, R1c: где R1a возможно замещен C1-6алкилом, C1-6алкокси или гидрокси, и где R1c возможно замещен C1-6алкилом; R2 представляет собой (а) арил, выбранный из фенила, или (б) NRaRb, где указанный арил возможно замещен (CH2)nNRcRd; Ra и Rb вместе с атомом азота, к которому они присоединены, представляют собой 5-членный циклический амин, замещенный группой (CH2)nNRcRd, где n означает число от нуля до двух; Rc и Rd независимо представляют собой водород, O2SR4, где R4 представляет собой C16алкил; R3 представляет собой CR4aR4bR4c, где: 1) R4a, R4b и R4c независимо выбраны из С1-3алкила.

Группа изобретений относится к ветеринарии, а именно к способу иммунной активации для повышения вылупляемости оплодотворенного куриного яйца, зараженного Е. coli.

Изобретение относится к области медицины, а именно к педиатрии и неонатологии, и может быть использовано для лечения конъюгационных гипербилирубинемий у детей раннего возраста.

Группа изобретение относится к области ветеринарии и предназначена для повышения резистентности новорожденных телят и поросят. Заявленный способ получения препарата включает применение неспецифического иммуноглобулина, выделенного из сыворотки крови животных путем обработки полиэтиленгликолем с включением микроэлементов.

Настоящее изобретение относится к медицине, а именно к терапии и иммунологии, и касается лечения болезни Дего. Для этого вводят эффективное количество ингибитора комплемента в виде монотерапии или в составе общепринятой комплексной терапии.

Изобретение относится к медицине. Изобретение касается применения пептида, имеющего формулу Thr-Lys-Pro-Arg-Pro-Gly-Pro (селанк), для гепатопротекторного воздействия при остром иммобилизационном стрессе.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и представляет собой средство для лечения и профилактики нейродегенеративных заболеваний и сосудистой деменции, содержащее по меньшей мере одну соль лития, выбранную из пироглутамата лития, тирозината лития, аргинината лития, пирувата лития, лизината лития, малата лития, аланината лития, лактата лития, цистеината лития, триптофаната лития, аспартата лития, бензоата лития, адипата лития, глицината лития, глюконата лития, цитрата лития, никотината лития, оротата лития, салицилата лития и витамина D в форме холекальциферола или биологически активного нейротрофического пептида, выбранного из: глицин-глутамат-фенилаланин-серин-валин, тирозин-глицин-глицин-фенилаланин-лейцин, тирозин-глицин-глицин-фенилаланин-метионин, цистеин-цистеин-аргинин-глутамин-лизин, триптофан-триптофан-лейцин-аспарагин-серин-аланин-глицин-тирозин.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению антиапоптозных фрагментов белка DAXX, и может быть использовано в медицине для лечения острого инфаркта миокарда (AMI), церебрального инфаркта, при трансплантации органов, операциях на сердце, острых нарушениях кровообращения, реперфузионных повреждениях и ишемии.

Изобретение относится к медицине, в частности к гинекологии, и касается лечения бесплодия на фоне хронического эндометрита с гипоплазией эндометрия. Способ включает комплексную терапию, в составе которой проводят внутриматочное введение лекарственных растворов с воздействием на эндометрий низкочастотного ультразвука (НЧУЗ).

Изобретение относится к пептидам, включающим фикоцианобилин (PCB), и медицинскому применению указанных пептидов и PCB, благодаря идентифицированному у них нейропротекторному и/или нейрорегенеративному действию.

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и может быть использовано для медикаментозного лечения ВПЧ-ассоциированных цервикальных неоплазий I степени.

Группа изобретений относится к области биохимии. Предложен пептид длиной 5-9 аминокислот, состоящий из последовательности SEQ ID NO: 3, 5, 6, 8 или 10, необязательно амидированный на его карбокси-конце.

Изобретение относится к области медицины, а именно к дерматологии, и может быть использовано при лечении больных красным плоским лишаем. Описан способ лечения больных красным плоским лишаем, в котором в качестве лекарственных средств используют натрия тиосульфат 30%, 10 мл один раз в день, наружно: 0,1% мазь мометозона фуорат и дополнительно назначают имунофан внутримышечно по 1,0 мл с активным компонентом аргинил-альфа-аспартил-лизил-валил-тирозил-аргинин 50 мкг через день курсом 10 дней.
Изобретение относится к фармацевтической промышленности и представляет собой фармацевтическую композицию, обладающую нейропротекторной, противогипоксической, антиамнестической активностью и способностью повышать физическую работоспособность, включающую семакс и цитиколин натрия.

Настоящее изобретение относится к области иммунологии. Предложен выделенный пептид, представляющий собой фрагмент белка CDC45L и обладающий способностью индуцировать цитотоксические Т-лимфоциты в форме комплекса с молекулой HLA-A*2402 или HLA-A*0201.

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и может быть использовано для лечения цервикальных неоплазий II-III степени, ассоциированных с папилломавирусной инфекцией. Для этого на 1-м этапе лечения в случае выявления анаэробного дисбиоза вводят нео-пенотран по 1 суппозиторию 1 раз в день 7 дней или нео-пенотран форте L по 1 суппозиторию 1 раз в день 7 дней. При выявлении Atopobium vaginae вводят макмирор-комплекс по 1 свече 2 раза в день 7 дней. При аэробном дисбиозе вводят тержинан по 1 вагинальной таблетке 1 раз в день 7 дней. На 2-м этапе проводят коррекцию местного иммунитета путем воздействия на шейку матки кавитированным низкочастотным ультразвуком раствором гексапептида имунофана 5,0, разведенным в 50 мл физиологического раствора, 1 раз в день в течение 5 дней. На 3-м этапе восстанавливают pH среды путем введения фемилекса 2 раза в день в течение 6 дней. На 4-м этапе проводят деструкцию: при цервикальной интраэпителиальной неоплазии II степени - электроэксцизию, при цервикальной интраэпителиальной неоплазии III - электроконизацию. Способ обеспечивает профилактику рака шейки матки, снижение рецидивирования и осложнений при лечении предраковой патологии шейки матки высокой степени в результате проведения патогенетически обоснованной комплексной терапии. 2 табл.
Наверх