Способ прогнозирования наступления беременности в программе экстракорпорального оплодотворения и переноса эмбрионов


 


Владельцы патента RU 2587333:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Уральский научно-исследовательский институт охраны материнства и младенчества" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НИИ ОММ" Минздрава России) (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования наступления беременности в программе экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) и переноса эмбрионов (ПЭ). Для этого к крови определяют содержание мочевины, количество лейкоцитов, процент лимфоцитов. Подсчитывают диагностический индекс по формуле: D=0,67×X1+0,07×Х2-0,25×Х3-3,95, где значения X соответствуют параметрам: X1 - концентрация мочевины в сыворотке крови, ммоль/л; Х2 - относительное содержание лимфоцитов, ×109/л; Х3 - общее количество лейкоцитов в крови, ×109/л. При D более 0 прогнозируют наступление беременности в результате ЭКО и ПЭ. При D менее 0 прогнозируют неэффективную попытку ЭКО и ПЭ и отсутствие беременности. Использование данного способа позволяет выявить группу риска с неэффективной попыткой ЭКО и ПЭ еще на этапе подготовки к проведению данной процедуры. 3 пр.

 

Эффективность ЭКО в настоящее время не превышает 35%, и около трети всех беременностей прерывается на ранних сроках. До сих пор не определены наиболее информативные и диагностически ценные признаки, эффективные для раннего прогноза результативности лечения бесплодия с помощью ЭКО.

Предлагаемое изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии и клинической лабораторной диагностике, касается способа прогнозирования наступления беременности в результате ЭКО и ПЭ и может быть использовано в работе женских консультаций и отделений вспомогательных репродуктивных технологий.

Уровень техники

Аналогом данного изобретения выбран способ прогнозирования эффективности лечения бесплодия с помощью ЭКО, включающий трансвагинальную пункцию фолликулов под контролем УЗИ по программе ЭКО с последующим исследованием полученной фолликулярной жидкости [1].

Недостатками этого способа являются его сложность и необходимость специализированной лаборатории для проведения хемилюминесцентного анализа для определения свободнорадикальной активности образцов. Высок риск возникновения осложнений, связанных с выполнением трансвагинальной пункции фолликулов, которая проводится под общим наркозом и может осложниться кровотечением.

Метод осуществляется на этапе пункции фолликулов, когда невозможно скорректировать тактику ведения пациентки.

Представляет интерес исследование диагностической ценности параметров иммунитета, в том числе 17 цитокинов в фолликулярной жидкости, и показателей фертилизации ооцитов в раннем прогнозе эффективности лечения бесплодия с помощью ЭКО [2]. Высокая информативность выделенных диагностических комплексов в прогнозе вероятного исхода ЭКО свидетельствует о целесообразности использования методов иммунодиагностики при проведении вспомогательных репродуктивных технологий. К недостаткам способа можно, так же как и в первом способе, отнести высокую стоимость исследований, наличие специализированной лаборатории и проведение пункции фолликулов.

В качестве прототипа выбран способ прогнозирования наступления беременности в длинном протоколе ЭКО и ПЭ путем определения содержания рецепторов прогестерона в мононуклеарной фракции клеток периферической крови в середине лютеиновой фазы менструального цикла пациентки перед назначением лечения по стандартному длинному протоколу стимуляции суперовуляции [3]. При величине более 700 рецепторов прогестерона на клетку прогнозируют наступление беременности в результате проведения программы ЭКО и ПЭ в стандартном длинном протоколе стимуляции суперовуляции.

Недостатком метода является сложность исполнения анализа и его недоступность для большинства лабораторий практического здравоохранения, так как требуется специальное оборудование.

Сущность изобретения

Целью изобретения является прогнозирование конечных результатов применения экстракорпорального оплодотворения и переноса эмбрионов (ЭКО и ПЭ), т.е. наступление или отсутствие беременности у женщин репродуктивного возраста, на этапе подготовки к беременности.

Поставленная цель достигается с помощью вычисления прогностического индекса по результатам проведенного исследования крови.

Сущность изобретения заключается в следующем.

Перед программой ЭКО и ПЭ в стандартном длинном протоколе стимуляции суперовуляции у пациентки выполняют исследование крови.

Материалом для исследования служит венозная кровь, полученная из локтевой вены пациента стандартизированным способом вакуумной венепункции для биохимических и общеклинических лабораторных исследований с использований первичных тест-систем (типа Vacuteiner) в объеме, указанном производителем для данного исследования.

Для получения сыворотки используют стандартный протокол проведения процедуры центрифугирования (3000 об/мин в течение 15 мин). Сыворотку отделяют от эритроцитарной массы.

Биохимическое исследование сыворотки венозной крови для определения мочевины выполняют на любом биохимическом анализаторе. Объем анализируемой пробы зависит от производителя и указывается в методических рекомендациях. Процедуру измерения производят в соответствии с инструкцией к прибору.

Определение количества лейкоцитов и относительного процентного содержания лимфоцитов выполняют на любом гематологическом анализаторе. Объем исследуемой пробы также зависит от производителя и указывается в методических рекомендациях.

Исследования выполняют с соблюдением всех регламентирующих организационных и метрологических аспектов лабораторной медицины [4, 6].

Интерпретацию результатов производят на основании подсчета диагностического индекса.

Диагностический индекс получен путем математической обработки результатов исследований методом пошагового дискриминантного анализа с помощью пакета прикладных программ Statistika.7 [7]. Были выделены информативные признаки и сформировано правило лабораторного прогнозирования эффективности вспомогательных репродуктивных технологий, которое заключается в определении диагностического индекса (D) по следующей формуле:

где значения X соответствуют параметрам:

X1 - концентрация мочевины в сыворотке крови, ммоль/л

X2 - относительное содержание лимфоцитов, ×109

X3 - общее количество лейкоцитов в крови, ×109

K1, K2,K3 - коэффициенты дискриминантной функции:

K1=0,67

K2=0,07

K3=-0,25

Const=-3,95

При значении D>0 прогнозируют наступление беременности в программе ЭКО и ПЭ. При D<0 прогнозируют отсутствие беременности после проведения процедуры ЭКО и ПЭ. Предлагаемый способ дает вероятность правильной классификации 73% (специфичность метода) для нормы (наступление беременности), для патологии (отсутствие беременности) - 82% (чувствительность метода) при уровне значимости Р<0,01. Эффективность алгоритма 78%.

Пример 1. Пациентка К., 28 лет. Проходила обследование и лечение по поводу первичного бесплодия трубно-перитонеального генеза. Беременностей не было. В анамнезе - двусторонняя тубэктомия в 2000 г., 2006 г. Данной пациентке была предложена процедура ЭКО и ПЭ. Женщине проведено биохимическое и общеклиническое обследование крови, в результате которого были получены следующие данные: общее количество лейкоцитов - 4,4×109/л, лимфоцитов - 44%; содержание мочевины 4,71 ммоль/л. Диагностический индекс D=1,2 (больше 0) свидетельствует о благоприятном прогнозе ЭКО. В результате трансвагинальной пункции получено 3 ооцита. На 3-и сутки произведен перенос одного 6-8 клеточного бластомера. На 14-е сутки после переноса эмбриона сдана кровь на β-хорионический гонадотропин, диагностировано наступление беременности.

Пример 2. Пациентка Н., 33 года. Проходила обследование и лечение по поводу вторичного бесплодия трубно-перитонеального генеза. Диагноз: состояние после двухсторонней тубэктомии. Спаечная болезнь органов малого таза. Была предложена процедура ЭКО и ПЭ. После обследования получены следующие результаты: общее количество лейкоцитов - 9,1,0×10%, содержание лимфоцитов - 31%; содержание мочевины -1,70 ммоль/л. Диагностический индекс D=-2,9 (меньше 0 - неблагоприятный прогноз ЭКО). На 14-е сутки после переноса эмбриона кровь пациентки была исследована на β-хорионический гонадотропин, получен низкий уровень, что указывало на то, что попытка ЭКО закончилось неудачно и беременность не наступила.

Пример 3. Пациентка Е., 32 года. Проходила обследование по поводу первичного бесплодия трубно-перитонеального генеза. Пациентке была предложена процедура ЭКО и ПЭ. По результатам исследования крови получены следующие показатели: общее количество лейкоцитов - 6,0×109/л, лимфоцитов - 42,8%, содержание мочевины в сыворотке крови - 4,12 ммоль/л, диагностический индекс составил D=0,3. Значение показателя D>0 свидетельствует о благоприятном прогнозе процедуры ЭКО и ПЭ. В дальнейшем, после получения ооцитов и их переноса, у пациентки наступила беременность.

Таким образом, предлагаемый способ прогнозирования эффективности лечения бесплодия с помощью ЭКО и ПЭ, позволяет с достаточно высокой точностью выявить группу риска еще на этапе подготовки к проведению данной процедуры. Методика не требует дорогостоящей материально-технической базы, специальных реактивов, удобна в исполнении при использовании минимального количества исследуемого материала, обеспечивает получение необходимой информации в течение часа, воспроизводима на любом уровне (от женской консультации до перинатального центра).

Источники информации

1. Потехина Ю.П. (RU), Щербатюк Т.Г. (RU), Хрулева Н.B. (RU) Способ прогнозирования результатов лечения бесплодия методом экстракорпорального оплодотворения (патент РФ №2357673).

2. Останин А.А., Айзикович Б.И., Айзикович И.В., Черных Е.Р. Прогностическая модель оценки эффективности лечения бесплодия с помощью ЭКО // Проблемы репродукции. - 2006. - №4. - С. 63-69.

3. Карева Е.Н., Крамаренко М.П., Савельева Г.М., Шимановский Н.Л., Сукновалова М.В., Клименко П.А., Каппушева Л.М. Способ прогнозирования наступления беременности в программе экстракорпорального оплодотворения и переноса эмбрионов в стандартном длинном протоколе стимуляции суперовуляции (патент РФ №2430379):

4. Мошкин А.В., Долгов В.В. Обеспечение качества в клинической лабораторной диагностике - М. - 2004. - С. 14-23., 38-39.

5. ISO 151189: 2003. Медицинские лаборатории - специфические требования к качеству и компетентности (проект русского варианта). Стандартизация в клинической лабораторной медицине. Организационные и метрологические аспекты - М. - 2005. - С. 37-105.

6. Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение прикладных программ STATISTICA. - М.: МедиаСфера, 2002. - 312 с.

Способ прогнозирования наступления беременности в программе экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) и переноса эмбрионов (ПЭ) путем исследования крови, отличающийся тем, что определяют содержание мочевины, количество лейкоцитов, процент лимфоцитов и подсчитывают диагностический индекс по формуле:
D=0,67×X1+0,07×Х2-0,25×Х3-3,95,
где значения X соответствуют параметрам:
X1 - концентрация мочевины в сыворотке крови, ммоль/л;
Х2 - относительное содержание лимфоцитов, ×109/л;
Х3 - общее количество лейкоцитов в крови, ×109/л;
и при D более 0 прогнозируют наступление беременности в результате ЭКО и ПЭ, а при D менее 0 прогнозируют неэффективную попытку ЭКО и ПЭ и отсутствие беременности.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области медицины, в частности к акушерству, гинекологии и патологической анатомии, и предназначено для диагностики и прогнозирования развития хронического эндометрита (ХЭ).
Изобретение относится к медицине и представляет собой способ прогнозирования острого повреждения почек у больных острым коронарным синдромом, заключающийся в том, что с целью улучшения прогнозирования определяется содержание эритропоэтина в сыворотке крови иммуноферментным методом, и при уровне эритропоэтина более 15,7 МЕ/мл диагностируется высокий риск развития острого повреждения почек.

Изобретение относится к медицине, преимущественно к фтизиатрии, и может быть использовано при оценке активности туберкулезной инфекции у детей и подростков. Для этого в пробы цельной крови пациента вносят специфические антигены: ППД-Л, Rv2660c, ESAT-6, гибридного белка CFP10-ESAT-6.
Изобретение относится к медицине, а именно к способу оценки активности туберкулемы. Сущность способа состоит в том, что в цельной крови определяют процентное содержание CD19+ клеток от числа всех лейкоцитов методом проточной цитофлюориметрии.

Изобретение относится к области медицинской диагностики и может быть использовано для прогнозирования показателей гидродинамики у больных первичной открытоугольной глаукомой, являющихся уроженцами Центрального Черноземья России.

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики первичного и вторичного иммунного ответа на вирус краснухи.

Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования рецидива угрожающего выкидыша. Для этого проводят иммунологическое исследование периферической венозной крови в 7-12 недель гестации у женщин с угрозой невынашивания беременности.
Изобретение относится к области медицины и касается способа диагностики остеопороза при ревматоидном артрите. Сущность способа заключается в том, что в сыворотке крови больных определяют концентрацию белков и пептидов и дополнительно исследуют уровень адипонектина.

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для определения антител к аллогенным HLA-G в сыворотки крови. Для этого используют тест перекрестной совместимости (cross match) мононуклеаров донора с сывороткой реципиента.
Изобретение относится к медицине. Способ характеризуется тем, что в сыворотке крови пациента определяют концентрации пепсиногенов I и II, вычисляют отношение концентрации пепсиногена I к концентрации пепсиногена II.

Группа изобретений относиться к области медицины, а именно к иммунологии, и может быть использована для диагностики состояния иммунной системы пациента на основе оценки количества наивных Т и В клеток, экспрессирующих TREC и KREC. Для этого выделяют ДНК из анализируемого образца крови. Затем производят одновременную амплификацию участков молекул ДНК TREC, KREC и нормировочного локуса IL17RA, постоянно присутствующего в единичном экземпляре в каждом цикле амплификации, осуществляемой с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР), проводимой в общей емкости при одинаковых условиях для всех амплификациируемых молекул и с участием олигонуклеотидных флуоресцентно меченых зондов, несущих на 5′-конце флуорофоры и на 3′-конце нефлуоресцентный тушитель, комплементарных центральной части амплифицируемых фрагментов. Регистрируют полученные результаты посредством гибридизационно-флуоресцентной детекции и определяют в режиме реального времени абсолютное количество молекул TREC, KREC и нормировочного локуса IL17RA в анализируемом образце ДНК с помощью калибровочных кривых, построенных при амплификации стандартных образцов ДНК, взятых не менее чем в 4-х последовательно убывающих десятикратных разведениях известных концентраций. По результатам оценки их количества производят диагностику состояния иммунной системы пациента. Группа изобретений относится также к набору праймеров, зондов и стандартных образцов для оценки количества ДНК молекул TREC, KREC, IL17RA и количества геном эквивалентов ДНК. Использование данной группы изобретения позволяет определять количество TREC и KREC наивных Т и В клеток в образцах крови с применением набора заявленных праймеров. 2 н. и 3 з.п. ф-лы, 3 табл., 4 пр., 4 табл.

Данное изобретение относится к области иммунологии. Предложено выделенное моноклональное антитело к FcRH5 человека, охарактеризованное последовательностями гипервариабельных участков (HVR), и его антигенсвязывающий фрагмент. Кроме того, рассмотрен полинуклеотид, кодирующий антитело по изобретению, экспрессирующий вектор и клетка-хозяин для получения антитела по изобретению. Описаны иммуноконъюгаты, содержащие антитело по изобретению и предназначенные для ингибирования роста клеток, для определения присутствия FcRH5 человека в образце, для лечения пролиферативного расстройства, а также для ингибирования пролиферации клетки. Также предложена фармацевтическая композиция для ингибирования роста клеток, которые экспрессируют FcRH5 человека, содержащая эффективное количество иммуноконъюгата; применение иммуноконъюгата для получения лекарственных средств для ингибирования жизнеспособности клетки, которая экспрессирует FcRH5 человека, и для лечения пролиферативного расстройства, опосредованного FcRH5 человека; способ in vitro определения присутствия белка FcRH5 человека в биологическом образце и способ получения соединения конъюгата антитело-препарат. Данное изобретение может найти дальнейшее применение в терапии и диагностики заболеваний, связанных с FcRH5 человека. 13 н. и 46 з.п. ф-лы, 48 ил., 13 табл., 13 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к терапии и хирургии, и может быть использовано для прогнозирования генетической предрасположенности или повышенного риска развития инфекционного эндокардита (ИЭ) у пациентов из группы риска. Способ включает забор венозной крови, выделение генетического материала, проведение полимеразной цепной реакции, определение полиморфизма гена. Проводят генотипирование по полиморфному локусу I105V гена GSTP1 пациентов из группы риска и при выявлении гетерозиготного варианта I105V у его носителей прогнозируют высокий риск развития инфекционного эндокардита. В группу риска входят лица с врожденными или приобретенными пороками сердца, протезированными клапанами и другими операциями на сердце, коронарных артериях, с иммунодефицитными состояниями, наркоманы с угрозой развития тяжелой инфекции. Предложенный способ позволяет выявить индивидов, генетически предрасположенных к ИЭ, поможет определить тактику ведения пациентов и индивидуализировать комплекс профилактических и лечебных мероприятий. 1 з.п. ф-лы, 2 табл., 4 пр., 1ил.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и отоларингологии, и может быть использовано для прогнозирования внутриутробного инфицирования плода у женщин с гриппом В во втором триместре беременности при анемическом синдроме. Способ включает трехкратное определение титра антител к вирусу гриппа В в сыворотках крови на 2-4 сутки, 12-14 сутки и 22-24 сутки заболевания и отмечают динамику изменения уровня антител в третьей сыворотке по сравнению со второй сывороткой в баллах, оценивая динамику титра антител в баллах. Затем с помощью дискриминантного уравнения рассчитывают величину дискриминантной функции: D=-2,200×А-2,191×В-107,394×С, где D - дискриминантная функция с граничным значением, равным - 19,98. При этом при D, равной или больше граничного значения, прогнозируют отсутствие внутриутробного инфицирования плода у женщин с гриппом В во втором триместре беременности при анемическом синдроме, а при D меньше граничного значения прогнозируют внутриутробное инфицирование плода у женщин с гриппом В во втором триместре беременности при анемическом синдроме. Вероятность правильного прогноза составляет 87,5%. 2 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству, и может быть использовано для диагностики тяжелой преэклампсии у беременных. Способ включает иммунологическое исследование периферической венозной в 22-37 недель беременности. Определяют показатель относительного содержания CD62L+ клеток в популяции нейтрофилов и при его значении, равном или менее 57%, диагностируют тяжелую преэклампсию. Использование изобретения позволяет диагностировать преэклампсию вне зависимости от наличия у женщины хронической артериальной гипертензии. 1 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано в диагностике сенсибилизации организма к формальдегиду. Для этого определяют относительное содержание аутоантител к мембранным антигенам паренхимы легких LuM и к β2-гликопротеину. Рассчитывают диагностический показатель по формуле: где: y - диагностический коэффициент, -0,222 - константа, 0,004 и 0,026 - коэффициенты предикторов. В качестве предикторов используются ауто-АТ LuM - относительное содержание ауто-АТ к мембранным антигенам паренхимы легких LuM, ауто-АТ β2-ГП I - относительное содержание ауто-АТ к β2-гликопротеину I. При значении у меньше 0,5 делают заключение об отсутствии реакции организма на формальдегид и прогнозируют отсутствие сенсибилизации организма к формальдегиду. При значении у больше 0,5 реакцию на формальдегид считают положительной и прогнозируют сенсибилизацию организма к формальдегиду. Использование данного способа позволяет прогнозировать сенсибилизацию к формальдегиду на основании иммунологических показателей ауто-АТ LuM и ауто-АТ β2-ГП I. 2 табл., 4 пр.

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой пептид, который имеет аминокислотную последовательность, состоящую из смежных аминокислот, полученных из белка WT1, и индуцирует WT1-специфические хелперные Т-клетки связыванием с молекулой МНС класса II. Такая аминокислотная последовательность выбрана из группы, состоящей из аминокислотной последовательности, изображенной в SEQ ID NO: 3; аминокислотной последовательности, изображенной в SEQ ID NO: 4; аминокислотной последовательности, изображенной в SEQ ID NO: 5. Изобретение касается также экспрессирующего вектора, содержащего полинуклеотид, кодирующий пептид, антитела против пептида, фармацевтической композиции, содержащей пептид, способа лечения рака путем введения пептида субъекту. Изобретение позволяет получить эффективное средство для индукции WT1-специфических хелперных Т-клеток связыванием с молекулой МНС класса II и использовать его для лечения рака. 14 н. и 3 з.п. ф-лы, 18 ил., 9 табл., 5 пр.

Изобретение относится к биохимии. Описано моноклональное антитело, которое специфически связывается с липоарабиноманнаном кислотоустойчивых бацилл, в частности с липоарабиноманнаном туберкулезной бациллы. Описанное антитело является моноклональным антителом, содержащим вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи, соединенные через линкер. Вариабельная область тяжелой цепи содержит CDR1-CDR3, показанные в (а)-(с), и легкой цепи содержит CDR1-CDR3, показанные в (d)-(f): (а) CDR1 тяжёлой цепи, состоящая из аминокислотной последовательности SEQ ID No:1, (b) CDR2 тяжёлой цепи, состоящая из аминокислотной последовательности SEQ ID No:2, (c) CDR3 тяжёлой цепи, состоящая из аминокислотной последовательности SEQ ID No:3, (d) CDR1 лёгкой цепи, состоящая из аминокислотной последовательности SEQ ID No:4, (e) CDR2 лёгкой цепи, состоящая из аминокислотной последовательности SEQ ID No:5, и (f) CDR3 лёгкой цепи, состоящая из аминокислотной последовательности SEQ ID No:6. Также описаны реагент, набор и устройство, содержащие описанное антитело. Изобретение расширяет арсенал средств для обнаружения микобактерий. 11 н. и 7 з.п. ф-лы, 19 ил., 5 табл., 12 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к трансфузиологии, и может быть использовано для контроля эффективности облучения донорской крови. Способ включает постановку реакции бласттрансформации клеток крови с митогеном фитогемагглютинином и учет результатов реакции путем определения индекса стимуляции лимфоцитов. Постановку реакции проводят в отношении облученной донорской крови, учет результатов выполняют с помощью проточного цитофлюориметра с использованием моноклональных антител, меченных разными флюорохромами, проведением гейтирования активированных лимфоцитов со сниженной экспрессией общелейкоцитарного маркера CD45 и определением среди них процента дубль-негативных Т-лимфоцитов с иммунофенотипом CD3+CD4-CD8-, при этом в качестве контроля берут необлученный образец той же крови. После чего определяют эффективность облучения по соотношению содержания дубль-негативных Т-лимфоцитов с иммунофенотипом CD3+CD4-CD8- в проверяемой облученной и той же необлученной контрольной крови как Эоб=Сднтло-Сднтлк, где Эоб - эффективность облучения, Сднтло - процент содержания дубль-негативных Т-лимфоцитов с иммунофенотипом CD3+CD4-CD8- в опыте (в проверяемой облученной крови), Сднтлк - процент содержания дубль-негативных Т-лимфоцитов с иммунофенотипом CD3+CD4-CD8- в контроле (в необлученном образце той же крови). При разнице с контролем более чем в 50% делают вывод о функциональной неполноценности Т-лимфоцитов в облученной крови и иммунологической безопасности данного препарата крови для реципиента. Использование данного способа позволяет определять эффективность облучения донорской крови методом проточной цитометрии.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к модифицированному тамавидину, и может быть использовано для детекции связанной с биотином субстанции. Получают модифицированный биотин-связывающий белок на основе тамавидина с последовательностью SEQ ID NO: 2, который содержит до 7 мутаций и при этом остаток аспарагина в 115 положении заменен на цистеин. Изобретение позволяет повысить устойчивость биотин-связывающего белка к нагреванию и обработке диметилсульфоксидом. 7 н. и 2 з.п. ф-лы, 3 ил., 3 табл., 5 пр.
Наверх