Способ увеличения числа клубеньков на корне растения
Изобретение относится к использованию седаксана (SDX) для увеличения числа клубеньков на корнях растения по сравнению с числом клубеньков на корнях необработанного контрольного растения путем применения указанного SDX к растению, и/или его месторасположению, и/или материалу для размножения растения, и затем выращивания указанного растения или материала для размножения. В конкретном варианте осуществления указанное растение представляет собой сою, а указанный материал для размножения представляет собой семена. Изобретение позволяет реализовать указанное назначение. 2 н. и 13 з.п. ф-лы, 3 табл., 1 пр.
Настоящее изобретение относится к использованию седаксана для получения растения, имеющего увеличенное число клубеньков на своих корнях. В частности, изобретение относится к использованию седаксана для получения растения сои, имеющего большее число клубеньков.
Связывание атмосферного азота (N2) с образованием азотсодержащих органических соединений называют фиксацией азота. У растений симбиотическое связывание азота происходит в клубеньках, обычно бобовых, растений, посредством чего бактерии, называемые Rhizobia, которые в противном случае свободно живут в почве, заражают корни и колонизируют клетки коры. Бактерии утилизируют углеводы, поступающие с флоэмой растения, в обмен предоставляя растению азотсодержащие продукты посредством ксилемы. Rhizobia принадлежит к семействам Rhizobiales и Burkholderiales, наиболее значимые разновидности принадлежат к родам Rhizobium и Bradyrhizobium, но многие другие разновидности в некоторых других родах Rhizobiales или Burkholderiales были отмечены в своей способности фиксировать атмосферный азот.
Растения, которые могут эффективно применять процесс фиксации азота, желательны с точки зрения коммерческого земледелия, поскольку они могут снизить количество дополнительного удобрения, необходимого для получения приемлемого урожая.
С увеличением населения мира по-прежнему существует необходимость в создании еще более эффективных способов максимизации отдачи от все более ценных и дорогих мировых земель сельскохозяйственного назначения.
Неожиданно было обнаружено, что фунгицид седаксан может увеличить число клубеньков на корнях растений, таким образом приводя к повышению возможности колонизации азотофиксирующей бактерией такой, как Rhizobium или Bradyrhizobium, приводя к повышению доступности азота в самом растении.
В соответствии с настоящим изобретением предложено использование седаксана (SDX) для увеличения числа клубеньков на корнях растения путем применения указанного SDX к растению, и/или к его месторасположению, и/или материалу для размножения растения, и затем выращивания указанного растения или материала для размножения растения, где число клубеньков на корнях указанного растения выше, чем число клубеньков на корнях необработанного контрольного растения.
Седаксан представляет собой фунгицид на основе пиразолкарбоксамида: 3-дифторметил-1-метил-1H-пиразол-4-карбоновой кислоты (2-бициклопропил-2-ил-фенил)-амид, имеющий формулу:
Он и его транс- и цис-изомерные формы, а именно:
также описаны в различных опубликованных международных патентных заявках, включая: WO 03/074491, WO 2006/015865, WO 2007/090623, WO 2007/131678, WO 2008/000377, WO 2008/003403, WO 2009/098218, WO 2010/000790 и раскрытая информация об исследовании [(2006), 507 (July), P783-P791 (Number 507002) CODEN: RSDSBB; ISSN: 0374-4353].
Дополнительный предпочтительный вариант осуществления настоящего изобретения представлен использованием седаксана или способа, в котором используют седаксан для увеличения числа клубеньков на корнях растения, где седаксан присутствует в композиции, которая включает рацемическую смесь транс-изомеров и цис-изомеров седаксана в отношении транс/цис от 1:1 до 100:1, например 1:1, 2:1, 3:1, 4:1, 5:1, 6:1, 7:1, 8:1, 9:1, 10:1, 20:1, 50:1 или 100:1. Дальнейшее предпочтение отдано отношениям от 2:1 до 100:1, более предпочтительно от 4:1 до 10:1. В дополнительном варианте осуществления седаксан применяют к растению, и/или его месторасположению, и/или материалу для размножения растения в составе, в котором седаксан присутствует в количестве от 65-99% его транс-изомера.
Настоящее изобретение дополнительно предоставляет использование соединения согласно формулы (I):
где
R1 представляет собой трифторметил или дифторметил и
R2 представляет собой водород или метил; или таутомер такого соединения, для увеличения числа клубеньков на корнях растения путем применения указанного соединения к растению, и/или его месторасположению, и/или материалу для размножения растения, и затем выращивания указанного растения или материала для размножения, где число клубеньков на корнях указанного растения выше, чем число клубеньков на корнях необработанного контрольного растения.
Настоящее изобретение предоставляет способ получения растения с увеличенным числом клубеньков на корнях указанного растения, причем указанный способ включает применение седаксана к указанному растению, и/или к его месторасположению, и/или материалу для размножения растения, и затем выращивание указанного растения или материала для размножения растения, где число клубеньков на корнях указанного растения выше, чем число клубеньков на корнях необработанного контрольного растения.
При использовании любая композиция, содержащая седаксан, может также включать дополнительные активные ингредиенты, например, инсектицид, фунгицид, нематоцид, синергист, гербицид, регулятор роста растения или соединение, способствующее "здоровью растения". Примеры активных ингредиентов, которые могут быть добавлены к содержащей седаксан композиции, включают соединения, перечисленные в руководстве The Pesticide Manual (British Crop Production Council - ISBN №9781901396188), которое можно найти на сайте www.bcpc.org. Особенно предпочтительные смеси включают смеси, раскрытые в WO 2006/015865 и в WO 2007/090623.
В случае необходимости применение седаксана и дополнительного активного ингредиента (например, в виде "комбинации") можно проводить в форме одной «готовой смеси» такой, как готовый состав, включающий два компонента в установленном соотношении; или в комбинированной смеси для опрыскивания или смеси для применения, составленной из отдельных составов из взятых отдельно активных ингредиентов в качестве компонентов (например, «баковая смесь»); или путем комбинированного использования отдельных активных ингредиентов в общем плане или расписании опрыскивания последовательным образом, т.е. одно за другим в течение приемлемого короткого периода (например, с интервалом в несколько часов один от другого). В случае применения в отдельных опрыскиваниях или при обработках семян, следующих одна за другой, порядок применения активных ингредиентов не столь важен для достижения эффекта в соответствии с настоящим изобретением.
Настоящее изобретение также дополнительно предоставляет использование или способ, как описано выше, где указанное растение или материал для размножения растения представляет собой сою.
Настоящее изобретение также дополнительно предоставляет использование или способ, как описано выше, где указанный материал для размножения растения представляет собой семена.
Настоящее изобретение также дополнительно предоставляет использование или способ, как описано выше, где седаксан применяют к указанному растению, и/или к его месторасположению, и/или материалу для размножения растения в таком количестве, что число клубеньков на корнях растения по меньшей мере на 5% выше, чем число клубеньков на корнях необработанного контрольного растения.
Настоящее изобретение также дополнительно предоставляет использование или способ, как описано выше, где седаксан применяют к указанному растению, и/или к его месторасположению, и/или материалу для размножения растения в таком количестве, что число клубеньков на корнях растения по меньшей мере на 10% выше, чем число клубеньков на корнях необработанного контрольного растения.
Настоящее изобретение также дополнительно предоставляет использование или способ, как описано выше, где седаксан применяют к указанному растению, и/или к его месторасположению, и/или материалу для размножения растения в таком количестве, что число клубеньков на корнях растения по меньшей мере на 50% выше, чем число клубеньков на корнях необработанного контрольного растения.
Настоящее изобретение также дополнительно предоставляет использование или способ, как описано выше, где седаксан применяют к указанному растению, и/или к его месторасположению, и/или материалу для размножения растения в таком количестве, что число клубеньков на корнях растения по меньшей мере на 60% выше, чем число клубеньков на корнях необработанного контрольного растения.
Настоящее изобретение также дополнительно предоставляет использование или способ, как описано выше, где указанное растение растет в присутствии Rhizobium sp. и/или Bradyrhizobium sp.
Настоящее изобретение также дополнительно предоставляет использование или способ, как описано выше, где растение содержит более высокую процентную долю азота в своей листве по сравнению с необработанным контрольным растением.
Настоящее изобретение также дополнительно предоставляет использование, как описано выше, где указанное растение растет в присутствии Rhizoctonia sp.
Настоящее изобретение также дополнительно предоставляет использование, как описано выше, где указанное растение растет в отсутствие Rhizoctonia sp.
Rhizoctonia представляет собой род анаморфных грибов в отряде Cantharellales. Разновидности Rhizoctonia представляют собой патогены растений, вызывающие коммерчески важные заболевания растений, в частности заболевания корней.
"Растение" и "растения" в соответствии в данным изобретением охватывают такие растения, которые способны образовывать клубеньки на корнях, которые могут быть колонизированы штаммами Rhizobium sp. или Bradyrhizobium sp. Обычно такие растения включают бобовые растения семейства Fabaceae. Примеры бобовых растений включают бобы, чечевицу, горох, сою, клещевину обыкновенную, бобы какао или земляной орех. Примеры бобовых, широко используемых для потребления животными, включают: люцерну; спаржевую фасоль; спаржевый горох; мелкую лимскую фасоль; долихос обыкновенный; коровий горох; черную черепаховую фасоль; фасоль янки; белую фасоль нэви; кормовые бобы; бобы Cannellini; нут; фасоль чили; бобы какао; фасоль кранберри; карликовую фасоль; гиацинтовую фасоль; лобию египетскую; английскую фасоль; фасоль фава; полевой горох; французскую зеленую фасоль; великую северную фасоль; зеленую фасоль; зеленый и желтый горох; фасоль кидни; чечевицу; леспедецу; лакричник; лимскую фасоль; мадагаскарскую фасоль; мексиканскую черную фасоль; мексиканскую красную фасоль; фасоль "желтый глаз"; золотистую фасоль; золотистый горох; фасоль нэви; фасоль мелкосемянную; земляной орех; перуанскую фасоль; фасоль пинто; красную фасоль; красный клевер; фасоль "красный глаз"; красную фасоль кидни; фасоль рисовую; стручковую фасоль; красную стручковую фасоль; фасоль красную мелкую; фасоль белую мелкую; стручковый горошек; южный горох; сахарный горох; сою; восковую фасоль; белый клевер; белую фасоль кидни и белую мелкосеменную фасоль. Этот список не представляет никакого ограничения.
Термины "растение" и "растения" также включают растения, которым придали устойчивость к гербицидам, инсектицидам, фунгицидам или были модифицированы каким-либо другим способом, например, с целью повышения урожайности, засухоустойчивости или качества, используя традиционные способы селекции или путем способов генной инженерии. Любые генетически модифицированные растения, используемые согласно настоящему изобретению, могли быть изменены путем применения технологий рекомбинантных нуклеиновых кислот, хорошо известных специалисту в данной области техники. Например, "растение" и "растения" согласно настоящему изобретению включают такие растения сои, которые были выведены путем методов селекции таким образом, чтобы они были устойчивы к Азиатской соевой ржавчине. Такие разновидности растения сои обозначены термином сортов "Inox" и включают сорта, зарегистрированные в Бразилии в соответствии с Законом о защите сортов растений под наименованиями TMG 801 и TMG 803.
Выражение «месторасположение» полезных растений, применяемое в данном документе, предназначено, чтобы охватить место, на котором выращивают полезные растения, где высеян материал для размножения полезных растений или где будет помещен в почву материал для размножения полезных растений. Примером такого месторасположения является поле, на котором выращивают культурные растения.
Выражение «материал для размножения растений» следует понимать как означающее генеративные органы растения, такие как семена, которые можно применять для размножения последних, и вегетативный материал, такой как черенки или клубни. Этот термин включает семена (в строгом смысле), корни, плоды, клубни, луковицы, корневища или части растений. Также можно отметить проросшие растения и сеянцы, которые необходимо пересадить после прорастания или после появления из-под почвы. Эти сеянцы можно защитить до пересадки полной или частичной обработкой путем погружения. Предпочтительно «материал для размножения растения» следует понимать как означающий семена.
Термин "необработанное контрольное растение" означает растение, его месторасположение или материал для размножения растения, которое находится в практически одинаковых условиях с растением, месторасположение которого или материал для размножения растения согласно данному изобретению, за исключением необработанного контрольного растения (или его месторасположения или материала для размножения растения), не были обработаны седаксаном. Специалист в данной области техники знаком с проведением должным образом контролируемых экспериментов и таким образом может провести сравнительное исследование путем выращивания двух групп растений одной разновидности/сорта в одинаковых условиях, где только одну группу (представляющую собой растение, его месторасположение или материал для размножения растения) подвергают обработке седаксаном, тем самым давая возможность указанному специалисту установить влияние обработки растения седаксаном на образование клубеньков по сравнению с необработанным контрольным растением.
Термины "корень" и "корни" должны рассматриваться как означающие орган растения, который обычно лежит ниже поверхности ростовой среды, такой как почва. Так, в контексте определения числа клубеньков, их подсчитывают путем определения числа клубеньков на всей массе того, что обычно считается корнем растения.
Термин "седаксан" может заменяться термином "SDX".
В еще одном дополнительном аспекте настоящее изобретение также предоставляет использование или способ, как описано выше, для дополнительного улучшения здоровья растения.
Например, полезные свойства, которые можно дополнительно получить в комбинации с увеличенным числом клубеньков на корнях, как описано выше, включают: улучшенные характеристики культуры, включая: всхожесть, урожайность сельскохозяйственной культуры, содержание белков, улучшенную мощность растения, более быстрое/замедленное созревание, увеличенную скорость прорастания семян, улучшенную эффективность усвоения питательных веществ, улучшенную эффективность усвоения азота, улучшенную эффективность использования воды, улучшенное содержание и/или качество масел, улучшенное переваривание, более быстрое/равномерное созревание, улучшенный вкус, улучшенное содержание крахмала, более развитую корневую систему (улучшенный корневой рост), улучшенную переносимость стресса (например, направленную против засухи, жары, соли, света, УФ, воды, холода), снижение этилена (сниженное образование и/или ингибирование восприятия), увеличенное побегообразование, увеличенную высоту растений, более крупную пластинку листа, меньшее увядание основных листьев, более сильные побеги, более зеленый цвет листьев, содержание пигмента, активность фотосинтеза, меньшее необходимое количество внесения (например, удобрений или воды), меньшее необходимое количество семян, более урожайные побеги, более раннее цветение, раннее дозревание зерен, меньшее полегание растений (полегание), увеличенный рост проростков, повышенную мощность растения, повышенную устойчивость растения к полеганию и раннее прорастание.
Полученные полезные свойства, особенно от обработанных семян, включают, например, улучшенное прорастание и укоренение в поле, лучшую мощность растения и более равномерную приживаемость в поле.
Полученные полезные свойства, особенно при внесении на листья и/или в борозду, включают, например, улучшенные рост растения и развитие растения, лучший рост, больше побегов, более зеленые листья, листья большего размера, большую биомассу, лучшие корни, улучшенную переносимость растением стресса, больший урожай зерен, большую собранную биомассу, улучшенное качество урожая (содержание жирных кислот, метаболитов, масел и т.д.), более легко продаваемые продукты (например, улучшенный размер), улучшенный процесс (например, более длительный срок годности, более легкое извлечение веществ), улучшенное качество семян (для посева в следующем сезоне для производства семян); или любые другие преимущества, знакомые специалисту в данной области техники.
В определенном варианте осуществления изобретения, как описано выше, предоставлено растение, имеющее большее число клубеньков на его корнях по сравнению с корнями контрольного растения, причем это растение также демонстрирует улучшенное здоровье растения в дополнение к более высокому числу клубеньков на его корнях.
При применении к растению в соответствии с использованием/способом по данному изобретению седаксан (активный ингредиент - а.и.) обычно вносят при нормах внесения от 5 до 200 г а.и./га, в частности от 10 до 1000 г а.и./га, например 50, 75, 100 или 200 г а.и./га, обычно в сочетании с от 0,5 до 1000 г/га, предпочтительно от 1 до 750 г/га, более предпочтительно от 2,5 до 500 г/га, более предпочтительно от 5 до 300 г/га, более предпочтительно от 7,5 до 200 г/га активного ингредиента.
В сельскохозяйственной практике нормы внесения композиций согласно использованию/способу по настоящему изобретению зависят от типа требуемого эффекта и, как правило, варьируются в диапазоне от 20 до 4000 г всей комбинации на гектар.
При использовании седаксана для обработки семян нормы внесения от 0,001 до 50 г седаксана на кг семян, предпочтительно от 0,01 до 10 г на кг семян, обычно являются достаточными.
Композицию, содержащую седаксан и любые смеси с другими соединениями/активными ингредиентами, как описано выше, можно использовать в любой обычной форме, например в виде сдвоенной упаковки, порошка для сухой обработки семян (DS), эмульсии для обработки семян (ES), текучего концентрата для обработки семян (FS), раствора для обработки семян (LS), диспергируемого в воде порошка для обработки семян (WS), суспензии капсул для обработки семян (CF), геля для обработки семян (GF), концентрата эмульсии (ЕС), концентрата суспензии (SC), суспоэмульсии (SE), капсульной суспензии (CS), диспергируемых в воде гранул (WG), эмульгируемых гранул (EG), эмульсии типа вода в масле (ЕО), эмульсии типа масло в воде (EW), микроэмульсии (ME), масляной дисперсии (OD), смешивающегося с маслом текучего концентрата (OF), смешивающейся с маслом жидкости (OL), растворимого концентрата (SL), суспензии для ультрамалообъемного внесения (SU), жидкости для ультрамалообъемного внесения (UL), технического концентрата (ТК), диспергируемого концентрата (DC), смачиваемого порошка (WP) или любого технически возможного состава в комбинации с приемлемыми в сельском хозяйстве вспомогательными веществами.
Такие смеси и композиции можно получить хорошо известным специалисту в данной области способом, например путем смешивания активных ингредиентов с по меньшей мере одним подходящим инертным вспомогательным веществом для составов, например разбавителями, растворителями, наполнителями и необязательно другими ингредиентами составов, такими как поверхностно-активные вещества, биоциды, антифризы, клейкие вещества, загустители и соединения, которые придают дополнительные эффекты. Специалисту в данной области следует аккуратно выбирать неактивные ингредиенты, особенно биоциды, таким образом, чтобы они не ингибировали или другим образом наносили вред азотофиксирующим бактериям. Если необходимо длительное действие, то можно применять также обычные составы медленного высвобождения. В частности, составы, которые вносят в распыленных состояниях, такие как диспергируемые в воде концентраты (например, ЕС, SC, DC, OD, SE, EW, ЕО и т.п.), смачиваемые порошки и гранулы, могут содержать поверхностно-активные вещества, такие как смачивающие и диспергирующие средства и другие соединения, которые придают дополнительные эффекты, например продукт конденсации формальдегида с нафталинсульфонатом, алкиларилсульфонат, лигнинсульфонат, жирный алкилсульфат и этоксилированный алкилфенол, и этоксилированный жирный спирт.
Составляющие ингредиенты, хорошо известные специалисту в данной области техники, могут, например, включать такие составляющие ингредиенты, которые не обладают какой-либо значимой биологической активностью, или вовсе не обладают биологической активностью. Они включают, например, разбавители, растворители, наполнители, поверхностно-активные вещества, биоциды, антифризы, вещества, способствующие прилипанию, загустители и вещества, обеспечивающие вспомогательное действие.
Состав для протравливания семян применяют способом, известным специалисту в данной области, например в виде водной суспензии или сухого порошка, обладающих хорошим прилипанием к семенам. В настоящем уровне техники известны такие составы для протравливания семян. Составы для протравливания семян могут содержать отдельные активные ингредиенты или комбинацию активных ингредиентов в инкапсулированном виде, например, как капсулы или микрокапсулы медленного высвобождения. Типичный состав баковой смеси для обработки семян содержит от 0,25 до 80%, особенно от 1 до 75%, требуемых ингредиентов, и от 99,75 до 20%, особенно от 99 до 25%, твердых или жидких вспомогательных веществ (включая, например, растворитель, такой как вода), где вспомогательные вещества могут быть поверхностно-активными веществами в количестве от 0 до 40%, особенно от 0,5 до 30%, в расчете на состав баковой смеси. Типичный состав готовой смеси для обработки семян содержит от 0,5 до 99,9%, особенно от 1 до 95%, требуемых ингредиентов, и от 99,5 до 0,1%, особенно от 99 до 5%, твердого или жидкого вспомогательного вещества (включая, например, растворитель, такой как вода), где вспомогательные вещества могут быть поверхностно-активными веществами в количестве от 0 до 50%, особенно от 0,5 до 40%, в расчете на состав готовой смеси.
Как правило, составы включают от 0,01 до 90% по весу активного средства, от 0 до 20% сельскохозяйственно-приемлемого поверхностно-активного вещества и от 10 до 99,99% твердых или жидких инертных веществ и вспомогательного вещества(веществ), причем активное средство содержит по меньшей мере седаксан и необязательно другие активные средства, включая упомянутые выше и/или микробиоциды или консерванты, или подобное. Концентрированные формы композиций, как правило, содержат примерно от 2 до 80%, предпочтительно примерно от 5 до 70% (вес.) активного средства. Формы состава для нанесения могут, например, содержать от 0,01 до 20% (вес.), предпочтительно от 0,01 до 5% (вес.) активного средства. Поскольку коммерческие продукты преимущественно составляют в виде концентратов, потребитель обычно применяет разбавленные составы.
Последующий пример служит для иллюстрирования изобретения. Данное изобретение не ограничивается этим Примером.
Пример
Следующий эксперимент проводили в лаборатории и в теплице. Штамм Rhizoctonia, используемый в данном эксперименте, был получен из города Дурадос штата Мато-Гроссо-до-Сул. Использованный штамм представлял собой Solo 44.
После получения штаммов их очищали и выращивали в питательной среде на основе картофельно-декстрозного агара (PDA). В заключение их выращивали в камере с контролируемой температурой (22+/-1°C) и контролируемым световым днем (12 ч на свету/12 ч в темноте) в течение 7 дней.
Исследуемые обработки в эксперименте проводили в соответствии с Таблицей 1.
| Таблица 1 | |||
| Номер п/п | Инокуляция | Химическая обработка | Норма внесения химиката (мл продукта/100 кг семян) |
| 1 | - | - | - |
| 2 | - | седаксан | 200 |
| 3 | Rhizobia - нет Rhizoctonia - да | - | - |
| 4 | Rhizobia - нет Rhizoctonia - да | седаксан | 200 |
| 5 | Rhizobia - да Rhizoctonia - да | - | - |
| 6 | Rhizobia - да Rhizoctonia - да | седаксан | 200 |
| 7 | Rhizobia - да Rhizoctonia - нет | - | - |
| 8 | Rhizobia - да Rhizoctonia - нет | седаксан | 200 |
Использованный состав представлял собой FS (текучий концентрат для обработки семян), содержавший 500 г/л седаксана.
Оцениваемые параметры:
- Свежая масса находящейся на воздухе части растения (г/растение);
- Свежая масса корней (г/растение);
- Число клубеньков;
- Сухая масса клубеньков;
- Общее содержание азота в листьях.
Оценка инфективности Bradyrhizobium:
Растение сои сорта "Roos" выращивали в теплице после того, как их семена были обработаны фунгицидом седаксан согласно перечню обработок. Немедленно после обработки химикатом (следуя указаниям Министерства сельского хозяйства) семена инокулировали коммерческой культурой Cell Tech®, содержащей культуру SEMIA 5079 и SEMIA 5080 штамма Bradyrhizobium japonicum, также согласно перечню обработок.
Растения выращивали в модифицированных горшках Leonard (Vincent, 1970 J.M. Vincent, A manual for the practical study of root-nodule bacteria, IBP Handb. No. 15, Blackwell, Oxford (1970), p.164.), наполненных средой для высаживания, состоящей из смеси вермикулита, промытого песка и прокаленного древесного угля в соотношении 3:1:1 соответственно. Горшки слегка поливали водой, накрывали грубой оберточной бумагой и стерилизовали при 121°C и давлении 1 атм в течение 1,5 часов.
После охлаждения горшков в них, поверх некоторого количества среды для выращивания, выкладывали кружки из питательной среды PDA диаметром 2,5 см, зараженные штаммом Rhizoctonia, согласно перечню обработок. Затем горшки полностью заполняли средой для выращивания (приблизительно еще на 3 см), затем высевали семена таким образом, чтобы они не находились в непосредственном контакте со штаммом Rhizoctonia.
Горшки регулярно поливали питательным раствором McKnight без азота, чередуя его с дистиллированной водой.
После прорастания подсчитывали взошедшие и мертвые ростки. Затем удаляли избыточные ростки, оставляя один росток в каждом горшке. За ростками проводили наблюдения каждый день, определяя их развитие и симптомы каких-либо болезней.
Эффективность азотофиксации у Bradyrhizobium
Во время цветения растения сои собирали, находящуюся на воздухе часть отделяли от корней и сушили в нагревательном шкафу при 65°C до постоянного веса. Определяли сухую массу этой фракции.
Затем сухую массу сжигали и определяли общее количество азота с помощью метода минерализации и титрования (микроанализ методом Кьельдаля). Jackson, 1964 M.L. Jackson, Soil Chemical Analysis, Prentice Hall Inc. Englewood Cliffs, New York (1964) pp.86-92.
Корни промывали водой для удаления почвы, затем отделяли клубеньки. Корни сушили при 65°C до постоянного веса. Определяли сухую массу этой фракции. Клубеньки подсчитывали и затем сушили в нагревательном шкафу при 65°C до постоянного веса. Определяли сухую массу этой фракции.
Статистический анализ
Испытания проводили по типу рандомизированных блоков (8 обработок и 5 повторений). Анализировали расхождения данных. В тесте F достоверность различий составляла 5%, и средние значения для обработок сравнивали с тестом Тьюки при 5%.
Результаты приведены в таблицах 2 и 3.
| Таблица 2 | ||
| Влияние обработок на число и сухую массу клубеньков | ||
| Номер п/п | Число клубеньков | Сухая масса клубеньков (мг/г) |
| 1 | 21,8 b | 0,124 b |
| 2 | 24,6 b | 0,13 b |
| 3 | 15,4 b | 0,1 b |
| 4 | 18,2 b | 0,098 b |
| 5 | 75,5 a | 0,434 a |
| 6 | 80 a | 0,408 a |
| 7 | 72 a | 0,386 a |
| 8 | 113 a | 0,524 a |
Средние значения с одинаковыми буквенными обозначениями после них не отличаются от теста Тьюки (5% достоверность).
| Таблица 3 | |||
| Влияние обработок на содержание азота, сухую массу находящихся на воздухе части и корней | |||
| Номер п/п | Азот (%) | Сухая масса находящейся на воздухе части (г/растение) | Сухая масса корней (г/растение) |
| 1 | 1,984 b | 1,598 b | 0,906 b |
| 2 | 2,866 b | 1,640 b | 1,022b |
| 3 | 2,576 b | 1,236 b | 0,806 b |
| 4 | 2,562 b | 1,226 b | 0,862 b |
| 5 | 3,376 ab | 3,550 a | 1,868 a |
| 6 | 4,020 a | 4,158 a | 1,800 a |
| 7 | 3,266 ab | 3,304 a | 1,546 ab |
| 8 | 3,980 a | 4,406 a | 1,818 a |
Средние значения с одинаковыми буквенными обозначениями после них не отличаются от теста Тьюки (5% достоверность).
1. Использование седаксана (SDX) для увеличения числа клубеньков на корнях растения путем применения указанного SDX к растению, и/или его месторасположению, и/или материалу для размножения растения, и затем выращивания указанного растения или материала для размножения, где число клубеньков на корнях указанного растения выше, чем число клубеньков на корнях необработанного контрольного растения.
2. Использование согласно п.1, где указанное растение или материал для размножения представляют собой сою.
3. Использование согласно п.1 или 2, где указанный материал для размножения представляет собой семена.
4. Использование согласно п.1 или 2, где указанный SDX применяют к указанному растению, и/или к его месторасположению, и/или материалу для размножения растения в таком количестве, что число клубеньков на корнях растения по меньшей мере на 5% выше, чем число клубеньков на корнях необработанного контрольного растения.
5. Использование согласно п.4, где указанный SDX применяют к указанному растению, и/или к его месторасположению, и/или материалу для размножения растения в таком количестве, что число клубеньков на корнях растения по меньшей мере на 10% выше, чем число клубеньков на корнях необработанного контрольного растения.
6. Использование согласно п.4, где указанный SDX применяют к указанному растению, и/или к его месторасположению, и/или материалу для размножения растения в таком количестве, что число клубеньков на корнях растения по меньшей мере на 50% выше, чем число клубеньков на корнях необработанного контрольного растения.
7. Использование согласно п.4, где указанный SDX применяют к указанному растению, и/или к его месторасположению, и/или материалу для размножения растения в таком количестве, что число клубеньков на корнях растения по меньшей мере на 60% выше, чем число клубеньков на корнях необработанного контрольного растения.
8. Использование согласно п.1 или 2, где указанное растение растет в присутствии Rhizobium sp. и/или Bradyrhizobium sp.
9. Использование согласно п.8, где растение содержит более высокую процентную долю азота в своей листве по сравнению с необработанным контрольным растением.
10. Использование согласно п.1 или 2, где указанное растение растет в присутствии Rhizoctonia sp.
11. Использование согласно п.1 или 2, где указанное растение растет в отсутствие Rhizoctonia sp.
12. Способ получения растения с увеличенным числом клубеньков на корнях указанного растения, причем указанный способ включает применение седаксана к указанному растению, и/или к его месторасположению, и/или материалу для размножения растения, и затем выращивание указанного растения или материала для размножения растения, где число клубеньков на корнях указанного растения выше, чем число клубеньков на корнях необработанного контрольного растения.
13. Способ согласно п.12, где указанное растение или материал для размножения представляют собой сою.
14. Способ согласно п.12 или 13, где указанный материал для размножения представляет собой семена.
15. Способ согласно п.12 или 13, где указанный SDX применяют к указанному растению, и/или к его месторасположению, и/или материалу для размножения растения в таком количестве, что число клубеньков на корнях растения по меньшей мере на 5% выше, чем число клубеньков на корнях необработанного контрольного растения.
