Способ прогнозирования внутриутробного инфицирования плода у женщин с гриппом в во втором триместре беременности при анемическом синдроме


 


Владельцы патента RU 2587777:

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Амурская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и отоларингологии, и может быть использовано для прогнозирования внутриутробного инфицирования плода у женщин с гриппом В во втором триместре беременности при анемическом синдроме. Способ включает трехкратное определение титра антител к вирусу гриппа В в сыворотках крови на 2-4 сутки, 12-14 сутки и 22-24 сутки заболевания и отмечают динамику изменения уровня антител в третьей сыворотке по сравнению со второй сывороткой в баллах, оценивая динамику титра антител в баллах. Затем с помощью дискриминантного уравнения рассчитывают величину дискриминантной функции: D=-2,200×А-2,191×В-107,394×С, где D - дискриминантная функция с граничным значением, равным - 19,98. При этом при D, равной или больше граничного значения, прогнозируют отсутствие внутриутробного инфицирования плода у женщин с гриппом В во втором триместре беременности при анемическом синдроме, а при D меньше граничного значения прогнозируют внутриутробное инфицирование плода у женщин с гриппом В во втором триместре беременности при анемическом синдроме. Вероятность правильного прогноза составляет 87,5%. 2 пр.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству.

Гриппозная инфекция у женщин в период беременности часто протекает на фоне анемического синдрома [2], при котором часто диагностируется внутриутробное инфицирование их потомства [1]. В динамике инфекционного процесса (в периоде разгара и реконвалесценции) отмечается изменение титра антител к вирусу гриппа [3], что повышает риск развития перинатальной патологии у новорожденных [5].

Известен способ прогнозирования внутриутробного инфицирования плода у женщин с гриппом A(H3N2) во втором триместре беременности при анемическом синдроме, заключающийся в определении титра противогриппозных антител, при этом в качестве показателя использовали вторую сыворотку крови (12-14 день заболевания) (А), концентрации среднемолекулярных пептидов (единицы оптической плотности) в период реконвалесценции (12-14 день), уровня общего гемоглобина (г/л) в период разгара заболевания (2-4 день) (С) и уровня общего гемоглобина (г/л) в период реконвалесценции (12-14 день)(Д), а затем с помощью дискриминантного уравнения рассчитывали величину дискриминантной функции (D) [5].

Недостатком известного способа прогнозирования является невозможность прогнозирования внутриутробного инфицирования плода у женщин с гриппом В во втором триместре гестации, осложненном анемическим синдромом.

Задачей предлагаемого изобретения является обеспечение возможности прогнозирования внутриутробного инфицирования плода у женщин с гриппом В во втором триместре беременности при анемическом синдроме.

Сущность предлагаемого изобретения заключается в том, что прогнозирование внутриутробного инфицирования плода во втором триместре гестации при гриппе В у женщин с анемическим синдромом осуществляют посредством трехкратного определения с помощью реакции торможения гемагглютинации титра антител к вирусу гриппа В в сыворотках крови (на 2-4 сутки, 12-14 сутки и 22-24 сутки заболевания) и отмечают динамику роста уровня антител в третьей сыворотке по сравнению со второй сывороткой (в баллах А), определяют изменение концентрации общего гемоглобина в крови у женщин с гриппом В на 22-24 сутки по сравнению с концентрацией общего гемоглобина на 12-14 сутки заболевания (в баллах) (В); оценивают концентрацию серомукоида (ед. опт. плот.) в плазме крови, полученной на 22-24 сутки заболевания (С). Затем с помощью дискриминантного уравнения, включающего определяемые показатели, прогнозируют развитие внутриутробного инфицирования у плода, сравнивая полученные результаты с граничными.

Способ содержит следующие приемы:

1. Посредством реакции торможения гемагглютинации и титрования трех сывороток крови, полученных у женщин с гриппом В и анемическим синдромом во втором триместре беременности на 2-4 сутки, 12-14 сутки и 22-24 сутки заболевания, устанавливают динамику роста уровня антител в третьей сыворотке по сравнению со второй сывороткой крови (1 балл - падение титра антител; 2 балла - равные титры антител; 3 балла - рост титра в 2 раза; 4 балла - рост титра в 4 раза) (А).

2. Устанавливают изменения концентрации общего гемоглобина в крови у женщин с гриппом В на 22-24 сутки заболевания по сравнению с таковой на 12-14 сутки заболевания (1 балл - нет изменений концентрации общего гемоглобина; 2 балла - падение концентрации общего гемоглобина на 1-5%; 3 балла - падение концентрации общего гемоглобина на 6-10%; 4 балла - падение концентрации общего гемоглобина на 11% и более)(В).

3. Определяют концентрацию серомукоида (ед. опт. плот.) в плазме крови, полученной на 22-24 сутки заболевания, например с помощью спектрофотомера "HITACHI-557" (Япония) (С).

4. С помощью дискриминантного уравнения определяют величину дискриминантной функции:

где D - дискриминантная функция с граничным значением, равным - 19,98.

5. Сравнивают величину дискриминантной функции с ее граничным значением, равным 19,98.

6. Прогнозируют развитие внутриутробного инфицирования плода: при D, равной или больше граничного значения дискриминантной функции, прогнозируют отсутствие внутриутробного инфицирования плода у женщин с гриппом В во втором триместре беременности, осложненной анемическим синдромом, а при D меньше граничного значения прогнозируют внутриутробное инфицирование плода у женщин с гриппом В во втором триместре беременности, осложненной анемическим синдромом.

Вероятность правильного прогноза составляет 87,5%.

Пример 1. Больная О., 24 лет, поступила в отделение акушерской патологии беременных ФГБУ «ДНЦ ФПД» СО РАМН при сроке беременности 21 неделя с жалобами на головную боль, повышение температуры тела до 37,8°, озноб, потливость, слабость, адинамию, насморк и кашель с умеренным количеством слизистой мокроты в течение 2 суток. Серологическое исследование сывороток крови, полученных у пациентки на 3 и 12 и 24 сутки заболевания, показало: титр антител к вирусу гриппа В составил 1:4-1:16, а на 23 сутки - 1:16 (2 балла) (А), наблюдалось снижение общего гемоглобина с 106 г/л на 12 сутки, до 102 г/л на 23 сутки заболевания (на 3,8%) (2 балла). Концентрация серомукоида в плазме крови на 23 сутки - 0,08 ед. опт. плот.(С).

Клинический диагноз: Беременность 24 недели. Осложненное течение данной беременности (грипп В).

После внесения вышеуказанных показателей в дискриминантное уравнение, установлено следующее значение дискриминантной функции:

D=-2,200×2-2,191×2-107,394×0,08=-17,373 т.е. D - больше граничного значения, равного - 19,98. Прогнозировалось отсутствие внутриутробного инфицирования плода при гриппе В у женщин с анемическим синдромом во втором триместре гестации. При ультразвуковом исследовании фетоплацентарная система на 24 неделе гестации имела следующие характеристики: тонус маточной мускулатуры был нормальный, эхоструктура плаценты соответствовала 0 степень зрелости, а толщина органа составляла 23,0 мм. Фетометрические показатели: бипариетальный размер головки - 57,0 мм, средний диаметр грудной клетки - 60 мм, средний диаметр живота - 63 мм, Это соответствовало 24 неделе гестации. Отмечались нормальные величины маточно-плацентарного и плацентарно-плодового кровотока: систолодиастолическое отношение (СДО) в правой маточной артерии - 1,98 усл. ед., СДО в левой маточной артерии - 2,02 усл. ед., СДО в артерии пуповины -3,27 усл. ед.

Родилась девочка массой 3500 граммов, длина тела - 52 см, окружность головы - 35 см и окружность груди - 34 см без клинических признаков внутриутробного инфицирования. При определении титра антител в парах мать-дитя в сыворотке крови из вены пуповины у новорожденного отмечались более низкие величины титра антител к вирусу гриппа В по сравнению с таковым у их матерей (1:16-1:4). Оценка ребенка по шкале Апгар - 7/9 баллов. Диагноз: здоровый новорожденный.

Пример 2. Больная В., 26 лет, обследовалась в отделении акушерской патологии беременных ФГБУ «ДНЦ ФПД» СО РАМН при сроке 22 недели гестации. При поступлении предъявляла жалобы на головную боль, температуру 37,7°, озноб, потливость, слабость, адинамию, насморк и кашель с умеренным количеством слизистой мокроты в течение 3 суток. При серологическом исследовании у женщины на 3, 12 и 23 сутки заболевания установлено: титр антител к вирусу гриппа В составил 1:8-1:32, а на 23 сутки - 1:64 (3 балла) (А), обнаруживалось падение общего гемоглобина на 23 сутки по сравнению с 12 сутками с 107 г/л до 100 г/л (на 6,5%) (3 балла). Концентрация серомукоида в плазме крови на 23 сутки заболевания - 0,10 ед. опт. плот. (С).

Клинический диагноз: Беременность 25 недель. Осложненное течение данной беременности (грипп В).

После внесения вышеуказанных показателей в дискриминантное уравнение установлено следующее значение дискриминантной функции: D=-2,200×3-2,191×3-107,394×0,10=-23,912, т.е. D - меньше граничного значения, равного - 19,98. Прогнозировалось внутриутробное инфицирования плода при гриппе В у женщин с анемическим синдромом во втором триместре гестации.

Эхографически на 25 неделе гестации визуализировались маркеры внутриутробного инфицирования плода [4]: тонус маточной мускулатуры был нормальным; регистрировалось ускорение созревания плаценты (I-степень зрелости) и ее утолщение до 31 мм (в норме 21-26 мм); отмечалось контрастирование базальной пластины, гиперэхогенные включения в структуре плаценты, а также варикозное расширение вен плодовой поверхности органа. Фетометрически обнаруживалась вентрикуломегалия, а бипариетальный размер головки плода составлял 61,0 мм. Средний диаметр грудной клетки - 59 мм, средний диаметр живота - 65 мм. При допплерометрии возрастало СДО в правой маточной артерии до 2,25 усл. ед. и СДО в левой маточной артерии до 2,21 усл. ед., а также СДО в артерии пуповины до 3,76 усл. ед.

Родилась девочка массой 3430 граммов, длина тела - 53 см, окружность головы - 33 см и окружность груди - 32 см. При осмотре регистрировались признаки внутриутробного инфицирования - везикулез. Серологически отмечалось четырехкратное увеличение титра антител к вирусу гриппа В в сыворотке пуповинной крови по сравнению с таковым в крови у матери в период родов (1:64-1:256). Оценка по шкале Апгар 6/8 баллов. Диагноз новорожденного: Внутриутробное инфицирование. Везикулез (титр антител к гриппу В в парах мать - дитя - 1:64-1:256).

Способ апробировали при обследовании 45 женщин на 19-26 неделях беременности при гриппе В с анемическим синдромом. Правильный прогноз подтвердился в 87,5% случаев.

Технический результат предлагаемого изобретения заключается в возможности обоснованного и своевременного проведения лечебных мероприятий, направленных на профилактику внутриутробного инфицирования плода во втором триместре гестации у женщин с гриппом В и анемическим синдромом.

Используемые информационные источники:

1. Гориков И.Н., Резник В.И. Состояние здоровья новорожденных от матерей с гриппом A(H3N2) во время беременности // Дальневосточный мед. журнал. - 2005. - №2. - С. 48-50.

2. Гориков И.Н. Клиническая характеристика острого ринофарингита при гриппе A(H3N2) у беременных женщин // Аллергология и иммунология, - 2004. - Т. 5, №3. - С. 516.

3. Грипп: Руководство для врачей / Под ред. акад. РАЕН, проф. Г.И. Карпухина. - СПб.: Гиппократ, 2001, - 360 с.

4. Кузнецов М.И., Белковская М.Э., Бабаева О.И. Эхографическая картина "инфицированной" плаценты - наиболее вероятные признаки// Ультразвуковая диагностика.- 2000. - Т. 8, №4. - С. 284-288.

5. Способ прогнозирования внутриутробного инфицирования плода у женщин с гриппом A(H3N2) во втором триместре беременности при анемическом синдроме: пат. 2492478. Рос. Федерация. МПК G01N 33/53 / И.Н. Гориков, В.П. Колосов, М.Т. Луценко, Л.Г. Нахамчен, А.Г. Судаков, О.Р. Воскобойникова, Б.А. Рабинович; заявитель и патентообладатель ГУ ДНЦ ФПД СО РАМН.- №2012131706. 07133030/15; заявл. 24.07.2012; опубл. 10.09.2013, Бюл. №25.

Способ прогнозирования внутриутробного инфицирования плода у женщин с гриппом В во втором триместре беременности при анемическом синдроме, включающий определение титра антител к вирусу гриппа в сыворотках крови и расчет дискриминантной функции, отличающийся тем, что с помощью реакции торможения гемагглютинации трехкратно определяют титр антител к вирусу гриппа В в сыворотках крови на 2-4 сутки, 12-14 сутки и 22-24 сутки заболевания и отмечают динамику изменения уровня антител в третьей сыворотке по сравнению со второй сывороткой в баллах, оценивая за 1 балл падение титра антител, 2 балла - равные титры антител, 3 балла - рост титра в 2 раза, 4 балла - рост титра в 4 раза (А), определяют изменение содержания общего гемоглобина в крови у женщин с гриппом В на 22-24 сутки по сравнению с содержанием общего гемоглобина на 12-14 сутки заболевания в баллах, оценивая в 1 балл - если нет изменений концентрации общего гемоглобина, 2 балла - если падение концентрации общего гемоглобина на 1-5%, 3 балла - если падение концентрации общего гемоглобина на 6-10%, 4 балла - если падение концентрации общего гемоглобина на 11% и более (В), устанавливают концентрацию в плазме крови серомукоида в единицах оптической плотности (С), полученной на 22-24 сутки заболевания, а затем с помощью дискриминантного уравнения рассчитывают величину дискриминантной функции:
D=-2,200×А-2,191×В-107,394×С,
где D - дискриминантная функция с граничным значением, равным - 19,98, при этом при D, равной или больше граничного значения, прогнозируют отсутствие внутриутробного инфицирования плода у женщин с гриппом В во втором триместре беременности при анемическом синдроме, а при D меньше граничного значения прогнозируют внутриутробное инфицирование плода у женщин с гриппом В во втором триместре беременности при анемическом синдроме.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к медицине, а именно к терапии и хирургии, и может быть использовано для прогнозирования генетической предрасположенности или повышенного риска развития инфекционного эндокардита (ИЭ) у пациентов из группы риска.

Данное изобретение относится к области иммунологии. Предложено выделенное моноклональное антитело к FcRH5 человека, охарактеризованное последовательностями гипервариабельных участков (HVR), и его антигенсвязывающий фрагмент.

Группа изобретений относиться к области медицины, а именно к иммунологии, и может быть использована для диагностики состояния иммунной системы пациента на основе оценки количества наивных Т и В клеток, экспрессирующих TREC и KREC.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования наступления беременности в программе экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) и переноса эмбрионов (ПЭ).

Изобретение относится к области медицины, в частности к акушерству, гинекологии и патологической анатомии, и предназначено для диагностики и прогнозирования развития хронического эндометрита (ХЭ).
Изобретение относится к медицине и представляет собой способ прогнозирования острого повреждения почек у больных острым коронарным синдромом, заключающийся в том, что с целью улучшения прогнозирования определяется содержание эритропоэтина в сыворотке крови иммуноферментным методом, и при уровне эритропоэтина более 15,7 МЕ/мл диагностируется высокий риск развития острого повреждения почек.

Изобретение относится к медицине, преимущественно к фтизиатрии, и может быть использовано при оценке активности туберкулезной инфекции у детей и подростков. Для этого в пробы цельной крови пациента вносят специфические антигены: ППД-Л, Rv2660c, ESAT-6, гибридного белка CFP10-ESAT-6.
Изобретение относится к медицине, а именно к способу оценки активности туберкулемы. Сущность способа состоит в том, что в цельной крови определяют процентное содержание CD19+ клеток от числа всех лейкоцитов методом проточной цитофлюориметрии.

Изобретение относится к области медицинской диагностики и может быть использовано для прогнозирования показателей гидродинамики у больных первичной открытоугольной глаукомой, являющихся уроженцами Центрального Черноземья России.

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики первичного и вторичного иммунного ответа на вирус краснухи.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству, и может быть использовано для диагностики тяжелой преэклампсии у беременных. Способ включает иммунологическое исследование периферической венозной в 22-37 недель беременности. Определяют показатель относительного содержания CD62L+ клеток в популяции нейтрофилов и при его значении, равном или менее 57%, диагностируют тяжелую преэклампсию. Использование изобретения позволяет диагностировать преэклампсию вне зависимости от наличия у женщины хронической артериальной гипертензии. 1 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано в диагностике сенсибилизации организма к формальдегиду. Для этого определяют относительное содержание аутоантител к мембранным антигенам паренхимы легких LuM и к β2-гликопротеину. Рассчитывают диагностический показатель по формуле: где: y - диагностический коэффициент, -0,222 - константа, 0,004 и 0,026 - коэффициенты предикторов. В качестве предикторов используются ауто-АТ LuM - относительное содержание ауто-АТ к мембранным антигенам паренхимы легких LuM, ауто-АТ β2-ГП I - относительное содержание ауто-АТ к β2-гликопротеину I. При значении у меньше 0,5 делают заключение об отсутствии реакции организма на формальдегид и прогнозируют отсутствие сенсибилизации организма к формальдегиду. При значении у больше 0,5 реакцию на формальдегид считают положительной и прогнозируют сенсибилизацию организма к формальдегиду. Использование данного способа позволяет прогнозировать сенсибилизацию к формальдегиду на основании иммунологических показателей ауто-АТ LuM и ауто-АТ β2-ГП I. 2 табл., 4 пр.

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой пептид, который имеет аминокислотную последовательность, состоящую из смежных аминокислот, полученных из белка WT1, и индуцирует WT1-специфические хелперные Т-клетки связыванием с молекулой МНС класса II. Такая аминокислотная последовательность выбрана из группы, состоящей из аминокислотной последовательности, изображенной в SEQ ID NO: 3; аминокислотной последовательности, изображенной в SEQ ID NO: 4; аминокислотной последовательности, изображенной в SEQ ID NO: 5. Изобретение касается также экспрессирующего вектора, содержащего полинуклеотид, кодирующий пептид, антитела против пептида, фармацевтической композиции, содержащей пептид, способа лечения рака путем введения пептида субъекту. Изобретение позволяет получить эффективное средство для индукции WT1-специфических хелперных Т-клеток связыванием с молекулой МНС класса II и использовать его для лечения рака. 14 н. и 3 з.п. ф-лы, 18 ил., 9 табл., 5 пр.

Изобретение относится к биохимии. Описано моноклональное антитело, которое специфически связывается с липоарабиноманнаном кислотоустойчивых бацилл, в частности с липоарабиноманнаном туберкулезной бациллы. Описанное антитело является моноклональным антителом, содержащим вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи, соединенные через линкер. Вариабельная область тяжелой цепи содержит CDR1-CDR3, показанные в (а)-(с), и легкой цепи содержит CDR1-CDR3, показанные в (d)-(f): (а) CDR1 тяжёлой цепи, состоящая из аминокислотной последовательности SEQ ID No:1, (b) CDR2 тяжёлой цепи, состоящая из аминокислотной последовательности SEQ ID No:2, (c) CDR3 тяжёлой цепи, состоящая из аминокислотной последовательности SEQ ID No:3, (d) CDR1 лёгкой цепи, состоящая из аминокислотной последовательности SEQ ID No:4, (e) CDR2 лёгкой цепи, состоящая из аминокислотной последовательности SEQ ID No:5, и (f) CDR3 лёгкой цепи, состоящая из аминокислотной последовательности SEQ ID No:6. Также описаны реагент, набор и устройство, содержащие описанное антитело. Изобретение расширяет арсенал средств для обнаружения микобактерий. 11 н. и 7 з.п. ф-лы, 19 ил., 5 табл., 12 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к трансфузиологии, и может быть использовано для контроля эффективности облучения донорской крови. Способ включает постановку реакции бласттрансформации клеток крови с митогеном фитогемагглютинином и учет результатов реакции путем определения индекса стимуляции лимфоцитов. Постановку реакции проводят в отношении облученной донорской крови, учет результатов выполняют с помощью проточного цитофлюориметра с использованием моноклональных антител, меченных разными флюорохромами, проведением гейтирования активированных лимфоцитов со сниженной экспрессией общелейкоцитарного маркера CD45 и определением среди них процента дубль-негативных Т-лимфоцитов с иммунофенотипом CD3+CD4-CD8-, при этом в качестве контроля берут необлученный образец той же крови. После чего определяют эффективность облучения по соотношению содержания дубль-негативных Т-лимфоцитов с иммунофенотипом CD3+CD4-CD8- в проверяемой облученной и той же необлученной контрольной крови как Эоб=Сднтло-Сднтлк, где Эоб - эффективность облучения, Сднтло - процент содержания дубль-негативных Т-лимфоцитов с иммунофенотипом CD3+CD4-CD8- в опыте (в проверяемой облученной крови), Сднтлк - процент содержания дубль-негативных Т-лимфоцитов с иммунофенотипом CD3+CD4-CD8- в контроле (в необлученном образце той же крови). При разнице с контролем более чем в 50% делают вывод о функциональной неполноценности Т-лимфоцитов в облученной крови и иммунологической безопасности данного препарата крови для реципиента. Использование данного способа позволяет определять эффективность облучения донорской крови методом проточной цитометрии.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к модифицированному тамавидину, и может быть использовано для детекции связанной с биотином субстанции. Получают модифицированный биотин-связывающий белок на основе тамавидина с последовательностью SEQ ID NO: 2, который содержит до 7 мутаций и при этом остаток аспарагина в 115 положении заменен на цистеин. Изобретение позволяет повысить устойчивость биотин-связывающего белка к нагреванию и обработке диметилсульфоксидом. 7 н. и 2 з.п. ф-лы, 3 ил., 3 табл., 5 пр.
Изобретение относится к области медицинской диагностики и может быть использовано для раннего прогнозирования невынашивания беременности. Способ включает выделение РНК из эпителиальных клеток цервикального канала у женщин, проведение обратной транскрипции с получением мДНК, определение экспрессии CASP-3α (отн. ед.) и COX-2 с помощью количественной полимеразной цепной реакции и расчет у1 и у2 по уравнениям линейной дискриминантной функции следующего вида: у1=-0,8383+155,755*x1+27,2986*x2, у2=-207,714+3007,030*x1+533,609*x2, где x1 - уровень экспрессии мРНК CASP-3α (отн. ед.), x2 - уровень экспрессии мРНК COX-2 (отн. ед.). Прогнозируют развитие невынашивания беременности ранних сроков, если y1 больше y2. Прогнозируют прогрессирование беременности в случае, если y2 больше, чем y1. Предложенное изобретение позволяет эффективно прогнозировать невынашивание беременности в 92,10% случаев. Применение данного способа позволит своевременно реализовывать необходимые лечебно-профилактические мероприятия по предупреждению невынашивания беременности. 3 табл.

Настоящее изобретение относится к медицине, а именно к урологии, и может быть использовано для обнаружения инфекции мочевыводящих путей у пациента. Для этого способ включает получение образца от пациента и обнаружение в указанном образце экспрессии рецептора CD1d на NKT-клетках и BCL6 в тканях мочевого пузыря. При повышении экспрессии CD1d на NKT-клетках и снижении BCL6 в тканях мочевого пузыря диагностируют наличие инфекции мочевыводящих путей. Использование данных биомаркеров позволяет диагностировать наличие инфекции мочевыводящих путей, а также использовать для оценки эффективности лечения. 1 пр., 7 ил.

Изобретение относится к ветеринарной вирусологии, а именно к получению диагностических препаратов. При осуществлении предлагаемого способа получения сыворотки для диагностики алеутской болезни норок (АБН) получают высокоочищенный вирусный антиген путем гомогенизации органов инфицированных АБН норок с последующим трехкратным замораживанием/размораживанием гомогената, дезинтеграции клеточного гомогената трехкратной ультразвуковой обработкой, осаждением неразрушенных клеток двукратным низкоскоростным центрифугированием, последующим осаждением иммунных комплексов, уплотнением осадка низкоскоростным центрифугированием, экстрагированием иммунных комплексов (ИК) минимальными количествами ТНЭ буфера путем трехкратной экстракции на холоду в течение 1-2 часов с последующим низкоскоростным центрифугированием, осаждением ИК высокоскоростным центрифугированием из объединенных экстрактов при 30000 об/мин в течение 2,5 часов, извлечением ИК из осадка минимальными количествами ТНЭ буфера путем трехкратного экстрагирования на холоду в течение 1-2 часов с последующим низкоскоростным центрифугированием, диссоциацией иммунных комплексов в кислой среде в течение 1 часа на холоду, отделением вируса АБН-Ф от антител высокоскоростным ультрацентрифугированием, растворением осадка в минимальном количестве карбонатного буфера, отделением ферритина от вирусных частиц на колонке с сефарозой 6B в системе карбонатного буфера. После чего проводят иммунизацию кроликов микроколичествами очищенного антигена в пять этапов с получением сыворотки с высоким титром антител к вирусу АБН - 1/16384. Технический результат: получение диагностической сыворотки с высоким титром, позволяющей тестировать вирус АБН в различных биологических жидкостях. 3 з.п. ф-лы, 2 пр., 4 ил.

Изобретение относится к области медицины, в частности к неврологии, и может быть использовано для диагностики течения «асимптомного» каротидного атеросклероза. Диагностику течения «асимптомного» каротидного атеросклероза проводят путем иммуноферментного определения в плазме крови биомаркеров. При этом в плазме крови иммуноферментным методом определяют уровни тканевого активатора плазминогена (t-PA), ингибитора активатора плазминогена (PAI-1), адипонектина, асимметричного диметиларгинина (ADMA), а биохимическим методом уровни нитрата, нитрита и оксида азота (NO). Затем каждому биомаркеру присваивают 0 или 1 балл в зависимости от его снижения или повышения относительно нормы. А именно при значении уровней t-PA, адипонектина и оксида азота выше нормы этим биомаркерам присваивают 0 баллов, а при их снижении относительно нормы - 1 балл, при значении уровней PAI-1, ADMA, нитрата и нитрита выше нормы данным биомаркерам присваивают 1 балл, а при их снижении относительно нормы - 0 баллов. После чего рассчитывают сумму баллов и при ее значении менее 4 баллов диагностируют благоприятное течение «асимптомного» каротидного атеросклероза, а при значении 4 и более - неблагоприятное. Способ обеспечивает высокую точность диагностики течения «асимптомного» каротидного атеросклероза за счет специфичности и чувствительности метода совместного определения биомаркеров - t-PA, PAI-1, адипонектина, ADMA, нитрата, нитрита и NO. 3 табл., 2 пр.
Наверх