Способ прогнозирования риска развития поуг с использованием генетических данных



Способ прогнозирования риска развития поуг с использованием генетических данных
Способ прогнозирования риска развития поуг с использованием генетических данных
Способ прогнозирования риска развития поуг с использованием генетических данных

 

G01N33/50 - химический анализ биологических материалов, например крови, мочи; испытания, основанные на способах связывания биоспецифических лигандов; иммунологические испытания (способы измерения или испытания с использованием ферментов или микроорганизмов иные, чем иммунологические, составы или индикаторная бумага для них, способы образования подобных составов, управление режимами микробиологических и ферментативных процессов C12Q)

Владельцы патента RU 2592205:

Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Белгородский государственный национальный исследовательский университет" (НИУ "БелГУ") (RU)

Изобретение относится к области медицинской диагностики и предназначено для прогнозирования риска развития первичной открытоугольной глаукомы (ПОУГ). У индивидуумов русской национальности, уроженцев Центрального Черноземья, определяют возраст, уровень систолического и диастолического артериального давления, наличие отягощенного семейного анамнеза, наличие сопутствующих неинфекционных заболеваний глаз, микрососудистых изменений в конъюнктиве, степень пигментации угла передней камеры, осуществляют забор периферической венозной крови и выделение ДНК, проводят анализ полиморфизма гена VEGF-A с.-958C>T (rs833061), после чего определяют значения дискриминантных показателей Dp и Dk по формулам. В случае, если Dp больше Dk, прогнозируют риск развития ПОУГ. Изобретение обеспечивает раннюю диагностику ПОУГ и позволяет формировать группы риска по данному заболеванию. 3 ил., 5 пр.

 

Изобретение относится к области медицинской диагностики и может быть использовано для прогнозирования риска развития первичной открытоугольной глаукомы на основе генетических данных.

Первичная открытоугольная глаукома (ПОУГ) - это хроническая патология глаз, характеризующаяся периодическим или постоянным повышением внутриглазного давления (ВГД) и сопровождающаяся прогрессирующей оптической нейропатией, которая проявляется атрофией зрительного нерва (с экскавацией) и характерными изменениями поля зрения [Егоров E.А. Глаукома. Национальное руководство / Под ред. E.А. Егорова. - М.: ГЭОТАР-Медиа. - 2013. - 824 с.]. По результатам многоцентровых эпидемиологических исследований за последние пять лет удельный вес глаукомы среди причин инвалидности по зрению значительно возрос с 20 до 28%, распространенность увеличилась с 0,12 до 0,62 и более на 10 тысяч населения субъекта федерации в зависимости от его особенностей и возрастной группы жителей [Либман E.С. Эпидемиологическая характеристика глаукомы / Либман E.С. // Глаукома. - 2009. - №1 (Прил.). - С. 2 - 3]. При этом только половина заболевших знают о своем диагнозе и лишь четверть из них получает адекватное лечение [Quigley, H. Glaucoma / Quigley H. // The Lancet. - 2011. - Vol.377, no. 9774. - P. 1367-1377]. В начальной стадии ПОУГ протекает практически бессимптомно, данное заболевание часто выявляется на стадиях, когда изменения зрительного нерва уже необратимы [Нестеров А.П. Глаукома. / Нестеров А. П. // М.: Мед. информ. агент., 2008. - 360 с.]. ПОУГ является мультифакториальным заболеванием, в этиопатогенезе которого важная роль принадлежит факторам роста [Banerjee, D. Comprehensive analysis of myocilin variants in east Indian POAG patients / Banerjee D., Bhattacharjee А., Ponda А., Ray K. // Molecular Vision. - 2012. Vol.18. - P. 1548-1557]. Сосудистая теория патогенеза ПОУГ развитие глаукомной оптической нейропатии (ГОН) рассматривает как результат нарушения кровоснабжения головки зрительного нерва (ГЗН) вследствие действия различных факторов риска [Flammer, J. The impact of ocular blood flow in glaucoma / Flammer J., Orgul S., Costa V. et аl. // Prog. Ret. Eye Res. - 2002. - 21. №4 - P. 359-393]. Одним из ключевых механизмов, обеспечивающих кровообращение в питающих ДЗН сосудах, является ауторегуляция кровотока. При изменениях перфузионного давления ауторегуляция контролирует расширение или сужение артериол, регулируя, таким образом, кровоток в них. Существенную роль при этом играют эндотелиальные клетки. Они являются продуцентами вазоактивных веществ, среди которых наибольшее значение имеют оксид азота (NO), эндотелин 1 (ЭТ-1) и фактор роста эндотелия сосудов (VEGF-А) [Resch, H. Endothelial dysfunction in glaucoma. / Resch H., Garhofer G., Fuchsjager-Mayrl G. // Acta Opthalmologica. - 2009. - vol. 87. - P. 4-12].

VEGF-A представляет собой гепаринсвязывающий гликопротеин молекулярной массой 45 кДа - это специфический митоген эндотелиальных клеток, являющийся стимулятором физиологического и патологического ангиогенеза, роста и пролиферации эндотелиоцитов, подавляет апоптоз циркулирующих предшественников эндотелиальных клеток [Ferrara, N. The biology of VEGF and its receptors / Ferrara N., Gerber H.P., Le Couter J. // Nat. Med. - 2003. - Vol.9(6). - P. 669-76].

Ген VEGF-А находится на коротком плече 6 хромосомы в локусе 6p21.3, состоит из восьми экзонов, разделенных семью интронами, имеющих альтернативный сплайсинг, и контролирует синтез целой группы белков. Экспрессия гена VEGF-А модулируется различными факторами, в частности цитокинами, липополисахаридами, гормонами и гипоксией. Экспрессия VEGF-А весьма вариативна, описано не менее 25 различных полиморфизмов, которые ее определяют [Heist, R. VEGF polymorphisms and survival in early-stage non-small cell lung cancer. / Heist R., Zhai R., Liu G. // Journal of clinicаl oncology. - 2008. - Vol.26. - P. 856-62].

Для оценки сложившейся патентной ситуации был выполнен поиск по охранным документам за период с 1990 по 2014 гг. Анализ документов производился по направлению: Способ прогнозирования риска развития ПОУГ с использованием генетических данных.

Источники информации: сайты Федерального института промышленной собственности http://fips.ru.

Известен способ прогнозирования риска развития и прогрессирования глаукомы по патенту РФ №2354287 (опубликован 10.05.2009), в котором определяют корнеальный гистерезис и центральную толщину роговицы и затем по формуле рассчитывают биомеханический коэффициент роговицы: К=КГ/ЦТР·50, где К - биомеханический коэффициент роговицы, КГ - корнеальный гистерезис, ЦТР - центральная толщина роговицы, и при значении менее 0,82 прогнозируют риск развития и прогрессирования глаукомы. Способ обеспечивает адекватное прогнозирование риска развития и прогрессирования глаукомы с учетом эластических свойств роговицы и ее центральной толщины и проведение соответствующего лечения.

К недостаткам данного способа относится то, что он не учитывает роль генетических полиморфизмов и, кроме того, предусматривает необходимость наличия дорогостоящего офтальмологического оборудования: анализатор биомеханических свойств глаза и пахиметр.

За прототип выбран метод прогнозирования риска развития ПОУГ у индивидуумов русской национальности, уроженцев Центрального Черноземья, на основании полиморфных вариантов генов факторов некроза опухолей и их рецепторов и других возможных факторов риска, изложенный в диссертации Тикуновой Е.В. «Роль генетических полиморфизмов факторов некроза опухолей и их рецепторов в развитии первичной открытоугольной глаукомы». В ходе данного исследования методом дискриминантного анализа (далее ЛДФ) проведено изучение больных ПОУГ и контрольной группы по десяти предикторам: возраст, наличие сердечно-сосудистых заболеваний, уровень систолического артериального давления, уровень диастолического артериального давления, наличие ПОУГ среди родственников, наличие сопутствующей патологии глаз, микрососудистые нарушения в переднем отрезке глаз, состояние пигментной каймы зрачкового края радужной оболочки, степень пигментации угла передней камеры, генетический вариант по локусу+1663A/G TNFR2. Материалом для исследования служила венозная кровь, выделение геномной ДНК проводилось методом фенольнохлороформной экстракции. Типирование локуса+1663A/G TNFR2 проводилось с помощью полимеразной цепной реакции (далее ПЦР) синтеза ДНК на амплификаторе IQ5 (Bio-Rad) в режиме real time.

Определение риска развития глаукомы по значениям, полученным при решении уравнений ЛДФ общей формулы. Уравнение ЛДФ имеет следующий вид [Реброва О.Ю., 2006]:

y=a1х12х23х3+…+аnхn+C,

где C - константа, хi - информативные признаки, аi - коэффициенты признаков.

Указанный способ, взятый за прототип, подтверждает, что выявленные предикторы имеют важное клиническое значение в формировании ПОУГ в совокупности с генетическими данными о вовлеченности полиморфизма+1663A/G TNFR2. Недостатком указанного способа является то, что в нем отсутствуют данные о влиянии на развитие первичной открытоугольной глаукомы генетического полиморфизма VEGF-A с.-958C>T.

Задачей настоящего исследования является расширение арсенала способов прогнозирования риска развития первичной открытоугольной глаукомы с использованием генетических данных у индивидуумов русской национальности, уроженцев Центрального Черноземья.

Технический результат использования изобретения - возможность прогнозирования риска развития первичной открытоугольной глаукомы у индивидуумов русской национальности, уроженцев Центрального Черноземья, с учетом генетического полиморфизма VEGF-A с.-958C>T, в сочетании с такими предикторами развития данного заболевания как возраст, уровень систолического и диастолического артериального давления, отягощенный семейный анамнез, наличие сопутствующих неинфекционных заболеваний глаз, микрососудистых изменений в конъюнктиве, степени пигментации угла передней камеры.

В соответствии с поставленной задачей был разработан способ прогнозирования риска развития первичной открытоугольной глаукомы у индивидуумов русской национальности, уроженцев Центрального Черноземья, с использованием генетических данных включающий определение следующих предикторов: возраст пациента, уровень систолического и диастолического артериального давления, отягощенный семейный анамнез, наличие сопутствующих неинфекционных заболеваний глаз, микрососудистых изменений в конъюнктиве, степени пигментации угла передней камеры; выделение ДНК из периферической венозной крови, в который внесены следующие новые признаки

- проводят анализ полиморфизма гена VEGF-A с.-958C>T (rs 833061);

- определяют значения дискриминантных показателей Dp и Dk по формулам:

Dp=-110,685+1,175·x1+0,383·x2+0,892·x3+5,434·x4+2,742·x5 - 14,578·x6 - 0,391·x7+8,193·x8,

Dk=-94,672+1,089·x1+0,308·x2+0,953·x3+3,483·x4+0,243·x5 -11,515·x6 - 2,607·x7+7,026·x8,

где x1 - возраст (лет), x2 - систолическое артериальное давление (мм рт. ст.), x3 - диастолическое артериальное давление (мм рт. ст.), x4 - отягощенный семейный анамнез (нет - x4=0; есть - x4=1), x5 - наличие сопутствующих неинфекционных заболеваний глаз (нет - x5=0; есть - x5=1), x6 - микрососудистые изменения в конъюнктиве (нет - x6=0; есть - x6=1), x7 - степень пигментации угла передней камеры (нет - x7=0; I степень - x7=1; II степень - x7=2; III степень - x7=3; IV степень - x7=4), x8 - генетический вариант по локусу VEGF-A с.-958C>T (TT или CT- x8=1; CC- x8=2);

- прогнозируют риск развития первичной открытоугольной глаукомы в случае, если Dp больше Dk.

Новизна и изобретательский уровень заключаются в том, что из уровня техники неизвестна возможность прогноза риска развития первичной открытоугольной глаукомы в зависимости от генетических вариантов по локусу VEGF-A с.-958C>T в сочетании с другими предикторами развития данного заболевания.

Способ осуществляют следующим образом.

ДНК выделяют из образцов периферической венозной крови индивидуумов в 2 этапа. На первом этапе 4 мл крови смешивают с лизирующим буфером, в котором содержится 320 г сахарозы, 1% тритон Х - 100, 5 мл MgCl2, 10 мл трис - HCl (pH 7,6), центрифугируют 20 минут при температуре 4°С на 4000 об/мин. Далее добавляют 4 мл ЭДТА - Soline, 400 мкл 10% SDS, 35 мкл протеиназы К (10 мг/мл) и инкубируют в течение 16 часов при 40°С.

На втором этапе из уже очищенного лизата производят экстракцию ДНК равными долями фенола, фенол-хлороформа, хлороформа и центрифугированием в течение 10 минут при 4000 об/мин. После центрифугирования водный слой удаляют и добавляют два объема охлажденного этанола 96%. Полученную ДНК растворяют в деионизованной, бидистиллированной воде, хранят при температуре -20°С и в дальнейшем используют для проведения полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Анализ генетического полиморфизма VEGF-A с.-958C>T осуществляют методом ПЦР синтеза ДНК на амплификаторе CFX96 (Bio-Rad Laboratories, USA) с использованием олигонуклеотидных зондов и праймеров для ПЦР фирмы «Синтол» (фиг. 1). Генотипирование осуществляют с использованием программного обеспечения «CFX Manager™».

Изобретение охарактеризовано на фигурах 1-3.

На фиг. 1 представлена дискриминация аллелей по локусу VEGF-A с. -958C>T (rs 833061), где - CС VEGF-A, - ТТ VEGF-A, - СТ VEGF-A, - отрицательный контроль.

На фиг. 2 представлена таблица 1 со значениями константы и дискриминантных коэффициентов для расчета дискриминантных показателей Dp и Dk.

На фиг. 3 в таблице 2 представлены статистические параметры признаков, включенных в уравнение ЛДФ.

Возможность использования предложенного способа для оценки риска развития первичной открытоугольной глаукомы на основе генетических данных подтверждает анализ результатов наблюдений 252 человек (450 глаз) с ПОУГ и 191 человек (382 глаза) контрольной группы. Формирование выборок больных и контроля осуществлялись на базе офтальмологического отделения Белгородской областной клинической больницы Святителя Иоасафа и медицинского центра микрохирургии глаза ООО «Ковчег».

Исследуемые группы были сформированы из индивидуумов русской национальности, являющихся уроженцами Центрального Черноземья РФ и не имеющих родства между собой. В группу больных включались пациенты с ранее установленным или впервые выявленным диагнозом ПОУГ, подтвержденным клиническими, инструментальными и лабораторными методами обследования. Диагноз глаукома устанавливался по основным диагностическим критериям: повышенное ВГД, наличие глаукоматозной экскавации ДЗН, характерные изменения ППЗ [Егоров E.А. Глаукома. Национальное руководство / Под ред. E.А. Егорова. - М.: ГЭОТАР-Медиа. - 2013. - 824 с.].

Группа контроля была сформирована из индивидуумов, не имеющих острых и хронических заболеваний глаз, у которых отсутствовали какие-либо признаки глаукомы, а также они не имели тяжелых соматических патологий, в том числе приводящих к поражениям глаз. Типирование молекулярно-генетических маркеров осуществлялось в лаборатории «Молекулярной генетики человека» медицинского института Белгородского государственного национального исследовательского университета. Формирование базы данных и статистические расчеты осуществлялись с использованием программы «STATISTICA 6.0».

Прогнозирование риска развития ПОУГ осуществлялось с использованием дискриминантного анализа по уравнению ЛДФ следующего вида [Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA / О.Ю. Реброва. - [3-е изд.]. - Москва: Медиа Сфера, 2006 с. - 305 с.]:

D=K+b1·х1+b2·х2+b3·х3+…+bn·хn,

где D - дискриминантный показатель, K - константа, хi - предиктор или независимая переменная, bi - дискриминантный коэффициент.

На первом этапе данного исследования методом дискриминантного анализа проведено изучение исследуемых групп - больных ПОУГ и группы контроля по различным признакам, характеризующим медико-биологический, офтальмологический статус пациентов и их генетические характеристики по исследуемому локусу VEGF-A с.-958C>T. Получены две дискриминантные функции

Dp=-110,685+1,175·x1+0,383·x2+0,892·x3+5,434·x4+2,742·x5 - 14,578·x6 - 0,391·x7+8,193·x8,

Dk=-94,672+1,089·x1+0,308·x2+0,953·x3+3,483·x4+0,243·x5 -11,515·x6 - 2,607·x7+7,026·x8,

где x1 - возраст (лет), x2 - систолическое артериальное давление (мм рт. ст.), x3 - диастолическое артериальное давление (мм рт. ст.), x4 - отягощенный семейный анамнез (нет- x4=0; есть- x4=1), x5 - наличие сопутствующих неинфекционных заболеваний глаз (нет- x5=0; есть- x5=1), x6 - микрососудистые изменения в конъюнктиве (нет- x6=0; есть- x6=1), x7 - степень пигментации угла передней камеры (нет- x7=0; I степень- x7=1; II степень- x7=2; III степень- x7=3; IV степень- x7=4), x8 - генетический вариант по локусу VEGF-A с.-958C>T (TT+CT- x8=1; CC- x8=2) (фиг. 2).

Полученные значения критериев Уилкса, F-критериев, вероятности Р и показателей толерантности представлены на фиг. 3 (р≤0,05, Т<0,10) [Дерябин В.E. Многомерные биометрические методы для антропологов / В.E. Дерябин. - М.: ВИНИТИ, 2001. - С. 105-265].

Таким образом, исследуемые нами группы по набору из 8 изученных признаков демонстрируют неслучайную межгрупповую вариацию.

Точность распознания индивидуумов, относящихся к группе больных ПОУГ, составляет 91,70%, а группы контроля - 91,06%. В среднем процент правильных дискриминаций в исследуемых группах составляет 91,43%.

Следовательно, с помощью полученных коэффициентов дискриминантной функции, на основе значений конкретных показателей у индивидуумов можно прогнозировать риск развития первичной открытоугольной глаукомы.

Примеры осуществления изобретения

1. У индивидуума А. определены следующие показатели: возраст - 71 год, уровень систолического артериального давления - 130 мм рт. ст., уровень диастолического артериального давления - 80 мм рт. ст., отягощенный семейный анамнез - есть (1), наличие сопутствующих неинфекционных заболеваний глаз - есть (1), микрососудистые изменения в конъюнктиве - есть (1), III степень пигментации угла передней камеры (3), генетический вариант по локусу VEGF - CC (2).

После подстановки значений признаков в уравнения ЛДФ и вычисления их значений получены следующие результаты:

Dp=-110,685+1,175·71+0,383·130+0,892·80+5,434·1+2,742·1 - 14,578·1 - 0,391·3+8,193·2=-110,685+83,425+49,79+71,36+5,434+2,742 - 14,578-1,173+16,386=102,7,

Dk=-94,672+1,089·71+0,308·130+0,953·80+3,483·1+0,243·1 -11,515·1-2,607·3+7,026·2=-94,672+77,319+40,04+76,24+3,483+0,243-11,515 - 7,821+14,052=97,369.

Так как значение Dp больше значения Dk, индивидуум А был включен в группу риска. Дальнейшее наблюдение и детальное клинико-инструментальное обследование этого индивидуума выявило у него ПОУГ.

2. У индивидуума Б. определены следующие показатели: возраст - 85 лет, уровень систолического артериального давления - 150 мм рт. ст., уровень диастолического артериального давления - 100 мм рт. ст., отягощенный семейный анамнез - нет (0), наличие сопутствующих неинфекционных заболеваний глаз - есть (1), микрососудистые изменения в конъюнктиве - есть (1), IV степень пигментации угла передней камеры (4), генетический вариант по локусу VEGF - ТТ (1).

Dp=-110,685+1,175·85+0,383·150+0,892·100+5,434·0+2,742·1 - 14,578·1 - 0,391·4+8,193·1=-110,685+99,875+57,45+89,2+0+2,742 - 14,578-1,564+8,193=130,6,

Dk=-94,672+1,089·85+0,308·150+0,953·100+3,483·0+0,243·1 -11,515·1-2,607·4+7,026·1=-94,672+92,56+46,2+95,3+0+0,243-11,515 - 10,43+7,026=124,7.

Значение Dp больше значения Dk, следовательно, данного индивидуума можно включить в группу риска развития ПОУГ, что подтвердилось при комплексном офтальмологическом обследовании данного пациента.

3. Для индивидуума В. были определены следующие показатели: возраст - 66 лет, уровень систолического артериального давления - 140 мм рт. ст., уровень диастолического артериального давления - 90 мм рт. ст., отягощенный семейный анамнез - нет (0), наличие сопутствующих неинфекционных заболеваний глаз - нет (0), микрососудистые нарушения в переднем отрезке глаз - нет (0), II степень пигментации угла передней камеры - (2), генетический вариант по локусу VEGF - CT (1).

Подставляя значения признаков в уравнения ЛДФ, при расчетах мы выявили максимальное значение D для группы контроля, что дает возможность отнести пациента В. в контрольную группу:

Dp=-110,685+1,175·66+0,383·140+0,892·90+5,434·0+2,742·0 - 14,578·0 - 0,391·2+8,193·1=-110,685+77,55+53,62+80,28-0,782+8,193=108,1,

Dk=-94,672+1,089·66+0,308·140+0,953·90+3,483·0+0,243·0 - 11,515·0 -2,607·2+7,026·1=-94,672+71,87+85,77+76,24 - 5,214+7,026=141,0.

Значение Dk больше значения Dp, следовательно, данного индивидуума можно было не включать в группу риска развития ПОУГ, что подтвердилось при комплексном офтальмологическом обследовании данного пациента.

4. Для индивидуума Г. были определены следующие показатели: возраст - 50 лет, уровень систолического артериального давления - 120 мм рт. ст., уровень диастолического артериального давления - 80 мм рт. ст., отягощенный семейный анамнез - есть (1), наличие сопутствующих неинфекционных заболеваний глаз - нет (0), микрососудистые нарушения в переднем отрезке глаз - нет (0), I степень пигментации угла передней камеры - (1), генетический вариант по локусу VEGF - СС (2).

Dp=-110,685+1,175·50+0,383·120+0,892·80+5,434·1+2,742·0 - 14,578·0 - 0,391·1+8,193·=-110,685+58,75+45,96+71,36+5,434+0 - 0-0,391+16,386=86,81,

Dk=-94,672+1,089·50+0,308·120+0,953·80+3,483·1+0,243·0 -11,515·0-2,607·1+7,026·2=-94,672+54,45+36,96+76,24+3,483+0-0 - 2,607+14,052=87,91.

Значение Dk больше значения Dp, следовательно, данного индивидуума несмотря на наличие глаукомы у близких родственников, можно было не включать в группу риска развития ПОУГ, что подтвердилось при комплексном офтальмологическом обследовании данного пациента.

5. Для индивидуума Д. были определены следующие показатели: возраст - 57 лет, уровень систолического артериального давления - 130 мм рт. ст., уровень диастолического артериального давления - 90 мм рт. ст., отягощенный семейный анамнез - есть (0), наличие сопутствующих неинфекционных заболеваний глаз - нет (0), микрососудистые нарушения в переднем отрезке глаз - нет (0), 0 степень пигментации угла передней камеры - (0), генетический вариант по локусу VEGF - СС (2).

Dp=-110,685+1,175·57+0,383·130+0,892·90+5,434·0+2,742·0 - 14,578·0 - 0,391·0+8,193·2=-110,685+66,97+49,79+80,28+0+0 - 0 - 0+16,386=102,74,

Dk=-94,672+1,089·57+0,308·130+0,953·90+3,483·0+0,243·0 -11,515·0-2,607·0+7,026·2=-94,672+62,07+40,04+85,77+0+0 - 0 - 0+14,052=107,26.

Так как значение Dk больше значения Dp, индивидуум Д не был включен в группу риска.

Предложенный способ прогнозирования развития ПОУГ позволит формировать группы риска по данному заболеванию, что будет способствовать более эффективному осуществлению лечебно-профилактических мероприятий по предупреждению развития ПОУГ и ее ранней диагностики.

Способ прогнозирования риска развития первичной открытоугольной глаукомы с использованием генетических данных у индивидуумов русской национальности уроженцев Центрального Черноземья, включающий определение возраста пациента, уровня систолического и диастолического артериального давления, наличие отягощенного семейного анамнеза, наличие сопутствующих неинфекционных заболеваний глаз, микрососудистых изменений в конъюнктиве, степень пигментации угла передней камеры, забор периферической венозной крови и выделение ДНК, отличающийся тем, что проводят анализ полиморфизма гена VEGF-A с.-958C>T (rs833061), после чего определяют значения дискриминантных показателей Dp и Dk по формулам:
Dp = -110,685 + 1,175·x1 + 0,383·x2 + 0,892·x3 + 5,434·x4 + 2,742·x5 -14,578·x6 -0,391·x7 + 8,193·x8,
Dk = -94,672 + 1,089·x1 + 0,308·x2 + 0,953·x3 + 3,483·x4 + 0,243·x5 -11,515·x6 -2,607·x7 + 7,026·x8,
где x1 - возраст (лет), x2 - систолическое артериальное давление (мм рт. ст.), x3 - диастолическое артериальное давление (мм рт. ст.), x4 - отягощенный семейный анамнез (нет - x4=0; есть - x4=1), x5 - наличие сопутствующих неинфекционных заболеваний глаз (нет - x5=0; есть - x5=1), x6 - микрососудистые изменения в конъюнктиве (нет - x6=0; есть - x6=1), x7 - степень пигментации угла передней камеры (нет - x7=0; I степень - x7=1; II степень - x7=2; III степень - x7=3; IV степень - x7=4), x8 - генетический вариант по локусу VEGF-A с.-958C>T (TT или CT - x8=1; CC - x8=2), прогнозируют риск развития первичной открытоугольной глаукомы в случае, если Dp больше Dk.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к области медицины, в частности к хирургии, и предназначено для дифференциации природы происхождения рецидивных кист при цистном эхинококкозе.

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу прогнозирования риска госпитальной летальности больных острым коронарным синдромом без подъема сегмента ST.

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ дифференциальной диагностики стадий гонартроза, включающий исследование крови и определение в ее плазме концентрации мочевой кислоты (МК), в мкМ/л, отличающийся тем, что в мононуклеарной фракции крови также определяют активность миелопероксидазы (МПО), в у.е./мин·мг, и активность ксантиноксидоредуктазы (КОР), в МЕ/г, после чего рассчитывают суммарный коэффициент диагностики К по формуле: при выполнении условия 3.1≤К<3.4 диагностируют I стадию; при выполнении условия 3.4≤К<3.9 диагностируют II стадию; при выполнении условия 3.9≤К<5.2 диагностируют III стадию; при выполнении условия К≥5.2 диагностируют IV стадию гонартроза по шкале Kellgren-Lawrence.
Изобретение относится к медицине, а именно к гнойной хирургии, и может быть использовано для профилактики гипертрофических рубцов при лечении флегмон мягких тканей.

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования риска развития инфекционных осложнений у больных злокачественными лимфопролиферативными заболеваниями, получающих программную химиотерапию.
Изобретение относится к медицине, а именно к кардиохирургии, и может быть использовано для лабораторной оценки эффективности лечения фондапаринуксом у кардиохирургических больных с гепарин-индуцированной тромбоцитопенией.

Изобретение относится к области медицины, в частности к онкологии и молекулярной биологии, и предназначено для диагностики плоскоклеточного рака легкого (ПКРЛ). Осуществляют получение исходной пары образцов ткани от пациента, где один из образцов получен из предположительно пораженной раком ткани, а второй - из прилегающей гистологически нормальной ткани, выделение и очистку препаратов РНК, синтез кДНК на матрице РНК, амплификацию фрагмента гена CALL и сравнение количества амплифицированного фрагмента ДНК CALL для образца, полученного из предположительно пораженной раком ткани, с количеством амплифицированного фрагмента ДНК для образца, полученного из нормальной ткани.

Изобретение относится к аналитической химии и касается способа обнаружения наличия микробной биомассы земного типа. Сущность способа заключается в том, что получают тестируемый образец, о котором известно, что он содержит или может содержать микроорганизмы, помещают тестируемый образец в контейнер, отделяют от тестируемого образца компоненты тестируемого образца с микроорганизмами, проводят масс-спектрометрическое исследование компонентов тестируемого образца с микроорганизмами.
Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для оценки угрозы формирования фетоплацентарной системы и развития плода на фоне обострения цитомегаловирусной инфекции в третьем триместре гестации.

Изобретение относится к медицине, а именно к способу оценки риска развития патологии беременности. Сущность способа состоит в том, что в качестве биомаркеров оценки риска развития патологии беременности используют концентрацию гипоксантина, ксантина, мочевой кислоты, для чего сыворотку крови разводят дистиллированной водой, освобождают от белков, маскирующих определение биомаркеров риска развития патологии беременности.

Изобретение относится к области медицинской диагностики и предназначено для прогнозирования риска развития хронического калькулезного холецистита (ХКХ). У женщин русской национальности, являющихся уроженками Центрального Черноземья России, осуществляют забор крови, выделение ДНК и анализ полиморфизмов генов интерлейкинов. В случае выявления генетического варианта -511Т IL-1В, либо сочетания аллелей и генотипов -889ТT IL-1А, -511Т IL-1В и -113Т IL-9, либо сочетания аллелей и генотипов -511Т IL-1В и -113ТТ IL-9, либо сочетания аллелей -511Т IL-1B, -113Т IL-9, -592C IL-10 и -251Т IL-8, либо сочетания аллелей -511Т IL-1B, -703Т IL-5 и -584C IL-4 прогнозируют повышенный риск развития ХКХ. В случае выявления сочетания аллелей -889С IL-1А, -511С IL-1B и -703С IL-5, либо сочетания аллелей -511C IL-1B и -703С IL-5 прогнозируют низкий риск развития ХКХ. Изобретение обеспечивает получение новых критериев оценки риска развития ХКХ у женщин. 8 ил., 7 пр.

Изобретение относится к области медицинской диагностики. Предложен способ прогнозирования характера поражения желчного пузыря у женщин, больных хроническим калькулезным холециститом, русской национальности, являющихся уроженками Центрального Черноземья России. В случае выявления сочетания генотипов -889ТТ и -889СТ IL-1A либо генотипа -174СС IL-6 прогнозируют образование крупного диаметра камня, а в случае выявления генотипа -584СС IL-4 прогнозируют увеличение толщины стенки желчного пузыря более 4 мм. Изобретение обеспечивает эффективное прогнозирование характера поражения желчного пузыря у женщин, больных хроническим калькулезным холециститом. 6 ил., 3 пр.

Изобретение относится к области медицины и предназначено для оценки индивидуального генетического риска атеросклероза. Осуществляют взятие крови, выделение ДНК и генотипирование митохондриальной ДНК. Наличие варианта A1811G свидетельствует о высоком генетическом риске. Наличие вариантов Т204С, G8251A, Т10238С, G12501A свидетельствует о низком генетическом риске. Изобретение обеспечивает повышение точности диагностики предрасположенности к атеросклерозу.

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике и гепатологии во внутренних болезнях, и может быть использовано для оценки состояния печени у больных хроническим вирусным гепатитом С. Сущность способа: в цельной крови больного определяют количество тромбоцитов, в сыворотке крови определяют уровень фактора некроза опухоли альфа и концентрацию альбумина, рассчитывают по следующей формуле индекс фиброза печени: ИФ=3,79-0,0056·ТР+0,0855·ФНО-α-0,0352·АЛЬБУМИН. При значении индекса фиброза в интервале от 0 до 0,5 определяют отсутствие фиброза (стадия F0), значение индекса фиброза в интервале от 0,6 до 2,5 соответствует умеренной стадии фиброза (F1-2), значение индекса фиброза более 2,5 соответствует выраженной стадии фиброза (F3-4). Изобретение обеспечивает снижение травматичности, повышение доступности и простоты исполнения при высокой чувствительности и специфичности. 4 пр., 1 табл.

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу прогнозирования чувствительности к химиотерапии у больных с лимфопролиферативными заболеваниями. Сущность способа состоит в том, что в сыворотке крови определяют количественные уровни маркеров тимидинкиназы-1 (TK-1) и β2-микроглобулина (β2-МГ), а также после первого курса химиотерапии активность TK-1. Если активность ТК-1 до начала лечения <150,0 ДЕд/л, то в результате 6-8 курсов XT достигается полная или частичная ремиссия, если уровень β2-МГ до начала лечения <2200,0 мкг/л, то в результате 6-8 курсов XT достигается полная или частичная ремиссия. Если активность ТК-1 после 1 курса химиотерапии возрастает более чем в 4 раза относительно исходного значения, то в результате 6-8 курсов XT достигается полная или частичная ремиссия. Использование заявленного способа позволяет для части пациентов избежать получения неэффективного лечения и его побочных токсических осложнений, улучшить прогноз заболевания за счет рационализации терапии уже на первом этапе. 3 ил., 3 табл., 4 пр.

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ оценки литогенности желчи, включающий определение в желчи у обследуемого (i) показателей холестерина (ХС, ммоль/л) в сравнении со средними значениями, принятыми за норму (k), отличающийся тем, что в желчи определяют комплекс общих липидов (ОЛ, г/л), суммарную антиокислительную активность (АОА) электрохимическим методом (в нА·с), максимум вспышки хемилюминесценции (МВХЛ, в усл. ед.) и площадь хемилюминесценции (ПХЛ, в усл. ед. площади), далее вычисляют интегральный показатель литогенности желчи (ИПЛi) по формуле: где Ki и Kk - коэффициент разведения - кратность разведения пробы желчи обследуемого и пробы желчи, принятой за норму, с ИПЛ не более 1,1 единиц литогенности - соответственно при определении АОА, и чем выше значение ИПЛi, тем более высокая степень литогенности желчи с риском развития холелитиаза. Способ позволяет оптимизировать выбор метода декомпрессии желчевыводящих путей, направленных на предупреждение ранней инкрустации эндопротезов, что позволяет повысить эффективность лечебных мероприятий. 6 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к способу диагностики псориаза. Сущность способа состоит в том, что он включает исследование показателей системы свертывания крови и тромбообразования пациента: скорость роста сгустка крови, и/или задержку роста сгустка, и/или начальную скорость роста сгустка, и/или стационарную скорость роста сгустка, и/или размер сгустка. Сравнивают, по крайней мере, один показатель с соответствующими средними показателями здоровых людей и при превышении, по крайней мере, одного из указанных показателей пациента c соответствующим средним показателем для здоровых людей ставят диагноз псориаз. Способ обеспечивает достоверное и эффективное диагностирование псориаза. 7 пр.
Изобретение относится к области медицины, в частности к онкологии, и предназначено для персонализированного назначения неоадъювантной химиотерапии (НАХТ) больным люминальным В раком молочной железы. До начала лечения осуществляют забор биопсийного материала опухоли, в котором проводят микрочиповое исследование ДНК с определением маркеров: делеции локусов генов ABCB1-7q21.1, АВСВ3-6р21.32, АВСС1-16р13.1, ABCG2-4q22, MVP-16p11.2; делеции 18p11.21; делеции 11q22.1-23.3; амплификацию 1q24.1-43. Пациентам, в опухолевой ткани которых не обнаружено ни одного из указанных маркеров, начинают лечение с хирургического вмешательства в объеме радикальной мастэктомии или органосохраняющей операции. Пациентам, у которых обнаружен хотя бы 1 из указанных маркеров, до хирургического вмешательства выполняют НАХТ. Изобретение обеспечивает увеличение эффективности НАХТ, адекватное планирование лечения в адъювантном режиме и улучшение отдаленных результатов. 4 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии, и может быть использовано для внутрипортальной озонотерапии при распространенном перитоните. Озонирование проводят посредством медицинского озонатора с концентрацией озона в озонокислородной смеси не менее 1000 мкг/л. После устранения источника перитонита, проведения назоинтестинальной интубации, лаважа и дренирования брюшной полости перед ушиванием срединной раны выполняют реканализацию и катетеризацию пупочной вены с ее канюлированием. Затем проводят внутрипортальную инфузию озонированным перфтораном в 1-2 сутки после операции капельным способом по 40 капель в 1 минуту. Затем на 3-5 сутки после этого проводят внутрипортальную инфузию озонированным физиологическим раствором. Способ обеспечивает снижение эндогенной интоксикации у больных с распространенным перитонитом и уменьшение числа послеоперационных осложнений и послеоперационной летальности. 3 табл., 5 ил., 1 пр.
Наверх