Способ диагностики ранних стадий наружного генитального эндометриоза


 


Владельцы патента RU 2592240:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ростовский научно-исследовательский институт акушерства и педиатрии" Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)

Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ диагностики ранних стадий наружного генитального эндометриоза путем исследования биологической жидкости. В предлагаемом способе в утренней порции мочи женщин определяют содержание 6-сульфатоксимелатонина и при его концентрации, равной 41 нг/мл и ниже, диагностируют наружный генитальный эндометриоз I-II стадии. Осуществление изобретения позволяет упростить способ диагностики при сохранении высокой точности. 3 пр.

 

Изобретение относится к области медицины, а именно к гинекологии, и найдет широкое применение для ранней диагностики наружного генитального эндометриоза (НГЭ).

По мнению Л.В. Адамян и соавт. (2014) отмечается продолжение роста процента эндометриоза (с 0,05% до 0,2%), что объясняется ранним началом половой жизни, прерыванием беременности в анамнезе и поздней реализацией репродуктивной функции.

До настоящего времени визуальный осмотр малого таза при лапароскопии остается «золотым стандартом» диагностики и лечения эндометриоидных гетеротопий при наружном генитальном эндометриозе (Kennedy S.H., 2005). К сожалению, лапароскопия - это инвазивная процедура, для которой характерны достаточно серьезные осложнения (Bokor К.С.А., 2009).

Отсутствие неинвазивных и полуинвазивных методов диагностики приводит к задержке при постановке правильного диагноза в среднем на 8 лет (Gajbhiye R. et al., // Identification and validation of novel serum markers for early diagnosis of endometriosis - Hum. Reprod. - 2012, Vol. 27 (2), P. 408-17). Особенно это актуально в отношении «малых форм» эндометриоза, так как качественная неинвазивная диагностика способна предотвратить прогрессирование его в более тяжелые, а как известно, почти в 50% случаев заболевание прогрессирует.

В настоящее время отсутствует надежная неинвазивная диагностика малых форм эндометриоза (Rogers Р.А. et al. // Priorities for endometriosis research: recommendations from an international consensus workshop. - Reprod Sci - 2009, Vol. 16, P. 335-346), что приводит к увеличению промежутка времени между первым проявлением симптомов боли, бесплодия и хирургическим подтверждением диагноза (Чернуха Г.Е. Эндометриоз и хроническая тазовая боль: причины и последствия. Проблемы репродукции, 2011, №5, с. 83-89).

Метод ультразвуковой диагностики имеет высокую чувствительность 74% и специфичность 75% (Van Holsbeke С. et al., 2010) в отношении эндометриоидных кист яичников, в зависимости от квалификации ультразвукового специалиста может эффективно работать при выявлении ретроцервикального эндометриоза, но, к сожалению, абсолютно бесполезен в отношении «малых» форм эндометриоза. То же самое касается и высокотехнологичных методов: компьютерная томография (КТ) и магнитно-резонансная томография (MPT) (Busard М. P. et al., 2010; Lee Y.R., 2011).

В последние годы было проведено огромное количество исследований для выявления в крови биомаркеров эндометриоза. В том числе СА-125, лептин, МРС-1 (monocyte chemoattractan protein 1), RANTES (regulated upon activation normal T-cell expressed and secreted), несколько цитокинов: TNFα, IL-6, IL-8, IL-1α (Agic A. et al. // Combination of CCR1 mRNA, MCP1, and CA125 measurements in peripheral blood as a diagnostic test for endometriosis - Reprod. Sci. - 2008; Vol. 15, P. 906-911; Dunselman G.A.J, et al. // ESHRE guideline: management of women with endometriosis. - Human Reproduction, Vol. 0, No. 0 pp. 1-13, 2014).

В ходе разработки модели для неинвазивной (без операции) диагностики группой ученых из Бельгии осуществлялось определение двадцати восьми различных биомаркеров в образцах плазмы (сыворотки) крови, полученных от 296 женщин в разные фазы менструального цикла. В результате проведения сложной статистической обработки были разработаны две панели биомаркеров. В первую модель с чувствительностью 81% и специфичностью 76% вошли: AnnexinV, VEGF, s-ICAM1 и СА-125. Вторая модель включает в себя 4 биомаркера: Annexin V, VEGF, гликоделин и СА-125, с чувствительностью 81% и специфичностью 75% (Vodolazkaia А., 2012).

По результатам анализа научно-медицинской и патентной литературы можно установить, что основная часть уже разработанных способов диагностики НГЭ является инвазивной.

Известен способ ранней диагностики наружного генитального эндометриоза (патент РФ №2247391, 27.02.2005) путем исследования биоптата эндометрия, отличающийся тем, что в пробе ткани определяют активность катепсина D и при ее значении 0,1 Ед ферм.акт/ч и менее диагностируют наружный генитальный эндометриоз.

Однако частота гистологического подтверждения диагноза колеблется от 70 до 85%. Положительный результат подтверждает диагноз эндометриоза, в то время как отрицательный совершенно не исключает эндометриоидную болезнь, так как на исследование могут попасть лишь отдельные кусочки тканей, лишенные характерных морфологических признаков эндометриоза (Баскаков В.П., Цвелев Ю.В., Кира Е.Ф. Эндометриоидная болезнь. Санкт-Петербург, 2002, 448 с.).

Известен способ диагностики наружного генитального эндометриоза (патент РФ №2291439, 2007 г.) у женщин с бесплодием, в периферической венозной крови которых определяют показатель относительного содержания CD 16+ моноцитов в моноцитарном гейте и при его значениях, равных или меньших 45%, диагностируют наружный генитальный эндометриоз.

Основным недостатком предложенного способа является технически трудоемкое его выполнение. Для определения содержания CD 16+ в моноцитарном гейте изначально фиксируются три основных параметра. Это осуществляется высококвалифицированным специалистом, что ограничивает возможность широкого применения данной методики.

Известен способ диагностики наружного генитального эндометриоза (патент РФ №2363001, 27.07.2009) по определению в перитонеальной жидкости, полученной при лапароскопии, и в сыворотке крови определяют содержание сосудисто-эндотелиального фактора роста (СЭФР), и если отношение содержания СЭФР в сыворотке крови к содержанию СЭФР в перитонеальной жидкости больше 4,35, диагностируют наличие наружного генитального эндометриоза.

К недостаткам данного метода можно отнести следующее:

- для получения перитонеальной жидкости необходимо выполнение лапароскопии, что является травматичным вмешательством,

- трудновыполним.

Известен способ диагностики наружного генитального эндометриоза (патент РФ №2526823, 27.08.2014), включающий исследование сыворотки крови, отличающийся тем, что в сыворотке крови биохимическим методом определяют содержание липопротеинов высокой плотности и при величине 0,77 ммоль/л и выше диагностируют наружный генитальный эндометриоз.

Недостатком данного метода является отсутствие возможности диагностики стадий эндометриоза.

Прототипом данного изобретения избран способ диагностики НГЭ по определению содержания в моче CYFRA 21.1 (растворимого фрагмента цитокератина 19) (May К.Е. et al. // Peripheral biomarkers of endometriosis: a systematic review - Hum. Reprod. - 2010, Vol. 16 (16), P. 651-74). Цитокератин 19 - это кодирующийся разными генами белок эпителиальных клеток, который экспрессируется в соответствии с типом эпителия. В патогенных клетках экспрессия цитокератинов увеличивается во много раз, в результате чего растворимые фрагменты попадают в лимфу, кровь и мочу.

Сущность способа-прототипа состоит в том, что в моче определяют содержание CYFRA 21.1, повышенные количества которого используются для диагностики НГЭ.

Данный способ обладает рядом несовершенств:

1. Метод неспецифичен, так как цитокератин 19 является онкомаркером для полиморфно-клеточного рака легкого, рака шейки матки, молочной железы, мочевого пузыря, яичников (Molina R., Aguusti С, Mane М. et al. CYFRA 21-1 in lung cancer: comparison with CEA, С A 125, SCC and NSE serum levels. - Int. J. Biol. Markers - 1994, Vol. 9, P. 96-101.

2. Ограничение возможности широкого применения метода (наличие оборудования и тест-наборов только в крупных перинатальных центрах).

3. Для выполнения метода необходим высококвалифицированный специалист.

Указанные недостатки устраняются в заявляемом изобретении. Задача заявляемого изобретения: разработка неинвазивного способа, позволяющегос высокой точностью диагностировать наружный генитальный эндометриоз I-II стадии.

Поставленная задача решается тем, что в утренней порции мочи женщин определяют содержание 6-сульфатоксимелатонина и при его концентрации, равной 41 нг/мл и ниже, диагностируют наружный генитальный эндометриоз I-II стадии.

Технический результат, получаемый в результате использования данного способа, заключается в том, он прост в исполнении, а определяемый уровень мелатонина позволяет диагностировать НГЭ и даже I-II (минимальные) его стадии и своевременно назначить лечебные и профилактические мероприятия.

Следует отметить, что выраженные формы НГЭ чаще всего сопровождаются наличием эндометриоидных кист яичников, для диагностики которых используется с высокой достоверностью 75% и специфичностью 74% ультразвуковое исследование (Van Holsbeke С. et al., 2010). Минимальные же формы НГЭ (I-II стадия) диагностируются только при выполнении лапароскопии.

Как известно, оксидативный стресс является одним из звеньев в патогенезе наружного генитального эндометриоза (Bedaiwy М.А. et al., 2002; Адамян Л.В. и соавт., 2012; Darling A.M., 2013). В свою очередь, мелатонин (МТ), гормон пинеальной железы, является мощным антиоксидантом и активатором антирадикальной защиты организма, с другой стороны, он обладает выраженным антипролиферативным действием (Anisimov V.N., 2003; Vinogradova LA. et al., 2010). В настоящее время физиологическая и патофизиологическая роль мелатонина активно изучается. К основным эффектам МТ можно отнести: влияние на развитие половых органов, пигментный обмен, контроль циркадианных и сезонных ритмов, антиопухолевое, антигонадотропное действие, а также сильнейшая антиоксидантная способность (Reiter R.J., et al. 2005). Получены данные, позволяющие считать мелатонин одним из наиболее мощных эндогенных антиоксидантов. Нарушение ритма и продукции мелатонина является пусковым моментом, приводящим на начальных этапах к десинхронозу, за которым следует возникновение органической патологии. Таким образом, факт нарушения продукции мелатонина может являться причиной возникновения различных заболеваний, в том числе и эндометриоза, который считается «болезнью цивилизации», рост заболеваемости которым в России в течение последних 10 лет отмечен на 76,8% (Шестакова О.В., 2015). В доступной отечественной и зарубежной литературе сведения о продукции мелатонина у пациенток с эндометриозом весьма ограничены. С учетом имеющихся данных о сниженной продукции предшественника мелатонина - серотонина - у пациенток с эндометриозом (Чернышова И.В., 2013), можно предположить, что изменение содержания мелатонина может быть рассмотрено в патогенезе заболевания с учетом его биологических свойств и в качестве неинвазивного маркера.

В нашем исследовании выявлены достоверные изменения уровня метаболита МТ (6-сульфатоксимелатонина) в моче у пациенток с наружным генитальным эндометриозом I-II стадии, что послужило основанием считать его специфическим маркером для данной патологии.

Определение параметров мелатонина у пациенток с эндометриозом позволит выбрать тактику ведения пациенток и использовать дополнительные лечебные и профилактические меры для коррекции обнаруженных изменений (препарат мелатонин, изменение режима сна-бодрствования, уменьшение инсоляции).

Подробное описание способа и примеры его клинического выполнения.

У пациентки, имеющей в анамнезе болевой синдром и/или бесплодие, производят забор утренней порции мочи. Для определения 6-сульфатоксимелатонина в моче используют иммуноферментный метод с использованием аппаратуры HYDROFLEX TECAN (Австрия), SUNRISE TECAN (Австрия), тест-систем BUHLMANN LABORATORIES AG (Швейцария) согласно протоколу исследования. Если содержание 6-сульфатоксимелатонина равно или меньше 41,0 нг/мл, диагностируют наружный генитальный эндометриоз I-II стадии.

Работоспособность заявляемого способа подтверждена следующими клиническими примерами.

Пример 1. Больная Ш-ва, 32 года. Поступила в гинекологическое отделение №1 РНИИАП 22.01.2014 г.

В утренней порции мочи пациентки содержание 6-сульфатоксимелатонина определяли тест-системой BUHLMANN LABORATORIES AG (Швейцария) на биохимическом оборудовании HYDROFLEX TECAN (Австрия), SUNRISE TECAN (Австрия).

Содержание 6-сульфатоксимелатонина в моче составило 41,8 нг/мл. Согласно нашей методике полученное содержание 6-сульфатоксимелатонина в моче позволило диагностировать наружный генитальный эндометриоз I-II стадии. При выполнении лапароскопии был подтвержден диагноз: Наружный генитальный эндометриоз I стадия Эндометриоз правого яичника. Женское бесплодие. Хроническая воспалительная болезнь матки. Гиперплазия эндометрия 23.01.2014 г. Проведены: лапароскопия, хромогидротубация, электрокоагуляция очагов эндометриоза, диагностическое выскабливание стенок полости матки.

Пример 2. Больная К-ич, 27 лет. Поступила в гинекологическое отделение №1 РНИИАП 10.12.2013 г. Содержание 6-сульфатоксимелатонина в моче составило 48,60 нг/мл. Согласно нашей методике полученное содержание 6-сульфатоксимелатонина в моче свидетельствовало об отсутствии эндометриоза. 11.12.2013 г. Проведена: Лапароскопия. Хромогидротубация. Дриллинг яичников. Дренирование брюшной полости. Гистероскопия. Диагностическое выскабливание стенок полости матки. Биопсия шейки матки. Подтверждено отсутствие НГЭ. Диагноз: Первичное бесплодие. Хронический метроэндометрит. Гиперплазия эндометрия.

Пример 3. Больная О-ная, 30 лет. Поступила в гинекологическое отделение №1 РНИИАП 12.12.2012 г. Содержание 6-сульфатоксимелатонина в моче составило 41,0 нг/мл. Согласно нашей методике полученное содержание 6-сульфатоксимелатонина в моче позволяет диагностировать наружный генитальный эндометриоз I-II стадии. 15.11.2012 г. Проведена: Лапароскопия. Хромогидротубация. Биопсия брюшина. Электрокоагуляция очагов эндометриоза. Гистероскопия. Диагностическое выскабливание стенок полости матки. Подтвержден диагноз: Наружный генитальный эндометриоз I стадия. Женское бесплодие. Фиброма левой маточной трубы. Гиперпластический процесс эндометрия.

Гистологическое исследование подтвердило наличие у пациентки наружного генитального эндометриоза.

По заявленному способу обследовано 88 пациенток (63 - с эндометриозом и 25 группы контроля), уровень 6-сульфатоксимелатонина был ниже 41 нг/мл у 28 женщин и равен 41 нг/мл у 13 женщин, у всех пациенток был гистологически подтвержден НГЭ I-II стадии и 25 женщин группы контроля - пациентки репродуктивного возраста без эндометриоза. Уровень 6-СОМТ выше 41 нг/мл.

Таким образом, заявляемый способ более эффективен по сравнению с известными и обладает рядом преимуществ:

1. Метод обладает высокой точностью, малотравматичен.

2. Исключает необходимость многократного проведения исследования, экономичен и прост в выполнении.

3. Клиническое применение способа позволяет своевременно диагностировать наружный генитальный эндометриоз I-II стадии, начать своевременное лечение.

4. Метод клинически эффективен и может быть рекомендован к использованию в гинекологической практике.

Способ диагностики ранних стадий наружного генитального эндометриоза путем исследования биологической жидкости, отличающийся тем, что в утренней порции мочи женщин определяют содержание 6-сульфатоксимелатонина и при его концентрации, равной 41 нг/мл и ниже, диагностируют наружный генитальный эндометриоз I-II стадии.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к клинической биохимии и может быть использовано для выделения и определения холестерина множественно модифицированных липопротеинов низкой плотности (ммЛНП) в сыворотке крови человека.

Изобретение относится к области медицины, в частности к неврологии, и может быть использовано для диагностики течения «асимптомного» каротидного атеросклероза. Диагностику течения «асимптомного» каротидного атеросклероза проводят путем иммуноферментного определения в плазме крови биомаркеров.

Изобретение относится к ветеринарной вирусологии, а именно к получению диагностических препаратов. При осуществлении предлагаемого способа получения сыворотки для диагностики алеутской болезни норок (АБН) получают высокоочищенный вирусный антиген путем гомогенизации органов инфицированных АБН норок с последующим трехкратным замораживанием/размораживанием гомогената, дезинтеграции клеточного гомогената трехкратной ультразвуковой обработкой, осаждением неразрушенных клеток двукратным низкоскоростным центрифугированием, последующим осаждением иммунных комплексов, уплотнением осадка низкоскоростным центрифугированием, экстрагированием иммунных комплексов (ИК) минимальными количествами ТНЭ буфера путем трехкратной экстракции на холоду в течение 1-2 часов с последующим низкоскоростным центрифугированием, осаждением ИК высокоскоростным центрифугированием из объединенных экстрактов при 30000 об/мин в течение 2,5 часов, извлечением ИК из осадка минимальными количествами ТНЭ буфера путем трехкратного экстрагирования на холоду в течение 1-2 часов с последующим низкоскоростным центрифугированием, диссоциацией иммунных комплексов в кислой среде в течение 1 часа на холоду, отделением вируса АБН-Ф от антител высокоскоростным ультрацентрифугированием, растворением осадка в минимальном количестве карбонатного буфера, отделением ферритина от вирусных частиц на колонке с сефарозой 6B в системе карбонатного буфера.

Настоящее изобретение относится к медицине, а именно к урологии, и может быть использовано для обнаружения инфекции мочевыводящих путей у пациента. Для этого способ включает получение образца от пациента и обнаружение в указанном образце экспрессии рецептора CD1d на NKT-клетках и BCL6 в тканях мочевого пузыря.
Изобретение относится к области медицинской диагностики и может быть использовано для раннего прогнозирования невынашивания беременности. Способ включает выделение РНК из эпителиальных клеток цервикального канала у женщин, проведение обратной транскрипции с получением мДНК, определение экспрессии CASP-3α (отн.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к модифицированному тамавидину, и может быть использовано для детекции связанной с биотином субстанции. Получают модифицированный биотин-связывающий белок на основе тамавидина с последовательностью SEQ ID NO: 2, который содержит до 7 мутаций и при этом остаток аспарагина в 115 положении заменен на цистеин.

Изобретение относится к медицине, а именно к трансфузиологии, и может быть использовано для контроля эффективности облучения донорской крови. Способ включает постановку реакции бласттрансформации клеток крови с митогеном фитогемагглютинином и учет результатов реакции путем определения индекса стимуляции лимфоцитов.

Изобретение относится к биохимии. Описано моноклональное антитело, которое специфически связывается с липоарабиноманнаном кислотоустойчивых бацилл, в частности с липоарабиноманнаном туберкулезной бациллы.

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой пептид, который имеет аминокислотную последовательность, состоящую из смежных аминокислот, полученных из белка WT1, и индуцирует WT1-специфические хелперные Т-клетки связыванием с молекулой МНС класса II.

Изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано в диагностике сенсибилизации организма к формальдегиду. Для этого определяют относительное содержание аутоантител к мембранным антигенам паренхимы легких LuM и к β2-гликопротеину.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и позволяет прогнозировать угрожающий поздний выкидыш у беременных женщин. Для этого в сроке 5-12 недель гестации определяют относительное количество CD178+ моноцитов гестации в периферической венозной крови. При его значении равном 37,7% или менее в моноцитарном гейте прогнозируют угрожающий поздний выкидыш у женщин с угрозой прерывания беременности ранних сроков и привычным невынашиванием в анамнезе. Использование данного способа позволяет выбрать правильную тактику ведения беременности, провести комплекс лечебно-профилактических мероприятий и снизить риск развития осложнений и неблагоприятных исходов беременности в группе женщин с высоким риском невынашивания беременности. 3 пр., 1 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и может быть использовано для диагностики вероятности развития локального воспаления в миоматозном узле. Для этого определяют средний уровень иммунореактивности СИР образцов сыворотки крови к антигену Spr-06. При значении СИР к антигену SPR-06 в диапазоне от +11% до +20% или от -21% до -30% прогнозируют течение миомы матки с развитием локального воспаления в миоматозном узле. При значении СИР к антигену SPR-06 выше +20% или ниже -30% диагностируют нарушение питания в миоматозном узле, что является показанием к хирургическому лечению. Использование данного способа позволяет прогнозировать на основании данных анализа крови течение миомы матки с развитием клинической симптоматики. 1 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования развития кровотечений у женщин с миомой матки. Способ включает определение уровня аутоантител к TrM-03 в сыворотке крови. При его значении в сравнительном аспекте со средней популяционной нормой в диапазонах от +11% до +20% или от -21% до -30% прогнозируют небольшую вероятность развития маточных кровотечений. Это является показанием к проведению консервативного лечения с дальнейшим контролем показателей указанных аутоантител. При его значении выше +20% и ниже -30% прогнозируют развитие кровотечений, что является показанием к проведению хирургического лечения. Способ позволяет с высокой точностью прогнозировать течение миомы матки и подбирать наиболее подходящий метод лечения для каждой пациентки. 1 табл., 4 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к пульмонологии, аллергологии, кардиологии, функциональной диагностике, и может быть использовано для прогнозирования развития диастолической дисфункции левого и правого желудочков и своевременной коррекции терапии у больных бронхиальной астмой. Сущность способа: оценивают уровень остеопонтина в плазме крови методом твердофазного иммуноферментного анализа, и при значении остеопонтина 36 нг/мл и более прогнозируют развитие диастолической дисфункции обоих желудочков. Предлагаемый способ обеспечивает своевременную коррекцию терапии у больных бронхиальной астмой, дает возможность своевременной коррекции терапии заболевания. 1 табл., 3 пр.
Представленная группа изобретений касается способа получения концентрата культуры клеток бруцелл из штамма Brucella abortus 19 для приготовления бруцеллезных антигенов, способа получения концентрата клеток бруцелл из штамма Brucella abortus 19 для получения сыворотки бруцеллезной диагностической, способа получения единого бруцеллезного антигена РА, РСК и РДСК, способа получения бруцеллезного антигена для роз-бенгал пробы (РБП), способа получения бруцеллезного антигена для кольцевой реакции (КР) с молоком, способа получения сыворотки бруцеллезной диагностической, тест-системы для диагностики бруцеллеза животных в РА, РСК и РДСК, тест-системы для диагностики бруцеллеза животных в РБП и тест-системы для диагностики бруцеллеза животных в КР с молоком. Охарактеризованный способ получения концентрата культуры клеток бруцелл из штамма Brucella abortus 19 для приготовления бруцеллезных антигенов, используемых в диагностических тест-системах, включает получение посевного материала бактериальных клеток и их культивирование в глубинных условиях на жидкой питательной среде с регулированием уровня концентрации растворенного в культуральной среде кислорода на протяжении всего процесса культивирования, нактивацию выросших бактериальных клеток нагреванием с последующим их концентрированием. При этом процесс культивирования бактериальных клеток осуществляют при температуре 36-38°C, в процессе культивирования на этапе накопления бактериальных клеток от концентрации 1,5-2,5 млрд м.к./см3 до концентрации 10 млрд м.к./см3 выдерживают концентрацию растворенного кислорода в культуральной среде в интервале 20-25 мг/л, а свыше 10 млрд м.к./см3 и до достижения бактериальными клетками стационарной фазы роста обеспечивают концентрацию растворенного кислорода в культуральной среде в интервале значений 40-45 мг/л, а концентрирование выросших бактериальных клеток осуществляют посредством осаждения флокулянтом, в качестве которого используют натриевую соль карбоксиметилцеллюлозы (КМЦ), который добавляют в культуральную среду в количестве 0,1-0,15 г по сухому веществу на 1 литр культуральной среды, после чего сливают надосадок с получением концентрата инактивированных бактериальных клеток для последующего приготовления бруцеллезного антигена в РА, РСК, РДСК, антигена РБП; антигена КР с молоком. Изобретения могут быть использованы для диагностики бруцеллеза животных. 9 н. и 29 з.п. ф-лы, 5 пр.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и медицине, в частности может быть использовано для детектирования присутствия и/или количества наркотических или психотропных веществ в биологических жидкостях человека. Предлагаемый способ позволяет детектировать в крови и моче малые количества опиатов, никотина, кокаина, марихуаны, фентанила, метадона, бензодизепинов, барбитуратов и амфетаминов при проведении диагностики ранних стадий употребления. Сущность способа заключается в том, что на дне лунок микропланшета иммобилизуют в виде по крайней мере двух микрообластей растворы конъюгатов бензоилэкгонина, тетрагидроканнабинола, амфетамина, морфина, фентанила, метамфетамина, метилендиокситамфетамина, метадона, бензодиазепина, барбитурата и котинина с белком, при проведении анализа в часть лунок микропланшета вносят мультианалитные калибровочные пробы, содержащие смесь указанных конъюгатов наркотиков с белком в буферном растворе, причем для исследования образцов мочи и сыворотки крови используют одни и те же мультианалитные калибровочные пробы, а в остальные лунки вносят исследуемые образцы мочи и/или крови, во все лунки добавляют раствор в реакционном буфере смеси биотинилированных мышиных моноклональных антител к искомым наркотикам для получения меченных биотином иммунных комплексов на дискретных микрообластях, детектируют излучение фосфоресценции на каждой дискретной области во всех лунках одновременно, строят калибровочные кривые, с которыми сравнивают измеренные значения фосфоресценции. 9 з.п. ф-лы, 4 ил., 4 табл., 7 пр.

Изобретение относится к области сельского хозяйства и ветеринарии и предназначено для определения жизнеспособности новорожденных телят. Способ включает взятие у телят венозной крови через 24-36 часов после рождения в утренние часы до кормления, определение в сыворотке крови концентрации кортизола и дегидроэпиандростерон-сульфата и расчет индекса жизнеспособности как соотношение концентрации кортизола (нМ/л) к концентрации дегидроэпиандростерон-сульфата (нМ/л). При значениях индекса жизнеспособности более 2,0 у телят устанавливают пониженную жизнеспособность. Заявленное изобретение позволяет быстро и точно определить жизнеспособность телят. 1 з.п. ф-лы, 2 табл., 2 пр.

Группа изобретений относится к медицине и касается способа количественного определения нескольких антиген-специфических иммуноглобулинов в анализируемом образце, включающего стадию анализа связывания серии образцов, содержащих иммуноглобулин известной антигенной реактивности, с несколькими антигенными компонентами или их фрагментами, иммобилизованными на твердой подложке. Группа изобретений также касается способа калибровки устройства, подходящего для анализа связывания нескольких антиген-специфических иммуноглобулинов с несколькими антигенами или их фрагментами, иммобилизованными на твердой подложке; и набора для осуществления указанных способов. Группа изобретений обеспечивает высокий уровень количественной оценки и калибровки. 3 н. и 20 з.п. ф-лы, 1 пр., 2 ил., 1 табл.
Наверх