Способ оценки индуцирующего действия цитомегаловирусной инфекции на активность липоевой кислоты в синцитиотрофобласте плаценты на третьем триместре гестации

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для оценки индуцирующего действия цитомегаловирусной инфекции на активность липоевой кислоты в синцитиотрофобласте плаценты на третьем триместре гестации. Для этого в периферической крови определяют титр антител к цитомегаловирусу и выполняют гистохимическую реакцию на выявление липоевой кислоты. При титре антител к ЦМВ до 1:1600 и снижении активности липоиддегидрогеназы до 23,50±0,95 усл. ед. развивается угроза функционирования плаценты и развития плода. Способ позволяет оценить индуцирующее действие цитомегаловирусной инфекции на активность липоевой кислоты в синцитиотрофобласте плаценты. 2 ил.

 

1. Цель изобретения - разработать способ оценки влияния цитомегаловирусной инфекции на активность липоевой кислоты в синцитиотрофобласте плаценты на третьем триместре гестации.

2. Изобретение относится к медицине, а именно к разработке способа, позволяющего оценить влияние цитомегаловирусной инфекции на активность липоевой кислоты, играющей роль кофермента в окислительно-восстановительном процессе цикла Кребса.

3. Раскрытие изобретения

Липоевая кислота - это химическое соединение из группы витаминоподобных кислот, которое в небольших количествах синтезируется в организме. Липоевая кислота является коферментом в комплексах (дегидрогеназ), обеспечивающих этапы метаболизма глюкозы [2, 6, 7]. Липоевая кислота как кофактор вовлечена в митохондриальный метаболизм. В аэробных условиях пируват проникает в митохондрии и в ходе комплексной реакции пируватдегидрогеназы конвертируется в ацетил-СоА для участия в цикле Кребса. В этом процессе участвует целый ряд коферментов, в том числе и липоевая кислота [7-9]. Увеличение липоевой кислоты повышает эффективность конвертации пирувата в ацетил-СоА и тем самым увеличивает количество медиаторов анаэробного метаболизма. Липоевая кислота наряду с участием в синтезе ацетил-СоА выполняет в организме еще и роль антиоксиданта[1-5].

4. Новая техническая задача

Разрабатывается способ, позволяющий путем определения активности липоевой кислоты в синцитиотрофобласте оценить влияние цитомегаловирусной инфекции на характер окислительно-восстановительных процессов в плаценте в период гестации.

5. В доступной литературе не имеется сведений, касающихся оценки активности липоевой кислоты в окислительно-восстановительном процессе в синцитиотрофобласте плаценты. В настоящем исследовании учитывается еще и характер участия липоевой кислоты в окислительно-восстановительных процессах в плаценте при обострении цитомегаловирусной инфекции.

6. Осуществление изобретения

6.1. Обследовано 20 беременных в возрасте 18-25 лет с хронической цитомегаловирусной инфекцией (ХЦМВИ) в стадии обострения на 25-26 неделях гестации с титром антител к ЦМВ 1:1600 и 10 беременных, не болевших на всем протяжении беременности. Диагноз обострения ХЦМВИ устанавливался при комплексном исследовании периферической крови на наличие IgM к ЦМВ или четырехкратного и более нарастания титра антител IgG в парных сыворотках в динамике через 10 дней, индекса авидности более 65%, а также наличия ДНК ЦМВ. Исследования проводились с учетом требований Хельсинской декларации Всемирной медицинской ассоциации «Этические принципы проведения научных исследований с участием человека» с поправками 2008 г. и правилами клинической практики в РФ, утвержденными приказом Министерства РФ №266 от 19.06.2003 г. Верификация ЦМВ, определение типоспецифических антител, индекс авидности осуществлялись методами ИФА на спектрофотометре «Stat-Fax-2100» (США) с использованием тест-систем ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск), методами ПНР на аппарате ДТ-96 с использованием наборов НПО «ДНК-технология» (Москва).

6.2. Статистический анализ и обработку данных проводили с использованием пакета прикладных программ «Statistica v. 6.0» (StatSoft Inc., США). Для определения достоверности различий использовали непарный параметрический критерий Стьюдента. Для определения достоверности различий в случае негауссовых распределений - непараметрические критерии Колмогорова-Смирнова и Манна-Уитни. Критический уровень значимости был принят за 5% (0,05). Данные представлены как среднее арифметическое (М) ± стандартная ошибка среднего арифметического (m).

6.3. Реакция проводилась на свежезамороженных срезах. Активность липоевой кислоты определяли гистохимическим методом. Субстратом служил 0,1 М раствор липоевой кислоты фирмы ICN (США) на фосфатном 0,1 М буфере рН 7,5-1 мл, нитросиний тетразолий фирмы ICN (США) - 1 мг. Инкубация проводилась при температуре 37°С в течение 30 мин. Срезы промывались в дистиллированной воде, слегка подсушивались и заключались в глицерин-желатин. Полученные препараты изучались под цифровым микроскопом, соединенным с компьютером по программе Scion (США), с целью цитофотометрическим методом по количеству продуктов реакции на липоевую кислоту определять ее активность в синцитиотрофобласте.

7. Полученные данные

В процессе исследования получены следующие результаты. В синцитиотрофобласте ворсинок плаценты рожениц, перенесших на 25-26 неделях гестации обострение цитомегаловирусной инфекции до титра антител к ЦМВ 1:1600, резко подавлялась активность на липоевую дегидрогеназу, выполненную гистохимическим методом: 0,1М раствор липоевой кислоты на фосфатном буфере рН 7,5-1 мл с добавлением нитросинего тетразолия - 1 мг, с инкубацией в течение 30 мин при температуре 37°С. Срезы промывались в дистиллированной воде и заключались в глицерин-желатин. Интенсивность реакции подсчитывали цитофотометрическим способом по программе Scion до 23,50±0,95 усл. ед. (контроль - 68,30±1,50 усл. ед.). Полученные данные свидетельствуют, что при обострении цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре гестации в синцитиотрофобласте снижается активность кофакторов, обеспечивающих синтез ацетил-СоА, подавляя тем самым уровень окислительно-восстановительных процессов в фетоплацентарном барьере, что снижает функциональную активность плаценты беременной и создает угрозу развития плода.

На фигуре 1 изображена гистохимическая реакция на активность липоиддегидрогеназы в синцитиотрофобласте ворсинок плаценты рожениц, не болевших на всем протяжении гестации. Гистохимическая реакция по Лойда. Цитофотометрически активность - 68,30±1,50 усл. ед. Увеличение - 10×90.

На фигуре 2 изображена гистохимическая реакция на активность липоиддегидрогеназы в синцитиотрофобласте ворсинок плаценты рожениц с обострением ХЦМВИ на 25-26 неделях гестации. Цитофотометрически по сравнению с контролем активность липоиддегидрогеназной реакции цитофотометрически снижена до 23,50±0,95 усл. ед. Увеличение - 10×90.

Литература

1. Burges S., Burges S.A. The role of chickens in vitamin discoveries // Intern. J. of Poultry Science. 2006. Vol. 5, №8. P. 704-707.

2. Greene E., Nelson K., Robinson M. Buse alpha-Lipoic acid prevents the development of glucose-induced insulin resistance in 3T3-1 adipocytes and accelerates the decline in immunoreactive insulin during cell incubation // Metabolism. 2001. Vol. 50. P. 1063-1069.

3. Lojda Z., Gossrau R. Enzyme Histocheristry. New York: 1979. 270 p.

4. Miquel J. Can antioxidant diet supplementation protect against age-related mitochondrial damage // Ann NY Acad Sci. 2002. Vol. 959. P. 508-516.

5. Motawi Т., Sadik N., Refaat A. Cytoprotective effect of DL-α-lipoic or squalene on cyclophosphamide-induced oxidative injury: anexperimental study on rat myocardium, testicles and urinary bladder // Food Chem Toxicol. 2001. Vol. 48, №8-9. P. 2326-2336.

6. Packer L., Kramer G. Molecular aspects of lipoic acid in prevention of diabetes complication//Nutrition. 2001. Vol. 17. P. 888-895.

7. Petersen S., Moreau R., Smith E. Is a-lipoic acid a scavenger of reactive oxygen species in vivo? Evidence for its initiation stress signaling pathways that promote endogenous antioxidant capacity // JUBMB Life. 2008. Vol. 60, №6. P. 362-367.

8. Souza G., Saldanha G., Freitas R. Lipoic acid increases glutathione peroxidase, Na+, K+ - ATPase and acetylcholinesterase activities in rat hippocampus after pilocarpine-induced seizures? // Arq. Neuropsiquiart. 2010. Vol. 68, №4. P. 586-591.

9. Stites Т., Mithell A., Rucker R. Physiological importance of quinoenzymes and the O-quinone family of cofactors // Journal of Nutrition. 2000. Vol. 130, №8. P. 719-727.

Способ оценки индуцирующего действия цитомегаловирусной инфекции на активность липоевой кислоты в синцитиотрофобласте плаценты на третьем триместре гестации, включающий определение в периферической крови титра антител к цитомегаловирусу, выполнение гистохимической реакции на выявление липоевой кислоты, и при титре антител к ЦМВ до 1:1600, снижении активности липоиддегидрогеназы до 23,50±0,95 усл. ед. развивается угроза функционирования плаценты и развития плода.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для оценки содержания андростендиона в синцитиотрофобласте плаценты беременных при обострении цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре гестации.

Изобретение относится к области медицины, а именно лабораторной диагностике, и может быть использовано для оценки развития угрозы гемической анемии беременных. Для этого определяют количество ненасыщенных жирных кислот в эритроцитах периферической крови с последующей оценкой их функционального состояния.
Изобретение относится к медицине, а именно гинекологии и эндокринологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики овариальной и адреналовой гиперандрогении у девочек пубертатного возраста.

Изобретение относится к областям ветеринарии и может быть использовано для оценки степени аккумуляции кадмия в печени крупного рогатого скота. Для этого определяют концентрацию Μn в биосубстрате методом атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно связанной плазмой.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для оценки эффективности и безопасности терапии при проведении клинических исследований. Проводят анализ клинических или клинико-лабораторных показателей для каждого пациента из исследуемой группы.
Изобретение относится к области экологической аналитической химии. Способ включает отбор проб массой 2-4 г, их сушку, измельчение и двухкратную экстракцию целевых компонентов дихлорметаном при воздействии на пробу ультразвуковых колебаний, фильтрование объединенного экстракта и упаривание досуха при давлении не выше 0,1 мм рт.ст.

Изобретение относится к области медицины, конкретно к онкологии, и может быть использовано для раннего выявления острого повреждения почек и своевременного назначения соответствующей терапии.

Изобретение относится к области медицины, а именно к экспериментальной хирургии, и может быть использовано для оценки энтеральной недостаточности при остром перитоните.

Предложенная группа изобретений относится к области медицины. Предложены способ, машиночитаемый носитель и система для определения генетической аномалии плода, которая представляет собой анеуплоидию.

Изобретение относится к ветеринарии и медицине и может использоваться при неинвазивном исследовании крови животных с помощью ультразвуковых волн. Способ окраски тромбоцитов после ультразвукового воздействия включает обработку образцов крови ультразвуком от 30 с до 45 с, интенсивностью 0,4 Вт/см2, частотой 880 кГц, бегущей ультразвуковой волной, режим непрерывный, с последующим приготовлением мазков крови и их окраской дифференциальными красителями.

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу дифференциальной диагностики заболеваний онкологического и не онкологического генеза. Сущность способа состоит в том, что исследуют электрофоретическую подвижность эритроцитов и при снижении электрофоретической подвижности эритроцитов менее чем на 49% от физиологической нормы диагностируют заболевание не онкологического генеза. При снижении электрофоретической подвижности эритроцитов более чем на 50% от физиологической нормы диагностируют заболевание онкологического генеза, при физиологической норме, равной 1,75±0,04 мкм·см/В·с. Использование заявленного изобретения позволяет повысить эффективность дифференциальной диагностики заболеваний онкологического и не онкологического генеза. 2 ил., 1 табл., 4 пр.
Изобретение относится к области судебной и криминалистической медицины и может быть использовано для выявления следов, имеющих органическое происхождение, а именно следов пальцев и ладоней. Для этого обрабатывают исследуемую поверхность направленным потоком реагента для выявления видимых окрашенных следов. Обработку проводят аэрозольным составом, содержащим 0,1-10% нингидрина, 1,0-30,0% метилэтилкетона или ацетона, 1,0-20,0% диэтилового эфира, 0,1-10% уксусной кислоты и этиловый или изопропиловый спирт в качестве растворителя нингидрина. В качестве пропеллента используют фреоны различных марок, пропан-бутановую смесь или азот. Изобретение позволяет выявлять отпечатки рук на различных гидрофобных и гидрофильных поверхностях. 1 з.п. ф-лы, 5 пр.

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ оценки литогенности желчи, включающий определение в желчи у обследуемого (i) показателей холестерина (ХС, ммоль/л) в сравнении со средними значениями, принятыми за норму (k), отличающийся тем, что в желчи определяют комплекс общих липидов (ОЛ, г/л), суммарную антиокислительную активность (АОА) электрохимическим методом (в нА·с), максимум вспышки хемилюминесценции (МВХЛ, в усл. ед.) и площадь хемилюминесценции (ПХЛ, в усл. ед. площади), далее вычисляют интегральный показатель литогенности желчи (ИПЛi) по формуле: где Ki и Kk - коэффициент разведения - кратность разведения пробы желчи обследуемого и пробы желчи, принятой за норму, с ИПЛ не более 1,1 единиц литогенности - соответственно при определении АОА, и чем выше значение ИПЛi, тем более высокая степень литогенности желчи с риском развития холелитиаза. Способ позволяет оптимизировать выбор метода декомпрессии желчевыводящих путей, направленных на предупреждение ранней инкрустации эндопротезов, что позволяет повысить эффективность лечебных мероприятий. 6 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно, к онкологии, и может быть использованго для комбинированного лечения немелкоклеточного рака легкого (НМРЛ) IB - III стадии. Способ включает проведение неоадъювантной химиотерапии, до ее начала проводят забор биопсийного материала опухоли, из которого выделяют тотальную РНК и определяют уровень экспрессии генов монорезистентности RRM1, TYMS, АВСС5, ERCC1, TOP1, ТОР2а, TUBB3 в ткани опухоли. На втором этапе проводят курсы неоадъювантной химиотерапии, на третьем этапе комбинированного лечения выполняют радикальную операцию в объеме пневмонэктемии или лобэктомии, во время которой производят забор образцов опухолевой ткани и визуально неизмененной ткани легкого/бронха, в которых проводят повторное определение уровней экспрессии генов монорезистентности, далее, в послеоперационном периоде на 15 сутки проводят адъювантную химиотерапию карбоплатином в дозе по AUC6 во 2-й день цикла, при уровне экспрессии гена монорезистентности ERCC1 менее 0,5, в комбинации с одним из цитостатиков, выбор которого зависит от уровня экспрессии исследуемых генов монорезистентности. Использование изобретения позволяет повысить эффективность лечения НМРЛ IB - III стадии. 1 ил., 4 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и касается способа прогнозирования развития сердечно-сосудистых осложнений после острого инфаркта миокарда с подъемом сегмента ST без тревожно-депрессивных расстройств. Для этого с помощью биолюминесцентного метода в тромбоцитах определяют активность анаэробной реакции лактатдегидрогеназы (НАДН-ЛДГ), НАДН-зависимой реакции малат-дегидрогеназы (НАДН-МДГ) и НАД-зависимой изоцитратдегидрогеназы (НАДИЦДГ). Затем вычисляют коэффициент глико-лимонного отношения (КГЛО), представляющий собой отношение произведения НАДН-ЛДГ и НАДН-МДГ к активности НАДИЦДГ, то есть КГЛО = (НАДН - ЛДГ × НАДН - МДГ)/НАДИЦДГ. При значении КГЛО ниже 25,0 прогнозируют развитие сердечно-сосудистых осложнений у больных без тревожно-депрессивных расстройств. При значении, равном или выше 25,0, прогнозируют отсутствие сердечно-сосудистых осложнений. Способ обеспечивает раннее и достоверное прогнозирование возможного развития сердечно-сосудистых осложнений у данной группы больных. 2 пр. .

Изобретение относится к области измерений для диагностических целей. Блок датчиков для проведения диагностических измерений, размещенных на поверхности тела, включает основание, содержащее выемку, в которой закреплен пьезоэлемент датчика давления. Блок также включает гибкую мембрану, установленную на основании и перекрывающую упомянутую выемку. К мембране с наружной стороны прикреплены первый и второй электроды. Первый электрод установлен напротив выемки с возможностью перемещения вместе с мембраной. Вокруг первого электрода выполнен второй неподвижный электрод. Между первым электродом и пьезоэлементом установлена центральная опора. Первый и второй электроды установлены с возможностью контакта с кожной поверхностью тела, причем к первому и второму электродам подсоединены электрические выводы датчика для измерения импеданса. Обеспечивается уменьшение габаритов блока датчиков. При этом повышается стабильность работы датчиков при увеличении их чувствительности. 10 з.п. ф-лы, 7 ил.
Изобретение относится к ветеринарии и предназначено для взятия крови у шиншилл. Шиншиллу фиксируют на животе с запрокинутой назад головой. Оттягивают кожные складки шеи на затылок. Удаляют волосы в области начала грудной клетки. Прокол внешней яремной вены осуществляют промытой раствором гепарина иглой 26-27G. Иглу вводят по направлению к основанию уха под углом 30-45 градусов, а лапы животного отводят в сторону специалиста, осуществляющего пункцию. Способ позволяет получить максимальное количество крови с минимальным травматическим воздействием. 1 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для индивидуального прогнозирования антенатальной гибели плода у беременных и выбора рациональной акушерской тактики в зависимости от результатов прогноза. У беременных на 32 неделе гестации выявляют наличие факторов, оказывающих влияние на течение и исход беременности: социально-биологические факторы, общий и акушерско-гинекологический анамнез, экстрагенитальные заболевания, особенности и осложнения настоящей беременности, состояние плода, результаты клинико-лабораторно-инструментального обследования беременных, ятрогенные дефекты при ведении настоящей беременности. Определяют в баллах в соответствии с прогностической таблицей антенатальной гибели плода их прогностические коэффициенты, обозначаемые знаком "+" в случае агрессивного характера фактора и знаком "-" в случае его протективного характера. Полученные прогностические коэффициенты суммируют. При сумме баллов "+13 или больше" прогнозируют антенатальную гибель плода. При таком прогнозе ежедневно проводят мониторинг состояния плода с помощью кардиотокографии с оценкой по шкале W. Fisher и дважды в неделю оценивают биофизический профиль плода по шкале A.M. Vintzeleos. При нормальном и удовлетворительном состоянии плода беременность пролонгируют, продолжая исследовать состояние плода в том же режиме. При сомнительном и неудовлетворительном состоянии плода пациентку родоразрешают путем операции кесарева сечения в течение 1-3 часов. При сумме баллов, равной "-13 или меньше", прогнозируют отсутствие антенатальной гибели плода, а беременность пролонгируют. При сумме баллов "больше -13 и меньше +13" прогноз считают неопределенным. При этом два раза в неделю проводят мониторинг состояния плода с помощью кардиотокографии и один раз в неделю оценивают биофизический профиль плода. При нормальном и удовлетворительном состоянии плода беременность пролонгируют, продолжая исследовать состояние плода в том же режиме. При сомнительном и неудовлетворительном состоянии плода пациентку родоразрешают путем операции кесарева сечения в плановом порядке. Способ позволяет точно, объективно и эффективно провести индивидуальное прогнозирование гибели плода во время беременности, оптимизировать акушерскую тактику за счет комплексной оценки и учета наиболее прогностически значимых факторов, а также оптимального режима мониторинга плода. 1 ил., 1 табл., 4 пр.
Изобретение относится к области медицины, а именно к способу прогнозирования течения апластической анемии после спленэктомии по индексу соотношения масс CD4+ и CD8+Т-лимфоцитов. Сущность способа состоит в том, что после спленэктомии определяют массу селезенки, морфометрически в гистологических срезах селезенки подсчитывают количество CD4+ и CD8+Т-лимфоцитов, вычисляют индекс соотношения масс CD4+/CD8+Т-лимфоцитам (ИСМ) по формулам. При значениях ИСМ селезенки >1,0 прогнозируют благоприятное течение апластической анемии, а при ≤1,0 - неблагоприятное течение заболевания. Использование заявленного способа позволяет повысить эффективность прогнозирования течения апластической анемии после спленэктомии. 3 пр.

Изобретение относится к медицине, экологии, токсикологии и может быть использовано для дифференциальной диагностики у детей дисметаболической нефропатии, ассоциированной с токсическим действием кадмия, хрома, свинца и фенола техногенного происхождения и дисметаболической нефропатии нетоксической природы. Определяют в крови ребенка содержание кадмия, свинца, хрома и фенола. При содержании в крови кадмия - в 1,4-2,0 раза, свинца - в 1,2-1,5 раза, хрома - в 1,2-1,7 раза, фенола - в 1,3-4,0 раза выше референтного/фонового, осуществляют генетическое исследование полиморфизма генов CYPOX, RCYT 450, SULTA1. При наличии полиморфизма по гомозиготному и гетерозиготному варианту генов CYPOX, RCYT 450, SULTA1 проводят ультразвуковое исследование у ребенка состояния кровотока в подкапсульной зоне почек в режиме цветового допплеровского картирования. При установлении обеднения кровотока в подкапсульной зоне почек определяют лабораторные показатели: уровень общей антиоксидантной активности сыворотки крови (ОАС), уровень Cu/Zn зависимой супероксиддисмутазы (Cu/Zn-СОД), уровень глутатионпероксидазы (ГлПО) и гидроперекисей липидов, показатель абсолютного фагоцитоза и фагоцитарного числа. При превышении уровня ОАС на 25-30%, уровня Cu/Zn-СОД на 30-50%, ГлПО на 30-50%, гидроперекисей липидов на 30-50% и абсолютного фагоцитоза и фагоцитарного числа в 1,2 и 2,3 раза соответственно. При наличии у ребенка указанного условия, по меньшей мере, в виде 65% от указанных лабораторных показателей, диагностируют у ребенка наличие дисметаболической нефропатии, ассоциированной с токсическим действием кадмия, свинца, хрома и фенола техногенного происхождения. При отсутствии такого превышения диагностируют у ребенка наличие дисметаболической нефропатии нетоксической природы. Способ позволяет точно провести дифференциальную диагностику, своевременно провести необходимые лечебные и профилактические мероприятия за счет учета наиболее значимых показателей. 5 табл., 1 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для оценки индуцирующего действия цитомегаловирусной инфекции на активность липоевой кислоты в синцитиотрофобласте плаценты на третьем триместре гестации. Для этого в периферической крови определяют титр антител к цитомегаловирусу и выполняют гистохимическую реакцию на выявление липоевой кислоты. При титре антител к ЦМВ до 1:1600 и снижении активности липоиддегидрогеназы до 23,50±0,95 усл. ед. развивается угроза функционирования плаценты и развития плода. Способ позволяет оценить индуцирующее действие цитомегаловирусной инфекции на активность липоевой кислоты в синцитиотрофобласте плаценты. 2 ил.

Наверх