Производные гамбогеновой кислоты, способ их получения и применение
Владельцы патента RU 2598032:
НАЙНТ ПИПЛЗ ХОСПИТАЛ, СКУЛ МЕДИСИН ШАНХАЙ ЦЗЯОТУН ЮНИВЕРСИТИ (CN)
Изобретение относится к производным гамбогеновой кислоты, соответствующим структурным Формулам (I) или (II), где А является -СО- или -НС(ОН)-; R2 водород или прямая или разветвленная C1-С10алкильная группа; R3 водород или ацильная группа, замещенная C1-С10алкильной группой; R водород или прямая или разветвленная C1-С10алкильная группа;
R1 выбран из:
-OR4, или ;
в котором R4 выбран из группы, состоящей из любого из следующих: водород, прямая или разветвленная C1-С10алкильная группа или алкильная группа, возможно, содержащая от 1 до 3 замещенных групп, включая кислород, C1-С10алкоксигруппу или C1-С10алкоксикарбонильную группу; R5 и R6 независимо выбраны из любой из следующих замещенных групп: водород; прямая или разветвленная C1-С10алкильная группа или C1-С10алкильная группа, возможно, содержащая от 1 до 3 замещенных групп, включая кислород, C1-С10алкоксигруппу, C1-С10алкоксиацильную группу, C1-С10алкильную группу, замещенную фенилом; s и t являются целыми положительными числами, и сумма s и t является натуральным числом от 2 до 4; m является 0, 1, 2 или 3 и представляет собой количество замещенных групп на R7 кольца; n является 0, 1, 2 или 3 и представляет собой количество В на кольце; В является углеродом, азотом или кислородом; В является углеродом, группы R7, R8 идентичны группе R5; и R4, R3, R2, R1 не являются одновременно водородом в Формуле (I). Изобретение также относится к способам получения соединений формул I и II и промежуточным соединениям и к противораковой фармацевтической композиции на основе этих соединений. В сравнении с гамбогеновой кислотой производные гамбогеновой кислоты показывают более эффективную противораковую активность. 6 н. и 7 з.п. ф-лы, 5 ил., 2 табл., 28 пр.
ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Данное изобретение относится к противоопухолевому препарату, его получению и способу применения, в особенности к производным гамбогеновой кислоты, их получению и применению.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
С увеличением продолжительности жизни благодаря изменениям в привычках питания, количество онкологических пациентов растет с каждым годом. Данные ВОЗ свидетельствуют о том, что рак стал главным смертельным заболеванием, и количество онкологических пациентов продолжает увеличиваться; в 2008 году рак являлся основной причиной смерти в 13,8% случаев и по предварительным прогнозам это число увеличится до 15% к 2015 году.
В настоящее время для клинического лечения злокачественных опухолей используют преимущественно хирургию, радиотерапию и химиотерапию, как по отдельности, так и в комбинации. В последние годы продолжительность выживания существенно возросла благодаря применению химиотерапии. Однако, существующие противораковые медикаменты все еще не удовлетворяют клиническим нуждам из-за высокого разнообразия раковых клеток и развития мультилекарственной резистентности. Цитотоксические медикаменты в качестве главного компонента противораковой химиотерапии играют очень важную роль. Эти медикаменты занимают большую часть рынка противораковых препаратов, включая лекарства, получаемые из натуральных продуктов, такие как таксоловые препараты и др.; они стали общепринятыми в медицинской практике противораковыми медикаментами благодаря своим терапевтическим эффектам.
Тем не менее, цитотоксические химиотерапевтические медикаменты при продолжительном применении могут вызывать мультилекарственную резистентность раковых клеток, что понижает эффективность этих лекарств, в связи с чем врачи повышают дозировку для увеличения эффективности, тем самым понижая безопасность медикамента. Также имеют место побочные реакции из-за того, что цитотоксические медикаменты, убивая раковые клетки, также убивают и нормальные клетки. Все цитотоксические медикаменты обычно вызывают побочные реакции у пациентов, и интенсивность побочных реакций увеличивается с увеличением дозировки. Поэтому максимальная дозировка химиотерапевтических препаратов строго ограничена. Другими словами, увеличение дозировки для повышения эффективности медикамента при возникновении резистентности является неоправданным. Единственным подходящим способом является применение замещающей терапии с другим эффективным медикаментом. Таким образом, необходима разработка более эффективных химиотерапевтических препаратов для клинического применения; исследования и разработка новых, эффективных противораковых медикаментов несомненно является одной из самых неотложных задач.
Гарциния (гуммигут) является желтой смолой дерева Garcinia morella, произрастающего в Индии, Вьетнаме, а также в китайских провинциях Юньнань, Хунань и Хубэй, и может использоваться как желтый пигмент для рисования. В книге «Компендиум лекарственных веществ» (Compendium of Materia Medica) за авторством Ли Шичжэнь (Li Shizhen) из династии Мин упоминается, что: "Был приготовлен отвар гарцинии для художника". Гарциния является одним из китайских медикаментов для замедления роста опухолей и против стойких карбункулов.
Гамбогеновая кислота (как показано в Формуле X, нумерация соответствует углеродной последовательности) является активным ингредиентом Гарцинии. Сообщалось, что гамбогеновая кислота может ингибировать рост раковых опухолей in vitro и in vivo, стимулировать апоптоз раковых клеток и демонстрирует сильную противоопухолевую активность в отношении ряда злокачественных опухолей благодаря способности к селективному ингибированию роста опухолей.
Bao-Xi, Qu etc. (Chinese Journal of Clinical Oncology, 1991, Volume 18, No. 1, page 50) продемонстрировал, что гамбогеновая кислота обладает значительной противораковой активностью, малой токсичностью и хорошим ингибиторным эффектом на S180, ARS брюшную карциному, Р388 лейкемию, рак легких Льюиса и рак легких La795. По сравнению с гарциниевой кислотой (другой противораковый компонент, экстрагируемый из Гарцинии), гамбогеновая кислота сильнее ингибирует мышиную лейкемию L1210 и процент выживания в случае гамбогеновой кислоты в 2,45 раза выше, чем для гарциниевой кислоты. Результаты исследования клеточного цикла лейкемии L1210 показали, что гамбогеновая кислота (внутривенное введение, 10 мг/кг) может ингибировать G1-S фазовый перенос путем уменьшения клеток S фазы и увеличения клеток G1 фазы.
Cheng Hui, etc. (Herbal, 2008, Volume 39 No. 2, page 236) сообщал об ингибировании пролиферации различных злокачественных клеток гамбогеновой кислотой МТТ способом. Результат показал, что гамбогеновая кислота может применяться для ингибирования пролиферации клеток человеческого рака кишечника (НСТ-8), клеток человеческой гепатомы (BEL-7402), клеток человеческого рака желудка (BGC-823), клеток человеческого немелкоклсточного рака легкого (А549) и человеческого рака яичников (А2780).
Гамбогеновая кислота является активным ингредиентом, применяемым в традиционной китайской медицине. Процесс экстракции гамбогеновой кислоты простой и низкозатратный, и гамбогеновую кислоту можно получить в достаточном количестве для производства противораковых препаратов.
В патенте CN1718183A описывается препарат гамбогеновой кислоты, способный ингибировать клетки человеческой гепатомы BEL-7402, человеческой гепатомы 7721, человеческого рака груди MCF-7 и клетки Хела человеческой цервикальной карциномы, при этом клетки человеческой гепатомы являются наиболее чувствительными. В патенте CN1718184A описываются комплексы гамбогеновой кислоты, комбинированные с такими противораковыми медикаментами, как мороксидин, амантадин, цитарабин и матрин, для лечения рака печени, рака кишечника и рака легких, характеризующиеся высокой эффективностью и низкой токсичностью. В патенте CN101947204A описываются твердые липидные наночастицы гамбогеновой кислоты: получение гамбогеновой кислоты в виде твердых наночастиц улучшает биодоступность, понижает ирритацию и увеличивает время эффективного действия.
По сравнению с современными клиническими медикаментами гамбогеновая кислота, получаемая из натуральных источников, обладает такими недостатками, как недостаточная активность и малая безопасная доза, что ограничивает ее разработку и применение. Поэтому, структуру гамбогеновой кислоты модифицировали для улучшения ее активности и возможности использования в качестве медикамента.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Для преодоления недостатка, заключающегося в недостаточной активности гамбогеновой кислоты, целью данного изобретения являлось получение производного гамбогеновой кислоты с более высокой противораковой активностью, для создания соединения для противораковых исследований или новых соединений-кандидатов для производства противораковых медикаментов.
В одном аспекте данное изобретение описывает производное гамбогеновой кислоты с молекулярной структурой, соответствующей Формулам (I) и (II):
где А является -СО- или -НС(ОН)-; R1 выбирают из:
1) -OR4;
где R4 выбирают из группы, состоящей из любого из следующих: водород, прямая или разветвленная C1-C10 алкильная группа, или алкильная группа, возможно содержащая от 1 до 3 замещенных групп, включая кислород, галоген, C1-C10 алкоксигруппу, ацилоксигруппу, C1-C10 алкоксикарбонильную группу, арилоксигруппу; C3-C8 циклоалкильная группа, C1-C10 алкильная группа, замещенная 1, 2 или 3 гетероатомами; алкиларильная группа включающая C1-C10 алкильную группу, замещенную ароматической группой и C1-C10 алкильную группу, возможно замещенную от 1 до 3 замещенными ароматическими группами, включая ацильную группу, -ОСН2О-, галоген, галогеналкильную группу, арильную группу, С3-C8 циклоалкильную группу, C1-C10 алкильную группу, гидроксигруппу, ацилоксигруппу, C1-C10 алкоксигруппу; гетероарилалкильная группа, включающая C1-C10 алкоксигруппу, замещенную гетероарильной группой, и C1-C10 алкильную группу, возможно замещенную любой гетероарильной группой, включая гетероарильную группу, C1-C10 алкильную группу, аралкильную группу, C3-C8 циклоалкильную группу, C1-C10 алкоксикарбонильную группу, карбамоильную группу, ароматическую группу и C1-С6 амидную группу; прямая или разветвленная С2-C10 алкенильная группа или алкинильная группа, возможно включающая от 1 до 3 замещенных групп, включая кислород, галоген, ароматическую циклическую группу, аралкильную группу, C1-C10 алкоксигруппу, ацилоксигруппу, амидную группу, C1-С6 амин ацильную группу, C1-C10 алкоксигруппу и C1-C10 гетероалкильную группу, включающую 1, 2 или 3 гетероатома; С4-C10 циклоалкенильная группа, С4-C10 алкинильная группа, или алкинильная группа, возможно включающая от 1 до 3 замещенных групп, включая кислород, галоген, ароматическую циклическую группу, аралкильная группа, C1-C10 алкоксигруппу, ацилоксигруппу, амидную группу, C1-С6 ацильную группу, C1-C10 алкоксигруппу, арилоксигруппу и C1-C10 гетероалкильную группу, возможно включающую 1, 2 или 3 гетероатома.
2) -NR5R6;
где R5 и R6 могут быть одинаковыми или разными, и их независимо выбирают из любых из следующих замещенных групп: водород; прямая или разветвленная C1-C10 алкильная группа или C1-C10 алкильная группа, возможно содержащая от 1 до 3 замещенных групп, включая кислород, галоген, C1-C10 алкоксигруппу, ацилоксигруппу, C1-C10 алкоксиацильную группу, арилоксигруппу; C3-C8 циклоалкильная группа; C1-C10 алкильная группа, замещенная 1, 2 или 3 гетероатомами; алкиларильная группа, включая C1-C10 алкильную группу, замещенную ароматической группой, и C1-C10 алкильную группу, необязательно замещенную от 1 до 3 замещещными ароматическими группами, включая ацильную группу, -OCH2O-, галоген, галогеналкильную группу, гидроксигруппу, арильную группу, С3-C8 циклоалкильную группу, C1-C10 алкильную группу, ацилоксигруппу, C1-C10 алкоксигруппу; гетероарилалкильная группа, включая C1-C10 алкоксигруппу, замещенную гетероарильной группой, и C1-C10 алкильную группу, возможно замещенную любой гетероарильной группой, включая гетероарильную группу, C1-C10 алкильную группу, аралкильную группу, C3-C8 циклоалкильную группу, C1-C10 алкоксикарбонильную группу, карбамоильную группу, ароматическую группу и C1-С6 амидную группу; прямая или разветвленная С2-C10 алкенильная группа или алкенильная группа, возможно содержащая от 1 до 3 замещенных групп, включая кислород, галоген, ароматическую циклическую группу, аралкильную группу, C1-C10 алкоксигруппу, ацилоксигруппу, амидную группу, C1-С6 амин ацильную группу, C1-C10 алкоксигруппу, арилоксигруппу и C1-C10 гетероалкильную группу, содержащую 1, 2 или 3 гетероатома; С4-C10 циклоалкенильная группа, С4-C10 алкинильная группа, или алкинильная группа, возможно содержащая от 1 до 3 замещенных групп, включая кислород, галоген, ароматическую циклическую группу, аралкильную группу, C1-C10 алкоксигруппу, ацилоксигруппу, амидную группу, C1-С6 ацильную группу, C1-C10 алкоксигруппу, арилоксигруппу и C1-C10 гетероалкильную группу, включая 1,2 или 3 гетероатома.
где s и t являются целыми положительными числами, и сумма s и t является натуральным числом от 2 до 10;
m является 0, 1,2 или 3, и представляет собой количество замещенных групп на R7 кольца;
n является 0, 1, 2 или 3, и представляет собой количество В на кольце; В является углеродом, азотом или кислородом;
группы R7, R8 идентичны группе R5, или карбонильной группе, иминогруппе, оксимной группе, алифатической группе; или если В является третичным азотом, то R8 является кислородом, и образует оксиды азота с В;
R2 выбирают из любых из следующих замещенных групп: водород, прямая или разветвленная C1-C10 алкильная группа, С3-С8 циклоалкильная группа, ароматическая группа или ароматическая группа, замещенная C1-C10 алкильной группой, гетероарильная группа, и ацильная группа, замещенная C1-C10 алкильной группой, или ацильная группа, замещенная ароматической группой;
R3 выбирают из любых из следующих замещенных групп: водород, алкильная группа, замещенная C1-C10 ацильной группой, или арильная группа, замещенная ароматической группой;
R выбирают из любых из следующих замещенных групп: водород, прямая или разветвленная C1-C10 алкильная группа, С3-С8 циклоалкильная группа, прямая или разветвленная С2-C10 алкенильная группа или C3-C8 циклоалкенильная группа, фенильная группа или фенильная группа, замещенная C1-C10 алкильной группой, С2-С6 алкинильная группа, нуклеофилы, содержащие вторичную аминогруппу, включая прямую или разветвленную алкиламиногруппу, прямую или разветвленную алкениламиногруппу; ароматическая или ароматическая алкиламиногруппа, амин, полученный присоединением цепочки алкиниламиногруппы и α,β-ненасыщенных кетонов.
Однако, R, R2, R3, R4 не являются одновременно водородом в Формуле (I).
В предпочтительном варианте осуществления данного изобретения, вышеописанные производные гамбогеновой кислоты соответствуют молекулярной структуре Формул III-V:
В предпочтительном варианте осуществления данного изобретения, вышеописанные производные гамбогеновой кислоты соответствуют молекулярной структуре Формулы (VI):
В формуле вышеописанного производного гамбогеновой кислоты, согласно данному изобретению, R1 предпочтительным образом выбирают из любого из следующих:
1) -OR4,
где R4 выбирают из группы, состоящей из любого из следующих: водород, метальная группа, этильная группа, пропильная группа, изопропильная группа, бутильная группа, изобутильная группа, трет-бутильная группа, гексильная группа, октальная группа, C1-C10 алкильная группа, замещенная любой от 1 до 3 замещенных групп, включая кислород, галоген, C1-C10 алкоксигруппу, ацилоксигруппу, C1-C10 алкоксиацильную группу, ароматическую группу; циклогексильная группа, циклопентильная группа; циклопропильная группа, -СН2СН2ОСН2СН3, -CH2CH2OCH2CH2OCH2CH3, -CH2CH2NHCH3, -OCH2O-, галоген, галогеналкильная группа, гидроксигруппа, -CH2CH2N(СН2СН3)2, -CH2CH2OCH2CH2NCH3, бензильная группа, фенилэтильная группа, фенилпропильная группа, тетрагидропиррольная группа, пиперидинильная группа, морфилинильная группа, -СН2С H2OCH2CH2OCH2NHCH3, -CH2CH2NHCH2CH3, -СН2(N-этил-пирролидин), -CH2C(CH3)CH2N(CH3), C1-C10 алкильная группа, замещенная возможно от 1 до 3 замещенными ароматическими группами, включая ацильную группу, арильную группу, C3-C8 циклоалкильную группу, C1-C10 алкильную группу, гидроксигруппу, ацилоксигруппу, C1-C10 алкоксигруппу; гетероарил алкильная группа, включая C1-C10 алкоксигруппу, замещенную гетероарильной группой, и С1-C10 алкильную группу, возможно замещенную любой гетероарильной группой, включая гетероарильную группу, C1-C10 алкильную группу, аралкильную группу, C3-C8 циклоалкильную группу, С1-C10 алкоксикарбонильную группу, карбамоильную группу, ароматическую группу и C1-С6 амидную группу; прямая или разветвленная С2-C10 алкенильная группа или алкенильная группа, возможно содержащая от 1 до 3 замещенных групп, включая кислород, галоген, ароматическую циклическую группу, аралкильную группу, C1-C10 алкоксигруппу, ацилоксигруппу, амидную группа, C1-С6 аминацильную группу, C1-C10 алкоксигруппу, арилоксигруппу, и C1-C10 гетероалкильную группу, содержащую 1, 2 или 3 гетероатома; С4-C10 циклоалкенильная группа, С4-C10 алкинильная группа, или C1-C10 алкинильная группа, возможно содержащая от 1 до 3 замещенных групп, включая кислород, галоген, ароматическую циклическую группу, аралкильную группу, C1-C10 алкоксигруппу, ацилоксигруппу, амидную группу, C1-С6 аминацильную группу, C1-C10 алкоксигруппу, арилоксигруппу и C1-C10 гетероалкильную группу, сожеращую 1, 2 или 3 гетероатома.
2) -NR5R6;
где R5 и R6 могут быть одинаковыми или разными, и их независимо выбирают из любых из следующих замещенных групп: водород, метальная группа, этальная группа, пропильная группа, изопропильная группа, бутильная группа, изобутильная бутильная группа, трет-бутильная группа, гексильная группа, октальная группа; C1-C10 алкильная группа, содержащая возможно от 1 до 3 замещенных групп, включая гидроксигруппу, аминогруппу, C1-C10 алкиламиногруппу, кислородную группу, галоген, C1-C10 алкоксигруппу, ацилоксигруппу, C1-C10 алкоксиацильную группу, арилоксигруппу; циклогексильная группа, циклопентильная группа, циклопропильная группа, -СН2СН2ОСН2СН3, -СН2СН2ОСН2СН2ОСН2СН3, -CH2CH2NHCH3, -CH2CH2N(CH2CH3)2, -CH2CH2OCH2CH2NCH3, -CH2(N-этил-пирролидин), тетрагидропиррольная группа, пиперидинильная группа, морфилинильная группа, бензильная группа, -CH2CH2OCH2CH2OCH2NHCH3, -CH2CH2NHCH2CH3, фенилэтильная группа, фенилпропильная группа, -СН2С(СН3)CH2N(СН3); C1-C10 алкильная группа возможно замещенная от 1 до 3 замещенными ароматическими группами, включая ацильную группу, -ОСН2О-, галоген, галогеналкильную группу, арильную группу, С3-C8 циклоалкильную группу, C1-C10 алкильную группу, гидроксигруппу, ацилоксигруппу, C1-C10 алкоксигруппу; гетероарилалкильная группа включая С1-C10 алкоксигруппу, замещенную гетероарильной группой, и C1-C10 алкильную группу, возможно замещенную любой гетероарильной группой, включая гетероарильную группу, C1-C10 алкильную группу, аралкильную группу, С3-C8 циклоалкильную группу, C1-C10 алкоксикарбонильную группу, карбамоильную группу, ароматическую группу и C1-С6 амидацильную группу; прямая или разветвленная С1-C10 алкенильная группа или алкинильная группа, возможно содержащая от 1 до 3 замещенных групп, включая кислород, галоген, ароматическую циклическую группу, аралкильную группу, C1-C10 алкоксигруппу, ацилоксигруппу, амидную группу, C1-С6 аминацильную группу, C1-C10 алкоксигруппу, арилоксигруппу и C1-C10 гетероалкильную группу, содержащую 1, 2 или 3 гетероатома; С4-C10 циклоалкенильная группа, С4-C10 алкинильная группа, или С4-C10 алкинильная группа, возможно содержащая от 1 до 3 замещенных групп, включая кислород, галоген, ароматическую циклическую группу, аралкильную группу, C1-C10 алкоксигруппу, ацилоксигруппу, амидную группу, C1-С6 аминацильную группу, C1-C10 алкоксигруппу, ацилоксигруппу, и C1-C10 гетероалкильную группу, содержащую 1, 2 или 3 гетероатома.
R3 выбирают из любых из следующих замещенных групп: водород, формильная группа, ацетильная группа, карбамоильная группа, фенильная группа, и фенил ацетильная группа.
R2 выбирают из любых из следующих замещенных групп: водород, метильная группа, этильная группа, пропильная группа, изопропильная группа, бутильная группа, изобутильная группа, трет-бутильная группа, гексильная группа, октальная группа, циклопропильная группа, циклобутильная группа, циклопентильная группа, циклогексильная группа, циклогептильная группа, бензильная группа, фенилэтильная группа, фурильная группа, пиранильная группа, 2Н-пирролильная группа, пирролильная группа, имидазолильная группа, пиразолильная группа, пиридильная группа, формильная группа, ацетильная группа, карбамоилацильная группа, фенильная группа и фенилацетильная группа.
R выбирают из любых из следующих замещенных групп: метальная группа, этальная группа, пропильная группа, изопропильная группа, бутильная группа, изобутильная группа, трет-бутальная группа, гексильная группа, октальная группа, циклогексильная группа, циклопентильная группа, винильная группа, бутеновая группа, гексенильная группа, циклогексенильная группа, циклопентенильная группа, фенильная группа, бензильная группа, фенилэтильная группа, фенилпропильная группа, бутинильная группа, гексинильная группа, морфилинильная группа, пиперидинильная группа, и пиперазинильная группа.
В предпочтительном варианте осуществления данного изобретения, в формуле вышеописанного производного гамбогеновой кислоты:
А является -СО- или -НС(ОН)-
R1 выбирают из:
где R7 выбирают из группы, состоящей из любого из следующих: замещенная группа как определено для R5, карбонильная группа, алкиленовая группа, оксимная группа;
m, n являются 0, 1, 2 или 3;
В является углеродом, азотом или кислородом;
группа R8 идентичная группе R5, или R8 является кислородом, образуя оксиды азота с В.
где R7 выбирают из группы, состоящей из любого из следующих:
замещенная группа, как определено для R5, карбонильная группа, иминогруппа, алифатическая группа;
m, n является 0, 1, 2 или 3;
В является углеродом, азотом или кислородом;
группа R8 идентична группе R5, или R8 является кислородом, образуя оксиды азота с В.
Во втором аспекте, данное изобретение описывает соль производного гамбогеновой кислоты, которая 1) соль образована с неорганической кислотой, такая как соли хлороводородной кислоты, карбонаты, сульфаты; 2) соль образована с органическим основанием, или 3) соль образована с неорганическим основанием; 4) соль образована с органической кислотой.
В третьем аспекте, данное изобретение описывает способ получения производного гамбогеновой кислоты, которое согласно Формуле (VII) получают введением R2 и R3 в гамбогеновую кислоту или производного гамбогеновой кислоты согласно Формуле (VI), в котором можно регулировать порядок введения R2 и R3;
где R3 конденсируют с R3X галогенидом кислоты или ангидридом кислоты (R3)2O; X является Cl, Br или I;
Если R2 является ацильной группой, замещенной алкильной группой, ацильной группой, замещенной ароматической группой, введенной таким же способом, как введение R3; если R2 является алкильной группой, циклоалкильной группой или гетероарильной группой, введение осуществляется путем реакции этерификации оп галогену R2.
Затем, карбонильную группу углерода C6 приготовили восстановлением с получением производных гамбогеновой кислоты, соответствующих Формуле (VIII), и/или путем эстерификации или окисления с помощью R4OH, R5R6NH или 
с получением производных гамбогеновой кислоты, соответствующих Формуле (III).
Растворителем для реакции конденсации R2 и/или R3 может быть метил хлорид (такой как дихлорметан, хлороформ), хлорированный этан, тетрагидрофуран, и т.д. Температура реакции предпочтительно от 20°C до 40°C. Двухосновный реагент (такой как триэтиламин, пиридин) или катализатор (такой как DMAP) может быть добавлен соответствующим образом. Если R2 и R3 являются различными, молярное соотношение галогенангидрида кислоты или ангидрида кислоты и гамбогеновой кислоты составляет 5:1.
Галогенидами R2 могут быть R2Br, R2I. Предпочтительным образом, условия реакции включают карбонат натрия, карбонат калия, карбонат или бикарбонат цезия. Предпочтительным образом, растворителем реакции является полярный растворитель, такой как DMA или DMF.
Восстанавливающие агенты, используемые для реакции восстановления по C6 включают такие, как боргидрид натрия, боргидрид лития, пригодные растворители включают C1-C6 спирты и тетрагидрофуран.
В четвертом аспекте, данное изобретение описывает второй способ получения производного гамбогеновой кислоты, при котором гамбогеновая кислота, производные гамбогеновой кислоты по Формуле (VII), или производные гамбогеновой кислоты по Формуле (VIII) используют в качестве исходных материалов; двойную связь между С9 и C10 окисляют с помощью пероксиданта в щелочных условиях, чтобы получить производные гамбогеновой кислоты по Формуле (II).
Предпочтительным образом, концентрация пероксида водорода составляет 30%. Реакционным растворителем является предпочтительным образом вода, основание является водорастворимым гидроксидом, таким как NaOH, KOH, и др.
В пятом аспекте, данное изобретение описывает третий способ получения производного гамбогеновой кислоты, при котором производное гамбогеновой кислоты по Формуле (I) получают с помощью 1,4-присоединения медьорганического реагента RCu по двойной связи между С9 и C10 гамбогеновой кислоты, производного гамбогеновой кислоты по Формуле (VII), или производного гамбогеновой кислоты по Формуле (VIIII).
Предпочтительным образом, растворителем для реакции присоединения является тетрагидрофуран, дихлорид углерода, и др. Температура реакции составляет предпочтительным образом от -10°C до -50°C, более предпочтительным образом -20°C.
В другом аспекте данное изобретение описывает применение противоракового медикамента упомянутого производного гамбогеновой кислоты. Противораковый препарат на основе гамбогеновой кислоты может применяться в виде инъекции, порошка и в других формах.
Злокачественные опухоли включают, не ограничиваясь этим, человеческий рак кожи, человеческий рак щитовидной железы, человеческий рак груди, человеческий рак желудка, человеческий рак ободочной и прямой кишки, человеческий рак печени, человеческий рак легких, человеческий рак яичников, человеческий рак головы и шеи, человеческий рак почек, человеческий рак мочевого пузыря, человеческая саркома (костей, хрящей, поперечнополосатых мышц и др.), человеческая злокачественная лимфома, человеческая лейкемия, человеческий рак простаты, человеческая злокачественная глиома, человеческий рак шейки матки, человеческий рак пищевода, человеческий рак яичек, человеческая злокачественная тератома.
Производное гамбогеновой кислоты по данному изобретению обладает лучшей противораковой активностью, большей безопасностью и более легким способом получения.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
На Фиг. 1 изображена схема первого способа получения производного гамбогеновой кислоты по данному изобретению;
На Фиг. 2 изображена схема второго способа получения производного гамбогеновой кислоты по данному изобретению;
На Фиг. 3 изображена схема третьего варианта осуществления данного изобретения в отношении производного гамбогеновой кислоты по данному изобретению;
На Фиг. 4 изображена схема четвертого варианта осуществления данного изобретения в отношении производного гамбогеновой кислоты по данному изобретению;
На Фиг. 5 изображена схема пятого варианта осуществления данного изобретения в отношении производного гамбогеновой кислоты по данному изобретению.
Подробное описание изобретения
Данное изобретение описывает производное гамбогеновой кислоты, соль производного гамбогеновой кислоты и способ получения и применения упомянутого производного гамбогеновой кислоты.
Структура производного гамбогеновой кислоты по данному изобретению соответствует Формуле (I) и/или (II), и предпочтительным образом любой из Формул (III)-(VI). Первый вариант получения производного гамбогеновой кислоты по данному изобретению изображен на Фиг. 1, исходными материалами является гамбогеновая кислота, вводятся R2 и R3, при этом порядок введения R2 и R3 можно менять.
Второй вариант получения производного гамбогеновой кислоты по данному изобретению показан на Фиг. 2, исходным материалом является гамбогеновая кислота или производное гамбогеновой кислоты, приготовленное согласно первому варианту, и карбонильная группа углерода C6 восстанавливается до гидроксигруппы.
Третий вариант получения производного гамбогеновой кислоты по данному изобретению показан на Фиг. 3, исходным материалом является гамбогеновая кислота или производное гамбогеновой кислоты, приготовленное согласно первому или второму варианту, и затем производное гамбогеновой кислоты получают эстерификацией с R4OH, или окислением с R5R6NH или 
.
Четвертый вариант получения производного гамбогеновой кислоты по данному изобретению показан на Фиг. 4, исходным материалом является гамбогеновая кислота, или производное гамбогеновой кислоты по Формуле (VII), или производное гамбогеновой кислоты по Формуле (VIII), и двойную связь между C8 и С9 окисляют с получением производного гамбогеновой кислоты.
Пятый вариант получения производного гамбогеновой кислоты по данному изобретению показан на Фиг. 5, исходным материалом является гамбогеновая кислота, или производное гамбогеновой кислоты по Формуле (VII), или производное гамбогеновой кислоты по Формуле (VIII), и производное гамбогеновой кислоты получают присоединением по двойной связи между С9 и C10 медьорганического реагента RCu.
Как показано на Фиг. 1 - Фиг. 5 и в Формулах (I)-(VIII):
А является -СО- или -НС(ОН)-;
R1 выбирают из:
1) -OR4;
где R4 выбирают из группы, состоящей из любого из следующих: водород, прямая или разветвленная C1-C10 алкильная группа, или алкильная группа, возможно содержащая от 1 до 3 замещенных групп, включая кислород, галоген, C1-C10 алкоксигруппу, ацилоксигруппу, C1-C10 алкоксикарбонильную группу, арилоксигруппу; C3-C8 циклоалкильная группа, C1-C10 алкильная группа, замещенная 1, 2 или 3 гетероатомами; алкиларильная группа включающая C1-C10 алкильную группу, замещенную ароматической группой и C1-C10 алкильную группу, возможно замещенную от 1 до 3 замещенными ароматическими группами, включая ацильную группу, -OCH2O-, галоген, галогеналкильную группу, арильную группу, С3-C8 циклоалкильную группу, C1-C10 алкильную группу, гидроксигруппу, ацилоксигруппу, C1-C10 алкоксигруппу; гетероарилалкильная группа, включающая C1-C10 алкоксигруппу, замещенную гетероарильной группой, и C1-C10 алкильную группу, возможно замещенную любой гетероарильной группой, включая гетероарильную группу, C1-C10 алкильную группу, аралкильную группу, С3-C8 циклоалкильную группу, C1-C10 алкоксикарбонильную группу, карбамоильную группу, ароматическую группу и C1-C6 амидную группу; прямая или разветвленная С2-C10 алкенильная группа или алкинильная группа, возможно включающая от 1 до 3 замещенных групп, включая кислород, галоген, ароматическую циклическую группу, аралкильную группу, C1-C10 алкоксигруппу, ацилоксигруппу, амидную группу, C1-C6 амин ацильную группу, C1-C10 алкоксигруппу и C1-C10 гетероалкильную группу, включающую 1, 2 или 3 гетероатома; С4-C10 циклоалкенильная группа, С4-C10 алкинильная группа, или алкинильная группа, возможно включающая от 1 до 3 замещенных групп, включая кислород, галоген, ароматическую циклическую группу, аралкильная группа, C1-C10 алкоксигруппу, ацилоксигруппу, амидную группу, C1-C6 ацильную группу, C1-C10 алкоксигруппу, арилоксигруппу и C1-C10 гетероалкильную группу, возможно включающую 1, 2 или 3 гетероатома.
2) -NR5R6;
где R5 и R6 могут быть одинаковыми или разными, и их независимо выбирают из любых из следующих замещенных групп: водород; прямая или разветвленная C1-C10 алкильная группа или C1-C10 алкильная группа, возможно содержащая от 1 до 3 замещенных групп, включая кислород, галоген, C1-C10 алкоксигруппу, ацилоксигруппу, C1-C10 алкоксиацильную группу, арилоксигруппу; С3-C8 циклоалкильная группа; C1-C10 алкильная группа, замещенная 1, 2 или 3 гетероатомами; алкиларильная группа, включая C1-C10 алкильную группу, замещенную ароматической группой, и C1-C10 алкильную группу, необязательно замещенную от 1 до 3 замещещными ароматическими группами, включая ацильную группу, -ОСН2О-, галоген, галогеналкильную группу, гидроксигруппу, арильную группу, C3-C8 циклоалкильную группу, C1-C10 алкильную группу, ацилоксигруппу, C1-C10 алкоксигруппу; гетероарилалкильная группа, включая C1-C10 алкоксигруппу, замещенную гетероарильной группой, и C1-C10 алкильную группу, возможно замещенную любой гетероарильной группой, включая гетероарильную группу, C1-C10 алкильную группу, аралкильную группу, С3-C8 циклоалкильную группу, C1-C10 алкоксикарбонильную группу, карбамоильную группу, ароматическую группу и C1-C6 амидную группу; прямая или разветвленная С2-C10 алкенильная группа или алкенильная группа, возможно содержащая от 1 до 3 замещенных групп, включая кислород, галоген, ароматическую циклическую группу, аралкильную группу, C1-C10 алкоксигруппу, ацилоксигруппу, амидную группу, C1-С6 амин ацильную группу, C1-C10 алкоксигруппу, арилоксигруппу и C1-C10 гетероалкильную группу, содержащую 1, 2 или 3 гетероатома; С4-C10 циклоалкенильная группа, С4-C10 алкинильная группа, или алкинильная группа, возможно содержащая от 1 до 3 замещенных групп, включая кислород, галоген, ароматическую циклическую группу, аралкильную группу, C1-C10 алкоксигруппу, ацилоксигруппу, амидную группу, C1-С6 ацильную группу, C1-C10 алкоксигруппу, арилоксигруппу и C1-C10 гетероалкильную группу, включая 1, 2 или 3 гетероатома.
где s и t являются целыми положительными числами, и сумма s и t является натуральным числом от 2 до 10;
m является 0, 1, 2 или 3, и представляет собой количество замещенных групп на R7 кольца;
n является 0, 1, 2 или 3, и представляет собой количество В на кольце; В является углеродом, азотом или кислородом;
группы R7, R8 идентичны группе R5, или карбонильной группе, иминогруппе, оксимной группе, алифатической группе; или если В является третичным азотом, то R8 является кислородом, и образует оксиды азота с В;
R2 выбирают из любых из следующих замещенных групп: водород, прямая или разветвленная C1-C10 алкильная группа, C3-C8 циклоалкильная группа, ароматическая группа или ароматическая группа, замещенная C1-C10 алкильной группой, гетероарильная группа, и ацильная группа, замещенная C1-C10 алкильной группой, или ацильная группа, замещенная ароматической группой;
R3 выбирают из любых из следующих замещенных групп: водород, C1-C10 ацильная группа, замещенная алкильной группой, или арильная группа, замещенная ароматической группой;
R выбирают из любых из следующих замещенных групп: водород, прямая или разветвленная C1-C10 алкильная группа, C3-C8 циклоалкильная группа, прямая или разветвленная С2-C10 алкенильная группа или C3-C8 циклоалкенильная группа, фенильная группа или фенильная группа, замещенная C1-C10 алкильной группой, С2-C6 алкинильная группа, нуклеофилы, содержащие вторичную аминогруппу, включая прямую или разветвленную алкиламиногруппу, прямую или разветвленную алкениламиногруппу; ароматическая или ароматическая алкиламиногруппа, амин, полученный присоединением цепочки алкиниламиногруппы и α,β-ненасыщенных кетонов.
Однако, R, R1, R2, R3 не являются одновременно водородом в Формуле (I).
Цели, преимущества и новизна данного изобретения станут более очевидны из последующего подробного описания в сочетании с прилагаемыми чертежами.
Пример 1. Получение метил гамбогеновой кислоты
R1 является метальной группой в Формуле (VI).
Согласно Фиг. 3, 20 мг гамбогеновой кислоты, 6,5 мг натрий гидрокарбоната, 1 мл DMA (N,N-диметилацетамид), 15 мкл йодометана добавили в 10 мл реакционную колбу и в темноте при комнатной температуре.
За прогрессом реакции следили с помощью тонкослойной хроматографии (TLC). По окончанию реакции, реакционный раствор вылили в 50 мл воды, экстрагировали эфиром, промыли солевым раствором, высушили над безводным сульфатом натрия, и подвергли хроматографии (в качестве элюента использовали этилацетат/петролейный эфир, в объемном соотношении 1:12) получив 9 мг оранжево-желтого желеобразного вещества.
Пример 2. Получение 6-метокси метилового эфира гамбогеновой кислоты
R1 является метальной группой, R2 является метальной группой, и R3 является Н в Формуле (ПI).
Согласно Фиг. 1, 20 мг метил гамбогеновой кислоты, полученной в примере 1, 12 мг калия, 1 мл DMA, 15 мкл йодометана добавили в 25 мл реакционную колбу и в темноте при комнатной температуре.
По окончанию реакции, реакционный раствор вылили в 50 мл воды, и экстрагировали эфиром, промыли водой, высушили и подвергли хроматографии (в качестве элюента использовали этилацетат/петролейный эфир, в объемном соотношении 1:12) получив 12 мг оранжево-желтого желеобразного вещества.
Пример 3. Получение этилового эфира гамбогеновой кислоты
R1 является этильной группой в Формуле (VI).
Согласно Фиг. 3, 20 мг гамбогеновой кислоты, 6,5 мг бикарбоната натрия, 1 мл DMA, и 15 мкл бромэтана добавили в 10 мл реакционную колбу и в темноте при комнатной температуре.
По окончанию реакции, реакционный раствор вылили в 50 мл воды, экстрагировали эфиром, подвергли хроматографии (в качестве элюента использовали этилацетат/петролейный эфир, в объемном соотношении 1:12) получив 9 мг оранжево-желтого желеобразного вещества.
Пример 4. Получение 6-этоксил производного этилового эфира гамбогеновой кислоты
R1 является этильной группой, R2 является этильной группой, R3 является Н в Формуле (ПI).
Согласно Фиг. 1, 20 мг метилгамбогеновой кислоты, полученной в примере 1, 6 мг карбоната калия, 1 мл DMA (N,N-диметилацетамид), 15 мкл бромэтана добавили в 25 мл реакционную колбу и в темноте при комнатной температуре.
По окончанию реакции, реакционный раствор вылили в 50 мл воды, экстрагировали эфиром, промыли водой, высушили и подвергли хроматографии (в качестве элюента использовали этилацетат/петролейный эфир) (в объемном соотношении 1:12) получив 9 мг оранжево-желтого желеобразного вещества.
Пример 5. Получение пиперидин производного гамбогеновой кислоты
R1 является 
в Формуле (VI).
Согласно Фиг. 3, 15,6 мг гамбогеновой кислоты и 0,5 мл дихлорметана охладили с помощью льда до 0°C с образованием ледяного раствора в 10 мл реакционной колбе. 6 мг 1-(3-диметаламинопропил)-3-этилкарбодиимида карбодиимида гидрохлорида (EDCI), 3,6 мг 1-гидроксибензотриазола триазола (НОВТ), 4,8 мкл безводного пиперидина и 0,4 мл дихлорметана добавили к этому ледяному раствору.
Ледяной раствор нагрели естественным образом до комнатной температуры и при перемешивании получили реакционный раствор. По окончанию реакции, реакционный раствор разбавили добавлением 50 мл дихлорметана, промыли с помощью 0,5 М водного раствора серной кислоты, насыщенным солевым раствором, высушили над безводным сульфатом натрия после чего упарили растворитель и подвергли хроматографии (в качестве элюента использовали этилацетат/петролейный эфир/диэтил хлорметан) (в объемном соотношении 1:4:1), и после элюирования получили 5 мг желтого желеобразного вещества.
Пример 6. Получение диэтиламида гамбогеновой кислоты
R1 является -N(CH32CH3)2.
Согласно Фиг. 3, 20 мг гамбогеновой кислоты и 0,5 мл дихлорметана охладили с помощью льда до 0°C с образованием ледяного раствора в 10 мл реакционной колбе. 6 мг EDCI, 3,6 мг НОВТ, 10 мкл этилендиамина и 0,5 мл дихлорметана добавили к этому ледяному раствору.
Ледяной раствор нагрели естественным образом до комнатной температуры и при перемешивании получили реакционный раствор. По окончанию реакции, реакционный раствор разбавили добавлением 50 мл дихлорметана, промыли с помощью 0,5 М водного раствора серной кислоты, насыщенным солевым раствором, высушили безводным сульфатом натрия после чего упарили растворитель и подвергли хроматографии (в качестве элюента использовали этилацетат/петролейный эфир/диэтил хлорметан) (в объемном соотношении 1:4:1), и после элюирования получили 7 мг желтого желеобразного вещества.
Пример 7. Получение морфолин производного гамбогеновой кислоты.
R1 является 
.
Согласно Фиг. 3, 15,6 мг гамбогеновой кислоты и 0,5 мл дихлорметана охладили с помощью льда до 0°C с образованием ледяного раствора в 10 мл реакционной колбе. 10 мг EDCI, 6 мг НОВТ, 5 мкл морфолина и 0,4 мл дихлорметана добавили к этому ледяному раствору.
Ледяной раствор нагрели естественным образом до комнатной температуры и при перемешивании получили реакционный раствор. 3 мг НОВТ, 5 мкл морфолина также добавили к реакционному раствору. По окончанию реакции, реакционный раствор разбавили добавлением 50 мл дихлорметана, и промыли с помощью 0,5 М водного раствора серной кислоты, насыщенным солевым раствором, высушили безводным сульфатом натрия, после чего упарили растворитель и подвергли хроматографии (в качестве элюента использовали хлороформ/этилацетат) (в объемном соотношении 8:1), и после элюирования получили 5 мг оранжево-желтого желеобразного вещества.
Пример 8. Получение 12-гидрокси гамбогеновой кислоты
Формула 12-гидрокси гамбогеновой кислоты следующая:
Согласно Фиг. 2, 20 мг гамбогеновой кислоты и 4 мл метанола охладили с помощью льда до -5°C с образованием ледяного раствора в 10 мл реакционной колбе. К ледяному раствору добавили 44 мг боргидрида натрия. Смесь высушили в течение 1 ч, и дали нагреться до комнатной температуры естественным образом в течение 3 часов до окончания реакции.
3 М водный раствор соляной кислоты добавили для погашения реакции. Реакционный раствор разбавили добавлением 50 мл этилацетата и промыли с помощью 0,5 М водного раствора соляной кислоты, насыщенным солевым раствором, и высушили безводным сульфатом натрия, после чего упарили растворитель и подвергли хроматографии (в качестве элюента использовали этилацетат/дихлорметан) (в объемном соотношении 1:4), и после элюирования получили 9 мг оранжево-желтого желеобразного вещества.
Пример 9. Получение 8,9-эпокси гамбогеновой кислоты
Структурная формула 8,9-эпокси гамбогеновой кислоты следующая:
Согласно Фиг. 4, 50 мг гамбогеновой кислоты, 0,5 мл и 2М водного раствора гидроксида натрия, и 0,2 мл перекиси водорода добавили в 10 мл реакционную колбу при комнатной температуре.
По окончанию реакции, реакционный раствор проэкстрагировали этилацетатом и промыли с помощью 1,0 М водного раствора соляной кислоты, насыщенным солевым раствором, и высушили безводным сульфатом натрия, после чего упарили растворитель и подвергли хроматографии (в качестве элюента использовали этилацетат/петролейный эфир) (в объемном соотношении 1:3), и после элюирования получили 12 мг оранжево-желтого желеобразного вещества.
Пример 10. Получение n-бутиламин производного гамбогеновой кислоты
А является -СО-, R1 является-NH-(СН2)10-СН3 в Формуле (VI).
20 мг гамбогеновой кислоты и 0,5 мл дихлорметана охладили с помощью льда до 0°C с образованием ледяного раствора в 10 мл реакционной колбе. К этому раствору добавили 10 мг EDCI, 4,5 мг НОВТ, 6 мкл n-бутиламина и 0,5 мл дихлорметана. Ледяной раствор нагрели естественным образом до комнатной температуры и при перемешивании получили реакционный раствор.
По окончанию реакции, реакционный раствор разбавили добавлением 50 мл дихлорметана, и промыли с помощью 0,5 М водного раствора серной кислоты, насыщенным солевым раствором, высушили безводным сульфатом натрия, после чего упарили растворитель и подвергли хроматографии на силикагелевой колонне (в качестве элюента использовали этилацетат/петролейный эфир/дихлорметан) (в объемном соотношении 1:8:1), и после элюирования получили 7 мг оранжево-желтого желеобразного вещества.
Пример 11 Получение ундециламин производного гамбогеновой кислоты
А является -СО-, R1 является -NH-(СН2)10-СН3 в Формуле (VI).
20 мг гамбогеновой кислоты и 0,5 мл дихлорметана охладили с помощью льда до 0°C с образованием ледяного раствора в 10 мл реакционной колбе. К этому раствору добавили 10 мг EDCI, 4,5 мг НОВТ, 6 мкл n-ундециламина и 0,5 мл дихлорметана. Ледяной раствор нагрели естественным образом до комнатной температуры и при перемешивании получили реакционный раствор.
По окончанию реакции, реакционный раствор разбавили добавлением 50 мл дихлорметана, и промыли с помощью 0,5 М водного раствора серной кислоты, насыщенным солевым раствором, высушили безводным сульфатом натрия, после чего упарили растворитель и подвергли хроматографии на силикагелевой колонне (в качестве элюента использовали этилацетат/петролейный эфир/дихлорметан (в объемном соотношении 1:8:1), и после элюирования получили 7 мг оранжево-желтого желеобразного вещества.
Пример 12. Получение изопропиламин производного гамбогеновой кислоты
А является -СО-, R1 является-NH-СН(СН3)2 в Формуле (VI).
20 мг гамбогеновой кислоты и 0,5 мл дихлорметана охладили с помощью льда до 0°C с образованием ледяного раствора в 10 мл реакционной колбе.. К этому раствору добавили 10 мг EDCI, 4,5 мг НОВТ, 5 мкл изопропиламина и 0,5 мл дихлорметана. Ледяной раствор нагрели естественным образом до комнатной температуры и при перемешивании получили реакционный раствор.
По окончанию реакции, реакционный раствор разбавили добавлением 50 мл дихлорметана, и промыли с помощью 0,5 М водного раствора серной кислоты, насыщенным солевым раствором, высушили безводным сульфатом натрия, после чего упарили растворитель и подвергли хроматографии на силикагелевой колонне (в качестве элюента использовали этилацетат/петролейный эфир/дихлорметан) (в объемном соотношении 1:8:1), и после элюирования получили 7 мг оранжево-желтого желеобразного вещества.
Пример 13. Получение дипропиламин производного гамбогеновой кислоты
А является -СО-, R1 является -NHR5R6, при этом R5 и R6 каждый являются пропильной группой в Формуле (VI).
20 мг гамбогеновой кислоты и 0,5 мл дихлорметана охладили с помощью льда до 0°C с образованием ледяного раствора в 10 мл реакционной колбе. К этому раствору добавили 10 мг EDCI, 4,5 мг НОВТ, 8 мкл дипропиламина и 0,5 мл дихлорметана. Ледяной раствор нагрели естественным образом до комнатной температуры и при перемешивании получили реакционный раствор.
По окончанию реакции, реакционный раствор разбавили добавлением 50 мл дихлорметана, и промыли с помощью 0,5 М водного раствора серной кислоты, насыщенным солевым раствором, высушили безводным сульфатом натрия, после чего упарили растворитель и подвергли хроматографии на силикагелевой колонне (в качестве элюента использовали этилацетат/петролейный эфир/дихлорметан (в объемном соотношении 1:4:1), и после элюирования получили 7 мг оранжево-желтого желеобразного вещества.
Пример 14. Получение изобутиламин производного гамбогеновой кислоты
А является -СО-, R1 является -NH-C(СН3)-СН2-СН3 в Формуле (VI).
20 мг гамбогеновой кислоты и 0,5 мл дихлорметана охладили с помощью льда до 0°C с образованием ледяного раствора в 10 мл реакционной колбе. К этому раствору добавили 10 мг EDCI, 4,5 мг НОВТ, 6 мкл изобутиламина и 0,5 мл дихлорметана. Ледяной раствор нагрели естественным образом до комнатной температуры и при перемешивании получили реакционный раствор.
По окончанию реакции, реакционный раствор разбавили добавлением 50 мл дихлорметана, и промыли с помощью 0,5 М водного раствора серной кислоты, насыщенным солевым раствором, высушили безводным сульфатом натрия, после чего упарили растворитель и подвергли хроматографии на силикагелевой колонне (в качестве элюента использовали этилацетат/петролейный эфир/дихлорметан (в объемном соотношении 1:8:1), и после элюирования получили 7 мг оранжево-желтого желеобразного вещества.
Пример 15 Получение 2,6-диметилпиперидин производного гамбогеновой кислоты
R1 является 
.
Согласно Фиг. 3, 20 мг гамбогеновой кислоты и 0,5 мл дихлорметана охладили с помощью льда до 0°C с образованием ледяного раствора в 10 мл реакционной колбе. К этому раствору добавили 10 мг EDCI, 4,5 мг НОВТ, 8 мкл 2, 6-диметилпиперидин и 0,5 мл дихлорметана. Ледяной раствор нагрели естественным образом до комнатной температуры и при перемешивании получили реакционный раствор.
По окончанию реакции, реакционный раствор разбавили добавлением 50 мл дихлорметана, и промыли с помощью 0,5 М водного раствора серной кислоты, 3 раза насыщенным солевым раствором, высушили безводным сульфатом натрия, после чего упарили растворитель и подвергли хроматографии (в качестве элюента использовали этилацетат/бензол) (в объемном соотношении 1:8), и после элюирования получили 5 мг оранжево-желтого желеобразного вещества.
Пример 16. Получение пирролидин производного гамбогеновой кислоты
R1 является 
.
Согласно Фиг. 3, 20 мг гамбогеновой кислоты и 0,5 мл дихлорметана охладили с помощью льда до 0°C с образованием ледяного раствора в 10 мл реакционной колбе. К этому раствору добавили 10 мг EDCI, 4,5 мг НОВТ, 5 мкл пирролидина и 0,5 мл дихлорметана. Ледяной раствор нагрели естественным образом до комнатной температуры и при перемешивании получили реакционный раствор.
По окончанию реакции, реакционный раствор разбавили добавлением 50 мл дихлорметана, и промыли с помощью 0,5 М водного раствора серной кислоты, 3 раза насыщенным солевым раствором, высушили безводным сульфатом натрия, после чего упарили растворитель и подвергли хроматографии (в качестве элюента использовали этилацетат/петролейный эфир) (в объемном соотношении 1:4), и после элюирования получили 6 мг оранжево-желтого желеобразного вещества.
Пример 17. Получение циклогексиламин производного гамбогеновой кислоты
R1 является 
.
Согласно Фиг. 3, 20 мг гамбогеновой кислоты и 0,5 мл дихлорметана охладили с помощью льда до 0°C с образованием ледяного раствора в 10 мл реакционной колбе. К этому раствору добавили 10 мг EDCI, 4,5 мг НОВТ, 7 мкл циклогексиламина и 0,5 мл дихлорметана. Ледяной раствор нагрели естественным образом до комнатной температуры и при перемешивании получили реакционный раствор.
По окончанию реакции, реакционный раствор разбавили добавлением 50 мл дихлорметана, и промыли с помощью 0,5 М водного раствора серной кислоты, насыщенным солевым раствором, высушили безводным сульфатом натрия, после чего упарили растворитель и подвергли хроматографии (в качестве элюента использовали этилацетат/петролейный эфир/дихлорметана) (в объемном соотношении 1:4:1), и после элюирования получили 7 мг оранжево-желтого желеобразного вещества.
Пример 18. Получение этоксиэтиламин производного гамбогеновой кислоты
R1 является -NH-(СН)2-O-СН2-СН3.
20 мг гамбогеновой кислоты и 0,5 мл дихлорметана охладили с помощью льда до 0°C с образованием ледяного раствора в 10 мл реакционной колбе. К этому раствору добавили 10 мг EDCI, 4,5 мг НОВТ, 5 мг этоксиэтиламин и 0,5 мл дихлорметана. Ледяной раствор нагрели естественным образом до комнатной температуры и при перемешивании получили реакционный раствор.
По окончанию реакции, реакционный раствор разбавили добавлением 50 мл дихлорметана, и промыли с помощью 0,5 М водного раствора серной кислоты, насыщенным солевым раствором, высушили безводным сульфатом натрия, после чего упарили растворитель и подвергли хроматографии (в качестве элюента использовали этилацетат/петролейный эфир/дихлорметана) (в объемном соотношении 1:4:1), и после элюирования получили 5 мг оранжево-желтого желеобразного вещества.
Пример 19. Получение бензиламин производного гамбогеновой кислоты
R1 является 
.
20 мг гамбогеновой кислоты и 0,5 мл дихлорметана охладили с помощью льда до 0°C с образованием ледяного раствора в 10 мл реакционной колбе. К этому раствору добавили 10 мг EDCI, 4,5 мг НОВТ, 7 мкл бензиламин и 0,5 мл дихлорметана. Ледяной раствор нагрели естественным образом до комнатной температуры и при перемешивании получили реакционный раствор.
По окончанию реакции, реакционный раствор разбавили добавлением 50 мл дихлорметана, и промыли с помощью 0,5 М водного раствора серной кислоты, насыщенным солевым раствором, высушили безводным сульфатом натрия, после чего упарили растворитель и подвергли хроматографии (в качестве элюента использовали этилацетат/петролейный эфир/дихлорметана) (в объемном соотношении 1:4:1), и после элюирования получили 7 мг оранжево-желтого желеобразного вещества.
Пример 20. Получение этоксикарбонил метиламин производного гамбогеновой кислоты
R1 является -NH-СН2-СО-O-СН2-СН3.
20 мг гамбогеновой кислоты и 0,5 мл дихлорметана охладили с помощью льда до 0°C с образованием ледяного раствора в 10 мл реакционной колбе. К этому раствору добавили 10 мг EDCI, 4,5 мг НОВТ, 10 мг этилового эфира глицина и 0,5 мл дихлорметана. Ледяной раствор нагрели естественным образом до комнатной температуры и при перемешивании получили реакционный раствор.
По окончанию реакции, реакционный раствор разбавили добавлением 50 мл дихлорметана, и промыли с помощью 0,5 М водного раствора серной кислоты, насыщенным солевым раствором, высушили безводным сульфатом натрия, после чего упарили растворитель и подвергли хроматографии (в качестве элюента использовали этилацетат/петролейный эфир/дихлорметана) (в объемном соотношении 1:4:1), и после элюирования получили 7 мг оранжево-желтого желеобразного вещества.
Пример 21. Получение пиперазин производного гамбогеновой кислоты
R1 является 
.
20 мг гамбогеновой кислоты и 0,5 мл дихлорметана охладили с помощью льда до 0°C с образованием ледяного раствора в 10 мл реакционной колбе. К этому раствору добавили 10 мг EDCI, 4,5 мг НОВТ, 4 мг пиперазина и 0,5 мл дихлорметана. Ледяной раствор нагрели естественным образом до комнатной температуры и при перемешивании получили реакционный раствор.
По окончанию реакции, реакционный раствор разбавили добавлением 50 мл дихлорметана, и промыли с помощью 0,5 М водного раствора серной кислоты, насыщенным солевым раствором, высушили безводным сульфатом натрия, после чего упарили растворитель и подвергли хроматографии (в качестве элюента использовали этилацетат/метанол) (в объемном соотношении 10:1), и после элюирования получили 7 мг оранжево-желтого желеобразного вещества.
Пример 22 Получение метилпиперазин производного гамбогеновой кислоты и его лимоннокислой соли.
R1 является 
.
20 мг гамбогеновой кислоты и 0,5 мл дихлорметана охладили с помощью льда до 0°C с образованием ледяного раствора в 10 мл реакционной колбе. К этому раствору добавили 10 мг EDCI, 4,5 мг НОВТ, 7 мкл метилпиперазина и 0,5 мл дихлорметана. Ледяной раствор нагрели естественным образом до комнатной температуры и при перемешивании получили реакционный раствор.
По окончанию реакции, реакционный раствор разбавили добавлением 50 мл дихлорметана, и промыли с помощью 0,5 М водного раствора серной кислоты, насыщенным солевым раствором, высушили безводным сульфатом натрия, после чего упарили растворитель и подвергли хроматографии (в качестве элюента использовали этилацетат/петролейньш эфир/дихлорметана) (в объемном соотношении 1:4:1), и после элюирования получили 7 мг оранжево-желтого желеобразного вещества.
Метилпиперазин производное гамбоненовой кислоты растворили в этаноле, по каплям добавили лимонную кислоту, образовавшийся осадок растворили нагреванием, при охлаждении выпал желтый осадок, который отфильтровали и высушили, получив лимоннокислую соль метилпиперазин производного гамбогеновой кислоты.
Пример 23. Получение бензилпиперазин производного гамбогеновой кислоты и его лимоннокислой соли.
R1 является 
.
20 мг гамбогеновой кислоты и 0,5 мл дихлорметана охладили с помощью льда до 0°C с образованием ледяного раствора в 10 мл реакционной колбе. К этому раствору добавили 10 мг EDCI, 4,5 мг НОВТ, 11 мкл бензилпиперазина и 0,5 мл дихлорметана. Ледяной раствор нагрели естественным образом до комнатной температуры и при перемешивании получили реакционный раствор.
По окончанию реакции, реакционный раствор разбавили добавлением 50 мл дихлорметана, и промыли с помощью 0,5 М водного раствора серной кислоты, насыщенным солевым раствором, высушили безводным сульфатом натрия, после чего упарили растворитель и подвергли хроматографии (в качестве элюента использовали этилацетат/петролейньш эфир/дихлорметана) (в объемном соотношении 1:4:1), и после элюирования получили 7 мг оранжево-желтого желеобразного вещества.
Пример 24. Получение 4-ацетилпиперазинил производного гамбогеновой кислоты.
.
20 мг гамбогеновой кислоты и 0,5 мл дихлорметана охладили с помощью льда до 0°C с образованием ледяного раствора в 10 мл реакционной колбе. К этому раствору добавили 10 мг EDCI, 4,5 мг НОВТ, 5 мг ацетилпиперазинила и 0,5 мл дихлорметана. Ледяной раствор нагрели естественным образом до комнатной температуры и при перемешивании получили реакционный раствор.
По окончанию реакции, реакционный раствор разбавили добавлением 50 мл дихлорметана, и промыли с помощью 0,5 М водного раствора серной кислоты, насыщенным солевым раствором, высушили безводным сульфатом натрия, после чего упарили растворитель и подвергли хроматографии (в качестве элюента использовали этилацетат/петролейный эфир/дихлорметана) (в объемном соотношении 1:4:1), и после элюирования получили 7 мг оранжево-желтого желеобразного вещества.
Пример 25. Получение циклопропанамин производного гамбогеновой кислоты.
R1 является 
.
20 мг гамбогеновой кислоты и 0,5 мл дихлорметана охладили с помощью льда до 0°C с образованием ледяного раствора в 10 мл реакционной колбе. К этому раствору добавили 10 мг EDCI, 4,5 мг НОВТ, 5 мкл циклопропанамина и 0,5 мл дихлорметана. Ледяной раствор нагрели естественным образом до комнатной температуры и при перемешивании получили реакционный раствор.
По окончанию реакции, реакционный раствор разбавили добавлением 50 мл дихлорметана, и промыли с помощью 0,5 М водного раствора серной кислоты, насыщенным солевым раствором, высушили безводным сульфатом натрия, после чего упарили растворитель и подвергли хроматографии (в качестве элюента использовали этилацетат/петролейный эфир/) (в объемном соотношении 1:8), и после элюирования получили 5 мг оранжево-желтого желеобразного вещества.
Пример 26. Получение 3-метокси-пирролидин производного гамбогеновой кислоты
R1 является 
.
Согласно Фиг. 3, 20 мг гамбогеновой кислоты и 0,5 мл дихлорметана охладили с помощью льда до 0°C с образованием ледяного раствора в 10 мл реакционной колбе. К этому раствору добавили 10 мг EDCI, 4,5 мг НОВТ, 6 мг 3-метоксипирролидина и 0,5 мл дихлорметана. Ледяной раствор нагрели естественным образом до комнатной температуры и при перемешивании получили реакционный раствор.
По окончанию реакции, реакционный раствор разбавили добавлением 50 мл дихлорметана, и промыли с помощью 0,5 М водного раствора серной кислоты, насыщенным солевым раствором, высушили безводным сульфатом натрия, после чего упарили растворитель и подвергли хроматографии (в качестве элюента использовали этилацетат/петролейный эфир/дихлорметана) (в объемном соотношении 1:4:1), и после элюирования получили 4 мг оранжево-желтого желеобразного вещества.
Пример 27. Получение [3-(3-метокси-пирролидинил)-пропилового] эфира гамбогеновой кислоты
R1 является 
.
Согласно Фиг. 3, 20 мг гамбогеновой кислоты и 0,5 мл дихлорметана охладили с помощью льда до 0°C с образованием ледяного раствора в 10 мл реакционной колбе. К этому раствору добавили 10 мг EDCI, 4,5 мг НОВТ, 10 мг 3-(3-метокси-пирролидинил)-пропанола и 0,5 мл дихлорметана. Ледяной раствор нагрели естественным образом до комнатной температуры и при перемешивании получили реакционный раствор.
По окончанию реакции, реакционный раствор разбавили добавлением 50 мл дихлорметана, и промыли с помощью 0,5 М водного раствора серной кислоты, насыщенным солевым раствором, высушили безводным сульфатом натрия, после чего упарили растворитель и подвергли хроматографии (в качестве элюента использовали этилацетат/петролейный эфир/дихлорметана) (в объемном соотношении 1:4:1), и после элюирования получили 7 мг оранжево-желтого желеобразного вещества.
Пример 28. Получение 10-метил гамбогеновой кислоты
R1 и R3 является Н, R является метальной группой в Формуле (V).
Согласно Фиг. 5, 24 мг магния, 1 мл эфира и 0,07 мл йодометана по каплям добавили в 5 мл реакционную колбу, и при микрокипячении получили прозрачный реагент Гриньяра. 100 мг йодида меди растворили в тетрагидрофуране с образованием суспензии, охладили ее до -40°C и добавили 0,1 мл приготовленного реагента Гриньяра с образованием серой суспензии.
20 мг гамбогеновой кислоты добавили в тетрагидрофуран при -20°C.
По окончанию реакции, реакцию погасили добавлением 1 М соляной кислоты, провели эфирную экстракцию, и подвергли хроматографическому разделению, получив 7 мг оранжево-желтого желеобразного вещества.
Соединения, синтезированные по данному изобретению, исследовали с помощью сульфородамин В протеинового окрашивания (сульфородамин В, SRB) и МТТ колориметрическим способом соответственно на in vitro противораковую активность (Cancer Res., 1988,48 (3): 589).
Градиент концентраций проверяемых соединений по данному изобретению составлял 10-4М, 10-5М, 10-6М, 10-7М, 10-8М, и проверяемыми соединениями являлись 6-метоксиметаловый эфир гамбогеновой кислоты, этиловый эфир гамбогеновой кислоты, 6-этоксиэтиловый эфир гамбогеновой кислоты, 6-ацил гамбогеновая кислота, пиперидин производное гамбогеновой кислоты, диэтиламид гамбогеновой кислоты, морфолин производное гамбогеновой кислоты, 12-гидрокси гамбогеновая кислота и 8,9-эпокси гамбогеновая кислота. Проверяемые соединения и позитивный контроль (гамбогеновая кислота) разбавили диметилсульфоксидом.
Степень ингибирования (%)=[(значение контрольной группы OD- значение испытуемой группы OD)/значение контрольной группы OD]×100%
Оценка результатов:
Не эффективно: 10-5М степень ингибирования <85%;
Слабо эффективно: 10-5М степень ингибирования ≥85% или 10-6М>50%;
Эффективно: 10-6М степень ингибирования ≥75% или 10-7 М степень ингибирования >50%.
1. Ингибирование роста клеток опухоли Са127
Клетки человеческого орального плоскоклеточного рака Са127 культивировали в DMEM с содержанием 10% эмбриональной бычьей сыворотки (FBS), из клеток с фазой долгого роста формировали суспензии и культивировали на 96-луночных планшетах. 10 мкл проверяемых соединений при различных концентрациях в качестве экспериментальной группы добавляли в каждую лунку 96-луночного планшета. Контрольная группа получила эквивалентный объем с самой высокой концентрацией растворителя (т.е., 10-4 М диметилсульфоксида) в DMEM. После инкубации при 37°C в атмосфере с 5% диоксида углерода в течение 72 часов, клетки зафиксировали трихлоруксусной кислотой и в каждую лунку добавили 100 мкл раствора SRB, несвязанный SRB смысл, и измерили значения OD при 550 нм с помощью автоматического спектрофотометра. Группа раковых клеток без медикаментов являлась контрольной группой. Степень ингибирования роста раковых клеток вычислили и результаты представили в Таблице 1.
2. Ингибирование роста раковых клеток MCF-7
Клетки человеческого рака груди MCF-7 культивировали в DMEM с содержанием 10% FBS, из клеток с фазой долгого роста формировали суспензии и культивировали на 96-луночных планшетах. Проверяемые соединения при различных концентрациях в качестве экспериментальной группы добавляли в каждую лунку 96-луночного планшета. Контрольная группа получила эквивалентный объем с самой высокой концентрацией растворителя (т.е., 10-4 М диметилсульфоксида) в DMEM. После инкубации при 37°C в атмосфере с 5% диоксида углерода в течение 72 часов, в каждую лунку добавили МТТ до финальной концентрации 1 мг/мл и инкубировали в течение 4 часов. Надосадочные жидкости каждой лунки отобрали и добавили 200 мкл DMSO для растворения кристаллов, после чего измерили значения OD при 490 нм с помощью автоматического спектрофотометра. Группа раковых клеток без медикаментов являлась контрольной группой. Степень ингибирования роста раковых клеток вычислили и результаты представили в Таблице 2.
Соответственно, Таблицы 1 и 2 по данному изобретению свидетельствуют о том, что производные гамбогеновой кислоты оказывают более сильное ингибирующее действие на раковые клетки.
Все описанные в описании свойства можно сочетать в любых комбинациях. Каждое свойство, описанное в данной спецификации, можно заменять альтернативным свойством, служащим такой же, эквивалентной или похожей цели. Таким образом, если однозначно не указано иначе, каждое описанное свойство является только примером из типичной серии эквивалентных или похожих свойств. Из вышеприведенного описания специалист в данной области с легкостью определит существенные характеристики данного изобретения, и не отклоняясь за рамки объема данного изобретения сможет произвести различные изменения и модификации этого изобретения для его адаптации к различным условиям и способам применения. Таким образом, другие варианты осуществления данного изобретения также являются включенными в формулу изобретения.
1. Производное гамбогеновой кислоты, соответствующее Формуле (I) или Формуле (II):
в котором:
А является -СО- или -НС(ОН)-;
R2 водород или прямая или разветвленная C1-С10алкильная группа;
R3 водород или ацильная группа, замещенная C1-С10алкильной группой;
R водород или прямая или разветвленная C1-С10алкильная группа;
R1 выбран из:
-OR4, 
или 
;
в котором R4 выбран из группы, состоящей из любого из следующих: водород,
прямая или разветвленная C1-С10алкильная группа или алкильная группа, возможно, содержащая от 1 до 3 замещенных групп, включая кислород, C1-С10алкоксигруппу, или C1-С10алкоксикарбонильную группу;
R5 и R6 независимо выбраны из любой из следующих замещенных групп: водород; прямая или разветвленная C1-С10алкильная группа или C1-С10алкильная группа, возможно, содержащая от 1 до 3 замещенных групп, включая кислород, C1-С10алкоксигруппу, C1-С10алкоксиацильную группу, C1-С10алкильную группу, замещенную фенилом;
s и t являются целыми положительными числами, и сумма s и t является натуральным числом от 2 до 4;
m является 0, 1, 2 или 3 и представляет собой количество замещенных групп на R7 кольца;
n является 0, 1, 2 или 3 и представляет собой количество В на кольце; В является углеродом, азотом или кислородом;
В является углеродом, группы R7, R8 идентичны группе R5; и
R4, R3, R2, R1 не являются одновременно водородом в Формуле (I).
2. Производное гамбогеновой кислоты по п. 1, отличающееся тем, что упомянутое производное гамбогеновой кислоты соответствует Формуле (III), Формуле (IV) или Формуле (V):
,
,
;
в котором R2, R3, R4 не являются одновременно водородом в Формуле (III); R, R2, R3 не являются одновременно водородом в Формуле (V).
3. Производное гамбогеновой кислоты по п. 1, отличающееся тем, что R4 выбран из группы, состоящей из водорода, метильной группы, этильной группы, пропильной группы, изопропильной группы, бутильной группы, изобутильной группы, трет-бутильной группы, гексильной группы, октильной группы, C1-С10алкильной группы, замещенной любой от 1 до 3 групп, включая кислород, C1-С10алкоксигруппу.
4. Производное гамбогеновой кислоты по п. 1, отличающееся тем, что R5 и R6 независимо выбраны из групп: водород, метильная группа, этильная группа, пропильная группа, изопропильная группа, бутильная группа, изобутильная группа, трет-бутильная группа, гексильная группа, октильная группа; C1-С10алкильная группа, содержащая, возможно, от 1 до 3 замещенных групп, включая кислород, C1-С10алкоксигруппу, С1-
С10алкоксиацильную группу, -СН2СН2ОСН2СН3, C1-С10алкильная группа, возможно, замещенная фенилом.
5. Производное гамбогеновой кислоты по п. 1, отличающееся тем, что R3 выбран из водорода, ацетильной группы.
6. Производное гамбогеновой кислоты по п. 1, отличающееся тем, что R2 выбран из водорода, метильной группы, этильной группы, пропильной группы, изопропильной группы, бутильной группы, изобутильной группы, трет-бутильной группы, гексильной группы, октильной группы.
7. Производное гамбогеновой кислоты по п. 1, отличающееся тем, что R выбран из метильной группы, этильной группы, пропильной группы, изопропильной группы, бутильной группы, изобутильной группы, трет-бутильной группы, гексильной группы, октильной группы.
8. Производное гамбогеновой кислоты по п. 1, отличающееся тем, что R1 выбран из:
или 
;
в котором R7 выбран
как определено для R5;
m, n являются 0, 1, 2 или 3;
В является углеродом, азотом или кислородом;
группа R8 идентичная группе R5.
9. Способ получения производного гамбогеновой кислоты, характеризующийся тем, что R2 и R3 вводят в гамбогеновую кислоту или в производное гамбогеновой кислоты Формулы (VI):
приводя к производному гамбогеновой кислоты Формулы (VII):
.
где R1, R2 и R3 как определено в п. 1.
10. Способ получения производного гамбогеновой кислоты, характеризующийся тем, что карбонильную группу углерода С6 восстанавливают, получая производное гамбогеновой кислоты Формулы (VIII), и/или путем эстерификации или окисления с помощью R4OH, R5R6NH или 
,
получая производное гамбогеновой кислоты Формулы (III);
где R2, R3, R4, R5, R6, R7 и R8 как определено в п. 1.
11. Способ получения производного гамбогеновой кислоты, характеризующийся тем, что гамбогеновую кислоту, производное гамбогеновой кислоты по Формуле (VII) или производное гамбогеновой кислоты по Формуле (VIII) используют в качестве исходных веществ; двойную связь между С9 и С10 окисляют пероксидом в щелочных условиях, получая производное гамбогеновой кислоты Формулы (II).
12. Способ получения производного гамбогеновой кислоты, характеризующийся тем, что производное гамбогеновой кислоты по Формуле (I) получают путем 1,4-присоединения по двойной связи между С9 и С10 действием медьорганического реагента RCu на гамбогеновую кислоту, производное гамбогеновой кислоты по Формуле (VII) или производное гамбогеновой кислоты по Формуле (VIIII).
13. Противораковая фармацевтическая композиция, содержащая в качестве активного ингредиента производное гамбогеновой кислоты по п 1.
