Способ подавления роста метициллин-резистентного штамма staphylococcus aureus

Авторы патента:

C12R1/445 - Схема кодирования для подклассов C12C-C12Q или C12S, относящаяся к микроорганизмам

C12Q1/06 - количественное определение

Владельцы патента RU 2598272:

ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ "САРАТОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМЕНИ В.И. РАЗУМОВСКОГО" МИНИСТЕРСТВА ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ (RU)

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для подавления роста метициллин-резистентного штамма Staphylococcus aureus. Способ предусматривает облучение взвеси бактериальных клеток метициллин-резистентного штамма Staphylococcus aureus светом красного лазера (λ - 660 нм). При этом плотность мощности составляет 100 мВт/см², время облучения - 10, 15 или 30 мин в непрерывном режиме. Энергетическая экспозиция - 60, 90 и 180 Дж/см² соответственно. Изобретение позволяет упростить способ подавления роста стафилококков. 1 табл.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для подавления роста метициллин-резистентного штамма Staphylococcus aureus.

Золотистый стафилококк является возбудителем многих заболеваний человека и до последнего времени остается наиболее частой причиной возникновения внутрибольничных инфекций (McKinnell J.A., Miller L.G., Eells S.J., Cui E., Huang S.S. A systematic literature review and meta-analysis of factors associated with methicillin-resistant Staphylococcus aureus colonization at time of hospital or intensive care unit admission. Infect. Control Hosp. Epidemiol. 2013. 34(10): 1077-1086; Carrel M., Schweizer M.L., Sarrazin M.V., Smith T.C., Perencevich E.N. Residential proximity to large numbers of swine in feeding operations is associated with increased risk of methicillin-resistant Staphylococcus aureus colonization at time of hospital admission in rural Iowa veterans. Infect. Control Hosp. Epidemiol. 2014. 35(2): 190-193). Особому риску подвергаются пациенты с ослабленной иммунной системой при несоблюдении персоналом больницы надлежащих санитарных правил. Лечение стафилококковых инфекций вызывает серьезные трудности вследствие нарастающей лекарственной устойчивости возбудителя и появления метициллин-резистентных штаммов (MRSA) (Braga E.D., Aguiar-Alves F., de Freitas Mde F. et al. High prevalence of Staphylococcus aureus and methicillin-resistant S. aureus colonization among healthy children attending public daycare centers in informal settlements in a large urban center in Brazil. BMC Infect. Dis. 2014. 6(14): 538; Miller R.M., Price J.R., Batty E.M. et al. Healthcare-associated outbreak of meticillin-resistant Staphylococcus aureus bacteraemia: role of a cryptic variant of an epidemic clone. J. Hosp. Infect. 2014. 86(2): 83-89; Dissemond J., Goos M., Esser S. Pathogenetic significance of methicillin resistant Staphylococcus aureus (MRSA) in chronic wounds. Vasa. 2003. 32(3): 131-138). Последнее диктует необходимость изыскания новых немедикаментозных методов лечения стафилококковых поражений. В этом плане внимание исследователей привлекают различные виды низкоинтенсивного лазерного излучения.

Так, в работе М. Wilson и С. Yianni (KiIIing of methiciIIin-resistant Staphylococcus aureus by low-power laser light. J. Med. Microbiol. 1999. 42: 62-66) показано ингибирующее влияние излучения He-Ne лазера на рост штамма MRSA. Однако в данном исследовании в качестве источника излучения использовался красный лазер с длиной волны (λ - 632,8 нм) и для повышения фоточувствительности микроба в качестве фотосенсибилизатора применялся толуидиновый синий. Следовательно, в данном случае речь идет не о прямом действии на микроорганизм излучения красного лазера, а о фотодинамическом эффекте.

В работе Silva D.C., Plapler Н., Costa М.М., Silva S.R., Sa Mda С, Silva B.S. (Low level laser therapy (AlGaInP) applied at 5 J/cm² reduces the proliferation of Staphylococcus aureus MRSA in infected wounds and intact skin of rats. An. Bras. Dermatol. 2013. 88(1): 50-55) в опытах на крысах показано снижение пролиферации метициллин-резистентного штамма золотистого стафилококка при облучении инфицированной кожной раны лабораторных животных под влиянием света полупроводникового красного лазера (λ - 658 нм). Однако методические особенности данной работы (использование в качестве модели инфицированной кожной раны, применение лазера с другой длиной волны) не позволяют рассматривать ее в качестве аналога данного предложения.

Более подходящего источника, который мог бы быть использован в качестве прототипа, не найдено.

Авторами предлагается простой и доступный способ подавления роста метициллин-резистентного штамма Staphylococcus aureus путем облучения его светом красного лазера.

Способ реализуется следующим образом. В качестве объекта исследования используются клетки клинического (метициллин-резистентного, MRSA) штамма золотистого стафилококка, полученные из музея кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии СГМУ им. В.И. Разумовского. Для культивирования бактерий используется ГРМ-агар (ГНЦ ПМБ «Оболенск», Россия). Для облучения культур микроорганизмов применяется полупроводниковый лазер (EMRED Оу, Финляндия), генерирующий излучение красной области спектра (λ - 660 нм) в непрерывном режиме. Плотность мощности на поверхности планшета составляет 100 мВт/см², время облучения - 10, 15 и 30 мин (энергетическая экспозиция соответственно 60, 90 и 180 Дж/см²). Для создания асептических условий полистирольный 96-луночный планшет для иммунологических исследований помещается в стерильный пластиковый корпус. Источник излучения располагается над ячейками планшета.

Бактериальная взвесь готовится в стерильном физиологическом растворе по международному оптическому стандарту мутности 5 ед. (ГИСК им. Л.А. Тарасевича, Москва); конечная концентрация составляет 10³ м.к./мл. Из конечного разведения бактериальную взвесь в объеме 0,2 мл вносится в ячейку планшета. Лазерному воздействию подвергается взвесь бактериальных клеток, находящаяся в соответствующих ячейках. Последовательно увеличивается доза облучения за счет возрастания продолжительности фотовоздействия. Затем из каждой ячейки делается высев по 0,2 мл взвеси на чашки Петри с плотной питательной средой и равномерно распределяется по поверхности стерильным шпателем. Контролем служат взвеси бактерий не подвергнутые облучению. Посевы контрольных и облученных микроорганизмов инкубируются в течение 48 часов при 37°C. Оценка влияния излучения на микроорганизмы производится путем подсчета числа выросших колоний. Все эксперименты проводятся в пятикратных повторностях. Статистическая обработка полученных результатов проводится с использованием U-теста Манна-Уитни. Достоверными считаются различия средних при p<0,05.

Результаты использования предлагаемого способа представлены в таблице.

Как видно из таблицы, в контроле среднее число колоний, образуемых микробом на питательной среде, составляло 320,6±69,9. При 10-минутном облучении число колоний уменьшилось до 143,2±19,6 (на 55%, p<0,05), при 15-минутном - до 126,4±16,8 (на 61%, p<0,05), при 30-минутном - до 107,2±14,8 (на 67%, p<0,02).

Следовательно, низкоинтенсивное лазерное излучение красной области спектра (λ - 660 нм) при плотности мощности 100 мВт/см² оказывает ингибирующее влияние на рост колоний метициллин-резистентного штамма золотистого стафилококка.

Способ прост в реализации, не требует дорогостоящего оборудования и высокоэффективен.

Способ подавления роста метициллин-резистентного штамма Staphylococcus aureus, заключающийся в том, что однократно облучают взвесь микробных клеток в концентрации 10³ м.к./мл светом красного лазера с длиной волны 660 нм, плотностью мощности излучения 100 мВт/см² при энергетической экспозиции 60, 90 и 180 Дж/см².

Предложены штамм молочнокислой бактерии Lactococcus lactis SBS-0001 (NITE BP-1107) и штамм молочнокислой бактерии Lactococcus lactis SBS-0002 (NITE BP-1108) для производства силоса. Указанные штаммы способны подавлять маслянокислое брожение в сырье для силоса или ферментированного корма, имеющем низкое содержание сахара, и не отличающемся достаточным качеством брожения при использовании обычной молочнокислой бактерии.

Штамм гриба lecanicillium muscarium, обладающий инсектоакарицидной и антибиотической активностью для борьбы против сосущих вредителей, грибных и бактериальных болезней // 2598251

Изобретение относится к сельскохозяйственной микробиологии, в частности к области защиты растений от вредителей и болезней. Штамм Lecanicillium muscarium МП-4 обладает инсектоакарицидной, а также антибиотической активностью к комплексу фитопатогенных грибов и бактерий.

Штамм paraphoma sp. - продуцент феосферида а // 2596928

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к получению биологически активных веществ и может быть использовано для получения феосферида А. Штамм гриба Paraphoma sp., депонированный в ФГБНУ ВИЗР под регистрационным номером VIZR 1.46, предлагается как продуцент феосферида А.

Штамм гриба mortierella alpina для получения высокоактивного регулятора роста растений // 2596922

Предложен штамм гриба Mortierella alpina ВКПМ F-1134 для производства комплекса жирных кислот с преобладанием арахидоновой кислоты, проявляющего рострегулирующий эффект по отношению к растениям.

Способ культивирования бактерий рода pseudomonas // 2596405

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано при производстве биотехнологических продуктов в экологической и сельскохозяйственной биотехнологии.

Способ дифференциации токсигенных и атоксигенных штаммов холерных вибрионов 01 серогруппы по ингибирующей активности // 2596401

Изобретение относится к области медицинской микробиологии и касается способа дифференциации токсигенных и атоксигенных штаммов холерных вибрионов О1 серогруппы по ингибирующей активности.

Способ восстановления антагонистической активности эндофитного штамма bacillus subtilis 26д вниисхм 128 // 2595431

Изобретение относится к биотехнологии. Способ предусматривает выращивание стерильных микрорастений картофеля на среде Мурасиге-Скуга.

Штамм гибридных клеток животного mus musculus l. 5н6 - продуцент моноклональных антител для выявления гликопротеина е вируса западного нила, моноклональные антитела 5н6, продуцируемые указанным штаммом гибридных клеток, и иммуноферментный набор для выявления гликопротеина е вируса западного нила с использованием указанных моноклональных антител // 2595429

Изобретение относится к области биотехнологии и иммунологии. Описан штамм гибридных клеток животного Mus musculus L.

Способ утилизации отходов животноводческих комплексов // 2595401

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для утилизации отходов на животноводческих комплексах. Способ утилизации отходов предусматривает смешивание твердых отходов с водой в определенной пропорции в зависимости от вида отходов.

Стимулятор роста дрожжей saccharomyces cerevisiae // 2595381

Изобретение относится к области микробиологии. Предложено новое средство для выращивания дрожжей Saccharomyces cerevisiae, в частности применение 5-ацетилсалицилоил-1,3,5-дитиазинана в дозе 0,1-0,15 мг на 0,1 г дрожжей для стимулирования роста дрожжей Saccharomyces cerevisiae.

Способ определения микробиологической чистоты фармацевтической субстанции, произведенной биотехнологическим путем // 2596399

Изобретение относится к фармацевтике и микробиологии. Способ определения микробиологической чистоты фармацевтической субстанции предусматривает подготовку образца фармацевтической субстанции путем разбавления его в триптиказо-соевом бульоне или среде №8.

Способ определения микробиологической чистоты лекарственных средств таргетной терапии // 2596395

Изобретение относится к фармацевтике и микробиологии. Способ определения микробиологической чистоты лекарственных средств предусматривает подготовку образца лекарственного средства путем разбавления его в триптиказо-соевом бульоне или среде №8.

Способ определения токсичности среды по степени угнетения роста тест-культур микроорганизмов // 2570637

Изобретение относится к области биохимии. Способ определения токсичности среды включает определение показателей роста тест-культур в контроле и опыте.

Обнаружение и подсчет микроорганизмов // 2554470

Группа изобретений относится к области микробиологии. Способ обнаружения и подсчета жизнеспособных микроорганизмов в образце предусматривает: (1) контактирование указанных микроорганизмов указанного образца с соединениями для восстановления и средой для выращивания, (2) инкубацию продукта стадии (1) и (3) обнаружение и подсчет указанных микроорганизмов.

Способ количественной оценки биопленкообразования микроорганизмов // 2547935

Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано для количественной оценки способности микроорганизмов к биопленкообразованию на различных биотических и абиотических поверхностях.

Способ микробиологического анализа воздуха // 2542969

Изобретение относится к области микробиологического анализа воздуха. Предложен способ микробиологического анализа воздуха.

Способ получения бактериологически чистых культур морских сине- зеленых микроводорослей // 2542481

Изобретение относится к микробиологии, а именно к способам выделения бактериологически чистых культур морских микроводорослей. Способ получения бактериологически чистых культур морских сине-зеленых микроводорослей предусматривает химическую стерилизацию культур микроводорослей путем обработки их в растворе стерильной морской воды, содержащей 0,1% фенола и 1,0% этилового спирта.

Способ оценки воздействия производственного микробиологического фактора на медицинских сестер крупных многопрофильных детских больниц // 2542412

Изобретение относится к области медицины, а именно к медицине труда и описывает способ оценки воздействия производственного микробиологического фактора на медицинских сестер крупных многопрофильных детских больниц.

Способ определения необходимости санитарно-гигиенической обработки животноводческих помещений // 2541768

Изобретение относится к области оценки состояния микробиологической обстановки окружающей среды и может найти применение в отраслях АПК, характеризующихся высокой бактериальной обсемененностью, например в животноводческих и птицеводческих помещениях.

Хромогенная питательная среда для одноэтапного выделения и идентификации возбудителей уроинфекций // 2534342

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для диагностики неспецифических инфекционных заболеваний мочеполовой системы. Питательная среда содержит питательный агар, сухой, из каспийской кильки, парааминобензойную кислоту, трис-(оксиметил) аминометан (трис-буфер), салицин, нейтральный красный, L-триптофан, 5-бром-4-хлор-3-индолил β-D-глюкуронид циклогексиламмонийной соли, 2-нитрофенил β-D-галактопиранозид и дистиллированную воду в заданном соотношении компонентов.

Способ стерилизации материалов с помощью электромагнитного излучения и устройство для его осуществления // 2592223

Группа изобретений относится к системам стерилизации с использованием электромагнитного излучения и может быть применена для очистки воздуха от бактерий. Способ стерилизации материалов с помощью электромагнитного излучения включает повышение напряженности электромагнитного поля до величины, обеспечивающей уничтожение малоразмерных биологических объектов, таких как бактерии, вирусы.