Способ моделирования неалкогольного стеатогепатита у крыс

Изобретение относится к медицине, экспериментальной биологии, ветеринарии и может быть использовано для моделирования неалкогольного стеатогепатита. Для этого используют лабораторных крыс. Способ включает введение с кормом животного в течение 90 суток 5 г топленого говяжьего сала. Начиная с 60 суток моделирования, дополнительно осуществляют внутримышечные инъекции тетрациклина в дозировке 100 мг/кг раз в день в течение 10 дней. Способ обеспечивает развитие стойких морфофункциональных изменений, характерных для неалкогольного стеатогепатита, при сокращении сроков моделирования. 3 табл.

 

Область техники, к которой относится изобретение

Изобретение относится к медицине и экспериментальной биологии и ветеринарии, может быть использовано для моделирования неалкогольного стеатогепатита у крыс.

Для моделирования неалкогольного стеатогепатита в течение 90 дней ежесуточно с кормом животным вводят 5,0 г топленого говяжьего сала и тетрациклин внутримышечно из расчета в дозе 100 мг/кг. Способ обеспечивает адекватное воспроизведение модели. Предложенная модель проста в исполнении, отличается хорошей воспроизводимостью, отсутствием летального исхода у экспериментальных животных и комплексностью формирования нарушений в печени и организме в целом, вызванных нарушениями метаболизма, характерных для неалкогольного стеатогепатита.

Уровень техники

Экспериментальные модели жировой болезни печени используются для изучения механизмов формирования, выяснения роли различных факторов внешней и внутренней среды в становлении патологических процессов, а также позволяют детально изучить патогенез и изыскать средства для рациональной терапии и профилактики.

Изучение патогенетических аспектов заболеваний печени, как правило, осуществляется с использованием экспериментальных моделей глубоких структурно-функциональных изменений ткани органа, сходных с таковыми у человека, но формирующимися за более короткий период времени. Однако в каждой из известных моделей гепатита, цирроза печени, жирового гепатоза и др. заболеваний печени за основу зачастую берется токсический фактор инициации повреждения печени, или же моделирование того или иного патологического состояния печени протекает в течение длительного времени [5, 6, 7].

Известен способ создания модели токсического гепатита и цирроза печени у грызунов, включающий помещение животного в клетку с открытым резервуаром, наполненным 70%-ным раствором формалина. В этих условиях лабораторных животных содержат в течение 5-7 месяцев [5]. К недостаткам данного способа можно отнести длительный период моделирования и побочные эффекты токсических доз формалина на дыхательную, сердечно-сосудистую и выделительную системы, способствующие летальному исходу экспериментальных животных.

Известен способ моделирования токсической гепатопатии путем введения химических веществ лабораторному животному, когда в желудок животного однократно вводят 50%-ный раствор совтола-1 на оливковом масле из расчета 150 мг на 100 г массы тела [6].

Известен способ моделирования цирроза печени путем введения химических веществ лабораторному животному, согласно которому в желудок вводят два раза в неделю в течение месяца 50%-ный раствор совтола-1 на оливковом масле из расчета 0,25 мл на 100 г массы тела и 10%-ный раствор этанола вместо воды для питья [7].

Перечисленные выше способы моделирования токсической гепатопатии, жировой дистрофии и цирроза печени способствуют развитию органического поражения печени. Однако недостатком этих способов является то, что способы имеют сугубо специфические пусковые механизмы развития патологий и патологических состояний печени, которые отличаются от реальных причин, способствующих патогенезу этого органа у людей. Кроме того, описанные методы требуют длительного времени.

У людей же основными инициаторами неинфекционных заболеваний печени являются неправильное питание, злоупотребление алкоголем, а также последствия применения лекарственных препаратов [1-5]. Следовательно, существуют трудности в экстраполяции экспериментальных данных по изучению механизмов развития патологии печени на человека. В связи с этим для изучения механизмов формирования заболеваний печени, разработки новых подходов в профилактике и лечения с применением современных достижений науки и техники исследователям требуются экспериментальные модели, наиболее приближенные к реальным условиям.

Проведенные патентные исследования и анализ научной медицинской литературы показал, что конкретных рекомендаций по моделированию неалкогольного стеатогепатита (НАСГ) и цирроза печени, характерных для реальных условий развития данных заболеваний у людей, не существует.

Известен способ формирования алиментарной гиперлипидемии гиперхолестериновым рационом по J. Fan. Согласно этому способу экспериментальных крыс содержат в течение 12 недель на гиперхолестериновом рационе. В результате у крыс происходит отложение избытка жира в печени и формируется стеатоз [12]. Недостатками описанного способа являются низкая вероятность развития глубоких структурных повреждений печени, способствующих формированию стеатогепатита и фиброза.

Наиболее близким техническим решением, принятым за прототип, является способ моделирования неалкогольного стеатогепатита у крыс, путем скармливания экспериментальным животным гепатопатогенного корма, согласно изобретению в течение 6 месяцев ежесуточно с кормом животным вводят 4,25 г топленого говяжьего сала и 0,43 г порошкового холестерина из расчета на 100 г массы тела [8].

При этом по истечении 30 суток от начала вскармливания у животных диагностируется сформировавшийся стеатоз печени, по истечении 90 суток диагностируют явно выраженный стеатогепатит, а по истечении 180 суток от начала вскармливания определяют сформировавшийся фиброз печени.

Учитывая возможность развития жировой болезни печени при несбалансированном гиперкалорийном питании, а также при воздействии лекарственных препаратов, представляет интерес разработка способа моделирования неалкогольного стеатогепатита путем воздействия на экспериментальных животных гиперкалорийным гепатогенным рационом при одновременном воздействии гепатогенным фармакологическим фактором.

Раскрытие изобретения

Задача изобретения состоит в том, чтобы создать более простой и более быстрый способ моделирования неалкогольного стеатогепатита у крыс с повышенной воспроизводимостью и высоким приближением к клиническому течению заболевания печени, воздействуя на животных алиментарными и фармакологическими патогенетическими факторами, способствующими формированию метаболической дисфункции и структурной реорганизации печени, наиболее точно отражающей патогенетические механизмы развития заболеваний печени у людей, с минимальной смертностью животных.

Общими с прототипами признаками являются следующие:

- скармливание экспериментальным животным гепатопатогенного корма (4,25 г топленого говяжьего сала и 0,43 г порошкового холестерина из расчета на 100 г массы тела).

Отличительными признаками являются следующие:

- в течение 90 дней ежесуточно с кормом животным вводят 5,0 г топленого говяжьего сала, а также 100 мг/кг тетрациклина внутримышечно, начиная с 60-х суток моделирования 10 дней.

При использовании изобретения оказывается гепатотропное воздействие животным жиром в виде топленого говяжьего сала (до 20% от общего состава рациона), увеличивается срок воздействия алиментарной гиперкалорийной нагрузки, обеспечивается дополнительная неалкогольная гепатотропная нагрузка на печень, отмечается стабильная прибавка в весе у крыс в течение всего периода эксперимента. Помимо структурной реорганизации печени предложенный способ моделирования НАСГ сопровождается рядом метаболических нарушений, являющимися основополагающими патогенетическими факторами, индуцирующими заболевания печени. За 70-90 суток формируется стеатогепатит, переходящий в фиброз печени. Изобретение дает возможность изучения стадийности формирования неалкогольной жировой болезни печени.

Проведенные анализ научной медицинской литературы и патентные исследования, отражающие современную методологию создания экспериментальных моделей жировой болезни печени с характерными метаболическими нарушениями, не выявили технологий моделирования НАСГ на экспериментальных животных, содержащих всю совокупность существенных признаков заявляемого изобретения. Таким образом, заявленное техническое решение соответствует требуемому критерию «новизна».

Заявляемое изобретение может быть использовано в экспериментальной медицине и биологии согласно своему назначению, и на этом основании оно соответствует критерию «промышленная применимость».

Предложенное решение является непростой модификацией известных способов. Оно дает высокий результат и 100%-ную воспроизводимость у подопытных крыс. Предлагаемый способ моделирования НАСГ не сложен в техническом воспроизведении и создает условия для проведения оригинальных имеющих практическое значение для медицины и биологии исследований, посвященных выяснению патогенеза и течения жировой болезни печени и причин, способствующих запуску процессов фиброгенеза и развития цирроза. Изобретение дает возможность проследить все стадии развития поражения печени вплоть до цирроза. Это позволяет заключить, что заявляемый способ соответствует критерию «изобретательский уровень».

Для создания модели неалкогольного стеатогепатита использовались белые крысы линии «Вистар». Для воспроизведения экспериментальной модели использованы 6-месячные особи мужского пола, средней массой 240,0±10,6 г. При разработке модели отрабатывалось воспроизведение нескольких аналогичных экспериментальных состояний, все варианты модификаций воспроизводимых моделей анализировались на основании гистологических исследований ткани печени. Отобраны были те модели, при воспроизведении которых достигались стойкие структурные нарушения печени, сопровождающиеся жировой инфильтрацией, образованием некроза печени, при отсутствии смертности экспериментальных животных.

Способ моделирования неалкогольного стеатогепатита осуществляют следующим образом. Животные в течение 90 суток находятся на специальной гиперкалорийной гепатогенной диете, насыщенной животными жирами (табл. 1), затем получают с 60-го дня исследования инъекции тетрациклина в бедренную мышцу внутримышечно из расчета в дозе 100 мг/кг в дозе 10 дней подряд.

Среди патогенететических факторов основной являлась жировая нагрузка топленым говяжьим салом, составляющая порядка 20% от общего состава рациона, увеличивающая общую калорийность диеты, а также применение тетрациклина в дозе 100 мг/кг в течение 10 дней, начиная с 60-го, также обладающего выраженным гепатотропным эффектом.

Для обоснования заявленного изобретения в лаборатории экспериментальной биологии и биотехнологии Московского государственного областного университета (г. Москва) были проведены экспериментальные работы на крысах линии Вистар.

В эксперименте участвовало 100 крыс-самцов линии Вистар, разделенных на 3 группы:

- контрольная группа - интактные крысы, содержащиеся на стандартном рационе вивария (n=20);

- I опытная группа 1 - крысы, содержащиеся на экспериментальном гиперкалорийном рационе в течение 60 суток (n=40);

- II опытная группа 2 - крысы, содержащиеся на экспериментальном гиперкалорийном рационе в течение 90 суток, получившие с 60-го дня исследования инъекции тетрациклина внутримышечно в бедренную мышцу в дозе 100 мг/кг 10 дней подряд (n=40).

Животные ежедневно осматривались, учитывалась поедаемость корма. За время опыта не было случаев падежа и заболеваний животных. Эвтаназию животных осуществляли путем декапитации под эфирным наркозом в соответствии с требованиями Европейской конвенции по защите экспериментальных животных 86/609 EEC [11].

Оценивались биометрические показатели: вес крысы, индекс Кетле, относительная и абсолютная масса печени. Уровень липидов, глюкозы и активность аланинаминотрансферазы (АЛТ), аспартатаминотрансферазы (ACT), лактатдегидрогеназы (ЛДГ) в сыворотке крови исследовали с помощью биохимического анализатора StatFax3300 (США) с помощью наборов фирмы «Spinreact», (Испания).

Для проведения гистологического исследования ткани печени небольшие фрагменты центральной части правой доли органа фиксировались в 10%-ном растворе нейтрального формалина. Обезвоживание тканей проводили в этиловом спирте возрастающей концентрации и заливали в парафин. Далее с помощью микротома (МЗП-01 «ТЕХНОМ») готовили срезы исследуемых органов толщиной 4 мкм. Для гистологических исследований срезы тканей печени окрашивали гематоксилин-эозином, пикрофуксином по Ван-Ги-зону на выявление коллагеновых волокон [9]. Препараты исследовали при помощи комплекса визуализации на базе микроскопа фирмы «Nicon Eclipse» (Япония) (ув. об. ×10, ×40 и ×100).

Данные, полученные в результате исследований, приведены таблицах.

Весоростовые параметры крыс с представлены в таблице 2. У всех крыс опытных групп по сравнению с группой интактных животных выявлено увеличение массы тела, индекса Кетле, абсолютной и относительной массы печени.

Формирование НАСГ сопровождалось развитием гипергликемии, доказательством чего явилось повышение уровня глюкозы в крови во всех опытных группах крыс.

Морфофункциональное состояние печени крыс опытных групп оценивали по активности в сыворотке крови ферментов - АЛТ, ACT, ЛДГ (табл. 3). У животных, содержавшихся на экспериментальном рационе, наблюдалось повышение активности ферментов печени, что свидетельствовало о повреждении целостности гепатоцитов, развитии цитолитического синдрома. Понижение коэффициента де Ритиса к концу эксперимента свидетельствует о хроническом течении патологического процесса (табл. 3). Все отмеченные изменения свидетельствуют о формировании заболеваний печени.

Динамику формирования метаболических нарушений и гистологическое строение ткани печени оценивали на 60-е и 90-е сутки воздействия на крыс экспериментальным рационом. Доказательством развития модели неалкогольного стеатогепатита у животных служило исследование гистологических срезов ткани печени, окрашенных гематоксилин-эозином и пикрофуксином по Ван-Гизону на выявление соединительной ткани.

Через 60 суток у крыс, находящихся на экспериментальном рационе, в печени развивался стеатоз, характеризующийся фокальными участками некроза с лимфомакрофагальными элементами, а также жировой дистрофией клеток печени. Отмечены многочисленные участки печени со смешанным типом стеатоза, одиночными некротизированными гепатоцитами и очагами микронекроза.

На 90 сутки воздействия на крыс гепатогенным рационом и тетрациклином гистоструктура печени подверглась значительным изменениям, выразившимся в увеличении площади некротизированных участков (14-17% от общей площади исследуемых участков органа), окруженных лимфомакрофагальным инфильтратом, нарушении балочного строения долек печени. Трабекулярность печени не выражена, гепатоциты располагались беспорядочно, синусоиды не прослеживались. Было отмечено расширение крупных портальных трактов за счет разрастания стромы и заполнения ее воспалительным инфильтратом. Некоторые портальные тракты были с некротическими изменениями сосудов. Стенки таких сосудов слабо различались, в некоторых случаях были нарушены. Выявлялась деструкция желчных протоков, сопровождаемая большими очагами воспалительного инфильтрата.

На препаратах, окрашенных по Ван-Гизону, в препортальной зоне четко обнаруживались коллагеновые волокна, что является доказательством сформировавшегося фиброза печени.

Таким образом, удалось получить модель неалкогольного стеатогепатита, характеризующуюся ожирением, нарушением структурной организации, некрозом ткани, формированием фиброза печени. Разработанная модель неалкогольного стеатогепатита позволяет также изучать стадийность развития жировой болезни печени, характеризующейся формированием стеатогепатита и фиброза. Результаты исследования свидетельствуют о несомненной привлекательности использования данной модели. Предлагаемая модель НАСГ может быть использована в области хронических экспериментов для оценки степени нарушения функционального состояния гепатобилиарной системы и поиска эффективных фармакотерапевтических гепатопротекторных средств.

Кроме того, предлагаемая модель проводится при отсутствии смертности животных, а также используется наиболее доступный биологический вид - крысы, что является важным и соответствует поставленной цели. Создание такой модели делает возможным проведение экспериментов, постановка которых в клинике является неосуществимой. Предлагаемая модель НАСГ может быть использована для проведения поиска и испытания действия гепатопротекторных препаратов.

Таким образом, проведенные исследования позволили получить новую экспериментальную модель неалкогольного стеатогепатита, в основе которой лежит комплексное сочетание патологических факторов, инициирующих каскад повреждений в печени, приводящих к развитию стойких морфофункциональных нарушений органа. Предложенная модель проста в исполнении, отличается высокой степенью воспроизводимости, отсутствием летального исхода экспериментальных животных.

Техническим результатом изобретения является повышение воспроизводимости, упрощение способа и приближение к клиническому течению данной патологии печени.

Предлагаемый способ моделирования позволяет в большей мере приблизиться к клиническому течению патологического процесса в печени.

Предлагаемым способом моделирования воспроизводится надежная модель стеатогепатита, что подтверждено морфологическим анализом печени, гистохимическими и биохимическими показателями. Кроме того, способ обеспечивает возможность изучения развития стеатогепатита в динамике.

Осуществление изобретения

Моделирование неалкогольного стеатогепатита проводится на половозрелых крысах линии «Вистар». Животные должны содержаться в стандартных виварных условиях с неограниченным доступом к еде и питью.

Моделирование неалкогольного стеатогепатита осуществляется в 2 этапа в течение 90 суток.

На первом этапе животные находятся на специализированной гиперкалорийной диете (Табл. 1).

На втором этапе, с 60-х суток осуществляются инъекции тетрациклина в бедренную мышцу внутримышечно из расчета в дозе 100 мг/кг в дозе 10 дней подряд.

Сочетание жировой нагрузки топленым говяжьим салом, составляющая порядка 20% от общего состава рациона, увеличивающей общую калорийность диеты, а также применение тетрациклина в дозе 100 мг/кг, также обладающего выраженным гепатотропным эффектом в течение 10 дней, начиная с 60-го дня моделирования, приводит к возникновению на 90 сутки воздействия неалкогольного стеатогепатита, характеризующегося ожирением, нарушением структурной организации, некрозом ткани, формированием фиброза печени.

Источники информации

1. Буеверова Е.Л., Драпкина О.М., Ивашкин В.Т. Атерогенная дислипидемия и печень // Рос. мед. вести. 2008. 1:17-23.

2. Григорьев П.Я. Жировой гепатоз (жировая инфильтрация печени): диагностика, лечение и профилактика // Рус. мед. журн. 2002. 1:30-31.

3. Климов А.Н., Никульчева Н.Г. Обмен липидов, липопротеидов и его нарушения. СПб.: Питер Ком, 1999. 512.

4. Лазебник Л.Б., Зеленогородская Л.А., Морозов И.А. и др. Клинико-морфологические изменения печени при атерогенной дислипидемии и при лечении статинами // Терапевт, арх. 2003. 5:8-12.

5. Пат. Ru 94026117. Способ создания модели гепатита и цирроза печени млекопитающих. Бояринов Г.А., Смирнов В.П., Кауров Я.В. и др., опубл. 27.08.1996.

6. Пат. Ru 2188457. Способ моделирования токсической гепатопатии. Мышкин В.А., Ибатуллина Р.Б., Волкова Е.С. и др., опубл. 27.08.2002.

7. Пат. Ru 2197018. Способ моделирования цирроза печени. Мышкин В.А., Ибатуллина Р.Б., Савлуков А.И. и др., опубл. 20.01.2003.

8. Пат. Ru 2394281. Способ моделирования неалкогольного стеатогепатита у крыс. Караман Ю.К., Новгородцева Т.П., Бивалькевич Н.В., Лобанова Е.Г., опубл. 10.07.2010.

9. Пирс Э. Гистохимия. М.: Изд-во Иностр. литературы, 1962. 967.

10. Chitturi S., Farrell G.C. Etiopathogenesis of non-alcoholic steatohepatitis // Semin. Liver. Dis. 2001. 21: 27-41.

11. European Convention for the Protection of Vertebrate Animals used for exsperimental and other scientific purposes. Strasburg: Council of Europe, 1986:51.

12. Fan J. Effect of low-calorie diet on steatohepatitis in rats with obesity and hyperlipidemia // World J. of Gastroenterology. 2003. 9(9): 2045-2049.

Способ моделирования неалкогольного стеатогепатита у крыс, включающий в себя введение с кормом животного топленого говяжьего сала в течение 90 суток, отличающийся тем, что ежесуточно с кормом вводят 5 г топленого говяжьего сала и, начиная с 60 суток моделирования, дополнительно осуществляют внутримышечные инъекции тетрациклина в дозировке 100 мг/кг раз в день в течение 10 дней.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к медицине, экспериментальной хирургии. Производят пункцию предпузырного пространства через запирательную мембрану.

Изобретение относится к медицине. Устройство для пункции проксимального конца бедренной кости содержит трубку с заостренным рабочим концом и канюлей на другом конце.

Изобретение относится к медицине, экспериментальной хирургии. Моделируют некроз серозно-мышечного слоя стенки кишечника экспериментального животного.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для оценки терапевтического воздействия клеточного продукта (КП) на основе эндометриальных стволовых клеток (ЭСК) на поврежденный эндометрий.

Изобретение относится к экспериментальной травматологии и ортопедии и может быть применимо для моделирования последовательного применения чрескостного и интрамедуллярного блокируемого остеосинтеза.

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной биологии, экологии, токсикологии, и может быть использовано при исследовании механизмов токсического действия молибдата аммония на функциональное состояние почек.

Изобретение относится к области медицины, а именно к экспериментальной онкологии, фармакологии, патологической физиологии. Для увеличения осмотической резистентности мембран эритроцитов в условиях экспериментального канцерогенеза предложено использовать ресвератрол.
Изобретение относится к области образования и медицины, точнее к способам формирования у студентов в медицинских учреждениях навыков владения профессиональной компетенцией «Аускультация сердца» и контроля над владением данной компетенцией и ее усовершенствованием у работающих врачей.

Изобретение относится к медицине и ветеринарии и может быть использовано для повышения репродуктивной активности особей мужского пола (самцов). Способ включает пероральное курсовое введение животным меланина с водорастворимостью не менее 80% и концентрацией парамагнитных центров не менее 8×1017 спин/г в растворенном виде в дистиллированной воде в эффективной концентрации.

Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к ревматологии, и может быть использовано для моделирования остеоартроза (OA), апробации средств и методов его лечения.

Группа изобретений относится к экспериментальной медицине и предназначена для получения модели электротермохимического ожога верхних отделов желудочно-кишечного тракта. В качестве лабораторного животного используют карликовую домашнюю свинью. По первому варианту способа дисковые литий-йодные элементы питания типоразмера 2025 в количестве 3 штук фиксируют положительным полюсом к нитям шовного материала длиной 10, 20 и 30 см с помощью клея на основе эпоксидной смолы. Затем нити с прикрепленными элементами питания подшивают П-образными швами к корню языка и мягкому небу животного свободным от батареи концом нити, начиная с самой длинной нити. После этого нити захватывают эндоскопическим зажимом и проталкивают в пищевод. По второму варианту способа производят верхне-срединную лапаротомию, в области тела желудка на передней стенке производят гастротомию 1,5-2,0 см. Через гастротомное отверстие в полости желудка подшивают один дисковый литий-йодный элемент питания типоразмера 2025, который предварительно фиксируют положительным полюсом к шовному материалу длиной 25 см с помощью клея на основе эпоксидной смолы. Предложенные варианты способа обеспечивают получение локального электротермохимического ожога пищевода или желудка при дозировании времени воздействия повреждающего агента и простоте воспроизведения, исключают системное воздействие на организм животного. 2 н.п. ф-лы, 2 ил., 2 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной гепатологии, и может быть использовано для моделирования неалкогольной жировой дистрофии печени для последующей разработки новых лечебных подходов к коррекции данного патологического состояния. Способ моделирования заключается в том, что крысам производят тиреоидэктомию,. Затем в течение последующих 8 недель животных содержат в условиях вивария на стандартном питании. По истечении указанного срока устанавливают развитие неалкогольной жировой дистрофии в сочетании с признаками стеатогепатита и стеатофиброза. Способ обеспечивает создание надежной, быстровоспроизводимой, максимально приближенной к клиническому течению заболевания модели при минимальных финансовых расходах на эксперимент. 3 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к нейрохимии, патофизиологии, неврологии и психиатрии. На модели острых генерализованных судорог, вызванных пентилентетразолом у крыс самцов линии Вистар, разработан способ противосудорожного воздействия при совместном использовании цитиколина и вальпроата натрия. Препараты вводят внутрибрюшинно, при этом цитиколин вводят в дозе 300 мг/кг за час до введения пентилентетразола, а вальпроат натрия вводят в дозе 70 мг/кг за 10 минут до введения пентилентетразола. Выбранный режим введения препаратов обеспечивает повышение противосудорожного эффекта, связанное в т.ч. с нейропротективным действием препаратов, которое снижает нейродегенерацию в головном мозге крыс в условиях острых генерализованных судорог, вызванных пентилентетразолом. 3 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к фтизиатрии, и может быть использовано для моделирования туберкулеза женских половых органов. Для этого кроликам вводят суспензию культуры Mycobacterium tuberculosis Erdman в дозе 107 КОЕ/0.2 мл под серозную оболочку маточной трубы на расстоянии 5 см от маточного рога. При этом до операции проводят эстрогенизацию животного внутримышечным введением 0,1% раствора синэстрола по 0,5 мл через день курсом 4 процедуры. Со 2 по 6 сутки после операции продолжают эстрогенизацию в том же режиме и проводят профилактику инфекционных осложнений с помощью антибиотиков широкого спектра действия, не обладающих противотуберкулезной активностью. Способ позволяет получить модель локального туберкулезного процесса в женских половых органах, доступную к воспроизводству и максимально приближенную к развитию специфического процесса к естественному, а также осуществлять прижизненный мониторинг развития и течения специфического воспалительного процесса и выбирать тактику лечения. 1 пр., 5 ил.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии и патофизиологии, и может быть использовано для изучения механизмов развития ранних и поздних осложнений после выполнения атипичной предельно допустимой резекции печени. Способ предполагает удаление 80% от общей массы печени у крыс. Для этого, после мобилизации в операционное поле срединной и левой долей печени, на 1 мм проксимальнее границы предполагаемой линии резекции накладывают 2-4 матрацных шва на каждую долю. После этого острым путем проводят резекцию указанных долей печени с последующей обработкой раневой поверхности электрокоагулятором. Предложенная резекция, являясь максимально приближенной по объему и тяжести к операции расширенной гемигепатэктомии у человека, позволяет изучать механизмы развития ранних и поздних послеоперационных осложнений, динамику морфо-функциональных изменений в оставшейся части печени, что стратегически важно при планировании объема резекции и трансплантации печени. 2 ил.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и касается исследований соединений с психотропными и актопротекторными свойствами на доклиническом этапе наблюдения. Способ включает формирование контрольной и экспериментальных групп животных (крыс), введение им препарата и тестирование животных. При этом предварительно для каждого животного обеих групп определяют значения когнитивных способностей, исследовательской активности, мотивационно-энергетических показателей и уровня тревожности. В соответствии с этим разделяют животных на три типа, определяющие возможность их эффективного использования для тестирования препаратов того или иного действия. Первый тип включает особей с изначальным когнитивным показателем от 0 до 45%, имеющих интегральный показатель исследовательской активности в пределах от 60 до 100%. Второй тип включает особей с изначальным когнитивным показателем от 45 до 60%, имеющих интегральный показатель исследовательской активности в пределах от 45 до 60%. Третий тип включает особей с изначальным когнитивным показателем от 60 до 100%, имеющих интегральный показатель исследовательской активности в пределах от 0 до 45%. Животных первого типа используют для исследования психотропных препаратов. Животных второго типа используют для изучения как психотропных, так и актопротекторных препаратов. Животных третьего типа используют предпочтительно для изучения актопротекторных препаратов. Тестирование по предварительному отбору лабораторных животных производят на одном и том же инструментальном средстве, выполненном с возможностью произвольного изменения его архитектуры, в виде приподнятого крестообразного лабиринта, открытого поля или универсальной проблемной камеры. При этом регистрируют качественные и количественные показатели как врожденного, так приобретенного поведения. Способ обеспечивает достоверное тестирование и открывает дополнительные возможности для выявления биологических свойств известных препаратов, а также новых соединений с предполагаемым психотропными и актопротекторными свойствами. 3 з.п. ф-лы, 6 ил., 2 табл., 4 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к патологической анатомии. Для изготовления анатомического препарата полый орган или его фрагмент выделяют из эвисцерированного комплекса органов, промывают полость проточной водой, препарируют, после чего его полость заполняют универсальным водостойким клеем на основе акриловой водной дисперсии, например клеем «Момент монтаж», до тех пор, пока внешний рельеф полого органа, его консистенция и степень наполнения не будут соответствовать аналогичным прижизненным характеристикам. Отверстия полого органа, через которые заполняли полость, прошивают, тампонируют ватой и перевязывают, после чего полый орган оставляют в герметичной емкости в парах консервирующего бактерицидного вещества, например 10%-ного водного раствора формалина, до полной фиксации. Способ позволяет изготовить анатомический препарат полого органа, который по внешнему рельефу и консистенции максимально напоминает соответствующий полый орган при жизни, при увеличении срока эксплуатации изготовленного анатомического препарата и повышении безопасности технологического процесса за счет отказа от использования токсичных и легковоспламеняющихся растворителей. 1 з.п. ф-лы, 1 ил.

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной и гнойной хирургии, и может быть использовано для поиска новых способов лечения абсцессов мягких тканей. Для моделирования абсцесса животному вводят возбудитель патологического процесса в подкожное пространство. При этом предварительно в это пространство вводят катетер с раздуваемым баллоном. Баллон раздувают в объеме 2 мл раствором 0,9% хлористого натрия. Конец катетера укрывают с помощью кожной дупликатуры. Через трое суток опорожняют баллон и удаляют катетер. Затем в образовавшуюся полость в качестве возбудителя патологического процесса вводят суспензию Staphylococcus aureus с микробной нагрузкой 2 мл × 106 КОЕ. Способ, являясь малотравматичным, не требующим сложных манипуляций, обеспечивает формирование отграниченного гнойного воспаления мягких тканей на пятые сутки эксперимента. 6 ил., 1 пр.
Изобретение относится медицине, а именно к экспериментальной фармакологии, и касается выявления и изучения средств для повышения физической работоспособности у лабораторных животных в эксперименте. Способ включает введение животному актопротектора, в качестве которого используют N-дифенилфосфорил-N′-алкил(С6-С10)мочевин со структурной формулой Ph2P(О)NHC(О)NHCH2CH=CH2 и брутто-формулой C16H17N2O2P. Соединение вводят в виде раствора внутрижелудочно через зонд в дозе 10-15 мг/кг веса животного за 20-40 минут до проведения теста Порсолта и теста на вертикальном экране-сетке. Способ обеспечивает повышение уровня работоспособности лабораторных животных в условиях повышенной физической нагрузки, что может позволить в дальнейшем использовать указанное соединение в медицинской и/или спортивной практике. 1 з.п. ф-лы, 2 табл., 2 пр.

Изобретение относится к экспериментальной медицине, фармакологии и предназначено для изучения принадлежности лекарственных препаратов к субстратам эффлюксного белка-транспортера гликопротеина-Р (P-gp, АВСВ1 белок), а также использования в качестве контроля ингибирующей активности P-gp при установлении веществ аналогичного типа действия. Для этого моделируют в эксперименте состояние ингибирования функциональной активности P-gp. В качестве препарата-ингибитора используют ингибитор дипептидилпептидазы-4 вилдаглиптин, который вводят кролику внутрижелудочно в дозе 5 мг/кг массы тела в течение 14 дней. При этом в качестве маркерного субстрата P-gp используют фексофенадин, который вводят животному внутрижелудочно в дозе 67,5 мг/кг до и после 14-дневного введения вилдаглиптина с последующей оценкой содержания фексофенадина в плазме крови. Способ обеспечивает создание такой модели, при которой проявляется селективный эффект в отношении P-gp в отсутствии влияния на CYP3A4 без возникновения клинически значимых побочных эффектов. 3 табл.

Изобретение относится к медицине, экспериментальной биологии, ветеринарии и может быть использовано для моделирования неалкогольного стеатогепатита. Для этого используют лабораторных крыс. Способ включает введение с кормом животного в течение 90 суток 5 г топленого говяжьего сала. Начиная с 60 суток моделирования, дополнительно осуществляют внутримышечные инъекции тетрациклина в дозировке 100 мгкг раз в день в течение 10 дней. Способ обеспечивает развитие стойких морфофункциональных изменений, характерных для неалкогольного стеатогепатита, при сокращении сроков моделирования. 3 табл.

Наверх