Способ визуального определения местонахождения источника образования запаха мочи и скрининг ингибиторов образования запаха мочи
Группа изобретений относится к биотехнологии. Предложены способ визуального определения местоположения источника образования запаха мочи и интенсивности запаха мочи, способы скрининга на водопоглощающий полимер или элементы, обладающий эффектом ингибирования образования запаха мочи, изделия-абсорбента, способ скрининга на ингибитор образования запаха мочи для изделия-абсорбента. Наносят жидкий препарат, содержащий реагент, детектирующий β-глюкуронидазную активность, или реагент, детектирующий арилсульфатазную активность, а также микроорганизм или фермент на изделие-абсорбент или на водопоглощающий полимер изделия-адсорбента. Реагент действует как субстрат фермента и продуцирует плохо растворимое в воде пигментное или флуоресцентное соединение. Микроорганизм выбирают из штамма с β-глюкуронидазной активностью и штамма с арилсульфатазной активностью. Фермент выбирают из β-глюкуронидазы и арилсульфатазы. По области изменения цвета определяют местонахождение источника образования запаха мочи. Интенсивность запаха мочи определяют по площади изменения цвета до и после ферментативной реакции. Отбор материалов изделия-абсорбента, обладающих эффектом ингибирования образования запаха мочи, и ингибиторов образования запаха мочи осуществляют по наименьшему изменению цвета в результате ферментативной реакции с использованием указанного жидкого препарата. Изобретения позволяют легко визуализировать местонахождение источника образования запаха мочи на твердой поверхности. 4 н. и 2 з.п. ф-лы, 9 ил., 4 табл., 6 пр.
Область, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к подходящему способу определения местонахождения источника образования запаха мочи и его интенсивности, а также к способу скрининга на изделие-абсорбент, полимер, поглощающий воду, или ингибитор образования запаха мочи, обладающий превосходным ингибирующим действием на образование запаха мочи.
Предшествующий уровень техники
Недавно, в связи с повышением требований потребителей к гигиене, крайне желательно не только удаление видимых загрязнений, но также запахов, которые оставляют эти загрязнения. В частности, среди существующих запахов окружающей среды, запах мочи дает особенно неприятное ощущение дискомфорта. Так, например, мочу, которая присутствует на внешней поверхности унитаза в виде оставшихся капелек в течение длительного периода времени, трудно определить визуально, а поэтому она является источником образования неприятного запаха. Кроме того, на нижнем белье и гигиенических изделиях, таких как пеленки и женские гигиенические прокладки, иногда попадает моча, присутствующая в окружающей среде в течение некоторого периода времени, которая также может служить источником неприятного запаха.
Вообще говоря, моча, сразу после ее выделения, обычно имеет слабый запах, и большая часть компонентов мочи, выделяющих неприятный запах, очевидно, продуцируется в течение определенного периода времени в результате разложения присутствующих в моче органических веществ ферментами микроорганизмов. В качестве дезодоранта/средства предотвращения запахов, продуцируемых микроорганизмами, применяются не только дезодоранты, которые физически или химически удаляют компоненты-источники запахов, и ароматизаторы, которые маскируют неприятные запахи, но также антимикробные агенты, направленные против микроорганизмов, продуцирующих запах, и ингибиторов казуальных ферментов (уреазы, β-глюкуронидазы, арилсульфатазы и т.п.), которые, как предполагается, радикально и в течение длительного времени ингибируют образование неприятных запахов.
Так, например, подходящий способ детектирования запаха или микроорганизма, продуцирующего такой запах, описан в Патентном документе 1, в котором рассматривается средство гигиены, такое как пеленки, содержащие индикатор, чувствительный к цвету и запаху, такой как индикатор на основе кислоты-основания.
Кроме того, в Патентном документе 2 описан способ обнаружения присутствия микроорганизма путем детектирования бактериального летучего компонента с помощью ГХ-анализа или индикатора. В соответствии с этим методом, присутствие E. coli, например, подтверждают путем обработки окрашенной альдегидом диметиламинокоричной кислоты хлопчатобумажной ткани суспензией E. coli с последующим наблюдением изменения цвета индикатора под действием индола, продуцируемого бактериальными клетками.
Кроме того, в Патентном документе 3 предлагается метод детектирования бактерий, ассоциированных с мочевой инфекцией, включая E. coli, с использованием среды, содержащей реагент, детектирующий активность фермента и служащий в качестве субстрата фермента β-глюкуронидазы или арилсульфатазы. В этом методе микроорганизм детектируют путем добавления образца в вышеописанную среду и инкубирования с последующим визуальным наблюдением за окрашиванием колоний и/или среды ферментами бактериальных клеток.
Список цитируемых документов
Патентные документы
Патентный документ 1: JP-A-2007-508105
Патентный документ 2: JP-A-2008-538179
Патентный документ 3: JP-A-Н9-512438
Описание сущности изобретения
Настоящее изобретение относится к способу визуального определения местонахождения источника образования запаха мочи и его интенсивности, где указанный способ включает:
первую стадию, а именно стадию нанесения жидкого препарата, содержащего компонент (А), на изделие, оборудование или материал, которые являются объектами определения запаха мочи;
вторую стадию, а именно стадию осуществления ферментативной реакции в указанном изделии, оборудовании или материале, на которые наносят указанный жидкий препарат; и
третью стадию, а именно стадию наблюдения изменения цвета в указанном изделии, оборудовании или материале, на которые наносят указанный жидкий препарат,
где область изменения цвета определяют как местонахождение источника образования запаха мочи, а количественное изменение цвета служит показателем интенсивности запаха мочи,
где компонентом (А) является реагент, детектирующий ферментативную активность, который служит в качестве субстрата фермента и продуцирует плохо растворимое в воде пигментное соединение или плохо растворимое в воде флуоресцентное пигментное соединение под действием ферментативной реакции.
Кроме того, настоящее изобретение относится к способу скрининга материала, элемента, ингибитора образования запаха мочи или получения компонента, обладающего превосходным действием, направленным на ингибирование образования запаха мочи, где указанный способ включает:
контактирование жидкого препарата, содержащего компонент (А), с материалами, элементами или агентами, которые являются объектами для оценки эффекта ингибирования образования запаха мочи, и
отбор объекта, который обнаруживает незначительное изменение цвета под действием ферментативной реакции,
где компонентом (А) является реагент, детектирующий ферментативную активность, который служит в качестве субстрата фермента и продуцирует плохо растворимое в воде пигментное соединение или плохо растворимое в воде флуоресцентное пигментное соединение под действием ферментативной реакции.
Краткое описание графического материала
На фигуре 1 схематически представлена пробирка для микротестов, используемая в примере 1.
На фигуре 2 проиллюстрировано появление окраски после тестирования, как описано в примере 1.
На фигуре 3 показана часть прокладки для абсорбции мочи, используемая, как описано в примере 2.
На фигуре 4 представлен график, на котором проиллюстрирована корреляция между величиной, полученной путем оценки интенсивности запаха (величиной, полученной путем сенсорной оценки), и величиной (%) соответствующего увеличения площади окрашенного участка, как описано в примере 2.
На фигуре 5 представлены изображения части пропитанной мочой прокладки, полученной с использованием абсорбирующего воду полимера В, как описано в примере 2.
На фигуре 6 представлены изображения и величины, полученные путем оценки соответствующих образцов на интенсивность запаха, как описано в примере 3.
На фигуре 7 представлены изображения и величины, полученные путем оценки соответствующих образцов на интенсивность запаха, как описано в примере 4.
На фигуре 8 представлены изображения и величины, полученные путем оценки соответствующих образцов на интенсивность запаха, как описано в примере 5.
На фигуре 9 представлено изображение образца, описанного в примере 6.
Подробное описание изобретения
Применение дезодорантов, запахмаскирующих агентов, противомикробных агентов, ингибиторов ферментов и различных агентов может рассматриваться как способ удаления запахов/предотвращения появления запахов мочи, описанный выше, и установление местонахождения источника образования запаха является очень важным фактором для определения места нанесения этих агентов. Что касается агентов для предотвращения появления запахов, таких как противомикробные агенты и ингибиторы ферментов, то их действие может оказаться значительно ниже, если место их нанесения не будет совпадать с истинным местонахождением источника образования запаха, а поэтому можно сказать, что указанные агенты обязательно должны быть нанесены именно в место, где присутствует источник образования запаха. Кроме того, такие продукты, особенно изделия-абсорбенты, в которых моча перемещается в другое место, контактируя с различными материалами, необходимо абсолютно точно идентифицировать место образования запаха мочи для того, чтобы определить место введения дезодоранта/агента для предупреждения появления запаха.
Как описано выше, способ определения местонахождения источника образования запаха мочи и его интенсивности, а в частности, подходящий способ визуализации местонахождения источника образования запаха является крайне необходимым для оптимизации места и количества введения дезодоранта/агента для предупреждения появления запаха, однако, поскольку компоненты запаха являются в высокой степени диффузными, то идентифицировать местонахождение источника образования запаха с высоким пространственным разрешением методами детектирования самих компонентов, проводимыми с помощью индикаторов, ГХ-анализов или т.п., как описано в Патентных документах 1 и 2, крайне затруднительно.
Кроме того, метод, основанный на культивировании в среде и описанный в Патентном документе 3, позволяет идентифицировать местонахождение источника образования запаха как область пролиферации микроорганизма, а поскольку необходимость в точной дифференциации образца в зависимости от требуемого пространственного разрешения усложняет такую процедуру, то идентификация местонахождения источника образования запаха в системе, аналогичной системе данного продукта, представляет значительные трудности. Кроме того, поскольку ферментативная активность наблюдается в определенной среде, то взаимосвязь между полученными результатами и интенсивностью запаха все еще остается предметом обсуждения.
Настоящее изобретение относится к подходящему способу идентификации местонахождения источника образования запаха мочи, который образуется с течением времени на объекте, где присутствует моча, и этот способ был разработан авторами настоящего изобретения на основе тщательных исследований по визуализации источника происхождения запаха мочи.
Изделия, материалы или оборудование, которые являются объектами применения способа визуального определения запаха мочи
Способ определения согласно изобретению является особенно удобным, если местонахождение источника образования запаха мочи и его интенсивность определяют визуально на изделии (включая составляющие его компоненты), оборудовании или материале, в которых образуется запах мочи. В настоящем изобретении «изделием, оборудованием или материалом, где образуется запах мочи», могут быть изделие, оборудование или материал, в которых фактически образуется запах мочи, а также изделие, оборудование или материал, в которых моча может абсорбироваться или присутствовать.
Примерами такого изделия являются средства гигиены, такие как памперсы, изделия, используемые при легком недержании мочи, пеленки и женские гигиенические прокладки, предметы одежды, такие как нижнее белье, постельные принадлежности и т.п., а также изделия, в которых образуется запах мочи животных, не являющихся человеком, такие как лотки для экскрементов домашних питомцев, например, собак и кошек (туалеты для домашних питомцев, абсорбенты мочи в виде листов и т.п.) и т.п., а также компоненты этих изделий. Примерами такого оборудования являются туалетные комнаты, такие как унитаз и пол туалета. Кроме того, примерами указанных материалов являются материалы, которые представляют собой компоненты вышеописанных изделий или оборудования, например, материалы изделий, такие как полимеры, абсорбирующие воду, пульпа, нетканые ткани, бумага и ткани; и материалы для оборудования, такие как керамика, твердые смолы, дерево, металлические трубки, различные материалы для отделки стен и материалы для пола.
Что касается этих изделий, оборудования или материалов, то следует отметить, что способ согласно изобретению может оказаться подходящим для изделий-абсорбентов, которые, предположительно, абсорбируют и задерживают мочу, такие как памперсы, изделия, используемые при легком недержании мочи, пеленки, женские гигиенические прокладки и абсорбенты мочи домашних питомцев в виде листов; а также абсорбирующие воду полимеры, пульпа, нетканые ткани и бумага, используемые для изготовления этих изделий. Кроме того, в более предпочтительном варианте, указанный способ может быть применен к памперсам, изделиям, используемым при легком недержании мочи, пеленкам, абсорбентам мочи домашних питомцев в виде листов и к используемым для этих целей полимерам, абсорбирующим воду.
Абсорбирующий воду полимер, который является объектом настоящего изобретения, конкретно не ограничивается полимерами с определенными абсорбирующими свойствами или определенным химическим составом, при условии, что он представляет собой гидрофильный полимер, который вводят в описанные выше и подобные продукты и который непосредственно или опосредованно служит для абсорбции и задерживания мочи.
Рассматриваемый жидкий препарат
Компонент (А): Реагент, детектирующий ферментативную активность
В настоящем изобретении жидкий препарат, содержащий реагент, детектирующий ферментативную активность (компонент (А)), используют для идентификации/визуализации местонахождения источника образования запаха мочи и интенсивности запаха мочи в первой стадии, описанной ниже.
Поскольку местонахождение источника образования запаха мочи должно быть идентифицировано с хорошим пространственным разрешением, то в настоящем изобретении, вместо индикатора-детектора для очень летучего диффузного компонента используют реагент, детектирующий ферментативную активность (компонент (А)), который служит в качестве субстрата и способен непосредственно детектировать ферментативную активность.
Кроме того, как описано выше, используемый в настоящем изобретении реагент, детектирующий ферментативную активность (компонент (А)), продуцирует пигментное соединение или флуоресцентное пигментное соединение посредством ферментативной реакции, и такое пигментное соединение или флуоресцентное пигментное соединение должно обладать низкой способностью диффундировать в воде, то есть оно должно быть плохо растворимым в воде. Более конкретно, растворимость описанного выше пигментного соединения или флуоресцентного пигментного соединения в воде при 20°C, предпочтительно, составляет менее чем 10 г/л, более предпочтительно, менее чем 6 г/л, еще более предпочтительно, менее чем 0,5 г/л, а наиболее предпочтительно, менее чем 0,05 г/л.
Кроме того, используемый в настоящем изобретении реагент, детектирующий ферментативную активность (компонент (А)), предпочтительно, гомогенно распределяется в изделии согласно изобретению. Поэтому реагент, детектирующий ферментативную активность (компонент (А)), используют в форме жидкого препарата. В соответствии с этим, предпочтительно, чтобы до проведения ферментативной реакции реагент, детектирующий ферментативную активность (компонент (А)), обладал высокой способностью диффундировать в воде, то есть, предпочтительно, чтобы он обладал более высокой растворимостью в воде, чем пигментное соединение, продуцируемое после ферментативной реакции.
Вышеописанное соединение, продуцируемое в процессе ферментативной реакции, должно представлять собой соединение, абсорбирующееся в видимой области спектра, или соединение, флуоресцирующее в видимой области спектра, то есть пигментное соединение или флуоресцентное пигментное соединение. Из этих соединений пигментные соединения, абсорбирующиеся в видимой области спектра, являются более предпочтительными из-за простоты их детектирования. Кроме того, для того, чтобы цветовой контраст пигментного соединения с мочой был более явным, предпочтительно, использовать пигментные соединения, которые имеют спектр поглощения в области от 500 до 800 нм, а более предпочтительно - соединения, продуцирующие синюю окраску.
Детектируемым ферментом может быть любой фермент, при условии, что он продуцируется микроорганизмами, ответственными за образование запаха мочи, и примерами таких ферментов являются гликозидазы и сульфатазы. Кроме того, ферменты, позволяющие идентифицировать местонахождение источника образования феноловых соединений и индолов, являются предпочтительными с точки зрения интенсивности и качества фактически ощущаемого запаха мочи, времени, необходимого для появления запаха мочи и т.п., и возможности их репродуцируемости, а поэтому предпочтительными являются ферменты, позволяющие детектировать β-глюкуронидазную или арилсульфатазную активность, а более предпочтительными являются ферменты, позволяющие детектировать β-глюкуронидазную активность.
В жидком препарате, используемом в первой стадии настоящего изобретения, содержание реагента, детектирующего ферментативную активность (компонента (А)), во всем жидком препарате по массе, исключая спаренные основания, предпочтительно, составляет от 0,002 до 0,2% масс/об, более предпочтительно, от 0,005 до 0,05% масс/об, а еще более предпочтительно, от 0,01 до 0,025% масс/об.
Реагент, детектирующий гликозидазную активность
Реагент, детектирующий гликозидазную активность и используемый в качестве компонента (А) в настоящем изобретении, не имеет конкретных ограничений, при условии, что он представляет собой реагент, детектирующий гликозидазную активность, который служит в качестве субстрата и продуцирует плохо растворимое в воде пигментное соединение или флуоресцентное пигментное соединение после ферментативной реакции, а также обладает способностью визуально детектировать гликозидазную активность.
Примерами реагентов, детектирующих гликозидазную активность, которые продуцируют плохо растворимое в воде пигментное соединение или флуоресцентное пигментное соединение после ферментативной реакции, являются кислотно-основные индикаторы на основе фенола, такие как фенолфталеин; и гликозидные соединения, имеющие гидроксииндоловый аналог, такой как 5-бром-4-хлор-3-гидроксииндол, 5-бром-6-хлор-3-гидроксииндол, 6-хлор-3-гидроксииндол или 3-гидроксииндол, или умбеллифероновый аналог, такой как 4-метилумбеллиферон, используемый в качестве агликона (соединения, не содержащего сахарной группы).
В настоящем изобретении более предпочтительными реагентами, детектирующими гликозидазную активность, являются гликозидные соединения, в которых описанный выше агликон связан с сахаром посредством β-D-гликозидной связи.
Кроме того, гликозидные соединения, имеющие гидроксииндоловый аналог, и гликозидные соединения, имеющие умбеллифероновый аналог, являются предпочтительными с точки зрения рН-стабильности при развитии окраски, и из этих соединений гликозидные соединения, имеющие гидроксииндоловый аналог, являются более предпочтительными с той точки зрения, что соединениями, продуцируемыми посредством ферментативной реакции, являются пигментные соединения, которые обладают способностью абсорбироваться в видимой области спектра и плохо растворяются в воде.
Эти реагенты, детектирующие гликозидазную активность, могут детектировать различные гликозидазные активности в зависимости от типа различных сахарных групп, и примерами таких реагентов являются реагенты, содержащие такие сахарные группы, как глюкоза, глюкуроновая кислота, манноза, галактоза, фруктоза, фукоза, рамноза, арабиноза или ксилоза. Из указанных реагентов реагенты, в которых глюкоза, глюкуроновая кислота или галактоза связаны с описанным выше агликоном, являются предпочтительными с точки зрения детектирования фермента микроорганизма, ответственного за появление запаха мочи, и кроме того, из указанных соединений соединение, состоящее из глюкуроновой кислоты и описанного выше агликона, связанного посредством β-D-гликозидной связи, то есть реагент, детектирующий β-глюкуронидазную активность, является более предпочтительным с точки зрения появления запаха мочи.
Конкретными примерами глюкуронидированных соединений, имеющих гидроксииндоловый аналог, являются 5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронид, 5-бром-6-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронид, 6-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронид и индоксил-β-D-глюкуронид, а примером глюкуронидированного соединения, имеющего умбеллифероновый аналог, является 4-метилумбеллиферил-β-D-глюкуронид.
Кроме того, из указанных соединений, глюкуронидированные соединения, имеющие гидроксииндоловый аналог, то есть 5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронид, 5-бром-6-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронид, 6-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронид и индоксил-β-D-глюкуронид, являются более предпочтительными с той точки зрения, что соединения, продуцируемые посредством ферментативной реакции, представляют собой пигментные соединения, которые способны абсорбироваться в видимой области спектра, и которые очень плохо растворяются в воде, и кроме того, из указанных соединений, еще более предпочтительным является 5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронид с точки зрения цветового контраста между этим пигментным соединением и мочой, стабильности развития окраски и его стоимости.
В жидком препарате, используемом в первой стадии настоящего изобретения, содержание реагента, детектирующего гликозидазную активность, или реагента, детектирующего β-глюкуронидазную активность, во всем жидком препарате по массе, исключая спаренные основания, предпочтительно, составляет от 0,002 до 0,2% масс/об, более предпочтительно, от 0,005 до 0,05% масс/об, а еще более предпочтительно, от 0,01 до 0,025% масс/об.
Реагент, детектирующий сульфатазную активность
Реагент, детектирующий сульфатазную активность и используемый в качестве компонента (А) в настоящем изобретении, не имеет конкретных ограничений, при условии, что он представляет собой реагент, детектирующий сульфатазную активность, который действует в качестве субстрата фермента и продуцирует плохо растворимое в воде пигментное соединение или флуоресцентное пигментное соединение после ферментативной реакции, а также обладает способностью визуально детектировать сульфатазную активность. Кроме того, реагент, детектирующий арилсульфатазную активность, является более предпочтительным с точки зрения определения источника появления запаха мочи.
Реагент, детектирующий арилсульфатазную активность и используемый в настоящем изобретении, подробно описан ниже, однако такой реагент, детектирующий арилсульфатазную активность и используемый в настоящем изобретении, не имеет конкретных ограничений при условии, что он будет обладать вышеописанными свойствами.
Примерами реагентов, детектирующих арилсульфатазную активность и используемых в настоящем изобретении, являются сульфированные соединения, имеющие гидроксииндоловый аналог, и сульфированные соединения, имеющие умбеллифероновый аналог.
Из этих соединений в качестве сульфированного соединения, имеющего гидроксииндоловый аналог, предпочтительно, использовать 5-бром-4-хлор-3-индолилсульфат и индоксилсульфат, а в качестве сульфированного соединения, имеющего умбеллифероновый аналог, предпочтительно, использовать 4-метилумбеллиферилсульфат.
Кроме того, с той точки зрения, что соединение, продуцируемое посредством ферментативной реакции, представляет собой пигментное соединение, способное абсорбироваться в видимой области спектра и очень плохо растворимое в воде, еще более предпочтительными являются сульфированные соединения, имеющие гидроксииндоловый аналог, то есть 5-бром-4-хлор-3-индолилсульфат и индоксилсульфат, а еще более предпочтительным является 5-бром-4-хлор-3-индолилсульфат с точки зрения цветового контраста между этим пигментным соединением и мочой, стабильности развития окраски и его стоимости.
В настоящем изобретении содержание реагента, детектирующего сульфатазную активность, или реагента, детектирующего арилсульфатазную активность, во всем жидком препарате по массе, исключая спаренные основания, предпочтительно, составляет от 0,002 до 0,2% масс/об, более предпочтительно, от 0,005 до 0,05% масс/об, а еще более предпочтительно, от 0,01 до 0,025% масс/об.
В жидком препарате, используемом в первой стадии настоящего изобретения, вода и/или моча могут быть использованы в качестве растворителя для растворения или диспергирования реагента, детектирующего ферментативную активность (компонента (А)). Кроме того, как описано ниже, в способе, где изделие, оборудование или материал, на который наносят жидкий препарат, подвергают однократной сушке, может быть использован летучий органический растворитель в качестве растворителя или диспергирующего агента. В качестве используемого здесь летучего органического растворителя предпочтительными являются водорастворимые растворители, такие как метанол, этанол, 1-пропанол, 2-пропанол и ацетонитрил. Кроме того, если это необходимо, жидкий препарат, используемый в первой стадии настоящего изобретения, может содержать, в качестве добавок, различные поверхностно-активные вещества, антиоксиданты, рН-корректирующие агенты, масляные агенты, органические растворители, соли металлов и ионы металлов, при условии, что они не будут оказывать негативного воздействия на эффект настоящего изобретения.
Моча
Визуальный способ определения и скрининг-способ согласно изобретению также отличаются тем, что местонахождение источника образования запаха мочи и его интенсивность могут быть обнаружены по развитию окраски реагента в условиях, имитирующих нужные условия, в присутствии или в отсутствие мочи, однако, предпочтительно, чтобы жидкий препарат, содержащий компонент (А) (жидкий препарат, используемый в первой стадии настоящего изобретения), также содержал мочу, поскольку, в данном случае, может быть воспроизведена химическая и биологическая среда, близкая к настоящей среде, в которой образуется запах мочи.
Если жидкий препарат, содержащий компонент (А)), включает мочу, то содержание мочи не имеет конкретных ограничений, однако, исходя из вышеуказанного, предпочтительной является ситуация, близкая к ситуации, при которой на изделии, оборудовании или материале согласно изобретению будет появляться запах мочи; причем, если данный объект, предположительно, непосредственно абсорбирует мочу, то есть, если указанным объектом является изделие-абсорбент; полимер, абсорбирующий воду, или т.п., то содержание мочи во всем жидком препарате составляет, предпочтительно, 50-100 об/об%, более предпочтительно, 80-100 об/об%, а еще более предпочтительно, 90-100 об/об%. Кроме того, если запах исходит от пятен мочи, которые уже до определенной степени высохли, а именно запах, предположительно, исходит от поверхности унитаза или пола туалета, то такой жидкий препарат получают с использованием концентрированной мочи, и концентрация мочи может быть на 100% об/об выше, чем неконцентрированная моча.
Кроме того, моча, используемая в жидком препарате, содержащем компонент (А), не ограничивается мочой, собранной у человека, и если указанным объектом являются лотки для экскрементов домашних питомцев, таких как собаки и кошки (туалеты для домашних питомцев, абсорбенты мочи в форме листов и т.п.), а также материал-абсорбент и абсорбирующий воду полимер, используемые для этих целей, то предпочтительно использовать мочу этих животных.
При этом может быть использована собранная моча, а если жидкий препарат, содержащий компонент (А), включает комбинацию описанного ниже микроорганизма и/или фермента, то предпочтительно использовать мочу, из которой такой микроорганизм был удален путем стерилизации с использованием фильтра или т.п., для стабилизации условий детектирования.
Микроорганизмы
Если жидкий препарат, содержащий компонент (А), наносят на изделие-абсорбент, являющийся используемой одеждой или используемым туалетом, или если жидкий препарат, содержащий компонент (А), включает мочу, которая не была подвергнута стерилизации, то способ согласно изобретению может быть осуществлен с использованием микроорганизма, обычно присутствующего на такой одежде или в таком туалете; однако, если необходимо проводить ферментативную реакцию с высокой воспроизводимостью, и если указанный объект находится в асептических условиях или в среде, из которой было удалено большинство микроорганизмов, то есть, если таким объектом является абсолютно новый продукт или материал, то более предпочтительно использовать жидкий препарат, который также содержит микроорганизмы.
Используемым здесь микроорганизмом может быть любой штамм, при условии, что он будет обладать ферментативной активностью, соответствующей активности реагента, детектирующего ферментативную активность и используемого в жидком препарате, содержащем компонент (А), а в частности, предпочтительно использовать один или более штаммов, выбранных из любого штамма, обладающего гликозидазной активностью или сульфатазной активностью.
В настоящем изобретении из указанных штаммов микроорганизмов предпочтительно использовать штамм, обладающий β-глюкуронидазной активностью, или штамм, обладающий арилсульфатазной активностью, а более предпочтительно - штамм, обладающий β-глюкуронидазной активностью, соответствующей активности реагента, детектирующего ферментативную активность (компонента (А)) и используемого в первой стадии настоящего изобретения, исходя из предположения взаимосвязи между ферментом и запахом мочи.
Кроме того, в качестве микроорганизмов, описанных выше, предпочтительно использовать микроорганизм, который в высокой степени ответственен за образование запаха мочи, а более предпочтительно использовать штамм, который был выделен из среды, контактирующей с мочой, например, изделия-абсорбента, которое, после поглощения им мочи, долгое время находилось в этом же состоянии, и из внутренней стороны края крышки унитаза. Кроме того, более предпочтительно использовать бактерии из-за легкости их обнаружения в окружающей среде и их взаимосвязи с запахом мочи, а особенно предпочтительно использовать клетки E. coli, обладающие β-глюкуронидазной активностью.
Если жидкий препарат, используемый в первой стадии настоящего изобретения, содержит любой из этих микроорганизмов, то его содержание не имеет конкретных ограничений, однако, с точки зрения репродуцируемости, предпочтительно, чтобы концентрация этого микроорганизма в жидком препарате составляла от 100 до 108 к.о.е./мл, более предпочтительно, от 101 до 106 к.о.е./мл, а еще более предпочтительно, от 102 до 104 к.о.е./мл.
Фермент
Если желательно проводить ферментативную реакцию с использованием жидкого препарата, содержащего компонент (А) с высокой репродуцируемостью, или если основным эффектом агента, обладающего действием, ингибирующим образование запаха мочи, и используемого в изделии, оборудовании или материале согласно изобретению, является, главным образом, не антимикробный эффект, а ингибирование фермента, то предпочтительно использовать жидкий препарат, содержащий компонент (А), который включает фермент.
Используемым здесь ферментом может быть любой фермент, подходящий для реагента, детектирующего ферментативную активность (компонента (А)), и используемый в жидком препарате, а, в частности, предпочтительно использовать один или более ферментов, выбранных из гликозидаз и сульфатаз.
Если принять во внимание взаимосвязь между ферментом и запахом мочи, то согласно настоящему изобретению, из этих ферментов, предпочтительно использовать β-глюкуронидазу или арилсульфатазу, а более предпочтительно использовать β-глюкуронидазу, подходящую для реагента, детектирующего ферментативную активность (компонента (А)) и содержащегося в жидком препарате, используемом в первой стадии.
Если жидкий препарат, используемый в первой стадии, включает эти ферменты, то их содержание будет варьироваться в зависимости от объекта или предполагаемой ситуации. Так, например, при оценке изделия-абсорбента и абсорбируюущего воду полимера, используемого в этих целях, следует учитывать время, прошедшее от начала использования продукта до его удаления; при этом их содержание предпочтительно скорректировать так, чтобы в образце, не содержащем ингибитора образования запаха мочи (контроль), наблюдалась реакция с достаточным развитием окраски при 37°C в течение 1-24 часов, во время использования продукта, и при 30°C в течение 8-120 часов после его удаления. В соответствии с этим, если в качестве фермента используется β-глюкуронидаза типа VII-А, происходящая от E. coli, то его содержание в жидком препарате может составлять в пределах от 0,1 до 30000 единиц/мл, в зависимости от объекта и предполагаемой ситуации.
Питательная среда
В жидкий препарат, содержащий компонент (А), может быть добавлена питательная среда в целях стимуляции пролиферации микроорганизмов и равномерного прохождения ферментативной реакции. При этом может быть использована любая питательная среда, при условии, что она будет способствовать пролиферации микроорганизмов, а предпочтительной является питательная среда, содержащая ингредиенты, выбранные из мясного экстракта, дрожжевого экстракта, продукта разложения казеина, аминокислот, сахаров, полисахаридов, различных неорганических солей, рН-корректирующего агента и т.п., и примерами таких сред являются питательные среды общего назначения, такие как среда SCD, среда Мюллера-Хинтона и среда LB.
Метод визуализации
Ниже описаны процедуры, проводимые в соответствии с настоящим изобретением.
При осуществлении способа согласно изобретению, в первой стадии, жидкий препарат, содержащий вышеописанный компонент (А), наносят на изделие, оборудование или материал, в которых образуется запах мочи.
Нанесение жидкого препарата, содержащего компонент (А), означает контактирование этого жидкого препарата с изделием, устройством или материалом, в которых образуется запах мочи; покрытие указанного изделия, оборудования или материала указанным жидким препаратом; пропитку такого изделия, оборудования или материала указанным жидким препаратом; распыление указанного жидкого препарата на такое изделие, оборудование или материал; или вливание указанного жидкого препарата в такое изделие, оборудование или материал или т.п. С точки зрения идентификации местонахождения источника образования запаха мочи в фактически используемой среде, если указанный жидкий препарат наносят на изделие, оборудование или материал, в которых образуется запах мочи, предпочтительно использовать жидкий препарат с имитацией присутствия реальной мочи; а если жидкий препарат, содержащий компонент (А), наносят на изделие-абсорбент, то предпочтительно, чтобы этот жидкий препарат абсорбировался так, чтобы он вытекал из участка, в котором абсорбируется моча в фактически используемой среде. С другой стороны, как описано ниже, если рассматриваемое изделие, на которое был нанесен жидкий препарат, содержащий указанный компонент (А), было подвергнуто сушке в промежутке между первой и второй стадиями, и на это рассматриваемое сухое изделие была снова добавлена моча, то предпочтительно, чтобы жидкий препарат, содержащий компонент (А), однородно абсорбировался на изделии-абсорбенте, если желательно повысить точность идентификации местонахождения источника образования запаха мочи.
Кроме того, если жидкий препарат, содержащий компонент (А), наносят в помещении туалета, то такой жидкий препарат, предпочтительно, наносят в виде покрытия или распыляют с использованием аэрозольных баллонов или т.п.
Кроме того, если жидкий препарат, содержащий компонент (А), наносят на изделие-абсорбент, то может быть использовано само изделие-абсорбент, а также имитирующая его модель. Кроме того, при необходимости, могут быть также использованы их части соответствующего размера, полученные путем разрезания.
Количество наносимого жидкого препарата не имеет конкретных ограничений, однако, исходя из того, что местонахождение источника образования запаха мочи в фактически используемой среде должно быть определено более точно, то в случае визуализации местонахождения источника образования запаха мочи в абсорбирующем воду полимере, предпочтительно, чтобы количество жидкого препарата в 4-240 раз, более предпочтительно, в 6-120 раз, а еще более предпочтительно, в 10-60 раз превышало массу абсорбирующего воду полимера.
Кроме того, в случае визуализации местонахождения источника образования запаха мочи в изделии-абсорбенте, соответствующее количество жидкого препарата, содержащего компонент (А), будет варьироваться в зависимости от объема абсорбируемой мочи, достаточного для этого продукта, а в частности, предпочтительное количество такого препарата составляет от 1/4 объема до объема, равного объему абсорбируемой мочи, а более предпочтительно, от 1/2 объема до объема, равного объему абсорбируемой мочи. Кроме того, если указанным объектом является модель, имитирующая изделие-абсорбент, или часть продукта или его модели, то соответствующее количество жидкого препарата, предпочтительно, вычисляют при условии, что отношение объема абсорбируемой мочи к объему основного продукта и его модели или его части равно отношению площади поверхности поглощения к площади основного продукта и его модели или его части.
Затем, во второй стадии, ферментативную реакцию проводят на изделии, оборудовании или материале, на которые был нанесен жидкий препарат, содержащий компонент (А).
Во второй стадии объект, на который был нанесен жидкий препарат, предпочтительно выдерживают при температуре, аналогичной температуре, при которой фактически образуется запах; так, например, если допустить, что запах образуется после использования и до удаления изделия-абсорбента, то такой объект, предпочтительно, выдерживают при температуре в пределах от комнатной температуры до температуры тела, то есть при температуре приблизительно от 15°C до 37°C, а более предпочтительно - при температуре приблизительно 30°C, с учетом того, что в летний сезон запах является особенно ощутимым.
В соответствии с настоящим изобретением, в данном изделии, оборудовании или материале, на которые был нанесен жидкий препарат, содержащий компонент (А), ферментативная реакция может быть инициирована сразу или через определенный промежуток времени. Если реакцию инициируют через определенный промежуток времени, то в промежутке между первой и второй стадиями может быть проведена другая стадия. Если ферментативную реакцию инициируют через определенный промежуток времени, то жидкий препарат, предпочтительно, не содержит мочи, и, в данном случае, предпочтительно, например, проводить стадию сушки рассматриваемого изделия, на которое был нанесен жидкий препарат, содержащий компонент (А), и нового добавления мочи в осушенное изделие в промежутке между первой и второй стадиями.
Если описанный выше способ применяют для изделия-абсорбента, имеющего более сложную конфигурацию, то жидкий препарат, содержащий компонент (А), может быть нанесен на само изделие-абсорбент, либо жидкий препарат может быть нанесен на отдельные элементы такого изделия, то есть на конкретные элементы, такие как абсорбирующий воду полимер, нетканая ткань, пульпа или картон с последующей их сушкой, после чего элементы, на которые был нанесен жидкий препарат, могут быть использованы для изготовления изделия-абсорбента.
Время прохождения ферментативной реакции варьируется в зависимости от объекта или предполагаемой ситуации, и такое время не имеет конкретных ограничений, однако, например, при оценке изделия-абсорбента и абсорбирующего воду полимера, используемого в этих целях, допускается интервал времени от начала использования продукта до его удаления. В данном случае это время, предпочтительно, составляет от 1 до 24 часов, более предпочтительно, от 2 до 16 часов, а еще более предпочтительно, от 4 до 8 часов. В случае удаления продукта это время, предпочтительно, составляет от 8 до 120 часов, более предпочтительно, от 16 до 96 часов, а еще более предпочтительно, от 24 до 72 часов.
Затем, в третьей стадии наблюдают изменение цвета под действием ферментативной реакции, и область со значительным изменением цвета идентифицируют как местонахождение источника образования запаха мочи. Кроме того, изделие, оборудование или материал с большой площадью изменения цвета могут быть идентифицированы как изделие, оборудование или материал с высокой интенсивностью запаха мочи.
Наблюдение изменения цвета может быть проведено непосредственно на всем изделии, устройстве или материале, на которые был нанесен жидкий препарат, а при оценке изделия-абсорбента для более точного определения местонахождения источника запаха в изделии-абсорбенте, имеющем более сложную конфигурацию, такое изменение цвета предпочтительно наблюдать на поверхности разреза. Если для такого наблюдения изделие-абсорбент должно быть разрезано, то это изделие может быть разрезано в любое время, при условии, что оно будет разрезано до проведения третьей стадии, однако, предпочтительно, чтобы это изделие было разрезано до проведения первой стадии, то есть для точной идентификации местонахождения источника образования запаха, предпочтительно, использовать вырезанную часть абсорбента.
Кроме того, в способе согласно изобретению, в случае, если используется реагент, детектирующий ферментативную активность и продуцирующий флуоресцентное пигментное соединение, изменение цвета должно быть определено в темном помещении и при облучении ультрафиолетом, однако, если используется реагент, продуцирующий пигментное соединение, имеющее длину волны поглощения в видимой области спектра, то в этом случае каких-либо требований к окружающим условиям и к условиям визуального наблюдения не предъявляется.
Для более объективной оценки предпочтительно проводить стадию вычисления площади изменения цвета после ферментативной реакции, исходя из данных изображения наблюдаемого объекта, такого как изделие, оборудование или материал, и определения интенсивности запаха мочи. Такое изображение может быть получено, например, с помощью цифровой камеры.
При этом может быть применен любой метод вычисления изменения цвета, исходя из данных визуализации, при условии, что этот метод позволяет точно выявить окрашенный участок и определить увеличение его площади, и для этого предпочтительно выбрать фильтр, дающий наиболее сильный контраст изменения цвета после ферментативной реакции в изделии, оборудовании или материале с помощью компьютерной программы редактирования изображения с последующей обработкой данного изображения путем фильтрации и вычислением площади изменения цвета до и после проведения реакции.
Так, например, ниже описана процедура, проводимая с использованием жидкого препарата, содержащего 5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронид в качестве компонента (А).
Сначала данные, полученные до и после ферментативной реакции, вводят в компьютерную программу редактирования изображения.
Затем, чтобы достичь наилучшего контраста изменения цвета после ферментативной реакции, предпочтительно использовать изображение, полученное путем выбора только красного канала, поскольку 5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронид представляет собой реагент, дающий темно-синюю окраску при ферментативной реакции. Четкое изображение участка образования запаха мочи может быть получено путем преобразования изображения по шкале градаций серого, а затем по шкале градаций черного и белого.
Затем, вычисляют отношение (%) числа окрашенных пикселей к числу всех пикселей, и исходя из этого отношения, сразу после добавления жидкого препарата, выводят величину изображения с получением увеличения процента, которое прямопропорционально окрашенной площади и которое может быть использовано как показатель интенсивности запаха мочи. В настоящем изобретении в качестве порога, используемого для преобразования черного и белого, может быть использована одна и та же величина для серии оцениваемых объектов, и может быть получена пороговая величина, которую, предпочтительно, устанавливают так, чтобы изображение было как можно ближе к окрашенной области, определенной визуально.
Метод скрининга
Скрининг материалов, элементов и агентов, а также групп элементов, обладающих превосходным эффектом ингибирования образования запаха мочи, может быть осуществлен методом визуального наблюдения в соответствии с настоящим изобретением.
При осуществлении скрининга жидкий препарат, содержащий компонент (А), может быть подвергнут контактированию с материалами, элементами или агентами, которые представляют собой объекты оценки эффекта ингибирования образования запаха мочи с последующим отбором объектов, в которых наблюдается незначительное изменение цвета после ферментативной реакции. В данном случае после визуализации местонахождения источника образования запаха мочи и его интенсивности методом, аналогичным методу визуальной оценки, описанному выше, наблюдают изменение цвета путем визуальной оценки или обработки изображения и отбирают материалы, элементы, агенты или группы элементов, для которых изменение цвета, то есть соответствующее увеличение окрашенной площади, является незначительным, и которые, следовательно, обладают превосходным эффектом ингибирования образования запаха мочи.
Скрининг материалов
Примерами материалов, которые представляют собой объект скрининга, являются абсорбирующий воду полимер, используемый в изделии-абсорбенте, однако такой абсорбирующий воду полимер не ограничивается полимерами, которые не подвергались конкретной обработке, и могут быть использованы полимеры, которые подвергались химической или физической обработке в целях предотвращения появления запаха, удаления запаха или уничтожения микробов или т.п.
Если объектами скрининга являются абсорбирующие воду полимеры, то абсорбирующий воду полимер, обладающий превосходным эффектом ингибирования образования запаха мочи, может быть отобран путем проведения:
первой стадии, а именно стадии нанесения жидкого препарата, содержащего компонент (А), на абсорбирующие воду полимеры многих типов;
второй стадии, а именно стадии проведения ферментативной реакции в абсорбирующих воду полимерах, на которые был нанесен жидкий препарат;
третьей стадии, а именно стадии наблюдения изменения цвета в абсорбирующих воду полимерах, на которые был нанесен жидкий препарат; и
четвертой стадии, а именно стадии отбора абсорбирующего воду полимера, в котором наблюдается меньшее изменение цвета, чем это наблюдалось в третьей стадии.
Ниже приводится объяснение описанного выше метода визуальной оценки для каждой из первых трех стадий, если отсутствуют какие-либо другие объяснения.
При отборе абсорбирующего воду полимера, обладающего превосходным эффектом ингибирования образования запаха мочи, скрининг может быть осуществлен с использованием только абсорбирующего воду полимера, однако, в данном случае, предпочтительно, проводить ферментативную реакцию с использованием абсорбирующего полимера, содержащегося в изделии-абсорбенте, и предпочтительно осуществлять скрининг путем наблюдения развития окраски на поверхности разреза части изделия в целях отбора абсорбирующего воду полимера, обладающего превосходным эффектом ингибирования образования запаха мочи, в случае, если этот абсорбирующий воду полимер действительно используется. При отборе абсорбирующего воду полимера с меньшим изменением цвета может быть выбран полимер, имеющий меньшее изменение оптической плотности цвета, или может быть выбран полимер, имеющий меньшую площадь изменения цвета. При этом предпочтительно выбрать абсорбирующий воду полимер, в котором не наблюдалось изменения цвета.
Скрининг элементов
Кроме того, примерами элементов, которые представляют собой объект скрининга, являются абсорбирующий воду полимер, нетканая ткань, пульпа, картон и т.п., используемые в элементах, составляющих изделие-абсорбент, а местонахождение источника образования запаха мочи и степень ингибирования образования запаха мочи могут варьироваться в зависимости от типа этих элементов и их расположения. Затем, эти составляющие элементы, используемые для получения изделия-абсорбента, обладающего превосходным эффектом ингибирования образования запаха мочи, и их соответствующие группы могут быть также выбраны с применением способа согласно изобретению.
Если элементы, составляющие изделие-абсорбент, представляют собой объект скрининга, то элемент изделия-абсорбента, обладающий превосходным эффектом ингибирования образования запаха мочи, может быть отобран путем проведения:
первой стадии, а именно стадии нанесения жидкого препарата, содержащего компонент (А), на множество изделий-абсорбентов, имеющих различные элементы, составляющие это изделие;
второй стадии, а именно стадии проведения ферментативной реакции в изделиях-абсорбентах, на которые был нанесен жидкий препарат;
третьей стадии, а именно стадии наблюдения изменения цвета на поверхности разреза изделий-абсорбентов, на которые был нанесен жидкий препарат; и
четвертой стадии, а именно стадии отбора элемента, составляющего изделие-абсорбент, в котором наблюдается меньшее изменение окраски, чем это наблюдалось в третьей стадии.
Ниже приводится объяснение описанного выше метода визуальной оценки для каждой из первых трех стадий, если отсутствуют какие-либо другие объяснения.
Кроме того, если группа элементов, составляющих изделие-абсорбент, представляет собой объект скрининга, то эта группа элементов изделия-абсорбента, обладающих превосходным эффектом ингибирования образования запаха мочи, может быть отобрана путем проведения:
первой стадии, а именно стадии нанесения жидкого препарата, содержащего компонент (А), на множество изделий-абсорбентов, имеющих различные группы элементов, составляющих это изделие;
второй стадии, а именно стадии проведения ферментативной реакции в изделиях-абсорбентах, на которые был нанесен жидкий препарат;
третьей стадии, а именно стадии наблюдения изменения цвета на поверхности разреза изделий-абсорбентов, на которые был нанесен жидкий препарат; и
четвертой стадии, а именно стадии отбора группы элементов, составляющих изделие-абсорбент, в котором наблюдается меньшее изменение цвета, чем это наблюдалось в третьей стадии.
Ниже приводится объяснение описанного выше метода визуальной оценки для каждой из первых трех стадий, если отсутствуют какие-либо другие объяснения.
При отборе элемента, составляющего изделие-абсорбент, или группы этих элементов, обладающих превосходным эффектом ингибирования образования запаха мочи, в качестве изделия-абсорбента предпочтительно использовать секцию этого изделия, которая представляет собой объект изобретения и в которой наблюдается развитие окраски, обусловленное факторами, аналогичными факторам, описанным выше.
Скрининг агентов
Кроме того, соответствующий ингибитор образования запаха мочи может быть также выбран с применением способа согласно изобретению. Примерами таких ингибиторов образования запаха мочи, которые представляют собой объект изобретения, являются неорганические или органические противомикробные агенты, которые ингибируют пролиферацию и рост микроорганизмов или уничтожают микроорганизмы, ответственные за образование запаха мочи; и ингибиторы ферментов, такие как ингибиторы β-глюкуронидазы и ингибиторы арилсульфатазы, которые ингибируют фермент, ответственный за образование запаха мочи. Кроме того, объектами способа отбора согласно изобретению могут быть растительные экстракты, отдушки, масляные агенты, поверхностно-активные вещества, дезодоранты и т.п., которые обладают прямым или опосредованным действием. Однако ингибитор образования запаха мочи согласно изобретению не ограничивается вышеописанными ингибиторами, и могут быть использованы любые ингибиторы при условии, что они будут ингибировать запах мочи, образующийся под действием микроорганизмов, если они были нанесены на рассматриваемый объект.
Если ингибитор образования запаха мочи представляет собой объект скрининга, то этот ингибитор образования запаха мочи, обладающий превосходным эффектом ингибирования образования запаха мочи, может быть отобран путем проведения:
первой стадии, а именно стадии нанесения жидкого препарата, содержащего компонент (А), на множество изделий, оборудований или материалов, на которые были нанесены различные ингибиторы образования запаха мочи;
второй стадии, а именно стадии проведения ферментативной реакции в указанных изделиях, на оборудовании или на материалах, на которые был нанесен жидкий препарат;
третьей стадии, а именно стадии наблюдения изменения цвета в указанных изделиях, на оборудовании или на материалах, на которые был нанесен жидкий препарат; и
четвертой стадии, а именно стадии отбора ингибитора образования запаха мочи, в котором наблюдается меньшее изменение цвета, чем это наблюдалось в третьей стадии.
Ниже приводится объяснение описанного выше метода визуальной оценки для каждой из первых трех стадий, если отсутствуют какие-либо другие объяснения.
При отборе ингибитора образования запаха мочи, обладающего превосходным эффектом ингибирования образования запаха мочи, скрининг предпочтительно осуществлять с использованием абсорбирующего воду изделия или изделия-абсорбента, которые обрабатывают такими методами, как нанесение ингибитора образования запаха мочи в качестве покрытия; пропитка указанным ингибитором и фиксация этим ингибитором, с точки зрения отбора подходящего ингибитора в случае, если этот ингибитор образования запаха мочи действительно используется.
Примеры
Пример 1. Отбор реагента, детектирующего ферментативную активность (компонента (А))
Как показано на фигуре 1, 300 мкл жидких препаратов, каждый из которых содержит реагент, детектирующий ферментативную активность, или индикатор, чувствительный к цвету и запаху, и каждый из которых имеет состав, представленный в таблице 1, абсорбировали на 0,03 г абсорбирующего воду полимера, и эти три полимера прокладывали слоями в виде сэндвича между двумя слоями пульпы в пробирке для микротестирования объемом 1,5 мл. Фермент или бактерию, которые являются инициатором образования запаха, добавляли только в центральный слой и оставляли на 72 часа при 37°C в камере термостата для инициации образования запаха, а затем наблюдали изменение цвета. Результаты представлены в таблице 2 и на фигуре 2. В таблице 2 показаны результаты развития окраски, контраста с цветом мочи и точности идентификации местоположения источника появления запаха мочи, где указанные результаты были подразделены на группы в соответствии с нижеследующими критериями и обсуждениями.
Развитие окраски
a: Яркая окраска
b: Менее яркая окраска
c: Слабая окраска
d: Отсутствие окраски
Контраст с цветом мочи
a: Резкий контраст между цветом мочи и пигментного соединения;
b: Менее резкий контраст между цветом мочи и пигментного соединения;
c: Слабый контраст между цветом мочи и пигментного соединения;
d: Цвет мочи и цвет пигментного соединения не отличались друг от друга;
-: Невозможно оценить из-за слабого развития окраски (развитие окраски: d).
Точность идентификации местонахождения источника образования запаха
a: Местонахождение источника образования запаха мочи может быть определено точно;
b: Местонахождение источника образования запаха мочи может быть определено;
c: Местонахождение источника образования запаха мочи может быть определено, но не точно;
d: Местонахождение источника образования запаха мочи не установлено;
-: Невозможно оценить из-за слабого развития окраски (развитие окраски: d).
Как показали эти результаты, явное изменение цвета наблюдалось только в центральном слое, а местонахождение источника образования запаха могло быть успешно и точно определено для образцов, на которых были абсорбированы жидкие препараты, содержащие используемый в настоящем изобретении реагент, детектирующий ферментативную активность и действующий как субстрат фермента (компонент (А)), где указанный реагент продуцировал плохо растворимое в воде пигментное соединение (примеры 1-1 - 1-7), если в качестве инициатора были использованы фермент или бактерия. В противоположность этому, в Сравнительном примере 1-3, где использовался индикатор, чувствительный к цвету и запаху, и в Сравнительном примере 1-1, где пигментное соединение, продуцируемое после ферментативной реакции, было водорастворимым (растворялось в водном 4-нитрофеноле: 11,6 г/л (20°C)), хотя и наблюдалось развитие окраски, однако местонахождение источника образования запаха мочи изменялось, а поэтому оно не могло быть точно идентифицировано. Некоторые из этих индикаторов, которые являются чувствительными к цвету и запаху, не могут действовать как индикаторы в абсорбирующем воду полимере, как показано в Сравнительном примере 1-2 и 1-4.
| Таблица 1 | |||||||||||
| Пример 1-1 | Пример 1-2 | Сравни-тельный пример 1-1 | Сравни-тельный пример 1-2 | Сравни-тельный пример 1-3 | Пример 1-3 | Пример 1-4 | Пример 1-5 | Пример 1-6 | Пример 1-7 | Сравнительный пример 1-4 | |
| 5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронид (% масс/об) | 0,02 | 0,02 | 0,01 | 0,005 | |||||||
| 5-бром-4-хлор-3-индолилсульфат (% масс/об) | 0,02 | ||||||||||
| 5-бром-6-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронид (% масс/об) | 0,02 | ||||||||||
| 5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-галактопиранозид (% масс/об) | 0,02 | ||||||||||
| 4-нитрофенил-β-D-глюкуронид (% масс/об) | 0,02 | ||||||||||
| Фенолфталеин (% масс/об) | 0,004 | ||||||||||
| Феноловый красный (% масс/об) | 0,004 | ||||||||||
| Альдегид диметиламино-коричной кислоты (% масс/об) | 0,02 | ||||||||||
| Моча (% об/об) | 90 | 90 | 90 | 90 | 90 | 90 | 90 | 90 | 90 | 90 | 90 |
| Диметилсульфоксид (% об/об) | 1 | 0,5 | |||||||||
| Вода | Доста- точное коли-чество |
Доста-точное коли-чество | Доста- точное коли-чество |
Достаточное количество | Достаточное количество | Доста-точное коли-чество | Доста-точное коли-чество | Доста-точное коли-чество | Доста-точное коли-чество | Доста-точное коли-чество | Достаточное количество |
| Всего | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 |
| Таблица 2 | |||||||
| Пример 1-1 | Пример 1-2 | Сравнительный пример 1-1 | Сравнительный пример 1-2 | Сравнительный пример 1-3 | |||
| Реагент, детектирующий ферментативную активность или индикатор, который является чувствительным к цвету и запаху | Название | 5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронид | 5-бром-4-хлор-3-индолилсульфат | 4-нитрофенил-β-D-глюкуронид | Фенолфталеин | Феноловый красный | |
| Классификация по свойствам | Действует как субстрат фермента/плохо растворимый в воде пигмент | Действует как субстрат фермента/плохо растворимый в воде пигмент | Действует как субстрат фермента/ растворимый в воде пигмент |
Чувствительный к цвету и запаху | Чувствительный к цвету и запаху | ||
| Фермент или микроорганизмы | β-гликозидаза | Арилсульфатаза | β-гликозидаза | Уреаза | Уреаза | ||
| Результаты теста | Развитие окраски | a | a | a | d | b | |
| Контраст с цветом мочи | a | a | c | - | b | ||
| Точность идентификации местоположения источника появления запаха | a | a | d | - | d | ||
| Пример 1-3 | Пример 1-4 | Пример 1-5 | Пример 1-6 | Пример 1-7 | Сравнительный пример 1-4 | ||
| Реагент, детектирующий ферментативную активность или индикатор, который является чувствительным к цвету и запаху | Название | 5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронид | 5-бром-4-хлор-3-индолилсульфат | 5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронид | 5-бром-4-хлор-6-индолил-β-D-глюкуронид | 5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-галактопира-нозид | Альдегид диметилами-нокоричной кислоты |
| Классификация по свойствам | Действует как субстрат фермента/плохо растворимый в воде пигмент | Действует как субстрат фермента/плохо растворимый в воде пигмент | Действует как субстрат фермента/плохо растворимый в воде пигмент | Действует как субстрат фермента/ плохо растворимый в воде пигмент |
Действует как субстрат фермента/ плохо растворимый в воде пигмент |
Чувствительный к цвету и запаху | |
| Фермент или микроорганизмы | E. coli | E. coli | E. coli | E. coli | E. coli | E. coli | |
| Результаты теста | Развитие окраски | a | a | b | a | a | d |
| Контраст с цветом мочи | a | a | a | a | a | - | |
| Точность идентификации местоположения источника появления запаха | a | a | a | a | a | - |
Пример 2. Визуализация местонахождения источника образования запаха мочи, определение интенсивности запаха мочи и скрининг абсорбирующих воду полимеров
(1) Сбор штамма, обладающего β-глюкуронидазной активностью
Штаммы, обладающие β-глюкуронидазной активностью, собирали и отделяли от использованной (пропитанной мочой) бумажной пеленки для детей стандартным методом с использованием планшета с агаровой средой SCDLP (NIHON PHARMACEUTICAL CO., LTD.), содержащей 5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронид. Если эти штаммы были культивированы в стерилизованной моче, то подтверждалось образование запаха, и штамм, который, по сравнению с другими штаммами, давал особенно сильный запах, был использован в этом примере как штамм, обладающий β-глюкуронидазной активностью. Секвенирование нуклеотидов молекулы рДНК 16S подтвердило, что этот штамм принадлежал E. coli.
(2) Получение клеточной суспензии
Штамм, обладающий β-глюкуронидазной активностью, описанной выше, инкубировали в течение ночи на планшете с агаровой средой SCD, и часть полученной колонии соскабливали стерилизованной петлей и разводили в стерилизованном физиологическом растворе с получением клеточной суспензии, имеющей концентрацию порядка 105 к.о.е./мл.
(3) Получение жидкого препарата
Из реагентов, детектирующих ферментативную активность, отбирали 5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронид, который позволял успешно идентифицировать местонахождение источника образования запаха мочи, как описано в примере 1, и получали жидкий препарат, содержащий 5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронид. Другими словами, 5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронид растворяли при 200 м.д. (масс/об) в стерилизованной человеческой моче (смеси проб мочи, взятых у двух индивидуумов в равном объеме), которая была стерилизована на фильтре Nalgene сразу после сбора, и к этой моче добавляли клеточную суспензию, полученную, как описано выше в разделе (2) в концентрации 0,1 об/об%, а затем смешивали с получением жидкого препарата.
(4) Получение частей абсорбента
Были изготовлены четыре памперса, которые отличались только по типу абсорбирующего воду полимера и имитировали конструкцию коммерчески доступного памперса (для использования во время сна). Из каждого памперса вырезали кусок размером 5,5 см2 в месте, близко расположенном от центральной части памперса, и эти части абсорбента подвергали нижеследующему анализу (фигура 3). В этом анализе объем мочи, абсорбированной в каждой части, который был пропорционален объему мочи, абсорбированной в коммерчески доступном памперсе, используемом в качестве эталона, составлял 16,7 мл.
(5) Ферментативная реакция
На верхнюю поверхность части абсорбента, полученной, как описано выше в (4), в место, расположенное на расстоянии 1,5 см от наблюдаемой поверхности, показанной на фигуре 3, выливали по каплям 12,5 мл жидкого препарата, полученного, как описано выше (3), и эту часть оставляли в камере термостата при 37°C на 8 часов и на 24 часа.
(6) Оценка интенсивности запаха
Интенсивность запаха соответствующих образцов, полученных, как описано выше (5), оценивали сразу, через 8 часов и через 24 часа после получения. Оценка интенсивности запаха проводилась двумя членами Экспертной комиссии, являющимися специалистами по определению запахов, в соответствии с методом оценки интенсивности запаха по 6-балльной системе от 0 до 5. Другими словами, оценочные баллы присваивались следующим образом: «0» - запах отсутствует; «1» - запах едва ощущается; «2» - слабый запах, хотя он и ощущается как запах мочи; «3» - запах, который явно ощущается как запах мочи; «4» - сильный запах мочи; и «5» - очень сильный запах мочи. Интенсивность запаха оценивали с интервалом 0,5, и если средние значения, полученные двумя специалистами, имели численную величину, равную десятичному числу со значением после запятой 0,25, то этому числу присваивали значение 0,5, а если численное значение было равно десятичному числу со значением после запятой 0,75, то его округляли до целого числа. Полученные результаты представлены в таблице 3.
(7) Визуализирующий анализ
Соответствующие образцы, полученные, как описано выше (5), фотографировали цифровой камерой сразу, через 8 часов и через 24 часа после получения. Полученные изображения считывали с помощью компьютерной программы редактирования изображений Photoshop 6.0 (Adobe) и выбирали только красный канал с последующим преобразованием изображения по шкале градаций серого для детекции участка, окрашенного синим цветом. Полученное изображение также преобразовывали по шкале градаций черного и белого для получения точной информации о местоположении окрашенного участка. Порог, используемый для преобразования по шкале градаций черного и белого, может быть выбран в зависимости от ситуации, а в данном случае была выбрана величина 128. Затем вычисляли отношение (%) числа окрашенных пикселей к числу всех пикселей, и исходя из этого, сразу получали величину увеличения интенсивности (%), которое прямопропорционально окрашенной площади через 8 часов и через 24 часа (если величина была меньше 0, то ее принимали за 0). Результаты представлены в таблице 3.
Кроме того, на фигуре 4 представлен график, иллюстрирующий корреляцию между величинами оценок интенсивности запаха (величинами, полученными при сенсорной оценке) как описано выше (6), и увеличением интенсивности (%), которое прямопропорционально окрашенной площади. Изображения (полученные сразу и через 24 часа) части памперсов, изготовленных с использованием абсорбирующего воду полимера В, представлены на фигуре 5 как один из примеров изображения.
Эти результаты показали, что с применением способа, согласно изобретению, пропорциональное увеличение окрашенной площади четко соответствует повышению интенсивности запаха, и местонахождение источника образования запаха мочи может быть точно установлено по окрашенному участку, а объективная оценка интенсивности запаха может быть сделана на основе визуальной информации. Кроме того, может быть визуально определено, что памперсы, изготовленные с использованием абсорбирующего воду полимера В, обнаруживают превосходный эффект в отношении предотвращения образования запаха мочи, и было показано, что с применением способа согласно изобретению может быть выбран абсорбирующий воду полимер, обладающий превосходным действием в отношении ингибирования образования запаха мочи и подходящий для его использования в целях изготовления изделия-абсорбента.
| Таблица 3 | |||
| Абсорбирующий воду полимер | Время реакции (ч) | Интенсивность запаха (величина сенсорной оценки) | Увеличение, прямопропорцио- нальное площади развития окраски (%) |
| А | 0 | 1,5 | - |
| А | 8 | 2,5 | 30 |
| А | 24 | 4,5 | 77 |
| В | 0 | 1,5 | - |
| В | 8 | 1,5 | 0 |
| В | 24 | 3 | 29 |
| С | 0 | 1,5 | - |
| С | 8 | 2,5 | 22 |
| С | 24 | 4,5 | 77 |
| D | 0 | 1,5 | - |
| D | 8 | 1,5 | 0 |
| D | 24 | 3 | 40 |
Пример 3. Скрининг на противомикробные агенты, ингибирующие образование запаха мочи
Органический противомикробный агент Р или Q, или неорганический противомикробный агент R, используемый в качестве ингибитора образования запаха мочи, добавляли в различных концентрациях (% масс/масс) к абсорбирующему воду полимеру. В данном случае в качестве органического противомикробного агента Р использовали соль четвертичного аммония, в качестве органического противомикробного агента Q использовали феноловый противомикробный агент, а в качестве неорганического противомикробного агента R использовали сульфат цинка. 0,45 г каждого из полученных абсорбирующих воду полимеров, содержащих противомикробный агент, равномерно распределяли по нижней поверхности контейнера размером приблизительно 5,5 см2, на которую наносили 6,5 мл жидкого препарата, полученного, как описано в разделе (3) примера 2, и проводили ферментативную реакцию в камере термостата при 30°C в течение 48 часов. На фигуре 6 представлены изображения образцов, под которыми указаны величины оценок интенсивности запаха, полученные способом, описанным в разделе (6) примера 2, а в таблице 4 указаны минимальные концентрации соответствующих противомикробных агентов, ингибирующие развитие окраски.
Полученные выше результаты показали, что противомикробные агенты, ингибирующие образование запаха мочи и подходящие для изготовления абсорбирующего воду полимера, могут быть выбраны соответствующим способом согласно изобретению.
| Таблица 4 | |
| Ингибитор образования запаха мочи | Минимальная концентрация, ингибирующая развитие окраски (масс/об%) |
| Органический противомикробный агент Р | 0,1 |
| Органический противомикробный агент Q | 0,5 |
| Органический противомикробный агент R | >1 |
Пример 4. Скрининг ингибиторов ферментов, ингибирующих образование запаха мочи
Жидкий препарат получали путем растворения 200 м.д. (масс/об) 5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронида в стерилизованной человеческой моче, полученной путем стерилизации свежесобранной человеческой мочи на фильтре Nalgene, а затем добавляли 1 об/об% водного раствора β-глюкуронидазы типа VII-А, происходящей от E. coli (закупленной у Sigma Corporation), где указанный водный раствор доводили до концентрации 160 единиц/мл и перемешивали.
Затем получали абсорбирующие воду полимеры, каждый из которых содержал ингибиторы β-глюкуронидазы S и Т, используемые в качестве ингибиторов образования запаха мочи в концентрации 1,5 масс.%. 0,5 г каждого из полученных абсорбирующих воду полимеров, содержащих ингибитор ферментов, и абсорбирующего воду полимера, не содержащего добавок, равномерно распределяли по нижней поверхности контейнера размером приблизительно 5,5 см2, на которую наносили 7,5 мл жидкого препарата, полученного, как описано выше, и проводили ферментативную реакцию в камере термостата при 30°C в течение 48 часов. На фигуре 7 представлены изображения соответствующих образцов, под которыми указаны величины оценок интенсивности запаха, полученные способом, описанным в разделе (6) примера 2.
Полученные выше результаты показали, что способ согласно изобретению позволяет осуществлять соответствующий скрининг ингибитора фермента, ингибирующего образование запаха мочи и подходящего для изготовления абсорбирующего воду полимера.
Препаративный пример 1. Получение изделия-абсорбента, в котором визуально определяют местонахождение источника образования запаха мочи
5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронид растворяли при 200 м.д. (масс/об) в этаноле с получением жидкого препарата. Из полученного памперса, имитирующего коммерчески доступный памперс (для использования в дневное время, объем абсорбированной мочи: 450 мл), вырезали фрагмент размером 5,5 см2 в месте, расположенном рядом с центральной частью каждого памперса. Полученные части абсорбента равномерно пропитывали 12,5 мл жидкого препарата и сушили в электросушилке вплоть до прекращения изменения массы.
Пример 5. Визуализация местонахождения источника образования запаха мочи с использованием изделия-абсорбента, в котором визуально определяют местонахождение источника образования запаха мочи
(1) Приготовление мочи, содержащей бактериальные клетки
Штамм, обладающий β-глюкуронидазной активностью, описанной в разделе (1) примера 2, инкубировали в течение ночи на планшете с агаровой средой SCD, и часть полученной колонии соскабливали стерилизованной петлей и разводили в стерилизованном физиологическом растворе с получением клеточной суспензии, имеющей концентрацию порядка 104 к.о.е./мл. Полученную клеточную суспензию добавляли в концентрации 1 об/об% к стерилизованной человеческой моче, полученной путем стерилизации свежесобранной человеческой мочи на фильтре Nalgene, в целях приготовления мочи, содержащей бактериальные клетки.
(2) Ферментативная реакция и визуализация местонахождения источника образования запаха мочи
На верхнюю поверхность части абсорбента, полученной, как описано в препаративном примере 1, в место, расположенное на расстоянии 1,5 см от наблюдаемой поверхности, показанной на фигуре 3, добавляли по каплям 12,5 мл мочи, содержащей бактериальные клетки и полученной, как описано выше (1), и эту часть оставляли на 24 часа в камере термостата при 30°C.
На фигуре 8 представлены изображения образцов, полученные сразу и через 24 часа, и под этими изображениями указаны величины оценок интенсивности запаха, полученные способом, описанным в разделе (6) примера 2.
Полученные выше результаты показали, что способ согласно изобретению позволяет легко визуализировать местонахождение источника образования запаха мочи в изделии-абсорбенте.
Препаративный пример 2: Получение твердой поверхности, на которой можно визуально определить местонахождение источника образования запаха мочи
5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронид растворяли в этаноле в концентрации 2000 м.д. (масс/об) с получением жидкого препарата. Затем жидкий препарат загружали в аэрозольный баллон, и 3,3 г этого жидкого препарата равномерно распыляли несколько раз с перерывами, на центральную часть (диаметром 6,5 см) керамической пластины и сушили при комнатной температуре.
Пример 6. Визуализация местонахождения источника образования запаха мочи на твердой поверхности, на которой можно визуально определить местонахождение источника образования запаха мочи
Стерилизованную человеческую мочу получали путем стерилизации свежесобранной человеческой мочи на фильтре Nalgene, а мочу, содержащую фермент, получали путем добавления к этой стерилизованной человеческой моче в концентрации 1 об/об%, водного раствора β-глюкуронидазы типа VII-А, происходящей от E. coli, и доводили до 25400 единиц/мл, а затем перемешивали так, чтобы постоянно выделялся запах мочи. После этого 300 мкл стерилизованной мочи и 300 мкл мочи, содержащей фермент, по каплям добавляли на левую и правую стороны, соответственно, керамической пластины, описанной в препаративном примере 4, и верхнюю поверхность пластины покрывали оберточной бумагой, а затем эту пластину оставляли на 24 часа при комнатной температуре.
На фигуре 9 представлены изображения образца, полученные сразу и через 24 часа.
Полученные результаты показали, что способ согласно изобретению позволяет легко визуализировать местонахождение источника образования запаха мочи на твердой поверхности.
1. Способ визуального определения местонахождения источника образования запаха мочи и интенсивности запаха мочи, где указанный способ включает:
первую стадию, а именно стадию нанесения жидкого препарата, содержащего компонент (А), на изделие-абсорбент или на водопоглощающий полимер указанного изделия-абсорбента, которые являются объектами определения запаха мочи;
вторую стадию, а именно стадию осуществления ферментативной реакции на указанном изделии-абсорбенте или на водопоглощающем полимере указанного изделия-абсорбента, на которые был нанесен указанный жидкий препарат; и
третью стадию, а именно стадию наблюдения изменения цвета на срезанной поверхности изделия-абсорбента или водопоглощающего полимера указанного изделия-абсорбента, на которые был нанесен указанный жидкий препарат,
где область изменения цвета определяют как местонахождение источника образования запаха мочи, а количественное изменение цвета, определенное путем вычисления площади изменения цвета до и после ферментативной реакции, служит показателем интенсивности запаха мочи, и где компонентом (А) является реагент, детектирующий ферментативную активность, который действует как субстрат фермента и продуцирует плохо растворимое в воде пигментное соединение или плохо растворимое в воде флуоресцентное пигментное соединение под действием ферментативной реакции, причем компонент (А) представляет собой один или более компонентов, выбранных из группы, состоящей из реагента, детектирующего гликозидазную активность, и реагента, детектирующего сульфатазную активность; реагент, детектирующий гликозидазную активность, представляет собой реагент, детектирующий β-глюкуронидазную активность, выбранный из группы, состоящей из 5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронида, 5-бром-6-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронида, 6-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронида, индоксил-β-D-глюкуронида и 4-метилумбеллиферил-β-D-глюкуронида, а реагент, детектирующий сульфатазную активность, представляет собой реагент, детектирующий арилсульфатазную активность, выбраный из группы, состоящей из 5-бром-4-хлор-3-индолилсульфата, индоксилсульфата и 4-метилумбеллиферилсульфата;
причем указанный жидкий препарат также содержит один или более агентов, выбранных из группы, состоящей из микроорганизма и фермента, где указанный микроорганизм представляет собой один или более микроорганизмов, выбранных из группы, состоящей из штамма, обладающего β-глюкуронидазной активностью, и штамма, обладающего арилсульфатазной активностью, а указанный фермент представляет собой один или более ферментов, выбранных из группы, состоящей из β-глюкуронидазы и арилсульфатазы.
2. Способ по п. 1, включающий стадию сушки изделия, на которое был нанесен жидкий препарат, содержащий компонент (А), в период времени между первой и второй стадиями.
3. Способ скрининга на водопоглощающий полимер, обладающий эффектом ингибирования образования запаха мочи, изделия-абсорбента, включающий:
первую стадию, а именно стадию нанесения жидкого препарата, содержащего компонент (А), на изделия-абсорбенты многих типов, содержащие различные водопоглощающие полимеры;
вторую стадию, а именно стадию проведения ферментативной реакции в водопоглощающих полимерах изделий-абсорбентов, на которые был нанесен жидкий препарат;
третью стадию, а именно стадию наблюдения изменения цвета в водопоглощающих полимерах указанных изделий-абсорбентов, на которые был нанесен жидкий препарат; и
четвертую стадию, а именно стадию отбора водопоглощающего полимера, в котором наблюдается меньшее изменение цвета в третьей стадии,
где компонентом (А) является реагент, детектирующий ферментативную активность, который действует как субстрат фермента и продуцирует плохо растворимое в воде пигментное соединение или плохо растворимое в воде флуоресцентное пигментное соединение под действием ферментативной реакции,
причем компонент (А) представляет собой один или более компонентов, выбранных из группы, состоящей из реагента, детектирующего гликозидазную активность, и реагента, детектирующего сульфатазную активность; реагент, детектирующий гликозидазную активность, представляет собой реагент, детектирующий β-глюкуронидазную активность, выбранный из группы, состоящей из 5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронида, 5-бром-6-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронида, 6-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронида, индоксил-β-D-глюкуронида и 4-метилумбеллиферил-β-D-глюкуронида, а реагент, детектирующий сульфатазную активность, представляет собой реагент, детектирующий арилсульфатазную активность, выбраный из группы, состоящей из 5-бром-4-хлор-3-индолилсульфата, индоксилсульфата и 4-метилумбеллиферилсульфата;
причем указанный жидкий препарат также содержит один или более агентов, выбранных из группы, состоящей из микроорганизма и фермента, где указанный микроорганизм представляет собой один или более микроорганизмов, выбранных из группы, состоящей из штамма, обладающего β-глюкуронидазной активностью, и штамма, обладающего арилсульфатазной активностью, а указанный фермент представляет собой один или более ферментов, выбранных из группы, состоящей из β-глюкуронидазы и арилсульфатазы.
4. Способ скрининга на элементы, обладающие эффектом ингибирования образования запаха мочи и составляющие изделие-абсорбент, включающий:
первую стадию, а именно стадию нанесения жидкого препарата, содержащего компонент (А), на множество изделий-абсорбентов, имеющих различные элементы, составляющие это изделие;
вторую стадию, а именно стадию проведения ферментативной реакции в изделиях-абсорбентах, на которые был нанесен жидкий препарат;
третью стадию, а именно стадию наблюдения изменения цвета на срезанной поверхности изделий-абсорбентов, на которые был нанесен жидкий препарат; и
четвертую стадию, а именно стадию отбора элементов, составляющих изделие-абсорбент, в котором наблюдалось меньшее изменение цвета в третьей стадии,
где компонентом (А) является реагент, детектирующий ферментативную активность, который действует как субстрат фермента и продуцирует плохо растворимое в воде пигментное соединение или плохо растворимое в воде флуоресцентное пигментное соединение под действием ферментативной реакции,
причем компонент (А) представляет собой один или более компонентов, выбранных из группы, состоящей из реагента, детектирующего гликозидазную активность, и реагента, детектирующего сульфатазную активность; реагент, детектирующий гликозидазную активность, представляет собой реагент, детектирующий β-глюкуронидазную активность, выбранный из группы, состоящей из 5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронида, 5-бром-6-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронида, 6-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронида, индоксил-β-D-глюкуронида и 4-метилумбеллиферил-β-D-глюкуронида, а реагент, детектирующий сульфатазную активность, представляет собой реагент, детектирующий арилсульфатазную активность, выбраный из группы, состоящей из 5-бром-4-хлор-3-индолилсульфата, индоксилсульфата и 4-метилумбеллиферилсульфата;
причем указанный жидкий препарат также содержит один или более агентов, выбранных из группы, состоящей из микроорганизма и фермента, где указанный микроорганизм представляет собой один или более микроорганизмов, выбранных из группы, состоящей из штамма, обладающего β-глюкуронидазной активностью, и штамма, обладающего арилсульфатазной активностью, а указанный фермент представляет собой один или более ферментов, выбранных из группы, состоящей из β-глюкуронидазы и арилсульфатазы.
5. Способ скрининга на ингибитор образования запаха мочи для изделия-абсорбента, где указанный способ включает:
первую стадию, а именно стадию нанесения жидкого препарата, содержащего компонент (А), на изделия-абсорбенты многих типов или на водопоглощающий полимер указанного изделия-абсорбента, на которые были нанесены различные ингибиторы образования запаха мочи;
вторую стадию, а именно стадию проведения ферментативной реакции в изделиях-абсорбент или в водопоглощающем полимере указанного изделия-абсорбента, на которые был нанесен жидкий препарат;
третью стадию, а именно стадию наблюдения изменения цвета на срезанной поверхности изделий-абсорбентов или водопоглощающего полимера указанного изделия-абсорбента, на которые был нанесен указанный жидкий препарат, и
четвертую стадию, а именно стадию отбора ингибитора образования запаха мочи водопоглощающего полимера, который имеет меньшее изменение цвета в третьей стадии,
где компонентом (А) является реагент, детектирующий ферментативную активность, который действует как субстрат фермента и продуцирует плохо растворимое в воде пигментное соединение или плохо растворимое в воде флуоресцентное пигментное соединение под действием ферментативной реакции, причем компонент (А) представляет собой один или более компонентов, выбранных из группы, состоящей из реагента, детектирующего гликозидазную активность, и реагента, детектирующего сульфатазную активность; реагент, детектирующий гликозидазную активность, представляет собой реагент, детектирующий β-глюкуронидазную активность, выбранный из группы, состоящей из 5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронида, 5-бром-6-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронида, 6-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронида, индоксил-β-D-глюкуронида и 4-метилумбеллиферил-β-D-глюкуронида, а реагент, детектирующий сульфатазную активность, представляет собой реагент, детектирующий арилсульфатазную активность, выбраный из группы, состоящей из 5-бром-4-хлор-3-индолилсульфата, индоксилсульфата и 4-метилумбеллиферилсульфата;
причем указанный жидкий препарат также содержит один или более агентов, выбранных из группы, состоящей из микроорганизма и фермента, где указанный микроорганизм представляет собой один или более микроорганизмов, выбранных из группы, состоящей из штамма, обладающего β-глюкуронидазной активностью, и штамма, обладающего арилсульфатазной активностью, а указанный фермент представляет собой один или более ферментов, выбранных из группы, состоящей из β-глюкуронидазы и арилсульфатазы.
6. Способ по любому из пп. 1, 2, 4 или 5, где указанный жидкий препарат также содержит мочу.
