Способ отбора доноров крови для получения плазмы с целью лечения пациентов с инфекционными заболеваниями и осложнениями после оперативных вмешательств, травм и ожогов

Изобретение относится к области медицины, в частности трансфузиологии, и результаты его будут востребованы в практической медицине. Способ касается отбора доноров для получения плазмы крови с целью лечения пациентов с инфекционными заболеваниями и осложнениями после оперативных вмешательств, травм и ожогов, путем исследования иммунологических показателей крови. Исследуют содержание бактерицидного белка, увеличивающего проницаемость клеточных мембран, и забор крови осуществляют у лиц, в плазме крови которых его концентрация составляет более 1,5 нг/мл у мужчин и более 1,0 нг/мл у женщин. Изобретение обеспечивает повышение эффективности лечения пациентов с инфекционными заболеваниями и осложнениями после оперативных вмешательств, травм и ожогов.

 

Изобретение относится к области медицины, в частности к трансфузиологии, и может быть использовано при отборе доноров с целью получения плазмы крови, эффективной при лечении пациентов с различными инфекционными заболеваниями, внутригоспитальной инфекцией и осложнениями после оперативных вмешательств, травм и ожогов.

Ранее, до 2010 г., в России проводился отбор доноров путем определения бактериальных антител в лечебном титре в плазме крови на широко распространенные в лечебных учреждениях инфекции:

- антистафилокковые;

- антиколибациллярные;

- антисинегнойные;

- антипротейные;

- антиклебсиеллезные (А.В.Чечеткин и соавт., Методические указания «Получение и клиническое применение иммунной плазмы в военно-медицинских учреждениях», СПб, ВМедА, 2008 г.).

С 2010 г., в связи с отсутствием диагностикумов для тестирования на ранее указанные инфекции, побудило искать новый подход для поиска естественных антибактериальных белков в плазме крови доноров, что крайне необходимо для оказания медицинской помощи и целевого применения плазмы определенной категории больных.

Известен способ получения вакцины на основе живых личинок нематод рода trichinella railliet (1895) для иммунизации животных и человека, применение молока животного, иммунизированного этой вакциной, в качестве средства для профилактики и лечения заболеваний иммунной системы, способ получения сыворотки из крови иммунизированных животных и способ профилактики и лечения заболеваний иммунной системы с помощью такой сыворотки (патент на изобретение RU №2506088).

Применение полииммунной плазмы целесообразно при верифицированной внутригоспитальной инфекции, ожоговой болезни, осложненной присоединившейся вторичной гнойной инфекции и в клинике внутренних болезней (тяжелое течение бактериальной пневмонии, септицемия, трофические язвы при сахарном диабете и пр.).

Целью изобретения является расширение арсенала средств и повышение эффективности лечения пациентов с инфекционными заболеваниями и осложнениями после оперативных вмешательств, травм и ожогов.

Цель данного изобретения достигается путем исследования иммунологических показателей крови, причем выявляют содержание бактерицидного белка, увеличивающего проницаемость мембран клеток возбудителей гемоконтактных инфекций; забор крови осуществляют у лиц, в плазме которых (по данному решению) он содержится в концентрации более 1,5 нг/мл у мужчин и более 1,0 нг/мл у женщин.

Антимикробные белки, увеличивающие проницаемость мембран клеток возбудителей гемоконтактных инфекций (GENERAL SUBJECT:BACTERICIDAL PERMEABILITY-INCREASING PROTEIN), имеют Мм=55 kDa, содержатся в первичных гранулах полиморфноядерных лейкоцитов и составляют от 0,5 до 1% общего белка нейтрофилов человека.

Способ реализуется следующим образом.

Проводят исследования иммунологических показателей крови доноров, выявляют содержание бактерицидного белка, увеличивающего проницаемость мембран клеток возбудителей гемоконтактных инфекций. Затем осуществляют забор крови у лиц, в плазме которых он содержится выше принятого порогового показателя.

В настоящее время бактерицидные белки, повышающие проницаемость клеток, представляют объект повышенного внимания широкого круга специалистов, в том числе рассматривающих такие соединения как альтернативу антибиотическим средствам и (или) усиливающих их действие. Учеными разрабатываются все новые и новые антибиотики, которые по сути являются производными старых, чтобы противостоять патогенным микроорганизмам на современном этапе достижений медицины (Garcia А.Е., Osapau G., Tran P.A.,Yuan J. Selsted ME Infect Immun / 2008 Dec. 76 (12): 5883-91). Естественно, бактерицидные белки, увеличивающие проницаемость мембран клеток возбудителей гемоконтактных инфекций, уступают современным антибиотикам по эффективности, но действуют они быстрее путем разрушения бактерий, а также потенцируют действие применяемых антибиотиков.

В 2012 г. ВОЗ описала устойчивые бактерии как «глобальную угрозу для здравоохранения, затрагивающую все страны мира», и эксперты согласны, что кризис только усугубляется.

Проницаемость биологических мембран - важнейшее свойство, заключающееся в их способности пропускать в клетку и из нее различные метаболиты, что имеет определяющее значение для осморегуляции и поддержании постоянства состава клетки, ее физико-химический гомеостаз.

Бактерицидный белок, увеличивающий проницаемость клеток, - это микробицидный белок, который присутсвует в азурофильных гранулах полиморфноядерных лейкоцитов, играет важную роль в генерации и проведении нервного импульса, в энергообеспечении клетки, сенсорных механизмах и др. процессах жизнедеятельности. К особенностям строения бактерицидного белка относится то, что он является осмотическим барьером между клеткой и внешней средой и подтверждает единство и взаимосвязь между структурой и функцией на молекулярном уровне и регулируется гормонами и биологически активными веществами (Гершанович В.Н. / Биологические мембраны. - М., 1973).

Данный белок связывает липополисахариды и быстро секретируется полиморфноядерными лейкоцитами в ответ на появление липополисахаридов или бактерий. Было доказано, что белок, увеличивающий проницаемость мембран, связывается с липополисахаридами с высокой аффинностью, индуцируя тем самым гибель бактерий, и ингибирует агрессивные эффекты липополисахаридов.

Лекарственные средства на основе данных антимикробных белков пока не созданы. Но, в то же время, показатели содержания антимикробных белков в плазме крови рассматриваются как индикатор наличия высокой иммунозащитной функции.

Б.В. Пинегин, А.С. Будихина в журнале «Иммунология», 2008, №5, указывают, что антимикробные белки являются компонентами иммунной системы и обеспечивают первую линию защиты макроорганизма от различных гемоконтактных патогенов.

1. Преимущества метода:

- время исследования - около 4 часов;

- минимальная измеряемая концентрация - 0,1 нг/мл;

- измеряемый диапазон - до 25 нг/мл;

- объем образца - 100 мкл;

- доступность диагностических тест-систем.

2. Принцип метода.

Основан на «сендвич-методе» твердофазного иммуноферментного анализа с применением диагностического набора Human BPI Elisa test KIT.

3. Подготовка образцов крови доноров к исследованию требует строжайшего выполнения всех рекомендаций методической инструкции - от разведения, применения требуемых пробирок до раскапывания исследуемого биологического материала.

Нами обследовано 88 кадровых доноров в возрасте 21-34 г., из которых 81 человек - мужского пола, 7 - женского.

Полученные образцы крови доноров немедленно дважды центрифугировали при +4°C, чтобы предотвратить контаминацию плазмы балластными лейкоцитами. Полученные образцы крови до исследования хранились в холодильнике при -70°C.

Исследование образцов крови доноров проводили через 24 ч после оттаивания.

Подготовка реагентов, проведение процедуры исследования выполняли в соответствии с инструкцией, прилагаемой к набору.

Из 81 обследованных мужчин у 12 выявлен белок, повышающий проницаемость клеток от 4,6 до 6,7 нг/мл - 14,8%, и у 1 женщины 3,1 нг/мл 1.4%.

Способ отбора доноров для получения плазмы крови с целью лечения пациентов с инфекционными заболеваниями и осложнениями после оперативных вмешательств, травм и ожогов путем исследования иммунологических показателей крови, отличающийся тем, что исследуют содержание бактерицидного белка, увеличивающего проницаемость клеточных мембран, и забор крови осуществляют у лиц, в плазме крови которых его концентрация составляет более 1,5 нг/мл у мужчин и более 1,0 нг/мл у женщин.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к применению пептида, состоящего из по меньшей мере 8 последовательных аминокислотных остатков последовательности, представленной в SEQ ID NO:3, для диагностики рассеянного склероза, что может быть использовано в медицине.

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для оценки угрозы нарушения энергетического обмена в фетоплацентарном барьере ворсинок плаценты.

Изобретение относится к области медицины и касается способа, тест-системы диагностики диабетической нефропатии. Сущность способа заключается в том, что в образце от субъекта определяют биомаркер, который представляет собой подобный антигену CD5.

Изобретение относится к области медицины, к клинико-биохимической лабораторной диагностике, а именно к методам определения модифицированных белков и предназначается для селективного количественного определения степени окисления фибриногена в клинических образцах плазмы крови по содержанию карбонильных групп в фибриновом сгустке.

Настоящее изобретение относится к биохимии, в частности к лигандам для аффинной хроматографии на основе различных доменов белка A (SpA) Staphylococcus. Лиганд содержит либо несколько доменов C, либо несколько доменов B, либо несколько доменов Z белка SpA.

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу отбора партий компонентов культивации, подлежащих применению при культивации клетки млекопитающего, экспрессирующей интересующий белок, когда при культивировании используют по меньшей мере два разных компонента, включающему следующие стадии: а) берут спектры разных партий первого компонента, полученные первым спектроскопическим способом, спектры второго компонента, полученные вторым отличным спектроскопическим способом, и выход интересующего белка из культивационного супернатанта, полученный при культивировании с использованием комбинаций данных разных партий первого и второго компонентов, б) идентифицируют связь слитых спектров этих двух различных спектроскопических методов после расчета счетов РСА спектров с выходом культивирования, в) берут спектр дополнительной партии первого компонента, полученный первым спектроскопическим способом, и спектр дополнительной партии второго компонента, полученный вторым спектроскопическим способом, г) выбирают комбинацию взятого первого компонента и взятого второго компонента, если предсказанный выход из культивационного супернатанта, основанный на связи слитых спектров после расчета счетов РСА спектров, идентифицированной в б), находится в пределах +/-10% среднего выхода, приведенного в а).

Настоящее изобретение относится к биотехнологии, конкретно к новым аллергенам собаки, и может быть использовано в медицине. Рекомбинантным путем получают аллерген Can f 4.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к модифицированному тамавидину, и может быть использовано для детекции связанной с биотином субстанции. Получают модифицированный биотин-связывающий белок на основе тамавидина с последовательностью SEQ ID NO: 2, который содержит до 7 мутаций и при этом остаток аспарагина в 115 положении заменен на цистеин.

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу прогноза риска дыхательной недостаточности у септического пациента. Сущность способа состоит в том, что проводят стадию измерения концентрации эндокана в образце крови, полученной от упомянутого септического пациента, и стадию сравнения концентрации эндокана с заданными пороговыми значениями, представляющими концентрации, измеренные в среднем у пациентов, у которых не развилась дыхательная недостаточность.
Изобретение относится к гепатологии и предназначено для прогнозирования ответа на противовирусную терапию при хроническом гепатите С у взрослых и детей. До начала лечения определяют уровень интерферона в плазмоцитоидных дендритных клетках крови и при его значении 136,7 пг/мл и более прогнозируют эффективность противовирусной терапии.

Изобретение относится к области медицины и касается способа диагностики генетической предрасположенности к риску развития ишемического инсульта у больных с фибрилляцией предсердий (ФП). Сущность способа заключается в том, что осуществляют анализ генов системы гемостаза: полиморфизма -455G>A гена FBG, полиморфизма 10976G>A гена FVII, полиморфизма -5Т>С гена GPIβα, полиморфизма 807С>Т гена GPIα. При этом присваивают 0%, при обнаружении GG полиморфизма -455G>A гена FBG, АА полиморфизма 10976G>А гена FVII, ТТ полиморфизма -5Т>С гена GPIβα, СС полиморфизма 807С>Т гена GPIα. Присваивают 50% при обнаружении GA полиморфизма -455G>A гена FBG, GA полиморфизма 10976G>A гена FVII, ТС полиморфизма -5Т>С гена GPIβα, СТ полиморфизма 807С>Т гена GPIα. Присваивают 100% при обнаружении АА полиморфизма -455G>A гена FBG, GG полиморфизма 10976G>А гена FVII, СС полиморфизма -5Т>С гена GPIβα, ТТ полиморфизма 807С>Т гена GPIα. Генетический риск развития ишемического инсульта при ФП рассчитывают по формуле: (a+b+c+d)/n, где: а - количество процентов, соответствующее генотипу полиморфизма -455G>A гена FBG, b - количество процентов, соответствующее генотипу полиморфизма 10976G>А гена FVII, с - количество процентов, соответствующее генотипу полиморфизма -5Т>С гена GPIβα, d - количество процентов, соответствующее генотипу полиморфизма 807С>Т гена GPIα, n - количество исследованных генотипов; риск оценивают как низкий при значении от 0 до 30%, средний - от 30 до 60%, высокий - от 60% и более. Предлагаемый способ позволяет выделить генетический риск развития ишемического инсульта при наличии у пациента ФП и повысить качество персонифицированной профилактики развития ишемического инсульта у данной группы больных. 5 ил., 5 табл. 2 пр.

Изобретение относится к области медицины, и касается способа прогнозирования эффективности монотерапии пероральным сахароснижающим препаратом метформином у больных сахарным диабетом 2 типа. Сущность способа заключается в том, что у больных сахарным диабетом 2 типа выделяют ДНК из периферической венозной крови с последующим проведением полимеразной цепной реакции (ПЦР) и проведением анализа на выявление полиморфизма А>С rs 622342 гена ОСТ1. При выявлении генотипа АА в участке rs 622342 гена ОСТ1 прогнозируют эффективность монотерапии метформином в качестве сахароснижающего препарата у больных сахарным диабетом 2 типа, а при выявления генотипа АС или СС в участке rs 622342 гена ОСТ1 прогнозируют неэффективность монотерапии метформином в качестве сахароснижающего препарата у данной категории больных. Испоотзование способа позволяет повысить точность и специфичность прогнозирования эффективности монотерапии пероральным сахароснижающим препаратом метформином у больных сахарным диабетом 2 типа. 2 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к гинекологии и гемостазиологии, и может быть использовано для оценки степени тяжести воспалительных заболеваний органов малого таза. Сущность способа: производят взятие венозной крови и подготовку образцов проб плазмы крови. Определяют количественные значения уровней фибриногена ФГ (г/л), растворимых фибрин-мономерных комплексов РФМК (мг/ 100 мл) и D-димеров (нг/мл). Анализируют полученные данные, рассчитывая с их учетом коэффициент K по формуле . При значении 4≤K≤6 - судят о легкой степени тяжести, при значении 6<K≤8 - средней степени тяжести, при значении K>8 - тяжелой степени тяжести. Изобретение позволяет повысить объективность клинико-лабораторной оценки степени тяжести воспалительных заболеваний органов малого таза во время выполнения скрининга пациенток, обеспечивает возможность выбора на основании полученных результатов места проведения дальнейшего лечения в условиях смотрового кабинета поликлиники, женской консультации или гинекологического стационара. 4 пр.

Настоящее изобретение относится к области микробиологии и касается способа определения таких характеристик, как типирование, потенциальная устойчивость по меньшей мере к одному антимикробному средству и фактора вирулентности, по меньшей мере, одного микроорганизма из образца. Представленный способ включает идентификацию указанного микроорганизма и определение характеристик. Определение характеристик осуществляют масс-спектрометрией типа MS/MS в режиме MRM, одновременно, в одном устройстве для масс-спектрометрии, с использованием белков, пептидов и/или метаболитов указанного микроорганизма в качестве маркеров характеристик. Изобретение позволяет быстро и с небольшими затратами определять характеристики микроорганизмов и может быть использовано в повседневной клинической практике. 1 н. и 26 з.п. ф-лы, 23 табл., 12 пр.

Группа изобретений относится к медицине и касается способа получения связывающего агента или смеси связывающих агентов, способных связываться с эпитопом, содержащимся в аминокислотной последовательности, соответствующей С-концевой части препро-вазопрессина, состоящей из аминокислот 146-163, но не содержащей аминокислоту 164, где указанный способ включает стадии получения связывающего агента с использованием формирующего агента; определения способности связывающего агента связываться с аминокислотной последовательностью длиной по меньшей мере 12 аминокислот, содержащейся в аминокислотной последовательности, соответствующей С-концевой части, но не содержащей аминокислоту 164 препро-вазопрессина; отбора связывающего агента из множества связывающих агентов. Группа изобретений также касается формирующего агента для получения связывающего агента или смеси связывающих агентов; применения связывающего агента для качественного или количественного детектирования препро-вазопрессина или его фрагментов в биологическом образце. Группа изобретений обеспечивает качественное или количественное детектирование препро-вазопрессина или его фрагментов в биологическом образце. 6 н. и 14 з.п. ф-лы, 1 пр., 5 ил., 2 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к новым аллергенам лошади, и может быть использовано в медицине для профилактического или терапевтического лечения или диагностики аллергии типа I на лошадей. Получают лошадиный аллерген, который представляет собой секретоглобин, имеющий молекулярную массу 15 кДа в невосстанавливающих условиях и содержащий первую пептидную цепь с молекулярной массой примерно 5 кДа и вторую пептидную цепь с молекулярной массой примерно 10 кДа, связанные друг с другом. Также получают рекомбинантную форму указанного аллергена. Изобретение позволяет получить рекомбинантным путем аллерген лошади с полностью установленной аминокислотной последовательностью. 12 н. и 1 з.п. ф-лы, 10 ил., 3 табл., 8 пр.

Изобретение относится к области медицины, конкретно к онкологии, и касается способов мониторинга эффективности противоопухолевого лечения немелкоклеточного рака легкого. Способ включает определение уровней экспрессии микроРНК-маркеров в периферической крови больного после хирургического лечения, причем определяют уровни микроРНК-19б, микроРНК-125б и сочетания микроРНК-125б/микроРНК-19б через 2 недели, 3 и 6 месяцев, 1 и 2 года после проведенного лечения. При получении линейной модели динамики изменения уровней экспрессии микроРНК, характеризующейся постепенным увеличением микроРНК-19б, снижением микроРНК-125б и сочетания микроРНК-125б/микроРНК-19б относительно исходных значений, определяют прогрессирование заболевания, а при получении квадратичной модели динамики изменения уровней экспрессии микроРНК, характеризующейся чередованием увеличения или снижения уровней экспрессии исследуемых микроРНК на снижение либо увеличение аналогичных показателей относительно исходных значений, определяют ремиссию заболевания. Изобретение обеспечивает повышение точности ранней диагностики прогрессирования немелкоклеточного рака легкого за счет проведения регулярного сравнительного анализа целевых профилей экспрессии микроРНК на этапах динамического наблюдения. 3 табл., 2 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к молекулярной фармакологии, и может быть использовано для получения меченых катионных дендримерных пептидов для внутриклеточной доставки нуклеиновых кислот (НК). Меченые катионные дендримерные пептиды представлены формулой: X-AC(Y)-NH2, где X является дендримерным катионным пептидом с аминокислотным составом, выбранным из группы, состоящей из (K)4(K)2K, (R)8(K)4(K)2K, (RRRKK)2KKK и (K8)(K4)(K2)K, где K представляет собой лизин; R представляет собой аргинин, А представляет собой аланин, С представляет собой цистеин, Y представляет собой присоединенный по меркаптогруппе цистеина флуоресцентный цианиновый краситель Су5. Использование данной конструкции меченых дендримерных пептидов, имеющих связывающий модуль для взаимодействия с НК, и сигнальный модуль, содержащий флуоресцентную метку - цианиновый краситель Су5, позволяет визуализировать распределения препарата по органам и тканям, обеспечивая трансфекционную активность, близкую к трансфекционной активности комплексов нуклеиновой кислоты с немеченым дендримерным пептидом. 6 ил., 1 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к области гастроэнтерологии и онкологии, и может быть использовано для прогнозирования риска развития аденокарциномы желудка. Сущность способа: проводят биохимическое определение содержания бета-аррестина-1 и оксида азота в крови; при концентрации в крови бета-аррестина-1 выше 0,5 нг/мл и оксида азота выше 0,5 мкг/мл делают вывод о риске развития аденокарциономы желудка. Изобретение обеспечивает прогнозирование развития ранних форм рака желудка. Изобретение обеспечивает снижение травматического воздействия на пациента. 1 табл.

Способ относится к области медицины, а именно к аллергологии в педиатрии, детской гастроэнтерологии, и может быть использован для диагностики аллергической энтеропатии, индуцированной белком коровьего молока у детей грудного возраста. Сущность способа заключается в определении в копрофильтратах у детей с подозрением на энтеропатию до начала элиминационной терапии зонулина, β-дефензина 2, эозинофильного катионного протеина. При повышении β-дефензин 2 более 34,8 нг/мл, зонулина более 1,59 нг/мл, эозинофильного катионного протеина более 455,57 нг/мл у пациента регистрируется непереносимость белков коровьего молока. Способ обеспечивает безопасную, неинвазивную и эффективную диагностику пищевой гиперчувствительности у детей любого возраста и позволяет своевременно определять тактику патогенетической терапии. 1 табл., 3 пр.
Наверх