Применение синтетических полисульфированных олигосахаридов в качестве средства для очистки раны


 


Владельцы патента RU 2601899:

ЛАБОРАТУАР УРГО (FR)

Настоящее изобретение относится к фармакологии и описывает средство для очистки ран, представляющее собой октасульфат сахарозы или его соль. Изобретение обеспечивает полное или частичное разрушение фибринозного матрикса в фазе очистки раневого процесса и может быть использовано, в частности, для изготовления повязок, предназначенных для очистки ран. 2 з.п. ф-лы, 3 пр.

 

Настоящее изобретение относится к применению по меньшей мере одного соединения, выбранного из синтетических полисульфированных олигосахаридов, имеющих от 1 до 4 звеньев монозы, и его солей и комплексов в качестве очищающего средства.

Более конкретно настоящее изобретение относится к применению по меньшей мере одного такого соединения в качестве средства для разрушения фибринозных матриксов, которые являются частью композиции фибринозной ткани. В частности, настоящее изобретение относится к получению композиции, предназначенной для применения в контексте вспомогательной очистки.

Заживление раны является естественным биологическим явлением, где ткани человека и животных способны к репарации локализованных повреждений посредством свойственных им процессов репарации и регенерации.

Естественное заживление раны происходит в три последовательные фазы, где каждая из этих фаз характеризуется специфичными клеточными активностями, которые вызывают протекание процесса репарации в соответствии с точными хронологическими последовательностями: фаза очистки, фаза грануляции и фаза эпителизации.

Сразу после повреждения организм реагирует посредством вовлечения сосудистых и воспалительных явлений с целью предотвращения какого-либо риска кровотечения и защиты раны против рисков инфекции.

Эти явления приводят к формированию матрикса на основе фибрина, который вносит вклад в остановку кровотечения. Этот матрикс также обеспечивает грубое, временное закрытие раны.

С целью инициации следующей фазы грануляции организм параллельно организует разрушение этого фибринозного матрикса, чтобы освободить пространство для внеклеточного матрикса, синтезируемого фибробластами, которые являются основными участниками фазы грануляции. В основном, именно эта фаза является фазой удаления фибринозного матрикса и различных видов продуктов распада клеток, присутствующих в ране, что подразумевают под термином "очистка".

Фаза очистки является существенной в процессе заживления. Его осуществление и скорость, с которой он происходит, являются решающими для успеха и скорости процесса заживления.

Однако способности к естественной очистке могут быть недостаточными, когда повреждение является большим, или когда пациент страдает сопутствующими расстройствами, такими как венозные расстройства или диабет. Следовательно, в таких случаях наблюдается фаза очистки, которая значительно пролонгирована, приводя к хроническим ранам, которые трудно лечить, например, к язвам голени.

Раны делятся на два основных типа:

- Раны, которые имеют бляшки черных тканей варьирующей твердости, обычно обозначаемых термином "некротические ткани";

- Раны, ткани которых являются мягкими и желтоватыми, обычно обозначаемые термином "фибринозная ткань" или "желтый фибрин".

В случае ран, для которых естественный процесс очистки недостаточен, таких как хронические раны, необходимо удалить некротические и/или фибринозные ткани. Удаление этих некротических и фибринозных тканей, которое может быть достигнуто различными методами, обычно обозначают термином "вспомогательная очистка", в противоположность естественной очистке.

В зависимости от используемого метода вспомогательная очистка может быть описана как механическая или хирургическая очистка, ферментативная очистка, аутолитическая очистка или биологическая очистка.

Цель вспомогательной очистки состоит в очистке раны путем удаления некротических и/или фибринозных тканей, вызывающих риски инфекции и возможных источников боли или неприятных запахов, сохраняя при этом максимальное количество здоровых тканей, присутствующих в ране.

Однако ни один из методов очистки, используемых в настоящее время, не является оптимальным, и все эти методы обладают многими недостатками.

Хирургическая или механическая очистка является быстрым методом, который состоит в обрезании некротических и/или фибринозных тканей, либо с использованием скальпеля, пинцета, ножниц или кюретки Брока, либо с помощью сложной аппаратуры, в которой используют струи воды под давлением, либо лазерной эксцизии. Этот метод осуществляют на постели пациента или в операционной в зависимости от тяжести раны.

Однако этот метод часто является болезненным и может привести к кровотечению, а иногда даже к кровопотере. В таком случае он представляет дополнительную травму для пациента. Он также обычно требует предварительного обезболивающего медикаментозного лечения, что увеличивает время обработки.

Ферментативную очистку осуществляют с помощью протеолитических ферментов, таких как стрептокиназа, трипсин или коллагеназа.

Однако использование этих ферментов далеко не оптимально. Действительно, эти ферменты могут быть инактивированы локальным применением антисептиков, и их активность может быть ограничена сывороточными ингибиторами, которые присутствуют в экссудатах из раны. Кроме того, некоторые из этих ферментов обладают очень коротким периодом полувыведения и должны часто восполняться. Эти ферменты, кроме того, могут вызвать болезненные ощущения во время их применения, реакции сенсибилизации или аллергию, либо могут даже создать локальную эритему.

В случае биологической очистки, также называемой личинкотерапией, разрушение некротических и/или фибринозных тканей достигается с помощью личинок мух, которые питаются исключительно на мертвых тканях.

Этот метод также обладает несколькими недостатками, такими как интенсивный локальный зуд, некоторая степень воспаления и локальное ощущение жжения. Кроме того, этот метод противопоказан пациентам с нарушениями свертывания крови, либо раны которых слабо васкуляризированы или находятся вблизи жизненно важных органов или крупных сосудов. Наконец, хотя оно очень эффективно, использование биологической очистки также сталкивается с трудностями или психологическим ингибированием для пациента, который видит или ощущает присутствие личинок в его ране.

Аутолитическая очистка состоит в наложении на рану абсорбирующих повязок на основе гелеобразующих волокон, которые за счет создания влажной окружающей среды стимулируют естественную очищающую роль макрофагов и многоядерных нейтрофилов, при этом давая возможность смягчения фибринозной ткани и абсорбции продуктов распада клеток. Такая повязка на основе карбоксиметилцеллюлозы, например, продается фирмой CONVATEC под названием АКВАЦЕЛЛ®.

Однако данное действие является медленным и недостаточным для удаления больших количеств фибринозной ткани. Поэтому необходимо дополнять аутолитическую очистку другим методом, которым очень часто является механическая очистка.

Поскольку доступны соединения, которые могут ускорить или стимулировать другие фазы процесса заживления, было бы, следовательно, желательно иметь соединения или смеси соединений, которые свободны от веществ, вызывающих аллергию, таких как ферменты, которые дали бы возможность разрушить некротические и/или фибринозные ткани таким образом, чтобы оптимизировать данную фазу очистки.

Применение таких соединений действительно дало бы возможность:

- с одной стороны, не обращаться к методам, которые являются травмирующими физически или психологически, таким как механическая очистка или личинкотерапия; и

- с другой стороны, оптимизировать аутолитическую очистку за счет включения этих соединений в абсорбирующие повязки, таким образом, обеспечивая препарат, который дает возможность разрушения некротических и/или фибринозных тканей и абсорбции их в одной стадии.

В данном контексте цель данного изобретения состоит в решении новой технической задачи, состоящей в обеспечении таких соединений, которые дают возможность очистки раны путем разрушения фибринозных матриксов, которые составляют некротические ткани и/или фибринозные ткани.

Совершенно удивительно и неожиданно было обнаружено, что синтетические полисульфированные олигосахариды, имеющие от 1 до 4 моносахаридных звеньев, их соли и комплексы и, в частности, калиевая соль октасульфата сахарозы дают возможность разрушать фибринозные матриксы и могут быть, следовательно, полезны в качестве очищающих средств.

Таким образом, в соответствии с первым аспектом настоящее изобретение относится к композиции, содержащей по меньшей мере одно соединение, выбранное из синтетических полисульфированных олигосахаридов, имеющих от 1 до 4 моносахаридных звеньев, их солей и комплексов, для применения в качестве средства для очистки раны.

Олигосахариды, которые можно использовать в контексте настоящего изобретения, представляют собой синтетические полимеры, образованные из моносахаридных звеньев в количестве от 1 до 4, и предпочтительно из 1 или 2 моносахаридных звеньев, как правило, связанных друг с другом альфа- или бета-гликозидной связью. Иными словами, они представляют собой моно-, ди-, три- или тетрасахариды и предпочтительно моно- или дисахариды.

Не существует конкретных ограничений относительно природы моносахаридных звеньев этих полисахаридов. Предпочтительно они представляют собой пентозы или гексозы.

В качестве примеров моносахарида можно упомянуть глюкозу, галактозу или маннозу.

В качестве примеров дисахарида можно упомянуть мальтозу, лактозу, сахарозу или трегалозу.

В качестве примера трисахарида можно упомянуть мелезитозу.

В качестве примера тетрасахарида можно упомянуть стахиозу.

Предпочтительно олигосахарид представляет собой дисахарид, более предпочтительно сахарозу.

Выражение "полисульфированный олигосахарид" в данной заявке обозначает олигосахарид, в котором по меньшей мере две и предпочтительно все гидроксильные группы каждого моносахарида замещены сульфатной группой.

Предпочтительно полисульфированный олигосахарид представляет собой октасульфат сахарозы.

Полисульфированные олигосахариды, используемые в контексте настоящего изобретения, могут находиться в форме солей или комплексов.

В качестве примеров солей можно упомянуть соли щелочных металлов, такие как соль натрия, кальция или калия; соль серебра или соль аминокислоты.

В качестве примеров комплексов можно упомянуть гидроксиалюминиевые комплексы.

В контексте настоящего изобретения соединениями, которые наиболее предпочтительны, являются приведенные ниже:

- калиевая соль октасульфатированной сахарозы;

- соль серебра октасульфатированной сахарозы;

- гидроксиалюминиевый комплекс октасульфата сахарозы, обычно называемый сукральфат.

Калиевая соль октасульфата сахарозы известна в течение 25 лет для лечения ран во время фазы грануляции благодаря ее действию на фибробласты. Это действие описано, например, в заявках на патент ЕР 230023, WO 89/05645 или WO 98/22114. Как указано в этих документах, данное соединение применяют после проведения вспомогательной очистки раны и, следовательно, после удаления некротических и/или фибринозных тканей (см. ЕР 230023, с.8 строки 10-15 и пример 18; с.33 строки 28-30; см. WO 89/05645, с.25 строки 8 и 9; и с.16 строки 25-28; см. WO 98/22114, с.17 строки 18-20). Поэтому ее используют на чистой, очищенной ране.

В международной заявке на патент WO 89/05645 (см. с.7 строки 13-24) указано, что полисульфированные полисахариды, такие как сукральфат, являются ингибиторами протеаз, а именно гиалуронидаз, которые представляют собой ферменты, способные к расщеплению гиалуроновой кислоты и гликозаминогликанов.

Поэтому, даже более удивительно, что эти соединения могут находить применение при очистке, поскольку протеазы являются ферментами, которые во время естественной фазы очистки могут стимулировать разрушение поврежденных тканей. Их ингибирование, следовательно, противоречит хорошей очистке раны.

Хотя механизм, посредством которого действуют соединения, применяемые в контексте настоящего изобретения, в настоящее время неизвестен, продемонстрировано, что они способны к разрушению фибринозного матрикса, восстановленного in vitro, и данное свойство проверено на образцах, взятых из фибринозных тканей in vivo.

Как правило, эти соединения можно использовать отдельно или в виде смеси двух или более чем двух из них, либо в комбинации с одним или более чем одним другим активным веществом для индукции или ускорения заживления, или которое может оказывать благоприятное действие при лечении раны. Предпочтительно эти соединения применяют с активными веществами, которые представляют больший интерес во время фазы очистки. Среди этих активных веществ можно упомянуть в качестве примеров, в частности:

- бактерицидные или бактериостатические агенты (хлоргексидин, соли или комплексы серебра, соли цинка или соли меди, метронидазол, неомицин) для предупреждения или лечения рисков инфекций, которые находятся среди возможных опасных осложнений при некротизированных тканях;

- местные анестетики (лидокаин);

противовоспалительные агенты, такие как нестероидные противовоспалительные лекарственные средства (НСПВЛ) (ибупрофен, кетопрофен, диклофенак), ингибиторы циклооксигеназы-2 (целекоксиб, рофекоксиб) для облегчения боли, которая часто сопутствует этим ранам;

- кортикоиды.

Конечно, соединения, применяемые в контексте настоящего изобретения, можно также применять с одним или более чем одним соединением, которое известно как обладающее действием в фазе очистки, например:

- ферменты (которые, следовательно, было бы возможно применять при более низких концентрациях и избегать проблемы с их сенсибилизацией);

- мочевина.

Соединения, применяемые в контексте настоящего изобретения, можно применять одновременно или последовательно, с другим активным веществом во время фазы очистки в зависимости от природы (инфекции, уровня некроза, болезненной раны) или развития (уровня фибринозной ткани) раны, подлежащей очистке.

В контексте их применения в качестве очищающих средств соединения, применяемые в контексте настоящего изобретения, применяют в фармацевтической композиции, например, геле, растворе, эмульсии, креме, гранулах или капсулах различного размера в диапазоне от нано- или микрометра до миллиметра, которые дадут возможность их нанесения непосредственно на рану. Если их применяют в виде смеси двух или более чем двух из них или в комбинации с одним или более чем одним другим активным веществом, эти соединения можно включать в одну и ту же фармацевтическую композицию или в отдельные фармацевтические композиции.

Альтернативно и предпочтительно соединения, применяемые в контексте настоящего изобретения, или содержащая их фармацевтическая композиция интегрированы в повязку.

"Повязка" в данной заявке означает все типы повязок, используемых для лечения ран, and preferably абсорбирующих повязок, поскольку раны, подлежащие обработке во время фазы очистки, часто являются весьма экссудативными.

Для простоты выражение "очищающее средство в соответствии с изобретением" далее в данной заявке используют для обозначения любого соединения или смеси соединений, выбранных из олигосахаридов сульфатов, описанных выше, и применение которых заявлено в данной заявке.

Очищающее средство в соответствии с изобретением или содержащую его фармацевтическую композицию можно включать в любой элемент структуры повязки.

Предпочтительно и в целях стимуляции быстрого действия, данное соединение (или содержащую его фармацевтическую композицию) включают в слой повязки, который вступает в контакт с раной, или наносят на поверхность повязку, которая находится в контакте с раной.

Такие методы нанесения хорошо известны специалистам в данной области техники, и некоторые, например, описаны в заявке на патент WO 2006/007844.

Предпочтительно очищающее средство в соответствии с изобретением (или содержащую его фармацевтическую композицию) можно, таким образом, наносить непрерывно или прерывисто на поверхность, которая предназначена для вступления в контакт с раной:

- либо в жидкой форме, например, путем выпаривания содержащего его раствора или суспензии;

- либо в твердой форме, например, путем просеивания содержащего его порошка.

Слой поверхности, вступающий в контакт с раной, может, например, состоять из абсорбирующего материала, такого как абсорбирующая гидрофильная полиуретановая пена; текстильный материал, такой как компресс, например, нетканый, пленочный, клеящий материал, абсорбирующий или не абсорбирующий; прилипающая или не прилипающая пограничная структура.

Как правило, фармацевтическая форма или структура повязки адаптирована к получению конкретного профиля высвобождения, быстрого или замедленного, в зависимости от потребностей, очищающего средства в соответствии с изобретением.

Конечно, количество очищающего средства в соответствии с изобретением, применяемое в фармацевтической композиции или в повязке, адаптировано в отношении необходимой кинетики, так и особых ограничений, связанных с его природой, растворимостью, термостойкостью и т.д.

Таким образом, для применения в фармацевтической композиции очищающее средство в соответствии с изобретением можно включать в количестве от 0,1 до 50 масс.% относительно суммарной массы композиции.

В контексте его применения в элементе повязки очищающее средство в соответствии с изобретением включают в количестве, таком, чтобы количество данного очищающего средства, высвобождаемое в экссудатах из раны, составляло от 0,001 г/л до 50 г/л и предпочтительно от 0,001 до 10 г/л. n

В предпочтительной форме осуществления очищающее средство в соответствии с изобретением включают в абсорбирующую повязку на основе гелеобразующих волокон, например, препарата АКВАЦЕЛЛ®, продаваемого фирмой CONVATEC. Это, таким образом, оптимизирует очищающий порошок данного типа препарата, который уже применяют в контексте аутолитической очистки.

В соответствии со следующим предпочтительным вариантом очищающее средство в соответствии с изобретением включают в повязку, состоящую из нетканого материала на основе сверхвпитывающих волокон, которые образуют гель при контакте с экссудатами раны. Такие волокна имеются в продаже, например, от фирмы TOYOBO Со Ltd под названием LANSEAL® F.

С целью усиления целостности этих нетканых волокон после абсорбции эти сверхвпитывающие волокна можно объединять, например, путем сшивания или термического связывания с термически связывающими волокнами, такими как двухкомпонентные волокна, состоящие из полиэфирной сердцевины и полиэтиленовой оболочки.

Нетканые повязки, которые можно использовать в данном контексте, описаны, например, в международной заявке на патент WO 2007/085391.

Очень часто во время наложения этих повязок медицинский персонал удерживает их на месте с помощью бинтов или покрывает их вторичным элементом, таким как вторая абсорбирующая повязка или даже тугая повязка. Поэтому полезно, если повязка остается фиксированной на ране, чтобы руки медицинского персонала были свободны от наложения этих вторичных элементов.

В контексте настоящего изобретения, таким образом, предпочтительно использовать нетканый материал, такой как вышеупомянутые материалы, в котором поверхность, вступающую в контакт с раной, покрывают не сплошным слоем клея. Этот клей может, например, находиться в форме волокон клеев, перфорированного клеящего слоя, прерывистого слоя клея в форме полосок или нити, либо любой другой прерывистой геометрической схемы.

Как правило, для этой цели можно использовать любой тип клея, обычно используемого в повязках.

Чтобы не оказывать вредного воздействия на здоровые ткани или края раны, в частности, при снятии повязки, предпочтителен клей, который не обладает свойством приклеивания к коже без приклеивания к ране.

В качестве примера такого клея можно упомянуть клеи на основе эластомеров силикона или полиуретана, такие как гели силикона или полиуретана и гидроколлоидные клеи.

Такие гидроколлоидные клеи состоят из эластомерного матрикса на основе одного или более чем одного эластомера, выбранного из блок-сополимеров поли(стирол - олефин - стирол), в комбинации с одним или более чем одним соединением, выбранным из пластификаторов, таких как минеральные масла, смолы, повышающие клейкость, и при необходимости антиоксидантами, где в этот матрикс включено предпочтительно небольшое количество (от 3 до 20 масс.%) гидроколлоида, например, натриевой соли карбоксиметилцеллюлозы или сверхвпитывающих полимеров, таких как продукты, продаваемые под названием LUQUASORB® фирмой BASF.

Препарат этих гидроколлоидных клеев хорошо известен специалистам в данной области техники и описан, например, в заявках на патенты FR 2392076 и FR 2495473.

Использование нити клея на нетканом материале особенно предпочтительно дает возможность уменьшить или избежать риска вступления мелких волокон текстильного материала в контакт с раной и прикрепиться к тканям, вызывая, таким образом, боль во время снятия или даже представляя препятствие процессу заживления раны. Кроме того, это обеспечивает лучший контроль тока жидкости в текстильном материале или на нем и может уменьшить или устранить риски "блокирования геля" в результате использования сверхвпитывающих волокон, которые в действительности ограничивают абсорбирующую способность нетканого материала.

В соответствии с предпочтительной формой осуществления настоящего изобретения очищающее средство в соответствии с изобретением включают в этот клей при концентрации, совместимой с его растворимостью и термостойкостью.

На основании этих критериев очищающее средство в соответствии с изобретением предпочтительно используют в количестве от 1 до 15 масс.% и более предпочтительно от 5 до 10 масс.% относительно суммарной массы клея.

При желании повысить абсорбцию данной нетканой повязки можно комбинированием ее с дополнительным абсорбирующим слоем, и предпочтительно этот абсорбирующий слой не становится гелем, как, например, в частности, абсорбирующая гидрофильная пена, предпочтительно гидрофильная полиуретановая пена, имеющая более высокую абсорбирующую способность, чем нетканый материал.

Такие пены и способ их изготовления, в частности, из смесей на основе форполимера, воды, сурфактанта и т.д., хорошо известны специалистам в данной области техники и описаны, например, в приведенных ниже патентных документах: WO 96/16099, WO 94/29361, WO 93/04101, ЕР 420515, ЕР 392788, ЕР 299122 и WO 2004/074343.

Нетканый материал и пену объединяют с помощью методов, которые хорошо известны специалистам в данной области техники, например, путем горячего каландрования с использованием порошка термоклея на основе полимеров TPU (уретанового термопластика)/поликапролактона. Этот метод обычно используют для связывания вместе нетканых материалов, которые предназначены для рынка медицинских изделий.

Наконец, данную пену или нетканый материал (где последний используют один) можно покрыть подложкой, чтобы защитить рану от внешней среды. Эта подложка может иметь больший размер, чем другие слои, и ее можно сделать клейкой непрерывно или прерывисто на лицевой стороне, вступающей в контакт с раной, чтобы оптимизировать удерживание повязки на месте во время применения, в частности, если рана локализована на областях тела, которые являются не плоскими.

Эта подложка и ее клей предпочтительно непроницаемы для жидкостей, но высоко проницаемы для водяного пара, чтобы дать возможность оптимального удаления экссудатов, абсорбируемых повязкой, и избежать проблем мацерации.

Подложки данного вида хорошо известны специалистам в данной области техники и состоят, например, из пленок, которые могут дышать и являются непроницаемыми, таких как полиуретановые пленки, комплексы пена/пленка или нетканый материал/пленка.

В соответствии с другим аспектом настоящее изобретение относится к способу лечения ран, который включает применение композиции в соответствии с изобретением, содержащей по меньшей мере одно соединение, выбранное из синтетических полисульфированных олигосахаридов, имеющих от 1 до 4 моносахаридных звеньев, их солей и комплексов.

В контексте данного способа лечения эту композицию наносят на рану любыми подходящими средствами и, в частности, посредством повязки, такой как описано выше.

Активность очищающего средства в соответствии с изобретением продемонстрирована в различных условиях:

- с одной стороны, на моделях фибринозных матриксов, полученных in vitro;

и

- с другой стороны, на фибринозной ткани, взятой из ран.

Тесты, которые были проведены и которые подробно описаны ниже, продемонстрировали способность данного соединения к разрушению фибринозных матриксов и фибринозной ткани. Эти тесты также продемонстрировали в модели in vitro способность повязки разрушать фибринозный матрикс, где эта повязка применима в контексте аутолитической очистки и состоит из нетканого материала на основе гелеобразующих волокон, на поверхности которого, предназначенной для вступления в контакт с раной, находится нить гидроколлоидного клея, включающего очищающее средство в соответствии с изобретением.

Полученные результаты показали:

- с одной стороны, преимущество очищающего средства в соответствии с изобретением в контексте очистки раны; и

- с другой стороны, преимущество применения очищающего средства в соответствии с изобретением в контексте аутолитической очистки, где его включение в абсорбирующую повязку, обычно используемую в данном методе, дает возможность получить оптимальное изделие, которое объединяет как свойства абсорбции продуктов распада клеток, так и действие на разрушение фибринозной ткани.

Пример 1: Демонстрация эффекта калиевой соли октасульфата сахарозы на разрушение фибринозного матрикса. полученного in vitro

1. Получение фибринозных матриксов in vitro

Фибринозные матриксы были получены в соответствии с протоколом Brown, описанным в книге "Fibroblast migration in fibrin gel matrices" Am J. Pathol, 1993, 142: 273-283.

Используемые компоненты и методы являются такими, как описано ниже: Нижеописанное растворяли при 37°С:

- 5 мл водного раствора, содержащего 50 миллимоль ГЭПЭС (каталог Sigma-Aldrich),

-15 мг фибриногена плазмы человека (каталог Sigma-Aldrich),

- 5 миллимоль СаС1 г.

К приготовленному таким образом раствору добавляли 50 мкл тромбина, 100 NIH плазмы человека (каталог Sigma-Aldrich).

Реакционную смесь перемешивали, помещали в 15 мл пробирку (или в чашку Петри диаметром 60 мм), а затем оставляли для инкубации при 37°С.

В течение первых 24 часов инкубации при 37°С наблюдали появление фибринозного матрикса, который примерно имеет внешний вид геля.

После 24 часов наблюдение этого фибринозного матрикса под микроскопом показало образование гомогенной волокнистой сети.

2. Демонстрация эффекта калиевой соли октасульфата сахарозы на разрушение фибринозного матрикса

Через 24 ч после начала формирования фибринозного матрикса в вышеупомянутой 15 мл пробирке раствор калиевой соли октасульфата сахарозы добавляли в количестве 1 объема раствора этого соединения к 5 объемам смеси фибриноген/тромбин, используемой для получения фибринозного матрикса.

Параллельно готовили контрольный раствор, не содержащий тестируемое соединение, с фосфатно-солевым буферным раствором (ФСБ).

Мониторинг разрушения фибринозного матрикса проводили визуально в течение следующих 24 и 48 часов.

Результаты наблюдений классифицировали на 3 уровня:

- Нет разрушения: матрикс остается неизменным.

- Частичное разрушение: разрыхление матрикса.

- Полное разрушение: матрикс исчезает.

3. Определение ПРФ:

С целью количественного определения и проверки, что проведенные наблюдения действительно соответствуют разрушению фибринозного матрикса, продукты распада фибрина (ПРФ) определяли через 24 часа или 48 часов после добавления растворов тестируемого соединения.

Это определение проводили в соответствии с общепринятым методом, используя аналитический набор для ПРФ плазмы со стандартом 00540, изготавливаемый фирмой Diagnostica Stago.

Таким образом, 20 мкл супернатанта отбирали из 15 мл пробирки и помещали его в центр красного круга чашки аналитического набора ПРФ. Добавляли 20 мкл суспензии латексных частиц. После перемешивания проводили анализ.

Путем корреляции визуальных результатов и измерений ПРФ полученные результаты определяли количественно:

- Если значение ПРФ, выраженное в мкг/мл, ниже 5, разрушения фибринозного матрикса нет.

- Если значение ПРФ, выраженное в мкг/мл, составляет от 5 до 20, есть частичное разрушение фибринозного матрикса.

- Если значение ПРФ, выраженное в мкг/мл, выше 20, есть полное разрушение фибринозного матрикса, который исчезает.

4. Тесты с калиевой солью октасульфата сахарозы:

Водный раствор калиевой соли октасульфата сахарозы готовили при 10 г/л.

Этот раствор тестировали в соответствии с протоколом, описанным выше, и ПРФ измеряли через 48 часов после добавления раствора к фибринозному матриксу.

Чтобы оценить релевантность результатов, раствор ФСБ тестировали в качестве отрицательного контроля, а в качестве положительного контроля тестировали препарат Accuzyme®, который содержит папаин в качестве протеолитического фермента вместе с мочевиной, который применяют в контексте ферментативной очистки.

Путем измерения ПРФ были получены приведенные ниже результаты:

- ФСБ: ниже 5 мкг/мл

- Accuzyme®: выше 20 мкг/мл

- Раствор калиевой соли октасульфата сахарозы 10 г/л: от 5 до 20 мкг/мл. Эти результаты продемонстрировали эффективность калиевой соли октасульфата сахарозы, которая приводит к частичному разрушению фибринозного матрикса.

Пример 2: Демонстрация эффекта калиевой соли октасульфата сахарозы на фибринозной ткани, удаленной in vivo

Такой же раствор калиевой соли октасульфата сахарозы тестировали на фибринозной ткани, удаленной in vivo.

Для этого теста образец фибринозной ткани из язвы голени венозного происхождения 5 мм2 помещали в 15 мл пробирку, поддерживаемую при 37°C.

Через 24 часа 1 мл раствора калиевой соли октасульфата сахарозы помещали на этот образец.

Опять же, готовили отрицательный контроль с ФСБ и положительный контроль с Accuzyme®.

ПРФ оценивали через 48 часов после введения активного вещества или контроля.

Этот эксперимент повторяли на 5 образцах фибринозных тканей, полученных от одного и того же пациента.

Таким образом, было обнаружено, что калиевая соль октасульфата сахарозы привела в данном тесте к полному разрушению фибринозного матрикса, следовательно, демонстрируя ее эффективность.

Измерение ПРФ подтвердило этот результат, где измеренные значения приведены ниже:

- Accuzyme®: выше 20 мкг/мл

- ФСБ: ниже 5 мкг/мл

Калиевая соль октасульфата сахарозы: выше 20 мкг/мл

Таким образом, эти результаты подтверждают на фибринозной ткани, взятой in vivo, результаты, полученные на модели in vitro, где измеренный уровень эффективности является лучшим, чем на модели фибринозного матрикса in vitro.

Пример 3: Демонстрация эффекта калиевой соли октасульфата сахарозы, включенного в абсорбирующую повязку, на разрушение фибринозного матрикса, полученного in vitro

1. Получение абсорбирующей повязки, содержащей калиевую соль октасульфата сахарозы

Используя термическое связывание, получали нетканый материал 180 г/м2, который можно использовать в качестве абсорбирующей повязки в контексте аутолитической очистки, с помощью сверхвпитывающих волокон LANSEAL®F, продаваемых фирмой TOYOBOCOLTD, и из двухкомпонентных термически связанных волокон полиэфира/полиэтилена в отношении 70% (сверхвпитывающие волокна)/30% (термически связанные волокна).

Кроме того, готовили гидроколлоидный клей, содержащий калиевую соль октасульфата сахарозы, путем смешивания в смесителе MEL G-40.

Композиция этого клея, выраженная в процентах по массе относительно суммарной массы клея, была такой, как описано ниже:

- Минеральное масло, продаваемое фирмой Shell под названием Ondina®917: 32,8%

- Натриевая соль карбоксиметилцеллюлозы (гидроколлоид), продаваемая фирмой AQUALON под названием CMC Blanose®7H4XF: 14%

- Калиевая соль октасульфата сахарозы, продаваемая фирмой EUTICALS: 7,5%

- Блок-сополимер поли(стирол - этилен - бутилен) (эластомер), продаваемый фирмой KRATON под названием KRATON® G 1654: 6%

- Антиоксидант, продаваемый под названием IRGANOX® 1010 фирмой CIBA SPECIALTY CHEMICALS: 0,12%

Сополимер соли 2-метил-2[(1-оксо-2-пропенил)амино]-1-пропансульфоновой кислоты и 2-гидроксиэтилового эфира пропеновой кислоты (высаливающий агент), продаваемый фирмой SEPPIC под названием SEPINOV® ЕМТ10: 5%

- Смола, повышающая клейкость, продаваемая фирмой EXXON CHEMICALS под названием ESCOREZ® 5380: 35%.

Различные ингредиенты добавляли при температуре от 100 до 110°C при перемешивании, чтобы получить гомогенную смесь.

Более точно, сначала добавляли минеральное масло, гидроколлоид, калиевую соль октасульфата сахарозы и эластомер, а затем антиоксидант и высаливающий агент, и, наконец, смолу, повышающую клейкость.

Этим клеем прерывисто покрывали конфигурацию в форме нити на полученном ранее нетканом материале.

2. Тесты на повязках на модели фибринозного матрикса in vitro

Затем сравнивали повязку, содержащую калиевую соль октасульфата сахарозы, и аутолитическую повязку, продаваемую фирмой CONVATEC под названием АКВАЦЕЛЛ®.

Для этой цели фибринозные матриксы готовили в чашках Петри диаметром 60 мм, следуя вышеописанному протоколу.

После 24 часов образец диаметром 20 мм каждой из 2 повязок, описанных выше, помещали при комнатной температуре на фибринозный матрикс.

Повязки удаляли через 24 часа после помещения, и фибринозный матрикс наблюдали визуально.

Было обнаружено, что в фибринозном матриксе образовывалась более или менее выраженная впадина под областью, соответствующей образцу повязки, содержащей калиевую соль октасульфата сахарозы. Напротив, фибринозный матрикс оставался интактным для образца препарата АКВАЦЕЛЛ®.

Данный эксперимент, таким образом, подтвердил эффективность калиевой соли октасульфата сахарозы для разрушения фибринозных матриксов и преимущество его включения в повязку, применимую в контексте аутолитической очистки.

1. Средство для очистки ран, представляющее собой октасульфат сахарозы или его соль.

2. Средство по п. 1, характеризующееся тем, что указанная соль выбрана из:
- калиевой соли октасульфата сахарозы;
- соли серебра октасульфата сахарозы;
- сукральфата.

3. Средство по любому из пп. 1, 2, характеризующееся тем, что его применяют в фармацевтической композиции, например, геле, растворе, эмульсии, креме, гранулах или капсулах, дающих возможность нанесения непосредственно на рану, предпочтительно в количестве от 0,1 до 50 масс.% относительно суммарной массы композиции.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области медицины, а именно к средствам, обладающим антимикробным, сорбционным, обезболивающим и ранозаживляющим действием на местные гнойно-воспалительные процессы мягких тканей и слизистых оболочек, используемым в хирургии, дерматологии, акушерстве и гинекологии, оториноларингологии.

Изобретение относится к фармацевтической композиции в форме эмульсии вода в масле для лечения предожоговых состояний или ожогов кожи. Указанная композиция содержит по меньшей мере 60% воды, от 4% до 15% цетеарилоктаноата, от 2% до 5% пчелиного воска, от 0,1% до 5% декспантенола, от 2% до 5% полидиметилсилоксана, по весу относительно общего веса композиции, а также растительное масло и другие фармацевтически приемлемые наполнители.

Изобретение относится к способу получения биоцидного средства в форме раствора фурацилина, заключающемуся в активировании 90 мл раствора 1:5000 препарата с 1 г лимонной кислоты и коллоидными ионами серебра в объеме 10 мл с концентрацией 0,5-1,0 мг/мл.
Изобретение относится к области медицины и касается способа получения вещества для разрушения микроциркуляторного русла удаляемого кожного образования. Сущность способа заключается в том, что в стеклянную тару вносят соль бензилпенициллина, выбранную из расчета 1…2 млн ЕД и 80-90 мг пластифицированного поливинилхлорида, доводят объем 60-65%-ным раствором серной кислоты до 10 мл, а после удаления деструктированного поливинилхлорида в раствор дополнительно вводят 5…10 мг прополиса, доводят общий объем конечного продукта 60-65%-ным раствором серной кислоты до 10-15 мл, плотно укупоривают стеклянную тару, смесь выдерживают в темноте при температуре 20…25°C до полного растворения прополиса.

Изобретение относится к медицине, а именно к физиотерапии и дерматовенерологии, и может быть использовано для лечения гипертрофических или келоидных рубцов. Для этого предварительно на рубцовую ткань наносят коньюгированный препарат гиалуронидазы с гиалуронидазной активностью 3000 ME.

Изобретение относится к медицине, а именно к хирургической стоматологии, и может быть использовано для локальной иммунокоррекции при лечении осложненных переломов нижней челюсти у пациента.

Изобретение относится к лечению кожных ран млекопитающих. Способ включает забор крови у млекопитающего и приготовление необходимого объема тромбоцитраной аутоплазмы.

Изобретение относится к медицине, а именно к детской гинекологии, и может быть использовано для профилактики рецидива синехий наружных половых органов после их разведения у девочек младенческого и раннего детского возраста.

Группа изобретений относится к области медицины и фармацевтики, а именно к иммуностимулирующей композиции в форме геля, имеющей температуру плавления перехода геля в золь выше 37°C и включающей от 0,1 до 6% растворимого бета-глюкана, который получен из дрожжей и содержит основную цепь из β-(1,3)-связанных остатков глюкозы и боковые цепи, включающие два или более β-(1,3)-связанных остатков глюкозы, при этом боковые цепи присоединены к основной цепи β-(1,6)-связью, и по существу не содержит повторяющихся β-(1,6)-связанных остатков глюкозы; и гелеобразующий агент, который представляет собой карбоксиметилеллюлозу или геллановую камедь, а также к способу ее получения и применения для облегчения заживления раны или язвы, для лечения мукозита слизистой оболочки полости рта, для лечения рака и для обеспечения пролиферации клеток кожи in vitro.
Изобретение относится к ветеринарии и может быть использовано для лечения заболеваний копыт, кожи, ожогов и дерматитов у животных. Для этого применяют препарат в виде эмульсии для наружного применения, включающий деготь березовый - 37 мас.%, тканевый экстракт (АСД-3Ф) - 37% мас.%, ихтиол - 8 мас.%, спиртовой раствор йода 5%-ный - 18 мас.%.

Группа изобретений относится к пищевой промышленности и касается композиции, представляющей собой искусственную питательную композицию, содержащую лакто-N-неотетраозу, 6′-сиалиллактозу и 2′-фукозиллактозу.
Группа изобретений относится к области пищевой промышленности, а именно к питательной композиции, которая не является человеческим молоком и содержит фукозиллактозу и бетагалактоолигосахариды, которые имеют структуру [галактоза]n-глюкоза, где n равно целому числу от 2 до 60, и имеют более 80% бета-1,4 и бета-1,6 связей; и к применению такой композиции для предоставления питания детям, пожилым и пациентам, болеющим раком, и/или пациентам, зараженным ВИЧ, а также для лечения и/или предотвращения развития вирусных инфекций, иммунных заболеваний и/или заболевания, которое может быть предотвращено и/или вылечено путем усиления Th1 ответа и/или Th1/Th2 баланса, и для усиления ответа на вакцинацию.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и медицине и представляет собой фармацевтическую композицию для лечения гиперхолестеринемии, триглицеридемии, ишемической болезни сердца (ИБС) и профилактики инфаркта миокарда, инсульта, атеросклероза и снижения риска неблагоприятного воздействия статинов на уровень глюкозы в крови, включающую, по меньшей мере, два активных компонента, при этом один компонент выбран из группы статинов: аторвастатин, ловастатин, правастатин, розувастатин, симвастатин, флувастатин, питавастатин, а второй компонент выбран из группы пребиотиков: ксилит, сорбит, лактитол, лактулоза, лактосукроза, мелибиоза, ксилобиоза, стахиоза, раффиноза, или галактоолигосахарид, мальтоолигосахарид, ксилоолигосахарид, изомальтоолигосахарид, гентиолигосахарид, или арабиногалактан, пуллулан, причем компоненты в композиции находятся в определенном соотношении, мг.
Изобретение относится к фармацевтической промышленности и представляет собой вагинальную шипучую композицию в твердой форме, содержащую лимонную кислоту, или яблочную кислоту, или винную кислоту, или фумаровую кислоту, или молочную кислоту, или их смеси, соль карбонатного и/или бикарбонатного аниона, где указанная соль присутствует в количестве, составляющем от 1 до 15% по массе относительно общей массы композиции, смесь, содержащую микрокристаллическую целлюлозу и арабиногалактан, в соотношении от 1:1 до 3:1, и по меньшей мере один пробиотический бактериальный штамм, обладающий способностью уменьшать и/или элиминировать присутствие патогенных агентов, выбранных из группы, включающей: Candida albicans, Candida glabrata, Candida parapsilosis, Candida krusei, Candida tropicalis, Gardnerella vaginalis, Trichomonas vaginalis, Neisseria gonorrhoeae, Escherichia coli, Herpex simplex и Haemophilus ducreyi, где пробиотический бактериальный штамм принадлежит к по меньшей мере одному виду, выбранному из группы, состоящей из: Lactobacillus plantarum, Lactobacillus pentosus, Lactobacillus casei, Lactobacillus casei ssp.paracasei, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus delbrueckii, Lactobacillus delbrueckii ssp.bulgahcus, Lactobacillus delbrueckii ssp.delbrueckii, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus gasseri, Lactobacillus reuteri, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium animalis ssp.lactis, Bifidobacterium adolescentis, Bifidobacterium pseudocatenulatum, Bifidobacterium eatenulatum или Bifidobacterium infantis и где указанная композиция предназначена для применения для лечения вагинита, вагиноза, кандидоза, гонореи, герпеса и мягкого шанкра.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и представляет собой композицию, включающую, по меньшей мере, один N-ацетиллактозамин, выбранный из группы, включающей лакто-N-тетраозу и лакто-N-неотетраозу, по меньшей мере, один сиалилированный олигосахарид и, по меньшей мере, один фукозилированный олигосахарид и гидролизат, включающий частично и/или сильно гидролизованные белки, у которых предпочтительно от 10% до 100% и предпочтительнее от 15% до 95%, популяции белков/пептидов имеют молекулярную массу менее 1000 дальтон, для применения при предупреждении и/или лечении атопического дерматита и экземы.

Изобретение относится к пищевой композиции. Предложены композиции и способы для укрепления иммунной системы и/или предупреждения заболевания, относящегося к иммунной системе, у субъекта, являющегося млекопитающим.

Изобретение относится к пищевой промышленности, а именно к смеси олигосахаридов, продукту питания, содержащему смесь олигосахаридов, и к применениям продукта питания.

Группа изобретений относится к области фармацевтики и касается водной композиции, содержащей антитело и алкилгликозид, имеющий значение СМС около 1,0 мМ или более в воде при 25°С, где алкилгликозид присутствует в концентрации, которая меньше значения СМС алкилгликозида в воде при 25°С.
Группа изобретений относится к медицине и может быть использована для предотвращения или снижения риска развития метаболического синдрома. Композиция по изобретению содержит смесь галактоолигосахаридов, которая включает дисахариды Gal (β1-3)-Glc; Gal (β1-3)-Gal; Gal (β1-6)-Gal; Gal (α1-6)-Gal; трисахариды Gal (β1-6)-Gal (β1-4)-Glc; Gal (β1-3)-Gal (β1-4)-Glc; тетрасахарид Gal (β1-6)-Gal (β1-6)-Gal (β1-4)-Glc и пентасахарид Gal (β1-6)-Gal (β1-6)-Gal (β1-6)-Gal (β1-4)-Glc.

Изобретение относится к способу получения нанокапсул антибиотиков. В качестве оболочки нанокапсул используется ксантановая камедь, в качестве ядра - антибиотик.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и медицине и представляет собой фармацевтическую композицию для лечения гиперхолестеринемии, триглицеридемии, ишемической болезни сердца (ИБС) и профилактики инфаркта миокарда, инсульта, атеросклероза и снижения риска неблагоприятного воздействия статинов на уровень глюкозы в крови, включающую, по меньшей мере, два активных компонента, при этом один компонент выбран из группы статинов: аторвастатин, ловастатин, правастатин, розувастатин, симвастатин, флувастатин, питавастатин, а второй компонент выбран из группы пребиотиков: ксилит, сорбит, лактитол, лактулоза, лактосукроза, мелибиоза, ксилобиоза, стахиоза, раффиноза, или галактоолигосахарид, мальтоолигосахарид, ксилоолигосахарид, изомальтоолигосахарид, гентиолигосахарид, или арабиногалактан, пуллулан, причем компоненты в композиции находятся в определенном соотношении, мг.
Наверх