Электрохимический биосенсор для прямой регистрации миоглобина на основе углеродных нанотрубок и молекулярно импринтированного полимера на основе о-фенилендиамина и способ его получения

Группа изобретений относится к области аналитической химии, электрохимиии и медицинской диагностики и может быть использована для диагностики ранних стадий инфаркта миокарда. Электрохимический биосенсор для прямой регистрации миоглобина в водных буферных растворах путем измерения высоты пика электровосстановления миоглобина методом квадратно-волновой вольтамперометрии представляет собой графитовый электрод, модифицированный углеродными нанотрубками и аналогом антител к миоглобину, представляющим собой молекулярно импринтированный для миоглобина полимер о-фенилендиамина. Группа изобретений касается также способа получения указанного биосенсора, включающего модификацию поверхности графитового электрода суспензией углеродных нанотрубок, последующую модификацию полученного электрода путем электрополимеризации о-фенилендиамина в присутствии миоглобина, осуществляемой на поверхности модифицированного нанотрубками электрода, и инкубацию полученного электрода в растворе, содержащем этанол и 0,25 М NaOH при их соотношении 2:1. При этом суспензию углеродных нанотрубок получают методом ультразвуковой дезинтеграции углеродных нанотрубок в органическом растворителе. Группа изобретений обеспечивает повышение чувствительности биосенсора. 2 н.п. ф-лы, 2 ил., 2 пр.

 

Изобретение относится к области клинической биохимии и аналитической химии и касается электрохимического биосенсора на основе углеродных нанотрубок и молекулярно импринтированного полимера (МИП) на основе о-фенилендиамина для прямого определения миоглобина и способа получения указанного биосенсора.

Изобретение может быть использовано в медицинской практике для диагностики ранних стадий инфаркта миокарда с помощью анализа раннего маркера инфаркта миокарда - миоглобина [1].

Специфичность биохимического анализа определяется, как правило, использованием принципа «ключ-замок», где роль «замка» играют такие биореагенты, как антитела, аптамеры, сомамеры, альтернативные каркасные белки [2]. Антитела, альтернативные каркасные белки, аптамеры являются природными полимерами, что может снижать их стабильность за счет чувствительности к протеазам (белки), нуклеазам (олигонуклеотиды) при работе различных сенсорных систем.

В связи с этим в настоящее время развивается новое направление - создание сенсоров на основе синтетических биомимических (или «биоподражательных») материалов, осуществляющих, как и биореагенты, селективное комплементарное связывание определяемых веществ по принципу «ключ-замок» (http://www.mipdatabase.com). Такими биомимическими материалами являются полимеры с молекулярными отпечатками или молекулярно импринтированные полимеры (МИП) [2]. В качестве мономеров для получения МИП описаны следующие вещества: замещенные акриламиды, пиррол, анилин, замещенные фенолы, допамин, о-фенилендиамин, тиофен (http://www.mipdatabase.com)].

Для повышения чувствительности биосенсорного анализа (предела определяемых концентраций) синтетические биораспознающие молекулы на основе полимеров конъюгируют с различными типами наноматериалов [3-7].

На сегодняшний день на рынке представлены следующие тесты и системы иммуноанализа белков-кардиомаркеров, выпускаемые зарубежными производителями: Stratus® CS STAT (Dade Behring Inc), i-STAT® (Abbott), Triage® Cardiac Panel (Biosite), RAMP® (Response Biomedical Corp), Cardiac Reader™ (Roche), PATHFAST® (Mitsubishi Chemical Europe GmbH), MGL-CHECK-1 (Vedalab), HEXAGON TROPONIN (HUMAN GmbH). Все вышеперечисленные методы анализа миоглобина основаны на использовании антител, обеспечивающих специфичность анализа.

Ранее нами были разработаны электрохимические сенсоры на основе антител к миоглобину для определения миоглобина в водных буферных растворах и в плазме крови здоровых доноров и больных острым инфарктом миокарда.

Так, описан электрохимический биосенсор для прямого определения миоглобина в водных буферных растворах и способ его получения, заключающийся в том, что на поверхность рабочего электрода, предварительно модифицированного коллоидным золотом, стабилизированным диметилдидодециламмоний бромидом (ДДАБ), и моноклональными антителами к миоглобину, наносят анализируемый водный буферный раствор, содержащий миоглобин в определенной концентрации [8].

Описан также способ экспресс-определения кардиомиоглобина в плазме крови здоровых доноров и больных инфарктом миокарда с помощью электрохимического иммуносенсора, заключающийся в том, что на поверхность рабочего электрода, предварительно модифицированного коллоидным золотом, стабилизированным диметилдидодециламмоний бромидом (ДДАБ), и моноклональными антителами к миоглобину, наносят анализируемую плазму крови [9].

Недостатками описанных биосенсоров является использование моноклональных антител, которые являются нестабильными и дорогостоящими белковыми молекулами, что сказывается на стоимости анализа, стабильности сенсора и возможности его многократного использования.

Задачей настоящего изобретения является разработка электрохимического биосенсора для регистрации миоглобина, лишенного указанных недостатков, так как распознающим элементом является полимер с молекулярными отпечатками миоглобина (МИП на миоглобин). Для повышения чувствительности биосенсора используется МИП на миоглобин, сопряженный с углеродными нанотрубками.

В соответствии с изобретением описывается электрохимический биосенсор для прямой регистрации миоглобина в водных буферных растворах путем измерения высоты пика электровосстановления миоглобина методом квадратно-волновой вольтамперометрии, представляющий собой графитовый электрод, модифицированный углеродными нанотрубками и аналогом антител к миоглобину, представляющий собой молекулярно импринтированный для миоглобина полимер о-фенилендиамина (МИП на миоглобин).

Описывается также способ получения указанного электрохимического биосенсора для прямой регистрации миоглобина, заключающийся в том, что поверхность графитового электрода модифицируют суспензией углеродных нанотрубок, полученной методом ультразвуковой дезинтеграции углеродных нанотрубок в органическом растворителе, с последующей модификацией полученного электрода путем электрополимеризации о-фенилендиамина в присутствии миоглобина, осуществляемой на поверхности печатного графитового электрода с углеродными нанотрубками.

Разработан электрохимический биосенсор на основе печатного графитового для прямой регистрации миоглобина в водных буферных растворах с использованием в качестве биораспознающего элемента молекулярно импринтированного для миоглобина полимера о-фенилендиамина (МИП на миоглобин), представляющего собой аналог антител к миоглобину.

Аналитическим сигналом служит величина измеряемого тока электровосстановления миоглобина на поверхности электрода, модифицированного углеродными нанотрубками и молекулярно импринтированным для миоглобина полимером на основе о-фенилендиамина. Полимер получают методом электрополимеризации на поверхности электрода [10-12].

Электрохимический биосенсор для безреагентного определения миоглобина изготавливается на основе одноразовых графитовых электродов, полученных методом трафаретной печати, которые модифицируют углеродными нанотрубками для усиления аналитического электрохимического сигнала и молекулярно импринтированным для миоглобина полимером (МИП на миоглобин).

Метод анализа основан на взаимодействии МИП, полученного электрополимеризацией о-фенилендиамина в присутствии миоглобина, как молекулы-шаблона, удалении миоглобина из полимера с последующей электрохимической регистрацией миоглобина в анализируемых водных буферных растворах за счет взаимодействия миоглобина с полостями в полимере, соответствующими молекуле миоглобина.

ПРИМЕР 1. Методика модификации рабочего графитового электрода углеродными нанотрубками (УНТ) и МИП на основе о-фенилендиамина.

Электрохимические измерения проводили с помощью потенциостата AUTOLAB 12 (Metrohm Autolab, Нидерланды), снабженного программным обеспечением GPES (версия 4.9.7).

Для приготовления биосенсоров используют трехконтактные электродные структуры, полученные методом трафаретной печати (ООО «АвтоКом», Россия, http://www.membrans.ru) с графитовыми рабочим и вспомогательным электродами (графит фирмы Acheson), и хлорсеребряным электродом сравнения. Диаметр рабочего электрода 2 мм. Все потенциалы приведены относительно хлорсеребряного Ag/AgCl электрода сравнения.

Приготовление предполимеризационной смеси мономер - миоглобин.

Для синтеза МИП на основе о-фенилендиамина и миоглобина были приготовлены исходные растворы реагентов: 100 мкМ миоглобин в 0,1 М калий-фосфатном буфере, рН=7,4, 10 мМ раствор о-фенилендиамина в 0,5 М ацетатном буфере, рН 5,2. Меньшие концентрации миоглобина и мономера получали при разведении исходных растворов теми же буферными растворами. Предполимеризационную смесь готовили смешиванием 30 мкл 1×10-7 М раствор миоглобина с 30 мкл 1×10-6 М о-фенилендиамина.

Получение суспензии углеродных нанотрубок.

Для получения суспензии углеродных нанотрубок была приготовлена смесь 1 мг УНТ/1 мл хлороформа, затем смесь озвучивали с помощью ультразвукового дезинтегратора (модель Elmasonic "Elma" S10H). Время озвучивания 5 минут.

Модификация рабочего графитового электрода.

На поверхность рабочего графитового электрода наносили 2 мкл озвученной суспензии УНТ в хлороформе (1 мг/мл) и инкубировали 15 мин при 37°С; затем на электрод наносили 60 мкл предполимеризационной смеси о-фенилендиамин:миоглобин в соотношении 10:1. Электросинтез пленок осуществлялся методом циклической вольтамперометрии (ЦВА), 20 сканов при сканировании в диапазоне потенциалов от 0 В до +1,1 В со скоростью сканирования 50 мВ/с. После полимеризации, модифицированный электрод промывали деионизованной водой с последующей инкубацией полученного электрода в растворе, содержащем этанол и 0,25 М NaOH при их соотношении 2:1 в течение 15 мин при 50°С с последующим промыванием водой в течение 15 мин при комнатной температуре. Модифицированные электроды высушивались под аргоном и хранились при +4°С (МИП/УНТ-электроды). Электроды без молекулярных отпечатков или молекулярно не импринтированные электроды (НИП) получали аналогично, используя вместо раствора миоглобина соответствующий объем 0,5 М ацетатного буфера, рН 5,2.

ПРИМЕР 2. Регистрация миоглобина с помощью электрохимического сенсора на основе углеродных нанотрубок и молекулярно импринтированного полимера (МИП) в качестве аналогов антител (МИП/УНТ-электроды).

Подготовка к измерению

Для встраивания анализируемой молекулы (миоглобина) в полимер с молекулярными отпечатками на модифицированный электрод (МИП/УНТ-электрод) наносят 2 мкл раствора миоглобина различной концентрации. Через 35 минут при 37°С электрод переносят в водный буферный раствор (0,1 М калий-фосфатный буфер, рН=7,4) на 15 мин, затем проводят измерения сигнала.

Параметры измерения сигнала

В программе к прибору устанавливают следующие параметры измерения сигнала.

- Метод: Квадратно-волновая вольтамперометрия (КВВА);

- Время инкубации: 900 с;

- Частота: 10 Гц;

- Начальный потенциал: 0.1 В;

- Конечный потенциал: -0.6 В;

- Шаг потенциала: 0.005 В;

- Амплитуда: 0.020 В;

Измерение сигнала

В ячейку вносят 1 мл фосфатного буферного раствора. Закрепляют биосенсор с нанесенной пробой в измерительной ячейке, опускают в буферный раствор и запускают процедуру измерения сигнала. Полученную вольтамперометрическую кривую запоминают в виде самостоятельного файла (Рис. 1).

Построение калибровочных кривых для определения миоглобина.

Если на полученной вольтамперограмме наблюдается пик (Еmах=-400÷-500 мВ), то с помощью программы к прибору GPES (версия 4.9.7) производят определение высоты полученного пика восстановления миоглобина. При использовании МИП/УНТ-сенсора аналитический сигнал регистрации миоглобина по сравнению с сенсором без УНТ возрастает в 80±5 раз (Рис. 1А). НИП/УНТ-электрод, полученный без миоглобина и не содержащий молекулярных отпечатков, менее эффективно связывал миоглобин (Рис. 1Б).

Квадратно-волновые вольтамперограммы прописывали после инкубации с 10-8 M миоглобином (Рис. 1А) и 10-7 M миоглобином (Рис. 1Б) и стадии отмывки для удаления неспецифической сорбции.

На основе зависимости высоты восстановительного пика миоглобина от концентрации проводят построение калибровочной кривой для определения диапазона определяемых концентраций и нижнего предела определяемых концентраций миоглобина. Диапазон определяемых концентраций миоглобина с помощью разработанного биосенсора на основе МИП и УНТ (МИП/УНТ-электрод) составил 10-10-10-6 М, а нижний предел определяемых концентраций составил 0,5×10-10 М.

Литература

1. Qureshi, Α., Gurbuz, Υ., and Niazi, J.H. (2012). Biosensors for cardiac biomarkers detection: A review. Sensors and Actuators B: Chemical, 171-172, 62-76.

2. О.Д. Гендриксон, A.B. Жердев, Б.Б. Дзантиев, Молекулярно импринтированные полимеры и их применение в биохимическом анализе. Успехи биологической химии, т.46, 2006, с. 149-192.

3. Y. Lv et al., Molecular imprinting of proteins in polymers attached to the surface of nanomaterials for selective recognition of biomacromolecules. Biotechnology Advances, 2013, 31, 1172-1186.

4. Zhang, X., Y. Peng, J. Bai et al., A novel electrochemical sensor based on electropolymerized molecularly imprinted polymer and gold nanomaterials amplification for estradiol detection. Sensors and Actuators B, 2014, 200, 69-75.

5. J. Luo, Sisi J. Xiaoya Liu, Electrochemical sensor for bovine hemoglobin based on a novel graphene-molecular imprinted polymers composite as recognition element / // Sensors and Actuators, 2014, 203, 782-789.

6. Choong C.-L. James S. Bendall, William I. Milne, Carbon nanotube array: A new MIP platform. Biosensors and Bioelectronics, 2009, 25, 652-656.

7. Liu, Y., S. Kumar, Polymer/Carbon Nanotube Nano Composite Fibers-A Review, ACS Appl. Mater. Interfaces, 2014, 6, 6069-6087.

8. Патент RU №2367958, 20.09.2009

9. Патент RU №2425382, 27.07.2011.

10. Najmeh Karimian, Mikhail Vagin, Mohammad Hossein Arbab Zavar, Mahmoud Chamsaz, Anthony P.F. Turner, Ashutosh Tiwari, An ultrasensitive molecularly-imprinted human cardiac troponin sensor. Biosensors and Bioelectronics 2013, 50, 492-498.

11. Najmeh Karimian, Anthony P.F. Turner, Ashutosh Tiwari, Electrochemical evaluation of troponin Τ imprinted polymer receptor. Biosensors and Bioelectronics 2014, 59, 160-165.

12. Cosimino Malitesta, Elisabetta Mazzotta, Rosaria A. Picca, Alessandro Poma, Iva Chianella, Sergey A. Piletsky, MIP sensors - the electrochemical approach. Anal. Bioanal. Chem. 2012, 402, 1827-1846.

1. Электрохимический биосенсор для прямой регистрации миоглобина в водных буферных растворах путем измерения высоты пика электровосстановления миоглобина методом квадратно-волновой вольтамперометрии, представляющий собой графитовый электрод, модифицированный углеродными нанотрубками и аналогом антител к миоглобину, представляющим собой молекулярно импринтированный для миоглобина полимер о-фенилендиамина.

2. Способ получения электрохимического биосенсора для прямой регистрации миоглобина по п. 1, заключающийся в том, что поверхность графитового электрода модифицируют суспензией углеродных нанотрубок, полученной методом ультразвуковой дезинтеграции углеродных нанотрубок в органическом растворителе, с последующей модификацией полученного электрода путем электрополимеризации о-фенилендиамина в присутствии миоглобина, осуществляемой на поверхности полученного модифицированного нанотрубками электрода, с последующей инкубацией полученного электрода в растворе, содержащем этанол и 0,25 М NaOH при их соотношении 2:1.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к кодированному микроносителю и, в частности, к микроносителю, содержащему пространственный элемент, к тест-системе и к способу проведения химического и/или биологического анализа.

Группа изобретений относится к области диагностики, а именно к устройству для выявления аналитов, включающему пластиковую подложку, частично или полностью непосредственно покрытую связывающими полимерами, фиксированными на подложке нековалентно, при этом указанные связывающие полимеры содержат полисахаридный остов, снабженный: ароматическими группами формы -X-CONH-Z, группами карбоновой кислоты формы -Х-СООН и реакционно-способными группами F, имеющими форму -X-CONH-Z′, где X означает неразветвленную или разветвленную, замещенную или незамещенную алкильную цепь, содержащую от 1 до 6 атомов углерода, Z означает арильную функцию, Z′ означает группу, которая способна связываться с другой молекулой, а также к способам производства указанного устройства, кроме того, к связывающему полимеру и к способу его получения.

Группа изобретений относится к области диагностики. Способ детектирования аналита в образце включает применение устройства для латерального проточного анализа (1), содержащего зону добавления образца (2), реакционную зону (4) и зону абсорбции (5), причем упомянутые зоны образуют путь потока для упомянутого образца.

Группа изобретений относится к области магнитного обнаружения клеток, а именно к магнитной проточной цитометрии. Устройство для магнитной проточной цитометрии включает в себя магниторезестивный датчик, проточную камеру, которая предназначена для прохождения потока клеточной суспензии, и участок концентрирования для ориентации и концентрирования магнитно маркированной клеточной пробы.

Изобретение относится к биологическим сенсорам и может быть использовано для анализа биологических проб, содержащих глюкозу или лактат. Способ изготовления микробиосенсора на основе гексацианоферрата железа заключается в том, что на рабочий электрод, коаксиально расположенный с электродом сравнения, наносят гексацианоферрат железа, а поверх него наносят фермент-оксидазу, иммобилизованный в матрицу на основе перфторсульфонированного полимера или гамма-аминопропилсилоксана.

Изобретение относится к способу покрытия наночастиц минимальным количеством связующего агента, композиции наночастиц и набору для детектирования способом локализованного поверхностного плазменного резонанса.

Группа изобретений относится к области детекции пищевых патогенных загрязнителей путем определения положительной или отрицательной реакции на молекулу-мишень. Устройство детекции молекулы-мишени содержит корпус и мембранную систему детекции.

Изобретение относится к биотехнологии. Предложен способ связывания Mycobacteria и/или фрагментов Mycobacteria, присутствующих в водной жидкости, с твердой поверхностью.

Группа изобретений относится к устройствам и способам анализа с использованием специфического связывания и предназначена для определения наличия или количества аналита в пробном образце.

Изобретение относится к области биохимии и медицины, в частности к аналитической химии и иммунохимическому анализу, и описывает способ обработки образца сыворотки или плазмы крови.

Изобретение относится к устройствам, применяемым для детектирования аффинностей связывания, и может быть использовано в биодатчиках. Устройство содержит планарный волновод (2), размещенный на подложке (3), и оптическую развязку (4) для вывода когерентного света (1) заданной длины волны в планарный волновод. Когерентный свет распространяется через планарный волновод (2), а затухающее поле (6) распространяется вдоль внешней поверхности (5) планарного волновода. Внешняя поверхность (5) планарного волновода содержит сайты (7) связывания, способные связывать на ней пробы-мишени (8) с сайтами (7) связывания таким образом, чтобы свет затухающего поля (6) рассеивался пробами-мишенями (8), связанными с сайтами (7) связывания. Сайты (7) связывания размещают вдоль множества заданных линий (9), размещенных таким образом, чтобы рассеянный свет конструктивно интерферировал в заданном местоположении детектирования с разницей длины оптического пути, являющейся целым кратным заданной длине волны. Технический результат – повышение эффективности детектирования, универсальности конструкции. 3 н. и 21 з.п. ф-лы, 21 ил.

Изобретение относится к области медицины, в частности к травматологии и ортопедии, и предназначено для диагностики синдрома жировой эмболии (СЖЭ) при переломах костей нижних конечностей. В первые сутки посттравматического периода производят забор у пациента венозной крови и последующее ее центрифугирование. В полученной сыворотке иммуноферментным методом определяют концентрацию сурфактантного белка D. СЖЭ диагностируют при превышении нормы белка, составляющей 200 нг/мл. Изобретение обеспечивает раннее выявление СЖЭ. 1 табл., 2 пр.

Группа изобретений относится к ветеринарии и касается иммунохроматографического способа детекции специфического вещества, содержащегося в молоке, который включает этап обработки молока литическим ферментом или поверхностно-активным веществом; этап приведения в контакт молока с тест-полоской, содержащей первую часть, содержащую меченое первое антитело, вторую часть, располагаемую ниже первой части, на которой иммобилизовано второе антитело, и третью часть, располагаемую выше первой части или второй части и содержащую пустоты, обеспечивающие удаление шариков молочного жира; этап протекания молока через третью часть для удаления части шариков молочного жира из молока; и этап протекания молока во вторую часть или последующую расположенную ниже часть с получением детектируемого сигнала метки во второй части или последующей расположенной ниже части. Группа изобретений также касается иммунохроматографического устройства для детекции специфического вещества, содержащегося в молоке; набора для детекции специфического вещества, содержащегося в молоке. Группа изобретений обеспечивает возможность производить определение специфического вещества на молочных фермах без необходимости использования дополнительного устройства, удаляющего шарики молочного жира. 3 н. и 11 з.п. ф-лы, 7 пр., 7 ил., 8 табл.

Группа изобретений относится к области химии и представляет собой способ иммуноферментного анализа. Предложен способ детекции свободного антигена биоспецифического антитела в образце, в котором антиген, подлежащий определению, может быть специфически связан с первым сайтом связывания биоспецифического антитела, включающий этап инкубации образца, содержащего свободный антиген и биоспецифическое антитело, с антиидиотипическим антителом, которое специфически связывается со второй связывающей детерминантой биспецифического антитела, отличной от первой связывающей детерминанты, при этом антиидиотипическое антитело связано с твердой фазой. Заявленная группа изобретений позволяет эффективно определить наличие/концентрацию свободного антигена биоспецифического антитела в образце. 2 н. и 7 з.п. ф-лы, 13 ил., 9 пр.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использована для диагностики колоректального рака. Способ включает одновременное количественное определение онкомаркеров белковой природы, антител к гликанам, иммуноглобулинов G, А и M в крови человека на биологическом микрочипе. Для этого биочип содержит гидрогелевые элементы с иммобилизованными антителами к белковым онкомаркерам, гидрогелевые элементы с иммобилизованными гликанами, гидрогелевые элементы с иммобилизованными антителами против иммуноглобулинов человека классов G, А, М. Изменение уровня анализируемых маркеров по сравнению с уровнем маркеров в сыворотке крови здоровых доноров, свидетельствует о колоректальном раке. Группа изобретений относится также к биологическому микрочипу, представляющему собой массив трехмерных гидрогелевых элементов. Использование данного изобретения позволяет проводить диагностику/скрининг колоректального рака, одновременное количественное определение онкомаркеров белковой природы, антител к гликанам, иммуноглобулинов G, А и M в крови человека на биологическом микрочипе, допускающем последовательное проведение реакций различного типа. 2 н. и 6 з.п. ф-лы, 5 пр., 5 табл., 7 ил.

Группа изобретений относится к способу калибровки составного анализа, включающему: добавление калибровочного реагента, включающего по меньшей мере две различные связывающие молекулы, где каждая молекула обладает способностью специфичного связывания с агентом захвата и способностью связываться с детектирующей молекулой и где по меньшей мере две из связывающих молекул имеют различные специфичности и присутствуют в различных концентрациях, добавление детектирующей молекулы, детектирование связанной детектирующей молекулы, создание калибровочной кривой, включающей ряд калибровочных точек/интервалов. Также группа изобретений относится к набору реагентов и составной аналитической системе. Применение группы изобретений позволяет повысить точность результатов благодаря системной вариабельности систематических анализов в течение времени. 4 н. и 16 з.п. ф-лы, 7 ил., 4 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области медицины, в частности к акушерству и гинекологии, и предназначено для ранней диагностики цервикальных интраэпителиальных неоплазий (ЦИН). Выявляют патологию шейки матки. Определяют уровень экспрессии маркеров-предикторов с помощью вестерн-блот анализа с детекцией хемилюминисценции и ПЦР в реальном времени. При значениях уровней экспрессии HIF1alpha 0,029, GLUT1 782,9±156,5, IGFBP-3 0,038±0,0076, HK2 36,4, VDAC1 70 диагностируют ЦИН1 (LSIL). При значениях уровней экспрессии HIF1alpha 0,03, GLUT1 1154,2±88,7, IGFBP-3 0,02±0,005, HK2 44,9, VDAC1 87 диагностируют ЦИН2-3 (HSIL). Изобретение обеспечивает эффективную диагностику ЦИН на более ранних этапах. 5 ил., 1 табл., 3 пр.
Группа изобретений относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для понижения адсорбции пузырьков на боковой поверхности пластмассовой ячейки в иммуноанализе. Для этого способ включает проведение реакции антиген-антитело в сухой пластмассовой ячейке, где способ включает добавление поверхностно-активного вещества в реакционную систему перед или одновременно с началом указанной реакции антиген-антитело. При этом указанное поверхностно-активное вещество представляет собой поли(оксиэтиленовый) сложный эфир сорбита и жирной кислоты или полиоксиэтилентрибензилфениловый эфир. Группа изобретений относится также к реагенту для иммуноанализа. Использование данной группы изобретений позволяет эффективно предотвращать адсорбцию пузырьков на спектрофотометрической поверхности сухой пластикой ячейки, в результате чего стабилизируется значение измерения и повышается точность измерения в иммуноанализе с помощью автоматического анализатора. 2 н. и 5 з.п. ф-лы, 6 табл.

Группа изобретений относится к медицине и касается способа измерения антитела против WT1 в образце, где способ включает выполнение иммуноанализа с использованием полипептида с антигенностью в отношении антитела против WT1, выбранного из i) полипептида, содержащего последовательность с аминокислотами в положениях 294-449 последовательности SEQ ID NO: 1, и ii) полипептида, включающего аминокислотную последовательность с делецией, заменой или добавлением от одной до нескольких аминокислот в аминокислотной последовательности, составляющей полипептид i). Группа изобретений также касается способа диагностики WT1-связанного заболевания, включающего измерение антитела против WT1 в образце и диагностирование наличия WT1-связанного заболевания в случае, если концентрация антитела против WT1 существенно повышена по сравнению с концентрацией антитела против WT1 у здорового индивида; способа прогнозирования ответа у пациента на терапию рака вакциной против WT1; реагента для измерения антитела против WT1 в образце. Группа изобретений обеспечивает высокую точность и чувствительность при определении группы раковых больных. 7 н. и 3 з.п. ф-лы, 5 пр., 12 ил., 1 табл.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использована для определения свободного антигена мультиспецифического антитела в образце. Способ определения in vitro наличия и/или концентрации связывающего партнера мультиспецифического связующего, в котором связывающий партнер может быть специфически связан с первой областью связывания мультиспецифического связующего, включающий этапы: инкубацию образца, содержащего связывающий партнер и мультиспецифическое связующее, с моноспецифическим связующим, которое специфически связывается со второй областью связывания мультиспецифического связующего, отличной от первой области связывания. Элиминацию из образца комплекса моноспецифическое связующее - мультиспецифическое связующее перед определением наличия или концентрации свободного связывающего партнера. И определение концентрации связывающего партнера в образце, из которого элиминировано мультиспецифическое связующее. Группа изобретений относится также к применению антиидиотипического антитела, которое специфически связывается со второй областью связывания мультиспецифического антитела в вышеуказанном способе. Использование данной группы изобретений позволяет перед определением наличия или концентрации свободного связывающего партнера элиминировать из образца связывающий партнер, который специфически связан с мультиспецифическим связующим, т.е. комплекс связывающий партнер - мультиспецифическое связующее. 3 н. и 32 з.п. ф-лы, 7 ил.
Наверх