Способ отбора образцов крови доноров с повышенным содержанием дефензинов для получения моноиммунной плазмы крови


 


Владельцы патента RU 2606377:

Федеральное государственное бюджетное военное образовательное учреждение высшего профессионального образования Военно-медицинская академия им. С.М. Кирова Министерства обороны Российской Федерации (ВМедА) (RU)

Изобретение относится к области медицины, в частности к трансфузиологии, и может быть использовано для получения плазмы крови доноров с содержанием дефензинов, обладающих наибольшей чувствительностью к бактериальной культуре. Для этого в плазме выявляют содержание антимикробных пептидов дефензинов и при титре дефензинов свыше 50 пг/мл осуществляют забор крови. Выделяют бактериальную культуру от пациентов с осложненными инфекциями, вызванными протеем, синегнойной и кишечной палочками, стафилококком и клебсиеллой, определяют чувствительность данной культуры к полученным дефензинам, а затем для получения плазмы отбирают доноров с дефензинами, обладающими наибольшей чувствительностью к выделенной бактериальной культуре. Использование данного способа позволяет получить плазму крови доноров с содержанием дефензинов, обладающих наибольшей чувствительностью к бактериальной культуре, для лечения внутрибольничной инфекции. 1 ил.


 

Изобретение относится к области медицины, и в частности к трансфузиологии и может быть использовано при отборе доноров с повышенным содержанием дефензинов, с целью целенаправленного и эффективного лечения пациентов с осложнениями внутригоспитальными инфекциями.

Одной из перспективных задач Службы крови является обеспечение лечебных учреждений иммунными препаратами направленного действия, получаемыми из донорской крови. Терапевтическая необходимость данных препаратов при лечении гнойно-септических внутригоспитальных инфекций научно обоснованы и практически доказаны (С.С. Балаян, 1991 г. «Плазма иммунная», Е.А. Селиванов и соавт., 2003 г. - отраслевой классификатор «Консервированная кровь человека и ее компонентов».

Объем трансфузиологической помощи в лечебных учреждениях в последние годы характеризуется устойчивым ростом за счет увеличения трансфузий свежезамороженной, замороженной и иммунной плазмы. Применение иммунной плазмы основано на введении антител, которые в последующем связывают соответствующие антигены и способствуют устранению клинических проявлений бактериальной агрессии.

Переливание иммунной плазмы проводится не только с лечебной целью, но и с профилактической (Н.В. Демидова, М., «Медицина», 1987 г., В.Н. Цыган и соавт., С-Пб., 2011 г.).

В учреждениях Службы крови СССР имеется опыт выпуска антистафилоккоковой плазмы и иммуноглобулинов (противостолбнячной, противогриппозной, противооспенной и др.), которые получали из крови доноров, подвергаемых активной иммунизации. Однозначно объем и спектр выпускаемых иммунных препаратов не удовлетворял практическое здравоохранение.

Для увеличения необходимых специфических иммунных компонентов сотрудниками Ленинградского ордена Трудового Красного Знамени, ордена Дружбы народов научно-исследовательского института гематологии и переливания крови (проф. В.К. Мельникова, кандидаты медицинских наук А.И. Смирнова, Л.К. Николаева, кандидаты биологических наук Е.И. Кайтанджан и Р.Г. Файзулин), были подготовлены методические рекомендации «Организация новой формы иммунного донорства среди лиц с естественными антибактериальными антителами с целью получения иммунных препаратов направленного действия» и утверждены Заместителем Министра Здравоохранения СССР Э.А. Ноговицыным 15 сентября 1989 года. В соответствии с требованиями данных рекомендаций и положениями, представленными в работе А.В. Чечеткина и соавт., 2008 г. (Методические указания «Получение и клиническое применение иммунной плазмы в военно-медицинских учреждениях») до 2010 года в лечебных учреждениях РФ проводился отбор доноров крови путем скрининга определения бактериальных антител в «лечебном титре» в плазме крови (иммунная плазма) на наиболее часто встречаемые внутрибольничные инфекции:

- антистафилококковые;

- антиколибациллярные;

- антисинегнойные;

- антипротейные;

- антиклебсиеллезные.

Основным показателем отбора образцов крови доноров являлась величина или терапевтически значимый (и выше) титр антибактериальных антител для оказания трансфузиологической помощи. Процент обнаружения таковых у кадровых доноров варьировал от 12 до 73% и зависел от пола, возраста, времени года и сезонных работ.

С 2010 года производство диагностических препаратов в стране для тестирования на ранее указанные инфекции прекратилось, что побудило нас искать новый подход для поиска естественных антибактериальных белков в плазме крови доноров, что крайне необходимо для оказания медицинской помощи и целевого применения плазмы определенной категории больных (верифицированной внутригоспитальной инфекции, ожоговой болезни, осложненной присоединившейся вторичной гнойной инфекции и др). Патентный поиск по этим вопросам к успеху нас не привел.

Памятуя, что изыскание высокоэффективных средств терапии и профилактики различных инфекций для службы крови приобретает в настоящее время особую актуальность и неотложную задачу практического здравоохранения.

В настоящее время антимикробные пептиды представляют объект повышенного внимания широкого круга специалистов, в том числе рассматривающих такие соединения как альтернативу антибиотическим средствам. В настоящее время, чтобы противостоять патогенным микроорганизмам, появляются все новые и новые виды антибиотиков, которые по сути являются производными старых. Если мы не изменим методы производства, назначения и использования антибиотиков, нас ждут катастрофические последствия, а нам известно, что антимикробные пептиды уступают антибиотикам по эффективности, но действуют быстрее, разрушая бактерии, не восприимчивые к антибиотическим средствам (Garsia А.Е., Osapau G., Tran P.A. Selsted ME Infect Immun. 2008 Dec. 76 (12): 5883-91).

Антимикробные пептиды постоянно образуются даже в стабильном состоянии организма. А.Е. Абатуров (Журнал «Здоровье ребенка», 3 (38), 2012 г. ) указывает, что даже при низких концентрациях дефензины ингибируют аденовирусную инфекцию.

Антимикробные пептиды-дефензины - мультифункциональные катионные белки человека, представляющие собой короткие молекулы длиной от 12 до 50 аминокислот, имеющие среднюю молекулярную массу 4 кD, выполняющие сложную роль в поддержании и регулировании иммунного ответа на вирусную, микробную и иную антигенную агрессию на основе прямого воздействия на клеточную мембрану микроорганизма, вызывающего разрушение клетки, а также участие в регулировании процесса презентации антигена.

Показатели содержания дефензинов в плазме крови (белки нейтрофилов человека) рассматривается как индикатор наличия высокой иммунозащитной функции. Лекарственные препараты на основе антимикробных антител пока не созданы, но идет активная работа в этом направлении.

Б.П. Пинегин, А.С. Будихина в журнале «Иммунология», 2008 г., №5 отмечают, что антимикробные пептиды (дефензины) являются компонентами иммунной системы и обеспечивают первую линию защиты макроорганизма от различных патогенов.

Известен способ отбора доноров для получения плазмы крови путем исследования иммунологических показателей крови, в котором в плазме выявляют содержание антимикробных пептидов дефензинов и при титре дефензинов от 180 до 545 нг/мл - у мужчин и от 128 до 386 нг/мл - у женщин осуществляют забор крови (RU 2558114, G01N 33/53, опубл. 27.07.2015). Недостатком этого изобретения является то, что способ отбора не обеспечивает получения плазмы, направленной на подавление определенного вида инфекций.

В основу изобретения положена задача разработки способа получения плазмы крови доноров с содержанием дефензинов, обладающих наибольшей чувствительностью к бактериальной культуре, позволяющего определение в плазме крови доноров антимикробных пептидов (дефензинов - катионных белков нейтрофилов), которые обладают микробицидной, хемотаксической, иммуномодулирующей и цитотоксической активностью без проведения целевой иммунизации доноров, в результате чего вовлекаются в защиту организма и воспалительные процессы, а также дающего возможность расширить область их применения в клинической практике.

Решение поставленной задачи обеспечивается тем, что в способе получения плазмы крови доноров с содержанием дефензинов, обладающих наибольшей чувствительностью к бактериальной культуре, в плазме выявляют содержание антимикробных пептидов дефензинов и при титре дефензинов свыше 50 пг/мл осуществляют забор крови, выделяют бактериальную культуру от пациентов с осложненными инфекциями, вызванными протеем, синегнойной и кишечной палочками, стафилококком и клебсиеллой, определяют чувствительность данной культуры к полученным дефензинам, а затем для получения плазмы отбирают доноров с дефензинами, обладающими наибольшей чувствительностью к выделенной бактериальной культуре.

Поставленная нами цель достигается путем тестирования образцов крови кадровых доноров на выявление человеческого белка нейтрофилов трех из четырех HNP 1-3 дефензины (от англ. defense - защита), которые являются уникальными для нейтрофилов и составляют около 99% от общего содержания в этих клетках. Количество дефензинов 3-5 mg на 1000000 нейтрофилов, а в плазме - 50-100 ng/ml.

Изобретение поясняется фиг. 1, на которой представлены снимки результатов бактериологических исследований, полученных нами, характеризующих влияние дефензинов на литическую активность микроорганизмов, взятых для опыта.

Обследовались лица молодого возраста 19-26 лет, 98% мужского пола.

Способ количественного определения HNP 1-3 проводили на диагностической тест-системе фирмы HYCULT-biotech (Нидерланды) основанный на «сендвич»-методе твердофазного иммуноферментного анализа (дефензины нейтрофилов) ELISA. Подготовка образцов крови доноров к исследованию требовала строжайшего выполнения всех рекомендаций методической инструкции. После забора крови донора не позже 20 мин проводилось центрифугирование при 1500g, температуре +4°C в течение 15 мин. Плазму отбирали строго в полипропиленовые пробирки и вновь центрифугировали в прежнем режиме. Отобранную плазму до исследования хранили при -70°C. Хранение при других температурах отрицательно влияет на показатели дефензинов.

Исследование образцов донорской плазмы проводили через 24 часа после оттаивания.

После выполнения иммунологических исследований полученные нами показатели величины дефензинов условно были распределены на три группы: 1 - лица, у которых показатели были до 50 ng/ml, 2 - до 100 ng/ml и 3 - более 100 ng/ml (при нормальном их содержании 50-100 ng/ml).

Было обследовано 153 образца плазмы крови доноров, в которых выявили показатели дефензинов 1 группы до 50 ng/ml - 43 образцах (28,1%), 2 группа - до 100 ng/ml - 46 образцах (30%) и 3 группа - свыше 100 ng/ml - в 64 образцах (41,1%). Таким образом, мы получили исходную «универсальную» (поливалентную - полииммунную) плазму.

В интересах клинического, целевого применения целесообразно уточнить - против какого конкретно микроорганизма данная полииммунная плазма обладает наибольшей активностью.

Нами данная задача решалась следующим образом.

На стандартные питательные среды (кровяной агар, агар Мюллера-Хилтон, желточно-солевой агар), приготовленные заранее проводили посев общепринятым методом следующих культур, выделенных от больных лечебных отделений (гнойной хирургии и ожоговой) E.Coli, St.Aureus, Ps. Aeruginose, Kl. Pneumonia и Proteus vulgaris. Затем на поверхность засеянных чашек Петри наносили пастеровской пипеткой «полииммунную» плазму в количестве по 0,05 мл 2 и 3 группы (по содержанию дефензинов) помещали в термостат. Через 18-20 часов проводили учет влияния дефензинов на засеянную культуру.

Оценку литической активности проводили: « - » - отсутствие активности; «+» - низкая активность;

«++» - образование зоны лизиса с большим количеством колоний вторичного роста бактерий;

«+++» - зона лизиса с единичными колониями вторичного роста;

«++++» - прозрачная зона лизиса без колоний вторичного роста.

Было выяснено, что чем выше показатели дефензинов, тем отчетливее отмечалась литическая активность на засеянную культуру. В то же время показатели величины дефензинов по-разному оказывали влияние на рост использованных нами микробных культур. Так, 2 группа дефензинов (до 100 ng/ml) из 46 образцов плазмы проявилась литическая активность в 31 случаях (67,6%) на 2 и 3 креста на Е. Coli, Kl. Pneuvmonia. Из третьей группы (содержание дефензинов выше 100 ng/ml) литическая активность составила из 64 образцов плазмы крови в 48 (76,5%) случаях на 2 и 3 креста. Тогда как в первой группе отмечалась в единичных случаях - 4 образцах (0,93%).

Практический пример

1. (Донор мужчина) - показатель дефензинов - 83 ng/ml. Литическая активность - «++» - «+++» креста.

2. Донор мужчина с показателем дефензинов 112 ng/ml. Литическая активность «+++» креста.

На фиг. 1 представлены снимки результатов бактериологических исследований, полученных нами, характеризующих влияние дефензинов на литическую активность микроорганизмов, взятых для опыта.

В связи с отсутствием в настоящее время наличия сертифицированной иммунной плазмы на станциях (отделениях) переливания крови и отсутствием указаний руководящих документов получения специфичной иммунной плазмы и учитывая крайнюю необходимость в ней лечебных учреждений самого различного профиля, нами предлагается способ получения естественной, специфической иммунной плазмы.

Особенности ее получения:

- не требуется особой, специальной медицинской аппаратуры;

- выполнима на уровне районной больницы и в военном госпитале на 150 и выше коек;

- наличие в штате учреждения врача-бактериолога.

Способ получения плазмы крови доноров с содержанием дефензинов, обладающих наибольшей чувствительностью к бактериальной культуре, отличающийся тем, что в плазме выявляют содержание антимикробных пептидов дефензинов и при титре дефензинов свыше 50 пг/мл осуществляют забор крови, выделяют бактериальную культуру от пациентов с осложненными инфекциями, вызванными протеем, синегнойной и кишечной палочками, стафилококком и клебсиеллой, определяют чувствительность данной культуры к полученным дефензинам, а затем для получения плазмы отбирают доноров с дефензинами, обладающими наибольшей чувствительностью к выделенной бактериальной культуре.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к области медицины и найдет применение в онкоурологии, в частности, при лечении рака предстательной железы для прогнозирования риска развития биохимического рецидива у больных.
Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной медицине и биологии, и может быть использовано для оценки биосовместимости имплантируемых изделий.

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для получения диагностикума для определения концентрации лечебного рекомбинантного α-интерферона в сыворотке крови больных вирусными инфекциями.

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для получения диагностикума для определения концентрации лечебного рекомбинантного α-интерферона в сыворотке крови больных вирусными инфекциями.

Изобретение относится к психологии. Диагностику школьной дезадаптации у младших школьников осуществляют путем определения методом РИА уровня АКТГ в сыворотке крови ребенка.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использована для измерения активности клеточно-опосредованного иммунного ответа у субъекта.

Изобретение относится к области биохимии. Предложено антитело к человеческому СD52.

Изобретение относится к области медицины, а именно к иммунологии, может быть использовано для дифференциальной диагностики первичного и вторичного иммунного ответа на вирус кори.
Изобретение относится к медицине, а именно к способу диагностики POEMS-синдрома у больных множественной миеломой или ангиофолликулярной гиперплазией лимфатических узлов.
Изобретение относится к медицине и представляет собой способ определения болевого синдрома при полинейропатии у больных вибрационной болезнью, включающий забор венозной крови, получение сыворотки крови и определение в ней количественного содержания серотонина.

Группа изобретений относится к медицине и касается системы детекции для электрохимического выявления белкового аналита, включающей наноструктурированный микроэлектрод, содержащий линкер на своей поверхности, где линкер присоединен к антителу или его фрагменту, способным связывать белковый аналит; и редокс-репортер, способный к переносу электронов с указанным наноструктурированным микроэлектродом, где связывание белкового аналита с указанными антителом или его фрагментом препятствует переносу электронов между указанным редокс-репортером и указанным наноструктурированным микроэлектродом. Группа изобретений также касается способа электрохимической детекции белкового аналита; способа электрохимической детекции множества белковых аналитов; способа мониторинга прогрессирования или ответа у субъекта, имеющего злокачественную опухоль; набора для электрохимической детекции белкового аналита. Группа изобретений обеспечивает создание простого и надежного анализа белков на основе электрохимической детекции. 5 н. и 65 з.п. ф-лы, 3 пр., 5 ил., 1 табл.

Изобретение относится к области биохимии. Предложен способ проверки безопасности исследуемого антитела, связывающегося с бета-амилоидом. Инкубируют глиальные макрофаги с олигомерами Аβ1-42: i) в присутствии исследуемого антитела, ii) в присутствии антитела IgG1 против бета-амилоида, включающего константную область IgG1 человека, и iii) без антитела. Затем измеряют активацию р38 МАР-киназы в глиальных макрофагах. Идентифицируют исследуемое антитело как безопасное, если оно индуцирует промежуточный уровень активации р38 МАР-киназы, т.е. уровень активации выше чем в присутствии олигомеров Аβ1-42 без антитела, но ниже чем в присутствии олигомеров Аβ1-42 и антитела IgG1. Также предложен способ контролирования безопасности курса лечения амилоидоза исследуемым антителом против бета-амилоида, включающий определение уровня активации р38 МАР-киназы в глиальных макрофагах, полученных от пациента, и, при необходимости, корректировку курса лечения так, чтобы активация р38 МАР-киназы была на промежуточных уровнях. Изобретение обеспечивает нейропротекцию, опосредуемую антителом против бета-амилоида, без вызова патогенетического воспалительного состояния. 2 н. и 57 з.п. ф-лы, 11 ил., 2 табл.

Изобретение относится к медицинской микробиологии и санитарной эпидемиологии. Предложен способ получения имитаторов патогенных биологических агентов путем обработки суспензии клеток возбудителя опасного инфекционного заболевания СВЧ-облучением с частотой 2450 МГц, мощностью 6 Вт/см3 двукратно по 5 минут. Инактивированные бактерии стабилизировали защитной средой и высушивали в сублимационной камерной установке до остаточной влажности 2-5%. Целевой продукт состоит из сухой культуры инактивированных бактерий (91,5%), талька (8%) и аэросила (0,5%). Способ обеспечивает получение безопасного при использовании и длительно сохраняющего свои индикационные свойства имитатора патогенного биологического агента. 2 табл., 5 пр.

Группа изобретений относится к медицине и может быть использована для тестирования образца, полученного от человека. Для этого проводят измерение первого сигнала, полученного вследствие связывания первой части указанного образца с бактериальным липополисахаридом, и измерение второго сигнала, полученного вследствие связывания второй части указанного образца с нативным антигеном, выбранным по меньшей мере из одного из: (а) относящегося к кишечнику антигена и (б) относящегося к гематоэнцефалическому барьеру антигена. Также предложена диагностика заболевания, связанного с синдромом повышенной кишечной проницаемости у субъекта, способ диагностики заболевания, связанного с проницаемостью гематоэнцефалического барьера у субъекта, и тестовый планшет. Группа изобретений обеспечивает диагностику заболеваний, связанных с синдромом повышенной кишечной проницаемости (независимо от того, развился он посредством парацеллюлярного или трансцеллюлярного пути, и независимо от того, был ли он вызван бактериальными токсинами или другими причинами), и/или заболеваний, связанных с чрезмерной проницаемостью гематоэнцефалического барьера, таких как: нейровоспаление и/или нейроаутоиммуннные реакции, боковой амиотрофический склероз, болезнь Паркинсона, рассеянный склероз, болезнь Альцгеймера или периферическая невропатия и большое депрессивное расстройство. 5 н. и 21 з.п. ф-лы, 9 ил., 9 табл.

Группа изобретений предлагает связанные со стрептавидином магнитные частицы, имеющие высокую способность связывания биотина, и способ их изготовления. Связанная со стрептавидином магнитная частица имеет структуру, в которой молекулы стрептавидина сшиты друг с другом на магнитной частице, где связанную со стрептавидином магнитную частицу изготавливают способом, включающим следующие стадии: (1) изготовление суспензии, содержащей магнитные частицы, на поверхности которых находятся аминогруппы; и (2) реакция магнитных частиц со стрептавидином и глутаральдегидом путем введения глутаральдегида в присутствии стрептавидина в суспензию, изготовленную на стадии (1). Настоящая группа изобретений может быть эффективно использована в клинической диагностике. 9 н. и 2 з.п. ф-лы, 2 ил., 1 табл., 2 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к биотехнологии, и может быть использовано при получении эритроцитарного антигена для диагностики некробактериоза животных. Для этого получают антигенную фракцию путем культивированием производственного штамма Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ с последующим отделением бактериальной массы и ресуспендированием 0,8-1,2% раствором дезмола до концентрации 4-10 млрд/мл микробных тел. Далее прогревают в течение 55-65 мин при температуре 93-98°C и смесь центрифугируют при 1,5-3,0 тыс. g, в течение 20-30 мин. К супернатанту добавляют формалин в конечной концентрации 0,3-0,4% и инкубируют при комнатной температуре в течение 10-15 суток. Затем к реакционной смеси добавляют формализованные эритроциты, взятые в конечной концентрации 9-12%, а целевой продукт получают инкубированием реакционной смеси с формализованными эритроцитами при 40-46°C в течение 1,5-2 час с последующим охлаждением до их комнатной температуры и отмывкой. Использование данного способа - получение эритроцитарного антигена для диагностики некробактериоза животных - позволяет увеличить срок хранения целевого продукта при сохранении его специфической активности. 3 з.п. ф-лы, 7 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к аллергологии и иммунологии, и может быть использовано при дифференциальной диагностике гиперреактивности (ГР) к яду пчел. Для этого выявляют в анамнезе пациента контакта с пчелой Apis mellifera. Определяют уровень общего IgE, уровень специфичного IgE к яду пчелы, гистамина, лейкотриенов, базальной триптазы, экспрессии CD63+ и CD203c при контакте базофилов крови с аллергенами яда пчелы, гистамина, лейкотриенов. При наличии в анамнезе контакта с пчелой Apis mellifera с последующими реакциями различной степени тяжести, уровне общего IgE более 100 МЕ/мл, уровне специфических IgE более 0,7 МЕ/мл, CD63+ более 10%, CD203c более 10%, уровне лейкотриенов более 200 пкг/мл, уровне гистаминолиберации от 10±3,2% до 50±5,3%, повышенном уровне базальной триптазы диагностируют IgE-опосредованную реакцию. При наличии в анамнезе контакта с пчелой Apis mellifera с последующими реакциями различной степени тяжести, уровне общего IgE менее 100 МЕ/мл, уровне специфических IgE менее 0,7 МЕ/мл, CD63+ менее 10%, CD203c более 10%, уровне лейкотриенов менее 200 пкг/мл, уровне гистаминолиберации до 15%, нормальном уровне базальной триптазы диагностируют не IgE-опосредованную реакцию. Разработанный комплексный метод позволяет осуществить дифдиагностику истинных и псевдоаллергических реакций на яд пчел, что в последующем позволит назначить адекватное специфическое лечение с учетом формирования блокирующих (защитных) антител. 2 пр., 3 табл.

Изобретение относится к способу получения сульфатированной формы тиреоидного гормона формулы II (T3S) по следующей реакции: Технический результат: полученное соединение T3S можно легко выделить в чистом виде в виде твердого вещества с хорошими выходами. 15 з.п. ф-лы, 2 ил., 6 табл., 6 пр.

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии и иммунологии. Предложены выделенные полинуклеотиды, кодирующие вариабельные области легкой и тяжелой цепи антитела против человеческого EGFR; анти-EGFR антитело и фрагмент антитела; а также вектор, клетка-хозяин и способ получения анти-EGFR антитела или его фрагмента. Рассмотрены: композиция, содержащая анти-EGFR антитело или его фрагмент, ее применение, а также применение антитела и его фрагмента для лечения расстройств, отличающихся сверхэкспрессией EGFR. Кроме того, описан способ выявления присутствия EGFR в образце с помощью антитела по изобретению. Настоящее изобретение может найти дальнейшее применение в терапии EGFR-опосредованных заболеваний. 22 н. и 48 з.п. ф-лы, 29 ил., 38 табл., 5 пр.

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования аллергических реакций при использования дентальных имплантатов на основе сплавов оксида титана в реконструктивной хирургии. Предлагаемый способ персонифицированного подбора пациенту дентального имплантата на основе сплавов оксида титана осуществляют в условиях in vitro с помощью тест-системы активации базофилов для оценки аллергической реакции на исследуемый материал методом подсчета разрушенных базофилов в крови пациента. Предварительно выделяют наночастицы с поверхности дентального имплантата путем инкубирования в воде при температуре 37,2°C в течение 5 дней, после чего на полученный супернатант воздействуют ультразвуком 35 кГц в течение 10-20 минут, затем добавляют венозную кровь пациента и моноклональные антитела к молекулам CD203 и CD294, повторно инкубируют в течение 15 минут и с помощью тест-системы методом проточной цитофлуориметрии фиксируют активацию базофилов либо ее отсутствие. Исходя из полученных результатов рассчитывают индекс активации базофилов, и в случае получения отношения количества позитивных базофилов исследуемого образца к количеству негативных базофилов контрольного образца меньше 1 или равного 1 рекомендуют данный имплантат к использованию. Использование способа позволяет прогнозировать и исключить возможные аллергические реакции со стороны иммунной системы пациента в послеоперационном периоде и, соответственно, осуществить индивидуальный подбор различных сплавов металлов и профилактику воспалительных осложнений в отсроченном периоде. 1 табл., 2 пр.
Наверх