Способ диагностики псориатической эритродермии


 

G01N33/50 - химический анализ биологических материалов, например крови, мочи; испытания, основанные на способах связывания биоспецифических лигандов; иммунологические испытания (способы измерения или испытания с использованием ферментов или микроорганизмов иные, чем иммунологические, составы или индикаторная бумага для них, способы образования подобных составов, управление режимами микробиологических и ферментативных процессов C12Q)

Владельцы патента RU 2611350:

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Санкт-Петербургский государственный педиатрический медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ГБОУ ВПО СПбГПМУ Минздрава России) (RU)

Изобретение относится к медицине, в частности к дерматовенерологии и патологической анатомии, и касается способа диагностики псориатической эритродермии. Способ заключается в иммуногистохимическом исследовании. При наличии выраженной экспрессии биомаркера IL-36γ в виде послойного позитивного окрашивания ядер и цитоплазматической мембраны клеток шиповатого и зернистого слоев эпидермиса диагностируют псориатическую эритродермию. Изобретение является простым, точным, быстрым и бюджетным методом ранней диагностики псориатической эритродермии в кратчайшие сроки после поступления больного и являются ключевыми в принятии решения о назначении специфической терапии. 2 пр.

 

Изобретение относится к медицине, в частности дерматовенерологии и патологической анатомии.

Известен способ диагностики псориатической эритродермии путем изучения клинических, анамнестических и катамнестических данных, а также гистологического исследования (Marti Jill Rothe, Megan L, Bernstein BS et al. Life-threating erythroderma: diagnosing and treating the «red man». Clinics in Dermatology 2005; 23: 206-217).

Недостатком этого способа является то, что при диагностике не используются специфические биомаркеры. Клинические, анамнестические и катамнестические данные являются неспецифическими для верификации диагноза эритродермии псориатической, а в ряде случаев критерии гистологического анализа, такие как псориазиформный акантоз, гипер/паракератоз, гипогранулез, нейтрофилы в эпидермисе и дерме, не могут быть точно определены ни на какой стадии болезни.

Ближайшим к заявляемому является способ диагностики псориаза с помощью изучения экспрессии биомаркеров S100, А7, А8 и А9 (Villanova F, Di Meglio P, Nestle F.O, et al. Biomarkers in psoriasis and psoriatic arthritis. Ann Rheum Dis 2012; 72: Suppl 2: 104-10).

Недостатком способа, выбранного в качестве прототипа, является то, что эти маркеры являются распространенными воспалительными медиаторами, которые высоко экспрессируются не только при специфических заболеваниях, таких как псориаз, но также и при других воспалительных кожных заболеваниях. Применение вышеперечисленных биомаркеров для диагностики псориатической эритродермии приводит к постановке ошибочного диагноза и назначению нерациональной терапии.

Другим недостатком способа является отсутствие единого биомаркера для диагностики псориатической эритродермии. Использование единовременно нескольких биомаркеров приводит к поздней постановке диагноза и большим денежным затратам.

Задачей настоящего изобретения является повышение точности диагностики при удешевлении способа.

Технический результат поставленной задачи достигается тем, что в способе диагностики псориатической эритродермии, заключающемся в иммуногистохимическом исследовании, согласно изобретению при наличии выраженной экспрессии биомаркера IL-36γ в виде послойного позитивного окрашивания ядер и цитоплазматической мембраны клеток шиповатого и зернистого слоев эпидермиса диагностируют псориатическую эритродермию.

Патогенетической основой IL-36γ является то, что он вызывает производство типичных для псориаза цитокинов IL-12, IL-23 и TNF alfa. Это способствует воспалению кожи, действуя на кератиноциты, дендритные клетки (расположенные в эпидермисе) и косвенно на T-лимфоциты. Важным механизмом окрашивания этих слоев эпидермиса при использовании IL-36γ является то, что при псориатической эритродермии происходит хемотаксис нейтрофилов и скопление их в шиповатом и зернистых слоях.

Определение экспрессии биомаркера IL-36γ в биоптатах кожи пациентов позволяет с высокой точностью диагностировать эритродермию псориатическую в ранние сроки, оптимизировать терапию уже на ранних стадиях заболевания, что имеет существенное значение в прогнозе заболевания.

Выявление экспрессии биомаркера IL-36γ при диагностике псориатической эритродермии, которое выполняется в первые 3 суток от момента поступления больного, имеет важное значение, так как пациенты поступают в тяжелом состоянии, с признаками нарушения электролитного дисбаланса и сопутствующими патологиями. В клинической практике своевременная точная диагностика и знание основного заболевания, вызвавшего эритродермию, имеет огромное значение для назначения адекватной терапии и профилактики. При этом можно избежать назначения системных глюкокортикостероидных гормонов и осложнений терапии.

Наряду с этим, выявление случаев псориатической эритродермии посредством морфологического определения биомаркера IL-36γ в ранние сроки позволяет сократить сроки исследования внутренних органов и снизить денежные затраты.

Способ осуществляется следующим образом. При выявлении у поступивших больных эритродермии (диффузное покраснение кожи), имеющих в анамнезе хроническое заболевание кожи или без предшествующих дерматозов, выполняется биопсия кожи из наиболее инфильтрированного участка и направляется на гистологическое и иммуногистохимическое исследование (ИГХ). После стандартной проводки на парафиновых срезах выполняется иммуногистохимическое исследование по схеме, рекомендуемой фирмой производителя, используя моноклональные мышиные IgG1 античеловеческие IL-36γ антитела (ab156783, Abcam, Cambridge, MA, USA; в разведении 1:1500). Визуализация выполняется красящим компонентом Real (Дако, Гамбург, Германия) с Fast Red хромогеном. Положительным результатом ИГХ реакций является наличие специфического послойного позитивного окрашивания ядер и цитоплазматической мембраны клеток эпидермиса при экспрессии вышеуказанного маркера.

Пример 1. В дерматологическое отделение Ленинградского областного центра специализированных видов медицинской помощи 12.02.2015 г. (выписной эпикриз №15752) поступила больная К., 42 л., с жалобами на поражение кожи всего кожного покрова. Считает себя больной в течение 1 месяца, когда впервые появились пятна в области живота. При обращении к дерматологу по месту жительства выставлялись различные диагнозы: экзема, экзематид, аллергический дерматит и назначена наружная горманальная терапия. Через 4 дня от начала лечения кожный процесс начал распространяться и за 1 день охватил весь кожный покров. На момент осмотра вся кожа была красного цвета, инфильтрирована, утолщена, активно шелушилась. На ладонях и подошвах наблюдался гиперкератоз. При гистологическом исследовании выявлены: в эпидермисе ортокератоз, паракератоз, псориазиформный (колбовидный) акантоз. В дерме периваскулярный скудный инфильтрат преимущественно из лимфоцитов.

При иммуногистохимическом исследовании с использованием биомаркера IL-36γ наблюдается резко выраженное послойное специфическое окрашивание ядер и цитоплазматической мембраны клеток шиповатого и зернистого слоев.

На основании применения заявляемого способа диагностики поставлен диагноз: эритродермия псориатическая.

Пример 2. Больной З., 39 л., доставлен в университетскую клинику Бонн, Германия, 24.05.2015 г. №236/15 с клинической картиной диффузного покраснения кожи. При осмотре обнаружено универсальное покраснение всего кожного покрова, утолщение ногтевых пластинок, озноб и общая интоксикация. Выполнили биопсию кожи из наиболее инфильтрированного участка. Из анамнеза известно, что болеет вульгарным псориазом с 15 лет. Болезнь протекала с периодической ремиссией и обострением, но тотального поражения никогда не наблюдалась. При проведении гистологического исследования выявлены паракератоз, гипогранулез, неравномерный акантоз. В дерме выявляется периваскулярный лимоцитарный инфильтрат с примесью небольшого числа нейтрофилов. В связи с отсутствием специфических гистологических признаков, характеризующих псориаз, биоптат кожи направлен на ИГХ исследование.

При ИГХ исследовании с использованием биомаркера IL-36γ наблюдается резко выраженное послойное специфическое окрашивание ядер и цитоплазматической мембраны клеток всех слоев эпидермиса.

На основании применения заявляемого способа диагностики поставлен диагноз: эритродермия псориатическая.

Заявляемый способ является простым, точным, быстрым и бюджетным методом ранней диагностики псориатической эритродермии. Выполнение заявляемого способа можно осуществлять в кратчайшие сроки после поступления больного. Учитывая отсутствие в ряде случаев анамнеза, специфических гистологических признаков и тяжелое торпидное течение заболевания, фактор времени и точность диагноза являются ключевыми в принятии решения о назначении специфической терапии.

Заявляемый способ доступен врачам дерматопатологам, патологоанатомам и не требует проведения большого количества лабораторных и инструментальных исследований для постановки диагноза.

Способ позволяет в ранние сроки диагностировать псориатическую эритродермию и назначать адекватную системную терапию и профилактику обострения заболевания.

Способ диагностики псориатической эритродермии, заключающийся в иммуногистохимическом исследовании, отличающийся тем, что при наличии выраженной экспрессии биомаркера IL-36γ в виде послойного позитивного окрашивания ядер и цитоплазматической мембраны клеток шиповатого и зернистого слоев эпидермиса диагностируют псориатическую эритродермию.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области медицины, а именно к онкостоматологии и лабораторной диагностике, и касается прогнозирования риска развития новообразований слизистой оболочки полости рта у лиц старше 40 лет.

Изобретение относится к экспериментальной медицине в области оториноларингологии и может быть использовано для оценки протективного действия фармакологического препарата при острой сенсоневральной тугоухости (ОСНТ) в эксперименте.

Изобретение относится к области медицины, а именно к судебной медицине, и может быть использовано для определения давности смерти человека на поздних сроках посмертного периода по величине оптической плотности синовиальной жидкости коленного сустава трупа.

Изобретение относится к медицине, а именно к терапии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики острого бронхита и острой пневмонии. Сущность способа: у пациента с клинической картиной острой респираторной инфекции, сопровождающейся бронхо-легочным синдромом, определяют в слюне содержание уксусной, валериановой и изокапроновой кислот.
Изобретение относится к медицине, а именно к онкоурологии. Определяют среднекубическую величину новообразования магнитно-резонансной томографией.

Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано при отборе проб биоматериала для получения достоверных данных по содержанию макро- и микроэлементов шерсти крупного рогатого скота.
Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, иммунологии, и касается способа прогнозирования невынашивания беременности в первой половине гестации у женщин с урогенитальной инфекцией.
Изобретение относится к области медицины и предназначено для оценки риска прогрессирования хронической болезни почек (ХБП) у детей. У ребенка с подозрением на ХБП забирают кровь из периферической вены и с помощью метода аллель-специфичной полимеразной цепной реакции проводят идентификацию однонуклеотидных полиморфизмов генов ангиотензин-превращающего фермента (АСЕ) Alu Ins/Del I>D, ангиотензина (AGT) Thr174Met и Met235Thr, рецепторов 1 типа ангиотензина 2 (R1AGT) С1166С и эндотелина-1 (ЕТ-1) Lys198Asn.
Изобретение относится к медицине, а именно к неонатологии, и может быть использовано при прогнозировании летального исхода у недоношенных новорожденных при церебральной ишемии средней степени тяжести, обусловленной врожденной цитомегаловирусной инфекцией.

Изобретение относится к медицине, а именно к гемокоагулологии, и касается способа выявления в крови продуктов паракоагуляции. Способ выявления в крови продуктов паракоагуляции, включающий забор крови, стабилизацию ее 3,8%-ным цитратом натрия, отделение плазмы от форменных элементов крови и определение в ней массы образующегося сгустка, при этом плазму разделяют по 1 мл на контрольную и опытные пробы, в контрольную пробу вводят 0,1 мл 0,9%-ного раствора хлорида натрия, в опытные - по 0,1 мл 0,03-0,09%-ного раствора гипохлорита натрия, проводят инкубацию проб в течение 30 мин при комнатной температуре, определяют в каждой пробе концентрацию фибриногена по методу Рутберг с последующим расчетом разности концентраций опытной пробы с максимальным значением и контрольной пробы, положительное значение которой 0,25 г/л и выше указывает на наличие в плазме продуктов паракоагуляции.

Изобретение относится к области медицины, в частности к молекулярной онкологии, и предназначено для прогнозирования выживаемости больных раком тела матки на основании уровня экспрессии гена ESR1. Осуществляют выделение тотальной РНК из тканевых проб матки с помощью метода гуанидин-тиоционат-фенол-хлороформной экстракции, получение кДНК с помощью обратной транскрипции на матрице РНК и последующую амплификацию в режиме ПЦР-РВ. Проводят расчет относительной экспрессии генетического локуса ESR1 с последующим вычислением соотношения экспрессии этого гена в опухолевой ткани относительно нормальной ткани матки по формуле K=REcancer/REnormal. При значении K в пределах 0,31≤KESR1≤0,81 прогнозируют благоприятный исход заболевания. При значении K в пределах 5,84≤KESR1≤9,32 прогнозируют неблагоприятный исход заболевания. Изобретение обеспечивает эффективное прогнозирование выживаемости больных раком тела матки. 2 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области медицины, в частности к акушерству и гинекологии, и предназначено для прогнозирования высокого риска репродуктивных потерь в первом триместре беременности. Из периферической венозной крови женщин выделяют ДНК с последующей амплификацией полиморфных вариантов A66G гена MTRR, -31С-Т (rs1143627) IL-1β, -174G-C (rs1800795) IL-6 и С677Т (rs1801133) MTHFR. При выявлении одного из четырех генотипов: -31СТ IL-1β / -174GG IL-6 / 677СТ MTHFR / 66GG MTRR; -31СТ IL-1β / -174СС IL-6 / 677СС MTHFR / 66AG MTRR; -31CC IL-1β / -174CC IL-6 / 677CC MTHFR/ 66AG MTRR; -31CC IL-1β / -174GC IL-6 / 677CT MTHFR/ 66AG MTRR прогнозируют высокий риск репродуктивных потерь в первом триместре беременности. Изобретение позволяет формировать среди женщин группы риска репродуктивных потерь в первом триместре беременности и своевременно реализовывать в этих группах необходимые лечебно-профилактические мероприятия. 1 ил., 1 табл., 7 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к способу оценки угрозы формирования у беременной гемической анемии при индуцирующем действии цитомегаловирусной инфекции в период обострения на структуру мембран эритроцитов. Способ заключается в определении в периферической крови титра антител IgG к цитомегаловирусу (ЦМВ), определении методом гель-электрофореза в мембранах эритроцитов периферической крови белка полосы-4.1, определении на мазках периферической крови цитофотометрически структуры мембран эритроцитов аппаратом «Mekos» с последующим анализом на установке «Pixera» по программе «BioVision». При титре антител IgG к ЦМВ до 1:1600, снижении белка полосы-4.1 до 4,11±0,08%, увеличении в периферической крови количества эхиноцитов до 8,80±0,09%, а дегенеративных форм эритроцитов до 21,0±1,30% оценивают угрозу формирования у беременной гемической анемии. 2 ил.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для оценки эффективности эндотелиопротекторной терапии у экспериментальных животных после реконструктивных операций на брюшном отделе аорты. Для этого через 1 месяц после операции в крови животных определяют уровень супероксиддисмутазы (СОД), малонового диальдегида (МДА), оксида азота(II) NO. На срезах из зоны пластики аорты определяют экспрессию актина (а-ГМА), CD34 и трансформирующий фактор роста (TGFβ) с помощью иммуногистохимических методов. При повышении секреции оксида азота(II) и уровня супероксиддисмутазы, снижении уровня малонового диальдегида, низкой экспрессии а-ГМА и TGFβ, повышении экспрессии CD34 делают вывод об отсутствии предпосылок для развития гиперплазии эндотелия и эффективности проведенной терапии. Изобретение позволяет проводить коррекцию эндотелиотропной терапии до развития гиперплазии неоинтимы. 3 табл., 6 ил.

Изобретение относится к области медицины, в частности к иммунологии и педиатрии, и предназначено для диагностики тимомегалии у детей. Проводят ПЦР в режиме реального времени с использованием соответствующих праймеров и флюоресцентно-меченого олигонуклеотида с последующим расчетом числа копий Т-рецепторных эксцизионных колец (ТРЭК) по стандартной кривой, построенной по разведениям плазмиды, представленной SEQ ID NO: 1 с известной концентрацией ДНК ТРЭК. Тимомегалию диагностируют при снижении уровня ТРЭК ниже 25,36 копий на 1 тыс. лимфоцитов у детей в возрасте до 2 лет, ниже 14,71 копий на 1 тыс. лимфоцитов у детей 3-6 лет и ниже 4,82 копий на 1 тыс. лимфоцитов у детей 7-10 лет. Изобретение обеспечивает эффективное определение тимомегалии у детей по уровню ТРЭК, что позволит своевременно назначить иммунокорригирующую терапию. 1 ил., 1 табл., 3 пр.

Группа изобретений относится к области медицины, а именно к диагностике. Способ идентификации и количественного определения специфической молекулы-мишени в образце, включающий: тестирование и выбор первого лиганда или множества первых лигандов и второго лиганда или множества вторых лигандов, соединенных с детектируемой меткой, в отношении связывания с молекулой-мишенью; или выбор первого лиганда или множества первых лигандов и второго лиганда или множества вторых лигандов, соединенных с детектируемой меткой, в отношении связывания с молекулой-мишенью; скрининг образца, содержащего специфическую молекулу-мишень, в высокопроизводительном скрининговом анализе, включающий добавление первого и второго лиганда, каждый из которых имеет первую и вторую детектируемую метку, связывание каждого из первого и второго лигандов с отдельными и специфическими сайтами на специфической молекуле-мишени, где скрининговый анализ не требует стадии промывания; обнаружение излучения света, когда первый и второй лиганды специфически связываются со специфической молекулой-мишенью; измерение интенсивности излучаемого света и по интенсивности света проводят идентификацию и количественное определение специфической молекулы-мишени в образце. Способ количественного определения специфического белка в образце. Способ скрининга потенциального терапевтического соединения. Способ скрининга потенциального терапевтического соединения. Способ диагностики заболевания или расстройства. Вышеописанная группа решений позволяет эффективно идентифицировать и определить количество специфической молекулы-мишени в образце. 6 н. и 26 з.п. ф-лы, 19 ил., 1 пр.

Изобретение относится к медицине, в частности к лабораторным методам исследования, и может быть использовано для диагностики сахарного диабета. Способ включает биохимическое исследование крови у пациентов, где в плазме / сыворотке крови определяют уровень метилглиоксаль-модифицированных липопротеидов низкой плотности путем иммунометрического сэндвич-метода иммуноферментного анализа. Затем уровень метилглиоксаль-модифицированных липопротеидов низкой плотности в определяемом образце рассчитывают в условных единицах относительно контрольного образца (cut-off): OD450 образца/OD450 cut-off . При значении ≥1 судят о наличии сахарного диабета. Изобретение обеспечивает повышение эффективности и точности диагностики сахарного диабета и осуществление контроля за эффективностью проводимой терапии данного заболевания. 3 пр., 2 ил.

Изобретение относится к области ветеринарии и молекулярной биотехнологии и предназначено для диагностики анаплазмоза рогатого скота методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Осуществляют выявление фрагмента гена MSP4, кодирующего ДНК анаплазм, с использованием 10 различных пар прямых и обратных олигонуклеотидных праймеров. Проводят электрофоретическое определение размера амплифицируемого фрагмента нуклеотидной последовательности. По наличию на электрофореграмме фрагментов соответствующей длины диагностируют в крови животного кровепаразитов Anaplasma marginale или Anaplasma ovis. Изобретение обеспечивает эффективный способ обнаружения фрагментов генома Anaplasma marginale и Anaplasma ovis методом ПЦР с использованием специфических олигонуклеотидных праймеров. 3 табл.

Изобретение относится к способу определения пола эмбриона, при котором пол эмбриона определяется при помощи, по меньшей мере, одного неинвазивного (неразрушающего), по меньшей мере, по отношению к яйцу способа определения. Причем при помощи неинвазивного способа определения устанавливается, по меньшей мере, одно характеризующее концентрацию эстрадиола в яйце значение эстрадиола. В зависимости от значения эстрадиола определяется пол. При помощи неинвазивного способа определения устанавливается химический сдвиг атомов водорода и/или углерода в яйце, и в зависимости от установленного сдвига определяется значение эстрадиола. Использование изобретения позволит просто и точно на раннем этапе определить пол эмбриона. 5 з.п. ф-лы, 6 ил.

Изобретение относится к области медицины, а именно к оториноларингологии. Для прогнозирования абсцесса при остром тонзиллите проводят определение балльного индекса по результатам суммирования баллов. Боли в горле при глотании присваивают 1 балл, инфильтрации передней и (или) задней дужки миндалин - 1 балл, отеку околоминдальной клетчатки - 1 балл, смещению небной миндалины к средней линии - 1 балл, нормальному значению ΡΟΗ - 0 баллов, компенсации эндогенной интоксикации - 1 балл, субкомпенсации эндогенной интоксикации - 2 балла, декомпенсации эндогенной интоксикации - 4 балла. При сумме 4-5 баллов вероятность возникновения абсцесса составляет 0-15%, при сумме 6 баллов вероятность возникновения абсцесса составляет 50-60%, при сумме 8 баллов вероятность возникновения абсцесса составляет 80-90%. Способ позволяет в ранние сроки прогнозировать абсцесс при остром тонзиллите без больших материальных затрат. 1 табл., 3 пр.
Наверх