Способ прогнозирования инфекционного осложнения атопического дерматита у детей при специфической иммунотерапии



Владельцы патента RU 2613301:

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Тихоокеанский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ГБОУ ВПО ТГМУ Минздрава России) (RU)
Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Российский университет дружбы народов" Министерства образования и науки Российской Федерации (ФГАОУ ВО РУДН Минобрнауки РФ) (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к аллергологии и дерматологии, и может быть использовано для прогнозирования инфекционного осложнения атопического дерматита у детей при специфической иммунотерапии. Для этого перед началом проведения специфической иммунотерапии (АСИТ) проводят определение фагоцитарной активности гранулярных нейтрофилов по фагоцитарному показателю (ФП) и фагоцитарному числу (ФЧ) в крови ребенка. При ФП ниже 45,5±1,02% и ФЧ ниже 2,14±0,4 микробных прогнозируют развитие инфекционного осложнения атопического дерматита вирусной, бактериальной или грибковой этиологии. Использование данного способа позволяет уменьшить частоту инфекционных осложнений атопического дерматита при АСИТ у детей, повышая эффективность дечения тяжелых и стойких форм заболевания. 3 пр.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к аллергологии - клинической иммунологии, педиатрии, дерматологии, и может быть использовано в клинике для прогнозирования развития инфекционных осложнений при проведении аллергенспецифической иммунотерапии у детей со среднетяжелым и тяжелым течением атопического дерматита.

Атопический дерматит (АД) - хроническое воспалительное аллергическое заболевание (AЗ) кожи, связанное с изменением функции клеточного и гуморального звеньев иммунитета. Как правило, АД возникает в раннем детском возрасте у лиц с наследственной предрасположенностью к атопическим болезням, имеет рецидивирующее течение и сопровождается изнурительным зудом, что приводит к физической и психоэмоциональной дезадаптации пациента и его семьи (Ballardini N.et al., 2009, Turner J.D. et al., 2006). Кроме того, в последние два десятилетия во многих странах мира отмечается увеличение частоты хронических форм АД с непрерывно-рецидивирующим течением, резистентных к традиционной терапии. Одним из факторов, утяжеляющих АД, является агрессивное распространение бактериальной, грибковой и вирусной флоры. Постоянное расчесывание кожи при АД приводит к нарушению ее защитных, барьерных свойств, что способствует присоединению вторичной инфекции. Инфекционные осложнения встречаются у 25-34% детей, больных АД (Hata T.R., Gallo R. 2008, Huang J.T. et al., 2009).

Лечение AЗ на протяжении длительного времени было направлено в основном на устранение действия провоцирующих факторов и коррекцию развития патофизиологических механизмов. В большинстве случаев разработанные схемы применения различных групп препаратов позволяют контролировать состояние больных АД и купировать основные симптомы заболевания. Однако они не оказывают влияния на патогенетические механизмы аллергического воспаления, клинически недостаточно эффективны, высокозатратны, нередко трудновыполнимы и могут приводить к развитию побочных реакций. Существует настоятельная необходимость в эффективных и безопасных методах лечения АД, которые давали бы возможность раннего вмешательства и длительного контроля над течением заболевания (Bieber Т., 2008; Tokura Y., 2010; Wasserbauer N. et al., 2009; Watson W. et al., 2011). Аллергенспецифическая иммунотерапия (АСИТ) является единственным противоаллергическим лечением, действующим на все патогенетически значимые звенья аллергического воспаления и обладающим длительным профилактическим эффектом после завершения терапии. Благодаря АСИТ формируется снижение гиперчувствительности к аллергену, происходит угнетение признаков аллергического воспаления, перестройка иммунного ответа. Приоритетно применение АСИТ при таких IgE-опосредованных заболеваниях, как бронхиальная астма (БА) и аллергический ринит (АР), однако сведения о применении АСИТ при IgE-опосредованном АД немногочисленны и неоднозначны. Монотерапия АСИТ имеет побочные реакции и может провоцировать обострение герпетических, стафилококковых и других рецидивирующих инфекций (Cadario G. et al., 2007).

Известен способ прогнозирования течения АД, при котором одновременно выделяют эпителиоциты в браш-биоптатах слизистой ротоглотки, определяют электрокинетическую активность ядер буккальных эпителиоцитов (ЭлА), индекс инфицирования (ИИ), индекс адгезии (ИА) и берут смывы с пораженных участков кожи площадью 2 см2, в которых определяют количество КОЕ/см2 S. aureus. При значении ИИ>70%, ИА>100-150 микробных клеток на эпителиоцит, КОЕ>200/см2 и ЭлА<20% при первичном осмотре прогнозируют тяжелое течение АД, а при ИИ<30%, ИА<50 микробных клеток на эпителиоцит, KOE<50/cм2 и ЭлА>30% прогнозируют легкое течение АД (RU 2310195, G01N 33/48).

Основным недостатком данного аналога является то, что он не предназначен для прогнозирования развития инфекционных осложнений при проведении АСИТ у детей со среднетяжелой и тяжелой формой IgE-опосредованного АД.

Известен способ прогнозирования развития осложненных форм АД у детей с вторичной инфекцией, при котором определяют факторы риска: наличие семейной отягощенности по AЗ и очагов хронической инфекции, неонатальные, антенатальные, алиментарные, микроэкологические, макроэкологические. По конкретным данным проводят расчет значений дискриминантных функций (fb f2, fs) на основе экспериментально определенных коэффициентов с помощью IBM PC. При наибольшем ее значении прогнозируют вероятность развития АД у детей и его осложненных форм вторичной инфекцией бактериальной и грибковой этиологии (RU 2297797, А61В 10/00).

Основным недостатком данного аналога является то, что он не предназначен для прогнозирования развития инфекционных осложнений при проведении АСИТ у детей со среднетяжелой и тяжелой формой IgE-опосредованного АД.

Наиболее близким аналогом-прототипом является способ прогнозирования осложнения АД у ребенка (RU 2528908, G01N 33/53), согласно которому во время лечения младенческой формы и детской формы АД в стадии обострения проводят определение содержания в сыворотке крови ребенка компонента комплемента С3, интерлейкина-6 и интерлейкина-10. При содержании в сыворотке крови компонента комплемента С3 меньше 0,8 мг/мл, интерлейкина-6 больше 20,9 нг/мл и интерлейкина-10 больше 5,6 нг/мл прогнозируют развитие инфекционного осложнения АД у ребенка.

Основным недостатком прототипа является то, что он не предназначен для прогнозирования развития инфекционных осложнений при проведении АСИТ у детей со среднетяжелой и тяжелой формой IgE-опосредованного АД.

Задачей заявляемого изобретения является разработка способа определения иммунологических показателей для прогнозирования развития инфекционных осложнений при проведении АСИТ у детей со среднетяжелой и тяжелой формой IgE-опосредованного АД.

Поставленная задача решается тем, что в способе прогнозирования инфекционного осложнения у детей с АД при проведении АСИТ на основании иммунологических показателей, перед началом проведения АСИТ проводят определение содержания показателей фагоцитарной активности гранулярных нейтрофилов: фагоцитарный показатель (ФП) и фагоцитарное число (ФЧ) в крови ребенка, при котором при содержании ФП ниже 45,5±1,02% и ФЧ ниже 2,14±0,4 микробных тел прогнозируют развитие инфекционного осложнения вирусной, бактериальной или грибковой этиологии.

В основу заявляемого изобретения положена обеспечивающая решение поставленной задачи новая совокупность отличительных от прототипа признаков, взаимно дополняющих друг друга иммунологических показателей фагоцитарной активности нейтрофильных гранулоцитов: ФП и ФЧ, информативных для достоверного прогноза развития инфекционных осложнений при проведении АСИТ детям с IgE-опосредованным АД среднетяжелого и тяжелого течения. Мониторирование указанных иммунологических параметров позволит предотвратить угрозу развития инфекционных осложнений при включении АСИТ в программу комплексного лечения.

Из патентно-технической литературы, практики обследования и лечения детей с АД неизвестно о способе прогнозирования развития инфекционного осложнения у детей со среднетяжелой и тяжелой формой АД при проведении АСИТ, который был бы идентичен заявляемому.

Отсюда правомерен вывод о соответствии заявляемого решения критерию «новизна».

Технический результат заключается в повышении эффективности специфического лечения и достоверном уменьшении частоты инфекционных осложнений АД при АСИТ аллергенами клеща домашней пыли (АКДП) у детей, что позволяет не только управлять тяжелыми и стойкими формами АД, осуществлять полный контроль над болезнью, но и повысить качество жизни ребенка.

Указанная выше совокупность существенных признаков необходима и достаточна для получения технического результата - прогноза развития инфекционных осложнений при проведении АСИТ у детей со среднетяжелой и тяжелой формой IgE-опосредованного АД, который обеспечивается определением значений взаимно дополняющих друг друга иммунологических показателей, информативных для данного прогноза, и сопоставлением этих показателей с их пороговыми значениями при проведении АСИТ. Между существующими признаками и решаемой задачей существует причинно-следственная связь, где каждый признак необходим и влияет на получение технического результата, а вместе взятые признаки достаточны для его получения. Правомерен вывод о соответствии заявляемого технического решения критерию «изобретательский уровень».

Предлагаемый способ может быть реализован многократно с использованием присущих ему существенных признаков, а значит, заявляемое техническое решение соответствует критерию «промышленная применимость».

Заявляемое изобретение апробировано при лечении АД у детей в аллергопульмонологическом отделении ДГКБ г. Владивостока. Ниже приведены результаты, поясняющие данный способ лечения АД.

При проведении АСИТ детям с IgЕ-опосредованным АД определение фагоцитарной активности нейтрофилов - ФП и ФЧ в крови ребенка, при котором ФП ниже 25,5±1,02% и ФЧ ниже 2,14±0,4 м.т., прогнозирует развитие инфекционного осложнения вирусной, бактериальной или грибковой этиологии, что позволяет рекомендовать эти показатели в качестве критериев оценки эффективности, адекватности и своевременности проведения иммунотропной терапии.

Пример 1. Больная Л., 11 лет.

Диагноз: АД, подростковая форма, среднетяжелое течение, стадия ремиссии.

Во время проведения стационарного лечения ребенку провели иммунологическое обследование с определением содержания в крови ФП, ФЧ и специфического IgE. Содержание в крови ФЧ составило 1,9 м.т. (норма 3,0-5,0 м.т.), ФП - 44,2% (норма 60-80%) и специфический IgE к АКДП - 98,5 МЕ/мл (>75,0 МЕ/мл - исключительно высокий).

Ребенок получал АСИТ причинно-значимыми АКДП подкожно, в предплечье, в возрастающих дозах. После установления значений ФП и ФЧ было спрогнозировано развитие инфекционного осложнения при проведении АСИТ у ребенка с Ig-E опосредованным АД. Данный прогноз подтвердился, так как в течение 7 дней после начала АСИТ у ребенка развилась пиодермия.

Пример 2. Больная П., 13 лет.

Диагноз: АД, подростковая форма, среднетяжелое течение, стадия ремиссии.

Страдает АД с 1-го года жизни (более 12 лет). Течение заболевания круглогодичное с обострениями в осенне-зимний период, заметные клинические проявления заболевания более чем 260 дней в году.

Во время проведения лечения в стационаре ребенку провели иммунологическое обследование с определением содержания в крови ФП, ФЧ и специфического IgE. Содержание в крови ФЧ составило 2,1 м.т. (норма 3,0-5,0 м.т.), ФП - 41,6% (норма 60-80%) и специфический IgE к АКДП - 104,7 МЕ/мл (>75,0 МЕ/мл - исключительно высокий).

В связи полученными результатами обследования было спрогнозировано развитие инфекционного осложнения АД у ребенка при проведении АСИТ причинно-значимыми АКДП. Данный прогноз подтвердился, так как в течение 4 дней после начала АСИТ у ребенка диагностировали герпетический дерматит.

Пример 3. Больная Ж., 9 лет.

Диагноз: АД, подростковая форма, среднетяжелое течение, стадия ремиссии.

АД у ребенка с первых месяцев жизни, течение заболевания круглогодичное с обострениями в осенне-зимний период.

Во время проведения стационарного лечения ребенку провели иммунологическое обследование с определением содержания в крови ФП, ФЧ и специфического IgE. Содержание в крови ФЧ составило 2,04 м. т. (норма 3,0-5,0 м.т.), ФП - 43,6% (норма 60-80%) и специфический IgE к АКДП - 98,1 МЕ/мл (>75,0 МЕ/мл - исключительно высокий).

У ребенка с АД было спрогнозировано развитие инфекционного осложнения при проведении АСИТ причинно-значимыми АКДП. Через 6 дней после начала АСИТ у ребенка была диагностирована пиодермия.

Таким образом, в примерах показаны преимущества заявляемого технического решения по сравнению с прототипом, заключающиеся в обеспечении прогнозирования развития инфекционных осложнений во время проведения АСИТ причинно-значимыми АКДП у детей с IgE-опосредованным АД среднетяжелого и тяжелого течения.

Список литературы

1. Ballardini N., Johansson С, Lilja G. Enhanced expression of the antimicrobial peptide LL-37 in lesional skin of adults with atopic eczema. Br. J. Dermatol. 161: 40-47, 2009.

2. Bieber T. Atopic dermatitis. N. Engl. J. Med. 358: 1483-1494, 2008.

3. Cadario G., Galluccio A.G., Pezza M. et al. Sublingual immunotherapy efficacy in patients with atopic dermatitis and house dust mites sensitivity: a prospective pilot study. Curr. Med. Res. Opin. 23(10): 2503-2506, 2007.

4. Hata T.R., Gallo R. Antimicrobial peptides, skin infections, and atopic dermatitis. Semin. Cutan. Med. Surg. 27: 144-150, 2008.

5. Huang J.T., Abrams M., Tlougan В., Rademaker A., Paller A.S. Treatment of Staphylococcus aureus colonization in atopic dermatitis decreases disease severity. Pediatrics. 123: 808-814, 2009.

6. Tokura Y. Extrinsic and intrinsic types of atopic dermatitis. J. Dermatol. Sci. 58: 1-7, 2010.

7. Turner J. D., Schwart R. A. Atopic dermatitis. A clinical challenge. Acta Dermatol. 115: 2, 59-68, 2006.

8. Wasserbauer N.. Ballow M. Atopic dermatitis. Am. J. Med. 122: 121-125, 2009.

9. Watson W., Kapur S. Atopic dermatitis. Allergy Asthma Clin. Immunol. 7(1): S4, 2011.

10. RU 2310195, G01N 33/48, дата публикации 20.07.2007 – аналог.

11. RU 2297797, A61B 10/00, дата публикации 20.12.1996 – аналог.

12. RU 2528908, G01N 33/53, дата публикации 20.09.2014 – прототип.

Способ прогнозирования инфекционного осложнения атопического дерматита у детей при специфической иммунотерапии на основании иммунологических показателей, отличающийся тем, что перед началом проведения специфической иммунотерапии (АСИТ) проводят определение фагоцитарной активности гранулярных нейтрофилов по фагоцитарному показателю (ФП) и фагоцитарному числу (ФЧ) в крови ребенка, при котором содержание ФП ниже 45,5±1,02% и ФЧ ниже 2,14±0,4 микробных тел позволяет прогнозировать развитие инфекционного осложнения вирусной, бактериальной или грибковой этиологии.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области ветеринарной и медицинской гельминтологии, в частности к иммунологическому методу обнаружения антигена личинок анизакид в мышечной ткани рыбы, и может быть рекомендовано для ветеринарно-санитарной экспертизы морепродуктов.

Изобретение относится к области иммунодиагностики и может быть использовано для иммунодиагностического тестирования биологического образца. Карта иммунодиагностического тестирования включает плоскую подложку и множество содержащихся на ней прозрачных колонок с инертным тестовым материалом, выполненным с возможностью формирования реакции агглютинации при добавлении биологического образца и реагента.

Изобретение относится к медицине, а именно к профессиональной патологии и пульмонологии, и может быть использовано для диагностики профессиональной хронической обструктивной болезни легких, сформировавшейся в условиях действия токсических промаэрозолей.

Изобретение относится к области молекулярной онкологии и может быть использовано для дифференциальной диагностики рака желудка различных гистологических типов. Способ включает получение ДНК, выделенной из биопсийного материала; амплификацию фрагментов локусов GSTP1, NFKB1 и HV2 методом полимеразной цепной реакции в реальном времени (ПЦР-РВ) с помощью набора высокоспецифичных праймеров; количественную интерпретацию результатов амплификации.

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и может быть использовано для оценки дисфункции иммунитета у детей дошкольного возраста с рецидивирующей респираторной инфекцией, проживающих на территориях вокруг химически опасных производств.

Изобретение относится к медицине, а именно к онкогинекологии, и может быть использовано для прогноза возникновения рецидива у больных раком вульвы. Для этого в ткани больных раком вульвы иммуногистохимическим методом оценивают экспрессию лимфоцитарных маркеров CD4+ и CD8+, рассчитывают коэффициент отношения CD4+/CD8+.

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использовано для прогноза развития увеита у пациентов с ювенильным идиопатическим артритом (ЮИА).

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к электрохимическому иммуноанализу. Предложен способ определения содержания грамотрицательных бактерий в анализируемой среде.

Изобретение относится к медицине, а именно гастроэнтерологии, и может быть использовано для определения генерализации злокачественного процесса после оперативного лечения рака головки поджелудочной железы.

Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике, и может быть использовано для оценки угрозы формирования фетоплацентарной недостаточности при оценке индуцирующего действия обострения цитомегаловирусной инфекции на содержание 7-дегидроксихолестерина на третьем триместре гестации.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для определения присутствия белка STEAP-1 в биологическом образце, полученном от индивида, имеющего подозрение на метастатический рак предстательной железы. Для этого биологический образец подвергают воздействию меченного 89цирконием антитела против STEAP-1 и измеряют связывание меченного 89цирконием антитела против STEAP-1 с белком в биологическом образце. При этом связывание меченного 89цирконием антитела против STEAP-1 с белком является показателем присутствия белка STEAP-1 в образце. Меченное 89цирконием антитело против STEAP-1 содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую гипервариабельную область CDR-H1, содержащую GYSITSDYAWN, CDR-H2, содержащую GYISNSGSTSYNPSLKS, и CDR-H3, содержащую ERNYDYDDYYYAMDY; и вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR-L1, содержащую KSSQSLLYRSNQKNYLA, CDR-L2, содержащую WASTRES, и CDR-L3, содержащую QQYYNYPRT, и меченное 89цирконием антитело против STEAP-1 представляет собой 89цирконий-десферриоксамид (Df) антитело против STEAP-1. Изобретение позволяет определять присутствия белка STEAP-1 в биологическом образце, полученном от индивида, с метастатическим раком предстательной железы. 5 з.п. ф-лы, 2 табл., 30 ил., 10 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике, и может быть использовано для прогнозирования синдрома задержки роста плода в третьем триместре гестации при обострении хронического простого бронхита, обусловленного гриппом A(H3N2), у женщин во втором триместре беременности. Для этого определяют уровень антител к вирусу гриппа в сыворотке крови, полученной на 21-24 день заболевания, и оценивают его изменение по сравнению с сывороткой крови, полученной на 12-14 день заболевания, в баллах: 1 балл - нет роста титра антител; 2 балла - рост титра антител в 2 раза; 3 балла - рост титра антител в 4 раза; 4 балла - рост титра антител более чем в 4 раза) (А), оценивают содержание среднемолекулярных пептидов в плазме крови на 21-24 день заболевания (ед. оп. пл.) (В), определяют концентрацию фактора некроза опухоли - а на 21-24 день заболевания в сыворотке крови (пг/мл) (С), а затем с помощью дискриминантного уравнения рассчитывают величину дискриминантной функции: D=-2,790×А-149,616×В-0,121×С; и при D равной или больше -50,23 прогнозируют отсутствие синдрома задержки роста плода, а при D меньше -50,23 прогнозируют развитие синдрома задержки роста плода. Способ позволяет обоснованно и своевременно проводить лечебные мероприятия, направленные на профилактику синдрома задержки роста плода, при простоте его исполнения. 2 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике, и может быть использовано для прогнозирования внутриутробного инфицирования плода у женщин во втором триместре гестации при обострении хронического простого бронхита, обусловленного гриппом A(H3N2). Для этого определяют титр антител к вирусу гриппа A(H3N2) в сыворотке крови, полученной на 21-24 дни заболевания, и оценивают его изменение по сравнению с сывороткой крови, полученной на 12-14 день заболевания, в баллах: 1 балл - нет роста титра антител; 2 балла - рост титра антител в 2 раза; 3 балла - рост титра антител в 4 раза; 4 балла - рост титра антител более, чем в 4 раза (А), оценивают концентрацию интерферона-γ (пг/мл) (В), устанавливают содержание циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) (ед. оп. пл.) (С), а затем с помощью дискриминантного уравнения рассчитывают величину дискриминантной функции: D=-2,115×A-0,324×В-328,250×С, и при D равной или больше -82,67 прогнозируют отсутствие внутриутробного инфицирования плода, а при D меньше -82,67 прогнозируют внутриутробное инфицирование плода. Способ позволяет обоснованно и своевременно провести лечебно-профилактические мероприятия, направленные на профилактику внутриутробного инфицирования плода при простоте его исполнения. 2 пр.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использована для одновременного выявления представителей условных таксономических групп микроорганизмов, патогенных для человека и животных. Характеризуется использованием как минимум пяти иммунохроматографических стрип-тестов, размещенных в едином корпусе. При этом в первом и втором каналах корпуса устройства находятся стрип-тесты для выявления токсинов, в третьем канале - стрип-тест для выявления вегетативных форм бактерий, в четвертом - споровых форм бактерий, а в пятом - стрип-тест для выявления питательной среды культивирования вирусов и риккетсий. Тестирование ведут путем укладки корпуса иммунохроматических стрип-тестов в теплоизолирующий цефленовый пакет, состоящий из двух слоев цефлена, с теплоизолирующей прокладкой из пористого теплоизолирующего материала между ними, а корпус иммунохроматографических стрип-тестов внутри пакета нагревают источником постоянного тепла, причем отверстие пакета закрывают механическим зажимом и считают этот момент началом тестирования. Также предложено устройство для иммунохроматографического анализа. Группа изобретений позволяет увеличить производительность иммунохроматографического анализа, расширить температурный диапазон иммунохроматографического анализа от минус 20 до плюс 50°C, сократить время получения результата до 10 мин по сравнению с анализом при комнатной температуре (20 мин), при условии достижения одинаковой чувствительности, повысить чувствительность анализа по сравнению с анализом, проводимым при комнатной температуре. 2 н. и 7 з.п. ф-лы, 5 ил., 4 табл., 8 пр.
Изобретение относится к медицине и может быть использовано для выявления риска формирования Т-хелперного иммунодефицита у человека в условиях Арктики. Для этого осуществляют забор крови из вены и определяют общее количество лимфоцитов, малых лимфоцитов в лимфоцитограмме и содержание зрелых функционально активных Т-клеток CD3+. При содержании общего количества лимфоцитов меньше 1,5⋅109 кл/л и клеток CD3+ меньше 1,5⋅109 кл/л судят о риске формирования Т-хелперного дефицита. Изобретение позволяет выявить лиц, имеющих риск патологии, связанной с иммунодефицитом Т-хелперного звена иммунитета при профотборе для работы в экстремальных условиях Приарктического региона, а также с целью профилактики лиц, ведущих кочевой образ жизни. 6 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к трансплантации органов и клинической лабораторной диагностике, может быть использовано при ведении пациентов после трансплантации сердца для диагностики отторжения трансплантированного сердца. Сущность способа: в сыворотке крови определяют концентрацию PlGF-1 и при уровне P1GF-1 выше 5,33 пг/мл диагностируют острое клеточное отторжение. Преимущество изобретения заключается в обеспечении простоты, доступности, неинвазивности диагностики, сокращении времени ее проведения при одновременном достижении достоверного диагностического скрининга острого клеточного отторжения как в раннем, так и в отдаленном посттрансплантационных периодах у реципиентов сердца, а также в улучшении результатов трансплантации сердца, повышении выживаемости реципиентов путем своевременного определения показаний к внеплановой эндомиокардиальной биопсии, коронароангиографии и уточнения тактики ведения больных путем определения уровня концентрации PlGF-1 в сыворотке крови. 2 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для выявления антиотцовских антител после иммунизации женщин с идиопатическим привычным выкидышем лимфоцитами полового партнера. Женщинам двукратно с интервалом в один месяц на 5-9 день менструального цикла внутрикожно вводят партнерские лимфоциты в однократной дозе 50 млн клеток в 10-12 точек ладонной части предплечья. Затем через две недели получают сыворотку крови, в которую добавляют в соотношении 1:1 выделенные из цельной периферической венозной крови лимфоциты (CD3+) партнера, полученные в градиенте плотности фиколл-верографин 1,077 г/см3 в течение 10 минут при 1600 g в соотношении 500 мкл фиколла к 1000 мкл крови, разведенной в 2 раза фосфатно-солевым раствором. Далее инактивированную женскую сыворотку с полученными лимфоцитами партнера инкубируют в течение 30 минут при температуре 37°С, после чего добавляют антитела к Fc-фрагменту иммуноглобулина G в разведении 1:4 с фосфатно-солевым раствором в объеме 1:1 суспензии лимфоцитов и инкубируют в течение 30 минут при температуре 4°С. Методом проточной цитометрии определяют процент партнерских лимфоцитов (CD3+), покрытых антителами к Fc-фрагменту иммуноглобулина G партнера, которые соответствуют уровню антиотцовских антител в сыворотке женщин. Изобретение позволяет отразить динамику появления антиотцовских антилейкоцитарных антител после иммунизации указанных женщин. 3 ил., 1 табл., 1 пр.

Изобретение относится к медицине и касается способа получения бифункционального аффинного сорбента для хроматографической очистки иммуноглобулинов флуоресцирующих путем иммобилизации неосмектина с гетерологичными антигенами, дающими перекрестные реакции с иммуноглобулинами, где к сорбенту вносят водорастворимый антиген, проводят экспозицию, отмывают от несвязавшегося антигена, доводят рН и проводят одномоментную очистку иммуноглобулинов флуоресцирующих от несвязавшегося ФИТЦ и гетерологичных антител с контролем иммунологических показателей готовых препаратов в РИФ. Изобретение обеспечивает эффективную очистку иммуноглобулинов флуоресцирующих от несвязавшегося красителя и гетерологичных антител. 2 пр., 3 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической лабораторной диагностике. Сущность способа: осуществляют забор крови в пробирку, содержащую антикоагулянт, перемешивают и оставляют на 20 мин для свободного осаждения эритроцитов при комнатной температуре, после седиментации эритроцитов берут 0,5 мл лейкоцитарной взвеси и определяют в ней количество лейкоцитов любым способом (рутинным или автоматизированным), доводят ее концентрацию до величины 5*109 лейкоцитов/л дистиллированной водой, биологическую жидкость помещают в морозильную камеру при температуре -20°С до полного замораживания и используют ее после процесса размораживания для иммуноферментного определения спонтанной продукции цитокинов. Применение изобретения обеспечивает точность определения концентрации цитокинов методом ИФА, снижается индивидуальная вариабельность показателей. 1 табл.

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к оптическим биосенсорам, предназначенным для определения белковых молекул в малых концентрациях. Заявленный флуоресцентный оптический ДНК-биосенсор состоит из подложки, адсорбированной на подложке тонкой пленки комплекса ДНК-белок, причем подложка выполнена из монокристаллического кремния с ориентацией поверхности (100), размером 18×18 мм и толщиной 380±20 мкм, шероховатость рабочей поверхности ≤0,06, а содержание белка в тонкой пленке составляет от 10-15 до 10-9 моль/л. Технический результат - разработка флуоресцентного оптического ДНК-биосенсора, обладающего возможностью многократного его использования без потери чувствительности, в частности, при определении белковых молекул в малых концентрациях. 3 табл.
Наверх