Способ диагностики целиакии


 


Владельцы патента RU 2613877:

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Санкт-Петербургский государственный педиатрический медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ГБОУ ВПО СПбГПМУ Минздрава России) (RU)

Изобретение относится к медицине, в частности к гастроэнтерологии, педиатрии, терапии и генетике, и может применяться для прогнозирования степени тяжести поражения кишечника у больных с целиакией.

Способ основан на выявлении DQ2 и DQ8 генов, оценке уровня специфических антител и степени атрофии кишечника. Определяют частоту встречаемости в локусе DQ аллели 0201 и при частоте ее встречаемости от 2 до 3 прогнозируют развитие тяжелой степени целиакии с атрофией кишечника Marsh III.

Заявляемый способ является простым, информативным и высоко воспроизводимым в определении генетической предрасположенности к более тяжелой целиакии. Он позволяет эффективно прогнозировать степень целиакии, что дает представление о возможных сроках восстановления слизистой. 3 пр.

 

Изобретение относится к медицине, в частности к гастроэнтерологии, педиатрии, терапии и генетике, и может применяться для прогнозирования степени тяжести поражения кишечника у больных с целиакией.

Известен способ диагностики целиакии, основанный на оценке серологической активности заболевания, степени атрофии кишечника и определении DQ2 и DQ8 генов [High-titre circulating tissue transglutaminase-2 antibodies predict small bowel villous atrophy, but decision cut-off limits must be locally validated. British Society for Immunology, Clinical and Experimental Immunology, 2013, 176: 190-198].

Недостатками серологического способа являются отсутствие единого метода определения уровня антител, выраженная зависимость показателя от возраста пациента, его иммунологического статуса и иммунной нагрузки.

Ближайшим к заявляемому является способ диагностики целиакии, основанный на определении уровня специфических антител (антител к тканевой трансглютаминазе 2, эндомизийных антител, антител к деамидированным пептидам глиадина) с использованием иммуноферментного анализа или реакции иммунофлюоресценции, гистологического исследования биоптатов кишечника по классификации Marsh и определением генов DQ2 и DQ8 методом полимеразной цепной реакции [Практическое руководство Всемирной организации гастроэнтерологов (ВОГ-OMGE), 2005 г.].

Недостатком способа, выбранного в качестве прототипа, является недостоверность проведения серологического исследования с определением уровня антител к тканевой трансглутаминазе 2 при недостаточной глютеновой нагрузке у лиц, находящихся на безглютеновой диете, у детей до 3 лет и у лиц со сниженным иммунным ответом.

Другим недостатком прототипа является невозможность долгосрочного объективного прогноза, потенциальная гистологическая картина оценивается на данный момент времени.

Задачей настоящего изобретения является обеспечение возможности объективного прогнозирования степени тяжести целиакии.

Технический результат настоящего изобретения достигается тем, что в способе прогнозирования целиакии, основанном на выявлении DQ2 и DQ8 генов, оценке уровня специфических антител и степени атрофии кишечника, определяют частоту встречаемости в локусе DQ аллели 0201 и при частоте ее встречаемости от 2 до 3 прогнозируют развитие тяжелой степени целиакии с атрофией кишечника Marsh III.

Определение частоты встречаемости аллели 0201 необходимо потому, что среди всего генотипа целиакии именно с этой аллелью связывают наиболее неблагоприятное течение данного заболевания, включая раннее начало и рефрактерные формы, вследствие тяжелого поражения кишечника. Для наличия гена DQ2, ассоциированного с целиакией, необходимо наличие по крайней мерее одной аллели 0201, а максимально возможным количеством аллелей в локусе является четыре. При частоте встречаемости аллели 0201 2 и 3 можно прогнозировать поражение кишечника степени Marsh III, характеризующееся тяжелой атрофией.

Способ осуществляется следующим образом. Методом ПЦР real-time определяется генотип HLA в локусе DQ. Подсчитывается количество аллелей 0201 в А1 и В1 цепях локуса. При наличии двух и трех аллелей 0201 прогнозируют развитие тяжелой степени целиакии с атрофией кишечника Marsh III. При частоте аллели 0201 одна развитие тяжелой формы целиакии с атрофией кишечника Marsh III, т.е. рефрактерной к терапии формы целиакии, маловероятно.

Пример 1. Больной В. поступил 29.08.2014 г. в СПбГПМУ для планового контрольного обследования по поводу целиакии с жалобами на периодические боли в гипогастрии. С раннего возраста у ребенка наблюдался жидкий стул, с 3 лет боли в животе. Ввиду раннего возраста в 2006 г. выполнение серологического исследования было не показано. В Медико-генетическом центре с целью определения DQ2 и DQ8 генов, ассоциированных с целиакией, было выполнено исследование заявляемым способом. Генотип больного DQ2, а именно HLA DQ А1 0501, 0501 В1 0201, 0301. Количество аллелей 0201 - одна. Это свидетельствовало о низком риске развития тяжелой целиакии с выраженной атрофией кишечника. В 2007 г. по результатам гистологического исследования выявлена атрофия кишечника Marsh II (высота ворсинок снижена незначительно - в среднем до 0,301 мм, крипты углублены 0,171 мм, соотношение ворсинка : крипта 1,8).

На фоне соблюдения безглютеновой диеты наблюдались купирование клинических симптомов и положительная гистологическая динамика (увеличение высоты ворсинок 0,336 мм, восстановление глубины крипт 0,162 мм соотношение в/к 2,08 МЭЛ 38,6). Целиакия протекала в легкой форме.

Пример 2. Больная К. поступила 29.08.2014 г. в СПбГПМУ для планового контрольного обследования по поводу целиакии с жалобами на ежедневные боли в животе, высыпания на коже, кашицеобразный стул. При обследовании выявлено значительное повышение уровней специфических антител. К тканевой трансглутаминазе 2 IgG (ед/мл) - 21,66 (норма до 20), IgA (ед/мл) - 200 (норма до 20) методом непрямой иммунофлюоресценции. Методом иммуноферментного анализа IgG - 27,8 (норма до 20), а IgA - антитела были отрицательны. В соответствии с заявляемым способом определен генотип - HLA А1 0201,0501 В1 0201,0301 - таким образом, количество аллелей 0201 - две. Сделан прогноз развития тяжелой формы целиакии с атрофией кишечника Marsh III. На гистологии: укорочение ворсинок 0,27 мм, углубление крипт 0,23, соотношение ворсинка : крипта 1,2, среднее количество МЭЛ 46. Целиакия протекала в тяжелой форме.

Пример 3. Больная С. поступила 11.03.2014 г. в 4-е педиатрическое отделение СПбГПМУ для планового обследования с жалобами на периодические вздутия живота, бледность, слабость, стойкую анемию. При обследовании выявлено повышение антител к тканевой трансглютаминазе 2 IgG (ед/мл) - 52,1 (норма до 25) IgA (ед/мл) - 128,0 (норма до 20) методом иммуноферментного анализа, а методом непрямой флюоресценции IgA - более 200.

В соответствии с заявляемым способом генотип девочки следующий: HLA А1 0201, 0501 В1 0201, 0201. Таким образом, количество аллелей 0201 - три. Сделан прогноз развития тяжелой формы целиакии с атрофией кишечника степени Marsh III. На гистологии: укорочение ворсин 0,28 мм, углубление крипт 0,29, соотношение ворсинка : крипта 1, среднее количество МЭЛ 47.

Целиакия протекала в тяжелой форме.

Заявляемый способ является простым, объективным и высоко воспроизводимым в определении генетической предрасположенности к более тяжелой целиакии. Он позволяет эффективно прогнозировать степень поражения кишечника, что дает представление о возможных сроках восстановления слизистой. Способ доступен врачам любой специальности, не требует специального оборудования и дополнительных лабораторных или инструментальных исследований.

Заявляемый способ позволяет врачу рассмотреть возможность перенесения контрольного обследования со взятием биоптатов на более поздние сроки (т.к. учитывается генетически обусловленное длительное восстановление кишечника при глубоком поражении). Это, в свою очередь, позволяет избежать «промежуточных» госпитализаций больного с такой инвазивной манипуляцией, как забор биоптата.

Способ прогнозирования целиакии, основанный на выявлении DQ2 и DQ8 генов, оценке уровня специфических антител и степени атрофии кишечника, отличающийся тем, что определяют частоту встречаемости в локусе DQ аллели 0201 и при частоте ее встречаемости от 2 до 3 прогнозируют развитие тяжелой степени целиакии с атрофией кишечника Marsh III.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к медицине, а именно к эндокринной хирургии, и может быть использовано для альтернативного лечения инсулин-продуцирующей доброкачественной опухоли поджелудочной железы.

Изобретение относится к области медицины, а именно разделу терапевтической стоматологии - заболеваниям слизистой оболочки рта. Техническим результатом изобретения является возможность прогнозирования риска развития красного плоского лишая слизистой оболочки рта (КПЛ СОР) у пациентов с гепатобилиарными расстройствами и гиперхолестеринемией с повышением холестерина липопротеидов низкой плотности (ХС ЛНП) при отсутствии на момент обследования КПЛ СОР.

Изобретение относится к медицине, а именно к травматологии и ортопедии, и может быть использовано для выбора тактики лечения пациентов пожилого и старческого возраста с тяжелой сочетанной травмой (политравмой).

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для раннего выявления больных с предрасположенностью к развитию послеоперационных кровотечений из шва анастомоза до панкреатодуоденальной резекции при раке головки поджелудочной железы.

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и касается определения компенсации сахарного диабета I типа у подростков. Для этого проводят непрерывное мониторирование глюкозы и вычисляют среднюю за время наблюдения площадь под гликемической кривой в гипер- и гипогликемических диапазонах (AUC).
Изобретение относится к области медицины и биологии, а именно к гистологии, и к гистологической технике и может быть использовано в практике патоморфологических лабораторий лечебных учреждений и морфологических кафедр высших учебных заведений медицинского и биологического профиля.Изобретение решает задачу создания ускоренного способа изготовления гистологических препаратов, которые можно было бы длительное время хранить в условиях лабораторий и многократно использовать для изучения.
Изобретение относится к медицине, а именно к оториноларингологии, и может быть использовано для диагностики хронического тонзиллита у детей. Для этого в слюне пациента до начала лечения определяют уровень интерлейкина ИЛ-6 и при его значении ИЛ-6≥9,02 пг/мл диагностируют хронический тонзиллит.
Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано в прогнозировании течения опухолевого процесса при раке ободочной кишки без отдаленных метастазов для индивидуализации и выбора оптимальной тактики лечения.

Изобретение относится к области медицины, в частности к токсикологическим исследованиям и может быть использовано для определения формальдегида в моче. Для этого в пробу мочи объемом 1 см3 добавляют 0,1 см3 0,1% водного раствора пентафторбензилгидроксиламина (ПФБГА).

Изобретение относится к области медицины, а именно к диагностическим способам в хирургии, сердечно-сосудистой хирургии. Определяют следующие показатели: возраст пациента (ВЗР), уровень окклюзионно-стенотического поражения конечности (Ур), уровень триглицеридов (ТГ), уровень липопротеинов низкой плотности (ЛПНП), полиморфизм генов рецептора к ангиотензину II второго типа (AGTR2:1675) и эндотелиальной синтазе оксида азота (NOS3:894).
Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики инвазивного протокового рака и фиброаденомы молочной железы. Для этого определяют концентрацию моноцитарного хемоаттрактантного белка МСР-1 в супернатанте пробы клеток крови пациента, инкубированных с раково-эмбриональным антигеном (РЭА) и без РЭА, после чего вычисляют индекс влияния (ИВ) раково-эмбрионального антигена (ИВ РЭА) на продукцию МСР-1 клетками крови по формуле: ИВ РЭА=А/Б, где А - уровень продукции МСР-1 под влиянием РЭА, Б - уровень спонтанной продукции МСР-1 без РЭА, и при величине ИВ РЭА, не превышающей 1,79, диагностируют инвазивный протоковый рак, а при величине ИВ РЭА, равной или превышающей 1,80, диагностируют фиброаденому. Способ позволяет своевременно выявить характер опухоли и начать адекватное лечение при его высокой чувствительности. 4 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к оториноларингологии, и может быть использовано для прогноза развития абсцесса при остром паратонзиллите. Сущность способа заключается в том, что проводят обследование пациента через 24 часа от начала заболевания острым тонзиллитом. При наличии 2-х клинических симптомов заболевания, индексе ЛИИм от 0,5 до 2,3, С-реактивном белке в количестве <0,005 г/л, орозомукоиде 0,4-1,3 г/л, α1-антитрипсине 1,4-3,2 г/л, гаптоглобулине 0,5-3,2 г/л, фибриногене 1,8-3,5 г/л, альбумине 37-53 г/л, преальбумине 0,25-0,45 г/л вероятность развития абсцесса составляет 0-15%. При наличии 3-х клинических симптомов, индексе ЛИИм 3,5 до 7,0, С-реактивном белке в количестве >0,05 г/л, орозомукоиде >2,6 г/л, α1-антитрипсине >6,4 г/л, гаптоглобулине 0,5-3,2 г/л, фибриногене 1,8-3,5 г/л, альбумине 37-53 г/л, преальбумине 0,25-0,45 г/л вероятность развития абсцесса составляет 40-60%. При наличии 4-х клинических симптомов, индексе ЛИИм более 8,0, С-реактивном белке в количестве >0,05 г/л, орозомукоиде >2,6 г/л, α1-антитрипсине >6,4 г/л, гаптоглобулине >6,4 г/л, фибриногене >7,0 г/л, альбумине <37 г/л, преальбумине <0,25 г/л вероятность развития абсцесса составляет 80-90%. Использование способа позволяет спрогнозировать развитие абсцесса при остром паратонзиллите и изменить тактику лечения пациентов. 3 пр.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для дооперационного прогнозирования стадии и агрессивности рака предстательной железы (РПЖ). Определяют в сыворотке крови больного до начала лечения уровней общПСА, свПСА, [-2]проПСА. Определяют возраст больного. Высчитывают Индекс Здоровья простаты. Показателям Гр.и.Глисона и Гр.Т присваивают балльные значения. Рассчитывают индекс Глисона (индекс ВИЗГ) рака предстательной железы по заявленной формуле. Если ВИЗГ < 3,6 ед., то диагностируется локализованный индолентный рак предстательной железы, индекс Глисона ≤ 6. Если ВИЗГ > 5,0 ед., то диагностируется агрессивный рак предстательной железы, индекс Глисона > 6 или стадия ≥ Т3а. Если ВИЗГ > 6,0 ед., то диагностируется агрессивный рак предстательной железы, индекс Глисона > 6 и стадия ≥ Т3а. Способ позволяет с большей достоверностью оценить стадию опухолевого процесса у больных РПЖ, избежать гипер- и гиподиагностики, улучшить отдаленные результаты лечения за счет оценки комплекса наиболее значимых показателей. 3 ил., 4 табл., 3 пр.
Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству, и может быть использовано при диагностике задержки роста плода. Способ включает определение в венозной крови женщин в I триместре беременности уровня плацентарного белка РР13. При снижении его уровня до 5,34 пг/мл и менее прогнозируют развитие задержки роста плода на фоне плацентарной недостаточности на последующих этапах беременности. Использование изобретения позволяет повысить точность диагностики задержки роста плода, что позволяет назначать своевременную адекватную терапию в более раннем периоде. 2 пр.

Изобретение относится к области методов клинико-лабораторной диагностики и заключается в создании модели прогнозирования вероятности наступления клинической беременности по результатам лабораторных исследований. Способ прогнозирования вероятности наступления клинической беременности у женщин с индексом массы тела от 18,5 до 28,49 в программе экстракорпорального оплодотворения включает оценку трансмембранного потенциала митохондрий в мононуклеарах периферической крови, измерение концентрации лептина в плазме крови и прогнозирование вероятности наступления клинической беременности по формуле:p=exp(logit)/(1+exp(logit)), где logit=3,39-(0,337*ΔΨ МПК после стимуляции овуляции)-(0,08*[Лептин]; где ΔΨ МПК после стимуляции овуляции - трансмембранный потенциал мононуклеаров периферической крови после стимуляции суперовуляции, у.е.; [Лептин] - концентрация лептина в плазме крови, пг/мл; р - искомая вероятность наступления клинической беременности, при значениях р выше 0,5 диагностируют наступление клинической беременности. 3 пр., 1 табл.

Изобретение относится к клинической медицине, в частности к клинической гематологии, и касается поиска новых возможностей изучения сгустка крови с целью использования их при обследовании больных. Способ исследования клеток включает забор капли крови массой 30-50 мг из жидкой части сгустка, собранной стеканием из поперечного разреза сгустка, и помещение капли крови на предметное стекло, покрытое стандартным покровным стеклом размером 24×24 мм, под тяжестью которого кровь расплывается, и которую потом исследуют под микроскопом. 7 ил.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для определения массы микрочастицы в суспензии. Для этого осуществляют формирование измерительного объема между двумя электродами, соединенными с источником переменного напряжения и расположенными в камере с жидкостью, диспергирование в этот объем частицы, измерение параметров взаимодействия частицы с электрическим полем и последующее вычисление ее массы. При этом между электродами формируют неоднородное переменное электрическое поле, а в качестве жидкости используют жидкую среду с низкой электропроводностью с заданной температурой и характеристиками, не меняющими биохимические свойства и физические параметры частицы. Частицу приводят в возвратно-поступательное движение с заданной амплитудой, равной (0,5-0,6) расстояния между электродами в измерительном объеме под действием неоднородного переменного электрического поля со средней напряженностью E~104-106 В/м, напряжением 4-8 В и частотой в диапазоне 1-18 Гц. Проводят съемку видеоизображения возвратно-поступательного перемещения частицы между электродами в измерительном объеме. Обрабатывают видеоизображение компьютерной программой с получением данных о радиусе частицы, частоте и амплитуде ее колебания между электродами. Рассчитывают программными средствами скорость возвратно-поступательного движения частицы. В качестве жидкой среды используют дистиллированную воду или 0,3 М раствор сахарозы. Микрочастица представляет собой латексную частицу, отдельную спору бактерий, отдельный эритроцит животных или отдельную вегетативную клетку бактерий. Изобретение позволяет определить массу микрочастицы в суспензии. 1 з.п. ф-лы, 2 табл., 2 ил.
Изобретение относится к медицине и предназначено для оценки риска развития Helicobacter pylori - ассоциированного гастрита у европеоидов Хакасии. Определяют относительное содержание сегментоядерных нейтрофилов, относительное содержание лимфоцитов и абсолютное содержание сегментоядерных нейтрофилов, установленным факторам риска присваивают градации (Z1-Z3) и числовые значения, после чего определяют прогностические коэффициенты P1, Р2 по формулам: P1=-226,062+4,573*Z1+5,128*Z2-2,001*Z3 и Р2=-202,361+4,201*Z1+4,908*Z2-0,858*Z3, где Z1 - относительное содержание сегментоядерных нейтрофилов, Z2 - относительное содержание лимфоцитов, Z3 - абсолютное содержание сегментоядерных нейтрофилов. При Р1>Р2 прогнозируют низкий риск, а при Р1<Р2 прогнозируют высокий риск развития Helicobacter pylori - ассоциированного атрофического гастрита у европеоидов Хакасии. Способ позволяет повысить эффективность диагностики. 1 пр.
Изобретение относится к области диагностики и изучения биологического материала в зоологии, медицине, ветеринарии, криминалистике, а именно к хранению летучих пахучих выделений человека и животных для последующего опознания и исследования по запаху с помощью собак или физико-химических приборов и методов. Образцы пахучих выделений помещают между двумя прижатыми предметными стеклами или двумя плоскими поверхностями из керамики, металла, пластмасс. Далее предметные стекла с образцами заворачивают в фольгу и хранят в помещении при нормальных условиях или в холодильно-морозильных камерах. Обеспечивается повышение эффективности сохранения полученных образцов пахучих выделений в течение продолжительного времени, а также сокращение времени получения образца с объекта.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для прогнозирования рецидивирующих эпизодов острой респираторной вирусной инфекции (ОРВИ) у детей дошкольного возраста с бронхиальной астмой (БА). Определяют анамнестические и клинико-лабораторные факторы риска: отсутствие острой респираторной вирусной (ОРВИ) более одного месяца - х1; уровень эозинофилов в общем анализе крови (ОАК) - х2; факт обострений БА на фоне ОРВИ за последний месяц - х3; отягощенный акушерский анамнез (ОАА) у матери - х4; факт хламидийной и микоплазменной инфекции в анамнезе по данным иммуноферментного анализа крови (ИФА крови) - х5; измененный уровень натуральных киллеров клеток (NK клеток) - х6; возраст начала посещения детского дошкольного учреждения (ДДУ) старше трех лет - х7; измененный уровень В-лимфоцитов - х8; измененный уровень иммуноглобулина G (IgG) - х9; возраст дебюта бронхообструктивного синдрома (БОС) - х10; измененный уровень фактора некроза опухоли (TNF) - х11; измененный уровень интерферона-гамма (INF-γ) - х12; измененный уровень фагоцитарной активности моноцитов - х13; профилактический прием противовирусных средств в сезон повышенной заболеваемости ОРВИ - х14. При этом факторам риска х1, х3-х5, х7, х10, х14 присваивают значение, равное 1. Факторам риска х2, х6, х8, х9, х11-х13 присваивают значение, определенное при лабораторном исследовании. Далее вычисляют значение F по формуле. Если F>0, то прогнозируют высокий риск развития ОРВИ. Если F<0, то прогнозируют минимальный риск ОРВИ у детей с БА. Способ позволяет с высокой вероятностью и эффективностью провести прогнозирование ОРВИ у детей с БА, своевременно провести профилактические и реабилитационные мероприятия за счет оценки наиболее значимых факторов риска. 1 табл., 2 пр.
Наверх