Штамм bacillus amyloliquefaciens, используемый для повышения продуктивности сельскохозяйственных животных, птицы и рыб


 


Владельцы патента RU 2614858:

Общество с Ограниченной Ответственностью "Пробиотик плюс" (RU)

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в ветеринарии. Штамм Bacillus amyloliquefaciens В-20 депонирован во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов под регистрационным номером ВКПМ В-12168. Штамм может быть использован для получения кормовой добавки, повышающей продуктивность сельскохозяйственных животных, птицы и рыб. Изобретение позволяет нормализовать микрофлору желудочно-кишечного тракта сельскохозяйственных животных, птицы, рыбы и повысить их продуктивность. 1 табл., 3 пр.

 

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения кормовой добавки, повышающей продуктивность сельскохозяйственных животных, птицы и рыб.

Известны штаммы Bacillus subtilis DSM 5750 и Bacillus licheniformis DSM 5749, которые составляют основу кормовой добавки Bioplus 2В [Alexopoulos С. еt al., Field Evaluation of the Efficacy of Probiotic Containing Bacillus Licheniformis and Bacillus Subtilis Spores. Conference Proceedings New Perspectives of Probiotics. Kosice, Slovakia 15-19th September 2004]. Известны штаммы Bacillus subtilis ВКМ B-2250 (RU №2184774, кл. A61K 35/74, 10.07.02) и Bacillus licheniformis ВКМ B-2252 (RU №2203947, кл. A61K 35174, 26.09.2001 г), которые являются основой кормовой добавки Субтилис.

Известны штаммы Bacillus subtilis 3 и Bacillus licheniformis 31, которые являются основой Биоспорина [Смирнов В.В. И др. Современные представления о механизмах лечебно-профилактического действия пробиотиков из бактерий рода Bacillus. Мiкробioлогiчний журнал. 1993. том 55, №4, с. 92-112].

Задачей, на решение которой направлено изобретение, является выявление новых эффективных штаммов из рода Bacillus для кормовой добавки, повышающей продуктивность сельскохозяйственных животных, птицы и рыб. Технический результат, достигаемый при осуществлении изобретения, заключается в повышении продуктивности сельскохозяйственных животных, птицы, рыб за счет использования кормовой добавки на основе предложенного штамма Bacillus amyloliquefaciens В-20/ВКПМ В 12168. Штамм Bacillus amyloliquefaciens В-20 выделен из почв экологически чистого Приокско-Террасного заповедника, идентифицирован до вида с помощью анализа 16S РНК Всероссийской коллекцией промышленных микроорганизмов (ВКПМ) ФГУП ГосНИИ Генетика и внесен в депозитарий этой коллекции под номером: Bacillus amyloliquefaciens ВКПМ В 12168 [Научный отчет «Идентификация штамма В-20 до вида с помощью анализа 16S РНК» 20/01/2015 г. Москва].

Штамм Bacillus amyloliquefaciens В-20/ВКПМ В 12168 может храниться в лиофилизированном состоянии в течение нескольких лет или на косяках с агаризованной средой на основе мясопептонного бульона с обязательным пересевом не реже 1 раза в 6 месяцев на эту же среду.

Штамм Bacillus amyloliquefaciens В-20/ВКПМ В 12168, характеризуется следующими признаками.

Паспорт штамма микроорганизма.

Номер В 12168. Дата депонирования в ВКПМ 05.02.2015.

1. Родовое и видовое название культуры: Bacillus amyloliquefaciens.

2. Номер или наименование штамма: В-20.

4. Способ получения штамма: найден в естественных условиях, изолят, Московская область, Приокско-Террасный заповедник, Кулаков Г.В.

5. Культура идентифицирована до вида с помощью анализа 16S РНК Всероссийской коллекцией промышленных микроорганизмов (ВКПМ) ФГУП ГосНИИ Генетика и внесена в депозитарий этой коллекции под номером: Bacillus amyloliquefaciens ВКПМ В 12168 [Научный отчет «Идентификация штамма В-20 до вида с помощью анализа 16S РНК» 20/01/2015 г. Москва].

6. Культурально-морфологические особенности штамма. Клетки прямые, палочковидные, размером 2,5-4,0×0,5-0,8 мкм, подвижные, грамположительные, спорообразующие. Размер спор 1,0-1,2×0,6-0,7 мкм. Клетки хорошо растут на простых питательных средах. При росте на мясопептонном агаре, агаре Хоттингера - колонии шероховатые, круглые, матовые, желтовато-серые, край неровный, лопастной. При росте в жидких средах: мясопептонном бульоне, LB-бульоне без аэрации образуют сухую пленку без помутнения среды, а при аэрации - интенсивную мутность.

7. Область применения штамма: пробиотик.

8. Продукт, синтезируемый штаммом: пробиотик.

9. Активность (продуктивность) штамма, другие производственные показатели: Не растет в анаэробных условиях, не образует ацетилметилкарбинол из глюкозы в реакции Фогес - Проскауэра, ферментирует с образованием кислоты глюкозу, маннозу, фруктозу, рибозу, ликсозу, целлобиозу, трегалозу, мальтозу, туранозу. Гидролизует крахмал, мочевину и эскулин. Обладает лецитиназной, каталазной активностью. Толерантен к концентрациям хлорида натрия в питательной среде в диапазоне 1-9%.

Штамм не является зоопатогенным и фитопатогенным.

Штамм продуцирует биологически активные метаболиты, в том числе антибиотики и ферменты широкого спектра действия, подавляющие рост патогенной и условно-патогенной бактериальной и грибной микрофлоры. Для длительного хранения штамма споровую массу лиофильно высушивают. Для массового размножения бактерии используют мясопептонный бульон. Культивирование проводят при температуре 37°С.

10. Способ определения активности штамма с указанием метода: МПА, МПБ.

11. Способ, условия и состав сред для длительного хранения: Культуру поддерживают на МПА с добавлением канамицина (50 мкг/мл) с пересевом не реже 1 раза в месяц, хранят на МПА с добавлением 50 мкг/мл канамицина.

12. Способ, условия и состав сред для размножения штамма: Оптимальная температура роста +37°C, рН - 7,0. Состав среды - пептон 5 г/л; дрожжевой экстракт 3 г/л; NaCl 5 г/л; (K2HPO4)×3H2O - 18,3 г/л; KH2PO4 - 6,0 г/л; (NH4)×2SO4 - 2,0 г/л; Na3C6H5O7×5,5H2O - 1,2 г/л, вода водопроводная - до 1 л.

13. Оптимальные условия и состав среды для ферментации: Оптимальная температура роста +37°C, рН 7,2. Состав среды: пептон мясной ферментативный - 10,0 г; дрожжевой экстракт - 5,0 г; хлорид натрия - 5,0 г; дистиллированная вода - до общего объема 1 дм3.

14. Литературные ссылки: Bergey's Manual of Systematic Bacteriology. (1984-1989). Vol. 1-4 Baltimore. Williams and Wilkins. Handbook of new bacterial Systematics. 1994. Goodfelow M. and A.G. O'Donnel (Ed). London. Acad. Press.

15. Является ли штамм: зоопатогенным: нет; представляет ли опасность по каким-либо другим причинам: нет.

16. Форма депонирования: национальное патентное депонирование. Культивирование штамма Bacillus amyloliquefaciens В-20/ВКПМ В 12168 проводят в ферментере на промышленных ферментационных средах, приготовленных на деминерализованной воде и содержащих, мас.%: картофельный крахмал, осахаренный альфа-амилазой, - 10, кукурузный экстракт - 2,4, белково-витаминный концентрат или пивные дрожжи - 0,3, лактоза - 0,28, (NH4)×2SO4 - 0,8, K2SO4 - 0,3, MgSO4×7H2O - 0,014, CuSO4 - 0,00038, NaCl - 0,03, вода - остальное, рН 7,2. Инокулят штамма выращивают в 750-мл колбах, содержащих 100 мл питательной среды следующего состава, мас.%: триптон - 1, дрожжевой экстракт - 1, хлористый натрий - 0,25, глюкоза - 1, деминерализованная вода - остальное, рН 7,2. Колбы инкубируют на качалке (280 об/ мин) при 37°C в течение 8 часов. Выращенную культуру в количестве 5% от объема среды в ферментере стерильно засевают в ферментер. Процесс ферментации ведут при 37°C и интенсивном перемешивании (800 об/мин), рН поддерживают в пределах 7.0-7.4 с помощью 12.5% NH×4 ОН и 6% H2SO4. Наработка биомассы осуществлялась в ферментере в течение 48±2 ч. При указанном способе культивирования может быть получен титр спор (5-10)×10+10 КОЕ/см3.

Изобретение поясняется примерами.

Пример 1.

Испытания предложенного штамма Bacillus amyloliquefaciens В-20/ВКПМ В 12168 в виде кормовой добавки, повышающей продуктивность новорожденных поросят.

Эффективность кормовой добавки была испытана на новорожденных поросятах с диагнозом диарея, протекавшей на фоне сложной эпизоотической обстановки в хозяйстве. Контрольные группы поросят получали кормление в соответствии со штатной методикой для этого хозяйства. Поросятам опытных групп (5 групп по 10 голов в каждой группе) задавали кормовую добавку на основе предложенного штамма Bacillus amyloliquefaciens В-20/ВКПМ В 12168 перорально с водой за 20 мин до кормления в разовой даче на голову по 20 мл три раза в день в течение трех суток. Испытания показали, что состояние поросят в контрольных группах (также 5 групп по 10 голов) характеризовалось продолжением диареи, развитием гипотрофии, в результате чего отход поросят составил 18%. В опытных же группах через сутки после дачи кормовой добавки общее состояние поросят стало улучшаться, диарея прекратилась, падежа поросят не было, а через двое суток все животные уже практически были здоровы.

Пример 2.

Сохранность цыплят в первые недели. Проведены испытания на цыплятах бройлерной птицефабрики (по 25 тыс. цыплят в опытной и в контрольной группах). Отход цыплят в контрольной группе, не получавших кормовую добавку, составил 4%, в опытных - 1,8%. В опытных группах цыплята также более интенсивно набирали вес. После первых трех дней средний вес цыпленка в контрольной группе равнялся 58 г, в опытной - 69 г.

Пример 3.

Кормовая добавка аквариумным рыбам. Проводилось кормление подрощенной молоди золотых рыб (оранда) экструдированным кормом с добавлением кормовой добавки на основе штамма Bacillus amyloliquefaciens В-20/ВКПМ В 12168. Количество корма составляло 100 г, кормовой добавки - 2 мл. Количество рыб в опытной и контрольной группах составляло по 50 экз. Кормление осуществляли 3 раза в сутки. Корм поедался охотно. Темп роста молоди в опытной группе по сравнению с контрольной составил 18%. Выход рыб в опытной группе - 95%, в контрольной - 76%. Вода в аквариумах не портилась, мутность отсутствовала.

Проведенные испытания показали повышение продуктивности животных, птицы и рыб при использовании кормовой добавки на основе предложенного штамма Bacillus amyloliquefaciens В-20/ВКПМ В 12168.

Штамм бактерий Bacillus amyloliquefaciens В-20 ВКПМ В-12168, используемый для повышения продуктивности сельскохозяйственных животных, птицы и рыб.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к рекомбинантному получению интерферонов, и может быть использовано для получения рекомбинантного белка - аналога интерферона бета.

Изобретение относится к области биотехнологии. Штамм Micrococcus luteus, депонированный под регистрационным номером В-12410 во Всеросиийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов ФГУП ГосНИИГенетика, является продуцентом сайт-специфической метилзависимой эндонуклеазы MluVI.
Изобретение относится к биохимии. Описан способ выявления контаминации вирусами культуры клеток иммунопероксидазным методом, включающий взаимодействие антигена с мечеными антителами в неинфицированной культуре клеток и учет результатов реакции по интенсивности окрашивания образовавшегося комплекса под микроскопом.

Изобретение относится к области биохимии, генной инженерии и биотехнологии, в частности к трансформированному микроорганизму Escherichia sp., продуцирующему О-ацетилгомосерин.

Группа изобретений относится к микробиологии и биотехнологии и касается получения трансформантов дрожжей Schizosaccharomyces pombe, продуцирующих молочную кислоту. Предложен трансформант, несущий ген ldh, кодирующий лактатдегидрогеназу из Lactobacillus acidophilus или фермент, аминокислотная последовательность которого гомологична ей не менее чем на 93%.

Изобретение относится к биотехнологии. Штамм аскомицетного гриба из класса Sordariomycetes ИНА 01108 обладает способностью продуцировать антибиотик эремоксиларин А.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к рекомбинантному получению интерферонов, и может быть использовано для получения рекомбинантного белка интерферона лямбда.

Группа изобретений относится к биотехнологии и касается штаммов бактерий B.adolescentis 150 и B.angulatum GT 102. Штаммы бактерий B.adolescentis и B.angulatum депонированы во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов под регистрационными номерами ВКПМ Ас-1974 и ВКПМ Ас-1973 и обладают способностью синтезировать гамма- аминомасляную кислоту (ГАМК).

Изобретение относится к биотехнологии. Планктонный штамм одноклеточной зеленой водоросли Chlorella kessleri NF обладает высокой продуктивностью.
Изобретение относится к биотехнологии. Способ предусматривает следующее.

Изобретение относится к области биотехнологии. Штамм Micrococcus luteus, депонированный под регистрационным номером В-12410 во Всеросиийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов ФГУП ГосНИИГенетика, является продуцентом сайт-специфической метилзависимой эндонуклеазы MluVI.

Изобретение относится к области биохимии, генной инженерии и биотехнологии, в частности к трансформированному микроорганизму Escherichia sp., продуцирующему О-ацетилгомосерин.
Изобретение относится к применению штамма цианобактерий Anabaena sp. РСС 7120 для получения наночастиц серебра.

Изобретение относится к биотехнологии, пищевой и медицинской промышленности и может быть использовано в получении пробиотиков, предназначенных для непосредственного потребления или в качестве биологически активной добавки к продуктам питания, при производстве кисломолочных продуктов профилактического назначения, предназначенных в частности для нормализации уровня холестерина и полезной микрофлоры желудочно-кишечного тракта человека и повышения общей резистентности организма.

Группа изобретений относится к биотехнологии и касается штаммов бактерий B.adolescentis 150 и B.angulatum GT 102. Штаммы бактерий B.adolescentis и B.angulatum депонированы во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов под регистрационными номерами ВКПМ Ас-1974 и ВКПМ Ас-1973 и обладают способностью синтезировать гамма- аминомасляную кислоту (ГАМК).
Изобретение относится к биотехнологии. Способ предусматривает следующее.
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения микробной белковой массы. Штамм метанокисляющих бактерий Methylococcus capsulatus ГБС-15, обладающий высокой скоростью роста в условиях непрерывного культивирования, устойчивостью к гомологам метана в природном газе, способностью к гетеротрофной фиксации углекислого газа и к росту при повышенном давлении (до 16 атм), депонирован во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов под номером ВКПМ В-12549.

Группа изобретений относится к области биохимии. Предложена система культивирования клеток, система для оценки эффекторных агентов кишечника, содержащая систему культивирования клеток, также предложены способы культивирования клеток, получения кишечного органоида и оценки лечения эффекторных агентов кишечника.

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано при переработке свежего куриного помета. Способ предусматривает смешивание птичьего помета с влагопоглощающими материалами и стимулятором компостирования на основе микроорганизмов и внесение его в субстрат.

Группа изобретений относится к биотехнологии. Предложен штамм непатогенной грамотрицательной бактерии, депонированный в CNCM 8 апреля 2010 г.

Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для повышения иммунобиологического статуса новорожденных поросят. Способ включает внутримышечное введение «Пирогенала» супоросным свиноматкам в дозе 0,08 мкг/кг массы тела за 60 дней до опроса 5 инъекций каждый день, за 40 дней до родов 5 инъекций с интервалом 1 день, за 20 дней до опороса 5 инъекций с интервалом 2 дня, общим курсом 15 инъекций при профилактике.
Наверх