Способ моделирования гипоксического поражения тканей глаза с активацией апоптоза

Изобретение относится к области медицины, а именно к экспериментальной медицине. Для моделирования гипоксического поражения поверхностных тканей глаза и сетчатки, приводящего к активации апоптоза, проводят воздействие физического фактора на экспериментальное животное. Получают гистологические образцы тканей глаза и выявляют в них клетки, находящиеся в состоянии апоптоза. Животное помещают в герметично закрывающуюся камеру объемом 0,10-0,15 м3, в которую производят подачу газообразного азота со скоростью 2,0-2,4 л/мин до появления судорог у экспериментального животного. Способ обеспечивает возможность селективной активации апоптотических процессов одновременно в тканях поверхности глаза и сетчатки для оценки гипоксии в числе факторов, вызывающих синдром сухого глаза и ретинопатию. 6 ил.

 

Изобретение относится к экспериментальной медицине и предназначено для моделирования гипоксического поражения поверхностных тканей глаза и сетчатки, приводящего к активации апоптоза в эксперименте.

На протяжении многих лет широко обсуждается роль различных типов гипоксии в развитии патологии глаза. Гипоксия играет важную роль в патогенезе дистрофических, ишемических, воспалительных и инфекционных заболеваний глазного яблока (Blasiak J., Petrovski G, Vereb Z., A., Kaarniranta K. Oxidative stress, hypoxia and autophagy in the neovascular processes of age-related macular degeneration // Biomed. Res. Int. 2014. P. 768026. doi: 10.1155/2014/768026). В ряде заболеваний глаза человека, таких как глаукома, катаракта, диабетическая ретинопатия, дистрофии сетчатки, наблюдается гибель клеток путем апоптоза (Каламкаров Г.Р. и др. Экспериментальная модель острой ишемии сетчатки глаза у крыс, Бюлл. Эксп.биологии и медицины. 2008. N 6. С. 634-638 и др.). Ранее было показано, что гипоксия индуцирует апоптотическую гибель в ганглиозных клетках сетчатки in vivo, а также в культуре ганглиозных клеток сетчатки и кератоцитах роговицы (Kaur С.et al., Hypoxia-ischemia and retinal ganglion cell damage, Clinic. Ophthalmol., 2008, Vol.2, N 4, p. 879-889; Peng Y. et al., Neuroprotective effect of protease-activated receptor-2 in the hypoxia-induced apoptosis of rat RGC-5 cells, J. Mol. Neurosci, 2013, Vol. 50, N l, p. 98-108.).

Наиболее часто гибель клеток происходит после преходящей ишемии, в патогенезе которой гипоксия играет важную роль. Апоптотический каскад включает активацию гена р53, ответственного за процесс повреждения и восстановления ДНК во время приходящей ишемии. Существует экспериментальная порода мышей, выведенных путем генной инженерии, у которых отсутствует ген р53. Доказана высокая резистентность этих животных к ишемическому повреждению, поэтому ген р53 считают одной из основных мишеней в терапевтической стратегии ишемии тканей глаза (Zhang SX et al., Genetic difference in susceptibility to the blood-retina barrier breakdown in diabetes and oxygen-induced retinopathy, Am J Pathol., 2005, 166 (1), p. 313-321). Известно много способов моделирования ишемического поражения тканей глаза с индукцией апоптоза, заключающихся в прекращении тока крови с нарушением баланса энергетических требований клетки, в этих экспериментах были задействованы обезьяны, собаки, кошки, грызуны. В большинстве экспериментальных исследований изучают влияние моделируемого ишемического повреждения глаза у крыс, кровоснабжение глаз у которых имеет сходство с кровотоком глаза у человека. Кроме того, данная модель является достаточно доступной (Киселева Т.Н. и др. Экспериментальное моделирование ишемического поражения глаза, Вестник РАМН, №11-12, 2014 г., с. 97-103).

Известен традиционный способ моделирования ишемии тканей глаза, включающий в себя окклюзию сосудов сетчатки глаза с помощью светового воздействия, при этом окклюзию осуществляют путем транспупиллярного воздействия на сосуды сетчатки I-III порядка и соответствующий им паравазальную сетчатку фотокоагулирующим лазерным излучение с определенными параметрами (RU 2313312 С1 от 03.05.2006 г.). С одной стороны, очевидно преимущество данного подхода, заключающегося в селективном воздействии на сетчатку. С другой стороны, данный способ не позволяет произвести комплексную оценку ишемического воздействия на функциональное состояние других тканей глаза.

Нужно подчеркнуть, что в связи с тем, что большинство известных способов нацелено на моделирование именно ретинальной ишемии или гипоксии, такой подход существенно сужает область возможных исследований последствий воздействия этих факторов на глаз, затрудняя оценку жизнеспособности и процессов клеточной гибели в других тканях глаза, таких как конъюнктива и передний эпителий роговицы.

Известно, что конъюнктива и передний эпителий роговицы секретируют основные компоненты слезной жидкости и выполняют в глазу жизненно важные защитную и метаболическую функции. Благодаря слезной жидкости осуществляются как биохимические, так и иммунные реакции, необходимые для нормального функционирования роговицы и конъюнктивы. (Полунин Г.С. и др. Особенности клинического течения различных форм синдрома сухого глаза - основа для разработки адекватных методов лечения, Веста. Офтальмологии, 2006, Т. 102, N 5, с. 17-20). Гибель клеток конъюнктивы приводит к патологическим изменениям ее морфологии, изменению состава слезной жидкости и нарушению общего функционального состояния глаза. Поражение клеток поверхности глазного яблока является одним из характерных признаков синдрома сухого глаза - мультифакторного заболевания, патогенез которого включает изменения воспалительного, а также аутоиммунного характера. Синдром сухого глаза имеет высокую частоту встречаемости у населения, поражая от 5 до 39% людей разного возраста. Среди многочисленных причин развития этой патологии глаза отмечают важную роль экзогенных факторов, в том числе влияние неблагоприятной экологической ситуации в целом. У пациентов с синдромом сухого глаза в биоптате конъюнктивы отмечается возрастание уровня провоспалительных цитокинов, маркеров апоптоза, среди которых АР02.7. (De Paiva CS et al, Rationale for anti-inflammatorytherapy in dry eye syndrome // Arq. Bras. Oftalmol. 2008. Vol. 71. P. 89-95).

Наиболее широко используемый способ моделирования гипоксического поражения тканей глаза с индукцией апоптотической гибели клеток заключается в воздействии физического фактора на экспериментальное животное (искусственное повышение давления, что приводит к повышению внутриглазного давления, ВГД) и получение гистологических образцов тканей глаза от подопытных животных. (Buchi ER et al, Pressure induced retinal ischemia in rats: en experimental model for quantitative study, Ophtalmologica, 1991, 203 (3), P. 138-147). Однако данный способ имеет существенное ограничение, поскольку высокое ВГД вызывает комбинированную компрессионно-ишемическую травму, что более характерно для глаукомного процесса и препятствует объективной оценке апоптотических процессов в других, в частности, поверхностных тканях глаза.

Таким образом, существует потребность в способе моделирования гипоксического поражения тканей глаза с индукцией клеточной гибели, заключающемся в возможности изучения активации апоптотических процессов как в тканях поверхности глаза, так и в сетчатке.

Техническим результатом настоящего изобретения является простота, доступность, возможность селективного действия моделируемых условий гипоксии на ткани поверхности глаза (конъюнктива, передний эпителий роговицы), так и на сетчатку, и оценки роли гипоксии в числе факторов, которые могут вызывать синдром сухого глаза.

Этот технический результат достигается тем, что предлагаемый способ моделирования гипоксического поражения тканей глаза с активацией апоптоза, заключающийся в воздействии физического фактора на экспериментальное животное, получении гистологических образцов тканей глаза и выявления в них клеток, находящихся в состоянии апоптоза, отличается тем, что животное помещают в герметично закрывающуюся камеру объемом 0,10-0,15 м3, в которую производят подачу газообразного азота со скоростью 2,0-2,4 л/мин до появления судорог у экспериментального животного.

Способ моделирования гипоксического поражения тканей глаза заключается в следующем.

Для исследования использовали 20 самцов крыс линии Wistar в возрасте 3-4 мес. Из них 10 животных были подвергнуты однократному действию азота, замещающего вдыхаемый воздух. В контроле (10 крыс) животные оставались в лабораторных условиях. Воздействие достигалось в результате подачи газообразного азота со скоростью 2,0-2,4 л/мин в герметично закрывающейся камере до появления судорог у экспериментального животного. Скорость подачи азота контролировали с помощью лабораторного реометра. Результаты опытов анализировали через 3 ч после завершения действия гипоксии. Подопытных и контрольных животных умерщвляли эфиром, энуклеированные глаза подвергали обработке для выявления клеток, находящихся в состоянии апоптоза. Для идентификации в тканях глаза поврежденных клеток с фрагментированной ДНК применяли традиционный метод TUNEL (Terminal desoxynucleotidyl transferase - mediated desoxyuridine triphosphate (UTP) - nick end - labeling), используя набор реагентов «DeadEnd Fluorometric TUNEL System» (Promega Corporation, USA). Для этой цели глаза в течение 4 ч фиксировали в 4%-ном нейтральном формалине, приготовленном на 0.1 М фосфатном буфере (рН 7.4). Образцы отмывали в фосфатном буфере, затем, последовательно, в фосфатном буфере с 5% сахарозой; фосфатном буфере с 10% сахарозой; 20% сахарозой (в каждом растворе в трех сменах по 15 минут) и оставляли на ночь в фосфатном буфере с 20% сахарозой при 4°С. Глаза замораживали в специальной среде (Tissue-Tec OCT, Leica, Германия), с помощью криостата (Leica Ml900, Германия) были получены поперечные срезы глазного яблока и отобраны для анализа. Толщина срезов составляла 12 мкм.

Мечение фрагментированной ДНК по методу TUNEL проводили по протоколу фирмы-производителя. Перед проведением энзиматической реакции срезы отмывали в 0.1 М PBS, фиксировали в 4% параформальдегиде в течение 5 минут, затем отмывали от фиксатора в 0.1 М PBS трижды в течение 5 минут. Реакцию проводили в течение часа при температуре 37°С, затем реакцию останавливали путем отмывания срезов в 2-кратном растворе SSC (Фиг. 1а, 2а, 3а). Для подтверждения специфичности реакции мечения фрагментированных участков ДНК, образующихся в клетках глаза, подвергающихся апоптозу, также проводили стандартную контрольную реакцию в отсутствие рекомбинантной терминальной дезоксинуклеотидил трансферазы. Ядра клеток окрашивали ядерным красителем Hoechst 33342, разведенным в 0.1 М PBS (1:1000, Leica, Германия), в течение двух минут. После окрашивания, срезы отмывали в нескольких сменах 0.1 М PBS, по 15 минут в каждом растворе, и заключали в специальную среду для препаратов с флуоресцентной меткой - Vectashield (Vector, США). Локализацию флуоресцентного свечения и его интенсивность в меченых клетках тканей глаза (Фиг. 16, 26, 36) анализировали с использованием флуоресцентного микроскопа Leica DM RXA2 (Германия), с передачей изображения на компьютерную приставку, оснащенную программой Leica for Windows. Результаты анализировали на поперечных срезах глаза. Изображения обрабатывали с помощью компьютерной программы Image J.

Выбранные в предлагаемом способе параметры воздействия (использование герметично закрывающейся камеры объемом 0,10-0,15 м3, в которую производят подачу газообразного азота со скоростью 2,0-2,4 л/мин до появления судорог у лабораторного животного) являются оптимальными для запуска избирательного интенсивного поражения ДНК в клетках тканей поверхности глаза и сетчатке, не затрагивая других тканей - хрусталик, радужку, цилиарное тело, хориодею, что позволяет одновременно смоделировать состояние тканей при синдроме сухого глаза и гипоксическое поражение сетчатки.

Так, нами приведены микрофотографии срезов тканей глаза экспериментальной модели: (Фиг. 1 - сетчатка, Фиг. 2 - конъюнктива, Фиг. 3 - роговица, а - мечение фрагментированной ДНК (1) по методу TTJNEL, 6 - флуоресцентное свечение апоптозированных клеток (2), окрашенных ядерным красителем Hoechst 33342). Избирательное интенсивное апоптотическое поражение наблюдалось только в клетках передней поверхности глаза (клетках конъюнктивы и переднего эпителия роговицы) и в клетках сетчатки. Окрашивание срезов глаза ядерным красителем Hoechst 33342 подтверждает локализацию апоптоза в ядрах клеток. Во всех изученных глазах наблюдали сходное распределение поврежденных клеток. В препаратах, приготовленных по протоколу производителя набора, служивших отрицательным контролем для подтверждения специфичности реакции в опыте с отсутствием фермента - терминальной дезоксинуклеотидил трансферазы, меченых клеток не наблюдали. В глазах контрольной группы животных, не подвергавшейся воздействию гипоксии, в исследуемых областях тканей поверхности глаза были отмечены лишь единичные меченые клетки. В других тканях глаза - хрусталике, радужке, цилиарном теле, хориодее апоптотические клетки отсутствовали как в опыте, так и в контроле. Таким образом, гипоксия в условиях, моделируемых с помощью предлагаемого способа, вызывала интенсивный процесс апоптоза только в клетках тканей поверхности глаза и в сетчатке.

Таким образом, предлагаемый способ достаточно прост, доступен, обеспечивает возможность селективной активации апоптотических процессов в тканях поверхности глаза (конъюнктива, передний эпителий роговицы) и сетчатке, и оценки гипоксии в числе факторов, вызывающих синдром сухого глаза и ретинопатию.

Способ моделирования гипоксического поражения тканей глаза с активацией апоптоза, заключающийся в воздействии физического фактора на экспериментальное животное, получении гистологических образцов тканей глаза и выявления в них клеток, находящихся в состоянии апоптоза, отличающийся тем, что животное помещают в герметично закрывающуюся камеру объемом 0,10-0,15 м3, в которую производят подачу газообразного азота со скоростью 2,0-2,4 л/мин до появления судорог у экспериментального животного.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к области медицины, а именно к экспериментальной медицине. Для моделирования ишемии спинного мозга лабораторным животным, вводят наркозный препарат «Пропофол».

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для моделирования сосудистой дистонии у крыс по гипотензивному типу. Для этого самцам крыс линии Wistar внутрибрюшинно однократно вводят множественно модифицированные липопротеины низкой плотности, приготовленные из сыворотки крови больных с атеросклерозом каротидных артерий, в дозе 200 мкг по белку.

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной дерматовенерологии, и касается способа моделирования вульгарной пузырчатки. Для этого способ включает введение новорожденным мышам препарата иммуноглобулинов класса G (IgG), выделенных от больных вульгарной пузырчаткой.

Изобретение относится к обучающим устройствам в области медицины. Устройство 1 для практического обучения операциям со шприцом предназначено для детектирования операции взятия или инъекции с помощью плунжера 120 шприца 100.

Изобретение относится к области медицины, а именно к экспериментальному моделированию. Для создания биологической модели системного ювенильного идиопатического артрита с характерными системными проявлениями осуществляют внутрикожное введение в подошву правой задней лапы в 0 сутки крысам самцам Wistar в возрасте 8 месяцев 0,1 мл раствора полного адъюванта Фрейнда 5 мг/мл и одновременное внутрибрюшинное введение раствора липополисахарида (ЛПС) из расчета 5 мкг/кг массы тела животного с последующим повторным внутрибрюшинным введением раствора ЛПС на 18 сутки из расчета 10 мкг/кг массы тела животного и активацией на 39 сутки системы иммунобиологического надзора организма путем повторного внутрикожного введения в подошву левой задней лапы 0,1 мл раствора полного адъюванта Фрейнда 5 мг/мл и одновременного внутрибрюшинного введения раствора ЛПС по 10 мкг каждому животному.
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной урологии, и может быть использовано для изучения влияния стойкого венозного полнокровия в малом тазу на органы и ткани малого таза в эксперименте на кроликах.

Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии, и может быть использовано для первичной фармакологической оценки антигипоксической активности вновь синтезируемых веществ.

Изобретение относится к экспериментальной биологии и медицине и касается моделирования гипогонадизма, развивающегося при метаболических нарушениях. Для этого мышам-самцам линии C57Bl/6 через сутки после рождения вводят стрептозотоцин однократно, подкожно в дозе 200 мг/кг.

Изобретение относится к экспериментальной биологии и медицине и может быть использовано для профилактики антракосиликоза. Способ включает моделирование заболевания ежедневной затравкой угольно-породной пылью экспериментальных животных с одновременным использованием профилактического препарата.

Изобретение относится к медицинской технике и может быть использовано для обучения специалистов проведению эхоконтрастных ультразвуковых исследований и оценке патологии внутренних органов.
Изобретение относится к медицине, к экспериментальной онкологии, и может быть использовано для моделирования светлоклеточного рака почки. Способ заключается в том, что крысам самкам проводят внутрибрюшинное введение формальдегида в дозе 1-1,5 мг/кг и фуросемида в дозе 0,8-1,7 мг/кг один раз в неделю в течение 2-3 недель. Спустя 6 месяцев выявляют рак. Способ обеспечивает создание достоверной модели заболевания. Целью изобретения является обеспечение моделирования светлоклеточного рака почки. Технический результат достигается тем, что экспериментальным животным однократно в неделю в течение 2-3 недель вводят формальдегид в дозе 1-1,5 мг/кг и фурасемид в дозе 0,8-1,7 мг/кг. 2 пр.
Изобретение относится к области экспериментальной медицины, в частности к изучению состояний, связанных с локальным снижением минеральной плотности костей. Для моделирования этого состояния у кроликов вначале выбирают кость для моделирования. Выполняют местную инфильтративную анестезию, проводя шприц чрескожно до кортикальной пластинки кости. Затем снимают корпус шприца, устанавливают через иглу шприца мандрен и прокалывают кортикальную пластинку; извлекают мандрен, присоединяя к игле шприц с раствором ортофосфорной кислоты. Осуществляют медленное введение раствора в различных направлениях внутри объема кости, после чего шприц снимают, снова устанавливают мандрен и извлекают иглу. При этом используют раствор ортофосфорной кислоты с концентрацией от 0,2 М до 1,0 М для обеспечения разной степени снижения минеральной плотности костной ткани. Такое введение приводит к снижению плотности на 10% при увеличении концентрации вводимой ортофосфорной кислоты на 0,1 М. Способ обеспечивает регулируемое снижение минеральной плотности кости при снижении травматичности манипуляции и сохранении привычных условий содержаний животных и ухода за ними. 2 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальным исследованиям в онкологии, и может быть использовано для моделирования лимфогенного и гематогенного метастазирования меланомы B16. Для этого используют белых нелинейных крыс. Через 2 недели после выведения у животного селезенки под кожу передней брюшной стенки в нее имплантируют суспензию опухолевых клеток мышиной меланомы В16 в физиологическом растворе в объеме 0,1 мл и в разведении 1:10. Через полгода от момента перевивки регистрируют лимфогенный и гематогенный путь распространения меланомы с морфологически подтвержденным метастатическим поражением внутренних органов. Способ обеспечивает достоверность моделирования, при этом экономичен и прост в исполнении. 6 ил.

Изобретение относится к экспериментальной медицине, иммунологии, патофизиологии, в частности к оценке изучения иммунопатогенетических особенностей хронической почечной недостаточности (ХПН) и методам коррекции данной патологии на модели лабораторных животных. Для этого начиная с 21 суток моделирования хронической почечной недостаточности крысам пипеточным способом вводят блокатор кальциевых каналов препарат Амлодипин в дозе 0,25 мг/кг в сутки на одно животное в течение 7 дней. Регистрируют изменения факторов врожденного и адаптивного иммунитета по отношению к показателям лабораторных животных, не получавших Амлодипин. При этом устанавливают нормализацию состояния клеточных факторов врожденного иммунитета, их способность к фагоцитозу и генерации активных форм кислорода, интенсивность реакции гиперчувствительности замедленного типа, увеличение количества антителообразующих клеток в селезенке. Использование способа расширяет информацию о механизмах патогенеза ХПН, не требует дефицитных расходных материалов, доступен в практике исследовательских центров, важен при анализе эффективности действия блокаторов кальциевых каналов в терапии ХПН. 2 табл.

Изобретение относится к области медицины, а именно к способам экспериментального моделирования процессов, протекающих в полости рта человека, в частности, образования зубного камня. Предлагаемый способ моделирования процесса образования зубного камня из аналога раствора зубного налета основан на получении зубного налета в искусственно созданной модельной среде. Для приготовления модельной среды используют: NaCl - 21,41 ммоль/л, KHCO3 - 24,81 ммоль/л, (NH4)2HPO4 - 3,30 ммоль/л, NaH2PO4⋅2H2O - 3,17 ммоль/л, NH4F - 0,10 ммоль/л, KCl - 0,79 ммоль/л, CaCl2⋅2H2O - 3,00 ммоль/л, MgCl2⋅6H2O - 0,85 ммоль/л, при этом добавляют NaHCO3 при рН 5,5÷6 в количестве, необходимом для предотвращения уменьшения концентрации в растворе карбонат ионов за счет гидролиза в кислой среде, осуществляют корректировку рН моделируемого раствора и проводят синтез при значении рН = 7,00±0,05. Предложенная модельная среда позволяет воспроизвести условия ротовой полости человека. При этом через 14 дней образуется фаза брушита и гидроксилапатита, состав которой соответствует основным компонентам зубных камней человека. 2 табл., 5 ил.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для изучения особенностей формирования химического ожога пищевода в эксперименте. Способ включает введение в пищевод животного, подобранного по величине просвета пищевода зонда, имеющего боковые отверстия, и доставку по зонду химического агента. При этом используют градуированный, слепо заканчивающийся полый зонд со свободно вставленной в его просвет до слепого конца струной-проводником. Зонд имеет два длинных продольных, соразмерных длине пищевода, расположенных друг напротив друга боковых отверстия. Последние выполнены таким образом, чтобы они при установке располагались в просвете всего пищевода и проксимальная вырезка отверстий находилась ниже глоточно-пищеводного сфинктера, а дистальная - над кардиальным жомом. Наличие между отверстиями узких перемычек практически не меняет щелевидную форму и объем пищевода животного при установлении зонда. Предлагаемый способ обеспечивает создание патофизиологического химического ожога пищевода, формируя его протяженный характер при использовании различных коррозивных жидкостей. 1 пр., 4 ил.

Изобретение относится к медицине, а именно к количественной гистохимической оценке адаптации организма к воздействию низкой температуры окружающей среды. Для этого устанавливают холодовую анестезию у экспериментального животного путем количественной цитохимической оценки хромаффинной реакции эритроцитов крыс при общем охлаждении организма. Способ включает охлаждение крыс, забор у них крови из легочной вены после ее флеботомии в воротах левого легкого. Изготавливают мазок крови на предметном стекле, окрашивают сначала 5% спиртовым раствором ализарина красного С, затем 5% раствором бихроматом калия. Под микроскопом подсчитывают количество различно окрашенных эритроцитов в группе от 300 клеток. После этого рассчитывают средний цитохимический коэффициент СЦК по формуле: в которой 1 балл - эритроциты не окрашены; 2 балла - гранулярная окраска периферии эритроцита, центральная часть клетки не окрашена; 3 балла - эритроциты целиком гранулярно окрашены. И при СЦК менее 2,4 устанавливают эффективную холодовую анестезию. Способ обеспечивает объективизацию оценки холодовой анестезии у животного, что позволяет проводить вивисекцию без использования наркосодержащих фармакологических средств. 1 пр., 1 табл.

Изобретение относится к экспериментальной биологии и предназначено для исследования поведенческих реакций лабораторных животных. Для этого предложена модифицированная тест-установка «Открытое поле». Установка включает круглую арену с высоким бортом, расчерченную на сектора. При этом она имеет несколько сменных арен, изготовленных из материала, не впитывающего запахи, а также единый раздвижной борт со скрепляющими механизмами. Арены имеют вариабельный диаметр, подходящий под размеры тестируемого животного, и выполнены с одинаковым количеством секторов, равным 37, при центральном секторе, имеющем форму круга. Площади секторов равны друг другу и превышают площадь занимаемой животным поверхности в 3,25 раза. Изобретение может использоваться для исследования поведения животных разных биологических видов, а также животных одного вида, но разных размеров при экономии и удобстве использования. 3 ил., 2 пр.

Изобретение относится к экспериментальной и спортивной медицине, в частности к способам моделирования физического переутомления у крыс в условиях десинхроноза. Нагрузку на животного осуществляют в два этапа. На первом этапе проводят индукцию экспериментального десинхроноза путем содержания крыс в течение 12 суток круглосуточно при искусственном освещении либо в полной темноте. После этого животных подвергают принудительному плаванию при естественном освещении с грузом, закрепленным на хвосте, вес которого составляет 10% веса тела животного. Используют стеклянный аквариум прямоугольной формы размерами 100 см × 100 см × 20 см. Аквариум разделен на отсеки, соединяющиеся у дна, и снабжен двумя вентилями - по одному сверху и снизу одной из боковых стенок. Температура воды составляет 26°-28°С. Животных подвергают плаванию до полного утомления, критерием которого являются три безуспешные попытки всплыть на поверхность либо отказ от таких попыток с опусканием на дно. Способ позволяет создать модель, при которой животные достигают состояния тренированности и резистентности к нагрузке и которая отражает проблемы спортивной физиологии, связанные с нарушением адаптивных резервов организма вследствие трансмеридианных перелетов и последующих спортивных тренировок. 1 табл.

Группа изобретений относится к медицинской технике. Тренажерное устройство содержит узел корпуса, содержащий наружный корпус, запускающий узел и демпферный блок, вставленные в наружный корпус. Демпферный блок содержит демпферный корпус и узел поршня, расположенный в указанном демпферном корпусе. Демпферный корпус установлен с возможностью перемещения относительно узла поршня и/или наружного корпуса к проксимальному концу устройства из заряженного положения к положению после имитации инъекции благодаря направленной наружу осевой силе от первого аккумулирующего энергию элемента. Узел поршня установлен с возможностью обеспечения первого сопротивления протеканию текучей среды через него в проксимальном направлении и обеспечения второго сопротивления протеканию текучей среды через него в дистальном направлении, причем второе сопротивление меньше первого сопротивления. Раскрыт блок для перезарядки тренажерного устройства. Технический результат состоит в обеспечении повторного использования тренажерного устройства для отработки автоматических инъекций. 2 н. и 11 з.п. ф-лы, 19 ил.

Изобретение относится к области медицины, а именно к экспериментальной медицине. Для моделирования гипоксического поражения поверхностных тканей глаза и сетчатки, приводящего к активации апоптоза, проводят воздействие физического фактора на экспериментальное животное. Получают гистологические образцы тканей глаза и выявляют в них клетки, находящиеся в состоянии апоптоза. Животное помещают в герметично закрывающуюся камеру объемом 0,10-0,15 м3, в которую производят подачу газообразного азота со скоростью 2,0-2,4 лмин до появления судорог у экспериментального животного. Способ обеспечивает возможность селективной активации апоптотических процессов одновременно в тканях поверхности глаза и сетчатки для оценки гипоксии в числе факторов, вызывающих синдром сухого глаза и ретинопатию. 6 ил.

Наверх