Способ определения степени тяжести изменений микробиоты полости рта, тонкой и толстой кишки у больных красным плоским лишаем слизистой оболочки рта с гепатобилиарными расстройствами, исключая гепатиты и обострения заболеваний гепатобилиарной системы и поджелудочной железы

Изобретение относится к области медицины, а именно к разделу терапевтической стоматологии - заболеваниям слизистой оболочки рта, и может быть использовано для определения степени тяжести изменений микробиоты полости рта, тонкой и толстой кишки у больных красным плоским лишаем слизистой оболочки рта с гепатобилиарными расстройствами, исключая гепатиты, обострения заболеваний гепатобилиарной системы и поджелудочной железы. Сущность способа: у данной категории больных выявляют маркеры микроорганизмов в биопробах слюны, крови и фекалиях с помощью метода газовой хроматографии и масс-спектрометрии. При повышении в определенной кратности в каждой из биопроб значений концентрации выявленных маркеров определенных микроорганизмов или хотя бы одного из них, по сравнению со средними значениями таких же показателей контрольной группы, определяют степени тяжести изменений микробиоты полости рта, тонкой и толстой кишки у данной категории больных. Изобретение обеспечивает определение степени тяжести изменений микробиоты полости рта, тонкой и толстой кишки у больных красным плоским лишаем слизистой оболочки рта. 5 пр., 1 табл.

 

Изобретение относится к области медицины, а именно разделу терапевтической стоматологии - заболеваниям слизистой оболочки рта, и может использоваться для определения степени тяжести изменений микробиоты полости рта, тонкой и толстой кишки у больных красным плоским лишаем слизистой оболочки рта (КПП СОР) с гепатобилиарными расстройствами, исключая гепатиты, обострения заболеваний гепатобилпарной системы и поджелудочной железы.

КПЛ СОР относят к дерматологическим аутоиммунным заболеваниям, до настоящего времени с неустановленной этиологией [1, 2, 3, 4].

Существуют разные клинические формы КПЛ СОР: сетчатая, экссудативно-гиперемическая, эрозивно-язвенная, буллезная, гиперкератотическая, атрофическая. В основе всех проявлений лежат характерные патоморфологические процессы: гранулез, акантоз, пара- и гиперкератоз в эпителии, полосовидный лимфо- и плазмоцитарный инфильтрат в собственной слизистой оболочке и повреждение базальной мембраны [2, 3, 4]. Общим клиническим признаком, определяемым визуально, является появление голубовато-перламутровых папул, при слиянии которых на слизистой оболочке образуется рисунок сетки (сетчатая форма) или бляшек (гиперкератотическая форма). При прогрессировании заболевания либо увеличивается площадь распространения папул, либо на фоне появления отека, гиперемии, эрозий, язв, пузырей могут меняться формы КПЛ СОР. Известно, что данные изменения в большей мере связаны с общими патологическими процессами, сопутствующими развитию КПЛ СОР [1, 2, 3, 4]. При этом, чем тяжелее и распространеннее развитие КПЛ СОР, тем сложнее его лечение [1, 4]. Этот факт диктует необходимость выявления факторов, осложняющих течение КПЛ СОР на фоне гепатобилиарных расстройств. Известно, что инфекционная альтерация слизистой оболочки рта (как и других тканей организма) может быть первичная - непосредственно местной инфекцией (пародонтиты, тонзиллиты и др.) и вторичная, когда альтерирующий инфекционный агент поступает в данную область гематогенным путем из отдаленных очагов, в том числе из тонкой и толстой кишки [5]. Некоторые исследователи учитывали влияние бактериального фактора на течение КПЛ, и в том числе КПЛ СОР, но исследование микрофлоры проводили методами, не позволяющими единовременно получить большой объем информации о качественном и количественном составе микробиоты полости рта и разных отделов кишечного тракта [1, 4, 6].

В связи с этим, актуальным явилось проведение исследования наиболее информативным методом, позволяющим детектировать широкий спектр микробиоты полости рта, тонкой и толстой кишки у больных КПЛ СОР и определять степень тяжести ее изменений. Определение степени тяжести изменений микробиоты полости рта, тонкой и толстой кишки у больных красным плоским лишаем слизистой оболочки рта с гепатобилиарными расстройствами необходимы для выбора адекватной тактики лечения больных КПЛ СОР.

Аналогов способа определения степени тяжести изменений микробиоты полости рта, тонкой и толстой кишки у больных КПЛ СОР с гепатобилиарными расстройствами, исключая гепатиты и обострения заболеваний гепатобилиарной системы и поджелудочной железы нами не обнаружено.

Техническим результатом изобретения является определение степени тяжести изменений микробиоты полости рта, тонкой и толстой кишки у больных КПЛ СОР с гепатобилиарными расстройствами, исключая гепатиты и обострения заболеваний гепатобилиарной системы и поджелудочной железы, что позволит выработать тактику адекватной терапии у данной категории больных.

Технический результат изобретения достигается тем, что у больных КПЛ СОР с гепатобилиарными расстройствами, исключая гепатиты, обострения заболеваний гепатобилиарной системы и поджелудочной железы, выявляют маркеры микроорганизмов в биопробах слюны, крови и фекалиях с помощью метода газовой хроматографии и масс-спектрометрии (ГХ-МС) с последующим определением концентрации маркеров выявленных микроорганизмов в каждой из биопроб и сравнением полученных значений со средними значениями концентрации маркеров таких же микроорганизмов у лиц контрольной группы без КПЛ СОР, но с наличием гепатобилиарных расстройств, исключая гепатиты, обострения заболеваний гепатобилиарной системы и поджелудочной железы. У лиц контрольной группы в слюне средние значения концентрации маркеров Streptococcus oralis - 720 кл/г × 10⁵, Nocardia 14:1d11 - 547 кл/г × 10⁵, Pseudomonas aeruginosa - 3 кл/г × 10⁵, в крови средние значения концентрации маркеров Streptococcus oralis - 644 кл/г × 10⁵, Nocardia 14:1d11 - 1631 кл/г × 10⁵, Eubacterium lentum гр. A - 351 кл/г × 10⁵, Prevotella - 38 кл/г × 10⁵, Cytomegalovirus - 517 кл/г × 10⁵, Bacillus cereus - 10 кл/г × 10⁵, Actinomycetes 10Ме14 - 23 кл/г × 10⁵, сем. Enterobacteriaceae - E.coli - 12 кл/г × 10⁵, Pseudomonas aeruginosa - 1 кл/г × 10⁵, в фекалиях средние значения концентрации маркеров - Streptococcus A - 2152 кл/г × 10⁵, Staphylococcus intermedius - 1870 кл/г × 10⁵, Clostridium perfringens - 5124 кл/г × 10⁵. При повышении в биопробе слюны в 1,1-2,9 раза значений концентрации маркеров микроорганизмов: Streptococcus oralis, Nocardia 14:1d11 или хотя бы одного из них, по сравнению со средними значениями таких же показателей контрольной группы, определяют легкую степень изменений микробиоты полости рта у данной категории больных. При повышении в биопробе крови в 1,1-2,9 раза значений концентрации маркеров микроорганизмов: Streptococcus oralis, Nocardia 14:1d11, Eubacterium lentum гр. A, Prevotella, Cytomegalovirus, Bacillus cereus, Actinomycetes 10Me14 или хотя бы одного из них, по сравнению со средними значениями таких же показателей контрольной группы, определяют легкую степень изменений микробиоты тонкой кишки у данной категории больных. При повышении в биопробе фекалий в 1,1-2,9 раза значений концентрации маркеров микроорганизмов: Streptcoccus A, Staphylococcus intermedius и Clostridium perfringens или хотя бы одного из них, по сравнению со средними значениями таких же показателей контрольной группы, определяют легкую степень изменений микробиоты толстой кишки у данной категории больных. При повышении в биопробе слюны в 3,0-7,9 раз значений концентрации маркеров микроорганизма Pseudomonas aeruginosa, по сравнению со средним значением такого же показателя контрольной группы, определяют среднюю степень изменений микробиоты полости рта у данной категории больных. При повышении в биопробе крови в 3,0-7,9 раз значений концентрации маркеров микроорганизмов: Prevotella, Cytomegalovirus, Bacillus cereus, Actinomycetes 10Me14 и сем. Enterobacteriaceae - E.coli или хотя бы одного из них, по сравнению со средними значениями таких же показателей контрольной группы, определяют среднюю степень изменений микробиоты тонкой кишки у данной категории больных. При повышении в биопробе фекалий в 3,0-7,9 раз значений концентрации маркеров микроорганизма Clostridium perfringens, по сравнению со средним значением такого же показателя контрольной группы, определяют среднюю степень изменений микробиоты толстой кишки данной категории больных. При повышении в биопробе слюны в 8,0-20,9 раза значений концентрации маркеров микроорганизма Pseudomonas aeruginosa, по сравнению со средними значениями такого же показателя контрольной группы, определяют тяжелую степень изменений микробиоты полости рта у данной категории больных. При повышении в биопробе крови в 8,0-20,9 раз значений концентрации маркеров микроорганизмов: Bacillus cereus, Actinomycetes 10Ме14, сем. Enterobacteriaceae - E.coli, Pseudomonas aeruginosa или хотя бы одного из них, по сравнению со средними значениями таких же показателей контрольной группы, определяют тяжелую степень изменений микробиоты тонкой кишки у данной категории больных. При повышении в биопробе крови в 21,0 и более раз значений концентрации маркеров микроорганизма Pseudomonas aeruginosa, по сравнению со средним значением такого же показателя контрольной группы, определяют очень тяжелую степень изменений микробиоты только тонкой кишки у данной категории больных. При выявлении маркеров нескольких микроорганизмов степени тяжести изменений микробиоты полости рта, тонкой и толстой кишки у данной категории больных определяют по максимальному значению кратности увеличения концентрации выявленных маркеров микроорганизмов, по сравнению со средними значениями таких же показателей контрольной группы.

Способ осуществляется следующим образом.

Первоначально у больных КПЛ СОР с гепатобилиарными расстройствами исключают наличие гепатитов, обострений заболеваний гепатобилиарной системы и поджелудочной железы путем иммунологических и биохимических исследований крови. В исследовании микробиоты полости рта, тонкой и толстой кишки у данной категории больных используют высокочувствительный экспрессный метод газовой хроматографии и масс-спектрометрии (ГХ-МС), который основан на методике извлечения маркерных веществ микроорганизмов (жирных кислот, альдегидов, спиртов и стеринов) из образцов различных субстратов (крови, слюны, фекалий и т.д.). Нами использовались: газовый хроматограф "Agilent 7890 " с масс-селективным и плазменно-ионизационным детекторами" Agilent Technologies", США, но можно использовать также и аналогичные приборы.

Биопробы слюны, крови и фекалий больных высушивают с добавлением равного по объему количества метанола и подвергают кислому метанолизу в 1М HCl в метаноле. Метанолиз проводят в 0,4 мл реактива на 10-15 мг сухого остатка (40 мкл цельной крови) в течение 1 часа при 80°C. На этой стадии происходит освобождение жирных кислот и альдегидов из сложных липидов микроорганизмов и других клеток жидкости в виде метиловых эфиров и диметилацеталей. Данные компоненты экстрагируют гексаном (400 мкл) в течение 5 мин, гексановый экстракт высушивают, а сухой остаток обрабатывают 20 мкл N,O-бис(триметил-силил)-трифторацетамида в течение 15 мин при 80°C для получения триметилсилильных эфиров оксикислот и стеролов. К реакционной смеси эфиров добавляют 80 мкл гексана и 1-2 мкл раствора вводят в инжектор ГХ-МС системы, соединенной с компьютером с соответствующими программами окончательного автоматического анализа и получают показатели концентрации маркеров микроорганизмов в значении - количество клеток на 1 грамм × 10⁵ (кл/г × 10⁵).

После чего сравнивают полученные значения с вычисленными нами средними значениями концентрации маркеров таких же микроорганизмов у лиц контрольной группы без КПЛ СОР, но с наличием гепатобилиарных расстройств, исключая гепатиты, обострения заболеваний гепатобилиарной системы и поджелудочной железы. У лиц контрольной группы в слюне средние значения концентрации маркеров Streptococcus oralis - 720 кл/г × 10⁵, Nocardia 14:1d11 - 547 кл/г × 10⁵, Pseudomonas aeruginosa - 3 кл/г × 10⁵, в крови средние значения концентрации маркеров Streptococcus oralis - 644 кл/г × 10⁵, Nocardia 14:1d11 - 1631 кл/г × 10⁵, Eubacterium lentum гр. A - 351 кл/г × 10⁵, Prevotella - 38 кл/г × 10⁵, Cytomegalovirus - 517 кл/г × 10⁵, Bacillus cereus - 10 кл/г × 10⁵, Actinomycetes 10Ме14 - 23 кл/г × 10⁵, сем. Enterobacteriaceae - E.coli - 12 кл/г×10⁵, Pseudomonas aeruginosa - 1 кл/г × 10⁵, в фекалиях средние значения концентрации маркеров - Streptococcus А - 2152 кл/г × 10⁵, Staphylococcus intermedius - 1870 кл/г × 10⁵, Clostridium perfringens - 5124 кл/г × 10⁵.

При повышении в биопробе слюны в 1,1-2,9 раза значений концентрации маркеров микроорганизмов: Streptococcus oralis, Nocardia 14:1d11, или хотя бы одного из них, по сравнению со средними значениями таких же показателей контрольной группы, определяют легкую степень изменений микробиоты полости рта у данной категории больных. При повышении в биопробе крови в 1,1-2,9 раза значений концентрации маркеров микроорганизмов: Streptococcus oralis, Nocardia 14:1d11, Eubacterium lentum гр. A, Prevotella, Cytomegalovirus, Bacillus cereus, Actinomycetes 10Me14 или хотя бы одного из них, по сравнению со средними значениями таких же показателей контрольной группы, определяют легкую степень изменений микробиоты тонкой кишки у данной категории больных. При повышении в биопробе фекалий в 1,1-2,9 раза значений концентрации маркеров микроорганизмов: Streptcoccus A, Staphylococcus intermedius и Clostridium perfringens или хотя бы одного из них, по сравнению со средними значениями таких же показателей контрольной группы, определяют легкую степень изменений микробиоты толстой кишки у данной категории больных.

При повышении в биопробе слюны в 3,0-7,9 раз значений концентрации маркеров микроорганизма Pseudomonas aeruginosa, по сравнению со средним значением такого же показателя контрольной группы, определяют среднюю степень изменений микробиоты полости рта у данной категории больных. При повышении в биопробе крови в 3,0-7,9 раз значений концентрации маркеров микроорганизмов: Prevotella, Cytomegalovirus, Bacillus cereus, Actinomycetes 10Me14 и сем. Enterobacteriaceae - E.coli или хотя бы одного из них, по сравнению со средними значениями таких же показателей контрольной группы определяют среднюю степень изменений микробиоты тонкой кишки у данной категории больных. При повышении в биопробе фекалий в 3,0-7,9 раз значений концентрации маркеров микроорганизма Clostridium perfringens, по сравнению со средним значением такого же показателя контрольной группы, определяют среднюю степень изменений микробиоты толстой кишки у данной категории больных.

При повышении в биопробе слюны в 8,0-20,9 раза значений концентрации маркеров микроорганизма Pseudomonas aeruginosa, по сравнению со средним значением такого же показателя контрольной группы, определяют тяжелую степень изменений микробиоты полости рта у данной категории больных. При повышении в биопробе крови в 8,0-20,9 раз значений концентрации маркеров микроорганизмов: Bacillus cereus, Actinomycetes 10Ме14, сем. Enterobacteriaceae - E.coli, Pseudomonas aeruginosa или хотя бы одного из них, по сравнению со средними значениями таких же показателей контрольной группы, определяют тяжелую степень изменений микробиоты тонкой кишки у данной категории больных.

При повышении в биопробе крови в 21,0 и более раз значений концентрации маркеров микроорганизма Pseudomonas aeruginosa, по сравнению со средним значением такого же показателя контрольной группы, определяют очень тяжелую степень изменений микробиоты только тонкой кишки у данной категории больных.

При выявлении маркеров нескольких микроорганизмов степени тяжести изменений микробиоты полости рта, тонкой и толстой кишки у данной категории больных определяют по максимальному значению кратности увеличения концентрации выявленных маркеров микроорганизмов, по сравнению со средними значениями таких же показателей контрольной группы.

Причинно-следственная связь между существенными отличительными признаками изобретения и достигаемым положительным результатом.

С помощью метода газовой хроматографии и масс-спектрометрии (ГХ-МС) у 33 больных КПЛ СОР на фоне гепатобилиарных расстройств, исключая гепатиты, обострения заболеваний гепатобилиарной системы и поджелудочной железы, а также у 34 лиц контрольной группы без КПЛ СОР, но с гепатобилиарными расстройствами, исключая гепатиты, обострения заболеваний гепатобилиарной системы и поджелудочной железы в биопробах слюны, крови и фекалий авторами заявляемого способа проведено исследование на выявление маркеров 57 микроорганизмов: Streptococcus орального, Streptococcus A, Streptococcus mutans - анаэроб, Peptostreptococcus анаэроб 1 и 2 типа, Staphylococcus и Staphylococcus intermedius, Enterococcus, Rhodococcus, Ruminicoccus, Eubacterium, Eubacterium lentum гр. A, Eubacterium moniliforme, Eubacterium/Cl. Coccoides, Clostridium hystolyticum, Clostridium propionicum, Clostridium ramosum, Clostridium difficile, Clostridium perfringens, Nocardia 14:1d11 и Nocardia asteroids, Bacillus cereus и Bacillus megaterium, Moraxella/Acinetobacter, Pseudomonas aeruginosa, Propionibacterium, Propionibacterium/Clostridium Subterminale, Propionibacterium acnes и Propionibacterium jensenii, Stenotrophomonas maltophilia, Bacteroides hypermegas, Actinomycetes 10Ме14 и Actinomyces viscosus, Pseudonocardia, Streptomyces, Pseudonocardia, Fusobacterium/Haemophylus, Alcaligenes, Penep, Flavobacterium, Porphyromonas, Corineform CDC-group XX, Lactobacillus, Campylobacter mucosalis, сем. Enterobacteriaceae - E.coli, Actinomadura, Prevotella, Bacteroides fragilis, Bifidobacterium, Helicobacter pylori, Blautia coccoides, Butyrivibrio/Cl. Fimetarum, Achromobacter, Mycobacterium/Candida, микрогрибы/кампестерол и микрогрибы/ситостерол, Herpes 1,2 типа, Cytomegalovirus.

По результатам статистической обработки методом факторного анализа по признаку максимального собственного значения более двух исходных переменных из 57-ми изучаемых показателей маркеров микроорганизмов у данной категории больных КПЛ СОР по сравнению с показателями лиц контрольной группы, было достоверно определено (p>0,5) повышение в слюне концентрации маркеров 3 микроорганизмов - Streptococcus oralis, Nocardia 14:1d11 и Pseudomonas aeruginosa; в крови - концентрации маркеров 9 микроорганизмов - Streptococcus oralis, Nocardia 14:1d11, Eubacterium lentum гр. A, Prevotella, Cytomegalovirus, Bacillus cereus, Actinomycetes 10Me14, сем. Enterobacteriaceae - E.coli и Pseudomonas aeruginosa; в фекалиях - концентрации маркеров 3 микроорганизмов - Streptococcus A, Staphylococcus intermedius и Clostridium perfringens. Таким образом, нами выявлены микробные факторы, осложняющие течение заболевания у больных КПЛ СОР с гепатобилиарными расстройствами, исключая гепатиты, обострения заболеваний гепатобилиарной системы и поджелудочной железы.

Метод ГХ-МС не только проводит мониторинг соединений, но и адекватно качественно и количественно определяет состав микробного сообщества, который кроется за набором маркеров конкретной биопробы. Поскольку к настоящему времени состав большинства клинически значимых микроорганизмов хорошо изучен, метод ГХ-МС позволяет детектировать в исследуемых образцах маркеры компонентов клеток широкого спектра - 57-ми микроорганизмов нормальной и патогенной микробиоты человека. По данным разработчиков метода ГХ-МС и различных исследований, одним из положительных его свойств является то, что показатели маркерных молекул крови предоставляют информацию, в большей степени, с труднодоступного для исследований участка - тонкой кишки, в связи с ее повышенным кровоснабжением и особенно, при увеличении объема микрофлоры, в ней обитающей [7, 8, 9].

Таким образом, в результате исследования биопроб слюны, крови и фекалий методом ГХ-МС и статистической обработки был выявлен не только наиболее часто встречающийся состав микробиоты, но и определены различные диапазоны показателей концентрации микробных маркеров в полости рта, тонкой и толстой кишке больных КПЛ СОР с гепатобилиарными расстройствами, исключая гепатиты, обострения заболеваний гепатобилиарной системы и поджелудочной железы.

Для определения степени тяжести изменений микробиоты полости рта, тонкой и толстой кишки у данной категории больных был проведен анализ результатов исследования по изучению среднего количественного состава маркеров микроорганизмов у больных КПЛ СОР с гепатобилиарными расстройствами, по сравнению со средними количественными показателями лиц контрольной группы без КПЛ СОР, но также с гепатобилиарными расстройствами, исключая гепатиты, обострения заболеваний гепатобилиарной системы и поджелудочной железы, в результате чего были определены 4 степени тяжести изменений микробиоты полости рта, тонкой и толстой кишки у данной категории больных в сравнении с показателями лиц контрольной группы (таблица №1).

Таким образом, впервые определены степени тяжести изменений микробиоты полости рта, тонкой и толстой кишки у больных красным плоским лишаем слизистой оболочки рта с гепатобилиарными расстройствами, исключая гепатиты, обострения заболеваний гепатобилиарной системы и поджелудочной железы, что позволит выработать тактику адекватной терапии у данной категории больных.

Способ иллюстрируется следующими клиническими примерами:

Пример №1. Больная К., 50 лет, обратилась к врачу-стоматологу с жалобами на появление болезненных ощущений в области зуба 3.1, появившиеся за последние 2 дня.

Жалобы общего характера: периодические болезненные ощущения в правом подреберье.

В анамнезе жизни: хронический тонзиллит, гипертоническая болезнь.

Объективно: в полости рта в дистальном отделе коронки зуба 3.1 определяется поверхностная кариозная полость. Слизистая оболочка полости рта без патологических изменений. Цвет слизистой оболочки мягкого неба - слегка желтушный.

После консультации с врачом-гастроэнтерологом и дополнительным обследованием методом УЗИ органов брюшной полости была выявлена дискинезия желчевыводящих путей. Биохимические исследования крови на печеночные показатели - без изменений. ИФА крови инфекционные гепатиты не выявил.

Результаты исследования маркеров микроорганизмов методом ГХ-МС биопроб слюны, крови и фекалий выявили:

В биопробе слюны:

Streptococcus oralis - 710 кл/г × 10⁵, что ниже среднего значения данного показателя в контрольной группе (720 кл/г × 10⁵).

Nocardia 14:1d11 - 540 кл/г × 10⁵, что ниже среднего значения данного показателя в контрольной группе (547 кл/г × 10⁵).

Pseudomonas aeruginosa - 3 кл/г × 10⁵, что соответствует средним значениям данного показателя в контрольной группе (3 кл/г × 10⁵).

В биопробе крови:

Streptococcus oralis - 650 кл/г × 10⁵ (среднее значение данного показателя в контрольной группе - 644 кл/г × 10⁵, определено повышение значения данного показателя в 1,01 раза, по сравнению со средним значением данного показателей контрольной группы, что указывает на отсутствие какой-либо стадии тяжести изменений микробиоты тонкой кишки).

Nocardia 14:1d11-1630 кл/г × 10⁵, что ниже среднего значения данного показателя в контрольной группе (1631 кл/г × 10⁵).

Eubacterium lentum гр. A - 351 кл/г × 10⁵, что соответствует среднему значению данного показателя в контрольной группе (351 кл/г × 10⁵). Prevotella - 36 кл/г × 10⁵, что ниже среднего значения данного показателя в контрольной группе (38 кл/г × 10⁵).

Cytomegalovirus - 520 кл/г × 10⁵ (среднее значение данного показателя в контрольной группе - 517 кл/г × 10⁵, определено повышение значения данного показателя в 1,005 раза, что указывает на отсутствие какой-либо стадии тяжести изменений микробиоты тонкой кишки).

Bacillus cereus - 9 кл/г × 10⁵, что ниже среднего значения данного показателя в контрольной группе (10 кл/г × 10⁵).

Actinomycetes 10Ме14 - 21 кл/г × 10⁵, что ниже среднего значения данного показателя в контрольной группе (23 кл/г × 10⁵).

сем. Enterobacte-riaceae (E.coli и др.) - 10 кл/г × 10⁵, что ниже среднего значения данного показателя в контрольной группе (12 кл/г × 10⁵).

Pseudomonas aeruginosa - 1 кл/г × 10⁵, что соответствует среднему значению данного показателя в контрольной группе (1кл/г × 10⁵).

В биопробе фекалий:

Streptococcus А-2152 кл/г × 10⁵, что соответствует среднему значению данного показателя в контрольной группе (2152 кл/г × 10⁵).

Staphylococcus intermedius - 1865 кл/г × 10⁵, что ниже среднего значения данного показателя в контрольной группе (1870 кл/г × 10⁵).

Clostridium perfringens - 5200 кл/г × 10⁵, что ниже среднего значения данного показателя в контрольной группе (5124 кл/г × 10⁵).

Оценка уровня концентрации исследуемых маркеров микроорганизмов в биопробах данной пациентки по высшим показателям показала, что полученные значения исследуемых показателей ниже среднего значения таких же показателей в контрольной группе или равны им (таблица 1).

Диагноз: поверхностный кариес зуба 3,1; слизистая оболочка рта без патологических изменений; дискинезия желчевыводящих путей без выраженных изменений микробиоты полости рта, тонкой и толстой кишки, характерных для больных КПЛ СОР.

Заключение: целесообразности в назначении данной больной антибактериальной терапии слизистой оболочки рта - нет; рекомендовано лечение дискинезии желчевыводящих путей и сопутствующих заболеваний.

Пример №2. Больная У., 45 лет, обратилась к врачу-стоматологу с жалобами на появление ощущений стянутости и шероховатости в области дистального отдела слизистой оболочки правой щеки, появившиеся за последние 3 месяца.

Жалобы общего характера: ощущения тяжести в правом подреберье, хронические запоры.

В анамнезе жизни: хронический гастрит, гипертоническая болезнь.

Объективно: в полости рта в дистальном отделе правой щеки на фоне слабо-розовой слизистой оболочки определяется участок - 2,0×3,2 см в диаметре, с возвышающимися мелкими узелками голубовато-перламутровой окраски, сгруппированными в виде сеточки. На слизистой оболочке других отделов полости рта подобные высыпания отсутствуют. Цвет слизистой оболочки мягкого неба - слегка желтушный. После консультации с врачом-гастроэнтерологом и дополнительным обследованием: с исключением инфекционных гепатитов методом ИФА крови, УЗИ органов брюшной полости в желчном пузыре обнаружена густая пристеночная желчь. Биохимические исследования печеночных ферментов - без изменений.

Результаты исследования маркеров микроорганизмов методом ГХ-МС биопроб слюны, крови и фекалий выявили:

В биопробе слюны:

Streptococcus oralis - 720 кл/г × 10⁵, что соответствует средним значениям данного показателя в контрольной группе (720 кл/г × 10⁵).

Nocardia 14:1d11 - 545 кл/г × 10⁵, что ниже среднего значения данного показателя в контрольной группе (547кл/г × 10⁵).

Pseudomonas aeruginosa - 3 кл/г × 10⁵, что соответствует средним значениям данного показателя в контрольной группе (3 кл/г × 10⁵).

В биопробе крови:

Определено незначительное повышение концентрации Streptococcus oralis - 740 кл/г × 10⁵ (среднее значение данного показателя в контрольной группе - 644 кл/г × 10⁵, определено повышение значения данного показателя в 1,1 раза, по сравнению со средним значением данного показателей контрольной группы, что соответствует легкой степени изменений микробиоты тонкой кишки).

Nocardia 14:1d11 - 2080 кл/г × 10⁵ (среднее значение данного показателя в контрольной группе -1631 кл/г × 10⁵, определено повышение значения данного показателя в 1,3 раза, по сравнению со средним значением данного показателей контрольной группы, что соответствует легкой степени изменений микробиоты тонкой кишки).

Actinomycetes 10Ме14 - 35 кл/г × 10⁵ (среднее значение данного показателя в контрольной группе - 23 кл/г × 10⁵, определено повышение значения данного показателя в 1,5 раза, по сравнению со средним значением данного показателей контрольной группы, что соответствует легкой степени изменений микробиоты тонкой кишки).

В биопробе фекалий:

Clostridium perfringens - 7200 кл/г × 10⁵ (среднее значение данного показателя в контрольной группе - 5124 кл/г × 10⁵, определено повышение значения данного показателя в 1,4 раза, по сравнению со средним значением данного показателей контрольной группы, что соответствует легкой степени изменений микробиоты толстой кишки).

Оценка уровня концентрации исследуемых маркеров микроорганизмов в биопробе фекалий данной больной определила легкую степень изменений микробиоты в толстой кишке и по высшим показателям в биопробах крови - легкую степень изменений микробиоты в тонкой кишке (таблица 1).

Диагноз: красный плоский лишай слизистой оболочки рта, сетчатая, локализованная форма на фоне гепатобилиарных расстройств билиарного типа и на фоне легкой степени изменений микробиоты тонкой и толстой кишки.

Заключение: целесообразности в назначении данной больной антибактериальной терапии слизистой оболочки рта - нет; рекомендуется терапия для коррекции изменений микробиоты тонкой и толстой кишки 1, легкой степени, а также лечение гепатобилиарных расстройств билиарного типа и других патологических состояний.

Пример №3. Больная С., 58 лет, обратилась к врачу-стоматологу с жалобами на болезненность, особенно при приеме пищи, слизистой оболочки щек и губ. Появились жалобы 2 года назад, а за последние 7 месяцев резко усилились.

Жалобы общего характера: на ощущения болезненности в правом подреберье, хронические запоры.

В анамнезе: желчекаменная болезнь (желчный пузырь удален полгода назад), гипертоническая болезнь, сахарный диабет 2-го типа, ожирение 1-й степени.

Объективно: в полости рта на дистальной поверхности слизистой оболочки щек, слизистой оболочки верхней губы, на переходных складках нижней челюсти определяется типичная для красного плоского лишая сеточка голубовато-перламутрового цвета из сгруппированных мелких папул. На этом фоне определяются также множественные участки ярко-красных пятен гиперемии в области левой и правой щеки размером до 2,5 см в диаметре. Цвет слизистой оболочки неба - ярко-желтый.

После консультации с врачом-гастроэнтерологом и дополнительным обследованием: исключение инфекционных гепатитов методом ИФА крови, УЗИ органов брюшной полости, биохимического исследования крови, копрограммы у больной установлен билиарный тип гепатобилиарных расстройств и стеатоз печени.

Результаты исследования маркеров микроорганизмов методом ГХ-МС биопроб слюны, крови и фекалий выявили:

В биопробе слюны:

Pseudomonas aeruginosa - 40 кл/г × 10⁵ (среднее значение данного показателя в контрольной группе - 3 кл/г × 10⁵, определено повышение значения данного показателя в 13,3 раза, по сравнению со средним значением данного показателей контрольной группы, что соответствует тяжелой степени изменений микробиоты полости рта).

В биопробе крови:

Pseudomonas aeruginosa - 15 кл/г × 10⁵ (среднее значение данного показателя в контрольной группе - 1 кл/г × 10⁵, определено повышение значения данного показателя в 15 раз, по сравнению со средним значением данного показателей контрольной группы, что соответствует тяжелой степени изменений микробиоты тонкой кишки).

Actinomycetes 10Ме14 - 170 кл/г × 10⁵, (среднее значение данного показателя в контрольной группе - 23 кл/г × 10⁵, определено повышение значения данного показателя в 7,4 раза, по сравнению со средним значением данного показателей контрольной группы, что соответствует средней степени изменений микробиоты тонкой кишки).

сем. Enterobacteriaceae (E.coli и др.) - 120 кл/г × 10⁵; (среднее значение данного показателя в контрольной группе - 12 кл/г × 10⁵, определено повышение значения данного показателя в 10 раз, по сравнению со средним значением данного показателей контрольной группы, что соответствует тяжелой степени изменений микробиоты тонкой кишки).

В биопробе фекалий:

Streptococcus А - 2850 кл/г × 10⁵ (среднее значение данного показателя в контрольной группе - 2152 кл/г × 10⁵, определено повышение значения данного показателя в 1,3 раза, по сравнению со средним значением данного показателей контрольной группы, что соответствует легкой степени изменений микробиоты толстой кишки).

Staphylococcus intermedius - 3860 кл/г × 10⁵ (среднее значение данного показателя в контрольной группе - 1870 кл/г × 10⁵, определено повышение значения данного показателя в 2,1 раза, по сравнению со средним значением данного показателей контрольной группы, что соответствует легкой степени изменений микробиоты толстой кишки).

Clostridium perfringens - 5124 кл/г × 10⁵ (среднее значение данного показателя в контрольной группе - 5124 кл/г × 10⁵, что соответствует среднему значению данного показателя в контрольной группе).

Оценка уровня концентрации исследуемых маркеров микроорганизмов в биопробе слюны определила у данной больной тяжелую степень изменения микробиоты полости рта и по высшим значениям концентрации исследуемых маркеров микроорганизмов в биопробах крови - тяжелую степень изменения микробиоты тонкой кишки и легкую степень изменения микробиоты толстой кишки (таблица 1).

Диагноз: красный плоский лишай слизистой оболочки рта, экссудативно-гиперемическая, распространенная форма на фоне билиарного типа гепатобилиарных расстройств, стеатоза печени и 3-й, тяжелой степени изменений микробиоты полости рта и тонкой кишки и 1-й, легкой степени - толстой кишки.

Заключение: отмечаются показания для данной больной в назначении антибактериальной терапии слизистой оболочки рта; лечения гепатобилиарных расстройств билиарного типа и назначении антибактериальной терапии для лечения изменений микробиоты тонкой кишки и коррекции микробиоты толстой кишки; лечения другой сопутствующей патологии.

Пример №4. Больная П., 64 года, обратилась к врачу-стоматологу с жалобами на болезненные ощущения, чувство жжения и стянутости в области слизистой оболочки щек, губ и боковых поверхностей языка, на что больная обратила внимание 4 месяца назад. Жалобы общего характера: периодически страдает болями в эпигастральной области и в области правого подреберья. Стул нерегулярный.

Из анамнеза: страдает ожирением 2-й степени и сахарным диабетом 2-го типа.

Объективно: слизистая оболочка рта отечна; на слизистой оболочке щек, верхней и нижней губы, а также боковых поверхностей языка определяются участки гиперемии разных размеров. На этом фоне наблюдается диффузный сетчатый рисунок из группированных голубовато-перламутровых папул, а также в области щек определяются по одной эрозии - 0,5-1,5 см в диаметре. Слизистая оболочка мягкого неба, щек и губ иктерична.

После консультации с врачом-гастроэнтерологом и дополнительным обследованием методами УЗИ органов брюшной полости и биохимического анализа крови у больной (повышены уровни АЛТ, общего и прямого билирубина) установлены билиарный тип гепатобилиарных расстройств и стеатоз печени.

Результаты исследования маркеров микроорганизмов методом ГХ-МС биопроб слюны, крови и фекалий выявили:

В биопробе слюны:

Pseudomonas aeruginosa - 55 кл/г × 10⁵ (среднее значение данного показателя в контрольной группе - 3 кл/г × 10⁵, определено повышение значения данного показателя в 18,3 раза, по сравнению со средним значением данного показателей контрольной группы, что соответствует тяжелой степени изменений микробиоты полости рта).

В биопробе крови:

Pseudomonas aeruginosa - 25 кл/г × 10⁵ (среднее значение данного показателя в контрольной группе - 1 кл/г × 10⁵, определено повышение значения данного показателя в 25 раз, по сравнению со средним значением данного показателей контрольной группы, что соответствует очень тяжелой степени изменений микробиоты тонкой кишки).

Actinomycetes 10Ме14 - 205 кл/г × 10⁵ (среднее значение данного показателя в контрольной группе - 23 кл/г × 10⁵, определено повышение значения данного показателя в 8,9 раза, по сравнению со средним значением данного показателей контрольной группы, что соответствует тяжелой степени изменений микробиоты тонкой кишки).

сем. Enterobacteriaceae - E.coli - 140 кл/г × 10⁵ (среднее значение данного показателя в контрольной группе - 12 кл/г × 10⁵, определено повышение значения данного показателя в 11,7 раз, по сравнению со средним значением данного показателей контрольной группы, что соответствует тяжелой степени изменений микробиоты тонкой кишки).

В биопробе фекалий:

Clostridium perfringens - 21000 кл/г × 10⁵ (среднее значение данного показателя в контрольной группе - 5124 кл/г × 10⁵, определено повышение значения данного показателя в 4,1 раза, по сравнению со средним значением данного показателей контрольной группы, что соответствует средней степени изменений микробиоты толстой кишки).

Оценка уровня концентрации исследуемых маркеров микроорганизмов в биопробах по высшим показателям определило у данной больной тяжелую степень изменений микробиоты полости рта и очень тяжелой - тонкой кишки, а также среднюю степень изменений микробиоты толстой кишки (таблица 1).

Диагноз: красный плоский лишай слизистой оболочки рта, эрозивно-язвенная распространенная форма на фоне билиарного типа гепатобилиарных расстройств и стеатоза печени, а также на фоне тяжелой степени изменений микробиоты полости рта и тонкой кишки и средней степени изменений микробиоты толстой кишки.

Заключение: для лечения больной отмечаются показания в назначении антибактериальной терапии слизистой оболочки рта; лечения гепатобилиарных расстройств билиарного типа и назначении антибактериальной терапии для лечения изменений микробиоты тонкой кишки и коррекции микробиоты толстой кишки; лечения другой сопутствующей патологии.

Пример №5. Больной М., 53 лет, обратился к врачу-стоматологу с жалобами на ощущение шероховатости и чувство стянутости на слизистой оболочке щек и спинке языка, на болезненные ощущения и кровоточивость слизистой оболочки десен, беспокоящие в течение 1,5 лет.

Жалобы общего характера: на чувство тяжести и болезненные ощущения в области левого подреберья, особенно после приема жирной пищи, периодические явления метеоризма и жидкий стул. В анамнезе: хронический панкреатит, холецистит, гипертоническая болезнь.

Объективно: на фоне неизмененной слизистой оболочке правой и левой щек наблюдается распространенный сетчатый рисунок из сгруппированных голубовато-перламутровых папул; на спинке языка папулы густо группируются в бляшки. Слизистая оболочка десен верхней челюсти и нижней челюсти вдоль зубных рядов ярко-красного цвета с истонченным голубоватым эпителием, кровоточащая при дотрагивании. Слизистая оболочка мягкого неба имеет выраженный иктеричный оттенок. После консультации с врачом-гастроэнтерологом и результатов проведенного исследования методами УЗИ органов брюшной полости, биохимического анализа крови с определением повышения уровней общего билирубина, ACT и АЛТ, амилазы, липазы, изучения копрограммы у больного диагностирован выраженный панкреатический тип гепатобилиарных расстройств. ИФА крови инфекционные гепатиты не выявил.

Результаты исследования маркеров микроорганизмов методом ГХ-МС биопроб слюны, крови и фекалий выявили:

В биопробе слюны:

Pseudomonas aeruginosa - 58 кл/г × 10⁵ (среднее значение данного показателя в контрольной группе - 3 кл/г × 10⁵, определено повышение значения данного показателя в 19,3 раза, по сравнению со средним значением данного показателей контрольной группы, что соответствует тяжелой степени изменений микробиоты полости рта).

В биопробе крови:

Pseudomonas aeruginosa - 24 кл/г × 10⁵ (среднее значение данного показателя в контрольной группе - 1 кл/г × 10⁵, определено повышение значения данного показателя в 24 раза, по сравнению со средним значением данного показателей контрольной группы, что соответствует очень тяжелой степени изменений микробиоты тонкой кишки).

Actinomycetes 10Ме14 - 285 кл/г × 10⁵ (среднее значение данного показателя в контрольной группе - 23 кл/г × 10⁵, определено повышение значения данного показателя в 12,3 раза, по сравнению со средним значением данного показателей контрольной группы, что соответствует тяжелой степени изменений микробиоты тонкой кишки).

сем. Enterobacteriaceae - E.coli - 210 кл/г × 10⁵ (среднее значение данного показателя в контрольной группе - 12 кл/г × 10⁵, определено повышение значения данного показателя в 17,5 раз, по сравнению со средним значением данного показателей контрольной группы, что соответствует тяжелой степени изменений микробиоты тонкой кишки).

В биопробе фекалий:

Clostridium perfringens - 31000 кл/г × 10⁵ (среднее значение данного показателя в контрольной группе - 5124 кл/г × 10⁵, определено повышение значения данного показателя в 6,05 раза, по сравнению со средним значением данного показателей контрольной группы, что соответствует средней степени изменений микробиоты толстой кишки).

Оценка уровня концентрации исследуемых маркеров микроорганизмов в биопробах по высшим показателям определило у данного больного тяжелую степень изменений микробиоты полости рта; очень тяжелую степень - тонкой кишки, а также среднюю степень изменений микробиоты толстой кишки (таблица 1).

Диагноз: красный плоский лишай слизистой оболочки рта, распространенная сетчатая и гипекератотические формы с распространенным десквамативным гингивитом на фоне выраженных гепатобилиарных расстройств билиарного типа, стеатоза печени и тяжелой степени изменений микробиоты полости рта, очень тяжелой степени изменений микробиоты тонкой кишки, а также средней степени изменений микробиоты толстой кишки.

Заключение: отмечаются показания для данного больного в назначении антибактериальной терапии слизистой оболочки рта и тонкой кишки, лечении гепатобилиарных расстройств панкреатического типа и назначении терапии для лечения изменений микробиоты толстой кишки, а также для лечения сопутствующей патологии.

Способ апробирован у 33 больных красным плоским лишаем слизистой оболочки рта с гепатобилиарными расстройствами, исключая гепатиты, обострения заболеваний гепатобилиарной системы и поджелудочной железы. У 9 больных определена легкая степень изменений микробиоты полости рта, у 5 больных - средняя, у 10 больных - тяжелая и у 5 больных - очень тяжелая степень изменений микробиоты полости рта, у 4 больных - значения концентрации микробных маркеров не превышало средних значений аналогичных показателей контрольной группы.

Выявление тяжелых изменений в микробиоте полости рта и тонкой кишки у больных с осложненными формами течения КПЛ СОР указывает на то, что данные изменения играют большую роль в патогенезе осложненных форм данного заболевания. Чем степень тяжести изменений микробиоты выраженнее, тем КПЛ СОР приобретает более тяжелую и распространенную форму заболевания. Степень тяжести изменений микробиоты полости рта, тонкой и толстой кишки у данной категории больных диктует определенную тактику лечения как воспалительных изменений слизистой оболочки рта при КПЛ СОР, так и гепатобилиарных нарушений и их осложнений.

Таким образом, впервые определены степени тяжести изменений микробиоты полости рта, тонкой и толстой кишки у больных красным плоским лишаем слизистой оболочки рта с гепатобилиарными расстройствами, исключая гепатиты, обострения заболеваний гепатобилиарной системы и поджелудочной железы, что позволяет выработать тактику адекватной терапии у данной категории больных.

Литература

1. Безрукова И.В. Клинико-лабораторное обоснование нормализации биоценоза в полости рта у больных с красным плоским лишаем. - Автореф. дисс. канд. мед. наук. – М., 1997. - 20 с.

2. Заболевания слизистой оболочки рта и губ / Под ред. проф. Е.В. Боровского, проф. А.Л. Машкиллейсона - М.: МЕДпресс, 2001. - 320 с. - С. 156-166.

3. Рабинович О.Ф. Иммунологические аспекты патогенеза красного плоского лишая слизистой оболочки рта (клиника, диагностика, лечение): Автореф. дис. … док. мед. наук. - Москва, 2001. - 39 с.

4. Шумский А.В., Трунина Л.П. Красный плоский лишай: монография. - Самара, РЕАВИЗ, 2004. - 161 с.

5. Поздеев O.K. Медицинская микробиология: учебное пособие для вузов. / Под ред. акад. РАМН В.И Покровского. - Москва, Издательская группа ГЭОТАР-Медиа, 2005. - 765 с.

6. Chung S.C. Treatment of oral erosive lichen planus with griseofulvin // Taehan Chikkwa Uisa Hyophoe Chi. - 1987. Vol. 25, №7. - P. 673-67.

7. Осипов Г.А. Способ определения родового (видового) состава ассоциации микроорганизмов. / Патент РФ №2086642. C12N 1/00, 1/20, C12Q 1/4, 24.12.1993.

8. Осипов Г.А, Федосова Н.Ф., Лядов К.В. Количественный in situ микробиологический анализ по липидным маркерам в биологических жидкостях с использованием метода газовой хроматографии – масс-спектрометрии. Здравоохранение и медицинские технологии. 2007, №5, стр. 20-23.

9. Полеско И.В., Бутов Ю.С., Осипов Г.А., Кабаева Т.И., Парфенов В.В., Деленян Н.В. Состав кожного сала, микроэкология кожи и кишечника у больных себорейным дерматитом и акне (исследование методом газовой хроматографии и масс-спектрометрии). // Рос. Журнал кожных и венерических болезней. - 2007. - №2. - С. 43-50.

Способ определения степени тяжести изменений микробиоты полости рта, тонкой и толстой кишки у больных красным плоским лишаем слизистой оболочки рта (КПЛ СОР) с гепатобилиарными расстройствами, исключая гепатиты, обострения заболеваний гепатобилиарной системы и поджелудочной железы, заключающийся в выявлении маркеров микроорганизмов в биопробах слюны, крови и фекалиях данной категории больных с помощью метода газовой хроматографии и масс-спектрометрии (ГХ-МС) с последующим определением концентрации маркеров выявленных микроорганизмов в каждой из биопроб и сравнением полученных значений со средними значениями концентрации маркеров таких же микроорганизмов у лиц контрольной группы без КПЛ СОР, но с наличием гепатобилиарных расстройств, исключая гепатиты, обострения заболеваний гепатобилиарной системы и поджелудочной железы, при этом у лиц контрольной группы в слюне средние значения концентрации маркеров Streptococcus oralis - 720 кл/г×10⁵, Nocardia 14:1d11 - 547 кл/г×10⁵, Pseudomonas aeruginosa - 3 кл/г×10⁵, в крови средние значения концентрации маркеров Streptococcus oralis - 644 кл/г×10⁵, Nocardia 14:1d11 - 1631 кл/г×10⁵, Eubacterium lentum гр. A - 351 кл/г×10⁵, Prevotella - 38 кл/г×10⁵, Cytomegalovirus - 517 кл/г×10⁵, Bacillus cereus - 10 кл/г×10⁵, Actinomycetes 10Ме14 - 23 кл/г×10⁵, сем. Enterobacteriaceae - E. coli - 12 кл/г×10⁵, Pseudomonas aeruginosa - 1 кл/г×10⁵, в фекалиях средние значения концентрации маркеров Streptococcus А - 2152 кл/г×10⁵, Staphylococcus intermedius - 1870 кл/г×10⁵, Clostridium perfringens - 5124 кл/г×10⁵, и при повышении в биопробе слюны в 1,1-2,9 раза значений концентрации маркеров микроорганизмов: Streptococcus oralis, Nocardia 14:1d11 или хотя бы одного из них, по сравнению со средними значениями таких же показателей контрольной группы, определяют легкую степень изменений микробиоты полости рта у данной категории больных, при повышении в биопробе крови в 1,1-2,9 раза значений концентрации маркеров микроорганизмов: Streptococcus oralis, Nocardia 14:1d11, Eubacterium lentum гр. A, Prevotella, Cytomegalovirus, Bacillus cereus, Actinomycetes 10Ме14 или хотя бы одного из них, по сравнению со средними значениями таких же показателей контрольной группы, определяют легкую степень изменений микробиоты тонкой кишки у данной категории больных, при повышении в биопробе фекалий в 1,1-2,9 раза значений концентрации маркеров микроорганизмов: Streptcoccus A, Staphylococcus intermedius и Clostridium perfringens или хотя бы одного из них, по сравнению со средними значениями таких же показателей контрольной группы, определяют легкую степень изменений микробиоты толстой кишки, при повышении в биопробе слюны в 3,0-7,9 раз значений концентрации маркеров микроорганизма Pseudomonas aeruginosa, по сравнению со средним значением такого же показателя контрольной группы, определяют среднюю степень изменений микробиоты полости рта у данной категории больных, при повышении в биопробе крови 3,0-7,9 раз значений концентрации маркеров микроорганизмов: Prevotella, Cytomegalovirus, Bacillus cereus, Actinomycetes 10Me14 и сем. Enterobacteriaceae - E. coli или хотя бы одного из них, по сравнению со средними значениями таких же показателей контрольной группы, определяют среднюю степень изменений микробиоты тонкой кишки, при повышении в биопробе фекалий в 3,0-7,9 раз значений концентрации маркеров микроорганизма Clostridium perfringens, по сравнению со средним значением такого же показателя контрольной группы, определяют среднюю степень изменений микробиоты толстой кишки у данной категории больных, при повышении в биопробе слюны в 8,0-20,9 раза значений концентрации маркеров микроорганизма Pseudomonas aeruginosa, по сравнению со средним значением такого же показателя контрольной группы, определяют тяжелую степень изменений микробиоты полости рта у данной категории больных, при повышении в биопробе крови в 8,0-20,9 раз значений концентрации маркеров микроорганизмов: Bacillus cereus, Actinomycetes 10Ме14, сем. Enterobacteriaceae - E. coli, Pseudomonas aeruginosa или хотя бы одного из них, по сравнению со средними значениями таких же показателей контрольной группы, определяют тяжелую степень изменений микробиоты тонкой кишки у данной категории больных, при повышении в биопробе крови в 21,0 и более раз значений концентрации маркеров микроорганизма Pseudomonas aeruginosa, по сравнению со средним значением такого же показателя контрольной группы, определяют очень тяжелую степень изменений микробиоты только тонкой кишки у данной категории больных, причем при выявлении маркеров нескольких микроорганизмов степени тяжести изменений микробиоты полости рта, тонкой и толстой кишки у данной категории больных определяют по максимальному значению кратности увеличения концентрации выявленных маркеров микроорганизмов, по сравнению со средним значением такого же показателя контрольной группы.