Способ прогнозирования невынашивания беременности инфекционного генеза на ранних сроках гестации


 


Владельцы патента RU 2616902:

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ГБОУ ВПО РНИМУ им. Н.И. Пирогова Минздрава России) (RU)

Изобретение относится к акушерству и касается прогнозирования угрозы невынашивания беременности инфекционного генеза на ранних сроках гестации. Способ состоит в том, что в лейкоцитах периферической крови беременной на 5-11 неделе гестации с помощью полимеразной цепной реакции в реальном времени определяют уровни экспрессии генов Toll-подобных рецепторов TLR4 и TLR9, гена противомикробного пептида HBD1. При одновременном снижении определяемых показателей, по меньшей мере, в 2,5 раза по сравнению с их уровнем, установленным при физиологически протекающей беременности, прогнозируют угрозу выкидыша в первом триместре гестации. Использование изобретения позволяет осуществить профилактику осложнений, обусловленных инвазивностью исследования (исключение забора биологического материала клеток эндометрия) при одновременном обеспечении точности прогнозирования невынашивания беременности инфекционного генеза на ранних сроках гестации за счет использования в качестве биологического материала лейкоцитов периферической крови. 1 табл., 4 пр.

 

Изобретение относится к акушерству и касается прогнозирования угрозы невынашивания беременности инфекционного генеза на ранних сроках гестации.

Известно, что при физиологически протекающей беременности происходит супрессия адаптивного иммунитета, сопровождающаяся активацией врожденного иммунитета. (Макаров О.В., Ковальчук Л.В., Ганковская Л.В., Бахарева И.В., Ганковская О.А. Невынашивание беременности, инфекция, врожденный иммунитет, Москва, «ГЭОТАР-Медиа», 2007, с. 176). Иммунологический баланс беременной женщины ограждает от иммунной агрессии полуаллогенный плод, при этом сохраняя защиту от инфекционных агентов.

При недостаточной активации врожденного иммунитета при беременности организм становится более уязвимым для инфекции, что влечет за собой внутриутробное инфицирования и невынашивание беременности. Доказано, что урогенитальная инфекция - частая причина прерывания беременности. На данный момент основными причинами невынашивания считаются инфекции, передаваемые половым путем, и иммунные нарушения в организме женщины (Сидельникова В.М. Привычная потеря беременности. Москва. Триада-Х, 2000, с. 50).

Последние несколько лет ведущую роль при физиологически протекающей беременности и ее патологии занимает система врожденного иммунитета. Сигнальные рецепторы врожденного иммунитета - Toll-подобные рецепторы - это семейство сигнальных молекул, распознающих консервативные молекулярные паттерны патогенов, включая бактерии, вирусы, грибы (Abrahams Vikki М. Toll-like receptors in the cycling reproductive tract and during pregnancy. Current Woman,s Health Reviews, 2005, 1. p. 37).

Известно, что Toll-подобные рецепторы высоко экспрессируются лейкоцитами крови.

На данный момент известен способ прогнозирования выкидыша на ранних сроках гестации путем определения уровня экспрессии Toll-подобных рецепторов - TLR1-10 клетками эндометрия при состоявшемся выкидыше инфекционно-воспалительного генеза на сроке 6-10 недель у пациенток (Лебедева О.П., Пахомов С.П., Ивашова О.Н., Старцева Н.Ю., Чурносов М.И. Сигнальные рецепторы врожденного иммунитета в индукции апоптоза при невынашивании беременности ранних сроков. Акушерство и гинекология. №2 / 2015). Данный способ выбран нами в качестве прототипа. Недостатком данного способа является выявление маркеров невынашивания уже после выкидыша, а также то, что в качестве биологического материала для исследования были выбраны клетки эндометрия, полученные при выскабливании полости матки. Следовательно, подобная диагностика неприменима при угрозе невынашивания в I триместре, т.к. может спровоцировать выкидыш.

Нами была поставлена задача поиска маркеров прогнозирования угрозы невынашивания беременности инфекционного генеза на ранних сроках гестации, связанных с показателями системы врожденного иммунитета.

Техническим результатом, достигаемым при осуществлении предлагаемого изобретения, является профилактика осложнений, обусловленных инвазивностью исследования (исключение забора биологического материала клеток эндометрия) при одновременном обеспечении точности прогнозирования невынашивания беременности инфекционного генеза на ранних сроках гестации за счет использования в качестве биологического материала лейкоцитов периферической крови.

На первом этапе была обследована группа женщин с физиологически протекающей беременностью в I триместре и определены показатели системы врожденного иммунитета (установлена норма экспрессии генов TLR4, TLR9 и HBD1) в лейкоцитах периферической крови (Табл. 1).

При исследовании группы женщин с угрозой прерывания беременности инфекционного генеза ранних сроков гестации нами впервые было выявлено, что снижение экспрессии генов TLR4, TLR9 и HBD1, по меньшей мере, в 2,5 раза ассоциировано с выкидышем в первом триместре (Табл. 1). Угроза выкидыша происходит, по-видимому, за счет низкой активации врожденного иммунитета, приводящей к неспособности своевременно распознать и уничтожить патогены, что в дальнейшем ведет к развитию выкидыша.

Выявленные нами прогностические признаки оказались пригодными для клинических целей - прогнозирования невынашивания беременности инфекционного генеза на ранних сроках гестации и, соответственно, своевременной коррекции ведения беременных.

Сущность изобретения заключается в следующем.

Для прогнозирования невынашивания беременности инфекционного генеза на ранних сроках гестации в лейкоцитах периферической крови беременной на 5-11 неделе гестации с помощью полимеразной цепной реакции в реальном времени определяют уровни экспрессии генов Toll-подобных рецепторов TLR4 и TLR9, гена противомикробного пептида HBD1. При одновременном снижении определяемых показателей, по меньшей мере, в 2,5 раза по сравнению с их уровнем, установленным при физиологически протекающей беременности, прогнозируют угрозу выкидыша в первом триместре гестации.

Способ осуществляется следующим образом.

Для изучения экспрессии генов TLR4, TLR9 и HBD1 используют следующую методику, которая включала в себя несколько последовательных этапов: забор венозной крови путем пункции локтевой вены, выделение лейкомассы из периферической крови, выделение из полученных клеток РНК, проведение реакции обратной транскрипции для синтеза на матрице РНК копии кДНК и проведение полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Взятие венозной крови проводят общепринятым способом и транспортируют в пробирке с этилендиаминтетрауксусной кислотой (ЭДТА) для предотвращения свертывания крови. Далее берут 5 мл крови и 1 мл 6% раствора декстрана, после чего пробирки с кровью и декстраном помещают в термостат под углом 45° и инкубируют 30 минут при температуре 37°С. После инкубации надосадочную жидкость (около 3 мл), содержащую лейкоциты, собирают в отдельные пробирки и отмывают от декстрана в среде 199 с солями Хенкса.

Для этого к 3 мл лейкомассы добавляют 1 мл питательной среды и ресуспензируют в ней клетки, потом центрифугируют 15 минут при 200g. Далее сливают надосадочную жидкость, а к осажденным клеткам снова добавляют 1 мл среды, ресуспензируют, центрифугируют 15 минут при 200g в центрифуге. Данную процедуру повторяют 2 раза. После последней отмывки к клеткам добавляют 1 мл среды 199.

Для выделения РНК из полученных лейкоцитов используют набор реактивов для выделения ДНК/РНК методом аффинной сорбции на частицах силикагеля «АмплиПРАИМ Рибо-сорб» (ИнтерЛабСервис, РФ) строго в соответствии с протоколом. В пробирки на 1,5 мл вносят 450 мкл прогретого до 60°С лизирующего буфера и 100 мкл лейкомассы. Содержимое перемешивают и центрифугируют при 5000 об/мин в течение 5 сек. В пробирку вносят 25 мкл ресуспензированного сорбента, перемешивают и центрифугируют при 10000 об/мин в течение 30 секунд, после чего надосадочную жидкость удаляют. Затем в пробирки добавляют 400 мкл раствора для отмывки 1, перемешивают и центрифугируют при 10000 об/мин 30 секунд и удаляют надосадочную жидкость. Далее добавляют 500 мкл раствора для отмывки 3, перемешивают и центрифугируют при 10000 об/мин 30 секунд и удаляют надосадочную жидкость. Данную отмывку производят дважды. Потом в пробирку вносят 400 мкл раствора для отмывки 4, перемешивают и центрифугируют при 10000 об/мин 30 секунд, удаляют надосадочную жидкость. Осадившийся в пробирках сорбент подсушивают в термостате при температуре 60°С 15 минут с открытыми крышками. Затем в пробирку вносят 50 мкл РНК-буфера, перемешивают и помещают в термостат на 3 минуты при температуре 60°С, потом снова перемешивают и центрифугируют при 13000 об/мин в течение 1 минуты. Надосадочную жидкость переносят в отдельную пробирку, не захватывая сорбент, и хранят при -70°С.

В реакции обратной транскрипции (ОТ) используют 5 мкл РНК. ОТ проводят с использованием наборов реактивов для проведения реакции обратной транскрипции (Синтол, РФ) для синтеза кДНК на матрице РНК. Реакционная смесь содержит: 1 мкл праймера Random с концентрацией 0,5 ОЕ/мл (Синтол, РФ), 1 мкл праймера Oligo(dT) с концентрацией 15 ОЕ/мл (Синтол, РФ) и 3 мкл деионизированной воды. Проводят отжиг Random гексамеров и праймера Oligo(dT) на матрице мРНК при температуре 75°С в течение 3 минут. После этого в пробирку вносят 10 мкл 2,5х реакционной смеси, 1 мкл ревертазы MMLV-RT с концентрацией 50 ед/мкл при температуре +4°С и инкубируют 40 минут при температуре 37°С. Далее инактивацию ревертазы проводят при 95°С в течение 5 минут. Полученную кДНК хранят при -70°С.

В качестве контроля прохождения реакции ОТ и для стандартизации метода используют ПЦР-систему на определение экспрессии гена β-актина.

ПЦР в реальном времени ставят с использованием наборов реактивов для проведения ПЦР-РВ в присутствии SYBR Green I (Синтол, РФ) и специфических праймеров. В готовую смесь добавляют 3 мкл кДНК, полученной при реакции ОТ. Условия прохождения ГЩР со специфическими праймерами к гену β-актина, гену TLR4, гену TLR9 и гену HBD1 были смоделированы с помощью программы VectorNTI 8,0 в соответствии с последовательностями мРНК, опубликованными в базе данных Gene Bank. Отрицательным контролем служит проба с реакционной смесью, не содержащая мРНК. ПЦР в реальном времени проводят на приборе ДТ-96 (ДНК-Технология, РФ) по следующей схеме: денатурация - 95°С - 5 минут, отжиг и элонгация (94°С - 20 сек, 62°С - 40 сек) - 40 циклов. Полученные результаты анализируют с помощью программы, прилагающейся к прибору ДТ-96. Расчет количества копий кДНК гена β-актина, TLR4, TLR9 и HBD1 проводят относительно разработанных ранее калибровочных прямых. Количество копий кДНК гена HBD1 определяют относительно 1×103 копий кДНК гена β-актина, а значение копий кДНК генов TLR4 и TLR9 - относительно 1×106 копий кДНК гена β-актина.

В таблице приводится значение уровня экспрессии исследуемых генов при физиологическом течении гестации и при невынашивании беременности инфекционного генеза в I триместре. Данные представлены в виде: медиана (25%-75% квантили) относительно 1 млн копий гена β-актина для генов TLR4 и TLR9, относительно 1000 копий гена β-актина - для гена HBD1.

Для доказательств возможности реализации заявленного назначения и достижения указанного технического результата приводим следующие данные.

Пример 1

Беременная Ш., 25 лет. Наблюдается в женской консультации с диагнозом физиологически протекающая беременность, 8 недель. Данная беременность вторая, первая в 2011 г. закончилась срочными родами живой доношенной девочкой 3300 г, 51 см; menarche в 14 лет, установились сразу, по 5 дней, ч/з 30 дней, регулярные, умеренные, безболезненные. Гинекологические заболевания отрицает. Из анамнеза: в детстве - ветряная оспа. Результаты клинико-лабораторного обследования - в пределах нормы. АД - в пределах нормы. Соматических заболеваний не выявлено. Амбулаторно обследована на урогенитальную инфекцию методом ПЦР-диагностики - отрицательно. Было выполнено исследование (прогнозирование невынашивания беременности инфекционного генеза) по предлагаемому способу.

У данной пациентки число копий кДНК TLR4 составило 63 053 относительно 1×106 копий кДНК гена β-актина; копий кДНК TLR9 - 20 777 относительно 1×106 копий кДНК гена β-актина; число копий кДНК HBD1 - 9160 копий относительно 1×103 копий кДНК гена β-актина.

Таким образом, у данной женщины с физиологическим течением беременности показатели экспрессии исследуемых генов находятся в пределах нормы. Невынашивания беременности не прогнозируется. Осложнений беременности в дальнейшем не выявлено.

Пример 2

Беременная, И. 27 лет, поступила в гинекологическое отделение 1ГКБ с диагнозом: Беременность 10-11 недель. Начавшийся самопроизвольный выкидыш. Предъявляла жалобы на тянущие боли внизу живота, кровяные выделения из половых путей. Из анамнеза: данная беременность вторая, на учете с 5-6 недели; первая беременность в 2013 г. закончилась самопроизвольным выкидышем на сроке 8-9 недель. Menarche в 15 лет, установились через 2 года, по 4 дня, ч/з 30 дней, регулярные, умеренные, безболезненные. В 2011 г. - лечение эктопии шейки матки методом криодеструкции. В 2012 - удаление кондиломы влагалища. Обследована на УТИ: обнаружен HPV 16⎪18, Herpes simplex. Из анамнеза: в детстве - краснуха, ветряная оспа; хронический гастродуоденит, хронический бронхит, хронический цистит. По результатам клинико-лабораторного обследования: снижение уровня АЛТ, ACT, креатенина; повышение уровня глюкозы; по УЗИ - Беременность 10 недель. Ретрохориальная гематома. Несмотря на терапию, направленную на пролонгирование беременности, через три дня после поступления пациентка отмечала усиление кровяных выделений, со сгустками, схваткообразные боли внизу живота, диагностирован аборт в ходу, произведено удаление остатков плодного яйца.

Количество копий кДНК TLR4 у данной пациентки составило 18 777 относительно 1×106 копий кДНК гена β-актина; копий кДНК TLR9 - 1 570 относительно 1×106 копий кДНК гена β-актина число копий кДНК HBD1 - 1431 относительно 1×103 копий кДНК гена β-актина. Снижение уровня экспрессии генов TLR4, TLR9 и HBD-1 в 3.4, 11.8 и 4.5 раз соответственно.

Вывод: при сравнении полученных данных с показателями экспрессии исследуемых генов у женщин с физиологическим течением беременности можно сделать заключение о снижении показателей врожденного иммунитета у данной пациентки при наличии урогенитальной инфекции и прогнозировать развитие выкидыша на ранних сроках. В дальнейшем, через двое суток, у данной пациентки произошел выкидыш. Таким образом, наш прогноз был подтвержден.

Пример 3

Беременная, Н. 26 лет поступила в гинекологическое отделение 1ГКБ с диагнозом: Беременность 6-7 недель. Начавшийся самопроизвольный выкидыш. Предъявляла жалобы на тянущие боли внизу живота, кровяные выделения из половых путей. Из анамнеза: данная беременность вторая, на учете с 5-6 недель; первая беременность в 2012 г. закончилась самопроизвольным выкидышем на сроке 8-9 недель. Menarche (первая менструация) в 14 лет, установились через 2 года, по 4 дня, ч/з 30 дней, регулярные, умеренные, безболезненные. Обследована на УГИ: обнаружен CMV. Из анамнеза: в детстве - краснуха, ветряная оспа; хронический пиелонефрит. По УЗИ - беременность 6-7 недель. Гипертонус миометрия.

Несмотря на терапию, направленную на пролонгирование беременности, через два дня пациентка отмечала усиление схваткообразных болей внизу живота и кровяных выделений, со сгустками. Диагностирован аборт в ходу, произведено удаление остатков плодного яйца.

Количество копий кДНК TLR4 у данной пациентки составило 16 505 относительно 1×106 копий к ДНК гена β-актина; копий кДНК TLR9 - 3676 относительно 1×106 копий кДНК гена β-актина; число копий кДНК HBD1 - 1411 относительно 1×10 копий кДНК гена β-актина. Снижение уровня экспрессии генов TLR4, TLR9 и HBD-1 в 3.8, 5 и 4.5 раз соответственно.

Вывод: по сравнению с группой здоровых беременных женщин у пациентки Н. выявлено достоверное снижение показателей врожденного иммунитета при наличии урогенитальной инфекции. Было прогнозировано развитие выкидыша, который состоялся на 10 неделе гестации.

Пример 4

Беременная, З. 35 лет, поступила в гинекологическое отделение 1ГКБ с жалобами на головокружение, обильные кровяные выделения из половых путей, схваткообразные боли внизу живота. Выставлен диагноз: Аборт в ходу при беременности 9-10 недель. Привычное невынашивание. Произведено удаление остатков плодного яйца. Из анамнеза: беременность третья, протекала с угрозой прерывания, проводилась терапия, направленная на пролонгирование беременности (дюфастон, магнеВ6, валериана). В сроке 5-6 недель перенесла ОРВИ с повышением температуры до 37.2, лечилась народными средствами. Первая беременность в 2006 г. закончилась самопроизвольным выкидышем на сроке 8-9 недель. Вторая в 2007 г. - неразвивающаяся беременность на сроке 6-7 недель. Menarche в 13 лет, установились сразу, по 5 дней, ч/з 28 дней, регулярные, умеренные, безболезненные. Обследована на УГИ: обнаружена Ureaplasma urealiticum, лечение не проводилось. Из анамнеза: в детстве - краснуха, ветряная оспа; хронический тонзиллит.

Количество копий кДНК TLR4 у данной пациентки составило 6067 относительно 1×106 копий кДНК гена β-актина; копий TLR9 - 4673 относительно 1×106 копий кДНК гена β-актина; число копий кДНК HBD1 - 996 копий гена относительно 1×103 копий кДНК гена β-актина. Снижение уровня экспрессии генов TLR4, TLR9 и HBD-1 в 10.4, 4 и 6.3 раз соответственно.

Вывод: у пациентки З. выявлено достоверное снижение показателей врожденного иммунитета по сравнению с группой здоровых беременных женщин. Был прогнозирован выкидыш. Данная беременность у пациентки прервалась на сроке гестации 12 недель.

В результате проведенных исследований по оценке показателей врожденного иммунитета в группе 18 беременных с угрозой прерывания беременности, мы прогнозируем развитие выкидыша с вероятностью 66,6%. Кроме того, 80% всех установленных выкидышей произошло на сроке 5-7 и 10-11 недель.

Таким образом, данный способ удобен и прост в применении, достаточно информативен и имеет высокую достоверность прогноза невынашивания беременности инфекционного генеза ранних сроков гестации. Заявленное изобретение позволяет решать важную практическую задачу раннего прогнозирования угрозы невынашивания беременности в I триместре, что важно в практическом отношении и основано на конкретных показателях. Использование данного способа будет способствовать более быстрой и безопасной диагностики угрозы прерывания беременности инфекционного генеза в I триместре.

Способ прогнозирования невынашивания беременности инфекционного генеза на ранних сроках гестации, отличающийся тем, что в лейкоцитах периферической крови беременной на 5-11 неделе гестации с помощью полимеразной цепной реакции в реальном времени определяют уровень экспрессии генов Toll-подобных рецепторов TLR4 и TLR9, гена противомикробного пептида HBD1 и при одновременном снижении уровней экспрессии указанных генов, по меньшей мере, в 2,5 раза по сравнению с их уровнем, установленным при физиологически протекающей беременности, прогнозируют выкидыш в первом триместре гестации.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к области диагностики, а именно к способу определения пола плода в ранние сроки его внутриутробного развития. Способ определения пола плода заключается в определении уровня антимюллерова гормона (АМГ) в сыворотке крови, в сроки 7, а также 9-10 недель беременности, и при увеличении АМГ в 2,6 и более раз за этот период диагностируют наличие плода мужского пола, при увеличении его не выше чем в 1,5 раза - наличие плода женского пола.

Изобретение относится к биотехнологии и вирусологии и может быть использовано специалистами, работающими в области производства медицинских и ветеринарных биопрепаратов.

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к оптическим биосенсорам, предназначенным для определения белковых молекул в малых концентрациях. Заявленный флуоресцентный оптический ДНК-биосенсор состоит из подложки, адсорбированной на подложке тонкой пленки комплекса ДНК-белок, причем подложка выполнена из монокристаллического кремния с ориентацией поверхности (100), размером 18×18 мм и толщиной 380±20 мкм, шероховатость рабочей поверхности ≤0,06, а содержание белка в тонкой пленке составляет от 10-15 до 10-9 моль/л.

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической лабораторной диагностике. Сущность способа: осуществляют забор крови в пробирку, содержащую антикоагулянт, перемешивают и оставляют на 20 мин для свободного осаждения эритроцитов при комнатной температуре, после седиментации эритроцитов берут 0,5 мл лейкоцитарной взвеси и определяют в ней количество лейкоцитов любым способом (рутинным или автоматизированным), доводят ее концентрацию до величины 5*109 лейкоцитов/л дистиллированной водой, биологическую жидкость помещают в морозильную камеру при температуре -20°С до полного замораживания и используют ее после процесса размораживания для иммуноферментного определения спонтанной продукции цитокинов.

Изобретение относится к медицине и касается способа получения бифункционального аффинного сорбента для хроматографической очистки иммуноглобулинов флуоресцирующих путем иммобилизации неосмектина с гетерологичными антигенами, дающими перекрестные реакции с иммуноглобулинами, где к сорбенту вносят водорастворимый антиген, проводят экспозицию, отмывают от несвязавшегося антигена, доводят рН и проводят одномоментную очистку иммуноглобулинов флуоресцирующих от несвязавшегося ФИТЦ и гетерологичных антител с контролем иммунологических показателей готовых препаратов в РИФ.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для выявления антиотцовских антител после иммунизации женщин с идиопатическим привычным выкидышем лимфоцитами полового партнера.
Изобретение относится к медицине, а именно к трансплантации органов и клинической лабораторной диагностике, может быть использовано при ведении пациентов после трансплантации сердца для диагностики отторжения трансплантированного сердца.
Изобретение относится к медицине и может быть использовано для выявления риска формирования Т-хелперного иммунодефицита у человека в условиях Арктики. Для этого осуществляют забор крови из вены и определяют общее количество лимфоцитов, малых лимфоцитов в лимфоцитограмме и содержание зрелых функционально активных Т-клеток CD3+.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использована для одновременного выявления представителей условных таксономических групп микроорганизмов, патогенных для человека и животных.
Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике, и может быть использовано для прогнозирования внутриутробного инфицирования плода у женщин во втором триместре гестации при обострении хронического простого бронхита, обусловленного гриппом A(H3N2).
Изобретение относится к медицине, в частности к оториноларингологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики острого риносинусита. Способ дифференциальной диагностики острого риносинусита включает исследование сыворотки крови больного до начала лечения и определение уровней цитокинов интерлейкина - 6 (IL-6) и γ-интерферона (γINF) пг/мл, после чего вычисляют коэффициент диагностики K по формуле: K=IL-6/γINF, и при значении K≤1,4 диагностируют вирусный риносинусит, при выполнении условия 1,4<K<2,5 диагностируют поствирусный риносинусит, при значении K≥2,5 диагностируют бактериальный риносинусит. Предложенный способ позволяет с высокой достоверностью проводить дифференциальную диагностику острого риносинусита за счет использования объективных критериев оценки, позволяющих четко, быстро и однозначно дифференцировать вирусный, поствирусный и бактериальный риносинусит. 3 пр.
Изобретение относится к медицине, в частности к педиатрии, и может быть использовано для прогнозирования осложненного течения ОРИ у детей. Для этого у детей путем в браш-биоптате слизистой носо-ротоглотки определяют местный неспецифический секреторный иммуноглобулин А, колонизационную активность: индекса инфицирования, индекса адгезии, степени деструкции эпителиоцитов и уровень внеклеточного фосфатидилхолина. По снижению уровня местного неспецифического иммуноглобулина А в пределах 4-16 lg, индекса инфицирования 50-100%, индекса адгезии клеточных эпителиоцитов 100-500 м.кл., деструкции эпителиоцитов 20-50%, уровня внеклеточного фосфатидилхолина 0,001-0,01 мг/мл прогнозируют осложненное течение острых респираторных инфекций у детей. Использование данного способа позволяет прогнозировать осложненное течение ОРИ у детей на ранних стадиях путем одновременного определения нескольких показателей, интегрально характеризующих антиинфекционную резистентность слизистой носо-ротоглотки. 2 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к терапии и хирургии, и может быть использовано для прогнозирования генетической предрасположенности или повышенного риска развития инфекционного эндокардита (ИЭ) у пациентов из группы риска. Сущность способа: проводят генотипирование по полиморфному локусу I462V гена CYP1A1 и по полиморфному локусу I105V гена глутатион-S-трансферазы Пи1 GSTP1 у пациентов группы риска, при выявлении носительства сочетания генотипов CYP1A1 I462I и GSTP1 I105V у их носителей прогнозируют 22,6-кратный риск развития инфекционного эндокардита. В группу риска входят лица с внутривенной наркоманией, врожденными и приобретенными пороками сердца, протезированными клапанами и другими операциями на сердце, коронарных артериях, иммунодефицитными состояниями. Способ позволяет установить генетическую предрасположенность к ИЭ у пациентов из группы риска, помогает определить тактику ведения пациентов и индивидуализировать комплекс профилактических и лечебных мероприятий. 1 з.п. ф-лы, 2 ил., 1 табл.

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ оценки готовности женщин с хроническим эндометритом к экстракорпоральному оплодотворению, включающий обследование женщин в период окна имплантации в цикле, предшествующем проведению программы экстракорпорального оплодотворения (ЭКО), отличающийся тем, что у женщин с хроническим эндометритом на 19-21 день менструального цикла получают смыв из полости матки, в котором методом твердофазного иммуноферментного анализа определяют содержание альфа-2-макроглобулина (а2-МГ) и при содержании а2-МГ равном или более 4,5 мг/л оценивают готовность женщин к ЭКО как низкую, рекомендуют дополнительное лечение и перенос сроков ЭКО, а при содержании а2-МГ менее 4,5 мг/л оценивают готовность женщин к ЭКО как высокую и рекомендуют инициацию программы ЭКО. Осуществление изобретения обеспечивает неинвазивный способ оценки готовности к ЭКО, позволяющий повысить эффективность ЭКО за счет выбора оптимального периода начала программы. 3 пр., 1 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к неонатологии и детской кардиологии, и касается предгравидарного прогнозирования риска формирования септальных форм врожденных пороков сердца у плода. Способ включает молекулярно-генетическое тестирование семейной пары, планирующей беременность на догестационном этапе, с выявлением женского аллеля HLA-DRB1*03, HLA-DRB1*12 и мужского генотипа HLA-DRB1*01,04. Вероятный прогноз развития врожденного порока рассчитывают по формуле ,где Y - вероятность риска формирования септальных форм врожденного порока сердца в последующих поколениях (%); X1 - женский аллель HLA-DRB1*03, при этом X1 принимает значение равное 0 при отсутствии аллеля в генотипе, X1=1 при наличии аллеля HLA-DRB1*03 в гетерозиготе и X1=2 при наличии аллеля HLA-DRB1*03 в гомозиготе; X2 - мужской генотип HLA-DRB1*01,04, X2=0 при отсутствии данного генотипа, X2=1 при наличии генотипа HLA-DRB1*01,04; X3 - женский аллель HLA-DRB1*12, соответственно X3=0 при отсутствии аллеля в генотипе, X3=1 при наличии аллеля HLA-DRB1*12 в гетерозиготе и X3=2 при наличии аллеля HLA-DRB1*12 в гомозиготе. Изобретение обеспечивает повышение эффективности и достоверности прогнозирования развития септальных форм врожденных пороков сердца у плода в последующей беременности. 3 пр., 1 табл.
Изобретение относится к медицине, в частности гастроэнтерологии, и касается способа диагностики тяжести течения хронического гастрита у детей. Сущность способа заключается в изучении клинических, морфологических и иммуногистохимических показателей слизистой оболочки желудка на наличие антигенов простого герпеса, цитомегаловируса и вируса Эпштейн-Барр. Поводят оценку числа микрососудов слизистой оболочки желудка и их эндотелий, неравномерность толщины стенки микрососудов, наличие разрастания соединительной ткани в их стенке, изменения ядер, ядерно-цитоплазматического индекса и наличие периваскулярного отека. При обнаружении вирусной моноинфекции с изменениями эндотелия до 40% микрососудов в виде неравномерного увеличения толщины их стенок, а также гиперхроматоза ядер эндотелиоцитов диагностируют легкое течение. При обнаружении не менее двух вирусных инфекций с увеличением числа микрососудов от 30% до 50% и изменением эндотелия в 45%-60% микрососудов диагностируют течение средней тяжести. При наличии вирусно-бактериальной инфекции с увеличением числа микрососудов более чем на 50% и тотальными изменениями эндотелия более 60% микрососудов диагностируют тяжелое течение хронического гастрита. Использование способа позволяет с высокой точностью оценить тяжесть течения хронического гастрита у детей. 3 пр.

Группа изобретений относится к области молекулярной диагностики и может быть использована для диагностики заболеваний с помощью молекул биомаркеров. Устройство для обнаружения специфической молекулы-мишени или биомаркера путем определения изменения электрических свойств включает: измерительный датчик, включающий проводящую или полупроводящую структуру; систему электродов, передающих сигнал от устройства; и контрольный датчик, имеющий структуру, идентичную измерительному датчику, но защищенную, т.е. предотвращающую образование связи с биомаркером и действующую как встроенный эталон. Структура измерительного датчика включает аптамерное покрытие и способна образовывать связь с биомаркером, вызывая изменение электрических свойств. Группа изобретений относится также к способу анализа пробы на наличие молекулы-мишени или биомаркера посредством указанного устройства. Группа изобретений обеспечивает повышение достоверности анализов. 2 н. и 28 з.п. ф-лы, 17 ил., 3 пр.

Изобретение относится к медицине и касается системы для получения аутологичной сыворотки с повышенным содержанием IL-1RA и со сниженным содержанием провоспалительного цитокина, включающей шприц, внутренние стенки которого покрыты твердофазным полимерным сорбентом с фиксированным на нем моноклональными антителами к IL-1β, содержащий стеклянные шарики диаметром от 2,5 до 3,5 мм, занимающие до 40% от общего объема шприца, и по меньшей мере один шприц, внутренние стенки которого покрыты твердофазным полимерным сорбентом с фиксированными на нем человеческими IL-1β, и стерильный переходник, выполненный с возможностью перемещения аутологичной сыворотки из шприца с антителами в шприц с человеческим IL-1β. Изобретение обеспечивает значительное снижение концентрации провоспалительного цитокина ИЛ-1β и повышение эффективности лечебного действия аутологичной концентрированной сыворотки. 3 з.п. ф-лы, 3 пр., 7 ил.

Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству-гинекологии и лабораторным методам исследования, может быть использовано для диагностики гипоксического поражения центральной нервной системы у детей, рожденных от матерей с табакокурением. Предлагаемое изобретение направлено на повышение точности способа диагностики гипоксического поражения центральной нервной системы у детей, рожденных от матерей с табакокурением. Способ диагностики заключается в том, что методом иммуноферментного анализа в сыворотке пуповинной крови новорожденных определяют количественное содержание гипоксией индуцированного фактора - 2α и при его концентрации 0,04 нг/мл и выше диагностируют гипоксическое поражение центральной нервной системы. 1 табл., 2 пр.

Группа изобретений относится к области биохимии и медицины и касается иммунологических способов детекции интактного фибриногена, включающих стадии: a) получения образца, содержащего по меньшей мере некоторое количество фибриногена, необязательно превращенного по меньшей мере частично в фибрин, и необязательно содержащего тромбин; b) растворения образца в растворе растворителя, который ингибирует активность тромбина; c) переноса/нанесения части указанного образца на мембрану, связывающую белок, после необязательного ДСН-ПААГ-электрофореза; d) взаимодействия фибриногена с первичным моноклональным антителом, способным связываться с фрагментом фибринопептида A или фрагментом фибринопептида В; и e) детекции количества интактного фибриногена в образце посредством определения количества связанного первичного моноклонального антитела. Группа изобретений включает также способы оценки эффективности или стабильности гемостатического устройства, включающие использование заявленных способов детекции интактного фибриногена. Группа изобретений обеспечивает использование заявленных способов в качестве диагностических или прогностических критериев с высокой точностью. 5 н. и 22 з.п. ф-лы, 8 ил., 2 табл., 2 пр.
Наверх