Способ экспресс-диагностики хронического алкоголизма при тяжелых сочетанных травмах


 

G01N33/50 - химический анализ биологических материалов, например крови, мочи; испытания, основанные на способах связывания биоспецифических лигандов; иммунологические испытания (способы измерения или испытания с использованием ферментов или микроорганизмов иные, чем иммунологические, составы или индикаторная бумага для них, способы образования подобных составов, управление режимами микробиологических и ферментативных процессов C12Q)

Владельцы патента RU 2619259:

Чухрова Марина Геннадьевна (RU)
Фирсов Сергей Анатольевич (RU)

Изобретение относится к медицине и предназначено для cito-диагностики хронической алкогольной зависимости и предрасположенности к алкогольному психозу у лиц, получивших тяжелую сочетанную травму. Венозную кровь предварительно кондиционируют, мазки крови окрашивают по Романовскому-Гимзе, проводят морфологический анализ с использованием светового микроскопа при увеличении в 1000 раз, просматривая тысячу клеток лейкоцитов, и учитывают (в ‰) измененные нейтрофилы (Нф), которые дифференцируют по характерным морфологическим признакам. При уровне спонтанного апоптоза лимфоцитов не менее 5% диагностируют хроническую алкогольную зависимость, длительное алкогольное потребление, предшествующее травме, и высокий риск развития алкогольного психоза. Способ позволяет упростить экспресс-диагностику, обеспечить возможность диагностировать хроническую алкогольную зависимость и предрасположенность к алкогольному психозу. 1 з.п. ф-лы, 1 пр.

 

Изобретение относится к способам экспресс-диагностики хронического алкоголизма и может быть использовано в медицине, а именно в лабораторной диагностике и в травматологии для cito-диагностики хронической алкогольной зависимости и предрасположенности к алкогольному психозу у лиц, получивших тяжелую сочетанную травму.

В настоящее время в России, как и во всем мире, не уменьшается бремя травматизма. Среди лиц, получивших травму, от 30 до 60%, по разным данным, находятся в состоянии алкогольного опьянения. Однако не всегда есть возможность выяснить, насколько это опьянение является эпизодичным, или пациент страдает алкогольной зависимостью. Если имеет место алкогольная зависимость и травма получена на фоне многодневного запоя, то у пострадавшего имеется высокий риск развития алкогольного психоза. Кроме того, затруднено анестезиологическое обеспечение, высокий риск присоединения нозокомиальной пневмонии, ослаблена функция печени; и возможны другие соматические неблагоприятные последствия алкоголизации, которые усложнят репарацию и реабилитацию после травмы, и могут явиться причиной летального исхода даже при оптимальной травматологической помощи. Существует необходимость быстрой диагностики возможной алкогольной зависимости у пострадавшего, что поможет скорректировать лечебную тактику и предотвратить ряд осложнений.

Известны способы диагностики алкогольной зависимости, из которых самым надежным методом является анамнестический, который неприменим у пациента, который находится в бессознательном состоянии. Известны различные вербальные тесты, например AUDIT с чувствительностью (Se) 87%, специфичностью (Sp) 88% (Seale J.P. et al., 2006), опросник CAGE (Se 62%; Tuunanen M. et al., 2007). Ориентированный на отдельные нозологические формы на основе критериев DSM-IV индекс тяжести болезненного пристрастия - ASI (Se 85%, Sp 80%; Rikoon S.H. et al., 2006; McLellan A.T. et al., 1980). Можно отметить и такой инструментарий, как скрининговый тест злоупотребления психоактивными веществами (DAST), предложен Skinner Н.А. (1982), профиль пристрастия Модели (MAP, Marsden J. et al., 1998). Входят в эту кагорту и тест быстрого скрининга проблемного употребления наркотиков и алкоголя (DAP), опросник для тонкого скрининга злоупотребления психоактивными веществами (SASSI), индекс лечения опиоидной зависимости (OTI; Darke S. et al., 1992), оценка реабилитационного потенциала, тест изменения вкусовых ощущений (Невидимова Т.И., Семке В.Я., Бохан Н.А., 2003). Эти тесты неприменимы у пациента с тяжелой травмой по той же причине.

Известны лабораторные биохимические методики для выявления алкогольной зависимости, которые по данным S.H. Rikoon (2006) обладают чувствительностью между 10% для АЛТ и 52% ГГТ, 56% ACT. Наиболее заметный результат дает оценка (Se 100%; Sp 95%) содержания эстерифицированных этилом жирных кислот (FAEE) в волосах испытуемых, и данный тест может применяться для оценки тяжелой формы алкогольной зависимости (Wurst F.M. et al. 2004). Возможно определение (Se 100%, Sp 95%) ассоциированного ацетальдегида крови (WBAA), который применяется для мониторинга абстиненции (Bean P. et al., 2001).

Основной недостаток таких способов диагностики - необходимость дорогостоящего оборудования, трудоемкость и длительность получения результатов анализа.

Известен способ диагностики алкоголизма (авторское свидетельство СССР №1169619, МПК А61В 10/00, опубл. 30.07.1985 г.) путем биохимического исследования крови, отличающийся тем, что, с целью ускорения и повышения точности способа, пациенту дают алкоголь в дозе не менее 0,4 г/кг массы, через 2-8 ч определяют содержание метилового спирта и при его концентрации 0,01% и выше диагностируют алкоголизм.

Однако данный способ нельзя использовать для диагностики хронического алкоголизма пациентов с тяжелыми сочетанными травмами и, тем более, в бессознательном состоянии. Кроме того, анализ проводят с использованием газового хроматографа, который отсутствует в обычной биохимической лаборатории.

Наиболее близким аналогом (прототипом) является способ диагностики алкоголизма (авторское свидетельство СССР №1805386, МПК G01N 33/48, опубл. 30.03.1993 г.). Целью изобретения является упрощение способа. Для этого у обследуемого утром до приема пищи получают 20-40 мл венозной крови, изолируют из нее лимфоциты и определяют скорость окисления ацетона данными клетками. Если величина этого показателя превышает нормальные значения в 5,6 раз или более, диагностируют алкоголизм. Способ весьма прост и доступен, а точность диагностики с его помощью не уступает точности известных способов.

Однако данный способ не позволяет отличить бытовой алкоголизм от хронической алкогольной зависимости и, таким образом, предрасположенности к алкогольному психозу. Кроме того, данный способ требует использование полярографа, который не всегда имеется в стандартной биохимической лаборатории, что усложняет проведение экспресс-диагностики.

Техническим результатом предлагаемого изобретения является упрощение средств реализации экспресс-диагностики, обеспечения возможности диагностировать хроническую алкогольную зависимость и, таким образом, предрасположенность к алкогольному психозу по морфологическим изменениям клеток лимфоцитов (их спонтанному апоптозу).

Указанный технический результат достигается тем, что в способе экспресс-диагностики хронического алкоголизма при тяжелых сочетанных травмах путем анализа венозной крови пострадавшего, согласно изобретению, венозную кровь предварительно кондиционируют, мазки крови окрашивают по Романовскому-Гимзе, проводят морфологический анализ с использованием светового микроскопа при увеличении в 1000 раз, просматривая тысячу клеток лейкоцитов, и учитывают (в ‰) измененные нейтрофилы (Нф), которые дифференцируют по характерным морфологическим признакам: апоптозные - по уменьшению размеров, по конденсированной цитоплазме, по уплотненному бесструктурному хроматину, часто разделенному на несколько округлых телец, и при уровне спонтанного апоптоза лимфоцитов не менее 5% диагностируют хроническую алкогольную зависимость, длительное алкогольное потребление, предшествующее травме, и высокий риск развития алкогольного психоза.

Апоптоз - форма гибели клетки, проявляющаяся в уменьшении ее размера, конденсации и фрагментации хроматина, уплотнении наружной и цитоплазматической мембран без выхода содержимого клетки в окружающую среду.

Способ экспресс-диагностики хронического алкоголизма при тяжелых сочетанных травмах осуществляется следующим образом.

У пострадавшего производится забор крови из вены при поступлении в клинику. Мазки крови окрашиваются по Романовскому-Гимзе после предварительного кондиционирования венозной крови. Для оценки апоптоза используется световая микроскопия, поскольку результаты морфологического анализа хорошо коррелируют с данными других методов оценки апоптоза [Маянский Н.А., 2000]. Посредством световой микроскопии окрашенных мазков из кондиционированной венозной крови определяют уровень апоптотически измененных нейтрофилов. На увеличении ×1000 просматривают тысячу клеток и учитывают (в ‰) измененные Нф, которые дифференцируют по характерным морфологическим признакам: апоптозные - по уменьшению размеров, по конденсированной цитоплазме, по уплотненному бесструктурному хроматину, часто разделенному на несколько округлых телец [Нестеренко А.Н., 2007; Fialkow L., 2006]. При уровне спонтанного апоптоза лимфоцитов не менее 5% диагностируется алкогольная зависимость, длительное алкогольное потребление, предшествующее травме, и высокий риск развития алкогольного психоза.

Описываемый способ позволяет повысить эффективность диагностики алкогольной зависимости у пациента с тяжелой сочетанной травмой.

Пример конкретного выполнения способа. Диагностические характеристики предлагаемого способа cito-диагностики алкогольной зависимости и возможного алкогольного психоза получены, исходя из результатов обследования пострадавших с сочетанными черепно-мозговыми и скелетными травмами, всего 58 чел., из них 30 чел. - в состоянии алкогольной интоксикации и с признаками алкогольной зависимости, который был подтвержден в дальнейшем катамнестически (1 группа), и 28 чел. - без признаков алкоголизма и алкогольной интоксикации (2 группа). Все пациенты были мужского пола, возраст от 31 до 57 лет, в среднем 41,52±1,25 года. У всех пострадавших состояние было квалифицировано как средней степени тяжести. Забор крови проводился при поступлении пациентов в клинику, до оперативного или консервативного лечения и до назначения фармакотерапии. В качестве контрольной группы использовались образцы крови 22 соматически и психически здоровых лиц, соответствующие по полу и возрасту обследуемой группе пациентов, не имеющих хронических заболеваний и не состоящих на диспансерном учете, без признаков перенесенных острых инфекционных заболеваний на момент обследования.

Уровень спонтанного апоптоза лимфоцитов в мазках, приготовленных сразу после взятия крови, у пострадавших с признаками алкоголизма (1 гр.) достоверно отличался от значений, наблюдаемых у пострадавших без признаков алкоголизма (2 гр.). Цитологический анализ мазков крови показал, что у лиц 1 группы уровень спонтанного апоптоза лимфоцитов составляет 5,6±0,7%, (в контрольной группе здоровых лиц 0,9±0,2%, у лиц 2 группы 2,4±0,4%, р<0,001). Индекс реализации апоптоза лимфоцитов, т.е. доля клеток с морфологическими признаками апоптоза в процентах от общего числа клеток, экспрессирующих рецепторы готовности к апоптозу у больных алкоголизмом, достоверно выше нормы (16,8±2,4%, в контроле - 7,7±1,6%, р>0,05). У лиц 1 группы выявлено повышение экспрессии рецептора CD95 (16,9±0,3%, во 2 гр. - 11,6±0,3%, р<0,05). Причем для экспресс-диагностики алкогольных проблем у пациента и настороженности в отношении развития алкогольного психоза достаточно определения уровня спонтанного апоптоза лимфоцитов, не менее 5% от общего числа клеток.

Таким образом, достижение заявляемого технического результата подтверждено в описании примера конкретного выполнения способа. Применение данного способа позволит быстро и недорого диагностировать хроническую алкогольную зависимость, предвидеть возможные осложнения и обосновать план лечения. Способ не требует сложных и дорогостоящих приборов для диагностики, а обычный световой микроскоп имеется в любой стандартной биохимической медицинской лаборатории.

1. Способ экспресс-диагностики хронического алкоголизма при тяжелых сочетанных травмах путем анализа венозной крови пострадавшего, отличающийся тем, что венозную кровь предварительно кондиционируют, мазки крови окрашивают по Романовскому-Гимзе, проводят морфологический анализ, просматривая тысячу клеток лейкоцитов, и учитывают (в ) измененные нейтрофилы (Нф), которые дифференцируют по характерным морфологическим признакам: апоптозные - по уменьшению размеров, по конденсированной цитоплазме, по уплотненному бесструктурному хроматину, часто разделенному на несколько округлых телец, и при уровне апоптоза лимфоцитов не менее 5% диагностируют хроническую алкогольную зависимость, длительное алкогольное потребление, предшествующее травме, и высокий риск развития алкогольного психоза.

2. Способ экспресс-диагностики по п. 1, отличающийся тем, что морфологический анализ клеток лейкоцитов проводят с использованием светового микроскопа при увеличении в 1000 раз.



 

Похожие патенты:
Группа изобретений относится к области медицины и представляет собой способ определения устойчивости микобактерий туберкулеза к рифампицину и изониазиду в биологическом образце, отличающийся тем, что способ включает одновременную детекцию мутаций в ДНК микобактерий биологического образца в участках гена rpoB, гена katG и промоторной области гена inhA, где указанные участки выбраны из группы, включающей кодоны 430, 445, 450 и 452 гена rpoB, кодон 315 гена katG, -15 или -17 позицию промоторной области гена inhA или их комбинации, посредством мультиплексной полимеразной цепной реакции в режиме реального времени с использованием зондов детекции, которые комплементарны указанным участкам генов, не содержащим мутацию.

Изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторной диагностике. Для диагностики у детей функциональных расстройств желудка и 12-перстной кишки, ассоциированных с воздействием хрома, никеля, марганца и хлорорганических соединений: хлороформа и тетрахлорметана, производят отбор пробы крови и устанавливают в ней содержание хрома, никеля, марганца и наличие хлороформа и тетрахлорметана.

Настоящая группа изобретений относится к способу ингибирования форм дикого типа и определенных мутантных форм метилтрансферазы гистонов EZH2 человека - каталитической субъединицы комплекса PRC2, которая катализирует от моно- до триметилирования лизина 27 на гистоне H3 (H3-K27), путем введения эффективного количества ингибитора EZH2 и способу определения способности к ответу на ингибитор EZH2 у индивидуума.

Изобретение относится к области медицины и предназначено для определения генетической предрасположенности к заболеванию инфекционным эндокардитом (ИЭ) и высокого риска развития ИЭ.

Изобретение относится к области диагностики, а именно к способу определения длительности болезни при лихорадке Ку у лиц в возрасте до 50 лет. Способ определения длительности болезни при лихорадке Ку, заключающийся в том, что в сыворотке крови больных в возрасте до 50 лет определяют активность каталазы на 1 или 2 неделях болезни, затем, решая регрессионные уравнения зависимости между активностью каталазы, длительностью эндотоксикоза и продолжительностью заболевания, определяют длительность болезни при лихорадке Ку в днях, при этом при определении активности каталазы сыворотки крови на 1 неделе болезни определяют длительность болезни с точностью до 1-2 дней, а при определении активности каталазы сыворотки крови на 2 неделе болезни - с точностью до 1-3 дней.

Настоящее изобретение относится к определению уровня маркерных пептидов в образце, полученном из физиологической жидкости субъекта, поступившего в отделение неотложной помощи с неспецифическими жалобами.
Изобретение относится к медицине, а именно к внутренним болезням, и предназначено для прогнозирования острого повреждения почек (ОПП) у больных c острой декомпенсацией хронической сердечной недостаточности (ОДХСН).

Изобретение относится к области клинико-лабораторной диагностики. Предложен способ прогнозирования качества гамет при лечении женского бесплодия в программах вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ).

Изобретение относится к области медицины, в частности к педиатрии, аллергологии, пульмонологии, и предназначено для оценки врожденного иммунитета у детей с бронхиальной астмой.
Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования числа эпизодов угрозы прерывания беременности у беременных с аномалиями расположения хориона.

Изобретение относится к медицине и предназначено для прогнозирования течения механической желтухи различного генеза. Определяют уровень билирубина крови и общего белка по трехбалльной оценке уровня общего билирубина: <60 мкмоль/л - 1 балл, 60-200 мкмоль/л - 2 балла, ≥200 мкмоль/л - 3 балла, уровня общего белка сыворотки крови: ≥65 г/л - 1 балл, 64-55 г/л - 2 балла, <55 г/л - 3 балла, и генеза заболевания. Дополнительно вводят данные о возрасте больного, наличии сахарного диабета, сопутствующей патологии, при этом возраст больного, наличие сахарного диабета и сопутствующей патологии оценивают по трехбалльной оценке: возраст больного от 30 до 50 лет - 1 балл, от 50 до 70 лет - 2 балла, от 70 до 90 лет - 3 балла, сахарный диабет: отсутствие данных - 1 балл, компенсированная патология - 2 балла, декомпенсированная патология - 3 балла, сопутствующую патологию: отсутствие данных - 1 балл, компенсированная патология - 2 балла, декомпенсированная патология - 3 балла, генез заболевания: доброкачественная патология - 0,2 балла, злокачественная патология: I стадия - 0,4 балла, II стадия - 0,6 балла, III стадия - 0,8 балла, IV стадия - 1 балл, с последующим расчетом по формуле: ПЗ=((Бил+Бел+В+СД+СП)×0,33))×(Г×0,2)×100%. Способ позволяет быстро рассчитать течение механической желтухи различного генеза, ускорить и упростить диагностику. 3 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области ветеринарии. Предложен способ профилактики нодулярного дерматита крупного рогатого скота (КРС), включающий выявление животных с инфекционным заболеванием на начальной стадии развития, убой больных и дальнейшее обследование остальных животных. Остальных животных в очаге инфекционного заболевания нодулярного дерматита обследуют в течение суток методом полимеразной цепной реакции с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени. Животных-носителей вируса и здоровых животных переводят в отдельные помещения и в их присутствии осуществляют санацию помещений озоно-воздушной смесью: в помещении с животными-носителями вируса - в течение месяца не менее 3-4 раз в неделю с концентрацией озона 4-6 г/м3 в течение 20-30 минут, в помещении со здоровыми животными - в течение не более двух недель 2-3 раза в неделю с концентрацией озона 3-4 г/м3 в течение 15-20 минут. Изобретение обеспечивает расширение функциональных возможностей способа профилактики нодулярного дерматита КРС. 4 табл., 1 пр.

Изобретение относится к области медицины и предназначено для оценки индивидуального риска формирования избыточной массы тела и ожирения у детей, потребляющих питьевую воду с повышенным содержанием хлороформа и тетрахлорметана. Осуществляют отбор пробы крови, определение в ней концентрации хлороформа и тетрахлорметана, определение уровней общего холестерина и липопротеида низкой плотности ЛПНП. Проводят анамнестическое обследование ребенка по трехбалльной шкале и генотипирование. Риск формирования у ребенка избыточной массы тела прогнозируют в случае повышения уровня общего холестерина выше 3,9 ммоль/л и уровня ЛПНП выше 1,8 ммоль/л, наличия у ребенка 6 и более баллов при анамнестическом обследовании, наличия гетерозиготного генотипа гена HTR2A rs7997012, повышения концентрации тетрахлорметана в крови выше референтной и концентрации хлороформа в пределах 5,17-5,59 мкг/л. Риск формирования ожирения прогнозируют при концентрации хлороформа равной или более 5,79 мкг/л. Изобретение обеспечивает эффективный способ оценки индивидуального риска формирования избыточной массы тела и ожирения у детей. 1 ил., 8 табл.

Изобретение относится к медицине и касается способа исследования синтеза липопротеидов. При исследовании синтеза липопротеидов вечером перед сном и утром натощак в плазме крови определяют содержание триглицеридов, липопротеидов высокой плотности (ЛПВП), липопротеидов низкой плотности (ЛПНП) и липопротеидов очень низкой плотности (ЛПОНП), гематокрита и объема циркулирующей крови, после чего рассчитывают коэффициент (К), позволяющий оценить состояние синтеза липопротеидов по формуле: гдеК - коэффициент состояния синтеза липопротеидов, ТГутр - содержание триглицеридов в плазме утром, ТГвеч - содержание триглицеридов в плазме вечером, ЛПВПутр - содержание липопротеидов высокой плотности в плазме крови утром, ЛПНПутр - содержание липопротеидов низкой плотности в плазме крови утром, ЛПОНПутр - содержание липопротеидов очень низкой плотности в плазме крови утром, ЛПВПвеч - содержание липопротеидов высокой плотности в плазме крови вечером, ЛПНПвеч - содержание липопротеидов низкой плотности в плазме крови вечером, ЛПОНПвеч - содержание липопротеидов очень низкой плотности в плазме крови вечером, ОЦКутр - объем циркулирующей крови утром, Htyтp - гематокрит, отражающий удельный вес форменных элементов в крови утром, ОЦКвеч - объем циркулирующей крови вечером, Htвeч - гематокрит, отражающий удельный вес форменных элементов в крови вечером. При выявлении К у мужчин ниже нормальных показателей 0,93-1.07, у женщин ниже нормальных 0,87-1.02 оценивают как снижение синтеза липопротеидов высокой и очень высокой плотности. Использование способа позволяет с высокой точностью оценить синтез липопротеидов. 1 пр.

Изобретение относится к диагностике, а именно способу прогнозирования развития абдоминального сепсиса у больных с распространенным гнойным перитонитом. Способ прогнозирования развития абдоминального сепсиса у больных с распространенным гнойным перитонитом (РГП), заключающийся в том, что в течение первых суток после постановки диагноза РГП с помощью хемилюминесцентного анализа в крови больных определяют индекс относительного синтеза супероксид-радикала (ИОСС), представляющий собой отношение площади под кривой люминолзависимой хемилюминесценции к площади под кривой люцигенинзависимой хемилюминесценции, и при ИОСС выше 1,32 прогнозируют развитие абдоминального сепсиса. Вышеописанный способ позволяет в ранний период заболевания определить риск развития абдоминального сепсиса. 1 табл., 4 пр.

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования развития коморбидной формы артериальной гипертензии (АГ) и хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ). У больного АГ или ХОБЛ определяют генотипы полиморфного локуса М235Т гена ангиотензиногена (AGT) и полиморфного локуса A1166C гена рецептора I типа агиотензина II (AGTR1). При наличии у больного генотипа Т/Т полиморфного локуса М235Т гена AGT и генотипа А/С полиморфного локуса А1166С гена AGTR1 прогнозируют высокую вероятность развития коморбидной АГ и ХОБЛ в течение 10 лет после дебюта первого из заболеваний. Изобретение позволяет с высокой долей вероятности прогнозировать развитие коморбидной формы АГ и ХОБЛ. 1 з.п. ф-лы, 1 ил., 10 табл., 4 пр.
Наверх