Способ прогнозирования синдрома гиперстимуляции яичников в программе эко на основании определения полиморфизмов генов vegfa и tshr


G01N33/50 - химический анализ биологических материалов, например крови, мочи; испытания, основанные на способах связывания биоспецифических лигандов; иммунологические испытания (способы измерения или испытания с использованием ферментов или микроорганизмов иные, чем иммунологические, составы или индикаторная бумага для них, способы образования подобных составов, управление режимами микробиологических и ферментативных процессов C12Q)

Владельцы патента RU 2621634:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова" Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)
Общество с ограниченной ответственностью "НПФ ДНК-Технология" (RU)

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования синдрома гиперстимуляции яичников (СГЯ) тяжелой или средней степени тяжести в программе ЭКО. Осуществляют генотипирование генов VEGFA и TSHR. При наличии генотипов TSHR:2181C/C и VEGFA:936C/T у пациентки прогнозируют СГЯ тяжелой или средней степени тяжести в программе ЭКО. Изобретение позволяет индивидуально подобрать оптимальный протокол стимуляции яичников и минимизировать риски, связанные с развитием СГЯ. 3 пр.

 

Одним из осложнений программ вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) является синдром гиперстимуляции яичников (СГЯ) - состояние, в основе которого лежит гиперэргический неконтролируемый ответ яичников на введение гонадотропинов, характеризующееся широким спектром клинических и лабораторных проявлений [1, 2]. Частота СГЯ варьирует от 0,5% до 33% при различных схемах стимуляции овуляции и не имеет тенденции к снижению [2, 3]. Крайне важно своевременно выявлять пациенток группы риска на этапе планирования программ ВРТ. Для этой цели разработан ряд клинико-лабораторных параметров, служащих предикторами развития СГЯ, к которым относятся возраст, ИМТ, базальный уровень ФСГ, уровень АМГ, ингибина В, число антральных фолликулов. Данные маркеры позволяют вовремя применить действенные клинически значимые меры профилактики, которые заключаются в выборе «мягких» протоколов стимуляции, замене триггера овуляции, использовании агонистов допаминовых рецепторов 2 типа, отмене переноса эмбрионов и их криоконсервации для переноса в следующих циклах. Однако несмотря на использование объективных клинико-лабораторных параметров и проведение вышеперечисленных мер профилактики, у части пациенток СГЯ развивается, что предполагает участие в его развитии других факторов, в том числе и генетических [4, 5].

В настоящее время бурно развивается фармакогенетика - наука о прогнозировании эффектов лекарственных препаратов на основании индивидуального генотипа пациента. Как известно, особенности реакции на гормоны зависят не только от вариаций в последовательности гена лиганда, но и от полиморфизма генов соответствующих рецепторов [6]. Полагают, что, несмотря на то что на реакцию пациента на лекарственный препарат могут влиять сотни генов, лишь небольшое количество ключевых нуклеотидных полиморфизмов могут надежно прогнозировать безопасность и эффективность применения данного препарата у конкретного пациента.

С выявлением генетической природы развития спонтанных форм СГЯ положено начало углубленному изучению полиморфизмов ряда генов-кандидатов, т.к. до внедрения в практику информативных молекулярно-генетических маркеров все имеющиеся на сегодняшний день клинико-лабораторные предикторы не способны в полной мере прогнозировать развитие СГЯ.

Мутации ТТГ-рецептора рассматриваются авторами, изучавшими патогенез спонтанного СГЯ, как одни из ключевых участников данного феномена [7, 8]. Доказано, что развитию СГЯ могут способствовать повышенные уровни ТТГ ввиду наличия рецепторов к тиреиодным гормонам в клетках гранулезы [9]. Считается, что ТТГ обладает слабой ФСГ-подобной активностью, воздействуя на ФСГ-рецептор и стимулируя функцию яичников [10]. Повышение внутрисосудистой проницаемости, являющееся одним из ключевых звеньев патогенеза СГЯ, опосредовано воздействием сосудистого эндотелиального фактора роста (VEGF). Существует большое количество работ, посвященных VEGF, также полиморфизмам его гена и рецептора [11]. Предлагаемый способ прогнозирования СГЯ тяжелой или средней степени тяжести в программе ЭКО на основании определения полиморфизмов генов VEGFA и TSHR, отличается тем, что осуществляют генотипирование генов VEGFA и TSHR и при наличии генотипов VEGFA:936C/T и TSHR:2181C/C у пациентки прогнозируют СГЯ тяжелой или средней степени тяжести.

Рядом авторов считается, что до внедрения генетических методов в алгоритм обследования пациенток программ ВРТ, прогнозирование рискаразвития СГЯ не будет полным, достаточно специфичным и персонифицированным [12].

Учитывая высокую специфичность генетического тестирования, перспективным представляется разработка алгоритма двухэтапного скрининга, включающего генотипирование пациенток при выявлении клинических предикторов СГЯ. Молекулярно-генетические предикторы могут дополнить ряд существующих клинико-лабораторных маркеров, используемых в рутинной практике ВРТ. Комплексная оценка клинико-лабораторных и молекулярно-генетических предикторов позволит индивидуально подобрать оптимальный протокол стимуляции яичников и минимизировать риски, связанные с развитием СГЯ.

Клинические примеры

Пример 1

Больная М., 34 г. Бесплодие II, трубно-перитонеальный фактор, мужской фактор. В анамнезе 1 беременность, в 2000 г. - самопроизвольный выкидыш. В 2006 г. - лапаротомия, резекция левого яичника (апоплексия левого яичника), в 2014 г - лапароскопия, резекция левого яичника по поводу кисты (гист.: серозная киста). ХГТ: маточные трубы непроходимы. В 2015 г. – 1-ая попытка ЭКО, получено 2 ооцита, ПЭ №2, без эффекта.

По данным клинико-лабораторных параметров риск СГЯ отсутствовал: АМГ - 1,76 нг/мл (норма 1-10,6), число антральных фолликулов - 8. Пациентке проводилась стандартная программа ЭКО, отмечен рост 6 фолликулов, триггер овуляции - Прегнил 10 тыс ME. При трансвагинальной пункции получено 6 ооцитов, поддержка лютеиновой фазы - Дюфастон 10 мг × 3 р/д. Перенос 1 эмбриона произведен на 5-е сутки. На 5-ые сутки после переноса эмбриона появились жалобы на вздутие живота, слабость, одышку. Госпитализирована с диагнозом: синдром гиперстимуляции яичников тяжелой степени тяжести в программе ЭКО. В отделении проводилась симптоматическая терапия, направленная на коррекцию явлений СГЯ (инфузионная терапия растворами кристаллоидов и коллоидов), для коррекции гипопротеинемии (альбумин плазмы от 08.12.2015 - 25 г/л) в/в введен 20% альбумин - 20,0. Профилактика тромбоэмболических осложнений - фраксипарин 0,3×2 р/д. В связи с прогрессирующим напряженным асцитом установлен катетр «цистофикс» для порционного удаления перитонеального транссудата. По данным генотипирования выявлены генотипы риска - VEGFA:936C/T и TSHR:2181C/C.

На фоне проводимой терапии состояние пациентки улучшилось. На 12 сутки после ПЭ диагностирована биохимическая беременность (в-ХГ 398,7 IU). Пациентка выписана в удовлетворительном состоянии.

Представленный клинический пример показывает, что у больной, имевшей исходно «нормальные» параметры овариального ответа (уровень АМГ, не превышающий нормативные значения, 8 антральных и 6 растущих фолликулов, 6 полученных ооцитов) и генотипы риска (VEGFA:936C/T и TSHR:2181C/C), развился синдром гиперстимуляции яичников тяжелой степени.

Пример 2

Больная Д., 29 л. Бесплодие I, трубно-перитонеальный фактор. В анамнезе две попытки ЭКО, без эффекта. По данным клинико-лабораторных параметров присутствовал риск развития СГЯ: АМГ - 7 нг/мл (норма 1-10,6), число антральных фолликулов - 16, в связи с чем, при проведении программы ЭКО, назначена «мягкая» стимуляция (низкими дозами гонадотропинов). В процессе стимуляции отмечен рост 12 фолликулов, триггер овуляции - Прегнил 10 тыс ME. При трансвагинальной пункции получено 11 ооцитов, поддержка лютеиновой фазы - Утрожестан 600 мг/сут. Перенос 2 эмбрионов произведен на 5-е сутки. На 10 сутки после ПЭ диагностирована биохимическая беременность (в-ХГ 50 IU). Тогда же предъявила жалобы на слабость, вздутие живота, задержку мочи. Госпитализирована с диагнозом: синдром гиперстимуляции яичников средней степени тяжести в программе ЭКО. Беременность малого срока. По данным генотипирования выявлены генотипы риска - VEGFA:936C/T и TSHR:2181C/C. В стационаре проводилась инфузионная, спазмолитическая, антитромботическая терапия с положительным эффектом. На фоне проводимой терапии состояние пациентки улучшилось. Пациентка выписана в удовлетворительном состоянии.

Представленный клинический пример показывает, что у больной, имевшей риск развития СГЯ по данным клинико-лабораторных параметров, синдром гиперстимуляции яичников развился, несмотря на применение «мягкой» стимуляции, при этом выявлены генотипы риска (VEGFA:936C/T и TSHR:2181C/C).

Пример 3

Больная С., 26 л. Бесплодие I, трубно-перитонеальный фактор. В анамнезе в 2003 г. - лапаротомия, аппендэктомия. 2012 г. - диагностическая лапароскопия, разделение спаек. ХГТ: правая маточная труба непроходима, левая - затрудненная проходимость. По данным клинико-лабораторных параметров выявлен высокий риск развития СГЯ: АМГ - 6,8 нг/мл (норма 1-2,5), число антральных фолликулов - 20, в связи с чем, при проведении программы ЭКО, назначена «мягкая» стимуляция (низкими дозами гонадотропинов). С целью профилактики развития СГЯ произведена замена триггера овуляции - диферелин 0,2 мг. При трансвагинальной пункции получено 16 ооцитов, поддержка лютеиновой фазы - Утрожестан 600 мг/сут. Перенос 1 эмбриона произведен на 5-е сутки. Пациентка выписана в удовлетворительном состоянии. Жалоб не предъявляла. На 12 сутки после ПЭ диагностирована биохимическая беременность (в-ХГ 199 IU). По данным генотипирования генотипов риска не выявлено (генотип - VEGFA:936C/C и TSHR:2181C/G).

Представленный клинический пример показывает, что у больной, имевшей высокий риск развития СГЯ по данным клинико-лабораторных параметров, и не имевшей генотипов риска по данным генотипирования, синдром гиперстимуляции яичников не развился.

Литература

1. Madill J.J., Mullen N.B., Harrison В.P. Ovarian hyperstimulation syndrome: a potentially fatal complication of early pregnancy. JEmerg Med 2008; 35(3): 283-6.

2. Alama P., B'ellver J., Vidal C, Giles J. GnRH Analogues in the Prevention of Ovarian Hyperstimulation Syndrome Int J EndocrinolMetab. 2013.

3. Корнеева И.Е., Калинина Е.А. Клинические рекомендации по СГЯ (2013).

4. Marzal A., Holzer H., Tulandi Т. Future Developments to Minimize ART Risks SeminReprod Med 2012; 30: 152-160.

5. Владимирова И.В., Калинина E.A., Донников A.E. Молекулярно-генетические маркеры как прогностические факторы овариального ответа в программах ВРТ. Акушерство и гинекология. 2014; 3; 16-20.

6. Nordhoff V., Gromoll J., Simoni M. Constitutively active mutations of G proteincoupled receptors: the case of the human luteinizing hormone and follicle-stimulating hormone receptors. Arch Med Res 1999, 30(6): 501-509.

7. Edwards-Silva R.N., Han C.S., Hoang Y., Kao L.C. Spontaneous ovarian hyperstimulation in a naturally conceived pregnancy with uncontrolled hypothyroidism // Obstet Gynecol 2008. - Vol. 111. - №2 Pt 2. - P. 498-501.

8. Taher В.M., Ghariabeh R.A., Jarrah N. S., Hadidy A.M., Radaideh A.M., Ajlouni K.M. Spontaneous ovarian hyperstimulation syndrome caused by hypothyroidism in an adult // Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol 2004. - Vol. 112. - №1. - P. 107-109.

9. Borna S., Nasery A. Spontaneous ovarian hyperstimulation in a pregnant woman with hypothyroidism // Fertil Steril 2007. - Vol. 88. - №3. - P. 705 e701-703.

10. Ashrafi M., Bahmanabadi A., Akhond M.R., Arabipoor A. Predictive factors of early moderate/severe ovarian hyperstimulation syndrome in non-polycystic ovarian syndrome patients: a statistical model // Arch Gynecol Obstet 2015. - Vol. 292. - №5. - P. 1145-1152.

11. Hanevik H.I., Hilmarsen H.Т., Skjelbred C.F., Tanbo Т., Kahn J.A. Increased risk of ovarian hyperstimulation syndrome following controlled ovarian hyperstimulation in patients with vascular endothelial growth factor + 405 cc genotype // Gynecol Endocrinol 2012. - Vol. 28. - №11. - P. 845-849.

12. Fiedler K. and Ezcurra D. Predicting and preventing ovarian hyperstimulation syndrome (OHSS): the need for individualized not standardized treatment. Reproductive Biology and Endocrinology, vol. 10, article 32, 2012.

Способ прогнозирования синдрома гиперстимуляции яичников (СГЯ) тяжелой или средней степени тяжести в программе ЭКО на основании определения полиморфизмов генов VEGFA и TSHR, характеризующийся тем, что осуществляют генотипирование генов VEGFA и TSHR и при наличии генотипов TSHR:2181C/C и VEGFA:936C/T у пациентки прогнозируют СГЯ тяжелой или средней степени тяжести в программе ЭКО.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения протеогликанов из мочи. Способ заключается в том, что мочу первоначально охлаждают, выдерживают до образования агрегатов, центрифугируют для выпадения осадка, не содержащего протеогликана, после чего к надосадочной жидкости для осаждения протеогликана добавляют осадитель в соотношении 1:1, состав которого включает 4 объема 96° этилового спирта и 1 объем 0,01 N раствора гидроксида натрия, после чего смесь оставляют, не изменяя температурный режим, на 20 мин для образования агрегатов, которые отделяют центрифугированием, а затем осадок протеогликана отделяют от надосадочной жидкости в режиме охлаждения при 0°C центрифугированием, осадок отмывают повторным добавлением охлажденного до 0°C осадителя в соотношении 1:10, выдерживают в течение 5 мин для образования агрегатов, вновь центрифугируют, отделяют надосадочную жидкость, полученный осадок растворяют добавлением 0,01 N раствора HCl, снижая значения pH конечного продукта до pH 7,2, оставшийся незначительный нерастворимый осадок отделяют центрифугированием, а надосадочную жидкость, содержащую очищенный протеогликан, используют по назначению.

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ отбора веществ для направленной модуляции иммунного ответа при вакцинации против чумы людей, характеризующийся тем, что выполняется ex vivo на суспензии клеток крови, полученной до и через месяц после вакцинации, инкубированных с тестируемым веществом при 37°С в течение 24 ч с определением в образцах продукции цитокинов - IL-17, IFN-γ, TNF-α, IL-4 и последующей математической обработкой полученных данных с использованием коэффициентов и индексов, и при значении коэффициента эффективности стимуляции тестируемым веществом Т-клеточного звена иммунной системы (КЭИ) тестируемого вещества, превышающего КЭИ для контроля 2 в диапазоне от 1,5 до 3,0 раз, тестируемое вещество считается пригодным для направленной модуляции иммунного ответа.

Изобретение относится к области медицины, в частности к гинекологии, и предназначено для прогнозирования развития ВПЧ-ассоциированных цервикальных интраэпителиальных неоплазий (CIN).
Изобретение относится к медицине, а именно к психофизиологической диагностике, и может быть использовано для выявления риска аддиктивного поведения у подростков и лиц юношеского возраста, учащихся образовательных учреждений.
Изобретение относится к области медицины и предназначено для диагностики врожденного нефротического синдрома финского типа у детей с использованием технологии секвенирования нового поколения.
Изобретение относится к области медицины и предназначено для диагностики гликогеновой болезни IXa типа у детей с использованием технологии секвенирования нового поколения.

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования развития коморбидной формы артериальной гипертензии (АГ) и хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ).

Изобретение относится к диагностике, а именно способу прогнозирования развития абдоминального сепсиса у больных с распространенным гнойным перитонитом. Способ прогнозирования развития абдоминального сепсиса у больных с распространенным гнойным перитонитом (РГП), заключающийся в том, что в течение первых суток после постановки диагноза РГП с помощью хемилюминесцентного анализа в крови больных определяют индекс относительного синтеза супероксид-радикала (ИОСС), представляющий собой отношение площади под кривой люминолзависимой хемилюминесценции к площади под кривой люцигенинзависимой хемилюминесценции, и при ИОСС выше 1,32 прогнозируют развитие абдоминального сепсиса.

Изобретение относится к медицине и касается способа исследования синтеза липопротеидов. При исследовании синтеза липопротеидов вечером перед сном и утром натощак в плазме крови определяют содержание триглицеридов, липопротеидов высокой плотности (ЛПВП), липопротеидов низкой плотности (ЛПНП) и липопротеидов очень низкой плотности (ЛПОНП), гематокрита и объема циркулирующей крови, после чего рассчитывают коэффициент (К), позволяющий оценить состояние синтеза липопротеидов по формуле: гдеК - коэффициент состояния синтеза липопротеидов, ТГутр - содержание триглицеридов в плазме утром, ТГвеч - содержание триглицеридов в плазме вечером, ЛПВПутр - содержание липопротеидов высокой плотности в плазме крови утром, ЛПНПутр - содержание липопротеидов низкой плотности в плазме крови утром, ЛПОНПутр - содержание липопротеидов очень низкой плотности в плазме крови утром, ЛПВПвеч - содержание липопротеидов высокой плотности в плазме крови вечером, ЛПНПвеч - содержание липопротеидов низкой плотности в плазме крови вечером, ЛПОНПвеч - содержание липопротеидов очень низкой плотности в плазме крови вечером, ОЦКутр - объем циркулирующей крови утром, Htyтp - гематокрит, отражающий удельный вес форменных элементов в крови утром, ОЦКвеч - объем циркулирующей крови вечером, Htвeч - гематокрит, отражающий удельный вес форменных элементов в крови вечером.

Изобретение относится к области медицины и предназначено для оценки индивидуального риска формирования избыточной массы тела и ожирения у детей, потребляющих питьевую воду с повышенным содержанием хлороформа и тетрахлорметана.

Изобретение относится к области медицины, в частности к гинекологии, и предназначено для прогнозирования развития ВПЧ-ассоциированных цервикальных интраэпителиальных неоплазий (CIN).
Изобретение относится к области медицины и предназначено для диагностики врожденного нефротического синдрома финского типа у детей с использованием технологии секвенирования нового поколения.
Изобретение относится к области медицины и предназначено для диагностики гликогеновой болезни IXa типа у детей с использованием технологии секвенирования нового поколения.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к способу идентификации растения, включающему по крайней мере одну детерминанту устойчивости сорта растения сои к соевой цистообразующей нематоде (SCN), а также к способу получения SCN-устойчивого растения сои, представляющего собой интерес сорта, включающему стадии скрещивания растения сои, имеющего признак устойчивости к SCN, с растением сои SCN-неустойчивого сорта, представляющий интерес, применение маркер-вспомогательной селекции, а также размножение растений сои F1 с получением SCN-устойчивого растения сои.

Изобретение относится к биотехнологии. Описан синтетический, необязательно модифицированный олигонуклеотид длиной 10-30 нуклеотидов или длиной 19-30 нуклеотидов, где модификация выбрана из модифицированного сахарного фрагмента; модифицированной межнуклеотидной связи; модифицированного нуклеотида, а также из их сочетаний.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к способу идентификации сортов малины Агавам, Атлант, Бабье лето II, Беглянка, Бриллиантовая, Брянское диво, Геракл, Желтый гигант, Золотая осень, Кумберленд, Логанберри, Лаутон, Оранжевое чудо, Пингвин, Солнышко, Тайберри, Торнфри, Элегантная на основе RAPD-маркеров, включающий отбор растительного материала, выделение ДНК из растительного материала, амплификацию ДНК в реакционной смеси с последовательным участием нескольких рандомных праймеров, разделение продуктов амплификации с помощью электрофореза, визуализацию продуктов амплификации под ультрафиолетовым светом и выявление среди продуктов амплификации уникальных сочетаний аллелей всех амплифицируемых зон (локусов) по всем используемым праймерам, присущих только для данного сорта профилей.

Изобретения относятся к области генетики и медицины и касаются способов неинвазивного пренатального установления отцовства. В способах применяются генетические измерения наличия однонуклеотидных полиморфизмов, делеций, дупликаций и инверсий нуклеотидных последовательностей, выполненные в плазме, взятой от беременной матери, вместе с аналогичными генетическими измерениями предполагаемого отца для определения того, является или не является предполагаемый отец биологическим отцом плода.

Изобретение относится к биохимии. Описаны способы детекции нуклеиновокислотной последовательности-мишени в анализе с PCE-NH (отсутствием гибридизации, зависящим от расщепления и удлинения зондирующего и метящего олигонуклеотида (РТО)).

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к способу для детекции нуклеотидных вариаций посредством анализа с расщеплением и удлинением зондирующего и метящего олигонуклеотида (анализа РТОСЕ), и может быть использовано в медицине.

Изобретение относится к биохимии. Изобретение обеспечивает способ селективной амплификации одной или нескольких целевых бактериальных ДНК в образце, включающий: гибридизацию множества гибридизационных зондов, выбранных из SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 6, с указанной целевой микробной ДНК, где каждый из указанных гибридизационных зондов содержит 5'-концевой участок, имеющий последовательность небактериальной ДНК, выбранную из вирусной последовательности или искусственно сконструированной последовательности, и 3'-концевой участок, имеющий последовательность, комплементарную участку последовательности гена бактериальной 16S rRNA; удаление негибридизированных гибридизационных зондов и любого несвязанного 3'-концевого участка целевой бактериальной ДНК; удлинение 3'-концов гибридизационных зондов и целевой бактериальной ДНК с образованием двухцепочечных удлиненных с помощью праймера матриц.

Изобретение относится к биотехнологии и стоматологии и клинико-лабораторной диагностике. Описан способ оценки состояния пародонта человека на предмет устойчивости к развитию хронического генерализованного пародонтита, вызываемого Treponema denticola и/или Tannerella forsythensis. Согласно изобретению в качестве специфического маркера используется уровень обсемененности пародонта бактерией-пародонтопротектором Streptococcus sanguinis, определяемый методом полимеразной цепной реакции в реальном времени с использованием специфических праймеров и зонда. Высокая обсемененность пародонта пациента S. sanguinis свидетельствует о его высокой устойчивости к гиперколонизации такими пародонтопатогенами, как Tannerella forsythensis и Treponema denticola, и в меньшей степени Porphyromonas gingivalis и Prevotella intermedia. Низкая представленность S. sanguinis в микробиоценозе пародонта конкретного пациента или его полное отсутствие является прогностическим признаком, свидетельствующим о повышенном риске сверхкритической колонизации пародонта патогенами и последующем развитии хронического генерализованного пародонтита (ХГП). Наибольшей эффективности при оценке состояния пародонта можно добиться за счет параллельного измерения представленности в микробиоценозе пародонта патогенов: Aggregatibacter actinomycetemcomitans, Porphyromonas gingivalis, Prevotella intermedia, Tannerella forsythensis и Treponema denticola [1-5] и S. sanguinis. Данный подход позволяет прогнозировать динамику развития заболевания и производить оценку результативности курса лечения, пройденного пациентом. 2 з.п. ф-лы.
© Патентный поиск, поиск патентов на изобретения - FindPatent.RU 2012-2024
Политика конфиденциальности 2016-01-11 2017-06-19T01:38:31
Наверх