Способ лабораторной верификации вагинита у девочек с вульвитом в возрасте до 8 лет


G01N33/50 - химический анализ биологических материалов, например крови, мочи; испытания, основанные на способах связывания биоспецифических лигандов; иммунологические испытания (способы измерения или испытания с использованием ферментов или микроорганизмов иные, чем иммунологические, составы или индикаторная бумага для них, способы образования подобных составов, управление режимами микробиологических и ферментативных процессов C12Q)

Владельцы патента RU 2622028:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова" Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)
Общество с ограниченной ответственностью "НПФ ДНК-Технология" (RU)

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ диагностики вагинита у девочек в возрасте до 8 лет, заключающийся в том, что используют ПЦР в режиме реального времени с определением в образце числа геномов Lactobacillus spp. и Gardnerella vaginalis в мазке-соскобе со слизистой оболочки влагалища, рассчитывают индекс lgL/G, где lgx - десятичный логарифм численного соотношения геномов микроорганизмов, L соответствует числу геномов Lactobacillus spp., a G - числу геномов Gardnerella vaginalis в образце и при значениях индекса более -0,5 диагностируют вагинит. Способ позволяет повысить информативность лабораторного обследования у девочек периода детства с нарушением биоценоза слизистой влагалища, оценить эффективность проводимой терапии. 3 пр.

 

Изобретение относится к медицине, в частности к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для лабораторного подтверждения диагноза вагинита у девочек.

Микробиоценоз слизистой оболочки влагалища у девочек в периоде детства в связи с низким уровнем эстрогенов, малым количеством слоев эпителия, слабой выработкой гликогена формируется в условиях предельно малого участия молочно-кислых палочек.

В повседневной практике достаточно часто встречаются девочки, обращающиеся с яркими симптомами вульвита, доставляющими крайний дискомфорт, притом что при микроскопии мазков и даже при микробиологическом исследовании отделяемого из влагалища выраженные отклонения биотопа отсутствуют, что затрудняет выбор лечебной тактики.

В 1990 году М.Л. Коршуновым впервые были разработаны критерии диагностики «переходного» типа микроценоза влагалища у детей в возрасте до 8 лет включительно, базирующиеся на анализе данных микроскопии мазка влагалищного отделяемого. Автор обозначил переходным типом микроценоза наличие незначительного количества грамположительных коккобактерий при минимуме лейкоцитов (0-2) и при обнаружении эпителиальных и дегенеративно измененных клеток у девочек с клиническими симптомами вульвовагинита. Однако вышеуказанные критерии незначительно отличаются от характеристики нормоценоза влагалища у девочек, описанного этим же автором, что не дает возможности дифференциально диагностировать патологические изменения микроценоза влагалища.

Способ диагностики с использованием микробиологического (культурального) исследования, позволяющего установить видовой состав аэробных, факультативно-анаэробных и некоторых облигатно-анаэробных бактерий и тем самым подтвердить принадлежность к роду, также не позволяет определить точные количественные значения микроорганизмов. Более того, традиционный забор содержимого влагалища из его просвета определяет состав транзиторных микроорганизмов а не постоянной пристеночной микрофлоры. Как известно, именно пристеночно живущие микроорганизмы участвуют в обеспечении колонизационной резистентности вульвы и влагалища.

Указанный способ не дает конкретных количественных значений указанных микроорганизмов и не дает возможность четко сформулировать необходимость и объем лечебного воздействия. Существенным недостатком являются приблизительная оценка, важность профессионализма работников лаборатории, длительные сроки культивирования (в среднем до 7 дней).

Одним из ближайших аналогов указанных способов является способ микробиологической диагностики дисбактериозов влагалища (RU 2293986), заключающийся в сочетанной оценке данных микроскопии и результатов культурального исследования вагинальных мазков из заднего свода влагалища, полученных стерильным ватным тампоном. Существенным недостатком указанного метода является необходимость введения влагалищных зеркал, что проблематично в рутинной практике врача, особенно у детей дошкольного возраста. Кроме того, в основу диагностического метода включены лабораторные исследования, требующие длительного поэтапного получения данных при отсутствии четких повозрастных критериев оценки биотопа влагалища у детей.

Другим аналогом является способ оценки микробиоценоза влагалища (RU 2249821) у взрослых женщин, заключающийся в одновременном заборе отделяемого и соскобного материала из влагалища, орошении влагалища 5,0 мл 6,0% раствора полиглюкина и заборе смыва с последующим цитологическим исследованием окрашенного по Граму мазка соскобного материала, определением бактериальной обсемененности эпителиоцитов, количества лейкоцитов и ключевых клеток, посева отделяемого влагалища и соскобного материала из серийных разведений на питательные среды с определением количества лактобацилл, условно-патогенной факультативно-анаэробной и облигатно-анаэробной микрофлоры. В смыве из влагалища определяют концентрации IgA, sIgA, IgM и свободного секреторного компонента. Сравнивают полученные данные с критериями, установленными для дисбиоза влагалища в репродуктивном периоде. Существенным недостатком данного способа является необходимость многократного и трудоемкого забора исследуемого материала, оценка микробиологического состояния без учета ее видовой идентификации и их количественных значений.

В последнее время наряду с классическими диагностическими методами все чаще используется метод ПЦР в реальном времени, позволяющий выявлять широкий спектр микроорганизмов, охарактеризовывать их количественный уровень по содержанию высокоспецифичных амплифицированных фрагментов ДНК даже при минимальных количественных изменениях микробного представительства.

Ближайшим аналогом указанного метода является способ диагностики дисбаланса микробиоты различных биотопов человека и степени его выраженности (RU 2362808), заключающийся в использовании ПЦР в режиме реального времени с определением общего числа геномов ДНК бактерий, характерных для конкретного биотопа с числом геномов нормальной и условно-патогенной биоты. Полученные величины сравнивают между собой, определяя их соотношение. При превышении числа геномов нормобиоты относительно числа геномов условно-патогенной биоты в 1000 раз констатируют отсутствие дисбаланса. При значении данного показателя менее 1000 диагностируют дисбаланс и устанавливают степень его выраженности. Указанный способ не учитывает возможные возрастные изменения микроценоза конкретного биотопа, а именно влагалища, отсутствует описание представительства отдельных групп микроорганизмов и их количественные изменения, определяющие нормобиоту у девочек и не менструирующих девочек-подростков.

Таким образом, вышеизложенное требует разработки новых более точных и высокоспецифичных критериев лабораторной диагностики вагинита у девочек с вульвитом в возрасте от 1 до 8 лет, особенно при спорных результатах стандартных лабораторных данных о микрофлоре в области вульвы и влагалища. Высокая чувствительность, специфичность и быстрота диагностических возможностей ПЦР в режиме реального времени отвечает практическим требованиям работы с детьми и подростками.

Задачей изобретения является разработка критериев диагностики вагинита у девочек в возрасте от 1 до 8 лет с вульвитом при использовании метода количественной ПЦР в режиме реального времени.

Методика исследования

В исследование было включено 93 девочки в возрасте от 1 до 8 лет включительно.

Критерии включения в основную группу (n=27): клинически и лабораторно подтвержденное воспаление вульвы и влагалища инфекционного генеза.

Критерий включения в группу контроля (n=66): соматическое и гинекологическое здоровье, подтвержденное клинически и лабораторно.

На 1-ом этапе проводили детальный анализ анамнестических данных девочек, включая изучение наследственной предрасположенности к заболеваниям, вредных привычек и хронических заболеваний у родителей до зачатия, течения беременности и родов у матерей девочек, острых и хронических соматических и эндокринных заболеваний, перенесенных и имеющихся у девочек к моменту осмотра.

На 2-м этапе после получения информированного согласия родителя или законного представителя девочки проводилась оценка физического (рост, масса тела, индекс массы тела) и полового развития (половая формула, данные наружного гинекологического осмотра).

На 3-м этапе оценивались данные ПЦР исследования в режиме реального времени мазка-соскоба со слизистой боковой стенки влагалища за гименом, взятые одноразовым урогенитальным зондом (артикул: 3400-01). Показателем адекватности получения биоматериала являлось достаточное количество геномной ДНК человека в пробе, источником которой являлись эпителиальные клетки и лейкоциты, попадающие в пробу при правильной технике взятия биоматериала - контроль взятия материала (КВМ). Показатель КВМ оценивался в абсолютных значениях, его минимальный пороговый уровень составлял 104 ГЭ/образец. При снижении данного показателя результат ПЦР в режиме реального времени считался недостоверным. Лабораторный контроль взятого материала после анализа КВМ был валиден во всех случаях, что подтверждало объективность последующего анализа полученных результатов.

На 4-ом этапе полученные данные клинических и лабораторных исследований обрабатывались статистическими методами.

Полученные результаты

Установлено, что у «здоровых» девочек микроценоз слизистой влагалища в возрасте от 1 до 8 лет включительно характеризуется количественным балансом геномов Lactobacillus spp. и Gardnerella vaginalis, выраженным их соотношением, равным lg0,3 или -0,5. При вагините у девочек аналогичного возрастного периода фиксируется увеличение числа геномов Lactobacillus spp. относительно Gardnerella vaginalis (р<0,05).

Задачей изобретения является разработка критериев диагностики вагинита у девочек с вульвитом в возрасте от 1 до 8 лет при использовании метода количественной ПЦР в режиме реального времени.

Сущность изобретения заключается в том, что используют ПЦР в режиме реального времени с определением в образце числа геномов Lactobacillus spp. и Gardnerella vaginalis в мазке-соскобе со слизистой оболочки влагалища, рассчитывают индекс lgL/G, где lgx - десятичный логарифм численного соотношения геномов микроорганизмов, L соответствует числу геномов Lactobacillus spp., a G - числу геномов Gardnerella vaginalis в образце, и при значениях индекса более -0,5 диагностируют вагинит.

Способ позволяет в кратчайшие сроки диагностировать вагинит у девочек с вульвитом в возрасте от 1 до 8 лет включительно.

Предложенный метод впервые позволяет ускорить диагностический поиск у детей дошкольного возраста, индивидуализировать терапевтические подходы с определением необходимости и объема лекарственного вмешательства. Предлагаемый способ впервые позволяет проводить объективное динамическое наблюдение за эффективностью в результате лечения - восстановление нормальной сбалансированной биоты. В основу способа положена впервые предлагаемая авторами комплексная количественная и качественная оценка отдельных групп микроорганизмов слизистой влагалища у девочек в возрасте от 1 до 8 лет в рамках определенного показателя с использованием метода ПЦР в реальном времени.

Способ осуществляется следующим образом.

Способ диагностики вагинита, отличающийся тем, что используют ПЦР в режиме реального времени с определением в образце числа геномов Lactobacillus spp. и Gardnerella vaginalis в мазке-соскобе со слизистой оболочки влагалища, рассчитывают индекс lg L/G, где lgx - десятичный логарифм численного соотношения геномов микроорганизмов, L соответствует числу геномов Lactobacillus spp., a G - числу геномов Gardnerella vaginalis в образце, и при значениях индекса более -0,5 диагностируют вагинит.

Клинические примеры

Пример 1. Девочка З., 1 года 3 месяца, обратилась с жалобами на незначительные выделения из половых путей желтоватого цвета, выраженный дискомфорт в области половых органов. Произведен забор мазка-соскоба боковой стенки слизистой влагалища за гименом с его исследованием методом ПЦР в режиме реального времени. В течение суток получен результат: число геномов в образце Gardnerella vaginalis 100,0, Lactobacillus spp. - 102,5, соответственно индекс составил lg 102,5/100,0=lg 316/1=2,5 то есть > -0,5. По результатам проведенного обследования диагностировано наличие вагинита. Назначена терапия. В отличие от известных методов диагностика с помощью предложенного метода позволила получить данные о состоянии микроценоза в кратчайшие сроки и провести адекватную терапию с эффектом.

Пример 2. Девочка О., 1 год 10 месяцев, обратилась с жалобами на покраснения половых органов, дискомфорт при ношении белья. Произведен забор мазка-соскоба боковой стенки слизистой влагалища за гименом с его исследованием методом ПЦР в режиме реального времени. В течение суток получен результат: число геномов в образце Gardnerella vaginalis 100,0, Lactobacillus spp. - 102,3, соответственно индекс составил lg 102,3/100,0=lg 199/1=2,2, то есть > -0,5. По результатам проведенного обследования диагностировано наличие вагинита. Назначена терапия. В отличие от известных методов диагностика с помощью предложенного метода позволила получить данные о состоянии микроценоза в кратчайшие сроки и провести адекватную терапию с эффектом.

Пример 3. Девочка М., 5 лет 6 месяцев, обратилась с жалобами на покраснение наружных половых органов, выделения из половых путей желто-зеленого цвета в скудном количестве. На основании результатов клинического осмотра заподозрен вульвовагинит. Произведен забор мазка-соскоба боковой стенки слизистой влагалища за гименом с его исследованием методом ПЦР в режиме реального времени. В течение суток получен результат: число геномов в образце Gardnerella vaginalis 100,0, Lactobacillus spp. 101,7, соответственно индекс составил lg 101,7/100,0=lg 50/1=1,6 то есть > -0,5. По результатам проведенного обследования диагностировано наличие вагинита. Назначена терапия. В отличие от известных методов диагностика с помощью предложенного метода позволила получить данные о состоянии микроценоза в кратчайшие сроки и провести адекватную терапию с эффектом.

Список литературы

1. Андросова Л.Д., Медицинский альманах №4 (13), ноябрь 2010, с. 177-179.

2. Анкирская А.С., Муравьева В.В. Опыт микробиологической диагностики оппортунистических инфекций влагалища // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. 2001. №2. Т. 3. с. 101-105.

3. Анкирская А.С., Муравьева В.В. Инфекции влагалища Диагностика. Лабораторная диагностика оппортунистических инфекций влагалища // Consilium Medicum. 2005. N 3. Т 7.

4. Богданова Е.А. Воспалительные заболевания вульвы и влагалища у девочек // Гинекология. 1999 /N 3/ Том I.

5. Бодяжина В.И., Жмакин К.Н. Учебник гинекологии. Второе издание, переработанное и дополненное. Москва: Изд-во «Медицина». - 1967. - с. 32-55.

6. Гриневич Е.В. Характеристика микробиоценозов влагалища, кишечника и мочевыводящих путей при вульвовагинитах у девочек раннего возраста в зависимости от различных факторов риска Дис… канд. мед. наук. 2005.

7. Гуркин Ю.А. Гинекология подростков. / Руководство для врачей. СПб: ИКФ «Фолиант», 2000. - 574 с.

8. Дмитриев Г.А. Лабораторная диагностика бактериальных урогенитальных инфекций. - М.: Мед. книга, Н. Новгород: Издательство НГМА, 2003. - 336 с.

9. Дергачева Т.И. Клинико-иммунологическая характеристика неспецифических вульвовагинитов у девочек с аллергическими заболеваниями. Дис… 1987.

10. Коротяев А.И., Бабичев С.А. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология Учебник для мед. вузов - СПб.: СпецЛит, 2008 - 4-е изд., - 767 с.

11. Коршунов М.Л. Бактериальный вульвовагинит у девочек, страдающих воспалительными заболеваниями почек и мочевыводящих путей. Дис… 1990

12. Кисина В.И. Микроценоз влагалища в норме и при вагинальных инфекциях: методы его коррекции // Consilium Medicum. Том 04/N 7/2002.

13. Лапченко М.Л. Гинекологические заболевания у девочек и девушек, 2004. Гл. 6 стр. 146-148.

14. Локун М.В. Особенности регуляции микроэкологических нарушений у девочек с неспецифическими вульвовагинитами. Дис… 2005

15. Маркин Л.Б., Яковлева Э.Б. Детская гинекология // Знания / стр. 109-118, 2004.

16. Малова И.О. Влагалищные выделения у девочек: этиология, клиника, диагностика, лечение // Педиатрия. Том 07 /N 2/ 2005.

17. Маркин Л.Б. Детская гинекология: Справочник - К.: Знания, 2004 - 476 с.

18. Прилепская В.Н., Довлетханова Э.Р., Байрамова Г.Р., Фофанова И.Ю. Современный взгляд на вопросы этиологии, патогенеза и лечения бактериального вагиноза // Гинекология №2 / том 12 / 2010.

19. Пересада О.А., Кудина О.Л., Тимошенко Т.И. Влияние микрофлоры матери на формирование микробиоценоза влагалища девочки. БелМАПО. Опубликовано: "Медицинская панорама" №1, январь 2002.

20. Препутневич Т.В., Мелкумян А.Р., Анкирская А.С. Использование современных лабораторных технологий в видовой идентификации лактобактерий при оценке состояния микробиоты влагалища у женщин репродуктивного возраста // Акушерство и гинекология №1 / 2013.

21. Рахматулина М.Р. Вульвовагиниты у девочек до 12 лет: этиология, клиника, диагностика. Дис… 2004.

22. Скала Л.З., Сидоренко С.В. Практические аспекты современной клинической микробиологии. - Тверь: ООО Издательство «Триада», 2004. - 312 с.

23. Субботина С.В. Клинико-иммунологические особенности вульвовагинитов у девочек. Дис… 2000.

24. Султанова Ф.Ш. Состояние влагалища и шейки матки у девочек допубертатного возраста с различным уровнем стероидных гормонов. Дис… 2003.

25. Творогова Т.М. Воспалительные заболевания гениталий у девочек // РМЖ // N7, 2005 г.

26. Тихомиров А.Л., Олейник Ч.Г. Бактериальный вагиноз: некоторые аспекты этиологии, патогенеза, клиники, диагностики и лечения // Гинекология. Том 06 /N2/ 2004.

27. Трачук Т.Ю. Особенности формирования биоценоза влагалища новорожденных и его роль в снижении детской гинекологической заболеваемости. Дис… 1999.

28. Уварова Е.В. Детская и подростковая гинекология. Руководство для врачей. - М.: Литтерра, 2009 г.

29. Уварова Е.В. Современные лечебно-диагностические технологии в детской гинекологии // Гинекология. Том 9 №5, стр 16 / 2007.

30. Уварова Е.В. Кандидный вульвовагинит в практике детского гинеколог. // Русский медицинский журнал, 2002, том 10, №18, с. 798-802.

31. Уварова Е.В., Латыпова Н.Х., Плиева З.А. Результаты применения Лактогина для устранения дисбиотических состояний кишечника и влагалища у девочек с хроническим вульвовагинитом // Репродуктивное здоровье детей и подростков / 2008, №4, с. 71-82.

32. Уварова Е.В., Султанова Ф.Ш. Неспецифические вагиниты у детей и подростков. Недетские детские проблемы // Consilium Provisorum. Том 03 /N5/ 2003.

33. Arne K. Myhre. Changes in Genital Anatomy and Microbiology in Girls between Age 6 and Age 12 Years: A Longitudinal Study, J Pediatr Adolesc Gynecol (2009).

34. Bacon JL. Prepubertal labial adhesions: Evaluluation of a referral population. Am. J Obstet Gynecol 2002; 187:327.

35. Jonathan Batchelor et al. Skin disorders affecting the vulva // obstetrics, gynaecology and reproductive medicine 2008; 18:3, p. 53-58.

36. Celeste J. Brown, Mayee Wong. Preliminary characterization of the normal microbiota of the human vulva using cultivation-independent methods // Journal of Medical Microbiology (2007), 56, 271-276.

37. Aldo Cavallini et al. Estrogen receptor and ER-related receptor expression in normal and atrophic vagina // Maturitas. 59 (2008), 219-225.

38. Consensus Conference on Pediatric Atopic Dermatitis // J. Am. Acad. Dermatol. 2003; 49: 1088-1095. Atopic eczema in primary care. MeReC Bulletin. 2003; 14:1.

39. Caglar M.K. Serum Estradiol levels, in infants with and without Labial Adhesions: The role of estrogen in the etiology and treatment, 2007.

40. Cambell M.F. Vulvar fusion // JAMA, No 115 Pages 513-515, 1940.

41. Tamara L. Callahan, Aaron B. Caughey. Blueprints in obstetrics and gynecology / 2nd ed. 2001.

42. Crone AM. Aetiological factors in vulvar dermatitis JEADV (2000) 14, 181-186.

43. Cuadros Juan. The aetiology of paediatric inflammatory vulvovaginitis // Eur J Pediatr (2004) 163: 105-107.

44. Metella Dei et al. Vulvovaginitis in childhood; Best practice & research clinical obstetrics and gynecology. 24 (2010) 129-137.

45. Denney Jeff M. Bacterial vaginosis: A problematic infection from both a perinatal and neonatal perspective // Seminars in Fetal & Neonatal Medicine. 14 (2009) 200-203.

46. Donders GG. Bosmans E, Dekeersmaecker A, Vereecken A, Van Bulck B, Spitz B. Pathogenesis of abnormal vaginal bacterial flora. Am J Obstet Gynecol 2000; 182:872-8.

47. Forsum U. Bacterial vaginosis - a microbiological and immunological enigma // APMIS 113: 81-90, 2005.

48. Jasper Jill M. Vulvovaginitis in the Prepubertal Child // Clinical pediatric emergency medicine 2009; 10-13.

49. Manohara Joishy, Chetan Sandeep Ashtekar, Arpana Jain, Rohini Gonsalves, Do we need to treat vulvovaginitis in prepubertal girls? Clinical review. BMJ, 2005 V 330 186-188 Metella Dei. Vulvovaginitis in childhood // Best Practice & Research Clinical Obstetrics and Gynaecology. 24 (2010), 129-137.

50. Lyubov A Matytsin. Vaginal microbiocoenosis and cytology of prepubertal and adolescent girls: their role in health and disease // World J Pediatr, Vol 6 #1, 2010.

51. Hammerschlag MR, Alpert S, Rosner I, et al. Microbiology of the vagina in children: normal and potentially pathogenic organisms. Pediatrics 1978; 62:57-62 Howard Maibach, Miranda Farage. Lifetime changes in the vulva and vagina // Arch Gynecol Obstet (2006). 273: 195-202.

52. Myhre A.K. Anogenital bacteriology in non-abused preschool children: a Acta Paediatr 91:885-891 / 2002.

53. Noverr M.C., Huffnagle G.B. The 'microflora hypothesis' of allergic diseases // Clin Exp Allergy 2005; 35:1511-1520.

54. Strieker Т., Navratil F., Sennhauser F.H. Vulvovaginitis in prepubertal girls // Arch Dis Child 2003; 88:324-326.

Способ диагностики вагинита у девочек в возрасте до 8 лет, заключающийся в том, что используют ПЦР в режиме реального времени с определением в образце числа геномов Lactobacillus spp. и Gardnerella vaginalis в мазке-соскобе со слизистой оболочки влагалища, рассчитывают индекс lg L/G, где lgx - десятичный логарифм численного соотношения геномов микроорганизмов, L соответствует числу геномов Lactobacillus spp., a G - числу геномов Gardnerella vaginalis в образце, и при значениях индекса более -0,5 диагностируют вагинит.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области профилактической медицины, экологии человека, педиатрии и может быть использовано для диагностики у детей функционального расстройства центральной нервной системы, ассоциированного с сочетанным техногенным воздействием.
Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования синдрома гиперстимуляции яичников (СГЯ) тяжелой или средней степени тяжести в программе ЭКО.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения протеогликанов из мочи. Способ заключается в том, что мочу первоначально охлаждают, выдерживают до образования агрегатов, центрифугируют для выпадения осадка, не содержащего протеогликана, после чего к надосадочной жидкости для осаждения протеогликана добавляют осадитель в соотношении 1:1, состав которого включает 4 объема 96° этилового спирта и 1 объем 0,01 N раствора гидроксида натрия, после чего смесь оставляют, не изменяя температурный режим, на 20 мин для образования агрегатов, которые отделяют центрифугированием, а затем осадок протеогликана отделяют от надосадочной жидкости в режиме охлаждения при 0°C центрифугированием, осадок отмывают повторным добавлением охлажденного до 0°C осадителя в соотношении 1:10, выдерживают в течение 5 мин для образования агрегатов, вновь центрифугируют, отделяют надосадочную жидкость, полученный осадок растворяют добавлением 0,01 N раствора HCl, снижая значения pH конечного продукта до pH 7,2, оставшийся незначительный нерастворимый осадок отделяют центрифугированием, а надосадочную жидкость, содержащую очищенный протеогликан, используют по назначению.

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ отбора веществ для направленной модуляции иммунного ответа при вакцинации против чумы людей, характеризующийся тем, что выполняется ex vivo на суспензии клеток крови, полученной до и через месяц после вакцинации, инкубированных с тестируемым веществом при 37°С в течение 24 ч с определением в образцах продукции цитокинов - IL-17, IFN-γ, TNF-α, IL-4 и последующей математической обработкой полученных данных с использованием коэффициентов и индексов, и при значении коэффициента эффективности стимуляции тестируемым веществом Т-клеточного звена иммунной системы (КЭИ) тестируемого вещества, превышающего КЭИ для контроля 2 в диапазоне от 1,5 до 3,0 раз, тестируемое вещество считается пригодным для направленной модуляции иммунного ответа.

Изобретение относится к области медицины, в частности к гинекологии, и предназначено для прогнозирования развития ВПЧ-ассоциированных цервикальных интраэпителиальных неоплазий (CIN).
Изобретение относится к медицине, а именно к психофизиологической диагностике, и может быть использовано для выявления риска аддиктивного поведения у подростков и лиц юношеского возраста, учащихся образовательных учреждений.
Изобретение относится к области медицины и предназначено для диагностики врожденного нефротического синдрома финского типа у детей с использованием технологии секвенирования нового поколения.
Изобретение относится к области медицины и предназначено для диагностики гликогеновой болезни IXa типа у детей с использованием технологии секвенирования нового поколения.

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования развития коморбидной формы артериальной гипертензии (АГ) и хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ).

Изобретение относится к диагностике, а именно способу прогнозирования развития абдоминального сепсиса у больных с распространенным гнойным перитонитом. Способ прогнозирования развития абдоминального сепсиса у больных с распространенным гнойным перитонитом (РГП), заключающийся в том, что в течение первых суток после постановки диагноза РГП с помощью хемилюминесцентного анализа в крови больных определяют индекс относительного синтеза супероксид-радикала (ИОСС), представляющий собой отношение площади под кривой люминолзависимой хемилюминесценции к площади под кривой люцигенинзависимой хемилюминесценции, и при ИОСС выше 1,32 прогнозируют развитие абдоминального сепсиса.

Изобретение относится к медицине и касается способа определения активности ангиотензин-превращающего фермента в тканях сердца, характеризующегося тем, что получают гомогенат биоптата ткани сердца, супернатант, полученный путем центрифугирования гомогената, разбавляют, затем один объем разбавленного супернатанта добавляют к пяти объемам смеси, состоящей из пептидного субстрата, содержащего дипептид His-Leu на С-конце, и ингибитора аминопептидазы, растворенных в буфере с рН 7,5-8,3, проводят реакцию, после чего определяют в реакционной среде содержание образованного дипептида His-Leu, при этом активность ангиотензин-превращающего фермента определяют по количеству микромолей His-Leu, образованному в единицу времени. Изобретение обеспечивает повышение точности определения активности ангиотензин-превращающего фермента в гомогенатах тканей, в которых его содержание невелико, в частности в биоптатах тканей сердца. 2 ил., 4 пр.

Изобретение относится к области медицины, в частности к педиатрии и инфекционным болезням, и может быть использовано для прогнозирования развития постинфекционной гастроэнтерологической патологии у детей, реконвалесцентов острых вирусных гастроэнтеритов. Сущность способа: определяют уровень аспартатаминотрансферазы в сыворотке крови в острый период болезни, рассчитывают показатели линейных дискриминантных функций ЛДФ1 (отсутствие развития гастроэнтерологической патологии) и ЛДФ2 (наличие развития гастроэнтерологической патологии) по формуламЛДФ1 = -6,03+2,40X1+0,83Х2++0,64Х3-1,42X4+0,64Х5;ЛДФ2 = -12,63+2,75X1+1,13X2++0,93Х3+2,02X4+5,09Х5, где X1 - характер лихорадки в первые сутки болезни (1 - субфебрильная: 37,0-37,9°С; 2 - фебрильная: 38,0-38,9°С; 3 - высокая фебрильная: 39,0-39,9°С; 4 - гиперпиретическая: 40,0°С и более); Х2 - частота жидкого стула в первые сутки болезни; Х3 - количество эпизодов рвоты в первые сутки болезни; Х4 - уровень аспартатаминотрансферазы в сыворотке крови в острый период болезни (0 - нормальный; 1 - повышенный); Х5 - применение антибактериальных препаратов для лечения на догоспитальном этапе (0 - нет; 1 - есть). Сравнивают значения показателей ЛДФ1 и ЛДФ2 и прогнозируют развитие постинфекционной функциональной гастроэнтерологической патологии при ЛДФ2>ЛДФ1. Использование способа позволит повысить эффективность профилактики и предупредить формирование постинфекционных заболеваний органов пищеварения функциональной природы, уменьшить число неблагоприятных исходов реабилитации. 2 пр., 3 табл.

Изобретение относится к области медицины, в частности к кардиологии, и предназначено для прогнозирования риска снижения эффективности антиагрегантной терапии клопидогрелем и препаратами ацетилсалициловой кислоты (АСК) у больных ишемической болезнью сердца (ИБС), подвергшихся стентированию коронарных артерий. Из венозной крови пациентов выделяют ДНК. Полиморфные варианты Т-786С гена NOS3 определяют путем аллель-специфичной ПЦР. Детекцию продуктов ПЦР проводят электрофоретическим методом. Повышенный риск снижения эффективности антиагрегантной терапии клопидогрелем и препаратами ацетилсалициловой кислоты прогнозируют у носителей генотипа -786СС гена NOS3. Изобретение позволяет провести оценку риска формирования резистентности к антиагрегантным препаратам и своевременно скорректировать проводимую терапию и повысить качество лечения. 2 табл., 3 пр.
Группа изобретений относится к медицине и касается способа диагностики дифтерии, предусматривающего забор клинического материала от больного, выделение из него ДНК, смешивание выделенной ДНК и смеси №1, содержащей ПЦР буфер, смесь нуклеотидов (dNTP), MgCl2, раствор Betaine, праймеры, нагревание, последующее охлаждение, добавление смеси №2, содержащей рабочее разведение Bst полимеразы; проведение изотермальной амплификации, детекцию продуктов амплификации при горизонтальном электрофорезе в агарозном геле путем сравнения электрофоретической подвижности полученных фрагментов ДНК с подвижностью контрольного образца ДНК токсигенного штамма Corynebacterium diphtheriae и диагностику дифтерии. Группа изобретений также касается набора для диагностики дифтерии. Группа изобретений обеспечивает ускорение, упрощение диагностики дифтерии, высокую чувствительность и специфичность за счет одновременной верификации токсигенных и нетоксигенных штаммов возбудителя с уточнением механизмов отсутствия экспрессии гена дифтерийного токсина. 2 н.п. ф-лы, 1 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к неонатологии, и может быть использовано у недоношенных новорожденных с очень низкой и экстремально низкой массой тела. Способ заключается в том, что у новорожденного с очень низкой и экстремально низкой массой тела на 1-2 сутки жизни определяют показатель тромбоэластограммы 30-минутный лизис сгустка крови (LY30). Затем учитывают вид респираторной терапии, концентрацию кислорода во вдыхаемом воздухе (fiO2) на момент взятия крови и рассчитывают дискриминантную функцию (Y) по формуле:Y=8,288-0,081×X1-2,553×Х2-0,056×Х3, гдеX1 - показатель LY30 в %;Х2 - вид респираторной терапии:назальный СРАР - 1 балл, ИВЛ - 2 балла;Х3 - концентрация fiO2 в %и при значении Y<0 прогнозируют кровотечение. Предлагаемый способ с высокой точностью, чувствительностью и специфичностью обеспечивает возможность прогнозирования кровотечений у новорожденных с очень низкой и экстремально низкой массой тела, что позволяет своевременно определить тактику лечебных мероприятий. 4 пр., 1 табл.

Изобретение относится к диагностике, а именно к способу оценки фибринолитической активности слезной жидкости. Способ оценки фибринолитической активности слезной жидкости включает отбор слезы из нижнего конъюнктивального свода глаз, титрование анализируемой слезной жидкости путем проведения серии из двукратных разведений с помощью буферного раствора, добавление к полученным образцам латексного реагента, содержащего мышиные моноклональные антитела к Д-димеру фибрина, далее смесь перемешивают, регистрируют реакцию агглютинации в пробе при наибольшей величине разведения и рассчитывают концентрацию Д-димера по формуле:С(Д-димер)=200×d, нг/мл,где С - концентрация Д-димера (нг/мл), d - наибольшая величина разведения, 200 - чувствительность реагента, при этом концентрацию Д-димера 3200 нг/мл считают пороговой для подтверждения повышения активности системы фибринолиза слезной жидкости для оценки фибринолитической активности слезной жидкости с использованием в качестве маркера концентрацию Д-димера в слезной жидкости в слезной жидкости. Вышеописанный способ позволяет эффективно проводить оценку фибринолитической активности слезной жидкости. 2 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии. Для выбора индивидуального объема локорегионарной лучевой терапии после хирургической операции по поводу люминального подтипа рака молочной железы (МЖ) проводят морфологическое исследование подмышечных лимфоузлов с метастазами. При этом определяют экспрессию Ki 67. В случае Ki 67<20% проводят облучение оставшейся ткани МЖ или послеоперационного рубца после ее удаления, а также тканей передней грудной стенки и зоны нижних и средних лимфатических узлов подмышечной области. При Ki 67≥20% проводят облучение оставшейся ткани МЖ или послеоперационного рубца после ее удаления, а также тканей передней грудной стенки и зоны лимфатических узлов подмышечной и подключичной области. Способ обеспечивает существенное снижение лучевой нагрузки при облучении пациентов раком МЖ, короткие сроки реабилитации. 2 пр.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для прогнозирования инвалидности у детей с ишемическим инсультом. Определяют 28 параметров: оценка по шкале Апгар, тромботические события у кровных родственников в возрасте до 50 лет, диспансерное наблюдение у невролога в течение первого года жизни, инфекционное заболевание до инсульта, «часто болеющий ребенок, первоначально диагноз «инсульт» не был установлен, в течение первых 6 часов имелись признаки парезов или параличей конечностей, при проведении нейровизуализации очаг инфаркта зафиксирован в течение первых суток, инсульт локализуется в бассейне задней мозговой артерии, внутривенная инфузия включала раствор MgSO4, применение антибактериальной терапии, гемотрансфузионной терапии, признаки комы сохраняются на 7-е сутки пребывания в стационаре, судорожный синдром сохраняется или появился на 7-е сутки пребывания в стационаре, признаки пареза или паралича конечностей сохраняются на 7-е сутки пребывания в стационаре, признаки бульбарного паралича сохраняются на 7-е сутки пребывания в стационаре, признаки пареза глазодвигательной группы черепных нервов сохраняются на 7-е сутки пребывания в стационаре, потребность в искусственной вентиляции легких сохраняется на 7-е сутки пребывания в стационаре, антитромботическая и антиэпилептическая терапия рекомендована при выписке из стационара, количество эритроцитов, количество лейкоцитов, количество тромбоцитов, тромбоцитопения, СОЭ, лейкоцитарная формула, фибриноген в общем анализе крови в остром периоде болезни, в остром периоде болезни зафиксирована патология строения сердца по результатам эхокардиографии. Рассчитывают интегративный прогностический индекс (ИПИ) по заявленной формуле. При значении ИПИ меньше нуля прогнозируют отсутствие инвалидности. При ИПИ больше нуля – прогнозируют присвоение инвалидности после окончания восстановительного периода ишемического инсульта в детском возрасте. Способ позволяет точно прогнозировать развитие инвалидности у детей с ишемическим инсультом за счет комплексной оценки наиболее значимых параметров. 1 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области медицинской диагностики. Предложен способ прогнозирования риска развития эссенциальной гипертензии у индивидуумов русской национальности, уроженцев Центрального Черноземья, включающий выделение ДНК из периферической венозной крови и анализ полиморфизмов генов. При выявлении сочетания генетических вариантов матриксных металлопротеиназ: генотипа АА rs1320632 MMР-8 и аллеля С rs11225395 MMР-8 прогнозируют высокий риск развития эссенциальной гипертензии. Изобретение позволяет на доклиническом этапе формировать среди индивидуумов группы риска и своевременно реализовывать в этих группах необходимые лечебно-профилактические мероприятия по предупреждению развития заболевания. 3 ил., 3 пр.

Изобретение относится к области медицины. Предложен способ определения кардио-генеративного потенциала клеток млекопитающих, включающий сбор измеренных уровней экспрессии в клетках млекопитающих генов Nkx2.5, Tbx5, MEF2C, GATA4, GATA6, Mesp1, FOG1 и определение коэффициента кардиального генеративного потенциала (CARPI) как среднего значения измеренных уровней экспрессии указанных генов указанных клеток. Изобретение обеспечивает хорошую прогнозируемость успеха восстановления сердца. 12 з.п. ф-лы, 1 ил., 1 табл., 3 пр.

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ диагностики вагинита у девочек в возрасте до 8 лет, заключающийся в том, что используют ПЦР в режиме реального времени с определением в образце числа геномов Lactobacillus spp. и Gardnerella vaginalis в мазке-соскобе со слизистой оболочки влагалища, рассчитывают индекс lgLG, где lgx - десятичный логарифм численного соотношения геномов микроорганизмов, L соответствует числу геномов Lactobacillus spp., a G - числу геномов Gardnerella vaginalis в образце и при значениях индекса более -0,5 диагностируют вагинит. Способ позволяет повысить информативность лабораторного обследования у девочек периода детства с нарушением биоценоза слизистой влагалища, оценить эффективность проводимой терапии. 3 пр.

Наверх