Производные тетрагидротриазолопиримидина в качестве ингибиторов нейтрофильной эластазы человека

Авторы патента:

КУЛАГОВСКИЙ Януш Джозеф (IT)

САТТОН Джонатан Марк (IT)

БЛЕНЧ Тоби Джонатан (IT)

ХИЛД Роберт Эндрю (IT)

ЭДВАРДС Кристин (IT)

КАПАЛЬДИ Кармелида (IT)

C07D487/04 - орто-конденсированные системы (карбапенамы, например тиенамицины C07D477/00)

A61P11/00 - Лекарственные средства для лечения дыхательной системы

A61K31/519 - орто- или пери-конденсированные с гетероциклическими кольцами

Владельцы патента RU 2622643:

Кьези Фармачеутичи С.п.А. (IT)

Изобретение относится к соединению формулы (I) или его фармацевтически приемлемым солям. Соединения изобретения обладают свойствами ингибиторов нейтрофильной эластазы человека (HNE). В формуле I

А представляет собой СН; R₁ выбран из водорода; (С₁-С₆)алкила; группы (С₁-С₆)алкилNR₇R₈; (С₁-С₄)алкенила; (С₁-С₆)алкилфенила, причем такое фенильное кольцо возможно замещено группой (С₁-С₆)алкилNR₁₅R₁₆ или группой (С₁-С₆)алкилN⁺R₁₅R₁₆R₁₇; группы -(CH₂)_nCONR₅R₆; группы -CH₂-(CH₂)_nNR₅SO₂R₆; группы -(СН₂)_t-(С₆Н₄)-SO₂(С₁-С₄)алкил; группы -(СН₂)_rSO₂(С₁-С₄)алкил, причем такой (С₁-С₄)алкил возможно замещен группой группой -N⁺R₁₅R₁₆R₁₇; группы -SO₂-фенил, причем такое фенильное кольцо возможно замещено группой (С₁-С₆)алкилNR₇R₈; и группы -(CH₂)n-W, где W представляет собой 6-членное гетероарильное кольцо с одним гетероатомом N, которое возможно замещено группой -SO₂(С₁-С₄)алкил; n означает 1; t означает ноль, 1; r означает 2, 3; R₅ выбран из группы, состоящей из водорода, (С₁-С₆)алкила, группы (С₁-С₆)алкилNR₁₆R₁₅ и группы (С₁-С₆)алкилN⁺R₁₇R₁₅R₁₆; R₆ представляет собой водород или (С₁-С₆)алкил; R₇ выбран из группы, состоящей из (С₁-С₆)алкила, группы карбонил(С₁-С₆)алкил, группы -SO₂(С₁-С₄)алкил и группы (С₁-С₆)алкилNR₁₆R₁₅; R₈ представляет собой (С₁-С₆)алкил; альтернативно, R₇ и R₈ могут образовывать вместе с атомом азота, к которому они присоединены, (С₅-С₇)гетероциклоалкильную кольцевую систему, которая возможно замещена оксо; R₁₆ представляет собой (С₁-С₆)алкил; R₁₅ представляет собой (С₁-С₆)алкил; R₁₇ представляет собой (С₁-С₆)алкил; R₂ представляет собой водород или -SO₂R₄, где R₄ выбран из (С₁-С₆)алкила; R₁₄ представляет собой группу циано или группу -C(O)-XR₃; X представляет собой двухвалентную группу, выбранную из -О- и -NH-; R₃ представляет собой группу, выбранную из водорода; (С₁-С₆)алкила; группы формулы -[Alk¹]-Z, где Alk¹ представляет собой (С₁-С₄)алкиленовый радикал, и Z представляет собой NR₉R₁₀, где R₉ и R₁₀ независимо представляют собой (С₁-С₆)алкил. Изобретение также относится к фармацевтической композиции и к способу лечения заболевания или состояния, в которое вовлечена HNE. Технический результат: получены новые соединения формулы (I), обладающие свойствами ингибиторов нейтрофильной эластазы человека. 3 н. и 13 з.п. ф-лы, 1 табл., 39 пр.

Область изобретения

Данное изобретение относится к гетероциклическим соединениям, которые являются производными пиримидина, обладающими свойствами ингибиторов нейтрофильной эластазы человека, и к их применению в терапии.

Предшествующий уровень техники

Нейтрофильная эластаза человека (HNE) представляет собой имеющую молекулярную массу 33 кДа серинпротеиназу, присутствующую в азурофильных гранулах нейтрофилов. Она играет роль в расщеплении самых разнообразных внеклеточных матриксых белков, включая фибронектин, ламинин, протеогликаны, коллагены типа III и типа IV, а также эластин (Bieth, G., Regulation of Matrix accumulation, Mecham, R.P. (Eds), Academic Press, NY, USA 1986, 217-306). Долго считалось, что HNE играет важную роль в гомеостазе через репарацию и удаление поврежденных тканей посредством расщепления тканевых структурных белков. Она также важна для осуществления защиты против бактериальной инвазии посредством разрушения бактериального организма. В дополнение к ее воздействиям на матриксные ткани, HNE участвует в положительной регуляции экспрессии гена IL-8, а также индуцирует высвобождение IL-8 из эпителиальных клеток легкого. В животных моделях хронического обструктивного заболевания легких, индуцированного воздействием курительного табака, как ингибиторы, имеющие молекулы небольшого размера, так и белковые ингибиторы HNE ингибирут воспалительную реакцию и развитие эмфиземы (Wright, J.L. et al. Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2002, 166, 954-960; Churg, A. et al. Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2003, 168, 199-207). Так, HNE может играть роль как в деструкции матрикса, так и в амплификации воспалительных реакций при хронических респираторных заболеваниях, при которых приток нейтрофилов является характерным признаком. Действительно, полагают, что HNE играет роль в нескольких легочных заболеваниях, включая хроническое обструктивное заболевание легких (COPD), муковисцидоз (CF), острый респираторный дистресс-синдром (ARDS), легочную эмфизему, пневмонию и фиброз легкого. Она также вовлечена в некоторые сердечно-сосудистые заболевания, в которые вовлечено ремоделирование ткани, например в сердечную недостаточность и образование ишемического повреждения ткани после острого инфаркта миокарда.

COPD является широким термином, охватывающим три разных патологических состояния, которые все вносят вклад в ограничение воздушного потока: хронический бронхит, эмфизему и заболевание малых дыхательных путей. Обычно все три будут существовать в различной степени у пациентов с COPD, и все три могут быть обусловлены нейтрофил-опосредованным воспалением, что подтверждено увеличением количества нейтрофилов, наблюдаемым в жидкостях бронхоальвеолярного лаважа (BAL) пациентов с COPD (Thompson, A.B.; Daughton, D.; et al. Am. Rev. Respir. Dis. 1989, 140, 1527-1537). Давно известно, что главной патологической детерминантой при COPD является баланс протеаза-антипротеаза (также известный как ʺгипотеза эластаза:антиэластазаʺ), при котором дисбаланс HNE и эндогенных антипротеаз, таких как α1-антитрипсин (α₁-АТ), секреторный ингибитор протеазы лейкоцитов (SLPI) и пре-элафин приводит к различным воспалительным расстройствам COPD. У индивидуумов с генетическим дефицитом ингибитора протеазы α-1-антитрипсина, развивается эмфизема, тяжесть которой увеличивается со временем (Laurrell, С.В.; Erikkson, S Scand. J. Clin. Invest. 1963 15, 132-140). Следовательно, избыток HNE является деструктивным, приводя к нарушению легочной морфологии с потерей эластичности и деструкцией альвеолярных связок дыхательных путей в легком (эмфизема) и одновременно увеличивая проницаемость микрососудов и гиперсекрецию слизи (хронический бронхит).

К настоящему времени в данной области раскрыто несколько ингибиторов нейтрофилов человека. В частности, в публикациях международных патентных заявок WO 2011/110858 и WO 2011/110859 описаны некоторые производные пиримидина, обладающие свойствами ингибиторов нейтрофильной эластазы человека и их применение в терапии.

Хотя, как указано выше, к настоящему времени уже раскрыто несколько ингибиторов HNE, все еще существует потребность в дополнительных ингибиторах HNE. В частности, все еще существует потребность в дополнительных ингибиторах HNE, обладающих высокой эффективностью в ингибировании фермента HNE. Особенно предпочтительной была бы идентификация дополнительных ингибиторов HNE, обладающих высокой эффективностью в ингибировании фермента HNE и способных демонстрировать соответствующий профиль разрабатываемости в качестве средств для ингаляционного лечения.

Настоящее изобретение направлено на удовлетворение вышеупомянутой потребности путем предоставления соединения по изобретению.

Краткое описание изобретения

Согласно данному изобретению предложены новые соединения, которые являются ингибиторами HNE и полезны в лечении заболеваний или состояний, в которые вовлечена HNE.

Подробное описание изобретения

В одном аспекте изобретения предложено соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль:

где А представляет собой СН или N;

R₁ выбран из

- водорода;

- (С₁-С₆)алкила;

- группы (C₁-C₆)алкилNR₇R₈;

- (С₁-С₄)алкенила;

- (С₁-С₆)алкилфенила, причем такое фенильное кольцо возможно замещено группой (C₁-C₆)алкилNR₁₅R₁₆ или группой (C₁-C₆) алкилN⁺R₁₅R₁₆R₁₇;

- группы -СН₂(СН₂)_nОН;

- группы -(CH₂)_nCONR₅R₆;

- группы -(CH₂)_nSO₂NR₅R₆;

- группы -CH₂-(CH₂)_nNR₅SO₂R₆;

- группы -(СН₂)_t-(С₆Н₄)-SO₂(С₁-С₄)алкил;

- группы -(СН₂)_rSO₂(С₁-С₄)алкил, причем такой (С₁-С₄)алкил возможно замещен группой -NR₁₅R₁₆ или группой -N⁺R₁₅R₁₆R₁₇;

- группы -SO₂-фенил, причем такое фенильное кольцо возможно замещено группой (С₁-C₆)алкилNR₇R₈; и

группы -(CH₂)n-W, где W представляет собой 5-6-членное гетероарильное кольцо, которое возможно замещено группой -SO₂(С₁-С₄)алкил;

n означает 1, 2 или 3;

t означает ноль, 1, 2 или 3;

r означает ноль, 1, 2, 3 или 4;

R₅ выбран из группы, состоящей из водорода, (С₁-С₆)алкила, группы (C₁-С₆)алкилNR₁₆R₁₅ и группы (C₁-C₆)aлкилN⁺R₁₇R₁₅R₁₆;

R₆ представляет собой водород или (С₁-С₆)алкил;

R₇ выбран из группы, состоящей из водорода, (С₁-С₆)алкила, группы карбонил(С₁-С₆)алкил, группы -SO₂(С₁-С₄)алкил и группы (C₁-C₆)алкилNR₁₆R₁₅;

R₈ представляет собой водород или (С₁-С₆)алкил;

альтернативно, R₇ и R₈ могут образовывать вместе с атомом азота, к которому они присоединены, (С₅-С₇)гетероциклоалкильную кольцевую систему, которая возможно замещена одной или более группами (С₁-С₆)алкил и оксо;

R₁₆ представляет собой водород или (С₁-С₆)алкил;

R₁₅ представляет собой водород или (С₁-С₆)алкил;

R₁₇ представляет собой водород или (С₁-С₆)алкил;

R₂ представляет собой водород или -SO2R4, где R4 выбран из возможно замещенного (С₁-С₆)алкила, группы (С₁-С₆-алкил)гидроксил, амино, моно- или ди(С₁-С₄)алкиламино, где (С₁-С₄)алкил возможно может быть замещенным, возможно замещенного (С₃-С₆)-циклоалкила, галогена и возможно замещенного фенила;

R₁₄ представляет собой группу циано или группу -С(O)-XR₃;

Х представляет собой двухвалентную группу, выбранную из -O-, -(CH₂)- и -NH-;

R₃ представляет собой группу, выбранную из

- водорода;

- (С₁-С₆)алкила;

группы формулы -[Alk¹]-Z, где Alk¹ представляет собой (С₁-С₄)алкиленовый радикал, и Z представляет собой:

(1) -NR₉R₁₀, где R₉ и R₁₀ независимо представляют собой водород, возможно замещенный (С₁-С₆)алкил или возможно замещенную (С₃-С₆)циклоалкильную группу; или, взятые вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют возможно замещенное моноциклическое (С₅-С₇)гетероциклическое кольцо, которое может содержать дополнительный гетероатом, выбранный из N, О и S;

или

(2) -N⁺R₁₁R₁₂R₁₃, где каждый из R₁₁, R₁₂ и R₁₃ независимо представляет собой возможно замещенный (С₁-С₆)алкил или возможно замещенную (С₃-С₆)циклоалкильную группу; или любые два из R₁₁, R₁₂ и R₁₃, взятые вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют возможно замещенное моноциклическое (С₅-С₇)гетероциклическое кольцо, которое может содержать дополнительный гетероатом, выбранный из N, О и S, а другой из R₁₁, R₁₂ и R₁₃ представляет собой возможно замещенный (С₁-С₆)алкил или возможно замещенную (С₃-С₆)циклоалкильную группу;

- радикала формулы -(CH₂)_q-[Q]-(CH₂)_pZ, где Z такой, как определено выше, q означает целое число в пределах от нуля до 3, р означает целое число в пределах от нуля до 3, и Q представляет собой двухвалентную группу, выбранную из -O-, возможно замещенного фенилена, возможно замещенного (С₅-С₇)гетероциклоалкилена, возможно замещенного (С₃-С₆)циклоалкила и возможно замещенного пиридинилена;

где если присутствует одна или более групп -(C₁-C₆)aлкилN⁺R₁₁R₁₂R₁₃ или -(C₁-C₆)aлкилN⁺R₁₅R₁₆R₁₇, то они образуют четвертичные соли с фармацевтически приемлемым противоионом;

и где группы R₅, R₆, R₇, R₈, R₁₅, R₁₆, R₁₇ и n в каждом случае могут иметь одинаковые или разные значения, если они присутствуют в более чем одной группе;

при условии, что соединение формулы (I) не является

метиловым эфиром 5-(4-цианофенил)-2-(2-диметиламиноэтил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметилфенил)-2,3,5,8-тетрагидро[1,2,4]триазоло[4,3- а]пиримидин-6-карбоновой кислоты;

2-диметиламиноэтиловым эфиром 5-(4-цианофенил)-2,7-диметил-3-оксо-8-(3-трифторметилфенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты;

{2-[5-(4-цианофенил)-2,7-диметил-3-оксо-8-(3-трифторметилфенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбонилокси]этил}-триметиламмонием;

5-(4-цианофенил)-2,7-диметил-3-оксо-8-(3-трифторметилфенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислотой;

или фармацевтически приемлемой солью указанных соединений.

В одном воплощении изобретения предложено соединение формулы (ID):

где

А представляет собой СН или N;

R₁ выбран из

- водорода;

- (С₁-С₆)алкила;

- группы (С₁-С₆)алкилNR₇R₈:

- (С₁-С₄)алкенила;

- (С₁-С₆)алкилфенила;

- ГРУППЫ -СН₂(СН₂)_nОН;

- группы -(CH₂)_nCONR₅R₆;

- группы -(CH₂)_nSO₂NR₅R₆; и

- группы -CH₂-(CH₂)_nNR₅SO₂R₆;

n означает 1, 2 или 3;

R₅ представляет собой водород или (С₁-С₆)алкил;

R₆ представляет собой водород или (С₁-С₆)алкил;

R₇ представляет собой водород или (С₁-С₆)алкил;

R₈ представляет собой водород или (С₁-С₆)алкил;

R₂ представляет собой водород или -SO₂R₄, где R₄ выбран из возможно замещенного (С₁-С₆)алкила, группы (С₁-С₆-алкил)гидроксил, амино, моно- или ди(С₁-С₄)алкиламино, где (С₁-С₄)алкил возможно может быть замещенным, возможно замещенного С₃-С₆-циклоалкила, галогена и возможно замещенного фенила;

R₁₄ представляет собой группу циано или группу -С(O)-XR₃;

Х представляет собой двухвалентную группу, выбранную из -O-, -(СН₂)- и -NH-;

R₃ представляет собой группу, выбранную из

- (С₁-С₆)алкила;

- группы формулы -[Alk¹]-Z, где Alk¹ представляет собой (С₁-С₄)алкиленовый радикал, и Z представляет собой:

или

или его фармацевтически приемлемая соль;

при условии, что соединение формулы (I) не является

метиловым эфиром 5-(4-цианофенил)-2-(2-диметиламиноэтил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметилфенил)-2,3,5,8-тетрагидро[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты;

Соединения формулы (I) могут быть получены в форме солей, в частности фармацевтически приемлемыех солей, их N-оксидов, гидратов, сольватов и полиморфов. В данном описании любая ссылка на соединение или ссылка на ʺсоединения по изобретениюʺ, ʺсоединения формулы (I)ʺ и т.п. охватывает такие соединения сами по себе или в форме соли, N-оксида, гидрата, сольвата или полиморфа.

Специалисту в данной области будет ясно, что некоторые группы, входящие в соединения формулы (I), могут существовать в одной или более таутомерных формах. Настоящее изобретение охватывает в своем объеме все такие таутомерные формы, включая смеси.

В частности, специалисту в данной области будет ясно, что соединения формулы (I), в которых R₁ представляет собой водород, могут существовать в двух таутомерных формах, указанных ниже:

Обе таутомерные формы входят в объем соединений по настоящему изобретению.

Соединения по изобретению можно применять в лечении или предупреждении заболеваний, в которые вовлечена HNE, например хронического обструктивного заболевания легких (COPD), бронхоэктазии, хронического бронхита, фиброза легкого, пневмонии, острого респираторного дистресс-синдрома (ARDS), легочной эмфиземы, эмфиземы, вызванной курением, и муковисцидоза.

Поэтому другими аспектами изобретения являются (1) фармацевтическая композиция, содержащая соединение по изобретению и фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент; и (2) применение соединения по изобретению для изготовления лекарственного средства для лечения или предупрежденияя заболевания или состояния, в которое вовлечена HNE.

Терминология

Термин ʺ(С_а-C_b)алкилʺ, где a и b означают целые числа, относится к алкильному радикалу с прямой или разветвленной цепью, имеющему от a до b атомов углерода. Так, когда а означает 1, и b означает 6, например, этот термин охватывает метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, н-пентил и н-гексил.

Термин ʺ(C_a-C_b)алкенилʺ, где a и b означают целые числа, относится к алкенильной группировке с прямой или разветвленной цепью, имеющей от a до b атомов углерода, имеющей по меньшей мере одну двойную связь либо в Е, либо в Z стереохимии, где как подходит. Так, когда а означает 2, и b означает 6, например, этот термин охватывает, например, винил, аллил, 1-й 2-бутенил и 2-метил-2-пропенил.

Выражения ʺ(Ca-Cb)aлкилNR₁₅R₁₆ʺ или ʺ(С_а-C_b)алкилNR₇R₈ʺ, где а и b такие, как определено выше, относятся к определенным выше ʺ(C_a-C_b)алкильнымʺ группам, в которых один атом водорода замещен одной группой -NR₁₅R₁₆ или -NR₇R₈ соответственно.

Выражение ʺ(С_а-C_b)алкилN⁺R₁₅R₁₆R₁₇ʺ, где a и b такие, как определено выше, относятся к определенным выше ʺ(C_a-C_b)алкильнымʺ группам, в которых один атом водорода замещен одной группой -N⁺R₁₅R₁₆R₁₇.

Выражения ʺмоно-(С_а-C_b)алкиламиноʺ или ʺди-(С_а-C_b)алкиламиноʺ, где a и b означают целые числа, относятся к аминогруппе, в которой соответственно один или оба атома водорода замещены группой (С_а-C_b)алкил.

Выражение ʺ(С_а-C_b)алкилфенилʺ относится к определенным выше ʺ(C_a-C_b)алкильнымʺ радикалам, в которых один атом водорода замещен одной фенильной группой.

Термин ʺдвухвалентный (С_а-C_b)алкиленовый радикалʺ где а и b означают целые числа, относится к насыщенной углеводородной цепи, имеющей от а до b атомов углерода, как определено выше, и две незанятые валентности.

Термин ʺ(C_a-C_b)циклоалкилʺ, где а и b означают целые числа, относится к насыщенным моноциклическим углеводородным группам, содержищим от а до b кольцевых атомов углерода. Примеры включают циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил и циклогептил.

Выражение ʺ(C_a-C_b)гетероциклоалкилʺ относится к моноциклическим (C_a-C_b)циклоалкильным группам, в которых по меньшей мере один кольцевой атом углерода заменен гетероатомом (например N, NH, S или О). Примерами (C_a-C_b)гетероциклоалкила являются пирролидинил, тиазолидинил, пиперазинил, пиперидинил, морфолинил, тиоморфолинил.

Аналогично, выражение ʺ(C_a-C_b)гетероциклоалкиленʺ относится к двухвалентному (C_a-C_b)гетероциклоалкильному радикалу (такому как, например, пирролидинен), где ʺ(C_a-C_b)гетероциклоалкильная группаʺ является такой, как определено выше.

Выражение ʺгетероарилʺ относится к моно- или бициклическим кольцевым системам с 5-11 кольцевыми атомами, в которых по меньшей мере одно кольцо является ароматическим, и в которых по меньшей мере один кольцевой атом является гетероатомом (например N, NH, S или О).

Примеры подходящих 5, 6-членных гетероарильных моноциклических систем включают, например, радикалы тиофена, бензола, пиррола, пиразола, имидазола, изоксазола, оксазола, изотиазола, тиазола, пиридина, имидазолидина, фурана и т.п.

Термин ʺ(C_a-C_b)алкоксилʺ, где a и b означают целые числа, относится прямоцепочечным и разветвленным алкоксигруппам, в которых количество составляющих атомов углерода находится в пределах от а до b. Конкретными алкильными группами являются метокси, этокси, н-пропокси, изопропокси и трет-бутокси.

Символ ʺ-С₆Н₄-ʺ означает двухвалентный фениленовый кольцевой радикал.

Выражение ʺкарбонил(C_a-C_b)алкилʺ относится к -СО(C_a-C_b)алкильным группам, где группа ʺ(C_a-C_b)алкилʺ имеет значение, определенное выше.

Выражение ʺ(C_a-C_b)алкилгидроксилʺ относится к определенным выше ʺ(C_a-C_b)алкильнымʺ радикалам, где один атом водорода замещен одной группой -ОН.

Если конкретно не указано иное, термин ʺзамещенныйʺ применительно к любой группировке здесь означает замещенный совместимыми заместителями в количестве вплоть до четырех, каждый из которых независимо может представлять собой, например, (С₁-С₆)алкил, (С₁-С₆)алкоксил, гидроксил, гидроксил-С₁-С₆-алкил, галоген (включая фтор, бром и хлор), трифторметил, трифторметокси. ʺВозможный заместительʺ может представлять собой одну из вышеупомянутых групп-заместителей.

Термин ʺсольʺ охватывает соли присоединения основания и соли присоединения кислоты.

Термин ʺфармацевтически приемлемые солиʺ относится к производным соединений формулы (I), где родительское соединение соответственно модифицировано путем превращения любой свободной кислотной или основной группы, если таковые присутствую в соответствующую соль присоединения с использованием любого основания или любой кислоты, которые признаны как фармацевтически приемлемые.

Соединения по изобретению, которые являются кислотными, могут образовывать соли, в том числе фармацевтически приемлемые соли, с основаниями, такими как гидроксиды щелочных металлов, например гидроксиды натрия и калия; гидроксиды щелочно-земельных металлов, например гидроксиды кальция, бария и магния; с органическими основаниями, например N-метил-D-глюкамином, холин-трис(гидроксиметил)амино-метаном, L-аргинином, L-лизином, N-этил-пиперидином, дибензиламином и т.п. Те соединения, которые являются основными, могут образовывать соли, в том числе фармацевтически приемлемые соли, с неорганическими кислотами, например с галогеноводородными кислотами, такими как соляная кислота или бромоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота или фосфорная кислота и т.п., и с органическими кислотами, например с уксусной, винной, янтарной, фумаровой, малеиновой, яблочной, салициловой, лимонной, метансульфоновой, пара-толуолсульфоновой, бензойной, бензолсульфоновой, глутаминовой, молочной и миндальной кислотами и т.п. Те соединения, которые имеют четвертичный атом азота, могут также образовывать четвертичные соли с фармацевтически приемлемым противоионом, таким как хлорид, бромид, ацетат, формиат, пара-толуолсульфонат, сукцинат, геми-сукцинат, нафталин-бис-сульфонат, метансульфонат, ксинафоат и т.п.

В тех случаях, когда соединения по изобретению имеют по меньшей мере один стереогенный центр, тогда они могут существовать в виде энантиомеров. Когда соединения по изобретению имеют два или более стереогенных центров, тогда они могут также существовать в виде диастереоизомеров. Следует иметь в виду, что все такие изомеры и их смеси в любом соотношении входят в объем настоящего изобретения.

Очевидно, что соединения общей формулы (I) содержат по меньшей мере один стереогенный центр, а именно центр, изображенный ниже как обозначеныый звездочкой атом углерода (1), и, следовательно, существуют в виде оптических стереоизомеров:

В одном из воплощений настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I)', которые представляют соединения формулы (I), как определено выше, где абсолютная конфигурация атома углерода (1) является такой, как показано здесь ниже:

В другом воплощении настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I)ʺ, которые представляют соединения формулы (I), как определено выше, где абсолютная конфигурация атома углерода (1) является такой, как показано здесь ниже:

Абсолютная конфигурация для атома углерода (1) установлена на основе номенклатуры Кана-Ингольда-Прелога с учетом свойств групп.

Следует иметь в виду, что все предпочтительные группы или воплощения, описанные здесь ниже для соединений формулы (I), могут быть объединены друг с другом и применены также к соединениям формул (I)', (I)ʺ, (IA), (IB), (IC) и (IE) с соответствующими поправками.

В одном из воплощений в соединения формулы (I) А представляет собой СН.

В одном из воплощений R₂ представляет собой водород или группу -SO₂R₄, где R₄ представляет собой (С₁-С₆)алкил. В предпочтительном воплощении R₂ представляет собой водород.

В одном из воплощений R₄ возможно представляет собой замещенный (С₁-С₆)алкил. В другом воплощении R₄ представляет собой (С₁-С₆)алкил.

В одном из воплощений R₁₄ представляет собой группу циано или группу -С(O)-XR₃. В предпочтительном воплощении R₁₄ представляет собой группу -С(O)-XR₃.

В одном из воплощений Х представляет собой двухвалентную группу -O- или -NH-. В другом воплощении Х представляет собой двухвалентный -O-.

В одном из воплощений Ra представляет собой группу, выбранную из

- водорода;

- (С₁-С₆)алкила; и

- радикала формулы -[Alk¹]-Z, где Alk¹ представляет собой (С₁-С₄)алкиленовый радикал, и Z представляет собой:

или

В предпочтительном воплощении R₃ представляет собой группу, выбранную из

- водорода;

- (С₁-С₆)алкила; и

радикала формулы -[Alk¹]-Z, где Alk¹ представляет собой (С₁-С₄)алкиленовый радикал, и Z представляет собой:

(1) -NR₉R₁₀, где R₉ и R₁₀ независимо представляют собой водород, (С₁-С₆)алкил или (С₃-С₆)циклоалкильную группу; или, взятые вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют моноциклическое (С₆-С₇)гетероциклическое кольцо, которое может содержать дополнительный гетероатом, выбранный из N, О и S;

или

(2) -N⁺R₁₁R₁₂R₁₃, где каждый из R₁₁, R₁₂ и R₁₃ независимо представляет собой (С₁-С₆)алкил или (С₃-С₆)циклоалкильную группу; или любые два из R₁₁, R₁₂ и R₁₃, взятые вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют моноциклическое (С₅-С₇) гетероциклическое кольцо, которое может содержать дополнительный гетероатом, выбранный из N, О и S, а другой из R₁₁, R₁₂ и R₁₃ представляет собой (С₁-С₆)алкил или (С₃-С₆)циклоалкильную группу.

В другом предпочтительном воплощении R₃ представляет собой группу, выбранную из

- водорода;

- (С₁-С₆)алкила; и

- радикала формулы -[Alk¹]-Z, где Alk¹ представляет собой (С₁-С₄)алкиленовый радикал, и Z представляют собой:

(1) -NR₉R₁₀, где R₉ и R₁₀ независимо представляют собой водород или возможно замещенный (С₁-С₆)алкил;

или

(2) -N⁺R₁₁R₁₂R₁₃, где каждый из R₁₁, R₁₂ и R₁₃ независимо представляет собой возможно замещенный (С₁-С₆)алкил.

В дополнительном предпочтительном воплощении R₃ представляет собой (С₁-С₆)алкил.

В еще одном предпочтительном воплощении R₃ представляет собой группу, выбранную из

- водорода;

- (С₁-С₆)алкила; и

- радикала формулы -[Alk¹]-Z, где Alk¹ представляет собой (С₁-С₄)алкиленовый радикал, и Z представляет собой:

(1) -NR₉R₁₀, где R₉ и R₁₀ независимо представляют собой водород или возможно замещенный (С₁-С₆)алкил;

или

(2) -N⁺R₁₁R₁₂R₁₃, где каждый из R₁₁, R₁₂ и R₁₃ независимо представляет собой возможно замещенный (С₁-С₆)алкил;

и Х представляет собой двухвалентный -O-.

В одном из воплощений в соединениях формулы (I) R₁ представляет собой водород или представляет собой группу, выбранную из (С₁-С₆)алкила, группы (С₁-С₆)алкилNR₇R₈, (С₁-С₄)алкенила, (С₁-С₆)алкилфенила и группы -(CH₂)_nCONR₅R₆.

В предпочтительном воплощении в соединениях формулы (I) R₁ представляет собой водород или представляет собой группу, выбранную из -CH₂(CH₂)_nOH, -(CH₂)_nCONR₅R₆, -(CH₂)_nSO₂NR₅R₆ и -CH₂-(CH₂)_nNR₅SO₂R₆.

В другом предпочтительном воплощении R₁ представляет собой водород или представляет собой группу -(CH₂)_nCONR₅R₆. В еще одном воплощении R₁ представляет собой водород.

В предпочтительном воплощении R₁ выбран из водорода, (С₁-С₆)алкила, группы (С₁-С₆)алкилNR₇R₈, (С₁-С₄)алкенила, (С₁-С₆)алкилфенила, причем такое фенильное кольцо возможно замещено группой (C₁-C₆)алкилNR₁₅R₁₆ или группой -(С₁-С₆)алкилN+R₁₅R₁₆R₁₇, группы -(CH₂)_nCONR₅R₆, группы -СН₂-(CH₂)_nNR₅SO₂R_6,, группы -(СН₂)_t-(С₆Н₄)-SO₂(С₁-С₄)алкил, группы (CH₂)_rSO₂(C₁-С₄)алкил, причем такой (С₁-С₄)алкил возможно замещен группой -NR₁₅R₁₆ или -N⁺R₁₅R₁₆R₁₇, группы -SO₂-фенил, причем такое фенильное кольцо возможно замещено группой -(С₁-C₆)алкилNR₇R₈, и группы -(CH₂)_nW, где W представляет собой 5-6-членное гетероарильное кольцо, которое возможно замещено группой -SO₂(С₁-С₄)алкил.

В предпочтительном воплощении R₁ выбран из водорода, (С₁-С₆)алкила, группы (С₁-С₆)алкилNR₇R₈, (С₁-С₆)алкилфенила, причем такое фенильное кольцо возможно замещено группой (C₁-C₆)алкилNR₁₅R₁₆ или группой -(C₁-C₆)aлкилN⁺R₁₅R₁₆R₁₇, группы -(CH₂)_nCONR₅R₆, группы -CH₂-(CH₂)_nNR₅SO₂R_6,, группы -(СН₂)_t-(С₆Н₄)-SO₂(С₁-С₄)алкил и группы -(СН₂)_rSO₂(С₁-С₄)алкил, причем такой (С₁-С₄)алкил возможно замещен группой -NR₁₅R₁₆ или -N⁺R₁₅R₁₆R₁₇.

В другом предпочтительном воплощении R₁ выбран из водорода, группы -(CH₂)_nCONR₅R₆, группы -CH₂-(CH₂)_nNR₅SO₂R₆ и группы -(СН₂)_rSO₂(С₁-С₄)алкил, причем такой (С₁-С₄)алкил возможно замещен группой -NR₁₅R₁₆ или -N⁺R₁₅R₁₆R₁₇.

В одном из воплощений предложено соединение формулы (IA)

где R₁₄ представляет собой -COXR₃, X представляет собой кислород, R₂ представляет собой водород, А представляет собой СН, а остальные группы такие, как определено выше.

В другом воплощении предложено соединение формулы (IB)

где R₁₄ представляет собой -COXR₃, X представляет собой NH, R₂ представляет собой водород, А представляет собой СН, а остальные группы такие, как определено выше.

В дополнительном воплощении предложено соединение формулы (IC)

где R₁₄ представляет собой -COXR₃, R₁ представляет собой водород, R₂ представляет собой водород, А представляет собой СН, а остальные группы такие, как определено выше.

В дополнительном воплощении предложено соединение формулы (IE), которое представляет собой соединение формулы (I), где R₁₄ представляет собой группу -CN, R₂ представляет собой водород, А представляет собой СН, а остальные группы такие, как определено выше.

В другом воплощении соединение по изобретению выбрано из группы, состоящей из

метилового эфира 5-(4-цианофенил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметилфенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты;

метилового эфира 2-карбамоилметил-5-(4-цианофенил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметилфенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин- 6-карбоновой кислоты;

метилового эфира 5-(4-цианофенил)-2-(2-диметиламино-пропил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметилфенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты;

метилового эфира 2-бензил-5-(4-цианофенил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметилфенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты;

метилового эфира 2-аллил-5-(4-цианофенил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметилфенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты;

метилового эфира 5-(4-цианофенил)-2,7-диметил-3-оксо-8-(3-трифторметилфенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты;

метилового эфира (R)-5-(4-цианофенил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметилфенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты;

метилового эфира 5-(4-циано-фенил)-2-{[(2-диметиламино-этил)-метил-карбамоил]-метил}-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты;

5-(4-циано-фенил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты;

2-диметиламино-этилового эфира 5-(4-циано-фенил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты;

3-диметиламино-пропилового эфира 5-(4-циано-фенил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты;

этиламида 5-(4-циано-фенил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты;

метилового эфира 5-(4-циано-2-метансульфонил-фенил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты;

5-(4-циано-фенил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбонитрила;

метилового эфира 5-(4-циано-фенил)-2-(4-метансульфонил-фенил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты;

метилового эфира 5-(4-циано-фенил)-2-(3-метансульфонил-пропил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты;

метилового эфира (R)-5-(4-циано-фенил)-2-(4-метансульфонил-бензил)-

7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты;

метилового эфира (R)-5-(4-циано-фенил)-2-(3-метансульфонил-пропил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты;

метилового эфира 5-(4-циано-фенил)-2-(4-{[(2-диметиламино-этил)-метил-амино]-метил}-бензолсульфонил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты;

метилового эфира (R)-5-(4-циано-фенил)-2-[2-(4-метансульфонил-фенил)-этил]-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты;

метилового эфира 5-(4-циано-фенил)-2-(4-диметиламинометил-бензил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты;

бромида {4-[5-(4-циано-фенил)-6-метоксикарбонил-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-5,8-дигидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-2-илметил]-бензил}-триметил-аммония;

метилового эфира 5-(4-циано-фенил)-2-(5-метансульфонил-пиридин-2-илметил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты;

метилового эфира 5-(4-циано-фенил)-7-метил-3-оксо-2-[3-(2-оксо-пирролидин-1-ил)-пропил]-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты;

метилового эфира 5-(4-циано-фенил)-2-{[(3-диметиламино-пропил)-метил-карбамоил]-метил}-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты;

бромида [2-({2-[5-(4-циано-фенил)-6-метоксикарбонил-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-5,8-дигидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-2-ил]-ацетил}-метил-амино)-этил]-триметил-аммония;

бромида [3-({2-[5-(4-циано-фенил)-6-метоксикарбонил-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-5,8-дигидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-2-ил]-ацетил}-метил-амино)пропил]-триметил-аммония;

метилового эфира 5-(4-циано-фенил)-2-{[(4-диметиламино-бутил)-метил-карбамоил]-метил}-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты;

метилового эфира 5-(4-циано-фенил)-2-{[(5-диметиламино-пентил)-метил-карбамоил]-метил}-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты;

бромида [4-({2-[5-(4-циано-фенил)-6-метоксикарбонил-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-5,8-дигидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-2-ил]-ацетил}-метил-амино)-бутил]-триметил-аммония;

бромида [5-({2-[5-(4-циано-фенил)-6-метоксикарбонил-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-5,8-дигидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-2-ил]-ацетил}-метил-амино)пентил]-триметил-аммония;

хлорида (R)-[5-({2-[5-(4-циано-фенил)-6-метоксикарбонил-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-5,8-дигидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-2-ил]-ацетил}-метил-амино)пентил]-триметил-аммония;

метилового эфира 2-[3-(ацетил-метил-амино)-пропил]-5-(4-циано-фенил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметилфенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты;

метилового эфира 5-(4-циано-фенил)-2-[3-(метансульфонил-метил-амино)-пропил]-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты;

толуол-4-сульфоната (3-{3-[5-(4-циано-фенил)-6-метоксикарбонил-7- метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-5,8-дигидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-2-ил]-пропан-1-сульфонил}-пропил)-триметиламмония;

хлорида (R)-(3-{3-[5-(4-циано-фенил)-6-метоксикарбонил-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-5,8-дигидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-2-ил]-пропан-1-сульфонил}-пропил)-триметиламмония;

толуол-4-сульфоната (3-{3-[6-циано-5-(4-циано-фенил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-5,8-дигидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-2-ил]-пропан-1-сульфонил}-пропил)-триметиламмония;

метилового эфира (Р?)-5-(4-циано-фенил)-2-{[(5-диметиламино-пентил)-метил-карбамоил]-метил}-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты;

и их фармацевтически приемлемых солей.

Терапевтическая применимость соединений по настоящему изобретению относится к любому заболеванию, которое, как известно, по меньшей мере частично опосредовано действием нейтрофильной эластазы человека. Например, соединения по настоящему изобретению могут быть полезны в лечении хронического обструктивного заболевания легких (COPD), муковисцидоза (CF), бронхоэктазии, острого респираторного дистресс-синдрома (ARDS), легочной эмфиземы, пневмонии и фиброза легкого.

Соединения по изобретению полезны для лечения воспалительных респираторных расстройств, например астмы (легкой, умеренной или тяжелой), астмы, резистентной к стероидам, бронхита, хронического обструктивного заболевания легких (COPD), муковисцидоза (CF), отека легких, легочной эмболии, пневмонии, легочного саркоидоза, легочной эмфиземы, силикоза, легочного фиброза, легочной гипертензии, респираторной недостаточности, острого респираторного дистресс-синдрома (ARDS), эмфиземы, хронического бронхита, туберкулеза, аспергиллеза и других грибковых инфекций, пневмонита с гиперчувствительностью, васкулита и тромботических заболеваний сосудистой сети легкого, кашля, включая лечение хронического кашля, ассоциированного с воспалительными и секреторными состояниями дыхательных путей, инфекции респираторным синцитиальным вирусом, гриппа, заболеваний, вызываемых коронавирусом (включая тяжелый острый респираторный синдром, SARS) и аденовирусом, бронхоэктазии и рака легкого.

Настоящее изобретение также относится к фармацевтическим композициям, содержащим в качестве активного ингредиента соединение по изобретению. Другие соединения можно комбинировать с соединениями по изобретению для предупреждения и лечения воспалительных заболеваний легкого. Таким образом, настоящее изобретение также относится к фармацевтическим композициям для предупреждения и лечения воспалительных заболеваний легкого, содержащим терапевтически эффективное количество соединения по изобретению и одного или более других терапевтических агентов.

Подходящие терапевтические агенты для комбинированной терапии с соединениями по изобретению включают: (1) кортикостероид, например будесонид, беклометазон, беклометазон (например в виде моно- или дипропионатного эфира), флунизолид, флутиказон (например в виде пропионатного или фуроатного эфира), циклесонид, мометазон (например в виде фуроатного эфира), мометазон десонид, рофлепонид, гидрокортизон, преднизон, преднизолон, метилпреднизолон, нафлокорт, дефлазакорт, галопредона ацетат, флуоцинолона ацетонид, флуоцинонид, клокортолон, типредан, предникарбат, алклометазона дипропионат, галометазон, римексолон, депродона пропионат, триамцинолон, бетаметазон, флудрокортизон, дезоксикортикостерон, рофлепонид, этипреднола диклоацетат и т.п. Стероидные лекарственные средства могут дополнительно включать стероиды, находящиеся в клинической и доклинической разработке для респираторных заболеваний, такие как GW-685698, GW-799943, GSK870086, QAE397, NCX-1010, NCX-1020, NO-дексаметазон, PL-2146, NS-126 (прежде ST-126). Стероидные лекарственные средства могут дополнительно также включать молекулы следующего поколения, находящиеся в разработке, со сниженными профилями побочных эффектов, такие как селективные агонисты глюкокортикоидных рецепторов (SEGRA), включая ZK-216348 и AZD5423; (2) агонист β₂-адреноцецептора, такой как альбутерол, бамбутерол, тербуталин, фенотерол, формотерол, формотерола фумарат, сальметерол, сальметерола ксинафоат, арформотерол, арформотерола тартрат, индакатерол (QAB-149), кармотерол, BI 1744 CL, GSK159797 (милветерол), GSK59790, GSK159802, GSK642444 (вилантерол), GSK678007, GSK96108, кленбутерол, прокатерол, битолтерол, LAS100977 (абедитерол), BI1744CL (олодатерол) и бродксатерол; (3) модулятор лейкотриенов, например монтелукаст, зафирлукаст или пранлукаст; (4) антихолинергические агенты, например селективные антагонисты мускаринового-3 (МЗ) рецептора, такие как ипратропия бромид, тиотропий, тиотропия бромид (Spiriva®), гликопиррония бромид, аклидиния бромид, LAS34273, GSK656398, GSK233705, GSK573719 (умеклидиний), LAS35201, QAT370 и окситропия бромид; (5) ингибиторы фосфодиэстеразы-IV (PDE-IV), например рофлумиласт, циломиласт или теофиллин; (6) противокашлевый агент, такой как кодеин или декстраморфан; и (7) нестероидное противовоспалительное лекарственное средство (NSAID), например ибупрфен или кетопрфен; (8) муколитик, например N-ацетил-цистеин или фудостеин; (9) отхаркивающее средство/мукокинетический модулятор, например амброксол, гипертонические растворы (например физиологический раствор или маннит) или поверхностно-активное вещество; (10) пептидный муколитик, например рекомбинантная человеческая дезоксирибонуклеаза I (дорназа-альфа и рчДНКаза) или гелицидин; (11) антибиотики, например азитромицин, тобрамицин и азтреонам; и (12) ингибиторы р38 митоген-активируемой протеинкиназы (МАР-киназы), такие как GSK 856553 и GSK 681323; (12) ингибиторы Янус-киназ (JAK), такие как СР-690550 или GLPG0634;

(13) ингибиторы селезеночной тирозинкиназы (SYK), такие как R406, R343 или PRT062607; (14) ингибиторы дельта и/или гамма изоформы фосфатидилинозит-3-киназы (PI3K); (15) анти-ретровирусные агенты, такие как рибавирин, занамивир или ланинамивир.

В одном аспекте изобретения предложено применение ингалируемого введения соединения по изобретению в комбинации с другими противовоспалительными лекарственными средствами и комбинациями бронхорасширяющих лекарственных средств (т.е. тройной комбинированный продукт), включая, без ограничения, сальметерола ксинафоат/флутиказона пропионат (Advair/Seretide®), формотерола фумарат/будесонид (Symbicort®), формотерола фумарат/мометазона фуроат, формотерола фумарат/беклометазона дипропионат (Foster®), формотерола фумарат/флутиказона пропионат (FlutiForm®), индакатерол/мометазона фуроат, индакатерол/ОАЕ-397, GSK159797/GSK 685698, GSK159802/GSK 685698, GSK642444/GSK 685698, формотерола фумарат/циклесонид, арформотерола тартрат/циклесонид.

В другом аспекте изобретения предложено применение ингалируемого введения соединения по изобретению в комбинации с другими комбинациями бронхорасширяющих лекарственных средств, в частности комбинациями агонист В2/антагонист М3 (т.е. тройной комбинированный продукт), включая, без ограничения, сальметерола ксинафоат/тиотропия бромид, формотерола фумарат/тиотропия бромид, BI 1744 CL/тиотропия бромид, индакатерол/NVA237, индактерол/QAT-370, формотерол/LAS34273, GSK159797/GSK 573719, GSK159802/GSK 573719, GSK642444/GSK 573719, GSK159797/GSK 233705, GSK159802/GSK 233705, GSK642444/GSK 233705.

Массовое соотношение первого и второго активных ингредиентов может варьировать и будет зависеть от эффективной дозы каждого ингредиента. Как правило, будут использовать эффективную дозу каждого.

Разумеется, величина профилактической или терапевтической дозы соединения по изобретению будет варьировать в зависимости от характера и тяжести состояния, которое лечат, и от конкретного соединения и пути его введения, и ее обычно будут определять в клинических испытаниях согласно требованиям, принятым в фармацевтической области. Она также будет варьировать в зависимости от возраста, массы тела и ответной реакции индивидуального пациента. Обычно суточная доза будет находиться в диапазоне от примерно 0,001 мг до примерно 100 мг на KT массы тела млекопитающего, предпочтительно от 0,01 мг до примерно 50 мг на KT и наиболее предпочтительно от 0,1 до 10 мг на КТ, в однократной дозе или разделенных дозах. С другой стороны, в некоторых случаях может возникнуть необходимость использовать дозировки за пределами этих границ.

В другом аспекте настоящего изобретения предложены фармацевтические композиции, которые содержат соединение по изобретению и фармацевтически приемлемый носитель. Термин ʺкомпозицияʺ, как, например, в фармацевтической композиции, охватывает продукт, содержащий активный(ые) ингредиент(ы) и инертный(ые) ингредиент(ы) (фармацевтически приемлемые эксципиенты), составляющие носитель, а также любой продукт, который является результатом, прямо или опосредованно, комбинирования, комплексообразования или агрегации любых двух или более ингредиентов, или диссоциации одного или более ингредиентов, или других типов реакций или взаимодействий одного или более ингредиентов. Соответственно, фармацевтические композиции по изобретению охватывают любую композицию, приготовленную путем смешивания соединения по изобретению, дополнительного(ых) активного(ых) ингредиента(ов) и фармацевтически приемлемых эксципиентов.

Фармацевтические композиции по изобретению содержат соединение по изобретению в качестве активного ингредиента или его фармацевтически приемлемую соль, а также может содержать фармацевтически приемлемый носитель и возможно другие терапевтические ингредиенты. Термин ʺфармацевтически приемлемые солиʺ относится к солям, полученным из фармацевтически приемлемых нетоксичных оснований или кислот, включая неорганические основания или кислоты и органические основания или кислоты.

Любой подходящий путь введения можно использовать для доставки млекопитающему, в частности человеку, эффективной дозировки соединения по настоящему изобретению. При терапевтическом применении активное соединение можно вводить любым удобным, подходящим или эффективным путем. Подходящие пути введения известны и включают пероральный, внутривенный, ректальный, парентеральный, местный, глазной, назальный, трансбуккальный и легочный (ингаляцией).

Композиции, подходящие для введения ингаляцией, известны и могут содержать носители и/или разбавители, которые известны для использования в таких композициях. Композиция может содержать 0,01-99% (масс.) активного соединения. Предпочтительно, стандартная доза содержит активное соединение в количестве от 1 мкг до 10 мг.

Наиболее подходящий уровень дозировки может быть определен любым известным подходящим методом. Понятно, однако, что конкретное количество для любого конкретного пациента будет зависеть от множества различных факторов, включая активность конкретного соединения, которое используют, возраста, массы тела, диеты, общего состояния здоровья и пола пациента, времени введения, пути введения, скорости экскреции, применения любых других лекарственных средств и тяжести заболевания, которое лечат.

Для доставки ингаляцией активное соединение находится предпочтительно в форме микрочастиц. Они могут быть получены различными способами, включая распылительную сушку, сублимационную сушку и микронизацию.

В качестве примера, композиция по изобретению может быть приготовлена в виде суспензии для доставки из небулайзера или в виде аэрозоля в жидком пропелленте, например для использования в компрессорном ингаляторе отмеренной дозы (PMDI). Пропелленты, подходящие для использования в PMDI, известны специалисту и включают CFC-12, HFA-134a, HFA-227, HCFC-22 (CCI2F2) и HFA-152 (CH4F2 и изобутан).

В предпочтительном воплощении изобретения композиция по изобретению находится в форме сухого порошка для доставки с использованием ингалятора сухого порошка (DPI). Известны многие типы DPI.

Микрочастицы для доставки посредством введения могут быть приготовлены с эксципиентами, которые способствуют доставке и высвобождению. Например, в сухой порошковой композиции микрочастицы могут быть приготовлены с частицами носителя большого размера, которые способствуют истечению из DPI в легкое. Частицы подходящих носителей известны и включают частицы лактозы; они могут иметь масс-медианный аэродинамический диаметр более 90 мкм.

В случае аэрозольной композиции предпочтительной композицией является:

Соединение по изобретению	24 м г/баллончик
Лецитин, NF, Жидк. Конц.	1,2 мг/баллончик
Трихлорфторметан, NF	4,025 г/баллончик
Дихлордифторметан, NF	12,15 г/баллончик.

Соединения по изобретению можно использовать в комбинации с другими лекарственными средствами, которые применяют в лечении/предупреждении/подавлении или ослаблении заболеваний или состояний, при которых полезны соединения по настоящему изобретению. Такие другие лекарственные средства можно вводить таким путем и в таком количестве, которые обычно используют, одновременно или последовательно с соединением по изобретению. Когда соединение по изобретению используют одновременно с одним или более другими лекарственными средствами, тогда предпочтительной является фармацевтическая композиция, содержащая такие другие лекарственные средства в дополнение к соединению по изобретению.

Соответственно, фармацевтические композиции по изобретению включают композиции, которые также содержат один или более других активных ингредиентов в дополнение к соединению по изобретению.

Агенты по изобретению можно вводить в ингалируемой форме. Создание аэрозоля может быть осуществлено с использованием, например, струйных распылителей, работающих под давлением, или ультрозвуковых распылителей, предпочтительно с использованием дозирующих аэрозолей, создаваемых пропеллентами, или безпропеллентным введением микронизированного активного соединения, например из ингаляционных капсул или других систем доставки сухого порошка.

Активные соединения можно дозировать, как описано, в зависимости от используемой системы ингалятора. В дополнение к активному соединению лекарственные формы могут дополнительно содержать эксципиенты, такие как, например, пропелленты (например Frigen в случае дозируемых аэрозолей), поверхностно-активные вещества, эмульгаторы, стабилизаторы, консерванты, корригенты, наполнители (например лактозу в случае порошковых ингаляторов) или, если это подходит, дополнительные активные соединения.

В целях ингаляции доступно большое количество систем, с помощью которых можно создавать и вводить аэрозоли частиц оптимального размера, используя ингаляционный метод, который подходит для пациента. Помимо использования адаптеров (спейсеров, экспандеров) и грушевидных контейнеров (например Nebulator®, Volumatic®), и автоматических устройств, испускающих порцию спрея (Autohaler®), для дозированных аэрозолей, в частности в случае порошковых ингаляторов, доступен целый ряд технических решений (например Diskhaler®, Rotadisk®, Turbohaler® или ингаляторы, описанные, например, в ЕР-А-0505321).

Способы синтеза

В одном аспекте изобретения предложен способ получения соединений по изобретению формулы (Ia), т.е. соединений формулы (I), где R₁ представляет собой водород, и R₁₄ представляет собой -COXR₃, и соединений по изобретению формулы (Ib), т.е. соединений формулы (I), где R₁ не является водородом, и R₁₄ представляет собой -COXR₃, согласно общим путям синтеза, представленным на Схеме А здесь ниже.

Соединения формулы (IV) могут быть получены из соединений формулы (III) в результате взаимодействия с этилхлорформиатом в присутствии основания, такого как триэтиламин, в растворителе, таком как THF, при температуре от 0°C до температуры дефлегмации. Соединения формулы (IV) могут быть превращены в соединения формулы (Ia) путем нагревания в подходящем растворителе. Подходящие условия включают использование растворителя, такого как IMS, и нагревание под действием микроволнового излучения при температуре до 150°С. Соединения формулы (Ia), которые являются соединениями формулы (I), где R₁₄ представляет собой С(O)XR₃, и R₁ представляет собой Н, могут быть превращены в соединения формулы (Ib), которые являются соединениями формулы (I), где R₁₄ представляет собой C(0)XRs, в результате взаимодействия с алкилгалогенидом (VI) формулы R₁-X', таким как алкилбромид, в растворителе, таком как DMF, в присутствии основания, такого как карбонат цезия, при температуре от комнатной температуры до 100°С.

Соединения формулы (III), где R₃ представляет собой (С₁-С₆)алкил, могут быть получены согласно Схеме В, приведенной ниже.

Соединения формулы (VIII) могут быть подвергнуты взаимодействию с бензальдегидом, таким как 4-цианобензальдегид, и ацетоацетатом, таким как этилацетоацетат, в присутствии кислоты, такой как TMS-полифосфат, в растворителе, таком как THF, при температуре от комнатной температуры до температуры дефлегмации с получением соединений формулы (VII), где R₃ представляет собой (С₁-С₆)алкил, а остальные группы такие, как определено для соединений формулы (I). Соединения формулы (III) могут быть получены из соединений формулы (VII) в результате взаимодействия с окислителем, таким как гидропероксид мочевины, с последующей обработкой in situ гидразингидратом в IMS.

С целью подбора путей синтеза для получения дополнительных соединений по изобретению специалист может произвести, если это целесообразно, подходящие изменения условий, конкретно описанных в экспериментах. Такие изменения могут включать, без ограничения, использование соответствующих исходных веществ для получения других соединений, замену растворителя и изменение температур реакций, замену реагентов аналогичными химическими веществами, введение или исключение стадий защиты/снятия защиты функциональных групп, чувствительных к реакционным условиям и реагентам, а также включение или исключение конкретных стадий синтеза, направленных на дополнительную функционализацию химической структуры.

Соединения, используемые в качестве исходных веществ или промежуточных соединений, могут быть коммерчески доступными, их получение может быть конкретно описано в литературе, или они могут быть получены известными способами.

Описанный способ является особенно предпочтительным, так как он поддается должному модулированию посредством любого известного варианта, подходящего для получения любого из целевых соединений. Такие варианты входят в объем настоящего изобретения.

Исходя из всего описанного выше, специалисту должно быть ясно, что любые описанные группы могут присутствовать как таковые или в любой надлежащим образом защищенной форме.

В частности, необходимо, чтобы функциональные группы, которые присутствуют в Промежуточных соединениях и соединениях Примеров и которые могут вызывать нежелательную побочную реакцию и вызывать образование побочных продуктов, были надлежащим образом защищены перед проведением стадий алкилирования, ацилирования, сочетания или сульфонилирования. Аналогично, последующее снятие защиты с этих защищенных групп может быть осуществлено после окончания указанных реакций.

В настоящем изобретении термин ʺзащитная группаʺ, если не указано иное, означает защитную группу, которая сохраняет функцию группы, с которой она связана. Обычно защитные группы используют для защиты амино, гидроксильных или карбоксильных функциональных групп. Соответствующие защитные группы могут включать, например, бензил, бензилоксикарбонил, трет-бутоксикарбонил, алкил или бензилэфирные группы или т.п., которые общеизвестны [смотри T.W. Green; Protecting groups in Organic Synthesis (Wiley, N.Y. 1981)].

Аналогично, селективная защита и снятие защиты любых указанных групп, включая, например, карбонильные, гидроксильные или аминогруппы, может быть осуществлена общеизвестными способами.

Возможное образование солей соединений формулы (I) может быть осуществлено путем соответствующего превращения любых свободных кислотных или аминогрупп в соответствующие фармацевтически приемлемые соли. И в этом случае используемые рабочие условия для возможного образования солей соединений по изобретению находятся в пределах компетенции специалиста.

Диастереоизомеры соединений формулы (I), если они имеются, могут быть получены способами, известными в данной области, такими как, например, препаративная ВЭЖХ или хроматографическая очистка. Рацемическая смесь соединения формулы (1) может быть разделена также с использованием препаративной ВЭЖХ и колонки с хиральной стационарной фазой или может быть разделена с получением индивидуальных энантиомеров с использованием методов, известных в данной области. Кроме того, хиральные промежуточные соединения могут быть разделены и использованы для получения хиральных соединений по изобретению.

Исходя из всего описанного выше, специалисту должно быть ясно, что вышеописанный способ получения подходящих соединений по изобретению, включая любой его вариант, может быть для удобства модифицирован с целью подбора реакционных условий для конкретных нужд, например путем выбора подходящих агентов конденсации, растворителей и защитных групп, в зависимости от обстоятельств.

Кроме того, соединения формулы (Id), т.е. соединения формулы (I), где R₁₄ представляет собой группу -COXR₃, R₁ и R₂ представляют собой водород, и А представляет собой СН, могут быть получены согласно Схеме D, приведенной здесь ниже.

Соединения формулы (XII) могут быть получены из соединений формулы (VIII), используя способы, описанные для синтеза соединений формулы (1а) на Схеме А и Схеме В. Соединения формулы (XI) могут быть получены из соединений формулы (XII) в результате отщепления бензилэфирной группы, используя подходящий способ, такой как восстановление в присутствии катализатора, такого как палладий на углероде, в растворителе, таком как IMS, в атмосфере водорода. Соединения формулы (Id) могут быть получены из соединений формулы (XI) в результате реакции со спиртом или амином XHR₃, например с аммиаком или 2-метокси-этанолом, в присутствии агента сочетания, такого как HATU, в растворителе, таком как DMF, в присутствии основания, такого как триэтиламин, при температуре от комнатной температуры до 80°С.

Путь синтеза, показанный на Схеме С, может быть полезным для введения XR₃ заместителей на последней стадии.

Альтернативно, кислотное промежуточное соединение (XI) может быть получено из соединений формулы (Ic), которые представляют собой соединения формулы (I), где Х представляет собой кислород, R₃ представляет собой метил, A, R₂ и R₁ представляют собой водород, согласно Схеме D, приведенной ниже.

В результате обработки соединения формулы (Ic), где XR₃ представляет собой ОМе, сильной кислотой Льюиса, такой как трибромид бора, в растворителе, таком как DCM, при температуре от -78°С до комнатной температуры с последующим гашением водой или метанолом можно получить соединения формулы (XI).

Специалисту должно быть ясно, что могут быть предусмотрены другие подходящие стратегии использования защитных групп, и что кислота формулы (XI) представляет собой универсальное промежуточное соединение для дополнительной функционализации, также как и соединения формулы (Id).

В качестве примера, согласно Схеме С1 путем соответствующей дериватизации соединения формулы (XI), которое определено выше, с превращением в соединение формулы (XVII), где R₁ не является водородом, могут быть получены соответствующие соединения формулы (Ih), где R₁ не является водородом.

Соединения формулы (XVII) могут быть получены из соединения формулы (XI), используя способы, описанные для превращения соединений формулы (Ia) в соединения формулы (1b) на Схеме Е. Соединения формулы (Ih) могут быть получены из соединений формулы (XVII), используя способы, описанные для превращения соединений формулы (XI) в соединения формулы (Id) на Схеме С.

Соединения формулы (Ib), которые определены выше, могут быть получены из соединений формулы (Ia), которые определены выше, альтернативными способами, описанными на Схеме Е, приведенной ниже.

Соединения формулы (Ia) могут быть превращены в соединения формулы (Ib), где R₁ представляет собой метилен-связанную боковую цепь, в результате реакции с алкилгалогенидом R₁-X' в присутствии основания, такого как карбонат цезия, в растворителе, таком как DMF, при температуре от комнатной температуры до 80°С.

Альтернативно, это превращение может быть осуществлено в результате реакции Мицунобу (Mitsunobu) со спиртом R₁OH. Типичными испоьзуемыми реагентами являются трифенилфосфин и DIAD в растворителе, таком как THF.

Если R₁= арил или гетероарил, то подобное превравращение может быть осуществлено в результате реакции сочетания Чен-Лама (Chen-Lam). Типичные реакционные условия заключаются в использовании производного бороновой кислоты, медного катализатора, такого как ацетат меди, основания, такого как триэтиламин, и растворителя, такого как пиридин, при температуре от комнатной температуры до температуры дефлегмации.

Соединения формулы (Ie), т.е. соединения формулы (I) где R₁₄ представляет собой группу COXR₃, и R₂ представляет собой группу -SO₂Me, могут быть получены из соединений формулы (XVIII) согласно Схеме F, приведенной ниже.

Превращение может быть осуществлено в результате реакции арилбромида с метансульфинатом натрия в присутствии катализатора, такого как трифлат меди, лиганда, такого как транс-циклогександиамин, в растворителе, таком как DMSO, при температуре до 150°С.

Соединения формулы (If) или (Ig), т.е. соединения формулы (I), которые имеют группу (C₁-C₄)алкиленNR_9/7R_10/8 или группу (C₁-C₄)aлкилeнN⁺R_11/15R_12/16R_13/17 соответственно в качестве заместителя, могут быть получены согласно Схеме G.

Соединения формулы (Ig) могут быть получены напрямую в результате реакции алкилирования соответствующего третичного амина R_11/15R_12/16R_13/17N, такого как триметиламин или диметилпиперазин, с соединениями формулы (XIX), где X' представляет собой подходящую уходящую группу (X'=Cl, Br, I, тозилат и т.д.), а группа -CH₂R представляет собой часть соединения формулы (Ig), которая остается незамещенной группой (C₁-C₄)aлкилeнN⁺R_11/15R_12/16R_13/17.

Типичные условия могут включать нагревание третичного амина в растворителе, таком как этанол или THF, при повышенной температуре от 60°С до 150°С под действием микроволнового излучения.

Альтернативно, превращение соединений формулы (XIX) в соединения формулы (Ig) может быть осуществлено через третичный амин (If), где R_9/7 и R_10/8 ≠ Н. Третичные аминосоединения формулы (Ig) могут быть получены из соединений формулы (XIX) в результате реакции с вторичным амином R_9/7R_10/8NH. Типичные реакционные условия включают использование основания, такого как карбонат цезия или карбонат калия, в растворителе, таком как DMF, при KT (комнатная температура). Превращение соединений формулы (If), где R_9/7 и R_10/8 ≠ Н, в соединения формулы (Ig) может быть осуществлено с использованием метилирующих агентов, таких как метилбромид, метилйодид или метилбензолсульфонат. Типичные реакционные условия заключаются в использовании растворителя, такого как MeCN или ацетон, при температуре от KT до 60°С при конвекционном или микроволновом нагревании.

Кроме того, первичные и вторичные аминосоединения формулы (If) могут быть также получены из соединений формулы (XIX) в результате реакции с аммиаком или подходящим первичным амином R_9/7NH₂ соответственно с образованием первичного амина или вторичного амина.

Соединения формулы (Ij), т.е. соединения формулы (I), где R₁₄ представляет собой группу -CN, могут быть получены согласно Схеме Н из соединений формулы (Ih), которые представляют собой соединения формулы (I), где XR₃ представляет собой NH₂, в результате реакции с дегидратирующим агентом, таким как реагент Бургесса (Burgess), в растворителе, таком как THF, при температуре от комнатной температуры до температуры дефлегмации.

Общие подробности экспериментов

Если конкретно не указано иное, реакции не проводи в инертной атмосфере. Если продукты очищали с использованием картриджа Isolute® SPE Si II, то ʺкартридж Isolute SPE Si IIʺ относится к предварительно упакованной полипропиленовой колонке, содержащей несвязанный активированный диоксид кремния, частицы которого имеют неправильную форму, средний размер 50 мкм и номинальную пористость 60А. Если использовали картридж Isolute® Sex-2, то ʺкартридж Isolute® SCX-2ʺ относится к предварительно упакованной полипропиленовой колонке, содержащей сильный катионообменный сорбент из диоксида кремния, функционализированного пропилсульфоновой кислотой без концевой группы. ʺКартридж Isolute® PE-AXʺ относится к предварительно упакованной полипропиленовой колонке, содержащей сорбент из диоксида кремния с химически связанной четвертичной аммониевой функциональной группой. Все растворители и коммерческие реагенты использовали в том виде, в котором они были приобретены.

¹H ЯМР спектры регистрировали при температуре окружающей среды на спектрометре Varian Unity Inova (400 МГц) с датчиком тройного резонанса 5 мм. Химические сдвиги выражали в м.д. (миллионные доли) относительно тетраметилсилана. Использованы следующие сокращения: br=широкий сигнал, s=синглет, d=дублет, dd=двойной дублет, t=триплет, td=триплет дублетов, q=квартет, m=мультиплет.

Эксперименты в условиях микроволнового излучения проводили с использованием реактора Biotage Initiator 60™ с одномодовым резонатором и настройкой динамического поля. Позволяет достигать температуру 40-250°С и давление вплоть до 30 бар (3000 кПа).

Названия соединений были присвоены с использованием функции Autonom 2000 в программном продукте MDL ISIS™/Draw 2.5 SP2.

Условия препаративной ВЭЖХ

Система ВЭЖХ 1

Колонка С18 с обращенной фазой с концевой группой (колонка Gemini 250×21,2 мм, размер частиц 5 мкм), элюирование с градиентом А: вода; В: ацетонитрил (с добавлением 0,1% муравьиной кислоты) со скоростью потока обычно 18 мл/мин и градиентом повышения содержания В 1%/мин. УФ-детектирование при 254 нм.

Система ВЭЖХ 2

Колонка С18 с обращенной фазой с концевой группой (колонка Gemini 250×21,2 мм, размер частиц 5 мкм), элюирование с градиентом А: вода; В: метанол (с добавлением 0,1% муравьиной кислоты) со скоростью потока обычно 13 мл/мин и градиентом повышения содержания В 1%/мин. УФ-детектирование при 254 нм.

Условия аналитической ЖХ-МС

Метод ЖХ-МС 1

Waters Platform LC с колонкой С18 с обращенной фазой (Phenomenex Luna 30×4,6 мм, размер частиц 3 мкм), элюирование А: вода +0,1% муравьиной кислоты; В: ацетонитрил +0,1% муравьиной кислоты. Градиент:

Детектирование - МС (масс-спектрометр), ЭС (электронный спектрометр), УФ (ультрафиолетовый детектор)

Метод ионизации МС - электрораспыление (регистрация положительных и отрицательных ионов)

Метод ЖХ-МС 2

Waters Micromass ZMD с колонкой С18 с обращенной фазой (Phenomenex Luna 30×4,6 мм, размер частиц 3 мкм), элюирование А: вода +0,1% муравьиной кислоты; В: ацетонитрил +0,1% муравьиной кислоты. Градиент:

Детектирование - МС, ЭС, УФ (МС с встроенным УФ-детектором с разделением потока 100 мл)

Метод ионизации МС - электрораспыление (регистрация положительных и отрицательных ионов)

Метод ЖХ-МС 3

Waters Micromass ZQ2000 с колонкой С18 с обращенной фазой (Acquity ВЕН 100×2,1 мм, размер частиц 1,7 мкм), поддерживаемой при 40°С, элюирование А: вода +0,1% муравьиной кислоты; В: ацетонитрил +0,1% муравьиной кислоты. Градиент:

Детектирование - МС, УФ ДФМ (детектор на фотодиодной матрице)

Метод ионизации МС - электрораспыление (регистрация положительных и отрицательных ионов)

Метод ЖХ-МС 4

НР1100 с колонкой С18 с обращенной фазой (Phenomenex Luna 30×4,6 мм, размер частиц 3 мкм), элюирование А: вода +0,1% муравьиной кислоты; В: ацетонитрил +0,1% муравьиной кислоты. Градиент:

Детектирование - МС, ЭС, УФ (МС с встроенным УФ-детектором с разделением потока 200 мл)

Метод ионизации МС - электрораспыление (регистрация положительных и отрицательных ионов)

Система МНАО (масс-направленная автоматизированная очистка): Аппаратура: Agilent 1260 система очисток с настройкой на бесконечность.

Agilent 6100 серия одноквадрупольная ЖХ/МС

Колонка: XSEELECT CSH Prep C18, 5 мкм OBD, 30Х150 мм, КГ

Подвижная фаза А:	0,1% водная муравьиная кислота
Подвижная фаза В:	0,1% муравьиной кислоты в ацетонитриле
Скорость потока:	60 мл/мин

Программа градиента: 10%-95%, 22 мин, сосредоточена около конкретного целенаправленного градиента

Впрыскивание образца 20-60 мг/мл раствора в DMSO (+возможно муравьиная кислота и вода).

Сокращения, использованные в экспериментальном разделе:

BBr₃ трибромид бора

CH₃CN ацетонитрил

DCM дихлорметан

DIAD ди-изопропилазодикарбоксилат

DIPEA ди-изопропилэтиламин

DMF N,N-диметилформамид

DMSO диметилсульфоксид

Et₃N триэтиламин

EtOAC этилацетат

HATU гексафторфосфат O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилурония

HCl соляная кислота

IMS денатурат

ЖХ-МС жидкостная хроматография-масс-спектрометрия

mCPBA 3-хлорпербензойная кислота

МНАО масс-направленная автоматизированная очистка методом ВЭЖХ

МеОН метанол

минут минуты

мл миллилитры

ммоль миллимоль

N₂ азот

Na₂SO₄ сульфат натрия

Na₂S₂O₃ тиосульфат натрия

KT комнатная температура

Rt время удерживания

TBAF тетрабутиламмонийфторид

THF тетрагидрофуран

В методиках, которые приведены ниже, некоторые исходные вещества идентифицированы посредством номера ʺПромежуточного соединенияʺ или ʺПримераʺ. Это сделано только в помощь специалисту-химику. Исходное вещество не обязательно было получено из партии, на которую дана ссылка.

При упоминании использования ʺсходнойʺ или ʺаналогичнойʺ методики, что будет очевидно специалистам в данной области, такая методика может включать в себя незначительные изменения, например реакционной температуры, количества реагента/растворителя, времени реакции, условий переработки или условий хроматографической очистки.

Промежуточное соединение 1

Метиловый эфир 4-(4-цианофенил)-6-метил-2-тиоксо-1-(3-трифторметилфенил)-1,2,3,4-тетрагидро-пиримидин-5-карбоновой кислоты

В раствор 3-трифторметилфенилтиомочевины (2,2 г, 10 ммоль) 4-цианобензальдегида (1,4 г, 11 ммоль) и метилацетоацетата (1,2 мл, 11 ммоль) в THF (40 мл) добавляли триметилсилилфосфат (1,8 г), и эту смесь нагревали при 70°С. Через 17 часов реакционную смесь оставляли охлаждаться, затем выливали на 0,5 М HCl (200 мл) и экстрагировали в EtOAc. Органическую фазу промывали водой, затем рассолом, сушили (Na₂SO₄) и концентрировали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом 20-30% EtOAc в циклогексане. Соответствующие фракции объединяли и концентрировали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде белой пены (3,7 г).

ЖХ-МС (Метод 1): Rt=3,88 мин, m/z=432 [M+H]⁺

Промежуточное соединение 2

Метиловый эфир 4-(4-цианофенил)-2-гидразино-6-метил-1-(3-трифторметил-фенил)-1,4-дигидро-пиримидин-5-карбоновой кислоты

В раствор Промежуточного соединения 1 (2 г, 4,6 ммоль) в IMS (100 мл) добавляли гидропероксид мочевины (865 мг, 9,2 ммоль), и эту смесь перемешивали в течение 5 часов при КТ, затем добавляли гидразингидрат (891 мл, 18,4 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение еще 16 часов при KT, и затем растворитель выпаривали до небольшого объема в вакууме. Полученный в результате остаток распределяли между EtOAc и насыщенным водным раствором Na₂S₂O₃. Органический слой отделяли, промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя 80% EtOAc в циклогексане. Соответствующие фракции объединяли и концентрировали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого масла (729 мг).

ЖХ-МС (Метод 2): Rt=2,38 мин, m/z=430 [M+H]⁺

Промежуточное соединение 3

Метиловый эфир 4-(4-цианофенил)-2-(N'-метоксикарбонил-гидразино)-6-метил-1-(3-трифторметилфенил)-1,4-дигидро-пиримидин-5-карбоновой кислоты

Промежуточное соединение 2 (724 мг, 1,7 ммоль) растворяли в THF (20 мл) и охлаждали до 0°С, затем добавляли триэтиламин (362 мл, 2,6 ммоль) и этилхлорформиат (191 мл, 2 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 часа и затем распределяли между EtOAc и водой. Органический слой отделяли, промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме. Полученный в результате остаток растирали с EtOAc, фильтровали, и твердое вещество собирали с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (49 мг).

ЖХ-МС (Метод 2): Rt=2,47 мин, m/z=502 [M+H]⁺

Промежуточное соединение 4

Метиловый эфир 4-(4-цианофенил)-2-метокси-6-метил-1,4-дигидропиримидин-5-карбоновой кислоты

Раствор 4-цианобензальдегида (13,1 г, 100 ммоль) в DMF (200 мл) добавляли бикарбонат натрия (33,4 г, 400 ммоль), затем добавляли гемисульфат 0-метилизомочевины (14,8 г, 120 ммоль) и метилацетоацетат (12,8 г, 110 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 70°С в течение 5 часов, затем вливали в воду, и продукт экстрагировали в EtOAc. Органическую фазу промывали водой (×2), затем рассолом, затем сушили (Na₂SO₄) и упаривали досуха. Полученную желтую смолу очищали хроматографией на силикагеле, элюируя диэтиловым эфиром с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества (12,8 г).

ЖХ-МС (Метод 1): Rt=2,20 мин, m/z=286 [M+H]⁺

Промежуточное соединение 5

1-(4-Нитрофенил)овый эфир 5-метилового эфира 6-(4-цианофенил)-2-метокси-4-метил-6Н-пиримидин-1,5-дикарбоновой кислоты

Промежуточное соединение 4 (1,56 г, 5,46 ммоль) растворяли в смеси DCM (25 мл) и пиридина (10 мл) и охлаждали на ледяной бане. Добавляли раствор 4-нитрофенилхлорформиата (705 мг, 3,50 ммоль) в DCM (25 мл) за период времени 30 минут. Реакционную смесь перемешивали в течение 1 часа при 0°С, и затем растворитель удаляли в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом 0-20% EtOAc в циклогексане, с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества. Полученный таким образом продукт испрользовали на следующей стадии без дополнительного анализа (2,0 г).

Промежуточное соединение 6

Метиловый эфир 2-бензил-5-(4-цианофенил)-7-метил-3-оксо-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

Промежуточное соединение 5 (250 мг, 0,55 ммоль) и гидрохлорид бензилгидразина (120 мг, 0,61 ммоль) суспендировали в CH₃CN (10 мл) при 0°С добавляли и Et₃N (85 мл, 0,61 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 30 минут и затем оставляли нагреваться до KT и перемешивали в течение еще 1 часа. Реакционную смесь фильтровали, и фильтрат концентрировали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом 0-100%, с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества (100 мг).

ЖХ-МС (Метод 2): Rt=3,87 мин, m/z=402 [М+Н]⁺

Промежуточное соединение 7

Метиловый эфир 2-аллил-5-(4-цианофенил)-7-метил-3-оксо-2.3.5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

Промежуточное соединение 4 (1,42 г, 5 ммоль) растворяли в смеси DCM (10 мл) и пиридина (10 мл) и охлаждали на ледяной бане. По каплям добавляли раствор 4-нитрофенилхлорформиата (0,955 мг, 4,75 ммоль) в DCM (10 мл), и полученный раствор перемешивали при 0°С в течение 1,5 часов, и затем одной порцией добавляли раствор гидрохлорида аллилгидразина (1,0 г, 5,5 ммоль) и DIPEA (3,75 мл, 22 ммоль) в CH₃CN (10 мл). Полученную смесь оставляли нагреваться до КТ, перемешивали в течение 4 часов и затем распределяли между EtOAc и водой. Органический слой отделяли, промывали водой, затем рассолом, затем сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого масла (0,95 г).

ЖХ-МС (Метод 2): Rt=2,73 мин, m/z=352 [M+H]⁺

Промежуточное соединение 8

Метиловый эфир 5-(4-цианофенил)-2,7-диметил-3-оксо-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

Промежуточное соединение 8 было получено способом, аналогичным способу, описанному выше для Промежуточного соединения 7.

ЖХ-МС (Метод 2): Rt=2,46 мин, m/z=326 [M+H]⁺

Промежуточное соединение 9

Метиловый эфир (R)-4-(4-цианофенил)-6-метил-2-тиоксо-1-(3-трифторметил-фенил)-1,2,3,4-тетрагидро-пиримидин-5-карбоновой кислоты

В раствор метилового эфира (R)-4-(4-циано-фенил)-6-метил-2-оксо-1-(3-трифторметил-фенил)-1,2,3,4-тетрагидро-пиримидин-5-карбоновой кислоты (14,5 г, 35 ммоль) (полученного согласно WO 2006082412) в толуоле (105 мл) в атмосфере N₂ добавляли реагент Лавессона (17 г, 42 ммоль), и полученную смесь перемешивали при 120°С в течение 17 часов. Реакционную смесь оставляли охлаждаться до KT и затем упаривали в вакууме. Полученный остаток растворяли в диэтиловом эфире, фильтровали, и фильтрат собирали, промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом 10-40% EtOAc в циклогексане, с получением указанного в заголовке соединения в виде желтой пены (4,8 г).

ЖХ-МС (Метод 2): Rt=3,75 мин, m/z=432 [М+Н]⁺

Промежуточное соединение 10

Метиловый эфир (R)-4-(4-цианофенил)-2-гидразино-6-метил-1-(3-трифторметил-фенил)-1,4-дигидро-пиримидин-5-карбоновой кислоты

Промежуточное соединение 10 (593 мг) было получено из Промежуточного соединения 9 (3,39, 7,9 ммоль) согласно методике, аналогичной методике, описанной для Промежуточного соединения 2.

ЖХ-МС (Метод 1): Rt=2,57 мин, m/z=430 [M+H]⁺

Промежуточное соединение 11

Метиловый эфир (R)-4-(4-цианофенил)-2-(N'-метоксикарбонил-гидразино)-6-метил-1-(3-трифторметилфенил)-1,4-дигидро-пиримидин-5-карбоновой кислоты

Промежуточное соединение 11 (381 мг) было получено из Промежуточного соединения 10 (782 мг, 1,8 ммоль) согласно методике, аналогичной методике, описанной для Промежуточного соединения 3.

ЖХ-МС (Метод 1): Rt=2,60 мин, m/z=502 [M+H]⁺

Промежуточное соединение 12

Метиловый эфир 5-(2-бром-4-циано-фенил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин- 6-карбоновой кислоты

Промежуточное соединение 12 (2,58 г) было получено согласно методике, аналогичной методике, описанной для Промежуточных соединений 1, 2 и 3 и соединения Примера 1, с использованием 2-бром-4-цианобензальдегида (12 г, 57 ммоль) вместо 4-цианобензальдегида в качестве исходного вещества в последовательности синтеза.

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=4,65 мин, m/z=534 [M(⁷⁹Br)+Н]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 11.20 (1Н, s), 8.18 (1H, d, J=1.6 Гц), 8/09 91Н, br s), 7.93-7.75 (5H, m), 6.23 (1H, d, J=1.2 Гц), 3.49 (3Н, s), 2.13 (3Н, s).

Промежуточное соединение 13

Амид 5-(4-циано-фенил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

Соединение Примера 9 (160 мг, 0,36 ммоль) растворяли в DMF (5 мл) и затем добавляли диизопропилэтиламин (123 мкл, 0,72 ммоль), затем HATU (280 мг, 0,72 ммоль). Через 1 час добавляли аммиак (0,5 М в диоксане, 4,3 мл, 2,15 ммоль), и эту смесь перемешивали при 60°С в течение 16 часов. Смесь оставляли охлаждаться до КТ, затем распределяли между EtOAc и водой. Органический слой отделяли, и водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом 0-10% МеОН в DCM, с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (120 мг).

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=3,47 мин, m/z=440 [M+H]⁺

Промежуточное соединение 14

1-Бром-3-метансульфонил-пропан

В раствор 3-(метилсульфонил)-1-пропанола (276 мг, 2 ммоль) в DCM (10 мл) добавляли тетрабромид углерода (730 мг, 2,2 ммоль), затем порциями добавляли трифенилфосфин (580 мг, 2,2 ммоль) в атмосфере N₂. Полученный раствор перемешивали при KT в течение 17 часов. Реакционную смесь распределяли между DCM и водой. Органический слой отделяли, промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя 50% EtOAc в циклогексане, с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (297 мг).

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 3.63 (2Н, t J=7 Гц), 3.25-3.20 (2Н, m), 3.01 (3H,s), 2.27-2.19 (2H, m)

Промежуточное соединение 15

Метиловый эфир 2-(4-бромметил-бензил)-5-(4-циано-фенил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

Соединение Примера 1 (228 мг, 0,5 ммоль) растворяли в DMF (5 мл) и добавляли карбонат цезия (652 мг, 2 ммоль) и α,α'-дибром-пара-ксилол (396 мг, 1,5 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 1 часа и затем распределяли между EtOAc и водой. Органический слой отделяли, промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя 40% EtOAc в циклогексане в качестве элюента, с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (211 мг).

ЖХ-МС (Метод 4): Rt=4,11 мин, m/z 638 [M(⁷⁹Br)H⁺

Промежуточное соединение 16

Метиловый эфир 5-(4-циано-фенил)-2-метоксикарбонилметил-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

Соединение Примера 1 (108 мг, 0,24 ммоль) растворяли в DMF (2 мл) и добавляли карбонат цезия (94 мг, 0,29 ммоль) и метилбромацетат (24 мкл, 0,26 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 2 часов и затем распределяли между EtOAc и водой. Органический слой отделяли, и водный слой дополнительно экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом 0-30% EtOAc в DCM, с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (112 мг).

ЖХ-МС (Метод 2): Rt=3,59 мин, m/z=528 [М+Н]⁺

Промежуточное соединение 17

Метиловый эфир 2-карбоксиметил-5-(4-циано-фенил)-7-метил-3-оксо-8-(3-триФторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]-пиримидин-6-карбоновой кислоты

Раствор Промежуточного соединения 16 (108 мг, 0,21 ммоль) в THF (1 мл) добавляли к МеОН (1 мл), затем добавляли гидроксид лития (3 М в воде, 68 мкл, 0,21 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 2 часов и затем добавляли гидроксид лития (3 М в воде, 27 мкл, 0,08 ммоль). После перемешивания при KT в течение еще одного 1 часа реакционную смесь подкисляли добавлением 1 М HCl и экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (100 мг).

ЖХ-МС (Метод 2): Rt=3,33 мин, m/z=514 [M+H]⁺

Промежуточное соединение 18

Метиловый эфир 2-[3-(трет-бутоксикарбонил-метил-амино)-пропил]-5-(4-циано-фенил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

Соединение Примера 1 (0,2 г, 0,44 ммоль) растворяли в DMF (4 мл) и добавляли карбонат цезия (0,19 г, 0,53 ммоль), затем добавляли трет-бутиловый эфир (3-йод-пропил)-метил-карбаминовой кислоты (0,14 г, 0,48 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 18 часов и затем гасили водой и экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом 0-5% МеОН в DCM, с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (238 мг).

ЖХ-МС (Метод 2): Rt=4,02 мин, m/z=627 [M+H]⁺

Промежуточное соединение 19

3-[3-(трет-Бутил-диметил-силанилокси)-пропилсульфанил]-пропан-1-ол

Раствор 3,3'-тиодипропанола (900 мг, 6 ммоль) в THF (3 мл) добавляли по каплям к суспензии гидрида натрия (240 мг, 6 ммоль) в THF (15 мл) в атмосфере N₂. Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 30 минут, затем добавляли раствор трет-бутилдиметилсилилхлорида (900 мг, 6 ммоль) в THF (2 мл), и перемешивание прдолжали в течение 16 часов. Реакционную смесь распределяли между EtOAc и водой. Органический слой отделяли, промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя 20% EtOAc в циклогексане, с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (793 мг).

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) 4.44-4.30 (1Н, m), 3.71-3.63 (2Н, m), 3.52-3.43 (2Н, m), 3.29-3.18 (4Н, m), 1.76-1.63 (4Н, m), 0.89 (9Н, s), 0.06 (6Н, s).

Промежуточное соединение 20

3-Г3-(п7рет-Бутил-диметил-силанилокси)-пропан-1-сульфонилЧ-пропан-1-ол

Промежуточное соединение 19 (782 мг, 2,96 ммоль) растворяли в DCM (25 мл) и добавляли тСРВА (1,55 г, 9 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 2 часов и затем распределяли между DCM и насыщенным водным раствором Na₂S₂O₅. Органический слой отделяли, промывали насыщенным водным раствором NaHCO₃, затем рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (919 мг).

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 4.69 (1Н, s), 3.73-3.66 (2Н, m), 3.53-3.48 (2Н, m), 3.16-3.08 (4Н, m), 1.91-1.78 (4Н, m), 0.89 ((H, s), 0.07 (6Н, s).

Промежуточное соединение 21

Метиловый эфир 2-{3-[3-(трет-бутил-диметил-силанилокси)-пропан-1-сульфонил]-пропил}-5-(4-циано-фенил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

Соединение Примера 1 (228 мг, 0,5 ммоль) растворяли в THF (5 мл) и затем добавляли Промежуточное соединение 20 (178 мг, 0,6 ммоль) и трифенилфосфин (158 мг, 0,6 ммоль), затем по каплям добавляли раствор диизопропилазодикарбоксилата (118 мкл, 0,6 ммоль) в THF (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 5 часов и затем распределяли между EtOAc и водой. Органический слой отделяли, и водный слой дополнительно экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя 50% EtOAc в циклогексане, с получением указанного в заголовке соединения (282 мг).

ЖХ-МС (Метод 2): Rt=4,49 мин, m/z=734 [M+H]⁺

Промежуточное соединение 22

Метиловый эфир 5-(4-циано-фенил)-2-[3-(3-гидрокси-пропан-1-сульфонил)-пропил]-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

Промежуточное соединение 21 (282 мг, 0,38 ммоль) растворяли в THF (3 мл) и затем добавляли 1М раствор TBAF в THF (760 мл, 0,76 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 4 часов и затем распределяли между EtOAc и водой. Органический слой отделяли, и водный слой дополнительно экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом 0-2% метанола в EtOAc, с получением указанного в заголовке соединения (89 мг).

ЖХ-МС (Метод 2): Rt=3,29 мин, m/z=620 [M+H]⁺

Промежуточное соединение 23

Метиловый эфир 5-(4-циано-фенил)-7-метил-3-оксо-2-{3-[3-(толуол-4-сульфонилокси)-пропан-1-сульфонил]-пропил}-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

Промежуточное соединение 22 (89 мг, 0,14 ммоль) растворяли в THF (3 мл) и затем добавляли гидрид натрия (6 мг, 0,2 ммоль) в атмосфере N₂. Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 10 минут, затем добавляли толуолсульфонилхлорид (31 мг, 0,16 ммоль), и перемешивание продолжали в течение 16 часов. Реакционную смесь распределяли между EtOAc и водой. Органический слой отделяли, промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом 50-80% EtOAc в циклогексане, с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (70 мг).

ЖХ-МС (Метод 4): Rt=3,81 мин, m/z=774 [M+H]⁺

Промежуточное соединение 24

[3-(3-Бром-пропан-1-сульфонил)-пропокси]-трет-бутил-диметил-силан

Промежуточное соединение 24 (485 мг) было получено из Промежуточного соединения 20 (1,18 г, 4 ммоль) согласно методике, аналогичной методике, описанной для Промежуточного соединения 14.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) 3.68 (2Н, t, J=6 Гц), 3.63 (2Н, t, J=6 Гц), 3.25-3.21 (2Н, m), 3.16-3.11 (2Н, m), 2.26-2.17 (2Н, m), 1.90-1.82 (2Н, m), 0.87 (9H, s), 0.05 (6H, s).

Промежуточное соединение 25

Метиловый эфир (R)-5-(4-циано-фенил)-2-метоксикарбонилметил-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

Соединение Примера 7 (227 мг, 0,5 ммоль) растворяли в DMF (4 мл) и добавляли карбонат цезия (195 мг, 0,6 ммоль) и метилбромацетат (51 мкл, 0,55 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 18 часов и затем распределяли между EtOAc и водой. Органический слой отделяли, и водный слой дополнительно экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле элюируя 50% EtOAc в циклогексане, с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного стекла (244 мг).

ЖХ-МС (Метод 4): Rt=3,16 мин, m/z=528 [M+H]⁺

Промежуточное соединение 26

Метиловый эфир (R)-2-карбоксиметил-5-(4-циано-фенил)-7-метил-3-оксо-8-(3-триФторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

В раствор Промежуточного соединения 25 (240 мг, 0,46 ммоль) в THF (3 мл) добавляли МеОН (3 мл), затем добавляли гидроксид лития (ЗМ в воде, 200 мкл, 0,6 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 2 часов, и затем летучие вещества удаляли в вакууме. Полученный в результате остаток растворяли в воде, и полученный раствор подкисляли добавлением 6 н. HCl и экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (250 мг).

ЖХ-МС (Метод 4): Rt=2,88 мин, m/z=514 [M+H]⁺

Промежуточное соединение 27

Метиловый эфир (R)-2-{3-[3-(трет-бутил-диметил-силанилокси)-пропан-1-сульфонил]-пропил}-5-(4-циано-фенил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трисфторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

Соединение Примера 7 (455 мг, 1 ммоль) растворяли в DMF (5 мл) и добавляли карбонат цезия (489 мг, 1,5 ммоль) и раствор Промежуточного соединения 24 (481 мг, 1,3 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 16 часов и затем распределяли между EtOAc и водой. Органический слой отделяли, и водный слой дополнительно экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя 50% EtOAc в циклогексане, с получением указанного в заголовке соединения в виде не совсем белой пены (623 мг).

ЖХ-МС (Метод 2): Rt=7,33 мин, m/z=734 [M+H]⁺

Промежуточное соединение 28

Метиловый эфир (R)-5-(4-циано-сренил)-2-Г3-(3-гидрокси-пропан-1-сульфонил)-пропил]-7-метил-3-оксо-8-(3-три(рторметил-сренил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

Промежуточное соединение 27 (620 мг, 0,85 ммоль) растворяли в THF (7 мл) и затем добавляли 1М раствор TBAF в THF (1,3 мл, 1,3 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 16 часов и затем распределяли между EtOAc и водой. Органический слой отделяли, и водный слой дополнительно экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом 4-5% метанола в DCM, с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (476 мг).

ЖХ-МС (Метод 4): Rt=2,83 мин, m/z=620 [M+H]⁺

Промежуточное соединение 29

Метиловый эфир (R)-5-(4-циано-фенил)-7-метил-3-оксо-2-{3-Г3-(толуол-4-сульфонилокси)-пропан-1-сульфонил]-пропил}-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

Промежуточное соединение 28 (470 мг, 0,76 ммоль) растворяли в THF (5 мл) и затем добавляли гидрид натрия (48 мг, 1,2 ммоль) в атмосфере N₂. Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 10 минут, затем добавляли толуолсульфонилхлорид (191 мг, 1 ммоль), и перемешивание продолжали в течение 16 часов. Реакционную смесь распределяли между EtOAc и водой. Органический слой отделяли, промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом 50-80% EtOAc в циклогексане, с получением указанного в заголовке соединения бледно-желтого стеклообразного вещества (132 мг).

ЖХ-МС (Метод 4): Rt=3,43 мин, m/z=774 [М+Н]⁺

Пример 1

Метиловый эфир 5-(4-цианофенил)-7-метил-3-оксо-8-(3-триФторметилФенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

Промежуточное соединение 3 (400 мг, 0.8 ммоль) растворяли в IMS (12 мл) и нагревали при 150°С в течение 1 часа, используя микроволновое излучение. Растворитель удаляли в вакууме, и полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом 50-70% EtOAc в циклогексане, с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (185 мг).

ЖХ-МС (Метод 2): Rt=3,32 мин, m/z=456 [M+H]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 11.25 (1H, s), 8.09 (1H, s), 7.93-7.78 (5H, m), 7,67 (2H, d, J=8 Гц), 5.92 (1H, s), 3.55 (3Н, s) и 2.16 (3Н, s).

Пример 2

Метиловый эфир 2-карбамоилметил-5-(4-цианофенил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметилфенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

Соединение Примера 1 (85 мг, 0,19 ммоль) растворяли в DMF (3 мл) и добавляли карбонат цезия (94 мг, 0,29 ммоль) и 2-йодацетамид (41 мг, 0,22 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 3 часов и затем распределяли между EtOAc и водой. Органический слой отделяли, промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя EtOAc, с получением указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого твердого вещества (49 мг).

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=4,14 мин, m/z=513 [M+H]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8.08 (1H, s), 7.93-7.79 (5H, m), 7.70 (2H, d, J=8 Гц), 7.26 (1H, s), 7.12 (1H, s), 5.96 (1H, s), 4.07 (1H, d, J=17 Гц), 3.98 (1H, d, J=17 Гц), 3.56 (3Н, s), и 2.15 (3Н, s).

Пример 3

Метиловый эфир 5-(4-цианофенил)-2-(2-диметиламино-пропил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметилфенил)-2,3,5,-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

Соединение Примера 1 (85 мг, 0,19 ммоль) растворяли в DMF (3 мл) и добавляли карбонат цезия (156 мг, 0,48 ммоль) и гидрохлорид 3-диметиламин-1-пропилхлорида (35 мг, 0,22 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 16 часов и затем нагревали при 65°С в течение 3 часов. Реакционную смесь оставляли охлаждаться и затем распределяли между EtOAc и водой. Органический слой отделяли, промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом 4-10% МеОН в DCM, с получением указанного в заголовке соединения в виде не совсем белого твердого вещества (23 мг).

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=3,53 мин, m/z=541 [М+Н]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8.10 (1Н, s), 7.94-7.79 (5H, m), 7.67 (2H, d, J=8 Гц), 5.95 (1Н, s), 3.55 (3Н, s), 3.52-3.39 (2H, m), 2.15 (3H, s), 2.03 (2H, td, J=2 и 7 Гц), 1.98 (6Н, s) и 1.57-146 (2H, m).

Пример 4

Метиловый эфир 2-бензил-5-(4-цианофенил)-7-метил-3-оксо-8-(3-триФторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

Промежуточное соединение 6 (100 мг, 0.24 ммоль), 3-трифторметилфенилбороновую кислоту (95 мг, 0,5 ммоль), Et₃N (250 мл, 1,8 ммоль) и ацетат меди(II) (50 мг, 0,4 ммоль) растворяли в DCM (10 мл), и перемешивание при KT продолжали в течение 48 часов. Реакционную смесь фильтровали для удаления твердого вещества, и фильтрат концентрировали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом 0-15% МеОН в DCM. Соответствующие фракции объединяли и концентрировали в вакууме, и полученный остаток дополнительно очищали, используя систему 2 препаративной ВЭЖХ, с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (20 мг).

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=5,43 мин, m/z=546 [M+H]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7.77 (1Н, d, J=8 Гц), 7.70-7.65 (3Н, m) 7.59-7.54 (3Н, m), 7.51 (1Н, d, J=8 Гц), 7.29-7.24 (3Н, m), 7.22-7.18 (2H, m), 6.14 (1Н, s), 4.80 (1Н, d, J=15 Гц), 4.60 (1Н, d, J=15 Гц), 3.64 (3Н, s) и 2.25 (3Н, s).

Пример 5

Метиловый эфир 2-аллил-5-(4-цианофенил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

Соединение Примера 5 было получено из Промежуточного соединения 7 способом, аналогичным способу, который описан выше в Примере 4, с получением указанного в заголовке соединения в виде белого порошка.

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=4,10 мин, m/z=496 [M+H]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8.11 (1H, s), 7.94-7.89 (2H, m), 7.88-7.79 (3Н, m), 7.69 (2H, d, J=8 Гц), 5.96 (1H, s), 5.72-5.62 (1H, m), 5.04 (1H, dd, J=1 и 10 Гц), 4.95 (1H, dd, J=1 и 16 Гц), 4.14-4.04 (2H, m), 3.55 (3Н, s) и 2.14 (3Н, s).

Пример 6

Метиловый эфир 5-(4-цианофенил)-2,7-диметил-3-оксо-8-(3-триФторметилФенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

Промежуточное соединение 8 (900 мг, 2,77 ммоль), 3-трифторметилфенилбороновую кислоту (1,05 г, 5,54 ммоль), Et₃N (925 мл, 6,6 ммоль) и ацетат меди(II) (1,0 г, 5,54 ммоль) растворяли в DCE (25 мл), и эту реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение 18 часов. После охлаждения до KT реакционную смесь распределяли между DCM и водой. Органический слой отделяли, промывали водой, затем рассолом, затем сушили (MgSO₄) и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом 3-10% МеОН в DCM, и затем используя систему 1 ВЭЖХ, с получением указанного в заголовке соединения в виде оранжевого твердого вещества (47 мг).

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=4,80 мин, m/z=470 [M+H]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8.11 (1H, s), 7.91 (2H, t, J=8 Гц), 7.87-7.79 (3Н, m), 7.69 (2H, d, J=8 Гц), 5.94 (1H, s), 3.55 (3Н, s), 3.08 (3Н, s) и 2,15 (3Н, s).

Пример 7

Метиловый эфир (R)-5-(4-цианофенил)-7-метил-3-оксо-8-(3-триФторметилФенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

Соединение Примера 7 (112 мг) было получено из Промежуточного соединения 11 (376 мг) по методике, аналогичной методике, которая описана в Примере 1.

Альтернативно, соединение Примера 7 может быть получено из соединения Примера 1 путем подвергания соединения Примера 1 препаративной ВЭЖХ хроматографии на хиральной фазе [колонка Daicel Chiralpak IC (5 мкм, 250 мм × 10 мм, элюент 3% IPA/DCM, скорость потока 5 мл/мин, детектирование при 220 нм)]. Соединение Примера 1 (3,15 г) растворяли в 3% IPA/DCM (60 мл) и выполняли 60 впрыскиваний по 1 мл с получением (R) энантиомера (2-й элюирующийся энантиомер) (1,5 г).

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=4,42 мин, m/z=456 [М+Н]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 11.25 (1Н, s), 8.09 (1Н, s), 7.93-7.78 (5H, m), 7.67 (2H, d, J=8 Гц), 5.92 (1Н, s), 3.55 (3Н, s) и 2.16 (3Н, s).

Пример 8

Метиловый эфир 5-(4-циано-фенил)-2-{[(2-диметиламино-этил)-метил-карбамоил]-метил}-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

Соединение Примера 1 (60 мг, 0,13 ммоль) растворяли в DMF (1 мл) и добавляли карбонат цезия (51 мг, 0,16 ммоль) и 2-хлор-N,N-диметилацетамид (15 мкл, 0,15 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 16 часов и затем распределяли между EtOAc и водой. Органический слой отделяли, и водный слой дополнительно экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя 50% EtOAc в DCM, с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (56 мг).

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=4,45 мин, m/z=549 [М+Н]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8.04 (1Н, s), 7.87-7.74 (5H, m), 7.64 (2H, d, J=9 Гц), 5.93 (1Н, s), 4.36 (2H, s), 3.52 (3Н, s), 2.80 (3Н, s), 2.68 (3Н, s), 2.15 (3Н, s).

Пример 9

5-(4-Циано-фенил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновая кислота

Соединение Примера 1 (100 мг, 0,22 ммоль) растворяли в DCM (2 мл) в атмосфере N₂ и охлаждали до -78°С, затем по каплям добавляли BBr₃ (1М в DCM, 1 мл, 1 ммоль). Эту реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение 1 часа, затем подогревали до 0°С и перемешивали в течение еще 4 часов. Реакционную смесь осторожно гасили насыщенным водным раствором NaHCO₃ и затем разбавляли DCM. Водный слой отделяли, подкисляли до рН 1 добавлением 6 н. HCl и затем экстрагировали DCM. Объединенные экстракты концентрировали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (53 мг).

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=3,81 мин, m/z=442 [M+H]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12.49 (1H, br s), 11.22 (1H, s), 8.08 (1H, s), 7.92-7.77 (5H, m), 7.66 (2H, d, J=8 Гц), 5.90 (1H, s), 2.17 (3H, s).

Пример 10

2-Диметиламино-этиловый эфир 5-(4-циано-фенил)-7-метил-3-оксо- 8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

В раствор соединения Примера 9 (32 мг, 0,073 ммоль) в DMF (1 мл) добавляли диизопропилэтиламин (125 мкл, 0,73 ммоль), затем добавляли HATU (30 мг, 0,080 ммоль). Через 1 час добавляли N,N-диметилэтаноламин (73 мкл, 0,73 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при KT в течение 16 часов. Реакционную смесь распределяли между EtOAc и водой. Органический слой отделяли, и водный слой дополнительно экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали ВЭЖХ с обращенной фазой с использованием градиента 20-70% ацетонитрила в воде с 0,1% аммиака с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (4 мг).

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=3,14 мин, m/z=513 [M+H]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8.39 (1Н, br s), 7.77 (1H, d, J=8 Гц), 7.71-7.53 (7Н, m), 6.11 (1H, s), 4.20-4.06 (2H, m), 2.49-2.47 (2H, m), 2.26 (3H, s), 2.21 (6H, s).

Пример 11

3-Диметиламино-пропиловый эфир 5-(4-циано-фенил)-7-метил-3-оксо-8-(3-триФторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

В раствор соединения Примера 9 (42 мг, 0,095 ммоль) в DMF (1 мл) добавляли диизопропилэтиламин (33 мкл, 0,19 ммоль), затем добавляли HATU (72 мг, 0,19 ммоль). Через 1 час добавляли N,N-диметилпропаноламин (67 мкл, 0,57 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при 60°С в течение 16 часов. Реакционную смесь оставляли охлаждаться до КТ, затем распределяли между EtOAc и водой. Органический слой отделяли, и водный слой дополнительно экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом 0-6% (2М NH₃ в МеОН) в DCM, с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (15 мг).

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=3,18 мин, m/z=527 [М+Н]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 9.22 (1Н, br s), 7.76 (1H, d, J=7 Гц), 7.69-7.61 (3Н, m), 7.58-7.51 (4H, m), 6.08 (1H, s), 4.04 (2H, t, J=6), 2.25 (3H, s), 2.21 (6H, s), 2.11-2.07 (2H, m), 1.67-1.60 (2H, m).

Пример 12

Этиламид 5-(4-циано-фенил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

В раствор соединения Примера 9 (100 мг, 0,23 ммоль) в DMF (3 мл) добавляли DIPEA (102 мл, 0,6 ммоль) и HATU (133 мг, 0,35 ммоль), и эту реакционную смесь перемешивали при KT в течение 45 минут. Затем добавляли этиламин (2М в THF, 175 мл, 0,35 ммоль), и перемешивание при KT продолжали в течение 16 часов. Дополнительно добавляли этиламин (2М в THF, 175 мл, 0,35 ммоль), температуру поднимали до 60°С, и перемешивание продолжали в течение 1,5 часов. Реакционную смесь распределяли между EtOAc и водой. Органический слой отделяли, промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом 80-100% EtOAc в циклогексане, с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (53 мг).

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=3,84 мин, m/z=469 [M+H]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 11.12 (1H, s), 8.00 (1H, t, J=6 Гц), 7.94 (1Н, s), 7.88-.775 (5Н, m), 7.54 (2H, d, J=9 Гц), 5.95 (1H, s), 3.02-2.92 (2H, m), 1.78 (3Н, s), 0.88 (3Н, t, J=7.5 Гц).

Пример 13

Метиловый эфир 5-(4-циано-2-метансульфонил-фенил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

Промежуточное соединение 12 (235 мг, 0,44 ммоль) растворяли в DMSO (4,5 мл) и продували N₂ в течение 5 минут. Затем добавляли метансульфинит натрия (220 мг, 2,2 ммоль) и транс-циклогексан-1,2-диамин, затем добавляли комплекс трифторметансульфонат меди(1)-бензол (222 мг, 0,44 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 120°С в атмосфере N₂ в течение 18 ч и затем оставляли охлаждаться до КТ. Реакционную смесь распределяли между EtOAc и водой. Органический слой отделяли, и водный слой дополнительно экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали обращенно-фазовой ВЭЖХ, используя градиент 60-90% МеОН в воде с 0,1% муравьиной кислоты, с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (6,5 мг).

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=4,37 мин, m/z=534 [M+H]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8.32 (1H, d, J=1 Гц), 7.91 (2H, dd, J=8, 1 Гц), 7,82 (1H, d, J=8 Гц), 7.73 (1H, t, J=8), 7.65-7.58 (4H, m), 3.57 (3Н, s), 3.44 (3Н, s), 2.22 (3Н, s).

Пример 14

5-(4-Циано-фенил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4] триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбонитрил

Промежуточное соединение 13 (92 мг, 0,209 ммоль) растворяли в THF (8 мл) и добавляли реагент Бургесса (150 мг, 0,63 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 30 минут и затем распределяли между EtOAc и водой. Органический слой отделяли, и водный слой дополнительно экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя 80% EtOAc в циклогексане в качестве элюента, с получением белого твердого вещества. Дополнительную очистку проводили обращенно-фазовой ВЭЖХ, используя градиент 40-98% MeCN в воде (+0,1% муравьиной кислоты), с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (34 мг).

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=4,28 мин, m/z=423 [M+H]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8.07 (1H, s), 7.81 (1H, d, J=8), 7.75-7.69 (3Н, m), 7.6 (1H, s), 7.54-7.49 (3Н, m), 5.68 (1H, s), 2.05 (3Н, s).

Пример 15

Метиловый эфир 5-(4-циано-фенил)-2-(4-метансульфонил-фенил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

Соединение Примера 1 (68 мг, 0,15 ммоль) растворяли в DCM (3 мл) и добавляли 4-метансульфонилфенилбороновую кислоту (90 мг, 0,45 ммоль), ацетат меди(II) (54 мг, 0,3 ммоль), триэтиламин (105 мл, 0,75 ммоль), пиридин (48 мл, 0,6 ммоль) и порошкообразные молекулярные сита 4А (100 мг). Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 72 часов, затем фильтровали, фильтрат собирали и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом 40-50% EtOAc в циклогексане, и полученный остаток растирали с 1:1 EtOAc: МеОН, фильтровали, и твердое вещество собирали с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (7 мг).

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=5,10 мин, m/z=610 [M+H]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8.22 (1H, s), 8.03-7.97 (2H, m), 7.91-7.85 (5H, m), 7.81-7.77 (4H, m), 6.07 (1H, s), 3.57 (3Н, s), 3.13 (3Н, s), 2.18 (3Н, s).

Пример 16

Метиловый эфир 5-(4-циано-фенил)-2-(3-метансульфонил-пропил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,41триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

Соединение Примера 1 (68 мг, 0,15 ммоль) растворяли в THF (2 мл) в атмосфере N₂ и добавляли 3-(метилсульфонил)-1-пропанол (25 мг, 0,18 ммоль) и трифенилфосфин (47 мг, 0,18 ммоль), затем по каплям добавляли DIAD (35 мл, 0,18 ммоль) в THF (200 мл). Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 5 часов, затем дополнительно добавляли 3-(метилсульфонил)-1-пропанол (25 мг, 0,18 ммоль) и трифенилфосфин (47 мг, 0,18 ммоль), затем по каплям добавляли DIAD (35 мл, 0,18 ммоль) в THF (200 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение еще 16 часов и затем распределяли между EtOAc и водой. Органический слой отделяли, промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом 50-100% EtOAc, с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (55 мг).

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=4,50 мин, m/z=576 [M+H]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8.12 (1H, s), 7.92 (2H, dd, J=1 Гц и 7.5 Гц), 7.87-7.79 (3Н, m), 7.69 (2H, d, J=7.5 Гц), 5.96 (1H, s), 3.68-3.60 (1H, m), 3.56 (3Н, s), 3.55-3.47 (1H, m), 3.04-2.96 (2H, m), 2.88 (3Н, s), 2.15 (3Н, s), 1.89-1.79 (2H, m).

Пример 17

Метиловый эфир (R)-5-(4-циано-фенил)-2-(4-метансульфонил-бензил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

Соединение Примера 7 (65 мг, 0,14 ммоль) растворяли в DMF (3 мл) и добавляли карбонат цезия (91 мг, 0,28 ммоль) и 4-метилсульфонилбензилбромид (50 мг, 0,2 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 3 часов и затем распределяли между EtOAc и водой. Органический слой отделяли, промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя 80% EtOAc в циклогексане, с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (73 мг).

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=4,78 мин, m/z=624 [M+H]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8.11 (1Н, s), 7.93-7.85 (4Н, m), 7.84-7.77 (3Н, m), 7.71 (2H, d, J=8.5 Гц), 7.33 (2Н, d, J=8.5 Гц), 6.00 (1Н, s), 4.82 (2H, dd, J=16.5 Гц и 36.5 Гц), 3.56 (3Н, s), 3.17 (3Н, s), 2.14 (3Н, s).

Пример 18

Метиловый эфир (R)-5-(4-циано-фенил)-2-(3-метансульфонил-пропил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4] триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

Соединение Примера 18 (85 мг) было получено из соединения Примера 7 (91 мг, 0,25 ммоль) и Промежуточного соединения 14 (50 мг, 0,25 ммоль) по методике, аналогичной методике, описанной в Примере 17.

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=4,48 мин, m/z=576 [M+H]⁺

Пример 19

Метиловый эфир 5-(4-циано-фенил)-2-(4-{[(2-диметиламино-этил)-метил-амино1-метил}-бензолсульфонил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

Соединение Примера 1 (68 мг, 0,15 ммоль) растворяли в THF (2 мл) и добавляли карбонат цезия (81 мг, 0,25 ммоль) и 4-(бромметил)-бензолсульфонилхлорид (49 мг, 0,18 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 1 часа и затем упаривали в вакууме. Полученный остаток растворяли в DMF (1 мл) и перемешивали при KT в течение еще 2 часов. Добавляли N,N,N'-триметилэтилендиамин (64 мл, 0,5 ммоль), и перемешивание при KT продолжали в течение 5 часов. Добавляли дополнительное количество N,N,N'-триметилэтилендиамина (150 мл, 1,2 ммоль), и перемешивание при KT продолжали в течение 16 часов. Реакционную смесь распределяли между EtOAc и водой. Органический слой отделяли, промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя 10% МеОН, и полученный остаток подвергали ВЭЖХ с обращенной фазой, используя градиент 40-60% ацетонитрила в воде с 0,1% аммиака, с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (7 мг).

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=3,84 мин, m/z=710 [M+H]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8.03 (1H, s), 8.00-7.96 (1H, m), 7.89-7.85 (2H, m), 7.78 (2H, d, J=8 Гц), 7.59 (2H, d, J=8 Гц), 7.56 (2H, d, J=8 Гц), 7.47 (2H, d, J=8 Гц), 5.87 (1H, s), 3.58 (2H, s), 3.51 (3Н, s), 2.48-2.43 (2H, m), 2.40-2.35 (2H, m), 2,13 (3Н, s), 2.12 (6H, s), 2.08 (3Н, s).

Пример 20

Метиловый эфир (R)-5-(4-циано-фенил)-2-[2-(4-метансульфонил-фенил)-этил]-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2.3.5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

Соединение Примера 7 (54 мг, 0,12 ммоль) растворяли в DMF (3 мл) и добавляли карбонат цезия (59 мг, 0,18 ммоль) и 1-(2-бромэтил)-4-(метилсульфонил)бензол (39 мг, 0,15 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 16 часов, затем температуру поднимали до 70°С, и перемешивание продолжали в течение 3 часов. Реакционную смесь оставляли охлаждаться до КТ, затем снова добавляли карбонат цезия (59 мг, 0,18 ммоль) и 1-(2-бромэтил)-4-(метилсульфонил)бензол (39 мг, 0,15 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 2 часов и затем распределяли между EtOAc и водой. Органический слой отделяли, промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом 50-80% EtOAc в циклогексане, с получением указанного в заголовке соединения в виде не совсем белого твердого вещества (45 мг).

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=4,81 мин, m/z=638 [M+H]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8.12 (1H, s), 7.95-7.91 (1H, m), 7.90=7.80 (4H, m), 7.74 (2H, d, J=8 Гц), 7.63 (2Н, d, J=8 Гц), 7.29 (2Н, d, J=8 Гц), 5.90 (1H, s), 3.81-3.66 (2Н, m), 3.54 (3H, s), 3.15 (3H, s) 2.87-2.82 (2Н, m), 2.14 (3H, s).

Пример 21

Метиловый эфир 5-(4-циано-фенил)-2-(4-диметиламинометил-бензил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

Промежуточное соединение 15 (105 мг, 0,16 ммоль) растворяли в THF (3 мл) и затем добавляли диметиламин (2М в THF, 400 мл, 0,8 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 16 часов и затем фильтровали. Фильтрат собирали и концентрировали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом 5-8% МеОН в DCM, с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (72 мг).

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=3,69 мин, m/z=603 [M+H]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8.04 (1H, s), 7.87-7.79 (4H, m), 7.76-7.71 (1H, m), 7.64 (2Н, d, J=8 Гц), 7.10 (2Н, d, J=8 Гц), 6.95 (2Н, d, J=8 Гц), 5.95 (1H, s), 4.64 (1H, d, J=15 Гц), 4.56 (1H, d, J=15 Гц), 3.50 (3H, s), 3.28-3.21 (2Н, m), 2.09 (3H, s), 2.05 (6H, s).

Пример 22

Бромид {4-[5-(4-циано-фенил)-6-метоксикарбонил-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-5,8-дигидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-2-илметил1-бензил}-триметил-аммония

Промежуточное соединение 15 (105 мг, 0,16 ммоль) растворяли в растворе 31% триметиламина в этаноле. Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 16 часов и затем фильтровали. Твердое вещество собирали фильтрованием и сушили в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (62 мг).

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=3,71 мин, m/z=617 [М+Н]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8.10 (1Н, s), 7.94-7.85 (4Н, m), 7.82-7.77 (1H, m), 7.72 (2H, d, J=8 Гц), 7.43 (2Н, d, J=8 Гц), 7.19 (2Н, d, J=8 Гц), 6.00 (1H, s), 4.80 (1H, d, J=16 Гц), 4.72 (1H, d, J=16 Гц), 4.47 (2Н, s), 3.57 (3H, s), 2.98 (9H, s), 2.16 (3H, s).

Пример 23

Метиловый эфир 5-(4-циано-фенил)-2-(5-метансульфонил-пиридин-2-илметил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2.4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

Соединение Примера 1 (50 мг, 0,11 ммоль) растворяли в DMF (1 мл) и добавляли карбонат цезия (43 мг, 0,13 ммоль), 2-хлорметил-5-метансульфонил-пиридин (25 мг, 0,12 ммоль) и йодид натрия (2 мг, 0,011 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 16 часов и затем распределяли между EtOAc и водой. Органический слой отделяли, и водный слой дополнительно экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом 0-50% EtOAc в DCM, с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (41 мг).

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=4,63 мин, m/z=625 [M+H]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8.86 (1Н, d, J=2 Гц), 8.18 (1Н, dd, J=9 и 2 Гц), 8.05 (1Н, s), 7.86 - 7.82 (4H, m), 7.75-7.71 (1Н, m), 7.67 (2H, d, J=9 Гц), 7.31 (1Н, d, J=8 Гц), 5.97 (1Н, s), 4.91 (1Н, d, J=17 Гц), 4.83 (1Н, d, J=17 Гц), 3.52 (3Н, s), 3.24 (3H, s), 2.10 (3H, s).

Пример 24

Метиловый эфир 5-(4-циано-фенил)-7-метил-3-оксо-2-[3-(2-оксо-пирролидин-1-ил)-пропил]-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

Соединение Примера 1 (35 мг, 0,08 ммоль) растворяли в THF (2 мл) и добавляли N-(3-гидроксипропил)-2-пирролидон (12 мкл, 0,09 ммоль) и трифенилфосфин (59 мг, 0,22 ммоль), затем добавляли диэтилазодикарбоксилат (42 мкл, 0,27 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 2 часов и затем распределяли между EtOAc и водой. Органический слой отделяли, и водный слой дополнительно экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом 0-10% МеОН в DCM. Дополнительную очистку проводили обращенно-фазовой ВЭЖХ, используя градиент 50-98% МеОН в воде +0,1% муравьиной кислоты, с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (10 мг).

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=4,50 мин, m/z=581 [M+H]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7.76 (1H, d, J=8 Гц), 7.70-7.63 (3H, m), 7.59-7.53 (4H, m), 6.10 (1H, s), 3.61 (3H, s), 3.60-3.56 (1H, m), 3.50-3.43 (1H, m), 3.25 (2H, t, J=7 Гц), 3.21-3.13 (2Н, m), 2.29 (2Н, t, J=8 Гц), 2.23 (3H, s), 1.97-1.91 (2Н, m), 1.84-1.78 (2H, m).

Пример 25

Промежуточное соединение 17 (48 мг, 0,09 ммоль) растворяли в DMF (1 мл) и затем добавляли диизопропилэтиламин (48 мкл, 0,28 ммоль) и HATU (39 мг, 0,10 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 30 минут и затем добавляли N,N,N-триметилэтилепедиамин (36 мкл, 0,28 ммоль). После 3 часов перемешивания при KT добавляли еще одну порцию HATU (10 мг, 0,03 ммоль), и перемешивание продолжали в течение 1 часа. Реакционную смесь распределяли между EtOAc и водой. Органический слой отделяли, и водный слой дополнительно экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом 0-10% (2М NH₃ в МеОН) в DCM, с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (40 мг).

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=3,52 мин, m/z=598 [M+H]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7.73 (1H, d, J=8 Гц), 7.66-7.62 (3Н, m), 7.58 (1H, s), 7.56-7.53 (3Н, m), 6.15 (1H, s), 4.37 (1H, d, J=17 Гц), 4.28 (1H, d, J=17 Гц), 3.63 (3Н, s), 3.40 (1H, m), 3.22 (1H, t, J=7 Гц), 2.90 (3Н, s), 2,42-2.35 (2H, m), 2.22 (3Н, s), 2.20 (3Н, s), 2.16 (3Н, s).

Пример 26

Метиловый эфир 5-(4-циано-фенил)-2-{[(3-диметиламино-пропил)-метил-карбамоил]-метил}-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

Промежуточное соединение 17 (57 мг, 0,11 ммоль) растворяли в DMF (1 мл) и затем добавляли диизопропилэтиламин (56 мкл, 0,33 ммоль) и HATU (63 мг, 0,17 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 30 минут, затем добавляли N,N,N-триметилпропандиамин (49 мкл, 0,33 ммоль), и перемешивание продолжали в течение еще 2 часов. Реакционную смесь распределяли между EtOAc и водой. Органический слой отделяли, и водный слой дополнительно экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом 0-10% (2М NH₃ в МеОН) в DCM, с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (42 мг).

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=3,52 мин, m/z=612 [M+H]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7.72 (1H, t, J=8 Гц), 7.66-7.61 (3Н, m), 7.59-7.50 (4H, m), 6.17 (1H, s), 4.55 (2H, s), 3.63 (3Н, s), 3.30 (1H, t, J=8 Гц), 3.25-3.16 (1H, m), 2.82 (3Н, s), 2.20 (3Н, s), 2.16 (3Н, s), 2.14-2.10 (2H, m), 2.06 (3Н, s), 1.66-1.59 (2H, m).

Пример 27

Бромид [2-({2-[5-(4-циано-фенил)-6-метоксикарбонил-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-5,8-дигидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-2-ил]-ацетил}-метил-амино)-этил]-триметил-аммония

Соединение Примера 25 (28 мг, 0,05 ммоль) растворяли в ацетонитриле (0,5 мл) и затем добавляли метилбромид (23 мкл 30%-ного раствора в ацетонитриле, 0,07 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 5 суток, и в это время добавляли метилбромид (50 мкл) каждые 12 часов. Затем в реакционную смесь добавляли карбонат калия (20 мг), и перемешивание продолжали в течение 12 часов. Реакционную смесь фильтровали, и фильтрат упаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (32 мг).

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=3,48 мин, m/z=612 [M]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8.05 (1H, s), 7.90-7.74 (5H, m), 4.68 (2H, d, J=9 Гц), 5.93 (1H, s), 4.47 (1H, d, J=17 Гц), 4.41 (1H, d, J=17 Гц), 3.59-3.53 (2H, m), 3.51 (3Н, s), 3.31-3.23 (2H, m), 2.97 (9H, s), 2.88 (3Н, s), 2.10 (3Н, s).

Пример 28

Бромид [3-({2-[5-(4-циано-фенил)-6-метоксикарбонил-7-метил-3-оксо-8-(3-триФторметил-фенил)-5,8-дигидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-2-ил]-ацетил}-метил-амино)пропил]-триметил-аммония

Соединение Примера 26 (32 мг, 0,05 ммоль) растворяли в ацетонитриле (0,5 мл) и затем добавляли метилбромид (25 мкл 30%-ного раствора в ацетонитриле, 0,07 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 3 суток, и в этот период времени добавляли метилбромид (25 мкл) каждые 12 часов. Реакционную смесь фильтровали, и фильтрат упаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (36 мг).

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=3,51 мин, m/z=626 [M]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8.05 (1H, s), 7.90-7.74 (5H, m), 7.64 (2H, d, J=8 Гц), 5.93 (1H, s), 4.41 (1H, d, J=17 Гц), 4.36 (1H, d, J=17 Гц), 3.52 (3Н, s), 3.21-3.06 (4H, m), 2.93 (9H, s), 2.84 (3Н, s), 2.10 (3Н, s), 1.80-1.73 (2H, m).

Пример 29

Метиловый эфир 5-(4-циано-фенил)-2-{[4-диметиламино-бутил)-метил-карбамоил]-метил}-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

Промежуточное соединение 17 (50 мг, 0,10 ммоль) растворяли в DMF (1 мл) и добавляли диизопропилэтиламин (50 мкл, 0,29 ммоль) и HATU (41 мг, 0,11 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 30 минут, затем добавляли N,N,N-триметилбутандиамин (38 мг, 0,29 ммоль), и перемешивание продолжали в течение еще 18 часов. Реакционную смесь распределяли между EtOAc и водой. Органический слой отделяли, и водный слой дополнительно экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом 0-10% (2М NH₃ в МеОН) в DCM, с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (34 мг).

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=3,54 мин, m/z=626 [M+H]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 7.73 (1Н, t, J=8 Гц), 7.65-7.62 (3Н, m), 7.57-7.53 (4H, m), 6.15 (1Н, s), 4.30 (1Н, d, J=17 Гц), 4.26 (1Н, d, J=17 Гц), 3.63 (3Н, s), 3.29 (2Н, t, J=7 Гц), 2.88 (3Н, s), 2.25 (2Н, t, J=8 Гц), 2.20 (3Н, s), 2.18 (3Н, s), 2.13 (3Н, s), 1.55-1.36 (4H, m).

Пример 30

Метиловый эфир 5-(4-циано-(ренил)-2-{[(5-диметиламино-пентил)-метил-карбамоил]-метил}-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

Промежуточное соединение 17 (45 мг, 0,09 ммоль) растворяли в DMF (1 мл) и затем добавляли диизопропилэтиламин (75 мкл, 0,44 ммоль) и HATU (51 мг, 0,14 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 30 минут, затем добавляли N,N,N-триметилпентандиамин (63 мг, 0,44 ммоль), и перемешивание продолжали в течение еще 18 часов. Реакционную смесь распределяли между EtOAc и водой. Органический слой отделяли, и водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом 0-10% (2М NH₃ в МеОН) в DCM, с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (44 мг).

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=3,59 мин, m/z=640 [M+H]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7.73 (1H, t, J=8 Гц), 7.67-7.64 (3Н, m), 7.57-7.52 (4H, m). 6.12 (1H, s), 4.37 (2H, s), 3.64 (3Н, s), 3.45 (2H, dd, J=14, 7 Гц), 2.86 (3Н, s), 2.64 (6H, s), 2.43 (2H, brs), 2.20 (3Н, s), 1.65-1.21 (6H, m).

Пример 31

Бромид [4-({2-[5-(4-циано-фенил)-6-метоксикарбонил-7-метил-3-оксо-8-(3-триФторметил-фенил)-5,8-дигидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-2-ил]-ацетил}-метил-амино)-бутил]-триметиламмония

Соединения Примера 29 (21 мг, 0,03 ммоль) растворяли в 30%-ном растворе метилбромида в ацетонитриле (1 мл) и добавляли карбонат калия (30 мг). Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 3 суток и затем фильтровали, и фильтрат упаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (25 мг).

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=3,54 мин, m/z=640 [M]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7.76-7.74 (2H, m), 7.70-7.66 (2H, m), 7.57-7.54 (4H, m), 6.09 (1H, s), 4.40 (1H, d, J=17 Гц), 4.35 (1H, d, J=17 Гц), 3.65 (3Н, s), 3.65-3.60 (2H, m), 3.36-3.29 (2H, m), 3.16 (9H, s), 2.90 (3Н, s), 2.20 (3Н, s), 1.71-1.59 (4H, m).

Пример 32

Бромид [5-({2-[5-(4-циано-фенил)-6-метоксикарбонил-7-метил-3-оксо-8-(3-трисЬторметил-фенил)-5,8-дигидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-2-ил1-ацетил}-метил-амино)пентил1-триметил-аммония

Соединение Примера 30 (34 мг, 0,05 ммоль) растворяли в 30%-ном растворе метилбромида в ацетонитриле (1 мл) и затем добавляли карбонат калия (30 мг). Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 24 часов и затем фильтровали и упаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (37 мг).

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=3,62 мин, m/z=654 [M]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8.04 (1H, s), 7.88-7.75 (5H, m), 7.64 (2H, dd, J=8, 1 Гц), 5.92 (1H, s), 4.38 (2H, s), 3.52 (3H, s), 3.26 (9H, s), 3.17-3.13 (4H, m), 2.94 (3H, s), 2.10 (3H, s), 1.64-1.54 (2H, m), 1.46-1.34 (2H, m), 1.19-1.07 (2H, m).

Пример 33

Метиловый эфир (R)-5-(4-циано-фенил)-2-{[(5-диметиламино-пентил)-метил-карбамоил]-метил}-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

Промежуточное соединение 26 (250 мг, 0,46 ммоль) растворяли в DMF (5 мл) и затем добавляли диизопропилэтиламин (240 мкл, 1,4 ммоль) и HATU (266 мг, 0,7 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 40 минут, затем добавляли N,N,N-триметилпентандиамин (288 мг, 2,0 ммоль) в DMF (1 мл), и перемешивание продолжали в течение еще 18 часов. Реакционную смесь распределяли между EtOAc и водой. Органический слой отделяли, и водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом 4-8% (2М NH₃ в МеОН) в DCM, затем градиентом 6-7% (2М NH₃ в МеОН) в DCM. Полученный остаток очищали посредством MDAP с получением указанного в заголовке соединения в виде не совсем белого твердого вещества (88 мг).

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=3,52 мин, m/z=640 [M+H]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7.73 (1H, t, J=8 Гц), 7.67-7.64 (3Н, m), 7.57-7.52 (4H, m), 6.12 (1H, s), 4.37 (2H, s), 3.64 (3Н, s), 3.45 (2H, dd, J=14, 7 Гц), 2.86 (3Н, s), 2.64 (6H, s), 2.43 (2H, br s), 2.20 (3Н, s), 1.65-1.21 (6H, m).

Пример 34

Хлорид (R)-[5-({2-[5-(4-циано-фенил)-6-метоксикарбонил-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-5,8-дигидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-2-ил]-ацетил}-метил-амино)пентил1-триметил-аммония

Соединение Примера 33 (88 мг, 0,14 ммоль) растворяли в 30%-ном растворе метилбромида в ацетонитриле (2 мл) и затем добавляли карбонат калия (39 мг). Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 24 часов и затем фильтровали, упаривали в вакууме и растворяли в воде. Полученный раствор элюировали через смолу Amberlite IRA458 и подвергали сублимационной сушке с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (49 мг).

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=3,62 мин, m/z=654 [M]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8.04 (1Н, s), 7.88-7.75 (5H, m), 7.64 (2H, dd, J=8, 1 Гц), 5.92 (1Н, s), 4.38 (2H, s), 3.52 (3H, s), 3.26 (9H, s), 3.17-3.13 (4H, m), 2.94 (3H, s), 2.10 (3H, s), 1.64-1.54 (2H, m), 1.46-1.34 (2H, m), 1.19-1.07 (2H, m).

Пример 35

Метиловый эфир 2-[3-(ацетил-метил-амино)-пропил]-5-(4-циано-фенил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметилфенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

В раствор Промежуточного соединения 18 (0,12 г, 0,19 ммоль) в DCM (2,5 мл) добавляли TFA (0,25 мл). Полученную смесь перемешивали при KT в течение 1 часа и затем упаривали в вакууме. Полученный остаток переносили в DCM (4 мл) и добавляли триэтиламин (86 мкл, 0,62 ммоль), затем добавляли уксусный ангидрид (47 мкл, 0,50 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 30 минут и затем распределяли между EtOAc и водой. Органический слой отделяли, и водный слой дополнительно экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом 0-10% МеОН в DCM, с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (80 мг).

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=4,45 мин, m/z=569 [M+H]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8.06 (1Н, d, J=6 Гц), 7.87-7.85 (2H, m), 7.82-7.75 (3H, m), 7.63 (2H, dd, J=8, 2 Гц), 5.91 (1Н, s), 3.50 (3H, s), 3.46-3.30 (2H, m), 3.10-2.99 (2H, m), 2.75 (3H, s), 2.10 (3H, s), 1.84 (3H, s), 1.58-1.50 (2H, m).

Пример 36

Метиловый эфир 5-(4-циано-фенил)-2-[3-(метансульФонил-метил-амино)-пропил]-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты

В раствор Промежуточного соединения 18 (0,12 г, 0,19 ммоль) в DCM (2,5 мл) добавляли TFA (0,25 мл). Полученную смесь перемешивали при KT в течение 1 часа и затем упаривали в вакууме. Полученный остаток переносили в DCM (4 мл) и затем добавляли триэтиламин (105 мкл, 0,75 ммоль), затем добавляли метансульфонилхлорид (28 мкл, 0,36 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при KT в течение 30 минут и затем распределяли между EtOAc и водой. Органический слой отделяли, и водный слой дополнительно экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом 0-10% МеОН в DCM в качестве элюента, с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (106 мг).

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=4,45 мин, m/z=605 [M+H]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8.06 (1H, s), 7.88-7.85 (2H, m), 7.81-7.75 (3Н, m), 7.63 (2H, d, J=8 Гц), 5.91 (1H, s), 3.51 (3Н, s), 3.41-3.31 (2H, m), 2.87 (2H, td, J=8, 2 Гц), 2.72 (3Н, s), 2.56 (3Н, s), 2.10 (3Н, s), 1.69-1.58 (2H, m).

Пример 37

Толуол-4-сульфонат (3-{3-[5-(4-циано-фенил)-6-метоксикарбонил-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-5,8-дигидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-2-ил]-пропан-1-сульфонил}-пропил)-триметиламмония

Промежуточное соединение 23 (68 мг, 0,09 ммоль) растворяли в 31%-ном растворе триметиламина в этаноле (3 мл) и перемешивали при KT в течение 16 часов. Растворитель выпаривали в вакууме, и полученный остаток повторно подвергали азеотропной перегонке с диэтиловым эфиром до образования твердого вещества. Это твердое вещество собирали и сушили в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде не совсем белого твердого вещества (51 мг).

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=3,59 мин, m/z=661 [M+H]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8.12 (1H, s), 7.94-7.89 (2H, m), 7.88-7.80 (3Н, m), 7.69 (2H, d, J=8 Гц), 7.47 (2H, d, J=8 Гц), 7.11 (2H, d, J=8 Гц), 5.96 (1H, s), 3.68-3.60 (1H, m), 3.59-3.50 (1H, m), 3.56 (3Н, s), 3.38-3.32 (2H, m), 3.13-3.07 (4H, m), 3.05 (9H, s), 2.29 (3Н, s), 2.15 (3Н, s), 2.12-2.04 (2H, m), 1.90-1.79 (2H, m).

Пример 38

Хлорид (R)-(3-{3-[5-(4-циано-фенил)-6-метоксикарбонил-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-5.8-дигидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-2-ил]-пропан-1-сульфонил}-пропил)-триметиламмония

Промежуточное соединение 29 (128 мг, 0,17 ммоль) растворяли в 31%-ном растворе триметиламина в этаноле (6 мл) и перемешивали при KT в течение 16 часов. Растворитель удаляли, и полученный остаток очищали ВЭЖХ с обращением фазы, используя градиент 10-98% ацетонитрила в воде с 0,1% муравьиной кислотой. Указанное в заголовке соединение было получено после элюирования через смолу Amberlite IRA458 и сублимационной сушки элюата с получением белого твердого вещества (72 мг).

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=3,52 мин, m/z=661 [M]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8.12 (1H, s), 7.94-7.89 (2H, m), 7.88-7.80 (3Н, m), 7.69 (2H, d, J=8 Гц), 5.96 (1H, s), 3.68-3.60 (1H, m), 3.59-3.50 (1H, m), 3.56 (3Н, s), 3.38-3.32 (2H, m), 3.13-3.07 (4H, m), 3.05 (9H, s), 2.15 (3Н, s), 2.12-2.04 (2H, m), 1.90-1.79 (2H, m).

Пример 39

Толуол-4-сульфонат (3-{3-[6-циано-5-(4-циано-фенил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-5.8-дигидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-2-ил]-пропан-1-сульфонил}-пропил)-триметиламмония

Соединение Примера 39 (89 мг) было получено из соединения Примера 14 (331 мг, 0,78 ммоль) и Промежуточного соединения 20 (296 мг, 1 ммоль) по методике, аналогичной методикам, описанным для Промежуточного соединения 23, затем соединения Примера 37.

ЖХ-МС (Метод 3): Rt=3,45 мин, m/z=628 [М]⁺

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8.12 (1 Н, s), 7.93-7.84 (4H, m), 7.81-7.70 (3Н, m), 7.43 (2H, d, J=7.6 Гц), 7.06 (2Н, d, J=7.6 Гц), 5.88 (1Н, s), 3.65-3.48 (2H, m), 3.33-3.2 (2H, m), 3.10-3.04 (4H, m), 3.01 (9H, s), 2.24 (3Н, s), 2.10-1.98 (2H, m), 1.89 (3H, s), 1.86-1.77 (2H, m).

Биологический анализ

Соединения по изобретению были протестированы в отношении их эффективности в анализе активности фермента нейтрофильная эластаза человека (HNE).

Анализ фермента HNE

Анализы проводили в 96-луночных планшетах в общем объеме пробы 100 мл. Конечная концентрация эластазы (человеческая лейкоцитарная эластаза, Sigma E8140) составляла 0,0036 единиц на лунку или 0,00072 ед./мл. Пептидный субстрат (MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-AMC, Calbiochem #324740) испоьзовали в конечной концентрации 100 мкм. Конечная концентрация DMSO составляла 1% в буфере для анализа (0,05М Tris.HCl, 0,1M NaCl, 0,1M CaCl₂, 0,0005% brij-35, pH 7,5). Ферментативную реакцию запускали добавлением фермента и инкубировали при 25°С в течение 30 минут. После инкубирования реакцию останавливали добавлением соевого трипсинового ингибитора (Sigma Т9003) в конечной концентрации 50 мкг на лунку. Флуоресценцию измеряли, используя планшет-ридер флуоресценции Molecular Devices при длине волны возбуждения 380 нм и длине волны излучения 460 нм.

Для каждого соединения определяли зависимость доза-ответ, и эффект соединения в каждом эксперименте выражали в виде процента ингибирования флуоресценции контрольного фермента. Строили кривые доза-ответ и определяли эффективность соединений (IC₅₀). Соединения тестировали по меньшей мере в двух отдельных экспериментах.

Значения 1650 для протестированных репрезентативных соединений по изобретению указанных Примеров приведены в следующей таблице:

1. Соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль:

где

А представляет собой СН;

R₁ выбран из

- водорода;

- (С₁-С₆)алкила;

- группы (С₁-С₆)алкилNR₇R₈;

- (С₁-С₄)алкенила;

- (С₁-С₆)алкилфенила, причем такое фенильное кольцо возможно замещено группой (С₁-С₆)алкилNR₁₅R₁₆ или группой (С₁-С₆)алкилN⁺R₁₅R₁₆R₁₇;

- группы -(CH₂)_nCONR₅R₆;

- группы -CH₂-(CH₂)_nNR₅SO₂R₆;

- группы -(СН₂)_t-(С₆Н₄)-SO₂(С₁-С₄)алкил;

- группы -(СН₂)_rSO₂(С₁-С₄)алкил, причем такой (С₁-С₄)алкил возможно замещен группой -N⁺R₁₅R₁₆R₁₇;

- группы -SO₂-фенил, причем такое фенильное кольцо возможно замещено группой (С₁-С₆)алкилNR₇R₈; и

- группы -(CH₂)n-W, где W представляет собой 6-членное гетероарильное кольцо с одним гетероатомом N, которое возможно замещено группой -SO₂(С₁-С₄)алкил;

n означает 1;

t означает ноль, 1;

r означает 2, 3;

R₅ выбран из группы, состоящей из водорода, (С₁-С₆)алкила, группы (С₁-С₆)алкилNR₁₆R₁₅ и группы (С₁-С₆)алкилN⁺R₁₇R₁₅R₁₆;

R₆ представляет собой водород или (С₁-С₆)алкил;

R₇ выбран из группы, состоящей из (С₁-С₆)алкила, группы карбонил(С₁-С₆)алкил, группы -SO₂(С₁-С₄)алкил и группы (С₁-С₆)алкилNR₁₆R₁₅;

R₈ представляет собой (С₁-С₆)алкил;

альтернативно, R₇ и R₈ могут образовывать вместе с атомом азота, к которому они присоединены, (С₅-С₇)гетероциклоалкильную кольцевую систему, которая возможно замещена оксо;

R₁₆ представляет собой (С₁-С₆)алкил;

R₁₅ представляет собой (С₁-С₆)алкил;

R₁₇ представляет собой (С₁-С₆)алкил;

R₂ представляет собой водород или -SO₂R₄, где R₄ выбран из (С₁-С₆)алкила;

R₁₄ представляет собой группу циано или группу -C(O)-XR₃;

X представляет собой двухвалентную группу, выбранную из -О- и -NH-;

R₃ представляет собой группу, выбранную из

- водорода;

- (С₁-С₆)алкила;

- группы формулы -[Alk¹]-Z, где Alk¹ представляет собой (С₁-С₄)алкиленовый радикал, и Z представляет собой:

-NR₉R₁₀, где R₉ и R₁₀ независимо представляют собой (С₁-С₆)алкил;

при условии, что соединение формулы (I) не является

метиловым эфиром 5-(4-цианофенил)-2-(2-диметиламиноэтил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметилфенил)-2,3,5,8-тетрагидро[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты;

или фармацевтически приемлемой солью указанных соединений.

2. Соединение по п. 1, где R₁₄ представляет собой группу -C(O)-XR₃.

3. Соединение по п. 1, которое выбрано из группы, состоящей из

метилового эфира (R)-5-(4-циано-фенил)-2-(4-метансульфонил-бензил)-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты;

толуол-4-сульфоната (3-{3-[5-(4-циано-фенил)-6-метоксикарбонил-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-5,8-дигидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-2-ил]-пропан-1-сульфонил}-пропил)-триметиламмония;

метилового эфира (R)-5-(4-циано-фенил)-2-{[(5-диметиламино-пентил)-метил-карбамоил]-метил}-7-метил-3-оксо-8-(3-трифторметил-фенил)-2,3,5,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиримидин-6-карбоновой кислоты;

и их фармацевтически приемлемых солей.

4. Соединение по п. 1, которое представляет собой соединение формулы (I)', где абсолютная конфигурация атома углерода (1) является такой, как показано здесь ниже:

и где R₁, R₂, R₁₄ и А такие, как определено для соединений формулы (I).

5. Соединение по п. 1 в форме фармацевтически приемлемой соли.

6. Фармацевтическая композиция, обладающая свойствами ингибиторов нейтрофильной эластазы человека, содержащая терапевтически эффективное количество соединения по любому из пп. 1-5 и фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент.

7. Фармацевтическая композиция по п. 6, которая приготовлена с возможностью перорального введения или введения легочным путем.

8. Соединение по любому из пп. 1-5 для лечения заболевания или состояния, в которое вовлечена HNE (нейтрофильная эластаза человека).

9. Соединение по п. 8, где заболевание или состояние представляет собой хроническое обструктивное заболевание легких (COPD), бронхоэктазию, хронический бронхит, фиброз легкого, пневмонию, острый респираторный дистресс-синдром (ARDS), легочную эмфизему, эмфизему, вызванную курением, или муковисцидоз.

10. Соединение по п. 8, где заболевание или состояние представляет собой астму, ринит, псориаз, атопический дерматит, неатопический дерматит, болезнь Крона, неспецифический язвенный колит или синдром раздраженного кишечника.

11. Соединение по любому из пп. 1-5 для применения в изготовлении лекарственного средства для применения в лечении заболевания или состояния, в которое вовлечена HNE.

12. Соединение по п. 11, где заболевание или состояние представляет собой хроническое обструктивное заболевание легких (COPD), бронхоэктазию, хронический бронхит, фиброз легкого, пневмонию, острый респираторный дистресс-синдром (ARDS), легочную эмфизему, эмфизему, вызванную курением, или муковисцидоз.

13. Соединение по п. 11, где заболевание или состояние представляет собой астму, ринит, псориаз, атопический дерматит, неатопический дерматит, болезнь Крона, неспецифический язвенный колит или синдром раздраженного кишечника.

14. Способ лечения заболевания или состояния, в которое вовлечена HNE, включающий введение субъекту, страдающему таким заболеванием, эффективного количества соединения по любому из пп. 1-5.

15. Способ лечения по п. 14, где заболевание или состояние представляет собой хроническое обструктивное заболевание легких (COPD), бронхоэктазию, хронический бронхит, фиброз легкого, пневмонию, острый респираторный дистресс-синдром (ARDS), легочную эмфизему, эмфизему, вызванную курением, или муковисцидоз.

16. Способ лечения по п. 14, где заболевание или состояние представляет собой астму, ринит, псориаз, атопический дерматит, неатопический дерматит, болезнь Крона, неспецифический язвенный колит или синдром раздраженного кишечника.

Предложены соединения 8-фторфталазин-1(2H)-онов формулы II, где один из X1, X2 и X3 представляют собой N и остальные символы имеют значения, указанные в п.1 формулы изобретения, или их стереоизомеры, гаутомеры и фармацевтически приемлемые соли.

Способы получения конъюгатов // 2621035

Изобретение относится к способу получения конъюгата, включающего агент, связывающийся с клетками (СВА), конъюгированный с цитотоксическим соединением посредством связывающей группы, причем указанный способ включает взаимодействие модифицированного цитотоксического соединения с модифицированным СВА при pH от приблизительно 4 до приблизительно 9, причем модифицированный СВА включает остаток бифункционального сшивающего агента, связанный с СВА, а указанный остаток включает связывающую группу и группу, способную взаимодействовать с тиолом, где СВА представляет собой антитело, и модифицированный СВА представлен формулами, указанными в формуле изобретения, модифицированное цитотоксическое соединение включает тиоловую группу и его получают взаимодействием имин-содержащего цитотоксического соединения, несущего тиоловую группу, с реагентом, способным взаимодействовать с иминами, и где имин-содержащее цитотоксическое соединение представлено формулой: в которой X' представляет собой –Н, Y' представляет собой -Н или оксогруппу, W' представляет собой -N(Re)-, Re представляет собой -(CH2-CH2-O)n-Rk, где Rk является -H, линейным, разветвленным или циклическим алкилом, имеющим от 1 до 6 атомов углерода, n является целым числом от 1 до 24, Rx является линейным или разветвленным алкилом, имеющим от 1 до 6 атомов углерода, А и А' являются -О-, R6 является -OR, R, в каждом случае, представляет собой линейный или разветвленный алкил, имеющий от 1 до 6 атомов углерода, G представляет собой -CH-, и реагент, способный взаимодействовать с иминами, выбран из группы, состоящей из сульфита, метабисульфита и дитионита.

2-фурил-6-нитро-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин-7-он // 2620594

Изобретение относится к 2-фурил-6-нитро-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин-7-ону. Технический результат: получено новое соединение, которое может применяться при лечении сепсиса.

Производные 1,2,4-триазоло [1,5-с]пиримидин-2-сульфонамида, обладающие гербицидной активностью // 2619467

Изобретение относится к производным 1,2,4-триазоло[1,5-с]пиримидин-2-сульфонамида общей формулы в которой если R1 - Н, то R2 - Н, если R1 - F, то R2 - F, обладающим гербицидной активностью.

Ингибиторы тирозинкиназы брутона // 2619465

Изобретение относится к новому соединению формулы I или его фармацевтически приемлемой соли, которые обладают свойствами ингибитора тирозинкиназы Брутона. Соединения могут быть использованы в качестве терапевтически активного вещества для лечения воспалительного и/или аутоиммунного состояния, выбранного из ревматоидного артрита и астмы.

Производные пирролопиримидина, полезные в качестве ингибиторов jak-киназы // 2618673

Изобретение относится к области органической химии, а именно к гетероциклическому соединению формулы (I) или к его энантиомеру, диастереомеру и их смеси и к его фармацевтически приемлемой соли, где А: СН или N; L: связь или С1-2алкил; R1 выбран из водорода, С1-4алкила, гетероарила, -(СН2)nC(O)OR15, -C(O)R15, -C(O)NR16R17, и -S(O)mR15, где каждый из алкила или гетероарила возможно замещен 1-3 группами, выбранными из галогена, гидрокси, циано, С1-2алкила, С1-2алкокси, С3циклоалкила, С6арила, пиридина и -(CH2)nC(O)OR15; R2 или R4 независимо выбран из водорода и C1-2алкила; R или R3 независимо выбран из водорода и галогена; R5 или R6 независимо выбран из водорода и C1-2алкила; R7, R8, R9 или R10 независимо выбран из водорода, С1-2алкила и гидроксиC1-2алкила; R11, R12, R13 или R14 независимо выбран из водорода или R11 и R12 или R13 и R14, взятые вместе, образуют оксогруппу; R15 выбран из С1-4алкила, С3циклоалкила, С2алкенила, С6арила и пиридина, где каждый из алкила, циклоалкила или гетероарила возможно замещен 1-4 группами, выбранными из галогена, гидрокси, циано, С1-4алкокси, С6арила, тетразола, -NR19R20, -S(O)mR18, -NHC(O)OR18 и -NHS(O)mR18; R16 или R17 независимо выбран из водорода, С1-3алкила и гетероарила, где гетероарил возможно замещен одной группой, выбранной из С1-2алкила, гидрокси, С1-2алкокси, С3циклоалкила, гидроксиC1алкила и -OR18; R18 выбран из С1-4алкила и гидроксиС1-4алкила; R19 или R20 независимо выбран из группы, состоящей из водорода; m равен 0, 1 или 2; n равен 0 или 1; р равен 0, 1 или 2; q равен 0 или 1; s равен 1 или 2; и t равен 1 или 2.

Производные n-пиперидин-3-илбензамида для лечения сердечно-сосудистых заболеваний // 2618628

Настоящее изобретение относится к замещенным амидным соединениям формулы (I), фармацевтическим композициям, содержащим такие соединения, и применению таких соединений для снижения в плазме крови уровней липидов, таких как холестерин липопротеинов низкой плотности (LDL-холестерин) и триглицериды, и, таким образом, для лечения заболеваний, которые усугубляются вследствие высоких уровней LDL-холестерина и триглицеридов, таких как атеросклероз и сердечно-сосудистые заболевания, у млекопитающих, включая людей.

Новые соединения и композиции для ингибирования nampt // 2617988

Изобретение относится к соединению формулы IIB или его фармацевтически приемлемым солям в которой R представляет собой бициклический 9-членный гетероарил, включающий 1, 2, 3 или 4 гетероатома, независимо выбранного(ых) из N, S или О, где указанный гетероарил может быть замещен с помощью одного заместителя, выбранного из группы, состоящей из оксо и галогена; R1 представляет собой -NHR4, и R4 представляет собой 3-10-членный циклоалкил, арил, выбранный из фенила и тетрагидронафталинила, или 9-10-членный гетероарил, содержащий 1 или 2 гетероатома, выбранных из N и О; 3-10-членный циклоалкил; арил, выбранный из фенила и нафталинила; или 5-10-членный моноциклический или бициклический гетероарил, содержащий 1 или 2 гетероатома, выбранных из N, О и S; R2 и R3 представляют собой водород; значения остальных заместителей указаны в формуле изобретения; или где соединение выбрано из группы, состоящей из соединений, представленных в формуле изобретения.

Пиридоновые и азапиридоновые соединения и способы применения // 2617405

Изобретение относится к соединению, выбранному из формулы I, или его стереоизомерам, или фармацевтически приемлемым солям, где R1 представляет собой необязательно замещенный C1-С3 алкил; R2, R3 и R4 независимо выбраны из Н, F, Cl; R5 выбран из (i) необязательно замещенного C6-С20 арила, выбранного из фенила; (ii) необязательно замещенного С5-С20 гетероарила, выбранного из пиразолила, пиридинила, пиримидинила, тетрагидроизохинолинила, 4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразинила, 6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазинила, 4,6,7-тригидропиразоло[3,2-с][1,4]оксазинила, 5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридинила, 2,3-дигидро-1Н-изоиндолила, 4,5,6,7-тетрагидротиазоло[5,4-с]пиридинила; (iii) необязательно замещенного -(C6-С20 арил)-(C3-С20 гетероциклила), где гетероциклил выбран из азетидинила, пиперидинила, морфолино, пиперазинила; (iv) необязательно замещенного -(С5-С20 гетероарил)-(C3-С20 гетероциклила), где гетероарил выбран из пиридинила и пиридазинила и гетероциклил выбран из азетидинила, пирролидинила, пиперидинила, пиперазинила, 1,4-диазепанила, 2,6-диазаспиро[3.3]гептанила, 7,9-диазабицикло[3.3.1]нонанила, гексагидропирроло[3,4-с]пирролила, морфолино; (v) необязательно замещенного -(C5-С20 гетероарил)-(C1-С6 алкила), где гетероарил выбран из пиразолила и пиридинила; или (vi) необязательно замещенного -(C5-С20 гетероарил)-С(=O)-(C3-С20 гетероциклила), выбранного из (пиридинил)-С(=O)-(морфолино); R6 представляет собой Н или C1-С3 алкил; Y1 и Y2 независимо выбраны из CR6 и N; где C1-С3 алкил, C3-С20 гетероциклил, C6-С20 арил и C5-С20 гетероарил необязательно замещены от одной до трех групп, независимо выбранных из D, F, Cl, Br, I, -СН3, -СН2СН3, -СН2СН(СН3)2, -СН2ОН, -СН2СН2ОН, -С(СН3)2ОН, -CH2F, -ОС(O)СН3, -СОСН3, -NHCH3, -N(CH3)2, =O, -ОН, -ОСН3, -OCH2CH2N(CH3)2, -ОР(O)(ОН)2, -СН2ОСН3, циклопропила, азетидинила, 1-(метилазетидин-3-ил)окси, N-метил-N-оксетан-3-иламино, азетидин-1-илметила, оксетанила и морфолино; где группа (а), образованная Z1, Z2, Z3, Z4, Z5, X и NC(O), образует структуры, приведенные в формуле изобретения, и при этом волнистая линия указывает на место присоединения.

Гетероциклилпиридинилпиразолы в качестве фунгицидного средства // 2616293

Настоящее изобретение относится к гетероциклилпиридинилпиразольным производным формулы (I), которая приведена ниже, и к их агрохимическим активным солям. В формуле (I) R1-R5, X1, U, Q, W, Y, n, a, b имеют указанные в формуле изобретения значения.

Антифибролитическое средство // 2621299

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к средству для снижения TGF-β-индуцированной дифференцировки миофибробластов. Применение дигитоксина для снижения TGF-β-индуцированной дифференцировки миофибробластов.

Антифибролитическое средство // 2621163

Изобретение относится к области фармакологии и пульмонологии и раскрывает применение сердечного гликозида уабаина в качестве средства, обладающего антифибротическим действием.

Производные пиразолохинолинона, их получение и их терапевтическое применение // 2621037

Изобретение относится к соединениям, соответствующим формуле (I), в которой R1, R2 и R3 имеют значения, указанные в п.1 формулы изобретения. Соединения по настоящему изобретению являются обратимыми и селективными ингибиторами метионинаминопептидазы типа 2 (MetAP2).

Композиции и способы профилактики или лечения заболеваний, состояний или процессов, характеризуемых аберрантной пролиферацией фибробластов и отложением внеклеточного матрикса // 2620066

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к композициям для применения в лечении фиброза легочной ткани, и может быть использовано в медицине. Композиции содержат полученный полипептид, имеющий аминокислотную последовательность YARAAARQARAKALARQLGVAA или его функциональный эквивалент, выбранный из группы FAKLAARLYRKALARQLGVAA, KAFAKLAARLYRKALARQLGVAA и HRRIKAWLKKIKALARQLGVAA.

Фенильное производное // 2619105

Изобретение относится к новым соединениям общей формулы (I-1), содержащим две циклические группы, в частности, где М1 - кольцо 1 и М2 - кольцо 2, каждое независимо, представляет собой феноксигруппы.

Способ лечения и профилактики хронических воспалительных заболеваний носоглотки у детей, ассоциированных с ингаляционной экспозицией бензола и формальдегида // 2618469

Изобретение относится к области медицины, а именно к педиатрии, и может быть использовано для лечения и профилактики хронических воспалительных заболеваний носоглотки (ХВЗН) у детей 4-10 лет, проживающих в зоне влияния промышленных предприятий в условиях загрязнения атмосферного воздуха бензолом и формальдегидом.

Способ и улучшенная фармацевтическая композиция для ускорения трансдермальной доставки ингибитора pde-5 // 2618462

Изобретение относится к медицине и представляет собой трансдермальную фармацевтическую композицию в форме геля или пластыря, которая содержит варденафил, усилитель, выбранный из группы, состоящей из лауроамфоацетата натрия, кватерния-60, изостеарамидопропил морфолина лактата и их комбинации, и фармацевтически приемлемый наполнитель.

Производные 5-замещенного хиназолинона, содержащие их композиции и способы их применения // 2617989

Предложен способ лечения или регулирования заболевания или нарушения, такого как рак, включающий введение пациенту 5-замещенного хиназолинонового соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, сольвата или стереоизомера.

Замещенные производные 3-тиазолоаминопропионовой кислоты и их применение в качестве фармацевтических препаратов // 2617843

Изобретение относится к соединению формул Ia и Ib, в виде любой его стереоизомерной формы или его физиологически приемлемой соли, где G представляет собой R71-O-C(О)-; R1 представляет собой водород; R2 представляет собой водород; R10 представляет собой R11; R11 представляет собой Ar; R30 выбран из группы, включающей (С3-С7)-циклоалкил и R32-CuH2u-, где u означает целое число, выбранное из группы, включающей 0, 1, 2 и 3; R32 представляет собой фенил, необязательно замещенный одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, включающей галоген, (C1-С6)-алкил, R33 и (C1-С6)-алкил-О-; R33 представляет собой фенил, необязательно замещенный одним заместителем, выбранным из галогена; R40 выбран из группы, включающей водород и (C1-C4)-алкил, или R30 и R40 вместе представляют собой (СН2)х, где х означает целое число, выбранное из группы, включающей 2, 3, 4 и 5; R50 представляет собой водород; R60 представляет собой водород; R71 представляет собой водород; Ar, независимо от каждой другой группы Ar, выбран из группы, включающей фенил и ароматический 5-членный или 6-членный моноциклический гетероцикл, который содержит один или два гетероатома, выбранных из азота, и присоединен через кольцевой атом углерода, где фенил и гетероцикл, все, необязательно замещены одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, включающей галоген, (C1-С6)-алкил, (C1-С6)-алкил-О- и CF3; где все алкильные заместители, независимо друг от друга и независимо от каких-либо других заместителей, необязательно замещены одним или несколькими атомами фтора.

Производные 1-фенил 2-пиридинилалкиловых спиртов в качестве ингибиторов фосфодиэстеразы // 2617401

Изобретение относится к соединениям общей формулы (I) где: R1 и R2, которые могут быть одинаковыми или разными, независимо выбраны из группы, состоящей из: - (С1-С6)алкила, возможно замещенного (С3-С7)циклоалкилом; - (С1-С6)галогеналкила; - (С3-С7)циклоалкила и - (С3-С7)гетероциклоалкила, содержащего гетероатом О; R3 представляет собой водород, (С1-С6)алкил или (С1-С3)алкилтио(С1-С6)алкил; А представляет собой частично ненасыщенную или ненасыщенную бициклическую кольцевую систему, состоящую из двух конденсированных моноциклических кольцевых систем В и С, изображенную в п.1 формулы, где кольцо С представляет собой моноциклическую арильную или моноциклическую гетероарильную кольцевую систему, кольцо В представляет собой 5- или 6-членную гетероциклоалкильную группу, ноль Y групп присоединено к кольцу С, n групп Y присоединено к кольцу В, и n представляет собой целое число от 1 до 3; и где кольцо В и С возможно содержит дополнительные гетероатомы в количестве от 1 до 4, выбранные из N, О или S; p представляет собой целое число от 0 до 3; Y представляет собой группу оксо; K выбран из группы, состоящей из: - (С1-С6)алкила, возможно замещенного одной (С3-С7)циклоалкильной группой; - (С3-С6)гетероциклоалкил(С1-С4)алкила, содержащего 1 или 2 гетероатома, выбранных из N или О; - (С3-С6)гетероциклоалкила, содержащего 1 или 2 гетероатома, выбранных из N или О, возможно замещенного одной или более чем одной (C1-С6)алкильной группой; - (С1-С4)галогеналкила; - OR4, где R4 выбран из группы, состоящей из: - Н; - (С1-С6)алкила, возможно замещенного (С3-С7)циклоалкилом или гетероарилом; - атомов галогена; - CN; - NO2; - NR5R6, где R5 и R6, которые могут быть одинаковыми или разными, независимо выбраны из группы, состоящей из: - Н; - ОН; - (C1-C4)алкил-NR7R8, где R7 и R8, которые могут быть одинаковыми или разными, независимо выбраны из группы, состоящей из: Н; (С1-С6)алкила, возможно замещенного (С1-С6)алкоксилом; и (C1-C6)алкил-NR9R10, где R9 и R10, которые могут быть одинаковыми или разными, представляют собой Н или (C1-С6)алкил; или они образуют вместе с атомом азота, к которому они присоединены, (С3-С6)гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1 или 2 гетероатома, выбранные из N, О или S, возможно замещенное (С1-С6)алкилом или (С1-С6)алкилкарбонильной группой; - (С1-С6)алкила, возможно замещенного (С1-С6)алкоксилом или гетероарилом, (С3-С6)гетероциклоалкилкарбонилом, содержащим 1 или 2 гетероатома, выбранные из N или О, гетероарилкарбонилом, причем все из них возможно дополнительно замещены одной или более чем одной (C1-С6)алкильной, (С1-С6)галогеналкильной или (С1-С6)алкоксильной группами, которые являются одинаковыми или разными и выбраны независимо; - SO2R11, где R11 представляет собой (С1-С6)алкил; - C(O)R12, где R12 представляет собой (С1-С6)алкил, возможно замещенный (С1-С6)алкоксилом; - (C1-C4)алкил-NR13R14, где R13 и R14, которые могут быть одинаковыми или разными, независимо выбраны из группы, состоящей из групп: - SO2(C1-С6)алкил, Н, (С1-С6)алкил и (С3-С7)гетероциклоалкил(С1-С4)алкил, содержащий 1 или 2 гетероатома, выбранных из N или О; и - SO2NR15R16, где R15 и R16, которые могут быть одинаковыми или разными, независимо представляют собой Н или (С1-С6)алкил; где группы с R4 по R16 имеют одинаковые или разные значения в каждом случае, если они присутствуют в более чем одной группе; и где гетероарил представляет собой моно- или бициклические кольцевые системы с 5-10 кольцевыми атомами, содержащими 1 или 2 гетероатома, выбранные из N, О или S; или его пиридин-N-оксиды, фармацевтически приемлемые соли или сольваты.

Ингибиторы cdk // 2621674

Изобретение относится к новым соединениям формулы Ia или их фармацевтически приемлемым солям, обладающим свойствами ингибиторов циклинзависимой киназы (CDK). Соединения могут быть использованы для лечения заболеваний или нарушений опосредованных CDK, таких как злокачественная опухоль.