Способ проведения иммунохроматографического анализа с высокой степенью выявления маркера

Изобретение относится к аналитической химии и представляет собой способ проведения иммунохроматографического анализа. Предложенный способ проведения иммунохроматографического анализа отличается тем, что при изготовлении тест-полоски используют прозрачную подложку. После контакта тест-полоски с пробой и завершения движения реагентов вдоль мембран на нитроцеллюлозную мембрану наносят вещество, растворяющее нитроцеллюлозу, но не нарушающее структуру подложки, например ацетонитрил. После высыхания растворителя на поверхности подложки образуется стекловидная прозрачная масса. Детекция на просвет оставшегося в зонах связывания маркера дает возможность его полной (100%-ной) регистрации при малом уровне неспецифического окрашивания вне зон связывания, что, в конечном итоге, повышает достоверность регистрации результатов анализа и позволяет выявлять наличие в пробах контролируемого соединения в более низких концентрациях. 2 ил., 1 табл., 1 пр.

 

Типичная иммунохроматографическая тест-система является мультимембранным композитом, состоящим из пластиковой подложки и зафиксированных на ней мембран: рабочей мембраны (как правило, нитроцеллюлозной), мембраны для конъюгата антитело-маркер (например, коллоидное золото), мембраны для анализируемой пробы и впитывающей мембраны.

Рабочая мембрана изготавливается из нитроцеллюлозы и имеет толщину 50-200 мкм. Чем больше толщина мембраны, тем большие объемы тестируемой пробы и маркера она поглощает, тем самым увеличивая их количество, проходящее через зоны связывания тест-полоски. Потенциально при этом должно происходить увеличение детектируемого сигнала - интенсивности окрашивания зон связывания. Однако это преимущество сводится на нет физическими ограничениями самой мембраны: из-за непрозрачности нитроцеллюлозы маркер виден, только если он находится вблизи поверхности мембраны.

В большинстве протоколов нанесения реагентов при изготовлении иммунохроматографических тест-систем антитела или иной связывающий иммунореагент, иммобилизуемый в аналитической и контрольной зонах, распределен по всей толщине мембраны. При этом маркер, связанный на глубине более ~10 мкм от поверхности (Rapid Lateral Flow Test Strips Considerations for Product Development. Bedford, MA: Millipore Corporation, 2001), становится невидимым, так как он закрыт вышерасположенными волокнами непрозрачной нитроцеллюлозной мембраны. Для материалов, используемых в иммунохроматографии, доля регистрируемого связывания маркера оценивается как 20% и менее (см. рис. 1).

Решением данной проблемы может быть использование иных маркеров, детектируемых неоптическими методами, например магнитных частиц (Shi, L., Wang, X.С, Liu, Y., Lu, Y., Rapid detection of shellfish major allergen tropomyosin using superparamagnetic nanoparticle-based lateral flow immunoassay. Advanced Materials Research 2011, Vol.311, pp. 36-445). Поскольку для регистрации магнитных свойств материал мембраны не является преградой, становится возможным детекция всей связанной метки. Однако этот метод требует специального регистрирующего оборудования, что сужает возможности его применения, особенно для внелабораторной диагностики.

Второй вариант - использование более тонких и крупнопористых мембран. При этом препятствия для визуализации действительно уменьшаются. Однако параллельно снижается объем впитываемой пробы и количество связывающих реагентов в аналитической зоне тест-полоски, что негативно сказывается на чувствительности анализа.

Нами предложен альтернативный вариант детекции маркера в иммунохроматографическом анализе, сохраняющий простоту оптической (в т.ч. визуальной) регистрации и позволяющий детектировать все связанные частицы маркера, а не только часть из них. Предлагаемая методика основана на растворении нитроцеллюлозной мембраны органическим растворителем непосредственно на поверхности подложки. Под действием растворителя (например, ацетонитрила) нитроцеллюлозная мембрана теряет пористую структуру, превращается в вязкий прозрачный гель, который сохраняет прозрачность после высыхания, а окрашенные частицы маркера не разрушаются и не вымываются с поверхности. Таким образом, вся часть тест-полоски, на которую была нанесена рабочая мембрана, становится прозрачной, и детектироваться могут все частицы связанного окрашенного маркера, независимо от глубины их расположения в исходной рабочей мембране.

Ближайший аналог предлагаемой разработки описан в публикации Vachereau, А. (1989). Transparency of nitrocellulose membranes with triton X-114. Electrophoresis, 10(7), 524-527 и заключается в заполнении пор мембраны соединением, повышающим ее прозрачность. Автор статьи описывает применение при проведении электрофореза и Western-блоттинга детергента Тритон Х-114. Однако в данном случае на мембрану наносится не высыхающий реагент, не изменяющий структуру мембраны, а лишь сближающий оптические характеристики волокон и пор. Кроме того, предложенная разработка не применялась в иммунохроматографии - ни в статье Vachereau, ни в более поздних публикациях.

Рассмотрим предлагаемую тест-систему и процедуру проведения анализа. В состав тест-полоски входят прозрачная пластиковая подложка (или прозрачная пленка), на которой зафиксирована рабочая мембрана, мембрана для конъюгата антитело-маркер (например, коллоидное золото), мембрана для анализируемой пробы и впитывающая мембрана. На рабочей мембране имеются две полосы с иммунореагентами - аналитическая и контрольная зоны. При проведении анализа тест-полоска контактирует с пробой. В результате последующего движения жидкости вдоль мембран и иммунохимических взаимодействий (как и в традиционной иммунохроматографии) в аналитической и контрольной зонах происходит связывание маркера, причем его количество в аналитической зоне отражает концентрацию определяемого соединения в пробе. После того как движение жидкости вдоль тест-полоски завершилось, на поверхность рабочей мембраны наносится несколько капель растворителя и выдерживается до высыхания, за время которого происходит растворение пористой структуры мембраны. Детекция результатов может проводиться при помощи фотометрического прибора (как специализированного, так и обычного офисного сканера со слайд-модулем) или визуально на просвет (оптимально - с использованием подсвечивающего матового столика).

Данное методическое решение обладает существенными преимуществами по сравнению с аналогами - известными разработками иммунохроматографических тестов, в которых связанный маркер также детектируется из всего объема аналитической зоны тест-полоски. Так, использование в качестве метки магнитных наночастиц и детекция их магнитных свойств описаны в ряде статей и технологизированных разработок, одним из примеров которых является работа Wang, Y., et al., Study of superparamagnetic nanoparticles as labels in the quantitative lateral flow immunoassay. Materials Science and Engineering, 2009. 29(3): p.714-718. Авторы предложили тест-полоску для количественной детекции хорионического гонадотропина. Тест-система позволяет проводить анализ за 20 мин, регистрируя связанную метку с помощью детектора магнитных частиц.

Принципиальный недостаток таких систем - невозможность бесприборной детекции результатов анализа. Для регистрации маркера необходимы специализированные приборы, способные выявлять магнитные частицы на очень небольших участках и тем самым корректно оценивать связывание маркера именно в аналитической зоне.

Реализуемость и практическая эффективность предложенного в патенте подхода подтверждается представленным ниже примером.

Пример 1. Иммунохроматографическое определение хлорамфеникола.

При изготовлении тест-полоски на прозрачной подложке (полипропиленовой пленке с клеевой основой производства 3М) фиксировали рабочую нитроцеллюлозную мембрану Millipore HF 120. При формировании аналитической зоны на рабочую мембрану наносили конъюгат хлорамфеникола с бычьим сывороточным альбумином из концентрации 0,25, 0,5 и 1 мг/мл и объема 0,1 мкл на 1 мм полосы. На мембрану для конъюгата наносили раствор коллоидного золота с иммобилизованными специфическими антителами (OD520=2) при расходе реагента 3,2 мкл/мм. Для нанесения реагентов использовали диспенсер «IsoFlow» фирмы «Imagene Technology» (США). С нижней части тест-полоски прикрепляли мембрану для анализируемой пробы, а с верхней - впитывающую мембрану. Полученные листы нарезали на индивидуальные тест-полоски шириной 3,5 мм.

При проведении анализа нижний край тест-полоски окунали в тестируемую пробу (раствор антибиотиков различной концентрации в фосфатном буфере). Через 10 мин тест-полоску помещали на горизонтальную поверхность, завершалось движение фронта жидкости вдоль тест-полоски, а последующая 15-минутная инкубация приводила к полному испарению жидкости. На поверхность рабочей мембраны наносили 200 мкл ацетонитрила (осч) и инкубировали 10 мин до полного высыхания. Для сравнения использовали такие же тест-полоски, не обрабатывавшиеся ацетонитрилом.

Результаты иммунохроматографического анализа представлены на рис. 2.

Окрашивание аналитической зоны детектировали визуально, а его интенсивность регистрировали с помощью сканера 9000А MarkII (Canon) с разрешением 1200 dpi, без автоматического контрастирования и цветокоррекции. На полученных цифровых изображениях выделяли прямоугольную область, захватывающую не менее чем 90% окрашенной зоны, и с помощью программы Total Lab (Nonlinear Dynamics, Великобритания) получали значение интенсивности окрашивания аналитической зоны.

Количественные данные об уровнях специфического окрашивания тест-полосок после анализа представлены в таблице 1. Как видно из результатов, амплитуда сигнала при использовании нового подхода значительно превосходит традиционные решения, особенно в случае малых амплитуд сигналов, что может быть связано с экранированием избытка частиц маркера друг другом при больших его концентрациях в соответствующих зонах. Аналогичные эффекты были получены при иммунохроматографическом определении микотоксина фумонизина. Полученные результаты подтверждают улучшение аналитических характеристик тест-системы в результате предложенной обработки.

Краткое описание чертежей

На рис. 1 представлена схема иммунохроматографической тест-полоски с указанием слоя мембраны, в котором возможна детекция маркера., где 1 - рабочая мембрана, 2 - мембрана для конъюгата, 3 - мембрана для анализируемой пробы, 4 - впитывающая мембрана, 5 - подложка.

На рис. 2 представлен внешний вид одной и той же тест-полоски до (А) и после (Б) растворения рабочей мембраны, цифрами отмечены контрольная (1) и аналитические (2-4) зоны.

В Таблице 1 представлены данные об интенсивности связывания маркера в контрольной и аналитических зонах данных иммунохроматографической тест-полоски до и после ее обработки ацетонитрилом.

Способ проведения иммунохроматографического анализа и детектирования его результатов на основании интенсивности окрашивания в аналитической зоне тест-полоски, отличающийся тем, что рабочая мембрана предварительно иммобилизуется на прозрачной пластиковой подложке, после проведения анализа растворяется органическим растворителем, а маркер в аналитической зоне детектируется на просвет.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для прогнозирования течения онкологических заболеваний. В периферической крови больного определяют количество Т-лимфоцитов CD3+, 10*9/л, и их субпопуляций: лимфоцитов CD4+ и CD8+, 10*9/л, %, кроме того, вычисляют значение частного от деления количества субпопуляций лимфоцитов CD4+ на количество CD8+.

Изобретение относится к области медицины и касается способа ранней диагностики бронхиальной астмы у детей в возрасте 5 лет и младше. Сущность способа заключается в том, что проводят анализ данных анамнеза, оценку клинических симптомов, изучение аллергологического статуса, которое проводят с использованием общего анализа крови, в котором определяют уровень эозинофилов и уровень общего иммуноглобулина Е в сыворотке крови, проведение цитологического исследования индуцированной мокроты, для определения в ней процентного содержания эозинофилов.
Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ прогнозирования развития тяжелого поражения центральной нервной системы при клещевом энцефалите с помощью анализа ликвора, отличающийся тем, что в ликворе больного определяют уровень серотонина, при его значении более 20 нг/мл прогнозируют среднетяжелое поражение центральной нервной системы с развитием непаралитической менингеальной формы, менее 20 нг/мл - прогнозируют тяжелое поражение центральной нервной системы с формированием паралитических очаговых форм.

Изобретение относится к медицине, в частности к иммунохимии, а именно к способу получения материала для биологического связывания с помощью сорбирующих колонок. Сущность изобретения заключается в том, что разработан способ получения селективного иммуносорбента для удаления антител - IgG к десмоглеину 3 типа из сыворотки крови больных пузырчаткой с использованием твердофазного носителя, заключающийся в том, что для его получения рекомбинантый человеческий десмоглеин 3 типа (Dsg3) иммобилизируют путем ковалентного связывания с твердофазным носителем, в качестве которого применяют агарозный сорбент, несущий на своей поверхности N-гидроксисукцинимидные группы: NHS-активированную агарозу.

Изобретение относится к медицине, а именно к аллергологии, и может быть использовано для оценки гиперчувствительности по высвобождению гистамина из лейкоцитов цельной крови.

Изобретение относится к области методов клинико-лабораторной диагностики и касается способа прогнозирования рецидивирующего вульвовогинального кандидоза (ВВК). Сущность способа: проводят генотипирование пациентки по полиморфным локусам генов IL4:-33 С>Т [rs2070874]; CCL2:2493(-2578) A>G [rs1024611]; IL1B:-598(-1552) A>G [rs16944] с применением ПЦР в режиме реального времени и определяют долю лактобацилл в составе вагинальной микрофлоры при помощи комплекта реагентов "Фемофлор 16", после чего полученные данные включают в функцию Z=1,063*IL1B+1,112*IL4+1,483*CCL2-0,044*Lact+1,326, где 1,326 - некоторая константа, IL1B - количество аллелей G в локусе IL1B:-598(-1552) A>G [rs16944] гена IL1B, IL4 - количество аллелей С в локусе IL4:-33 С>Т [rs2070874] гена IL4, CCL2 - количество аллелей G в локусе CCL2:2493(-2578) A>G [rs1024611] гена CCL2, Lact - доля лактобацилл (%) в составе вагинальной микрофлоры.
Изобретение относится к медицине, а именно к гематологии, и предназначено для прогнозирования течения иммунной тромбоцитопении после спленэктомии. Для осуществления изобретения определяют массу удаленной селезенки, выполняют гистологическую проводку образцов послеоперационного материала общепринятым способом с приготовлением парафиновых блоков.

Изобретение относится к области педиатрии, а конкретно к аллергологии и диетологии раннего возраста, и может быть использовано аллергологами и/или диетологами для прогнозирования формирования толерантности при аллергии к белку коровьего молока у детей раннего возраста.

Группа изобретений относится к области медицины, в частности к клинической и биологической психиатрии. Регистрируют электроэнцефалограмму (ЭЭГ) до начала терапии больных приступообразной шизофренией с маниакально-бредовыми расстройствами.
Изобретение относится к медицине и касается способа прогнозирования угрозы невынашивания при гриппе A(H3N2) у женщин в первом триместре беременности. Сущность способа заключается в том, что у женщин в первом триместре гестации при гриппе A(H3N2) в период разгара заболевания в первой сыворотке крови определяют величину титра противовирусных антител (А), оценивают уровень TNF-α (пг/мл) (В).

Изобретение относится к области биохимии. Описаны антиген-связывающие фрагменты (Fab), селективно связывающиеся с ботулиническим нейротоксином С, в частности гуманизированные Fab. Представлены клетки дрожжей, продуцирующие указанные гуманизированные Fab. Предложен способ получения описанных гуманизированных Fab. Также предложены способ детекции ботулинического нейротоксина С и набор для детекции ботулинического нейротоксина С. Изобретение позволяет получить реагенты для детекции ботулинического нейротоксина С, обладающие высокой специфичностью связывания с указанным нейротоксином. 8 н. и 1 з.п. ф-лы, 12 ил., 6 табл., 9 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использован для выявления предраковых изменений в молочной железе. Для этого определяют концентрацию интерлейкина 8 (ИЛ-8) в супернатанте пробы клеток крови пациента, инкубированных с раково-эмбриональным антигеном (РЭА) и без РЭА. После чего вычисляют индекс влияния (ИВ) раково-эмбрионального антигена (ИВ РЭА) на продукцию ИЛ-8 (ИВ РЭА ИЛ-8) по формуле: ИВ РЭА ИЛ-8=А/Б, где А - уровень продукции цитокина под влиянием РЭА, Б - уровень спонтанной продукции цитокина. При величине ИВ РЭА ИЛ-8, не превышающей 14, выявляют предраковые изменений в молочной железе (склерозирующий аденоз или пролиферат молочной железы). Использование данного способа позволяет выявлять предраковые изменения в молочной железе, что позволяет своевременно начать адекватное лечение. 4 пр.

Изобретение относится к области медицины, конкретно к онкологии, и касается способов прогнозирования безрецидивной выживаемости у больных раком молочной железы. Сущность способа: определяют уровень экспрессии YKL-39 по технологии ТaqMan с помощью специфичных праймеров и пробы Sense 5’-aacaacaaggttatcatcaaggac-3’, AntiSense 5’-tttgggattcttggttttgag-3’, Probe FAM-5’-agtgaagtgatgctctaccagaccat-3’-BHQ1, далее проводят ПЦР-анализ экспрессии гена белка YKL-39, оценивают относительную экспрессию гена белка YKL-39 с помощью метода Pfaffl в условных единицах (УЕ) относительно гена рефери GAPDH, причем в качестве калибратора используют нормальную ткань молочной железы, в которой при проведении исследования аналогичным вышеописанному способом уровень экспрессии гена белка YKL-39 составляет 1 УЕ. При уровне экспрессии YKL-39 более 1 УЕ прогнозируют высокую, а при уровне экспрессии гена белка YKL-39 менее 1 УЕ - низкую вероятность длительного периода безметастатической выживаемости. 1 табл.

Изобретение относится к области анализа биологических проб. Способ анализа проб включает в себя анализ клинико-химических и иммунологических параметров, а также включает установку картриджей для реагентов в приемное устройство, установку сосуда для пробы в пробоприемник, определение клинико-химических и иммунологических параметров с применением измерительной кюветы, промывку или извлечение использованных измерительных кювет, извлечение использованных картриджей для реагентов и сосуда для проб. При этом для каждого определяемого клинико-химического или иммунологического параметра в приемное устройство вставляют отдельный картридж для реагентов, который содержит ячейки с необходимыми для анализа реагентами-индикаторами, причем в картриджи для реагентов для анализа клинико-химических параметров помещают по меньшей мере один реагент-индикатор, а в картриджах для анализа иммунологических параметров, предусматривают первую ячейку с конъюгатом, вторую ячейку с субстратным раствором и твердую фазу. Изобретение обеспечивает возможность одновременного определения клинико-химических и иммунологических параметров пробы. 10 з.п. ф-лы, 3 ил.

Изобретение относится к медицине и к клинической биохимии и может быть использовано для оценки содержания циркулирующих десиалированных липопротеидов низкой плотности (цмЛПНП). Сущность способа: используют твердофазный лектин-иммуноферментный метод, основанный на связывании цмЛПНП с 100 мкл раствора агглютинина RCA120 в изотоническом фосфатном буфере (ИБФ) в концентрации 30 мкг/мл, иммобилизованного в лунках планшета, промывке лунок буферным раствором с бычьим сывороточным альбумином (БСА), содержащим 2 г/л БСА, внесении по 100 мкл меченных пероксидазой поликлональных антител 1 мкг/мл к белку аполипопротеину В, инкубировании 1 ч при комнатной температуре, внесении 100 мкл исследуемого образца крови в ИФБ, инкубировании в течение 2 ч при 20°С, промывке, проявлении цитратным буфером рН 4,5, содержащим ортофенилендиамин и перекись водорода, инкубировании 30 мин при 37°С, остановке реакции добавлением серной кислоты и количественной оценке цмЛПНП за счет измерения оптической плотности при длине волны 492 нм, что позволяет определять содержание цмЛПНП без их предварительного выделения. Изобретение обладает более высокой чувствительностью и воспроизводимостью и позволяет избирательно анализировать цмЛПНП, таким образом дает возможность точно и надежно измерять концентрацию цмЛПНП без предварительного выделения фракции ЛПНП. Способ является простым, доступным и быстрым в осуществлении, позволяет проводить скрининговые обследования с целью выявления наличия атеросклеротического процесса на доклинической стадии и при диспансеризации населения. 3 ил., 4 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к дерматологи, и представляет собой способ подготовки пробы для проведения иммунофлюоресцентного исследования при диагностике болезни Хейли-Хейли, включающий размещение на предметном стекле криостатных срезов кожи лабораторного животного, нанесение на них типированной сыворотки больного, инкубацию при температуре 37,2°C во влажной камере в течение 45 мин, промывку срезов, отличающийся тем, что криостатные срезы кожи лабораторного животного предварительно обрабатывают 100% охлажденным ацетоном с температурой 4,0-6,0°C в течение 3-5 мин, затем высушивают в течение 2-3 мин при комнатной температуре, причем промывку срезов осуществляют в течение 3-5 минут. Осуществление изобретения позволяет повысить достоверность результатов диагностики. 3 пр., 4 ил.

Изобретение относится к медицине и предназначено для прогнозирования вероятности развития метастазов в лимфоузлы у пациентов с диагнозом рак желудка. Осуществляют амплификацию фрагментов генетических локусов В2М, HV2 и CFLAR методом полимеразной цепной реакции в реальном времени с помощью набора высокоспецифичных праймеров на матрице выделенной ДНК, проводят количественную интерпретацию результатов амплификации и расчет относительной копийности генов по формуле rC=2-(Ct(ген мишень)-Ct(B2M)), где rС - относительная копийность гена в опухолевой ткани, Ct - среднее значение сигналов флюоресценции, сравнивают полученные значения относительной копийности генов с прогностическими, и при значениях rСHV2<870 и rСCFLAR>0,40 прогнозируют отсутствие метастазов, а при значениях rСHV2>870 и rСCFLAR<0,40 прогнозируют развитие метастазов. Способ позволяет осуществить раннее прогнозирование развития метастазов у больных раком желудка. 2 пр., 1 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к онкогинекологии, и может быть использовано для прогноза возникновения рецидива у больных раком вульвы. Для этого в ткани больных раком вульвы иммуногистохимическим методом полуколичественно оценивают экспрессию маркеров ангиогенеза - CD34, апоптоза - р53, пролиферативной активности - Ki-67. При значении Ki-67 в пределах 80-90%, р53 в пределах 66,3-76,5%, CD34 в пределах 5,16-5,78% прогнозируют короткую ремиссию. При значении Ki-67 в пределах 7,6-9,8%, р53 в пределах 11,4-17%, CD34 в пределах 2,82-3,68% прогнозируют длительную ремиссию. Использование данного изобретения позволяет прогнозировать наступления короткой или длительной ремиссии у больных раком вульвы и позволяет на основе прогностических факторов оценивать эффективность лечения рака вульвы. 2 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к авиакосмической медицине, и может быть использовано для оценки оптимального уровня компенсаторно-приспособительных и адаптационных возможностей организма космонавтов в условиях космического полета. Способ включает получение препарата хромосом, его окрашивание и определение цитогенетических показателей, при значении в пределах 18,0-20,6 условных единиц показателя (дозы) активных рибосомных генов оценивают уровень компенсаторно-приспособительных и адаптационных возможностей организма космонавта как оптимальный. Изобретение обеспечивает возможность использовать для оценки один универсальный показатель в условиях космического полета при повышении достоверности оценки, в том числе непосредственно на борту пилотируемого космического аппарата, а также для прогноза необходимости проведения дополнительных реабилитационных процедур в период реадаптации космонавтов к земной гравитации после окончания космических полетов. Оно также может найти широкое применение при первичном отборе кандидатов в космонавты, а также на этапах предварительной диагностики профпригодности лиц опасных профессий, для прогнозирования их профессионального долголетия, оценки рисков развития заболеваний, вызванных вредными условиями профессиональной деятельности, прогноза их течения и исхода. 3 пр., 4 табл.

Изобретение относится к области ветеринарной микробиологии и касается иммуноферментной тест-системы для серологической диагностики анаэробной энтеротоксемии сельскохозяйственных животных, вызываемой бактериями Clostridium perfringens (Cl. perfringens), а также контроля напряженности поствакцинального иммунитета. Представленная иммуноферментная тест-система содержит специфические антигены штаммов Cl. perfringens №28 (тип А), №1 (тип В), №392 (тип С), №213 (тип D), полученные озвучиванием бактериальных клеток на ультразвуковом дезинтеграторе, последующим осаждаем эндотоксина сульфатом аммония и диализом против водопроводной воды. Антигены представляют собой специфический белок в концентрации 8-10 мкг/см3, адсорбированный на поверхности полистироловых лунок в карбонатно-бикарбонатном буфере. Также набор содержит контрольную положительную сыворотку, полученную к антигенам Clostridium perfringens типов А, В, С, D с активностью в ИФА 1:6400-1:12800, контрольную отрицательную сыворотку, конъюгат антивидовой, калий фосфорнокислый однозамещенный, калий фосфорнокислый двухзамещенный, натрий хлористый, хромоген (ортофенилендиамин), перекись водорода, стоп-реагент и панели для постановки реакции иммуноферментного анализа. Тест-система позволяет проводить диагностику анаэробной энтеротоксемии у животных и определить напряженность поствакцинального иммунитета. 2 табл., 5 пр.

Изобретение относится к аналитической химии и представляет собой способ проведения иммунохроматографического анализа. Предложенный способ проведения иммунохроматографического анализа отличается тем, что при изготовлении тест-полоски используют прозрачную подложку. После контакта тест-полоски с пробой и завершения движения реагентов вдоль мембран на нитроцеллюлозную мембрану наносят вещество, растворяющее нитроцеллюлозу, но не нарушающее структуру подложки, например ацетонитрил. После высыхания растворителя на поверхности подложки образуется стекловидная прозрачная масса. Детекция на просвет оставшегося в зонах связывания маркера дает возможность его полной регистрации при малом уровне неспецифического окрашивания вне зон связывания, что, в конечном итоге, повышает достоверность регистрации результатов анализа и позволяет выявлять наличие в пробах контролируемого соединения в более низких концентрациях. 2 ил., 1 табл., 1 пр.

Наверх