Способ получения экстракта из лишайника рода cladonia, обладающего бактерицидными свойствами



Способ получения экстракта из лишайника рода cladonia, обладающего бактерицидными свойствами
Способ получения экстракта из лишайника рода cladonia, обладающего бактерицидными свойствами
Способ получения экстракта из лишайника рода cladonia, обладающего бактерицидными свойствами

 


Владельцы патента RU 2624865:

федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Красноярский медицинский университет имени профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого" Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)

Изобретение относиться к фармацевтической промышленности, в частности к способу получения экстракта из лишайников рода Cladonia Hill ex P. Browne, смеси лишайниковых кислот и лихенинов, обладающего бактерицидными свойствами. Способ получения экстракта из лишайника рода Cladonia, обладающего бактерицидными свойствами, включает очистку лишайника от механических примесей, измельчение слоевища лишайника, настаивание с карбонатом натрия, кипячение раствора, фильтрацию, при этом измельченную до порошкообразного состояния лишайниковую массу заливают 10-кратным по отношению к массе объемом 96% этилового спирта и кипятят в течение 1 часа, после чего полученный раствор охлаждают и засыпают измельченным карбонатом натрия в количестве, равном количеству измельченной лишайниковой массы, затем раствор настаивают в течение 5 часов при температуре 5-7°С, после настаивания раствор нагревают до кипения и фильтруют в горячем виде. Вышеописанный способ является исчерпывающим и позволяет получить экстракт с высокими бактерицидными свойствами. 3 табл.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к фармации, и предназначено для получения экстракта (смеси лишайниковых кислот и лихенинов), обладающего бактерицидными свойствами, из лишайника рода Cladonia Hill ex P. Browne.

Органические специфические гипоаллергенные вещества лишайников (лихенины, или, лишайниковый крахмал, и лишайниковые кислоты), не синтезирующиеся другими организмами, потенциально являются перспективными для поиска и получения новых биологически активных веществ, способных подавлять рост и снижать жизнеспособность болезнетворных и постоянно мутирующих микроорганизмов, приспособившихся к уже известным видам антибиотических средств [Муравьева Д.А. Фармакогнозия. - М.: Медицина, 2002. - 656 с.]. Лишайниковые вещества практически не имеют побочных эффектов, не вызывают аллергических реакций, раздражения и ожогов кожных покровов, не несут раздражающего эффекта для ЦНС. Их применение не ограничено хроническими заболеваниями печени и почек, желудочно-кишечного тракта, ОРЗ, ОРВИ [Аньшакова В.В. Разработки на основе лишайникового сырья (твердофазные биопрепараты) / В.В. Аньшакова, А.В. Степанова, А.Ш. Смагулова и др. // Вестник спортивной науки. – 2013. - №6. - С. 28-30; Грибова Н.А. Применение новой пищевой добавки для приготовления кондитерских изделий / Н.А. Грибова, Н.Л. Султаева // Сервис в России и за рубежом. – 2014. - №2 (49). - С. 109-115; Степанова А.В. Токсикологическая и гигиеническая оценка БАД «Ягель Детокс» / А.В. Степанова, В.В. Аньшакова // Фундаментальные исследования. Биологические науки. - №9. - 2014. - С. 105-109].

Известно несколько способов получения экстрактов, обладающих бактерицидными свойствами, из слоевищ лишайников различных видов.

Известен способ получения экстракта из дубового мха (Evernia prunastri (L.) Ach.), включающий измельчение сырья, экстракцию гексаном и этиловым спиртом, однократное настаивание в течение 5 часов при температуре кипения этилового спирта, фильтрацию, 2-3-кратное промывание отработанного сырья С2Н5ОН и концентрирование [Патент 2348683 РФ, МПК С11В 1/10, С11В 9/02, бюл. №7, 10.03.2009 г. Способ получения экстракта из дубового мха].

Недостатками данного способа являются его нерентабельность и малый выход конечного продукта - смеси органических кислот, фосфолипидов и глицеридов с побочными продуктами экстракции. Использование гексана в больших количествах по отношению к массе обрабатываемого сырья повышает себестоимость предложенного способа, а малый выход экстракта не предполагает промышленное внедрение. На втором этапе обработки лишайникового сырья требуется большое количество этилового спирта (соотношение массы сырья к объему спирта составляет 1:9) и последующая промывка С2Н5ОН, что также повышает себестоимость данного способа.

Известен способ получения сухого экстракта Cetraria islandica (L.) Ach. этиловым спиртом с концентрацией от 35% до 45% [Патент 2321419 РФ, МПК А61K 36/09, А61K 9/20, бюл. №10, 10.04.2008 г. Экстракт Cetraria islandica (L.) Ach. сухой, таблетированная форма].

К недостатку данного способа следует отнести сложность его выполнения, поскольку заморозка и разморозка, повышающая конечный продукт экстракции, являются достаточно энергоемкими процессами.

Наибольшее влияние на процесс извлечения оказывают степень измельчения сырья, время и количество экстракций. С увеличением времени и кратности этилового спирта заметна тенденция к уменьшению доли полисахаридов в экстрактивных веществах. Интенсификация процесса ведет к неконтролируемому изменению нативного комплекса биологически активных веществ за счет разрушения гемицеллюлоз, так экстракция 70% и 96% растворами этанола приводит к увеличению токсичности раствора. Поэтому способ не является достаточно универсальным и в каждом разном случае дает разный выход экстрактивных веществ.

Известен способ получения усниновой кислоты экстракцией смеси лишайников родов Usnea и Cladonia органическими растворителями (хлороформом, четыреххлористым углеродом, ацетоном, гексаном, петролейным эфиром, нефрасом и смесью перечисленных растворителей) с последующим выделением целевого продукта путем упаривания органического растворителя и осаждения из экстракта в системе хлороформ-спирт (1:10) или из гексана [Патент 2317076 РФ, МПК А61K 31/343, А61К 36/09, бюл. №5, 20.02.2008 г. Способ получения усниновой кислоты].

К недостатку данного способа следует отнести то, что исходное сырье - сумма из более чем 10 видов лишайников родов Usnea и Cladonia - собрано в разных экотопах, и установление того вида лишайника, который является главным источником основного действующего вещества, что будет экскретироваться, весьма затруднительно, а сбор всех, задействованных в способе видов, в других экологических условиях практически невозможен. Использование нескольких органических растворителей и последующее их выпаривание делает способ затратным.

Наиболее близким к заявляемому является способ получения лихенина [Патент 2129159 РФ, МПК С12Р 19/02, С12Р 19/04, С08В 37/00, Бюл. №5, 20.04.1999 г. Способ получения лихенина из лишайника], включающий стадии очистки лишайника от механических примесей, измельчение его до частиц размером 10-15 мм, отстаивание слоевища лишайника в воде при комнатной температуре в течение 24 часов и нейтрализацию лишайниковых кислот раствором Na2CO3, промывку растительной массы водой до нейтральной реакции и повторное измельчение таллома до частиц размером 3-5 мм. После этого лихенин экстрагируют, фильтруют, очищают и сушат распылением или сублимацией. Данный способ взят за прототип.

Общим с заявляемым способом является получение лихенина, а именно очистка лишайника от механических примесей, измельчение слоевища лишайника, настаивание с карбонатом натрия (Na2CO3), кипячение раствора и фильтрация.

К недостаткам прототипа следует отнести продолжительность его исполнения. В общей сложности на проведение экстрагирования требуется 2 суток, а для нейтрализации лишайниковых кислот требуется 20-кратный по отношению к массе сырья объем Na2CO3 в трех повторностях, после чего этот раствор сливают и больше не используют, что повышает себестоимость способа. В итоге полученный экстракт содержит только растворенный лехинин без лишайниковых кислот и не обладает бактерицидными свойствами.

Задачей предлагаемого способа является получение экстракта (смеси лишайниковых кислот и лихенинов) из лишайника рода Cladonia Hill ex P. Browne, обладающего бактерицидными свойствами.

Поставленную задачу достигают тем, что слоевище лишайника предварительно промывают проточной водой, измельчают до порошкообразного состояния, кипятят в течение 1 часа в 10-кратном по отношению к полученной массе измельченного лишайника объеме 96% этилового спирта, затем полученный раствор охлаждают и засыпают измельченным Na2CO3 в количестве, равном количеству измельченной лишайниковой массы, затем настаивают в течение 5 часов при температуре 5-7°С, после настаивания раствор нагревают до кипения и фильтруют в горячем виде.

Сущность предлагаемого способа заключается в следующем. Сухой лишайник, предварительно очищенный от механических примесей, и слоевище которого промыто, измельчают до порошкообразного состояния.

Измельченную лишайниковую массу заливают 10-кратным по отношению к массе объемом 96% этилового спирта и кипятят в течение 1 часа для экстракции спирторастворимых лишайниковых кислот. Так как не все кислоты способны растворятся в спиртовой среде и большинство из них (усниновая, эверновая, физодовая, атранорин и др.) растворяются в бензоле, хлороформе, амиловом спирте, ледяной уксусной кислоте, едких щелочах и барите, то для преобразования лишайниковых кислот в водорастворимые формы без потери их бактерицидных свойств получают их натриевые соли. Для этого спиртовой раствор после кипячения охлаждают в холодильнике до 17°С и засыпают измельченным Na2CO3 в количестве, равном количеству измельченной лишайниковой массы. Реакция проходит на холоде, поэтому раствор настаивают в течение 5 часов при температуре 5-7°С. Так как натриевые соли и лихенины хорошо растворяются в горячем этиловом спирте, далее раствор нагревают до кипения и в горячем виде фильтруют.

Возможность осуществления заявляемого способа показана следующим примером. Сухой лишайник из рода Cladonia (Cl. arbuscula (Wallr.) Hale et WL Culb.) в количестве 10 грамм, предварительно очищенный от механических примесей и промытый в проточной воде, измельчают до порошкообразного состояния. Измельченную лишайниковую массу заливают 100 мл 96% этилового спирта и кипятят в течение 1 часа для экстракции спирторастворимых лишайниковых кислот и лихенинов, после чего раствор охлаждают в холодильнике до 17°С. Для исчерпывающей экстракции нерастворимых лишайниковых кислот в приготовленный охлажденный раствор добавляют 10 грамм измельченного Na2CO3 для получения растворимых натриевых солей лишайниковых кислот. После пятичасового настаивания при температуре 5-7°С раствор нагревают до кипения для максимального извлечения солей лишайниковых кислот из слоевища. Далее в горячем виде фильтруют через ватно-марлевый фильтр. Осадок не используют. Полученный таким способом экстракт - смесь натриевых солей лишайниковых кислот и лихенинов, обладающий бактерицидными свойствами - имеет темно-коричнево-зеленый цвет из-за растворенных в спирте пигментов слоевища лишайника, не обезвоживается и хранится в герметично закрытой посуде в холодильнике. Используется в разведенном виде в соотношении 5 мл экстракта на 250 мл дистиллированной воды.

Для подтверждения бактерицидных свойств полученного экстракта было проведено опрыскивание изолированных помещений одинаковых по площади (18 м2) и объему пространства (54 м3), но различающихся обсемененностью микроорганизмами. По степени биологического загрязнения воздуха помещения условно были разделены на три группы: сильный, средний и незначительный уровни загрязнения.

Высев микроорганизмов в изолированной среде проводили по методу Коха в чашки Петри, по пять чашек на каждое исследуемое нами помещение (первую чашку использовали как контроль, четыре последних - экспериментальные), после чего культивировали в течение 3 суток в термостате при температуре 37°С.

После добавления полученных нами экстрактов лишайника по 15, 20, 25, 30 мл в каждую из экспериментальных чашек Петри, полученных из исследуемых нами помещений, и культивировании высевов сразу всех чашек каждого помещения (4 экспериментальных и 1 контрольная) в термостате при температуре 37°С еще в течение 3 суток, было замечено подавление развития и частичное уменьшение размера колоний микроорганизмов в каждой из экспериментальных чашек по сравнению с контролем (табл. 1).

Полученные данные сравнивали с результатами аналогичного эксперимента, в котором использовали экстракт, полученный согласно способа прототипа [Патент 51708 Украина. МПК А01В 79/00, бюл. №14, 26.07.2010 г. Способ аэросанации изолированной среды с помощью экстрактов лишайников].

После приготовления экстракта лишайника Cladonia arbuscula, из жидкостного пневматического распылителя (производительность которого составляет 20 мл/мин) было проведено опрыскивание исследуемых помещений (из расчета 2,5-3,0 мл экстракта на 1 м3 помещения) и повторный высев микроорганизмов из воздуха каждые 2, 24, 36, 48 часа дезинфекционной выдержки. Полученные результаты представлены в таблицах 2, 3.

Таким образом, проведенные нами исследования доказывают тот факт, что предлагаемый способ получения экстракта из лишайника рода Cladonia Hill ex P. Browne, смеси лишайниковых кислот и лихенинов, является наиболее эффективным по сравнению с известными аналогами, и позволяет проводить исчерпывающую экстракцию веществ, обладающих повышенными бактерицидными свойствами и сразу готовых к применению. Положительный эффект предлагаемого способа заключается в его дешевизне, простоте и минимизации времени осуществления экстракции. Способ может быть использован для производства санирующих средств.

Способ получения экстракта из лишайника рода Cladonia, обладающего бактерицидными свойствами, включающий очистку лишайника от механических примесей, измельчение слоевища лишайника, настаивание с карбонатом натрия, кипячение раствора, фильтрацию, и отличающийся тем, что измельченную до порошкообразного состояния лишайниковую массу заливают 10-кратным по отношению к массе объемом 96% этилового спирта и кипятят в течение 1 часа, после чего полученный раствор охлаждают и засыпают измельченным карбонатом натрия в количестве, равном количеству измельченной лишайниковой массы, затем раствор настаивают в течение 5 часов при температуре 5-7°С, после настаивания раствор нагревают до кипения и фильтруют в горячем виде.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к способу получения средства, обладающего антиаритмическим действием. Указанный способ предусматривает выделение технической суммы алкалоидов - технического продукта из растений рода Aconitum (борец) семейства Ranunculaceae (лютиковые) и его очистку, при которой выполняют растворение технического продукта в одном из одноатомных алифатических насыщенных спиртов из группы: метанол, этанол, затем добавляют к полученному раствору спирт из группы одноатомных алифатических насыщенных спиртов с количеством атомов углерода от 3 до 5 в количестве 4-20 об.% от полученного раствора, упаривают полученный раствор до полного удаления спирта из группы: метанол, этанол и проводят окончательную кристаллизацию целевого продукта в спирте из группы одноатомных алифатических насыщенных спиртов с количеством атомов углерода от 3 до 5, после чего проводят фильтрацию, промывку и сушку с получением целевого очищенного продукта.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения биологически активного продукта из кожи марала. Способ получения биологически активного концентрата из кожи маралов, заключающийся в том, что кожу измельчают до состояния фарша и подвергают ферментативному гидролизу с последующей экстракцией под действием ультразвуковых колебаний, при этом ферментативный гидролиз проводят в присутствии ферментов пепсина и папаина, причем фермент пепсин вводится в процесс в начале экстрагирования смеси, а папаин - в середине временного периода процесса экстракции, после фильтрации осуществляют сушку экстракта при определенных условиях.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и касается способа получения гиперицина и псевдогиперицина из сырьевой фитомассы растений видов зверобой пятнистый и зверобой продырявленный.

Изобретение относится к средству, обладающему антимикробным, репаративным и ранозаживляющим действием. Указанное средство включает экстракт сухой из побегов рододендрона золотистого с содержанием суммы простых фенолов и фенологликозидов не менее 28%, полученный путем экстракции сырья с размером частиц 2-3 мм водой очищенной при соотношении сырья и экстрагента 1:10, время экстракции при первом контакте фаз 2 ч, втором - 1,5 ч, третьем - 1 ч, при перемешивании сырья и температуре 60±5°С.

Изобретение относится к химической переработке древесины, конкретно к получению из древесины березы ксилозы, целлюлозного продукта и лигнинового сорбента. Способ включает стадию предгидролиза древесных опилок при атмосферном давлении водным раствором 2-3 мас.% серной кислоты, при гидромодуле 8, температуре 100°C, продолжительности 3-5 ч, при интенсивном перемешивании, стадию делигнификации древесного остатка при атмосферном давлении водным раствором, содержащим 30 мас.% уксусной кислоты и 4-5 мас.% пероксида водорода и катализатор 2 мас.% серной кислоты, температуре 100°C, гидромодуле 10-15, продолжительности 3,5 ч, при интенсивном перемешивании, отгон уксусной кислоты из отработанного варочного раствора, разбавление кубового остатка и осаждение лигнина, его экстракцию при гидромодуле 2 дистиллированной водой, нагретой до 90°C, в течение 10 минут с получением лигнинового сорбента.

Изобретение относится к способу получения средства, обладающего тиреотропной активностью. Указанный способ характеризуется тем, что проводят трехкратную экстракцию растительного материала при температуре 70°C при отношении 1 мас.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и касается способа получения средства, обладающего стресспротективной и антиоксидантной активностью. Способ заключается в том, что траву серпухи васильковой, измельченную до размера 1,0-2,0 мм, экстрагируют трехкратно при температуре 60°C при соотношении сырья в мас.ч.

Изобретение относится к химической переработке древесных отходов, в частности, к комплексной переработке коры березы с получением ценных химических продуктов. Способ переработки березовой коры включает в себя измельчение коры и разделение ее на луб и бересту; обработку бересты спирто-водно-щелочным раствором; отделение твердого остатка; отгон из фильтрата этилового спирта; отделение выпавшего бетулина; осаждение суберина соляной кислотой на холоде; отделение осажденного суберина с последующей сушкой под вакуумом; обработку луба спирто-водно-щелочным раствором; отделение твердого остатка; отгон водно-спиртового раствора из фильтрата до образования сухого остатка - полифенолов; растворение полифенолов в воде; добавление раствора формальдегида для образования геля; помещение геля в этанол для замещения воды на спиртовую фазу; высушивание при комнатной температуре и давлении с образованием готового продукта - органического аэрогеля; объединение твердых остатков луба и бересты; нейтрализацию и промывание с последующей сушкой готового продукта - энтеросорбента.

Изобретение относится к относится к химии высокомолекулярных природных соединений, а именно к получению биополимера растительного происхождения - меланина и его модификации с целью повышения антиоксидантной активности, и может быть использовано для производства лечебно-профилактических препаратов, биологически активных и пищевых добавок, а также в качестве антиоксидантов и противостарителей в пищевой и химической промышленности.

Предложенное изобретения относится к фармацевтической промышленности, а также к химии высокомолекулярных природных соединений. Способ получения меланина из чаги, включающий заливание измельченной чаги водой, настаивание при комнатной температуре, кипячение смеси, фильтрование извлечения, добавление 25% раствора хлористоводородной кислоты до рН 1,0-2,0, перемешивание полученной смеси, отстаивание, отделение осадка фильтрованием, сушку полученного меланина, при этом после отстаивания надосадочный раствор декантируют, выпавшие хлопья меланина растворяют добавляемым при перемешивании раствором гидроксида натрия с доведением рН до 7-8, а для очистки и осаждения меланина в полученный раствор вливают ацетон при определенных условиях.

Группа изобретений относится к микробиологии и медицине, может быть использована для подавления инфекции, вызванной устойчивыми к антибиотикам штаммами Pseudomonas aeruginosa.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к пептидной химии, и может быть использовано в медицине. Получены синтетические пептиды на основе бета-шпилечных полипептидов.

Изобретения касаются вакцинных составов против Streptococcus pneumoniae и их применения. Представленные вакцинные составы содержат фармацевтически приемлемый носитель и первый полипептид, имеющий по меньшей мере 95% идентичность с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 265, 266 или 268, и второй полипептид, имеющий по меньшей мере 90% идентичности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 9, 10, 20, 21, 6, 7, 18 или 19.

Изобретение относится к фармацевтике и медицине и представляет собой кремнийцинкборсодержащий глицерогидрогель для местного применения, обладающий ранозаживляющей, регенерирующей, бактерицидной и противогрибковой активностью, состав которого отвечает формуле mSi(C3H7O3)4⋅ZnC3H6O3⋅nHB(C3H6O3)2⋅xC3H8O3⋅yH2O, где 1≤m≤3, 1≤n≤2, 9≤х≤15, 28≤у≤70, получен взаимодействием тетраглицеролата кремния в избытке глицерина Si(C3H7O3)4⋅xC3H8O3, где 1,5≤х≤4,5, моноглицеролата цинка в избытке глицерина ZnC3H6O3⋅6C3H8O3, бисглицеролата бора НВ(C3H6O3)2 и воды в мольном соотношении Si(C3H7O3)4:ZnC3H6O3:НВ(C3H6O3)2:C3H8O3:H2O, равном (1÷3):1:(1÷2):(9÷15):(28÷70), при температуре 40-60°С и перемешивании.
Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к средству для лечения заболеваний кожи, обладающему противовоспалительным, антибактериальным, противовирусным, противогрибковым действием, представляющему собой масляный экстракт из листьев Gynura procumbens, полученному определенным способом.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и медицине и представляет собой антибактериальную композицию в виде суппозитория и способ ее получения, где композиция содержит жидкую субстанцию бактериофагов, включающую, по меньшей мере, три бактериофага с титром не менее 2×108 БОЕ на суппозиторий каждого штамма, суппозиторную основу, включающую витепсол или твердый жир типа А, а также твин-80, причем компоненты в композиции находятся, в определенном соотношении, в % на 1 суппозиторий.

Изобретение относится к средству, обладающему антимикробным, репаративным и ранозаживляющим действием. Указанное средство включает экстракт сухой из побегов рододендрона золотистого с содержанием суммы простых фенолов и фенологликозидов не менее 28%, полученный путем экстракции сырья с размером частиц 2-3 мм водой очищенной при соотношении сырья и экстрагента 1:10, время экстракции при первом контакте фаз 2 ч, втором - 1,5 ч, третьем - 1 ч, при перемешивании сырья и температуре 60±5°С.
Изобретение относится к медицине, а именно кардиохирургии и трансплантологии, может быть использовано для профилактики пневмоцистной пневмонии у реципиентов сердца в раннем послеоперационном периоде после трансплантации сердца.

Изобретение относится к медицине и фармацевтической промышленности и представляет собой антибактериальную композицию, предназначенную для изготовления имплантируемых изделий медицинского назначения на основе полидиметилметилвинилсилоксанового каучука, включающую аэросил, антиструктурирующую добавку, кремнегидрид, платиновый катализатор и антимикробную добавку, отличающуюся тем, что в качестве антимикробной добавки композиция содержит рифампицин, причем компоненты в композиции находятся в определенном соотношении, в масс.ч.
Изобретение относится к области медицины, фармацевтики и нанотехнологий. Предлагается фармацевтическая композиция, обладающая антимикробной и противогрибковой активностью, содержащая трийодметан, нанесенный на алюмосиликатные нанотрубки с внешним диаметром трубок - 60-160 нм, внутренним диаметром - 10-60 нм и длиной трубок - 100-5000 нм, взятые при следующих соотношениях, масс.%: трийодметан 50, алюмосиликатные нанотрубки 50.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и представляет собой применение соединения Нуфлеина бисангидродигидрохлорида формулы I ,обладающего избирательной, цитотоксической активностью на клетки рака шейки матки человека.
Наверх