Способ диагностики миопатии в эксперименте

Данное изобретение относится к экспериментальной биологии и представляет собой способ диагностики миопатии в эксперименте, включающий исследование подопытного животного, отличающийся тем, что в двуглавой мышце, выделенной из передней конечности, определяют содержание изоформ NT- и N2A-тайтина, и при одновременном выполнении условий: содержание NT-изоформы ≤0,016 и содержание N2A-изоформы ≤0,085 диагностируют миопатию. Осуществление изобретения обеспечивает повышение достоверности диагностики миопатии за счет использования конкретных лабораторных показателей. 2 пр.

 

Данное изобретение относится к экспериментальной биологии и медицине и может быть использовано для диагностики миопатии у экспериментальных животных.

Миопатия - обобщенное название множества заболеваний мышечной системы, обусловленных нарушением сократительной способности мышечных волокон (Орлова М.А., Троицкая Л.А. Разработка проблемы когнитивного развития детей с соединительнотканной патологией и наследственными нарушениями опорно-двигательного аппарата: результаты историко-психологического анализа. // Материалы III Международной научно-практической конференции «Психология XXI века: теория, практика, перспективы». - Прага, 2013. - С. 12-20).

В настоящее время в зависимости от этиологического фактора выделяют врожденные нейродегенеративные заболевания мышечной системы, а также миопатии лекарственного генеза, общими проявлениями которых являются мышечная слабость, уменьшение объема активных движений, снижение мышечного тонуса. При этом описанные проявления являются не специфичными для миопатии и могут встречаться при других заболеваниях.

Поскольку верификация миопатии в эксперименте зачастую основана на субъективном описании изменения двигательной активности животных в динамике эксперимента, то выделение лабораторных критериев позволит исключить субъективный фактор и существенно повысить диагностику миопатии в эксперименте.

В качестве прототипа нами выбран способ диагностики миопатии, описанный в авторском свидетельстве СССР №1312633 (опубликовано 23.05.87). Исследуют подопытное животное, в качестве которого выбирают кролика. Животному удаляют вилочковую железу, а на ее место имплантируют фрагмент свежей вилочковой железы больного дистрофией Дюшена. Повторную имплантацию осуществляют через 5-6 дней в область спины, используя фрагмент консервированной вилочковой железы того же больного. В обоих случаях имплантируемые фрагменты по массе равны удаленной вилочковой железе.

Согласно прототипу критериями для диагностики миопатии является описание симптоматики в динамике эксперимента: нарушение двигательной активности, постепенная дистрофия мышц спины, передних и задних конечностей подопытного животного. Недостатками прототипа является недостаточная достоверность за счет субъективизма и использования неспецифических критериев.

Задачей предлагаемого изобретения является разработка высокообъективного, достоверного способа диагностики миопатии в эксперименте.

Техническим результатом, проявляющимся при использовании данного изобретения, является повышение достоверности диагностики миопатии за счет использования конкретных лабораторных показателей.

Технический результат достигается тем, что исследуют подопытное животное - кролика, в двуглавой мышце которого определяют содержание NT-изоформы тайтина и N2А-изоформы тайтина. При одновременном выполнении условий: содержание NT-изоформы ≤0,016 и содержание N2A-изоформы ≤0,085 диагностируют миопатию.

Подробное описание способа.

Для исследования используют двуглавую мышцу, которую выделяют из передней конечности подопытного животного - кролика. Кролика обезболивают и умерщвляют в соответствии с принципами Хельсинской декларации о гуманном отношении к животным.

Выделение тайтина, идентификацию его изоформ и определение содержания NT-изоформы и N2A-изоформы тайтина проводят по методике, разработанной для данного белка (Вихлянцев И.М., Подлубная З.А. Изоформный состав тайтина в мышцах при патологических процессах // Биофизика. - 2008. - Т. 53, вып. 6. - С. 1058-1065).

При одновременном выполнении условий: содержание NT-изоформы ≤0,016 и содержание N2A-изоформы ≤0,085 диагностируют миопатию.

Выбор белка тайтина в качестве лабораторного критерия для верификации миопатии обусловлен его полифункциональной ролью в организации структуры и функционировании мышечной ткани. Согласно современным представлениям, тайтин является каркасом для сборки толстых нитей саркомера и обеспечивает его высокоупорядоченную структуру, участвует в регуляции актин-миозинового взаимодействия и межклеточных коммуникациях. Более ранними исследованиями снижение уровня тайтина выявлено при ряде патологий скелетной мускулатуры и миокарда (Вихлянцев И.М., Подлубная З.А. Новые изоформы тайтина (коннектина) и их функциональная роль в поперечно-полосатых мышцах млекопитающих: факты и предположения. // Успехи биологической химии. - 2012. - Т. 52. - С. 239-280).

Для разработки диагностических критериев нами были исследованы 25 животных - кроликов в возрасте 1,3-1,5 лет, массой 2,1-2,3 кг. Контрольную группу составили 10 интактных животных. В качестве группы сравнения использовали 15 животных с экспериментальной миопатией, которая была смоделирована согласно способу, описанному в авторском свидетельстве СССР №1312633 (опубликовано 23.05.87).

Для исследования использовали двуглавую мышцу, которую выделяли из передней конечности подопытного животного. Кролика обезболивали и умерщвляли в соответствии с принципами Хельсинской декларации о гуманном отношении к животным.

Содержание изоформ тайтина определяли в двуглавой мышце передней конечности кролика. Выделение тайтина, идентификацию его изоформ и определение содержания NT-изоформы и N2A-изоформы проводили по методике, разработанной для данного белка (Вихлянцев И.М., Подлубная З.А. Изоформный состав тайтина в мышцах при патологических процессах // Биофизика. - 2008. - Т. 53, вып. 6. - С. 1058-1065).

Анализ изменений содержания тайтина позволил выявить статистически достоверное (р<0,001) снижение содержания NT-изоформы и содержания N2A-изоформы тайтина в мышечной ткани животных группы сравнения относительно контрольной группы, и определить пограничные количественные значения содержания NT-изоформы ≤0,016 и содержания N2A-изоформы ≤0,085, позволяющие верифицировать миопатию (Белоусова Е.С., Виноградова Е.В., Саркисян О.Г., Микашинович З.И. Уровень тайтина как показатель мышечной дистрофии в эксперименте // Материалы международной научно-практической конференции «Актуальные вопросы современной медицины». - Екатеринбург, 2015. - С. 59-61).

Практическая реализуемость предлагаемого способа подтверждается следующими данными экспериментального исследования.

Пример 1: кролик-самец, возраст 1,2 года, масса 2,25 кг с экспериментальной миопатией, которая была смоделирована согласно способу, описанному в авторском свидетельстве СССР №1312633 (опубликовано 23.05.87). Животное было обезболено и умерщвлено в соответствии с принципами Хельсинской декларации о гуманном отношении к животным. Было проведено исследование согласно заявляемому способу.

Для исследования использовали двуглавую мышцу передней конечности животного.

Выделение тайтина, идентификацию его изоформ и определение содержания NT-изоформы и N2A-изоформы проводили по методике, разработанной для данного белка (Вихлянцев И.М., Подлубная З.А. Изоформный состав тайтина в мышцах при патологических процессах // Биофизика. - 2008. - Т. 53, вып. 6. - С. 1058-1065).

Было получено: содержание NT-изоформы = 0,014, N2A-изоформы = 0,085.

Поскольку были одновременно выполнены условия: содержание NT-изоформы = 0,014<0,016 и N2A-изоформы = 0,085, то у животного была диагностирована миопатия. Подтверждением диагноза служили результаты визуального осмотра и исследование поведения животных, при котором были отмечены вялость, дрожание в конечностях, животное падало на задние лапы.

Пример 2: кролик-самка, возраст 1,4 года, масса 2,00 кг с экспериментальной миопатией, которая была смоделирована согласно способу, описанному в авторском свидетельстве СССР №1312633 (опубликовано 23.05.87). По истечении срока эксперимента животное было обезболено и умерщвлено в соответствии с принципами Хельсинской декларации о гуманном отношении к животным.

Для исследования использовали двуглавую мышцу передней конечности животного.

Выделение тайтина, идентификацию его изоформ и определение содержания NT-изоформы и N2A-изоформы проводили по методике, разработанной для данного белка (Вихлянцев И.М., Подлубная З.А. Изо-формный состав тайтина в мышцах при патологических процессах // Биофизика. - 2008. - Т. 53, вып. 6. - С. 1058-1065).

Было получено: содержание NT-изоформы = 0,016, N2A-изоформы = 0,084. Поскольку были одновременно выполнены условия: содержание NT-изоформы = 0,016 и N2A-изоформы = 0,084<0,085, то у животного была диагностирована миопатия. Подтверждением диагноза служили результаты визуального осмотра и исследование поведения животных, при котором были отмечены шаткость, дрожание в конечностях, животное падало на бок, не могло отталкиваться задними лапами.

С помощью предлагаемого способа нами было исследовано 15 кроликов в возрасте 1,3-1,5 лет, массой 2,1-2,3 кг. В мышечной ткани всех животных содержание NT-изоформы тайтина находилось в пределах 0,010-0,016, содержание N2A-изоформы тайтина - от 0,070 до 0,085. У всех животных наблюдали нарушение двигательной активности. Всем животным была диагностирована миопатия.

Таким образом, предлагаемый способ диагностики миопатии в эксперименте эффективен, достоверен и позволяет исключить субъективный фактор при диагностике миопатии за счет использования специфических лабораторных критериев.

Способ диагностики миопатии в эксперименте, включающий исследование подопытного животного, отличающийся тем, что в двуглавой мышце, выделенной из передней конечности, определяют содержание изоформ NT- и N2A-тайтина, и при одновременном выполнении условий: содержание NT-изоформы ≤0,016 и содержание N2A-изоформы ≤0,085 диагностируют миопатию.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к медицине и может быть использовано для профилактики фармацевтического повреждения клеток крови, включающей назначение пациенту курса внутрисосудистых инъекций и инфузий растворов лекарственных средств.
Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии и репродуктологии, и может быть использовано для доклинической диагностики преждевременного истощения яичников у женщин репродуктивного возраста.

Изобретение относится к области медицины, а именно к детским инфекционным болезням, и может быть использовано для определения степени тяжести острого инфекционного мононуклеоза, вызванного вирусом Эпштейна-Барр у детей.

Изобретение относится к области медицины, а именно к терапии. Для индивидуального прогнозирования обострений хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ) у больных с сопутствующим сахарным диабетом (СД) 2 типа в течение ближайшего года наблюдения проводят измерение систолического артериального давления (САД), вычисление индекса массы тела (ИМТ), тест с 6-минутной ходьбой (ТШХ) и тест оценки степени влияния ХОБЛ на качество жизни пациентов - COPD Assessment Test (CAT).
Изобретение относится к области медицины и касается способа выявления нервных структур в зубочелюстной системе. Сущность способа заключается в том, что проводят фиксацию объекта в течение 3-5 суток в растворе, содержащем концентрированную муравьиную кислоту - 3,5 мл, хлоралгидрат - 3,5 г, дистиллированную воду - 100 мл, причем 2-3 раза в сутки проводят замену фиксирующего раствора.

Изобретение относится к области медицины, а именно к кардиологии, терапии и анестезиологии, и может быть использовано для оценки повышенного риска возникновения флеботромбозов у пациентов с ишемической болезнью сердца (ИБС).
Изобретение относится к области медицины и касается способа диагностики микробного фактора при хроническом неспецифическом эндометрите. Сущность способа заключается в том, что у больной на 7-9-й день менструального цикла берут бактериологический посев из полости матки и цервикального канала с помощью внутриматочной цитощетки.
Изобретение относится к области медицины и касается способа диагностики микробного фактора при хроническом неспецифическом эндометрите. Сущность способа заключается в том, что у больной на 7-9-й день менструального цикла берут бактериологический посев из полости матки и цервикального канала с помощью внутриматочной цитощетки.
Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии, и может быть использовано для предупреждения появления и дальнейшего развития клиновидных дефектов зубов.
Изобретение касается определения угрозы нарушения имплантации зародыша в слизистую оболочку матки при обострении цитомегаловирусной инфекции на первом триместре гестации.

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ изготовления системы измерения аналита, имеющей сенсоры с тиснеными каналами измерительной камеры. В одном варианте осуществления сенсоры являются удлиненными тест-полосками для тестирования in vitro, причем каждая тест-полоска имеет подложку, по меньшей мере, один электрод, канал, вытисненный в электроде, и накрывающую ленту, покрывающую, по меньшей мере, часть тисненого канала. Способ позволяет устранить необходимость в калибровочном коде при использовании сенсоров с измерительным прибором. 9 з.п. ф-лы, 6 ил.

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, репродуктологии, эмбриологии, и может быть использовано для определения in vitro перспективных эмбрионов для последующей имплантации в матку при проведении процедуры экстракорпорального оплодотворения (ЭКО). Для этого посредством цейтраферной видеозаписи у 2-клеточных эмбрионов определяют последовательность и ориентацию плоскостей делений (горизонтальная/экваториальная - Е, вертикальная/меридиональная - М) каждого бластомера. При этом учитывают, что такие плоскости могут быть: последовательными экваториальными (ЕЕ), последовательными меридиональными (ММ), меридиональным, затем экваториальным (ME), экваториальным, затем меридиональным (ЕМ). И в случае, если последовательности делений в этих плоскостях соответствуют вариантам (ЕМ) или (ММ), то такие эмбрионы считают перспективными для последующей имплантации в матку при проведении процедуры ЭКО. Способ обеспечивает раннее выявление и перенос наиболее перспективных для имплантации эмбрионов, что повышает частоту имплантации и беременности. 2 ил., 2 табл., 2 пр.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для определения длительности химиотерапии после хирургического лечения туберкулеза органов дыхания у детей и подростков. Для этого после хирургического лечения туберкулеза органов дыхания у детей и подростков проводят патогистологические исследования операционного материала и определяют степень активности воспалительного процесса и степень роста микобактерий туберкулезного комплекса. Также определяют наличие осложнений в послеоперационном периоде, неустранимых побочных реакций на химиотерапию, степень остаточных изменении в легких и/или внутригрудных лимфатических узлах. При объеме хирургического вмешательства не более двух сегментов, отсутствии в операционном материале признаков активности или легкой активности воспалительного процесса, отсутствии роста микобактерий туберкулезного комплекса, отсутствии осложнений в послеоперационном периоде, отсутствии побочных реакций на химиотерапию, отсутствии или незначительных остаточных изменении в легких и/или внутригрудных лимфатических узла устанавливают длительность химиотерапии в течение трех месяцев. При тех же показателях, но, как минимум, с двумя дополнительными показателями, касающихся объема хирургического вмешательства или более двух сегментов, или комбинированных резекций, или удаления внутригрудных лимфатических узлов или плеврэктомии, умеренной или выраженной активности воспалительного процесса, выявленном росте микобактерий туберкулезного комплекса, развитии осложнений в послеоперационном периоде и развитии побочных реакций на химиотерапию устанавливают длительность химиотерапии в течение шести месяцев. Изобретение позволяет уменьшить количество рецидивов заболевания и исключить необоснованно длительные курсы химиотерапии у детей и подростков. 1 ил.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и касается прогнозирования преждевременных родов. Для этого выделяют геномную ДНК, определяют полиморфизм генов интерлейкинов IL1b Т>СЗ1 и TNFa - G>A308 и рассчитывают прогностический коэффициент Y по формуле Y=exp(2,54+0,19*X1+12,28*X2+0,07*X3+0,63*X4+2,43*X5+1,97*X6)/(1+ехр(-2,54+0,19*Х1+12,28*Х2+0,07*Х3+0,63*Х4+2,43*Х5+1,97*Х6), где Y - вероятность развития преждевременных родов; X1 - полиморфизм гена интерлейкина IL1b Т>СЗ1 (0 - нормальная гомозигота или гетерозигота, 1 - мутантная гомозигота); Х2 - полиморфизм гена интерлейкина TNFa - G>A308 (0 - нормальная гомозигота или гетерозигота, 1 - мутантная гомозигота); Х3 - возраст пациентки (в годах); Х4 - вредные привычки (курение) (0 - нет; 1 - есть); Х5 - наличие выкидышей и преждевременных родов (0 - нет; 1 - есть); Х6 - наличие абортов (0 - нет; 1 - есть). При значении прогностического коэффициента Y>0,5 прогнозируют преждевременные роды. Способ обеспечивает точность прогноза более 84% за счет учета индивидуальных анамнестических и генетических данных пациенток. 4 пр.

Изобретение относится к медицине и экологии. Производят выборку групп населения, подлежащих сравнению. Определяют у каждого обследуемого человека из обеих групп значения следующих лабораторных маркерных показателей тиреоидных нарушений: тироксин свободный (Т4); тиреотропный гормон (ТТГ); антитела к тироглобулину (АТ к ТГ); антитела к тиреоиднойпероксидазе (антитела к ТПО). Также определяют маркерные показатели ультразвукового исследования (УЗИ) щитовидной железы (ЩЖ) на предмет наличия или отсутствия увеличения ее объема выше/ниже физиологической нормы, нарушения ее структуры и/или кровотока. В каждой группе находят среднее значение для каждого маркерного показателя. Для качественных показателей находят средние значения, принимая значение «ноль» в случае отсутствия отклонений от нормы, и значение «единица» в случае наличия отклонений от указанной нормы. Используя указанные средние значения для каждого маркерного показателя, определяют вклад каждого из них в формирование тиреоидных нарушений. Для чего находят с помощью параболического закона для каждого 1-ого маркерного показателя функцию отклонения Fi, где Fi∈[0; 1]. Каждому среднему маркерному диагностическому показателю придают экспертный весовой коэффициент Ci. Вычисляют значение интегрального индекса Р для совокупности указанных маркерных показателей по каждой группе населения, подлежащих сравнению, по заявленной формуле. Затем производят сравнение установленных интегральных индексов по каждой группе, и те из них, которые характеризуются большей величиной интегрального индекса, считаются группой с более высоким риском формирования тиреоидных нарушений на популяционном уровне. Способ позволяет информативно и доказательно провести сравнительную интегральную оценку на популяционном уровне формирования тиреоидных нарушений у населения, судить о различиях в условиях воздействия различных негативных факторов за счет комплексной оценки наиболее значимых показателей. 2 з.п. ф-лы, 3 табл.

Группа изобретений относится к медицине и предназначена для неинвазивного мониторинга свойств биологической ткани. Последовательно проводят следующие этапы: сбора данных импеданса и вспомогательных данных от участка тела пользователя; предварительной обработки полученных данных, причем предварительная обработка заключается в фильтрации полученных данных и удалении артефактов из полученных данных импеданса путем обнаружения не относящихся к пище физиологических факторов на основе вспомогательных данных; восстановления динамики кривой глюкозы путем применения обученного алгоритма машинного обучения, оценивания гликемического индекса из динамики кривой глюкозы, предоставления пользователю результатов оценки и автоматического мониторинга привычек питания на основе упомянутых результатов оценки для определенного периода времени. Группа изобретений позволяет повысить эффективность неинвазивного мониторинга гликемических показателей и скорректировать привычки питания. 2 н. и 40 з.п. ф-лы, 5 ил.

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ прогнозирования летального исхода у реанимационных пациентов кардиохирургического профиля, отличающийся тем, что вычисляют интегральный индекс (ИИ) по формуле: где K1 - отношение количества тромбоцитов у пациента к значению нижней границы референтного интервала;К2 - отношение активности антитромбина III у пациента к значению нижней границы референтного интервала;К3 - отношение содержания фибриногена у пациента к значению нижней границы референтного интервала;К4 - отношение содержания фибрин-мономера у пациента к референтному значению;К5 - отношение содержания Д-димера у пациента к референтному значению,и при значении интегрального индекса ниже 10,0 прогнозируют летальный исход у реанимационных пациентов кардиохирургического профиля. Осуществление изобретения позволяет повысить точность прогнозирования летального исхода. 2 пр.

Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ прогнозирования риска развития быстрорастущей миомы матки, заключающийся в том, что исследуют ультразвуковые параметры матки с подсчетом количества миоматозных узлов, методом краевой дегидратации менструальных выделений (МВ) определяют наличие параллельных и волокнистых структур и рассчитывают коэффициент Р: где z рассчитывают по формуле:z=b1×x1+b2×x2+b3×х3+а,где b1 - коэффициент, равный 2,172; x1 - волокнистые структуры в MB: наличие «2»; отсутствие «1»; b2 - коэффициент, равный 2,238; x2 - параллельные структуры в MB: наличие «2»; отсутствие «1»; b3 - коэффициент, равный 1,568; x3 - количество узлов; а - константа, равная –10,915; и при значении Р>0,5 дополнительно методом иммуноферментного анализа исследуют уровни лигандов APRIL и TRAIL, и при значении APRIL более 11,1 нг/мл, TRAIL менее 22,5 пг/мл прогнозируют риск развития быстрорастущей миомы матки. Изобретение обеспечивает повышение точности прогнозирования. 2 табл., 2 пр.

Изобретение относится к медицине в области онкологии и представляет собой способ прогнозирования резистентности опухоли к таргетной терапии цетуксимабом у больных плоскоклеточным раком языка и слизистой дна полости рта, включающий исследование крови, отличающийся тем, что за два дня до начала полихимиотерапевтического лечения с включением таргетной терапии цетуксимабом, у больного плоскоклеточным раком языка и слизистой дна определяют EGF, sEGFR, затем рассчитывают соотношение EGF/sEGFR и при значении этого соотношения в пределах 55,3-66,9 прогнозируют отсутствие резистентности опухоли к терапии цетуксимабом, а при значении этого показателя в пределах 92,6-117,8 прогнозируют наличие резистентности опухоли к терапии цетуксимабом. Изобретение обеспечивает раннее прогнозирование резистентности опухоли к таргетной терапии цетуксимабом. 2 пр., 1 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу определения биологической активности дефибротида. Приводят в контакт дефибротид, эуглобулин млекопитающего и субстрат, специфичный для плазмина, который в результате реакции с плазмином дает измеряемый продукт. Субстрат, специфичный для плазмина, представляет собой соединение формулы А1-А2-А3-Х, где A1 и А2 являются неполярными аминокислотами, А3 является лизином или аргинином и X является измеряемым продуктом. Измеряемый продукт выбирают из группы, состоящей из пара-нитроанилина и 2-нафтиламина. Измеряют количества образовавшегося продукта в последовательных временных точках для определения биологической активности дефибротида. Изобретение обеспечивает точные и правильные измерения активности дефибротида даже в присутствии примесей, таких как, например, РНК, гепарин, деградированный дефибротид. Способ является чувствительным для обнаружения концентраций дефибротида, равных или меньших чем 2,5 мкг/мл, и дает хорошую корреляцию до максимальных величин концентраций, равных или более высоких чем 1000 мкг/мл. 13 з.п. ф-лы, 3 ил., 4 табл.

Данное изобретение относится к экспериментальной биологии и представляет собой способ диагностики миопатии в эксперименте, включающий исследование подопытного животного, отличающийся тем, что в двуглавой мышце, выделенной из передней конечности, определяют содержание изоформ NT- и N2A-тайтина, и при одновременном выполнении условий: содержание NT-изоформы ≤0,016 и содержание N2A-изоформы ≤0,085 диагностируют миопатию. Осуществление изобретения обеспечивает повышение достоверности диагностики миопатии за счет использования конкретных лабораторных показателей. 2 пр.

Наверх