Способ прогнозирования интраоперационных геморрагических осложнений при тяжелой форме диабетической ретинопатии

Изобретение относится к офтальмологии и предназначено для прогнозирования интраоперационных геморрагических осложнений при тяжелой форме пролиферативной диабетической ретинопатии. Сущность способа: проводят определение уровня VEGF-A в сыворотке крови и при его концентрации, равной или более 300 пг/мл, прогнозируют интраоперационные геморрагические осложнения. Способ обеспечивает возможность разработки дифференцированной дооперационной тактики подготовки пациента к хирургическому вмешательству, направленной на снижение риска интраоперационных геморрагических осложнений у пациентов группы риска. 4 пр.

 

Предлагаемое изобретение относится к офтальмологии и предназначено для прогнозирования интраоперационных геморрагических осложнений при хирургии пролиферативной диабетической ретинопатии (ПДР).

Сахарный диабет (СД) занимает третье место в мире по распространенности после сердечно-сосудистых и онкологических заболеваний. По оценкам Международной Федерации Диабета (IDF) в 2015 году в мире СД страдали более 415 миллионов человек, а согласно прогнозам к 2040 году число больных достигнет 642 миллиона [1].

Диабетическая ретинопатия является микрососудистым осложнением СД и одной из самых частых причин слепоты и слабовидения среди трудоспособного населения развитых стран. Как показало исследование WESDR среди пациентов с СД, распространенность слепоты, возникшей до 30 лет (раннее начало), составляет 3,6%, а среди заболевших в возрасте после 30 лет (позднее начало) - 1,6%. В этих группах пациентов случаи слабовидения составили 1,4% и 3% соответственно [2, 3, 4].

Одной из наиболее частых причин значительного снижения зрения и инвалидизации пациентов с диабетическим поражением глаз является прогрессирование патологического процесса до осложненной стадии пролиферативной диабетической ретинопатии (ПДР), характеризующейся выраженной фиброваскулярной пролиферацией, тракционной деформацией и отслойкой сетчатки, гемофтальмом, рубеозом радужки и развитием неоваскулярной глаукомы.

На сегодняшний день основная роль в патогенезе прогрессирования диабетической ретинопатии отводится сосудистому эндотелиальному фактору роста (vascular endothelial growth factor, VEGF). Наибольшее физиологическое значение для регуляции пролиферации и формирования эндотелиальных клеток в процессе неоангиогенеза у человека имеет VEGF-A, являющийся гомодимерным гликопротеидом, состоящим из двух субъединиц с молекулярной массой по 23 кДА.

В экспериментах in vitro и in vivo доказано, что активация синтеза VEGF происходит в условиях гипоксии и при повышенном содержании глюкозы в крови животных или в среде культивирования клеток пигментного эпителия сетчатки. Эффект усиливается при сочетании этих двух патологических факторов [5, 6].

Клинические исследования выявили значительное повышение концентрации VEGF-A в стекловидном теле (СТ) и водянистой влаге у пациентов с ПДР в сравнении с показателями пациентов без СД [7, 8]. Повышение содержания VEGF-A во влаге передней камеры и СТ коррелировало с тяжестью пролиферативного процесса в глазу [9, 10, 11, 12, 13] и не зависело от типа СД, длительности заболевания, способа контроля гликемии, уровня HbA1c, наличия артериальной гипертензии или нефропатии [14, 15].

Основным способом лечения пациентов с осложненной ПДР является хирургическое вмешательство - микроинвазивная витрэктомия. Наиболее частым интраоперационным осложнением витрэктомии является геморрагическая активность новообразованных сосудов в процессе отсепаровки фцброваскулярных мембран, что существенно затрудняет проведение манипуляций, снижает анатомический и функциональный результат хирургии.

Ряд исследований выявил корреляцию между уровнем VEGF-A в СТ больных с ПДР и исходами хирургических вмешательств [16, 17, 18, 19].

Актуальным представляется прогнозирование интраоперационных геморрагических осложнений на дооперационном этапе, что позволит разработать дифференцированную тактику подготовки пациента к хирургическому вмешательству, снизить частоту осложнений, повысить анатомический и функциональный результат операций.

Ближайшим аналогом предлагаемого изобретения является способ того же назначения, включающий измерение уровня VEGF-A в стекловидном теле (СТ) с целью прогноза результата витрэктомии у больных с осложненной ПДР. Исследовали уровень VEGF-A в СТ у пациентов с ПДР для того, чтобы прогнозировать результат операции. Уровень VEGF определяли с помощью проточного цитометра. Пациентов наблюдали в течение 6 месяцев после Операции. В раннем послеоперационном периоде кровоизлияние произошло в 25% из 60 глаз с исходно повышенным уровнем VEGF-A в СТ. Высокий уровень VEGF-A в СТ во время витрэктомии у больных с ПДР был идентифицирован как существенный фактор риска внутриглазного кровоизлияния в раннем послеоперационном периоде [20]. Недостатком данного способа является сложность получения проб биологической жидкости - С Т - и невозможность использования способа на дооперационном этапе с целью выбора дифференцированной тактики предоперационной подготовки пациента.

Задачей предлагаемого изобретения является разработка доступного и простого способа прогнозирования результатов хирургического лечения (микроинвазивной витрэктомии) при осложненной ПДР.

Техническим результатом предлагаемого способа является возможность разработки дифференцированной дооперационной тактики подготовки пациента к хирургическому вмешательству, направленной на снижение риска интраоперационных геморрагических осложнений у пациентов группы риска. Технический результат достигается за счет определения в сыворотке крови уровня VEGF-A.

Разработка способа, позволяющего прогнозировать развитие интраоперационных геморрагических осложнений за счет выявления в сыворотке крови (СК) сосудистого эндотелиального фактора роста (VEGF-A) и своевременное проведение профилактических и лечебных мероприятий позволяет снизить риск интраоперационных геморрагических осложнений, улучшить функциональный и анатомический результат операции.

Нами было проведено исследование по определению уровня VEGF-A в сыворотке крови (СК) у здоровых и пациентов с осложненной ПДР. В СК практически здоровых людей VEGF-A определяется на уровне в среднем 90,0±24,5 пг/мл. В то же время у пациентов с осложненной ПДР сывороточный уровень VEGF-A определялся в среднем на уровне 226,4±146,3 пг/мл, достоверно превышающем таковое в группе здоровых людей (p<0,01).

У пациентов с исходно повышенным уровнем VEGF-A в СК более 300 пг/мл ходе микроинвазивной витрэктомии в процессе отсепаровки фиброваскулярных мембран отмечалась продолжительная геморрагическая активность, затрудняющая проведение операции (интраоперационные геморрагические осложнения). В подгруппе пациентов с интраоперационными геморрагическими осложнениями уровень VEGF-A в СК в среднем составил 383,5±234,2 пг/мл, что достоверно превышает показатель в подгруппе пациентов с неосложненным течением операции - 187,0±111,0 пг/мл (p<0,05). При уровне VEGF-A в СК 300 пг/мл и выше интраоперационные геморрагические осложнения были отмечены во всех случаях.

Способ осуществляют следующим образом.

Уровень VEGF-A определяют в СК пациентов с осложненной ПДР. Взятие проб СК проводят до каких-либо манипуляций. Концентрация VEGF-A может быть определена любым доступным из предназначенных для этих целей методов: ИФА (полу- или автоматическим); в рамках мультиплексного анализа с помощью анализатора MAGPIX («LuminexCorporation», США) в программе LuminexxPONENT 3.1 (наборы ProcartaPlex «eBioscience», Австрия); проточного цитометра. Полученные результаты выражают в пг/мл. При уровне VEGF-A 300 пг/мл и более прогнозируют интраоперационные геморрагические осложнения.

Пример 1.

Пациент 54 лет. Диагноз: ОИ тяжелая пролиферативная диабетическая ретинопатия, тракционная отслойка сетчатки, частичный гемофтальм, начальная осложненная катаракта. До операции проводили определение концентрации VEGF-A в СК в рамках мультиплексного анализа на анализаторе MAGPIX («LuminexCorporation», США) в программе LuminexxPONENT 3.1, с помощью наборов (ProcartaPlex «eBioscience», Австрия). Концентрация VEGF-A в СК - 851,5 пг/мл. Показатель VEGF-A соответствовал значению, характерному для высокого риска интраоперационных геморрагических осложнений. Пациенту проведено хирургическое вмешательство на OS: микроинвазивная витрэктомия, швартэктомия. В процессе отсепаровки фиброваскулярных мембран в заднем полюсе отмечалась продолжительная геморрагическая активность пересеченных новообразованных сосудов, затрудняющая полное отделение пролиферативной ткани и расправление сетчатки в макуле, что свидетельствует об информативности определения VEGF-A в сыворотке крови для прогнозирования интраоперационных геморрагических осложнений.

Пример 2.

Пациент 61 лет. Диагноз: ОИ тяжелая пролиферативная диабетическая ретинопатия, тракционная отслойка сетчатки, субтотальный гемофтальм. До операции проводили определение концентрации VEGF-A в СК в рамках мультиплексного анализа на анализаторе MAGPIX («LuminexCorporation», США) в программе LuminexxPONENT 3.1, с помощью наборов (ProcartaPlex «eBioscience», Австрия). Концентрация VEGF-A в СК - 465,5 пг/мл. Показатель VEGF-A соответствовал значению, характерному для высокого риска интраоперационных геморрагических осложнений. Пациенту проведено хирургическое вмешательство на OS: микроинвазивная витрэктомия. В ходе удаления измененного стекловидного тела отмечалась массивная продолжительная геморрагическая активность из новообразованных сосудов на периферии глазного дна, затрудняющая удаление элементов стекловидного тела в полном объеме. Манипуляции по остановки кровотечения на периферии глазного дна неэффективны. Запланированные этапы операции - эндотампонада перфторорганическим соединением, замена на силиконовое масло - оказались невыполнимы. Данный пример демонстрирует связь высоких сывороточных уровней VEGF-A с интраоперационной геморрагической активностью.

Пример 3.

Пациент 45 лет. Диагноз: ОИ тяжелая пролиферативная диабетическая ретинопатия, тракционная отслойка сетчатки. До операции проводили определение концентрации VEGF-A в СК в рамках мультиплексного анализа на анализаторе MAGPIX («LuminexCorporation», США) в программе LuminexxPONENT 3.1, с помощью наборов (ProcartaPlex «eBioscience», Австрия). Концентрация VEGF-A в СК - 177,34 пг/мл. Показатель VEGF-A соответствовал значению в подгруппе пациентов с неосложненным течением операции. Пациенту проведено хирургическое вмешательство на OD: микроинвазивная витрэктомия. В ходе удаления измененного стекловидного тела геморрагическая активность из новообразованных сосудов не отмечалась. Данный пример демонстрирует связь низких сывороточных уровней VEGF-A с неосложненным течением операции.

Пример 4.

Пациент 63 лет. Диагноз: ОИ тяжелая пролиферативная диабетическая ретинопатия, тракционная отслойка сетчатки, частичный гемофтальм. До операции проводили определение концентрации VEGF-A в СК в рамках мультиплексного анализа на анализаторе MAGPIX («LuminexCorporation», США) в программе LuminexxPONENT 3.1, с помощью наборов (ProcartaPlex «eBioscience», Австрия). Концентрация VEGF-A в СК - 511,47 пг/мл. Показатель VEGF-A соответствовал значению, характерному для высокого риска интраоперационных геморрагических осложнений. Микроинвазивную витрэктомию проводили через 7 дней после интравитреального введения ингибитора ангиогенеза в OD. В процессе отсепаровки фиброваскулярных мембран геморрагической активности пересеченных новообразованных сосудов, не отмечалось. Операция завершалась эндотампонадой перфторорганическим соединением с заменой на силиконовое масло. Данный пример демонстрирует эффективность модифицированной тактики предоперационной подготовки пациента, проведенной на основании результатов исследования VEGF-A в сыворотке крови, в отношении снижения риска интраоперационных геморрагических осложнений.

Таким образом, предложенный способ позволяет провести адекватные превентивные мероприятия во избежание геморрагических интраоперационных осложнений у пациентов с пролиферативной диабетической ретинопатией.

Список литературы

1. Диагностика и лечение диабетическойретинопатии и диабетического макулярного отека. Федеральные клинические рекомендации (протоколы лечения) // ООО «Ассоциация врачей-офтальмологов». Москва. - 2013. - С. 18.

2. Klein, R. Visual impairment in diabetes / R. Klein, В. E. Klein, S. E. Moss // Ophthalmology. - 1984. - Vol. 91, - P. 1-9.

3. The Wisconcin Epidemiologic Study of Diabetic Retinopathy. II. Prevalence and risk of diabetic retinopathy when age at diagnosis is less 30 years / R. Klein [et al.] // Arch. Ophthalmol. - 1984. - Vol. 102. - P. 520-526.

4. Klein, R. The Wisconcin Epidemiologic Study of Diabetic Retinopathy. III. Prevalence and risk of diabetic retinopathy when age at diagnosis is 30 years or more / R. Klein, В. E. Klein, S. E. Moss // Arch. Ophthalmol. - 1984. - Vol. 102. - P. 527-532.

5. Up-regulation of HIF-1 alpha and VEGF expression by elevated glucose concentration and hypoxia in cultured human retinal pigment epithelial cells / Q. Xiao [et al.] // J. Huazhong Univ. Sci. Technolog. Med. Sci. - 2006. - Vol. 26, №4. - P. 463-465.

6. Vascular dysfunction induced by elevated glucose levels in rats is mediated by vascular endothelial growth factor / R.G. Tilton [et al.] // J. Clin. Invest. - 1997. - Vol.99, №9. - P. 2192-2202.

7. Aiello L.P., Avery R.L., Arrigg P.G., Keyt B.A., Jampel H.D., Shah S.T., Pasquale L.R., Thieme H., Iwamoto M.A., Park J.E., Hung V.N., Aiello L.M., Napoleone F., George L. Vascular endothelial growth factor in ocular fluid patients with diabetic retinopathy and other retinal disorders. N. Eng. J. Med., 1994, Vol. 331, no. 22, pp. 1480-1487.

8. Adamis AP1, Miller JW, Bernal MT, D'Amico DJ, Folkman J, Yeo TK, Yeo KT. Increased vascular endothelial growth factor levels in the vitreous of eyes with proliferative diabetic retinopathy. Am J Ophthalmol., 1994, Vol. 118, no. 4, pp. 445-50.

9. Amin R.H., Frank R.N., Kennedy A., Eliott D., Puklin J.E., Abrams G.W. Vascular endothelial growth factor is present in glial cells of the retina and optic nerve of human subjects with nonproliferative diabetic retinopathy. Invest Ophthalmol Vis Sci., 1997, Vol. 38, no. 1, pp. 36-47.

10. Sack R.A., Conradi L., Krumholz D., Beaton A., Sathe S., Morris C. Membrane array characterization of 80 chemokines, cytokines and growth factor in open and closed eye tears: angiogenin and other defense system constituents. Invest. Ophthalmol. Vis Sci., 2005, Vol. 46, no. 4, pp. 1228-38.

11. Funatsu H., Yamashita H., Nakamura S., Mimura Т., Eguchi S., Noma H., Hori S. Vitreous levels of pigment epithelium-derived factor and vascular endothelial growth factor are related to diabetic macular edema. Ophthalmology., 2006, Vol. 113, no. 2, pp. 294 - 301.25.26.

12. Nishikiori N., Osanai M., Chiba H., Kojima Т., Mitamura Y., Ohguro H., Sawada N. Glial Cell-Derived Cytokines Attenuate the Breakdown of Vascular Integrity in Diabetic. Diabetes., 2007, Vol. 56, no. 5, pp. 1333-1340.

13. Tripathi R.C., Li J., Tripathi B.J., Chalam K.V., Adamis A.P. Increased level of vascular endothelial growth factor in aqueous humor of patients with neovascular glaucoma. Ophthalmology., 1998, Vol.105, no. 2, pp.232- 237.

14. Noma H., Funatsu H., Yamashita H., Kitano S., Mishima H.K., Hori S. Regulation of angiogenesis in diabetic retinopathy: possible balance between vascular endothelial growth factor and endostatin. Arch. Ophthalmol., 2002, Vol.120, no. 8, pp. 1075-1080.

15. Нероев B.B., Зайцева O.B., Балацкая H.B., Курчаева З.В. Локальная и системная продукция VEGF-A при осложненной пролиферативной диабетической ретинопатии. Медицинская иммунология.

16. Илюхин П.А. Применение антиангиогенных факторов в хирургическом лечении пролиферативной диабетической ретинопатии // Дис.…канд. мед. наук. Москва. - 2012. - С. 104-122.

17. Шишкин М.М., Юлдашева Н.М. Интравитреальное введение ингибиторов ангиогенеза как этап щадящей витреоретинальной хирургии пролиферативной диабетической ретинопатии // Вестник НМХЦ им. Н.И. Пирогова. - 2011. - Т. 6, №1, - С. 77-81.

18. Funatsu Н., Yamashita Н., Noma Н., Mimura Т., Sakata К., Hori S. Risk evaluation of vitreous surgery for proliferative diabetic retinopathy based on vitreous level of vascular endothelial growth factor and angiotensin ll. Br. J. Ophthalmol., 2004, Vol. 88, no. 8, pp. 1064-1068.

19. Funatsu H., Yamashita H., Mimura Т., Noma H., Nakamura S., Hori S. Risk evalution of outcome of vitreous surgery based on vitreous levels of cytokines. Eye., 2007, Vol. 21, no. 3, pp. 377-382.

20. Wakabayashi Y, Usui Y, Okunuki Y, Ueda S, Kimura K, Muramatsu D, Kezuka T, Goto H. Intraocular VEGF level as a risk factor for postoperative complications after vitrectomy for proliferative diabetic retinopathy. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2012 Sep 21; 53 (10): 6403-10.

Способ прогнозирования интраоперационных геморрагических осложнений при тяжелой форме пролиферативной диабетической ретинопатии, включающий определение уровня VEGF-A, отличающийся тем, что уровень VEGF-A определяют в сыворотке крови и при его концентрации, равной или более 300 пг/мл прогнозируют интраоперационные геморрагические осложнения.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к мутеинам белка липокалина, а также к полученным на их основе специфично связывающимся терапевтическим или диагностическим белкам, направленным против гепсидина, и может быть использовано в медицине.
Изобретение относится к области медицины, а именно к судебно-медицинской экспертизе, криминалистике, и предназначено для определения биологического возраста трупа.

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии и касается способа выделения антилиганда, представляющего собой антитело или его антигенсвязывающий вариант, производное или фрагмент, каркасную молекулу со сконструированными вариабельными поверхностями; рецептор или фермент, к дифференциально-экспрессирующемуся целевому лиганду.

Группа изобретений относится к области биохимии. Предложен способ для идентификации субъекта с депрессией или имеющего риск развития депрессии, который имел бы положительный эффект от или ответил на режим лечения, включающий фолат-содержащее соединение, где указанный субъект идентифицируется таким, как указанно выше при условии детекции в генотипах двух локусов наличия аллеля с тимином Т в положении 677 (в гене MTHFR) и аллеля с гуанином G в положении SNP2756 (в гене MTR).

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к клеточной инженерии, и может быть использовано для определения биологической активности IFN-γ. Получают линию клеток меланомы человека PiGAS с регистрационным номером ВКПМ Н-161 путем трансфекции родительской линии клеток меланомы человека MelP плазмидой pGAS(x6)-Luc//Neo, кодирующей репортерную конструкцию 6xGAS-Luc, состоящую из последовательности SEQ ID NO: 1, включающую 6 повторов сайта связывания транскрипционного фактора STAT-1, минимального промотора SV-40 и гена люциферазы светлячка Photinus pyralis (Luc), а также последовательности SEQ ID NO: 2, включающую ген устойчивости Neo к селективному антибиотику G418 под контролем своего конститутивного промотора PGK-1.

Изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторной диагностике в медицине неотложных состояний и к экспериментальной медицине, и может быть использовано для оценки степени тяжести любой этиологии у пациентов и лабораторных животных.

Настоящее изобретение относится к определению уровня маркерных пептидов в образце, полученном из физиологической жидкости субъекта, поступившего в отделение неотложной помощи с неспецифическими жалобами.
Изобретение относится к медицине, а именно к трансплантации органов и клинической лабораторной диагностике, может быть использовано при ведении пациентов после трансплантации сердца для диагностики отторжения трансплантированного сердца.

Настоящее изобретение относится к способу стратификации терапии обморока у пациента путем определения уровня СТ-проЕТ-1 в образце жидкости организма указанного пациента, корреляции уровня СТ-проЕТ-1 со стратификацией терапии обморока, где пациентов стратифицируют в соответствии с их потребностью в кардиостимуляторе посредством определения уровня СТ-проЕТ-1.
Изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для прогнозирования развития плацентарной недостаточности в первом триместре беременности у женщин после процедуры экстракорпорального оплодотворения.

Изобретение относится к области медицины, а именно к педиатрии, и может быть использовано при обследовании больных для прогнозирования развития нефросклероза у детей с хроническим пиелонефритом. Сущность способа: в крови больного определяют уровень гомоцистеина и при его значении больше 7 мкмоль/л у детей до 10 лет и 9 мкмоль/л у детей старше 10 лет прогнозируют высокий риск развития склеротических изменений в почечной ткани. Предложенный способ позволяет прогнозировать развитие склеротических изменений в ткани почек у детей с хроническим пиелонефритом, что позволит в максимально ранние сроки назначать нефропротективную терапию тем пациентам, которые в ней нуждаются. В свою очередь, вовремя начатая и адекватная нефропротекция будет способствовать замедлению прогрессирования хронической болезни почек. Изобретение позволяет более точно прогнозировать развитие нефросклероза у детей, а также не подвергать больных дополнительному забору крови и инвазивным методам диагностики, не требует дополнительного инвазивного вмешательства, использования дорогостоящей аппаратуры и радиофармпрепарата и может быть выполнено в амбулаторных условиях. 2 табл., 3 пр.

Изобретение относится к экспериментальной биологии и медицине и касается способа стимуляции выработки эритропоэтина клетками костного мозга in vitro. Для этого CD4+-клетки костного мозга культивируют в СO2-инкубаторе при 37°С, 5% СО2 и 100% влажности воздуха в течение 24 часов. Инкубацию осуществляют в культуральной среде следующего состава: 90% среды RPMI-1640, 10% ЭТС, 280 мг/л L-глутамина, 50 мг/л гентамицина, 50 мкМ ингибитора фосфатидилинозитол-3-киназы (PI3K). Способ обеспечивает повышение выработки эритропоэтина за счет стимулирующего действия ингибитора PI3K на секреторную функцию CD4+-клеток. 1 табл., 1 пр.

Группа изобретений относится к способу калибровки составного анализа, включающему: добавление калибровочного реагента, включающего по меньшей мере две различные связывающие молекулы, где каждая молекула обладает способностью специфичного связывания с агентом захвата и способностью связываться с детектирующей молекулой и где по меньшей мере две из связывающих молекул имеют различные специфичности и присутствуют в различных концентрациях, добавление детектирующей молекулы, детектирование связанной детектирующей молекулы, создание калибровочной кривой, включающей ряд калибровочных точек/интервалов. Также группа изобретений относится к набору реагентов и составной аналитической системе. Применение группы изобретений позволяет повысить точность результатов благодаря системной вариабельности систематических анализов в течение времени. 4 н. и 16 з.п. ф-лы, 7 ил., 4 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к офтальмологии, и предназначено для прогнозирования необходимости проведения лазерной коагуляции при ретинопатии недоношенных. Для прогнозирования необходимости лазерной коагуляции при ретинопатии недоношенных осуществляют определение массы тела новорожденного, индекс трансаминаз, представляющий собой отношение уровня аспартатаминотрансферазы к уровню аланинаминотрасферазы (АСТ/АЛТ), и количество белка быстрой фазы. При массе тела новорожденного менее 1364 грамм, индексе трансаминаз выше 0,52 и количестве белка быстрой фазы выше 9,9 мг/л прогнозируют необходимость применения лазерной коагуляции. Использование изобретения позволяет своевременно провести лазерную коагуляцию аваскулярных зон сетчатки, обеспечивая тем самым дальнейшее развитие глаза, стабилизацию зрительных функций и повышение качества жизни недоношенных детей. 1 табл., 3 пр.

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ диагностики немалиновой миопатии, при котором у пациента с клинической картиной врожденной миопатии осуществляют забор биоптата скелетной поперечнополосатой мышечной ткани, проводят иммуногистохимическое выявление фактора, индуцируемого гипоксией 1-альфа (HIF-1α), для чего готовят гистологические образцы-срезы, наносят на них усилитель флуоресцентного сигнала, далее на срезы наносят белок-блокатор для уменьшения фонового неспецифического окрашивания, затем срезы инкубируют с поликлональными антителами кролика к белку HIF-1α, после промывки наносят на срезы соответствующие вторичные флуоресцентные антитела, покрывают фотозащитным реагентом и проводят люминесцентную микроскопию, а при выявлении локусов округлой и/или овальной формы красной окраски диаметром 3-5 мкм под оболочкой мышечного волокна диагностируют немалиновую миопатию. Техническим результатом изобретения является повышение надежности диагностики немалиновой миопатии. 2 ил., 2 пр.

Изобретение относится к области химии, а именно к аналитической химии, электрохимии и биохимии, и предназначено для идентификации пептидов и выявления аминокислотных замен в их структурах. Для осуществления способа на печатный графитовый электрод наносят аликвоту 60-100 мкл 50 мкМ раствора пептида в буферном растворе. Регистрируют квадратно-волновую вольтамперограмму окисления в области от 0 до 1,5 В (отн. Ag/AgCl). Измеряют потенциалы максимумов и высоты полученных сигналов окисления аминокислотных остатков - пиков или волн и фиксируют результаты. По различию в положении потенциалов максимумов сигналов окисления и их интенсивности, зная аминокислотные последовательности для группы исследуемых пептидов или имея базу данных, полученную ранее, проводят идентификацию пептидов. При сравнении результатов относительно контроля - «нормального» пептида, констатируют аминокислотную замену. Использование изобретения обеспечивает электрохимическую идентификацию пептидов и выявление в их структуре аминокислотных замен. 1 з.п. ф-лы, 3 ил., 2 табл., 1 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и предназначено для оценки ранних проявлений неблагоприятного побочного действия кортикостероидных препаратов на метаболические процессы в организме ребенка при терапии нефротического синдрома. Выполняют биохимический анализ крови с определением уровня глюкозы (Агл) и амилазы (Аам) в сыворотке крови ребенка. Вычисляют индекс массы тела (Аимт). Рассчитывают коэффициент модификации Мимт – индекса массы тела, Мгл – глюкозы и Мам – амилазы по формулам: Затем рассчитывают на их основании индекс метаболических реакций (ИМР) по формуле: При значениях ИМР ≥ 16,5 ед. судят о неблагоприятных побочных реакциях кортикостероидных препаратов на метаболические процессы в организме ребенка, рекомендуют соответствующую фармакологическую коррекцию. Изобретение позволяет контролировать безопасность фармакотерапии при изменении дозы кортикостероидов либо на фоне корригирующей терапии. 9 табл., 3 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к аллергологии и иммунологии, и может быть использовано для диагностики аллергии. Для этого осуществляют подготовку пробы биологического материала (копрофильтрат) с последующей спектрофотометрией при 405 нм. При этом берут утреннюю пробу фекалий в количестве 1 г, растворяют ее в 9 мл фосфатно-солевого буфера с 0,05% Твином 20 (ФСБТ) рН=7,2. Затем перемешивают до однородной консистенции. После чего центрифугируют в течение 10-20 мин при 3500 об/мин. Отбирают надосадочную жидкость и проводят иммуноферментный анализ на наличие аллергенспецифических IgE-антител к пищевым аллергенам с последующей спектрофотометрией. При определении оптической плотности 0,15 ед. оптической плотности и более диагностируют аллергию к конкретному аллергену. А при определении оптической плотности менее 0,15 ед. диагностируют отсутствие аллергии к конкретному аллергену. Изобретение позволяет повысить точность диагностики пищевой аллергии на 10-12%. 3 пр.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике онкологических заболеваний. Предложено применение аддукта нуклеосома-белок в качестве биомаркера в образце крови, сыворотки или плазмы для диагностики рака, где белок, связанный с нуклеосомой, содержит фактор транскрипции или модифицирующий хроматин фермент. Также предложены возможность детекции или диагностирования рака у индивидуума, оценка индивидуума в отношении применимости медицинского лечения и мониторинг лечения индивидуума. Группа изобретений обеспечивает возможность диагностирования онкологических заболеваний, таких как: рак толстого кишечника, рак легких, рак поджелудочной железы, рак молочной железы, рак предстательной железы, за счет измерения уровня циркулирующих внеклеточных аддуктов нуклеосома-HMGB-1 и нуклеосома-EZH2 в биологическом образце крови, сыворотки или плазмы, полученном от индивидуума. 5 н. и 15 з.п. ф-лы, 11 ил., 12 пр.

Группа изобретений относится к медицине и касается способа измерения активности натуральных клеток-киллеров (NK-клеток), включающего стимулирование NK-клеток в образце цельной крови посредством инкубирования образца цельной крови со средством, включающим по меньшей мере один стимулирующий цитокин, выбранный из группы, состоящей из интерлейкина 2, интерлейкина 15 и интерлейкина 18, и измерение количества секретируемых NK-клетками цитокинов, секретированных в образце цельной крови. Группа изобретений также касается набора для измерения активности натуральных клеток-киллеров. Группа изобретений обеспечивает большую точность измерения активности натуральных клеток-киллеров по сравнению с измерением активности натуральных клеток-киллеров с использованием PBMC. 3 н. и 21 з.п. ф-лы, 9 пр., 12 ил., 2 табл.

Изобретение относится к офтальмологии и предназначено для прогнозирования интраоперационных геморрагических осложнений при тяжелой форме пролиферативной диабетической ретинопатии. Сущность способа: проводят определение уровня VEGF-A в сыворотке крови и при его концентрации, равной или более 300 пгмл, прогнозируют интраоперационные геморрагические осложнения. Способ обеспечивает возможность разработки дифференцированной дооперационной тактики подготовки пациента к хирургическому вмешательству, направленной на снижение риска интраоперационных геморрагических осложнений у пациентов группы риска. 4 пр.

Наверх