Способ прогнозирования восстановления менструального цикла у девочек-подростков с нервной анорексией

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и найдет широкое применение в лечении пациенток с аменореей, обусловленной нервной анорексией. Сущность способа: пациенток на этапе редукции нервной анорексии с продолжающейся аменореей в сыворотке крови методом ИФА определяют уровень дофамина и ЛГ, и если уровень дофамина составляет 67,25 пг/мл и более, но менее 280 пг/мл, а показатели ЛГ 0,95 мМЕ/л и более, прогнозируют нормализацию менструальной функции. Применение данного способа прогнозирования восстановления менструальной функции позволит своевременно выбрать адекватную терапию для лечения данного заболевания, что поможет предотвратить развитие вторичного гипогонадизма, приводящего к гипоплазии матки и бесплодию в репродуктивном периоде. Способ позволяет объективизировать оценку эффективности лечения и своевременно прогнозировать дальнейшее течение заболевания. Способ имеет чувствительность – 93,9%, специфичность 93,9%, точность 88,2%. 3 пр.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и найдет использование при решении вопроса о выборе метода восстановления менструальной функции у пациенток с аменореей, связанной с нервной анорексией (НА).

НА - расстройство, сопровождающееся резким снижением массы тела вследствие добровольного отказа от приема пищи. В динамике НА выделяют 4 этапа: инициальный, аноректический, кахектический и этап редукции (Коркина М.В., Цивилько М.А., Марилов В.В., 1986). Вес тела сохраняется пациентками на уровне как минимум на 15% ниже ожидаемого, индекс массы тела Кветелета составляет 17,5 или ниже. Нарушение полового развития, роста и аменорея являются обязательными диагностическими признаками данного расстройства (МКБ 10, F-50.0; 1999). Аменорея - постоянный признак НА, развивается на аноректическом этапе, продолжается на кахектическом и в начале этапа редукции.

Хотя патогенез данного заболевания до конца не изучен, известно, что он включает психические расстройства, нейроэндокринно-метаболические нарушения и нарушение питания (Grinspoon S., Gulick Т., Askari Н. et al., 2010). Среди нейроэндокринно-метаболических нарушений основным является центральное торможение секреции гонадотропин-рилизинг-гормона (ГнРГ), что вызывает резкое снижение гонадотропинов по сравнению с препубертатным уровнем и развитием аменореи (Travaglini P., Peccoz Р., 1976). Одним из факторов, поддерживающих цирхоральный ритм секреции ГнРГ, является лептин (Thong F.S., Graham Т.Е., 1999). В исследованиях Miller K.K., Parulekar M.S. (1998) выявлена корреляция между плазменным уровнем лептина, падением концентрации гонадотропинов, прежде всего лютеинизирующего гормона (ЛГ), и развитием аменореи у пациенток с НА.

Ведущим проявлением НА является сверхценная дисморфоманическая идея, в основе формирования которой определенную роль играет гиперпродукция дофамина. При неэффективной терапии - высокий уровень дофамина приводит к рецидивам расстройства пищевого поведения, формированию гипогонадотропного гипогонадизма, персистирующей аменореи и необратимому поражению функции репродуктивной системы.

С другой стороны, терапия нейролептиками, применяемая психиатрами для дезактуализации дисморфоманической идеи, приводит к блокаде дофаминовых рецепторов и поглощения дофамина, истощает запасы и тормозит его обмен, вызывает подъем уровня секреции пролактина что приводит к формированию гиперпролактинемии. Секреция пролактина находится под ингибирующим контролем дофамина. При достаточном содержании дофамина в сыворотке крови уровень пролактина находится в границе нормативов. Супрафизиологическая концентрация пролактина оказывает тормозящее действие на гипоталамо-гипофизарно-яичниковую систему, что приводит к формированию овариальной недостаточности, аменореи и развитию гипогонадизма. Следовательно, наиболее важным, является определение не только лептина но и факторов, лежащих в основе формирования дисморфоманической идеи, с наличием которой связано нарушение пищевого поведения, снижение массы тела, приводящее к нарушению выработки лептина, гонадотропинов и половых гормонов.

Описаны результаты исследования Miller KK, Parulekar MS, Schoenfeld Е. at al. (Decreased leptin levels in normal weight women with hypothalamic amenorrhea: the effects of body composition and nutritional intake.//J Clin Endocrinol Metab. 1998 Jul; 83 (7): 2309-12.), изучавшими роль лептина в качестве регулятора репродуктивной функции. Авторы сравнили уровни лептина у женщин с гипоталамической аменореей и у нормально менструирующих женщин, имеющих равные (нормальные) значения индекса массы тела, потребляемых с пищей калорий и одинаковый возраст. Выявлено, что уровни лептина были значительно ниже у пациенток с гипоталамической аменореей по сравнению с контрольной группой.

Кроме этого Андреевой В.О. описан «Способ прогнозирования восстановления менструальной функции у пациенток с нервной анорексией» (Патент на изобретение №2363002; 27.07.2009 г.), отличающийся тем, что у пациенток на этапе редукции нервной анорексии с аменореей, определяют методом ИФА в сыворотке крови уровень лептина, рассчитывают индекс массы тела и соотношение лептин/ИМТ. Если уровень лептина превышает диагностический порог 23,5 нг/мл, а соотношение лептин/ИМТ составляет 0,8 и более, прогнозируют нормализацию менструальной функции. Данный способ выбран нами за прототип заявляемого изобретения.

Однако эти данные в первую очередь демонстрируют значение уровня лептина для восстановления менструальной функции, но не учитывают значимость факторов, лежащих в основе патогенеза НА - формировании дисморфоманической идеи, с наличием которой связана аноректическая симптоматика, низкий вес, нарушение выработки лептина, гонадотропинов и половых гормонов (Janik J.E., 1997; Mantzoros C.S., 1997).

Внимание, уделяемое изучению НА, помимо увеличения удельного веса данной нозологии в патологии пубертатного периода, связано с низкой курабельностью заболевания, развитием вторичного гипогонадизма, приводящего к гипоплазии матки и бесплодию в репродуктивном периоде.

В настоящее время лечение больных НА, включает в себя психофармакотерапию, психотерапию, диетотерапию и терапию, направленную на коррекцию вторичных сомато-эндокринных расстройств. Фармакотерапия при НА используется ограничено. Сложностями при применении медикаментозной терапии является низкая переносимость препаратов, отказ от лечения, симптоматический, а не синдромальный подход, «стигматизация» нейролептиков (Fazeli Р.K., Calder G.L., Miller K.K. et al., 2012).

Основными критериями для оценки результатов терапии НА являются дезактуализация сверхценной дисморфоманической идеи, повышение массы тела, нормализация менструального цикла и поддержание восстановленной массы тела в дальнейшем (Андреева В.О., 2008).

При эффективном лечении менструальный цикл постепенно восстанавливается - сначала менструации приходят в скудном количестве с длительными - до 40-60 дней интервалами, затем формируется регулярный менструальный цикл (Андреева В.О., 2008). При неэффективной терапии - показатели гонадотропинов остаются низкими, сохраняется эстрогендефицитное состояние, прогрессирует гипоплазия матки, что может привести к необратимости поражения репродуктивной системы.

До настоящего времени не определены прогностические критерии восстановления менструального цикла после набора веса и объективные критерии оценки эффективности проводимой терапии - то есть критерии дезактуализации сверхценной дисморфоманической идеи.

Отсутствие единой точки зрения на целесообразность и сроки назначения заместительной гормональной терапии (ЗГТ) пациенткам после достижения нормального индекса массы тела (ИМТ) на этапе редукции НА при выраженном гипогонадизме и персистирующей аменореи, создает необходимость разработки метода прогнозирования восстановления менструальной функции у данной категории больных.

Заявляемое изобретение позволяет решить эту проблему.

Задача изобретения - разработка точного метода прогнозирования восстановления менструальной функции у пациенток после достижения нормального индекса массы тела (ИМТ) на этапе редукции нервной анорексии.

Поставленная задача решается тем, что у девочек-подростков с нарушением менструального цикла - вторичной аменореей, наступившей на аноректическом этапе нервной анорексии и продолжающейся несмотря на проводимое лечение и восстановление ИМТ до 17,5 кг/м2 и более на этапе редукции НА методом ИФА определяют в сыворотке крови уровень дофамина и ЛГ и если значения дофамина ≥67,25 пг/мл, а уровень ЛГ ≥0,95 мМЕ/л - прогноз восстановления менструального цикла - благоприятный, терапия оценивается как эффективная. При значениях дофамина <67,25 пг/мл и ЛГ <0,95 мМЕ/л - прогноз восстановления менструального цикла неблагоприятный, пациентка нуждается в проведении комплексной терапии.

Технический результат, достигаемый данным изобретением в клинической практике состоит в том, что использование данной методики поможет:

1) повысить точность диагностики прогнозирования течения заболевания;

2) повысить эффективность лечения, направленного на восстановление менструальной функции.

При продолжающейся аменорее и наличии критериев, определяющих неблагоприятный прогноз восстановления менструальной функции, несмотря на нормализацию веса, своевременно ставить вопрос о необходимости пересмотра дозы нейролептиков в сторону уменьшения и назначения комплексной терапии, включающей применение антипсихотических средств, не влияющих на уровень дофамина, а также стероидных гормонов в составе ЗГТ. Необходимость и своевременность начала гормонотерапии обусловлена как высокими темпами снижения минеральной плотности кости, так и прогрессирующей гипоплазией матки на фоне эстрогендефицитного состояния, что может привести к необратимости поражения репродуктивной оси.

Для изучения роли дофамина в формировании нейроэндокринных нарушений при НА, а также определения изменений его сывороточной концентрации в динамике лечения, нами проведено исследование уровня дофамина и ЛГ при первичном обращении пациенток с НА, и через 3 месяца от начала лечения на этапе редукции НА.

Данное исследование проведено у 95 девочек-подростков, с установленным диагнозом нервная анорексия, согласно критериям, изложенных в МКБ-10. Все пациентки обследованы при первичном обращении - на аноректическом этапе и через 3 месяца - после редукции основной психопатологической симптоматики и набора 2,45 единиц индекса массы тела (ИМТ). На этапе редукции ИМТ пациенток составил 18,07 кг/м2. В группу контроля вошли 20 девочек-подростков с ИМТ=20,3 (24,9; 18,5) кг/м2 без нарушений менструальной функции, не имевших отклонений в состоянии здоровья, обратившихся в консультативную поликлинику с целью прохождения профилактического осмотра.

Исследование уровней дофамина и ЛГ в сыворотке крови проводилось методом иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием иммуноферментных тест-систем Delfia (Wallac Оу, Turku, Finland).

Статистическое обоснование различий между выделенными группами пациенток проводилось с использованием U-критерия Манна-Уитни при максимальном допустимом уровне вероятности ошибки первого рода р=0,05. Расчеты проводились в среде пакета прикладных программ Statistica 6.0.

Сывороточное содержание дофамина на аноректическом этапе НА превышало показатели группы контроля в 2,25 раза (р<0,001). На этапе редукции данный показатель снизился в 16,2 раза (р<0,001) и был ниже, чем в группе контроля в 7,2 раза (р<0,001) (таблица 1). Столь низкие значения дофамина на этапе редукции могут быть связаны с приемом пациентками препаратов из группы нейролептиков, обладающих дофаминоблокирующей активностью, что, на фоне редукции симптомов, могло привести к снижению уровня дофамина в крови. Снижение сывороточного содержания дофамина на этапе редукции, в сочетании с дезактуализацией дисморфоманической идеи и улучшением состояния больных, может косвенно указывать на положительную динамику в состоянии пациенток и тесную связь между нейроэндокринными и психопатологическими нарушениями.

Терапевтические трудности восстановления менструального цикла у пациенток с НА, связанные с быстро развивающимися сомато-эндокринными расстройствами, диссимулятивным поведением пациенток и отсутствием сотрудничества с врачами, обусловливают поиск более точных критериев оценки эффективности лечения и прогноза.

С целью оценки эффективности лечения и прогноза восстановления менструального цикла у пациенток с НА целесообразно использовать объективные критерии - диагностические пороги. Для этого нами разработана диагностическая модель, позволяющая оценить эффективность терапии и прогнозировать восстановление менструального цикла у девочек-подростков с НА. Для получения диагностической формулы (модели) мы использовали статистический метод, называемый дерево решений. Для построения бинарного дерева решений нами был использован алгоритм CART (classification and regression tree), который решает задачи классификации и регрессии. Методом «Дерево решений» было получено диагностическое правило, которое было проверено с использованием тестирующей выборки, в результате чего получены значения чувствительности, специфичности, точности. Под точностью дерева решений понимается отношение правильно классифицированных объектов к их общему количеству, а под ошибкой - количество неправильно классифицированных объектов. Выбранными нами параметрами были дофамин и ЛГ, что было обусловлено их участием в патогенезе олиго-аменореи при НА. Нами установлено, что у девочек-подростков без нарушения пищевого поведения, с регулярным менструальным циклом, нормальным ИМТ значения дофамина были 67,25 пг/мл и более, но менее 280 пг/мл, а показатели ЛГ были 0,95 мМЕ/л и более. В группе с НА и аменореей значения дофамина на этапе редукции были меньше установленного диагностического порога менее 67,25 пг/мл, также как и значения ЛГ менее 0,95 мМЕ/л.

Таким образом, повышение уровня дофамина и ЛГ выше указанных порогов на этапе редукции НА, но ниже верхней границы нормативов (для дофамина 280 пг/мл) будет свидетельствовать о положительном прогнозе восстановления менструального цикла и эффективности назначаемой терапии. Диагностическая точность данной модели составила 88,2%, выделение пациенток происходило с чувствительностью 93,9%, выделение здоровых - со специфичностью 93,9%. Значения дофамина и ЛГ меньше установленных диагностических порогов свидетельствуют о неблагоприятном прогнозе восстановления менструального цикла, неэффективности проводимой терапии и необходимости назначения заместительной гормональной терапии половыми стероидными гормонами с целью профилактики вторичного гипогонадизма и гипоплазии матки.

Подробное описание способа и примеры его клинического выполнения.

У девочек-подростков с установленным диагнозом «нервная анорексия, этап редукции» и аменореей, определяют концентрацию дофамина и ЛГ в сыворотке крови методом ИФА с использованием иммуноферментных тест-систем Delfia (Wallac Оу, Turku, Finland). Если значения дофамина от 67,25 пг/мл, до 280 пг/мл, а уровень ЛГ 0,95 мМЕ/л и более - прогноз восстановления менструального цикла - благоприятный, проведенная терапия оценивается как эффективная.

Если значения дофамина менее 67,25 пг/мл, а уровень ЛГ менее 0,95 мМЕ/л - прогноз восстановления менструального цикла неблагоприятный, пациентка нуждается в проведении комплексной терапии.

При продолжающейся аменорее и наличии критериев, определяющих неблагоприятный прогноз восстановления менструальной функции, несмотря на нормализацию веса, следует своевременно ставить вопрос о необходимости пересмотра дозы нейролептиков в сторону уменьшения и назначения комплексной терапии, включающей применение антипсихотических средств, не влияющих на уровень дофамина, а также стероидных гормонов в составе ЗГТ. Необходимость и своевременность начала гормонотерапии обусловлена как высокими темпами снижения минеральной плотности кости, так и прогрессирующей гипоплазией матки на фоне эстрогендефицитного состояния, что может привести к необратимости поражения репродуктивной оси.

Пример №1.

Пациентка С-ва, 17 лет. Поступила в стационар с жалобами на отсутствие менструаций в течение последних 8 месяцев после потери 25 кг массы тела за 2 месяца с «косметической целью». Три месяца назад девочке был поставлен диагноз: нервная анорексия, аноректический этап. До заболевания весила 65 кг при росте 170 см (ИМТ=22,49 кг/м2), вес при первичном обращении - 40 кг (ИМТ=13,84 кг/м2). Уровень дофамина в сыворотке крови при первом визите на аноректическом этапе составлял 1824,7 пг/мл, уровень ЛГ - 0,24 мМЕ/л. Лечение пациентки проводилось стационарно на основании мультидисциплинарного подхода, с обязательным участием гинеколога, психиатра и эндокринолога, а также привлечением врачей других специальностей. Цель лечения на аноректическом этапе - дезактуализация сверхценной дисморфоманической идеи, коррекция метаболических, эндокринных и соматических нарушений под контролем клинического и биохимического мониторинга - была достигнута через 2,5 месяца. По назначению психиатра пациентка получала антипсихотический препарат из группы нейролептиков - кветиапин в суточной дозе 600 мг в 2 приема, длительность лечения составила 3 месяца, общая курсовая доза препарата 108 г. Выписана из гинекологического отделения при достижении массы тела - 50,6 кг (ИМТ=17,5 кг/м2). При этом менструальная функция несмотря на нормализацию веса и пищевых паттернов не восстановилась. Через 3 месяца от первого визита больная была вновь госпитализирована для оценки эффективности лечения и выработки дальнейшей тактики терапии, направленной на восстановление менструальной функции.

Объективное исследование:

Вес 54,6 кг, ИМТ=18,9 кг/м2.

Лабораторное исследование:

Уровень дофамина - 280 пг/мл, ЛГ - 2,3 мМЕ/л, что выше диагностических порогов - 67,25 иг/ мл (для дофамина) и 0,95 мМЕ/л (для ЛГ). Несмотря на то, что у пациентки длительность аменореи составляла на момент госпитализации 8 месяцев, данные результаты свидетельствовали об эффективности лечения и благоприятном прогнозе восстановления менструальной функции. Решено было отказаться от начала ЗГТ половыми стероидами. Пациентка продолжала заниматься с психологом, консультировалась психиатром, совместно с которым проводилась программа пищевой реабилитации, начатой на аноректическом этапе, лечение нейролептиками не проводилось. Полный эффект от лечения - возобновление менструального цикла - наступил через 4,5 месяцев от первого визита.

Пример №2

Пациентка Т-ва, 15,5 лет. Поступила в стационар для повторного обследования и лечения. Из анамнеза установлено: аменорея в течение месяцев после добровольной и целенаправленной потери 12,6 кг массы тела на фоне низкокалорийной диеты с целью достижения «идеального веса». Из анамнеза известно, что до анорексии ее вес был 51,6 кг, рост 167 см, ИМТ=18,5 кг/м2. За 2 месяца потеряла в весе 12,6 кг, после чего наступила аменорея.

Первый визит и госпитализация - 3 месяца назад. Консилиумом, с участием гинекологов, эндокринологов и педиатров был поставлен диагноз: «нервная анорексия». Вес пациентки при первом визите составлял 39 кг, рост - 167 см, ИМТ=13,98 кг/м2. Уровень дофамина при 1 визите на аноректическом этапе - 968,9 пг/мл. В стационаре пациентка провела 21 день, проводилось лечение с обязательным участием гинеколога, психиатра и эндокринолога, а также привлечением врачей других специальностей. Выписана по настоянию родителей. При выписке вес 42 кг, ИМТ=15,05 кг/м2. Дальнейшее лечение проводилось амбулаторно. За 2,5 месяца амбулаторного наблюдения и лечения пациентка прибавила в весе еще 8,9 кг и ее масса тела составила 50,9 кг, ИМТ=18,2 кг/м2. Психиатрами сделано заключение о редукции нервной анорексии. При этом менструальная функция несмотря на набор веса и редукцию основной психопатологической симптоматики не восстановилась.

Лабораторное исследование:

Уровень дофамина в настоящее время (этап редукции) 66,25 пг/мл, уровень ЛГ=0,90 мМЕ/л. Таким образом, через 3 месяца от первого визита и начала лечения уровень дофамина был ниже диагностического порога 67,25 пг/мл, что свидетельствовало о неэффективности лечения и неблагоприятном прогнозе восстановления менструальной функции.

Учитывая длительность аменореи 8 месяцев, несмотря на нормализацию ИМТ, результаты исследования дофамина свидетельствовали о неэффективности лечения и неблагоприятном прогнозе восстановления менструальной функции, показатели ЛГ в сыворотке крови также были ниже нормативов, поэтому решено было начать гормональную терапию половыми стероидами, наряду с продолжением программы пищевой реабилитации. От приема гормональных препаратов родители девочки отказались. Дальнейшее наблюдение в течение 1 года позволило констатировать продолжающуюся аменорею и развитие гипоплазии матки.

Пример №3.

Больная А-ко, 16 лет поступила в стационар с жалобами на отсутствие менструаций в течение 9 месяцев. Аменорея наступила после потери в весе 16 кг за 2,5 месяца. Известно, что вес до начала заболевания составлял 61 кг, рост - 168 см, ИМТ=21,63 кг/м2. Вес минимальный на аноректическом этапе НА - 45 кг, ИМТ=15,96. В дальнейшем, после проведенного обследования и лечения в психиатрическом стационаре по поводу диагностированной нервной анорексии, вес пациентки полностью восстановлен. Первоначальный уровень дофамина определен не был. Длительность лечения составила 3 месяца.

Объективное исследование:

Вес - 60 кг, ИМТ=21,28 кг/м2.

Лабораторное исследование:

Уровень дофамина 67,25 пг/мл. Уровень ЛГ - 0,95 мМЕ/л.

Несмотря на то, что у пациентки длительность аменореи составляла на момент госпитализации 9 месяцев, данные результаты свидетельствовали о благоприятном прогнозе восстановления менструальной функции. Гормональная терапия назначена не была, проводилась негормональная стимуляция функции яичников, включающая витамины группы Е, С, В, препараты кальция и сигетин. Полный эффект от лечения - возобновление менструального цикла - наступил через 3 месяца.

Таким образом, заявляемый нами способ позволяет с позиций доказательной медицины объективизировать оценку эффективности лечения, направленного на восстановление менструальной функции, и своевременно прогнозировать дальнейшее течение заболевания. Метод имеет чувствительность 93,9%, специфичность 93,9%, точность - 88,2%.

Способ может широко использоваться в гинекологических стационарах, а также в поликлиниках на гинекологическом приеме.

Способ прогнозирования восстановления менструальной функции у пациенток с нервной анорексией путем исследования крови, отличающийся тем, что у пациенток на этапе редукции нервной анорексии с аменореей методом ИФА определяют в сыворотке крови уровень дофамина и лютеинизирующего гормона, и если уровень дофамина составляет от 67,25 пг/мл до 280 пг/мл, а показатели лютеинизирующего гормона 0,95 мМЕ/л и более, прогнозируют нормализацию менструальной функции.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области биохимии. Заявлено антитело, специфически связывающееся с PTK7 (протеинтирозинкиназа 7) человека, а также конъюгат указанного антитела с цитотоксическим агентом.

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для определения нейтрализующих антител (HAT) в сыворотке крови больных рассеянным склерозом, леченных препаратами интерферона-бета (ИФНβ).

Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ прогнозирования риска развития быстрорастущей миомы матки, заключающийся в том, что исследуют ультразвуковые параметры матки с подсчетом количества миоматозных узлов, методом краевой дегидратации менструальных выделений (МВ) определяют наличие параллельных и волокнистых структур и рассчитывают коэффициент Р: где z рассчитывают по формуле:z=b1×x1+b2×x2+b3×х3+а,где b1 - коэффициент, равный 2,172; x1 - волокнистые структуры в MB: наличие «2»; отсутствие «1»; b2 - коэффициент, равный 2,238; x2 - параллельные структуры в MB: наличие «2»; отсутствие «1»; b3 - коэффициент, равный 1,568; x3 - количество узлов; а - константа, равная –10,915; и при значении Р>0,5 дополнительно методом иммуноферментного анализа исследуют уровни лигандов APRIL и TRAIL, и при значении APRIL более 11,1 нг/мл, TRAIL менее 22,5 пг/мл прогнозируют риск развития быстрорастущей миомы матки.

Изобретение относится к области медицины и биологии, в частности к исследованиям таких канцерогенных веществ, как нитрозамины, модифицирующие апоптоз у детей, проживающих в неблагоприятных условиях среды обитания.

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии и патоморфологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики опухолей аногенитальных маммароподобных желез.

Настоящее изобретение касается способа предварительной оценки, будет ли терапевтическое средство, выбранное из группы полипептид, антитело или иммуноадгезин, иметь необходимую скорость выведения у яванского макака, человека.
Изобретение относится к области медицины, к лабораторной диагностике в гинекологии и касается способа определения вида эндометриоза яичника. Способ включает анализ транскриптома эндометриоидной ткани очага эндометриоза яичника путем проведения исследования экспрессии гена TIMP1, при превышении экспрессии гена TIMP1 относительно гена выше 0,5 о.е.
Изобретение относится к медицине, в частности к гематологии, и может быть использовано для прогнозирования течения апластической анемии после спленэктомии. Для этого после удаления селезенки определяют ее массу.

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано при лечении сарком мягких тканей для прогнозирования возникновения рецидива. Для этого с помощью проточной цитофлюориметрии проводят определение процентного содержания T-regs(CD3+CD4+CD25+CD127dim) лимфоцитов от количества CD3+CD4+клеток в гомогенатах образцов опухолевой ткани и в ткани линии резекции после хирургического удаления опухоли.

Изобретение относится к области ветеринарной микробиологии и касается иммуноферментной тест-системы для серологической диагностики анаэробной энтеротоксемии сельскохозяйственных животных, вызываемой бактериями Clostridium perfringens (Cl.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для иммуногистохимического выявления антигенов в препаратах органов продуктивных и непродуктивных животных длительного хранения в фиксаторах. Для этого проводят обработку поверхности предметного стекла для наклеивания срезов адгезивом на основе яичного белка и глицерина в соотношении 2:1. Затем проводят депарафинирование и регидратацию срезов. При этом после депарафинизации и регидратации срезы опускают на 5 мин в чистую емкость с дистиллированной водой. После чего срезы помещают в Н2О2 на 10-12 мин, после работы пароварки, содержащей цитратный буфер в течение 40-45 мин. При этом стекла из пароварки не вынимают в течение 20 мин после прекращения ее работы. Промывают срезы дистиллированной водой, затем помещают в буфер Твин 20х. Для образования сухого поля срезы промакивают одноразовыми бумажными полотенцами и делают вокруг срезов гидрофобный слой маркером. Далее наносят блокировочный раствор, в качестве которого используют 5% бычий сывороточный альбумин, на 10-12 мин. Наносят первичные антитела и ставят в термостат при 27°С на 24-26 ч во «влажной камере», через 14-15 ч смывают первичные антитела буфером Твин 20х в течение 5-7 мин. При этом срезы промакивают и наносят на них вторичные антитела. Ставят в термостат на 1-2 ч во «влажной камере» при температуре 27°С. Смывают вторичные антитела, при этом используют хромоген на безбиотиновой системе детекции. Окрашивают в течение 3 мин, смывают хромоген в трех порциях дистиллированной воды по 5-7 мин. Докрашивают срезы гематоксилином Майера 5-7 мин. Затем ополаскивают стекла в дистиллированной воде и опускают в щелочную воду на 10-15 с. Изобретение позволяет выявлять антигены в гистологических препаратах, после их длительного хранения в фиксаторах. 8 ил., 4 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к ветеринарии, и может быть использовано для получения антигена для дифференциальной диагностики вакцинированных и больных бруцеллезом животных. Для этого проводят экстракцию липополисахаридов бруцелл вида Brucella abortus и Brucella melitensis, для чего их берут в равном соотношении. Обрабатывают 2%-ным раствором уксусной кислоты в присутствии 10% NaCl при автоклавировании, затем отделяют экстракт центрифугированием, фракционируют супернатант спиртом с последующим диализом и выделяют О-полисахарид центрифугированием. Использование данного способа позволяет получить комплексный антиген, содержащий О-полисахаридный М- и А-антигены, при этом включение в комплекс М-компонента значительно повышает чувствительность реакции иммунодиффузии при диагностике бруцеллеза, вызываемого B. Melitensis. 1 пр.

Настоящее изобретение относится к акушерству и касается прогнозирования угрозы невынашивания инфекционного генеза на ранних сроках гестации. Сущность способа: в сыворотке крови беременных со сроком 6-11 недель гестации с помощью иммуноферментного анализа определяют уровень интерфероноподобного цитокина IL-28B. При концентрации IL-28B выше 261,4 пг/мл по сравнению с концентрацией, установленной для физиологически протекающей беременности, прогнозируют угрозу выкидыша в первом триместре гестации. Изобретение обеспечивает повышение точности прогнозирования угрозы невынашивания за счет использования в качестве количественного показателя увеличение концентрации цитокина IL-28B. Способ малоинвазивен, удобен и прост в применении, достаточно информативен и имеет высокую достоверность прогноза. Использование данного способа будет способствовать более быстрой и безопасной диагностике угрозы прерывания беременности инфекционного генеза в I триместре. 1 табл., 4 пр.

Изобретение относится к медицине и касается способа получения селективного иммуносорбента для удаления антител к десмоглеину 3 типа (Dsg3) из крови больных пузырчаткой, при котором приготавливают раствор Dsg3 в фосфатном буфере. В пустую центрифужную микроколонку добавляют сухую NHS-активированную агарозу, вносят раствор Dsg3 в микроколонку с агарозой и, перемешивая, инкубируют; по окончании инкубации микроколонку центрифугируют с охлаждением, затем получившийся фильтрат отбирают, после чего для отмывки от несвязавшегося Dsg3 в колонку добавляют фосфатный буфер, центрифугируют; повторяют процедуру отмывки, фильтраты после отмывок отбирают; далее для блокирования остаточных активных NHS-групп сорбента добавляют раствор буфера - этаноламина и, перемешивая, инкубируют; по окончании инкубации центрифугируют, фильтрат удаляют; повторяют процедуру отмывки, фильтраты после отмывок отбирают; готовый сорбент используют для выделения аутоантител к Dsg3. Изобретение обеспечивает получение селективного иммуносорбента для избирательного удаления антител к десмоглеину 3 типа из сыворотки крови у больных пузырчаткой. 4 ил., 1 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области биохимии. Предложено антитело к рецептору эпидермального фактора роста 2 (HER2) человека, а также включающие указанное антитело фармацевтические композиции, предназначенные для профилактики и лечения злокачественной опухоли и для индуцирования апоптоза. Кроме того, предложен набор для диагностики злокачественной опухоли, включающий указанное антитело. Изобретение позволяет уничтожать раковые клетки с существенно увеличенной цитотоксичностью при применении указанного антитела в комбинации с трастузумабом и может быть использовано в терапии рака. 4 н. и 7 з.п. ф-лы, 27 ил., 10 табл., 15 пр.

Группа изобретений относится к области биотехнологии. Представлен рекомбинантный ген, кодирующий белок L1 вируса папилломы человека 16 типа, с кодонами, оптимизированными для гетерологичной экспрессии в штаммах Е. coli. Представлен экспрессионный плазмидный вектор pQE-L1/16, несущий указанный рекомбинантный ген. Представлен способ получения рекомбинантного белка L1HPV16 с использованием указанного вектора, которым трансформируют штаммы Е. coli. Представлены иммуногенная композиция и вакцина для индукции специфического клеточного и гуморального иммунитета против HPV16, содержащие рекомбинантный белок L1HPV16. Группа изобретений позволяет получать устойчивый очищенный иммуногенный белок L1HPV16, а также позволяет снизить стоимость процесса его получения для применения в составе эффективных иммуногенных композиций и вакцин против вируса папилломы человека 16 типа. 6 н.п. ф-лы, 3 ил., 1 табл., 5 пр.

Настоящая группа объектов изобретения относится к области биотехнологии. Предложен рекомбинантный мультимерный скаффолд на основе 3 домена FnIII тенасцина (Tn3), который специфически связывается с рецептором 2 TRAIL (TRAIL R2). Кроме того, рассмотрена выделенная молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая мультимерный скаффолд; вектор экспрессии; клетка-хозяин и способ получения рекомбинантного мультимерного скаффолда. Также описаны: фармацевтическая композиция; способ профилактики, лечения или снижения симптомов рака; способ индуцирования апоптоза в клетке и способ изменения активности TRAIL R2-экспрессирующей клетки. Мультимерный скаффолд по настоящему изобретению обладает повышенной аффинностью относительно TRAIL R2, повышенной стабильностью и пониженной иммуногенностью. В этой связи настоящее изобретение может найти дальнейшее применение в терапии и диагностике заболеваний, связанных с TRAIL R2. 9 н. и 23 з.п. ф-лы, 25 табл., 28 ил., 22 пр.

Группа изобретений относится к способу калибровки составного анализа, включающему: добавление калибровочного реагента, включающего по меньшей мере две различные связывающие молекулы, где каждая молекула обладает способностью специфичного связывания с агентом захвата и способностью связываться с детектирующей молекулой и где по меньшей мере две из связывающих молекул имеют различные специфичности и присутствуют в различных концентрациях, добавление детектирующей молекулы, детектирование связанной детектирующей молекулы, создание калибровочной кривой, включающей ряд калибровочных точек/интервалов. Также группа изобретений относится к набору реагентов и составной аналитической системе. Применение группы изобретений позволяет повысить точность результатов благодаря системной вариабельности систематических анализов в течение времени. 4 н. и 16 з.п. ф-лы, 7 ил., 4 табл., 3 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к вирусологии, и может быть использовано для диагностики периода инфекционного процесса, вызванного вирусом ветряной оспы. Сущность способа: исследуемую сыворотку одновременно вносят в лунки двух стрипов, иммобилизованных антигеном вируса varicella zoster, инкубируют в течение 50-55 минут, затем один стрип обрабатывают однократно водным раствором 6 М мочевины в течение 15 минут, после чего оба стрипа промывают и вносят в них конъюгат специфических моноклональньгх антител к IgG антителам человека, инкубируют в течение 30 минут, после промывания окрашивают водным раствором хромогена 10-15 минут при комнатной температуре, реакцию останавливают раствором 0,5 М серной кислоты, определяют оптическую плотность с помощью спектрофотометра, проводят расчет индекса авидности по формуле: и при уровне ИА менее 45% и до 50% диагностируют острый период, при более 50% ИА и менее 65% - раннюю паст-инфекцию, при ИА 65% и более 70% - поздний период заболевания. Способ является эффективным и информативным для диагностики периода инфекционного заболевания, вызванного вирусом varicella zoster у детей, с помощью которого возможно устанавливать острую инфекцию, активацию хронической персистирующей инфекции, а также высокий протективный иммунитет, что оказывается решающим фактором при установлении этиологии заболевания и выборе адекватной терапевтической тактики. 3 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области биомедицины и касается способа диагностирования острого повреждения почек и применения in vitro набора, содержащего праймеры, необходимые для выполнения способа. Способ включает анализ образца, взятого у пациента, и определение уровня экспрессии по меньшей мере одной микроРНК, выбранной из miR-127, miR-126, miR-210 и miR-101, и сравнение упомянутого уровня экспрессии со значением контроля, где: (а) снижение уровня экспрессии сывороточной miR-127 в отношении значения контроля свидетельствует об остром повреждении почек; (б) повышение уровня экспрессии miR-127 в моче в отношении значения контроля свидетельствует об остром повреждении почек; (в) снижение уровня экспрессии сывороточной miR-126 в отношении значения контроля свидетельствует об остром повреждении почек; (г) повышение уровня экспрессии сывороточной miR-210 в отношении значения контроля свидетельствует об остром повреждении почек; (д) снижение уровня экспрессии miR-210 в моче в отношении значения контроля свидетельствует об остром повреждении почек; или (е) повышение уровня экспрессии сывороточной miR-101 в отношении значения контроля свидетельствует об остром повреждении почек. 2 н. и 3 з.п. ф-лы, 20 ил., 2 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и найдет широкое применение в лечении пациенток с аменореей, обусловленной нервной анорексией. Сущность способа: пациенток на этапе редукции нервной анорексии с продолжающейся аменореей в сыворотке крови методом ИФА определяют уровень дофамина и ЛГ, и если уровень дофамина составляет 67,25 пгмл и более, но менее 280 пгмл, а показатели ЛГ 0,95 мМЕл и более, прогнозируют нормализацию менструальной функции. Применение данного способа прогнозирования восстановления менструальной функции позволит своевременно выбрать адекватную терапию для лечения данного заболевания, что поможет предотвратить развитие вторичного гипогонадизма, приводящего к гипоплазии матки и бесплодию в репродуктивном периоде. Способ позволяет объективизировать оценку эффективности лечения и своевременно прогнозировать дальнейшее течение заболевания. Способ имеет чувствительность – 93,9, специфичность 93,9, точность 88,2. 3 пр.

Наверх