Способ приготовления цитологических препаратов метафазных хромосом

Изобретение относится к области клинико-диагностических исследований и может применяться для приготовления цитологических препаратов метафазных хромосом при проведении анализа кариотипа гемопоэтических клеток. Для этого 1-2 мл суспензии фиксированных клеток, полученных из костного мозга или периферической крови пациента, наносят на горизонтально удерживаемое предметное стекло с пленкой 55% водного раствора уксусной кислоты. В результате содержание метафазных пластинок с адекватными для анализа разбросами хромосом в цитологических препаратах повышается не менее чем в 3 раза. Изобретение обеспечивает быстрый и точный анализа кариотипа метафазных хромосом. 1 пр.

 

Изобретение относится к приготовлению цитологических препаратов метафазных хромосом, применяемых в научных и клинико-диагностических исследованиях. Хромосомные аберрации лежат в основе возникновения так называемых хромосомных патологий (болезнь Дауна, болезнь Шерешевского-Тернера и др.), а также обусловливают или сопровождают во многих случаях развитие онкологических заболеваний, прежде всего гемобластозов. В настоящее время базовым подходом к оценке кариотипа при хромосомных и онкогематологических патологиях является исследование метафазных хромосом с помощью световой микроскопии (Verma R.S., Babu A. Human chromosomes. Perga-mon Press, Inc., New York. 1989. 240 p.). Успешность проведения исследования с помощью указанного метода, как и метафазного FISH-анализа, во многом определяется качеством морфологии хромосом в приготовленном препарате. К числу важнейших параметров качества хромосомных препаратов относятся площадь разброса хромосом в отдельной метафазной пластинке, частоты наложения хромосом и разрушенных метафаз. Нестабильность в достижении оптимального разброса хромосом до сих пор остается главной проблемой метафазных FISH- и стандартных цитогенетических исследований (Barch MJ, Knusten T, Spurbeck JL. The AGT cytogenetics laboratory manual. 3rd ed. New York: Raven Press. 1997. P. 25-50).

Высокие уровни метафазных пластинок с избыточной компактностью, наложениями хромосом или разрушенными метафазами на цитологических препаратах затрудняют, а порой делают невозможным кариотипирование. В случае исследований образцов (костного мозга, периферической крови, лимфоузлов) онкогематологических больных ситуация усугубляется тем, что для оценки кариотипа опухолевых клеток необходим анализ не менее 20 метафазных пластинок с адекватными разбросами. Такого количества пригодных для анализа метафаз нередко не оказывается не только из-за высоких частот некачественных метафаз на цитологическом препарате, но и вследствие того, что цитогенетическое исследование выполняется на фоне проводимой терапии, которая, как правило, приводит к снижению уровня пролиферирующих клеток.

Известен способ приготовления цитологических препаратов хромосом, включающий равномерного нанесение 3-5 капель фиксированной (с помощью смеси метанола и уксусной кислоты в соотношении 3:1) клеточной суспензии на сухое предметное стекло, предварительно очищенное погружением в 100%-ный этанол с последующим вытиранием чистой безворсовой тканью и высушенное на воздухе (Cancer Cytogenetics: Methods and Protocols, Methods in Molecular Biology, vol. 730 Ed. by: Lynda J. Campbell L.J, Springer Science + Business Media, LLC 2011. P. 63-78).

Недостатком данного способа приготовления хромосомных препаратов является низкий уровень метафаз с пригодными для анализа разбросами хромосом в большинстве случаев.

Известен другой способ приготовления цитологических препаратов хромосом, включающий раскапывание 1 капли полученной клеточной суспензии на предметное стекло с водяной пленкой. После выдерживания «лицевой» стороны предметного стекла над водяным паром (75°C или более) в течение 1-3 с и появления зернистости в фиксаторе (клетки становятся видимыми) высушивают предметное стекло на металлической пластине с температурным градиентом вдоль одного из ее измерений. Степень разброса регулируется благодаря наличию возможности варьировать температуру предметного стекла с помощью нагретой пластины. Согласно имеющимся данным повышение температур способствует увеличению разброса хромосом. В тех же случаях, когда не удается достичь адекватных для анализа разбросов с помощью вышеуказанных технических приемов, авторы предлагают после раскапывания клеточной суспензии выдерживать предметное стекло кратковременно над паром, затем добавлять 4-6 капель ледяной уксусной кислоты. После распределения уксусной кислоты по поверхности предметного стекла проводится быстрое высушивание над паром в течение 3-5 с в горячей области металлического плата (65-75°C) или металлического блока (Henegariu O, Heerema N.A., Wright L.L. et al Improvements in Cytogenetic Slide Preparation: Controlled Chromosome Spreading, Chemical Aging and Gradual Denaturing // Cytometry. 2001. Vol. 43, P. 101-109).

Основным недостатком указанного способа приготовления цитологических препаратов хромосом является часто низкий уровень метафаз с адекватными для анализа разбросами хромосом. При этом следует отметить, что в случае дополнительного наслаивания ледяной уксусной кислоты на нанесенный материал в среднем наблюдается улучшение качества хромосомных разбросов. Но в то же время ухудшается качество дифференциальной окраски хромосом, что делает их малоинформативными либо вовсе непригодными для кариотипирования.

В качестве прототипа способа выбран стандартный способ приготовления цитологических препаратов метафазных хромосом, включающий:

1) нанесение 1 капли суспензии фиксированных культивированных клеток, полученных из клинического образца (костный мозг, периферическая кровь) пациента, на центральную часть удерживаемого горизонтально предметного стекла с пленкой из деионизованной воды,

2) перемещение стекла на ровную поверхность с последующим удалением переместившейся к краям стекла воды с помощью фильтровальной бумаги,

3) высушивание стекла на воздухе при комнатной температуре (Cancer Cytogenetics: Methods and Protocols, Methods in Molecular Biology, vol. 220 Ed. by: J. Swansbury - Humana Press Inc., Totowa, NJ, 2003 - P. 73-83).

К недостатку способа относится нередко низкое содержание метафазных пластинок с пригодными для анализа разбросами хромосом в цитологическом препарате, что вызывает значительные затраты времени на поиск указанных пластинок, а во многих случаях не позволяет проводить полноценный анализ кариотипа.

Техническая задача изобретения - устранение указанного недостатка.

Технический результат заключается в ускорении и повышении точности анализа кариотипа гемопоэтических клеток.

Данный технический результат достигается тем, что предложен способ приготовления хромосомных препаратов, включающий нанесение 1-2 капель суспензии фиксированных культивированных клеток, полученных из костного мозга или периферической крови пациента, на горизонтально удерживаемое предметное стекло с пленкой из 55% водного раствора уксусной кислоты. Этапы получения хромосомных препаратов, связанные с перемещением предметного стекла на ровную поверхность с последующими удалением переместившейся к краям стекла воды с помощью фильтровальной бумаги и высушиванием стекла на воздухе при комнатной температуре, проводятся стандартно.

Сущность предлагаемого изобретения заключается в том, что благодаря раскапыванию суспензии фиксированных клеток, полученных из костного мозга или периферической крови пациента, на предметное стекло с пленкой из 55% водного раствора уксусной кислоты удается повысить содержание метафазных пластинок с адекватными для анализа разбросами хромосом в цитологических препаратах не менее чем в 3 раза. Применение указанного раствора уксусной кислоты лабилизует клеточную мембрану, делая ее более чувствительной к разрывам. При этом данный подход без дополнительных технических приемов эффективен при широком спектре атмосферных условий (относительная влажность, температура) и приемлемом качества дифференциального окрашивания хромосом.

Способ осуществляют следующим образом.

Для приготовления цитологических препаратов хромосом с применением, в частности, краткосрочного культивирования образец костного мозга (периферической крови или лимфоузла) ставится на культивирование при 37°C в течение 18-24 ч в стерильной одноразовой пластиковой пробирке (объем 15 мл) в 5 мл культуральной смеси из расчета 1-2 млн ядросодержащих клеток на 1 мл культуральной смеси. Культуральная смесь включает 4 мл среды RPMI-1640, 1 мл эмбриональной телячьей сыворотки, L-глутамин с конечной концентрацией 292 мкг/мл, антибиотики пенициллин (100 ед./мл) и стрептомицин (100 мкг/мл), а также колцемид (конечная концентрация - 0,02 мкг/мл) для накопления метафазных клеток. После инкубации клетки осаждаются центрифугированием при 1000 об/мин в течение 10 мин, удаляется супернатант, осадок суспендируется в 7-10 мл нагретого до 37°C гипотонического (0,075 М) раствора KCI, и клетки инкубируются в течение 10 мин при 37°C. Затем клетки центрифугируются при 1000 об/мин в течение 5 мин, супернатант удаляется, а осадок тщательно разбивается встряхиванием примерно в 0,5 мл супернатанта. Далее по каплям при осторожном перемешивании добавляется 7-10 мл фиксатора, суспензия выдерживается в течение 20 мин при комнатной температуре, и проводится центрифугирование при 1000 об/мин в течение 10 мин. После окончания центрифугирования осадок вновь ресуспендируется в 5 мл фиксатора, а суспензия выдерживается 7-10 мин при комнатной температуре. После этого проводится центрифугирование при 1000 об/мин в течение 10 мин при комнатной температуре. Ресуспендирование клеток в фиксаторе с последующим их центрифугированием повторяется 4-6 раз в зависимости от качества полученных препаратов. После последнего центрифугирования осадок клеток суспендируется в 0,5 мл свежего фиксатора.

На заключительном этапе приготовления хромосомных препаратов одна или 2 капли (одна вблизи матового поля, другая у противоположного края стекла) клеточной суспензии наносятся на горизонтально удерживаемое предметное стекло с пленкой из 55% водного раствора уксусной кислоты. Сама пленка создается нанесением 6-8 капель указанного раствора с помощью пастеровской пипетки на предметное стекло и последующим распределением по всей поверхности последнего (за исключением матового поля) полирующими движениями пипетки. После аккуратного перемещения предметного стекла с нанесенной клеточной суспензией на горизонтальную поверхность проводится высушивание препарата на воздухе при комнатной температуре.

Пример. Для оценки кариотипа опухолевых клеток у больной Р. хроническим миелолейкозом, получающей терапию ингибитором тирозинкиназ иматинибом, 0,5 мл пунктата костного мозга с концентрацией ядросодержащих клеток 20×106/мл было поставлено на культивирование в течение 24 ч с ночной колцемидизацией (конечная концентрация колцемида - 0,02 мкг/мл). После окончания культивирования обработка клеток проводилась стандартным способом. Полученная клеточная суспензия наносилась на горизонтально удерживаемые предметные стекла с пленками из деионизованной воды и 55% водного раствора уксусной кислоты. После высушивания предметных стекол хромосомные препараты подвергались «старению» (ночная инкубация в термостате при 60°C) с последующим дифференциальным G-окрашиванием и анализировались. В хромосомных препаратах, полученных с применением раскапывания суспензии фиксированных клеток на предметные стекла с пленками из воды и 55% водного раствора уксусной кислоты, было обнаружено соответственно 14 и 47 метафазных пластинок с пригодными для анализа разбросами. Затраты времени на поиск 14 адекватных для анализа метафаз в препарате, полученном с применением пленки из деионизованной воды, были примерно в 3 раза больше, чем в препарате, приготовленном с применением 55% водного раствора уксусной кислоты. При анализе кариотипа клеток в препарате, полученном с применением пленки из раствора уксусной кислоты, было выявлено 2 цитогенетических клона: 46,XX,t(9;22)(q34;q11)[4]/46,XX[43]. При исследовании же препарата, приготовленного с применением водной пленки, был выявлен только один цитогенетический клон клеток с нормальным кариотипом: 46,ХХ[14].

Способ приготовления цитологических препаратов метафазных хромосом, заключающийся в том, что на поверхность горизонтально удерживаемого предметного стекла наносят одну или две капли суспензии культивированных фиксированных клеток, отличающийся тем, что на поверхности предметного стекла перед раскапыванием клеточной суспензии создается пленка из 55% водного раствора уксусной кислоты нанесением 6-8 капель указанного раствора с помощью пастеровской пипетки на предметное стекло и последующим распределением по всей поверхности последнего (за исключением его матового поля) полирующими движениями пипетки.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к области диагностики, а именно к способу контроля эффективности сорбции липополисахарида (ЛПС) при проведении селективной ДПС-гемосорбции. Способ контроля эффективности сорбции ЛПС при проведении селективной ЛПС-гемосорбции, включающий определение концентрации пресепсина в крови до и после колонки гемосорбента не реже, чем один раз в час, и при росте концентрации пресепсина в крови после колонки гемосорбента фиксируют снижение эффективности сорбции гемосорбента.

Изобретение относится к медицине, в частности к лабораторному методу исследования, и может быть использовано при прогнозировании течения раневого процесса. Способ прогнозирования течения раневого процесса заключается в том, что производят микроскопическое исследование текстур, полученных в результате высыхания исследуемой биологической жидкости на обезжиренном предметном стекле в форме капли при температуре 20-30°С, исследование проводят на изотропных текстурах, а в качестве биологической жидкости используют сыворотку крови, которую высушивают в течение 24 часов, а затем осуществляют микроскопическое исследование в проходящем свете и, при выявлении изотропных текстур в форме языковых полей, выпуклых округлых образований, трехлучевых трещин, делают прогноз по дальнейшему течению раневого процесса - наличие одного из видов изотропных текстур или их сочетание свидетельствует об осложнении заживления раны.

Изобретение относится к области медицины, а именно к онкологии, и предназначено для прогнозирования риска возникновения гематогенного метастазирования при инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы у пациенток с хорошим ответом на неоадъювантную химиотерапию.

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и касается способа ранней диагностики наследственной тирозинемии 1 типа (HT1). Сущность способа заключается в том, что детям первых 3-х месяцев жизни, у которых имеет место сочетание симптомокомплекса, состоящего из лихорадки неясного генеза, отеков, желтухи и диспепсического синдрома, а у детей в возрасте 4 месяцев и старше - гепато- или гепатоспленомегалии и клинических проявлений острого рахита, проводят исследование крови с оценкой уровня гемоглобина и количества эритроцитов, количества тромбоцитов, уровня АЛТ, ACT, билирубина и его фракций, уровня щелочной фосфатазы, кальция, фосфора, АФП, коагулограммы.

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, для диагностики врожденных заболеваний, и может быть использовано для ранней диагностики прогрессирующего семейного внутрипеченочного холестаза у детей (ПСВХ).

Изобретение относится к области медицины и касается способа прогнозирования значений индекса атерогенности через 4-5 лет у стажированных работающих, экспонированных ртутью, без признаков патологии нервно-психической сферы.

Изобретение касается способа изготовления биомеханического сенсора для измерения сил адгезии в системе «клетка-клетка». Сущность способа заключается в том, что используют влажную камеру, стандартный tipless кантилевер, суспензию лимфоцитов.

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ прогнозирования развития артериальной гипертензии (АГ) среди шорцев, имеющих почечную дисфункцию (ПД).
Изобретение относится к области медицины, а именно к ортопедии и травматологии, и предназначено для диагностики при подозрении на инфекцию в области сустава. Для осуществления способа выполняют взятие биологического материала и транспортировку для исследования.

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу определения биологической активности дефибротида. Приводят в контакт дефибротид, эуглобулин млекопитающего и субстрат, специфичный для плазмина, который в результате реакции с плазмином дает измеряемый продукт.
Изобретение относится к медицине, а именно к травматологии и ортопедии, и может быть использовано для хирургического лечения гетеротопической оссификации с выполнением локального нейромоделирования спастического синдрома пациента. Для этого предварительно методом многослойной спиральной компьютерной томографии (МСКТ) проводят пространственную визуализацию костных структур и оссификатов. Методом магнитно-резонансной томографии выявляют мягкотканную компоненту оссификата, не визуализируемую при выполнении МСКТ. Затем определяют стадию зрелости гетеротопических оссификатов по показателям фосфорно-кальциевого обмена - щелочной фосфатазы, остеокальцина и маркера формирования костного матрикса PINP - N-терминального пропептида проколлагена 1 типа в венозной крови пациента. Если измеренные показатели N-терминального пропептида проколлагена 1 типа - PINP составляют менее 76 нг/мл даже при изолированном поражении одного локтевого или одного коленного сустава, уровень щелочной фосфатазы находится в пределах 40-150 Ед/л и уровень остеокальцина - в пределах 11-46 нг/мл, то устанавливают факт завершенности процессов образования остеоида и его минерализации с образованием и созреванием губчатой костной ткани новообразованной кости. В таком случае считают показанным хирургическое удаление оссификатов в пораженном суставе. При этом перед выполнением хирургического удаления оссификатов проводят этап локального нейромоделирования спастического синдрома до получения его стойкого снижения до уровня от 0 до 1 балла по шкале Ашворта. Далее осуществляют хирургическое лечение, включающее резекцию оссификата или удаление адекватного объёма гетерогенной кости для восстановления функционально достаточного объема движений в пораженном суставе. Способ обеспечивает возможность хирургического лечения гетеротопической оссификации у пациентов со спастическим синдромом, минимизацию риска осложнений при хирургическом лечении и возникновения рецидива патологического процесса. 2 з.п. ф-лы, 5 пр.

Изобретение относится к диагностике, в частности к гистохимии, и может быть использовано для оценки типа мышечных волокон. Для этого гистологические срезы для определения окислительного, окислительно-гликолитического и гликолитического типов мышечных волокон последовательно помещают вначале в 1% раствор CaCI2, затем в 2% раствор CoCI2 и далее в 1% раствор сульфида аммония, в последующем их помещают в кислую среду, в которой инактивируется «быстрый» миозин гликолитических волокон, и в щелочную среду для определения окислительно-гликолитического и гликолитического типов, в которой инактивируется «медленный» миозин окислительных волокон, при этом окислительные волокна на срезе окрашиваются черным цветом, окислительно-гликолитические волокна - серым цветом, а гликолитические волокна - белым цветом, тип же мышечных волокон определяют по площади их поперечного сечения, а в качестве маркеров используют ферменты: сукцинатдегидрогеназу - для оценки активности окислительных процессов в митохондриях и лактатдегидрогеназу - для определения интенсивности гликолиза в цитоплазме клетки. Способ позволяет достоверно определить тип мышечного волокна при его доступности. 3 табл., 5 ил.

Изобретение относится к медицине и предназначено для оценки функционального состояния печени при патологии. Производят оценку лабораторных данных, характеризующих состояние органа: интенсивность процессов липопероксидации (ДК, МДА), функциональная активность (БИЛ, АлАТ, Рж, ЦП) и состояние гистоструктур органа (МИТ, ГЕП, СТ); определяют фазу патологического процесса. Для этого показатели сравниваются с их табличными значениями, полученными на основе математического анализа зависимостей, отображающих отдельные параметры реального состояния органа. Способ позволяет повысить точность диагностики состояния печени. 11 ил., 7 табл.
Изобретение относится к ветеринарии и может быть использовано для экспресс-диагностики скрытых воспалительных процессов молочной железы и репродуктивных органов коров. Способ экспресс-диагностики скрытых воспалительных процессов молочной железы и репродуктивных органов коров включает определение гистамина в надосадочной жидкости, полученной в результате осаждения белков жидкой части крови ацетонитрилом. Осаждение белков жидкой части крови осуществляют ацетонитрилом, который берут в соотношении 1:2, взбалтывают, выдерживают не более 2 мин, добавляют 90-100 мкл едкого натрия и 400-500 мкл 2%-го медного купороса, встряхивают смесь и определяют наличие гистамина в надосадочной жидкости и по изменению окраски устанавливают реакцию. Светло-голубая окраска – реакция положительная, а фиолетовая окраска - реакция отрицательная. Способ позволяет в течение 5 минут и с высокой достоверностью определить наличие скрытого воспалительного процесса в организме коров. 2 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к микробиологии, клинической лабораторной диагностике, молекулярной биологии, акушерству, гинекологии и неонатологии. Cпособ выявления возбудителей нозокомиальных оппортунистических инфекций и маркеров их резистентности к бета-лактамным антибиотикам и гликопептидам у женщин репродуктивного возраста и новорожденных детей заключается в том, что выполняется ПЦР в режиме реального времени и определяются следующие показатели: наличие геномной ДНК человека, общая бактериальная масса, наличие ДНК УПМ, относящихся к восьми таксонам (семейство: Enterobacteriaceae, роды: Staphylococcus, Enterococcus, Acinetobacter, комплекс видов: Burkholderia cepacia, виды: Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Stenotrophomonas maltophilia), а также 15 маркеров резистентности микроорганизмов к антибиотикам: mecA, vanA, vanB, blaTEM, blaSHV, blaCTX-M blaOXA23-подобные гены, blaOXA40-подобные гены, blaOXA48-подобные гены, blaOXA51-подобные гены, blaOXA58-подобные гены, blaNDM, blaVIM, blaKPC, blaIMP и по полученным данным осуществляют оптимальный выбор антибактериальных препаратов. 5 табл., 3 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии и сердечно-сосудистой хирургии, и может быть использовано для диагностики реактивности и дефицита кровотока в позвоночных артериях у пациентов с клиникой вертебрально-базилярной недостаточности. Для этого пациенту, в положении лежа, проводят цветное допплеровское картирование позвоночных артерий, из доступа у угла нижней челюсти регистрируют линейные и объемные скорости кровотока по позвоночным артериям в 3 сегменте, определяют среднюю скорость кровотока, проводят пробу с задержкой дыхания пациентом на 30 секунд, регистрируют изменения объемных, линейных скоростей кровотока и средней скорости после пробы, вычисляют индекс реактивности позвоночных артерий по формуле: ИР=V2-V1/V2⋅100%, где ИР - индекс реактивности; V1 - средняя скорость кровотока до пробы; V2 - средняя скорость кровотока после пробы, затем проводится исследование позвоночной артерии с другой стороны и при значении ИР менее 30% и суммарном объемном кровотоке по двум позвоночным артериям менее 250 мл/мин диагностируют низкую реактивность и дефицит кровотока в позвоночных артериях. Способ позволяет выбрать адекватный и полноценный способ реваскуляризации позвоночных артерий при простоте и точности определения реактивности и дефицита кровотока в них. 2 пр.

Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для сбора зрелых яиц in vitro от самок возбудителя гельминтозооноза Trichostrongylus colubriformis. Способ заключается в том, что матриксы из тонких кишок спонтанно зараженных трихостронгилюсами при исследовании гельминтологическими методами на вскрытии мелких жвачных предварительно обрабатывают в изотоническом растворе (0,9%) хлорида натрия при t = 37°C. Затем проводят отбор 250 и более живых, активных, половозрелых 250 и более самок вида Trichostrongylus colubriformis. Отбор проводят в отдельные бактериологические чашки с раствором Ringer по 9 самок в каждую чашку. Затем их экспонируют при t = 25°C в течение 3-х часов в условиях термостата, после чего получают чистую культуру зрелых яиц Trichostrongylus colubriformis, выделенных живыми самками. Заявленный способ позволяет получить до 100% сбора только зрелых яиц от самок возбудителя гельминтозооноза Trichostrongylus colubriformis. 1 пр.

Изобретение относится к медицине, и предназначено для ранней диагностики дисфункции сфинктера Одди III типа у пациентов, оперированных по поводу желчнокаменной болезни. Дополнительно определяют уровень нейропептидов пищеварительного тракта и оксида азота при поступлении в хирургическое отделение и при значениях концентрации нейропептидов-дилататоров ниже 0,5 нг/мл, нейропептидов-констрикторов выше 1,0 нг/мл, оксида азота ниже 9,75 мкмоль/л диагностируют дисфункцию сфинктера Одди III типа. Способ позволяет повысить эффективность ранней диагностики и своевременно проводить профилактические и лечебные мероприятия и диспансерное наблюдение этой категории пациентов. 3 ил., 1 табл., 1 пр.

Изобретение относится к медицине, в частности к лабораторным методам исследования, позволяющим осуществлять эффективный скрининг антиоксидантов. Способ экспресс-скрининга потенциальных антиоксидантов заключается в том, что выделяют липопротеиды низкой плотности (ЛНП) из плазмы венозной крови здоровых доноров, осуществляют окисление липопротеидов низкой плотности при температуре 37°С внесением 30 мМ сульфата меди (CuSO4), после чего через фиксированные интервалы времени измеряют накопление липогидропероксидов (конъюгированных диенов) при 233 нм (ΔD233) и по результатам исследования строят кинетическую кривую окисления ЛНП, из которой определяют продолжительность периода индукции (τ), затем в опытные пробы вносят исследуемые антиоксиданты (конечная концентрация 1 мкМ), растворенные либо в 96% этаноле - для жирорастворимых веществ или в среде инкубации - для водорастворимых веществ, и если продолжительность периода индукции исследуемого вещества выше 0,4 - вещество может рассматриваться в качестве эффективного антиоксиданта; если ниже 0,1 - исследованное вещество эффективным антиоксидантом не является. 3 пр., 2 ил., 1 табл.

Изобретение относится к областям экологии, ветеринарии, животноводства и предлагается для использования в качестве теста прижизненной оценки уровня аккумуляции свинца в мышечной ткани крупного рогатого скота герефордской породы. Способ заключается в определении в волосе концентрации стронция или цинка. Затем рассчитывают уравнение регрессии, при этом по содержанию стронция или цинка определяют концентрацию свинца в мышечной ткани y=0,0019x+0,0376, где x - содержание Sr (мг/кг) в волосе, y - содержание Pb (мг/кг) в мышечной ткани; y=0,0011x+0,0142, где x - содержание Zn (мг/кг) в волосе, y - содержание Pb (мг/кг) в мышечной ткани. Способ атравматичен, точен и неинвазивен, удобен и прост в использовании. 3 табл., 1 пр.

Изобретение относится к области клинико-диагностических исследований и может применяться для приготовления цитологических препаратов метафазных хромосом при проведении анализа кариотипа гемопоэтических клеток. Для этого 1-2 мл суспензии фиксированных клеток, полученных из костного мозга или периферической крови пациента, наносят на горизонтально удерживаемое предметное стекло с пленкой 55 водного раствора уксусной кислоты. В результате содержание метафазных пластинок с адекватными для анализа разбросами хромосом в цитологических препаратах повышается не менее чем в 3 раза. Изобретение обеспечивает быстрый и точный анализа кариотипа метафазных хромосом. 1 пр.

Наверх