Пептид, обладающий способностью ингибировать миграцию клеток, стимулированную белком tarc



Пептид, обладающий способностью ингибировать миграцию клеток, стимулированную белком tarc
Пептид, обладающий способностью ингибировать миграцию клеток, стимулированную белком tarc
Пептид, обладающий способностью ингибировать миграцию клеток, стимулированную белком tarc

 


Владельцы патента RU 2629198:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Российский кардиологический научно-производственный комплекс" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "РКНПК" МЗ РФ) (RU)

Изобретение относится к биологически активным пептидам. Предложен пептид формулы H-Gly-Ala-Ile-Pro-Leu-Arg-Lys-Leu-Lys-Thr-Trp-Tyr-OH, обладающий способностью ингибировать миграцию клеток, стимулированную хемокином TARC, и способ его получения. 2 н.п. ф-лы, 1 ил., 2 пр.

 

Изобретение относится к биологически активным пептидам, способным ингибировать подвижность клеток, стимулированную хемокином TARC. Предложен пептид формулы H-Gly-Ala-Ile-Pro-Leu-Arg-Lys-Leu-Lys-Thr-Trp-Tyr-ОН. Заявленный пептид может использоваться в иммунологии для лечения аллергических заболеваний и в онкологии для повышения эффективности противоопухолевой терапии лейкозов.

Хемокины - это группа структурно родственных белков небольшого размера (8-12 кДа). Они представляют собой цитокины, индуцирующие миграцию лейкоцитов в лимфатические органы и очаги воспаления, контролирующие активацию и дифференцировку клеток. Действие хемокинов осуществляется через специфические мембранные рецепторы.

TARC - тимусом и активацией регулируемый хемокин (thymus- and activation-regulated chemokine, или CCL17) относится к подсемейству СС или β-хемокинов, в структуре которых два остатка цистеина расположены рядом (-с-с-) [1]. TARC специфически связывается с рецептором CCR4. Основную популяцию CCR4 + клеток в норме составляют Т-хелперные клетки, обеспечивающие гуморальный иммунный ответ на антигены (Т-хелперы 2 типа) [2-4].

Известно, что Т-хелперы 2 типа играют важную роль в развитии иммунных патологий, таких как аллергии и аутоиммунные расстройства [5]. Было показано значительное увеличение содержания в крови хемокина TARC при атопическом дерматите [6, 7], астме [8] и аллергическом рините [9].

Высокая экспрессия рецептора CCR4 выявлена в клетках Т-клеточной лимфомы/лейкоза взрослых и Т-клеточной лимфомы кожи [10, 11]. Показано, что поражения кожных покровов, характерные для этих неоплазий, обусловлены CCR4-зависимой миграцией опухолевых клеток в дерму.

Все эти факты указывают на необходимость разработки терапевтических подходов, основанных на ингибировании взаимодействия рецептора CCR4 с его лигандом. Некоторые шаги в этом направлении уже предприняты. Разработано несколько химических антагонистов CCR4 различной структуры и получены моноклональные антитела против рецептора CCR4, которые показали достаточно высокую противовоспалительную и противоопухолевую активность в доклинических испытаниях [12, 13]. Однако использование химических антагонистов в клинике может быть сопряжено с такими проблемами, как: низкая эффективность, токсичность, трудности в оценке фармакокинетических характеристик и метаболизма.

В связи с этим представляется целесообразным получение антагониста рецептора CCR4 с минимальным побочным действием. В качестве такого вещества может быть использован пептидный фрагмент TARC человека, обладающий антагонистическими по отношению к TARC свойствами.

Задачей настоящего изобретения является синтез пептидов, лишенных побочных реакций, ингибирующих TARC-опосредованную миграцию лимфоидных клеток.

Поставленная задача решается путем синтеза пептида формулы: TARC 17-28 - H-Gly-Ala-Ile-Pro-Leu-Arg-Lys-Leu-Lys-Thr-Trp-Tyr-OH. Заявляемый пептид содержит 12 аминокислотных остатков. Синтез заявляемого пептида осуществляется твердофазным способом с помощью Fmoc-технологии, что в настоящее время с учетом длины пептида является рутинной задачей. Очистка пептида осуществляется путем обычной одностадийной высокоэффективной жидкостной хроматографией (ВЭЖХ). Все это делает получение заявляемого антагониста значительно проще и дешевле, чем получение «гуманизированных» антител.

Неочевидность изобретения обусловлена тем, что поставленная задача решается путем синтеза пептида последовательности 17-28 TARC, хотя из литературы не известно ни одного фрагмента этого белка, способного ингибировать TARC-стимулированную миграцию лимфоидных клеток. Таким образом, из литературных данных не следовало, что поиск пептидного ингибитора TARC-стимулированной подвижности лимфоидных клеток среди фрагментов молекулы может привести к желаемым результатам. Заявляемый пептид не обладает иммуногенным и токсическим действием, поскольку является низкомолекулярным фрагментом эндогенного хемокина TARC.

Синтез заявляемого пептида осуществляется по стандартной технологии пептидного синтеза на твердой фазе с применением наиболее современной Fmoc-(9-флуоренилметоксикарбонил)-технологии [14]. В качестве нерастворимого носителя использовали сополимер стирола с 1% дивинилбензола с кислотолабильной якорной группой. Для блокирования функциональных групп боковых цепей аминокислот применяли следующие защиты: трет-бутильную для гидроксильных групп треонина и тирозина; трет-бутилоксикарбонильную (Boc) - защиту для ε-аминогруппы лизина и индольного кольца триптофана; 2,2,5,7,8-пентаметилхроман-6-сульфонильную (Pmc) - защиту для гуанидиновой функции аргинина. Пептидную цепь наращивали по одной аминокислоте, начиная синтез с С-конца. Для создания амидных связей использовали 2-(1Н-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония тетрафторборат (TBTU) в присутствии 2-х эквивалентов N-метилморфолина.

Для заключительного деблокирования и отщепления пептидов от носителя применяли трифторуксусную кислоту со скэвенджерами. Сырой продукт твердофазного синтеза очищали с использованием препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).

Пример 1. Синтез додекапептида H-Gly-Ala-Ile-Pro-Leu-Arg-Lys-Leu-Lys-Thr-Trp-Tyr-OH, соответствующего последовательности 17-28 тимус-ассоциированного регуляторного хемокина (TARC)

В работе использовали производные L-аминокислот фирмы Bachem (Швейцария), TBTU, TIBS (триизобутилсилан) фирмы Fluka (Швейцария). Для синтеза применяли диметилацетамид, дихлорметан (DCM), 4-метилпиперидин и трифторуксусную кислоту фирмы Fluka (Швейцария).

Аналитическую и препаративную ВЭЖХ проводили на приборе Gilson (Франция), использовали ацетонитрил фирмы Panreac (Испания).

Аналитическую ВЭЖХ проводили на колонке Диасфер 110-С18 (Россия). В качестве элюентов использовали: буфер А - 0.1% ТФА, буфер Б - 80% ацетонитрила в буфере А, элюция градиентом буфера Б от 20 до 80% за 30 мин со скоростью 1 мл/мин; детекция при 220 нм. Препаративную ВЭЖХ проводили на колонке Диасорб С16 130Т (25×250 мм), размер частиц сорбента 10 мкм. В качестве элюентов использовали буфер А -- 0.1% ТФА, буфер Б - 80% ацетонитрила в буфере А. Элюцию проводили градиентом 0.5% в минуту буфера Б в буфере А от 100% буфера А со скоростью 10 мл/мин. Пептиды детектировали при длине волны 220 нм.

1Н-ЯМР-спектры снимали на спектрометре WH-500 Bruker 500 МГц (Германия) в DMSO-d6 (дейтерированный диметилсульфоксид) при 300K, концентрация пептидов составляла 2-3 мг/мл, химические сдвиги измерялись относительно тетраметилсилана. Масс-спектры регистрировали на приборе VISION 2000, (Termobioanalysis corp., Finnigan, США), снабженном импульсным азотным лазером класса 3В с длиной волны излучения 337 нм, методом MALDI с использованием 2,4,6-тригидроксиацетофеноновой матрицы.

Синтез пептидного фрагмента хемокина TARC осуществляли по стандартной технологии синтеза на твердой фазе с использованием Fmoc-методологии. В качестве полимерного носителя использовали Fmoc-аминоацил-полимер Ванга - сополимер стирола с 1% дивинилбензола с гидроксиметилфеноксиметильной якорной группой, с размером частиц 200-400 меш фирмы Bachem (Швейцария). Содержание стартовой аминокислоты составляло 0.7 ммоль/г аминоацилполимера.

Синтез проводили на автоматическом пептидном синтезаторе Tribute-UV фирмы Protein Technologies (США) по стандартной программе для однократной конденсации 0.5 ммоль Fmoc-аминокислоты. Использовали 4-кратный избыток Fmoc-защищенных аминокислот по отношению к содержанию аминогрупп в полимере. Синтез проводили с С-конца в соответствии с протоколом автоматического синтезатора для конденсации методом TBTU/NMM (2-(1Н-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония тетрафторборат / N-метилморфолин). Для деблокирования α-аминогрупп в процессе твердофазного синтеза (ТФС) использовали раствор 10% 4-MePip и 2% DBU (1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ен) в DMA (N,N-диметилацетамид).

Протокол твердофазного синтеза

По окончании ТФС пептидилполимер переносили из реактора на фильтр Шотта и промывали DMA (3×10 мл), DCM (3×10 мл), сушили на воздухе.

Заключительное деблокирование и отщепление пептида от полимера проводили в одну стадию путем обработки соответствующего пептидилполимера 10 мл смеси 95% TFA, 2.5% деионизованной воды, 2.5% TIBS в течение 1.5 ч. Затем полимер отфильтровывали, промывали 2×2 мл деблокирующей смесью, фильтрат упаривали и к остатку прибавляли сухой диэтиловый эфир. Осадок отфильтровывали, промывали DCM (3×3 мл), эфиром (3×5 мл), сушили в вакуум-эксикаторе. Сырой продукт ТФС содержал, по данным ВЭЖХ, около 80% основного вещества. Очистку полученного соединения проводили методом препаративной ВЭЖХ.

Структуру полученного соединения подтверждали данными 1H-ЯМР- спектроскопии и масс-спектрометрии в указанных выше условиях. Выход синтезированного фрагмента TARC 17-28 в расчете на стартовую аминокислоту, присоединенную к полимеру, составил 46.2%. Данные масс-спектрометрии: найдено m/z=1446.16, вычислено М=1445.79. Данные аналитической ВЭЖХ: время удерживания пептида (Rt) - 12.7 мин, чистота - 96.1%

Пример 2

Тестирование синтезированного пептида проводилось по оценке его влияния на миграцию клеток Т-лимфобластного лейкоза линии CEM.NKR, стимулированную TARC. Клетки были любезно предоставлены зав. лаб. иммунологии и клеточной биотехнологии РНПЦ эпидемиологии и микробиологии МЗ Республики Беларусь д.м.н. Гончаровым А.Е. Клетки культивировали в среде RPMI-1640 с добавлением 10% сыворотки плода коровы, 2 мМ глутамина, по 100 Ед/мл пенициллина и стрептомицина (все реактивы фирмы Invitrogen). Экспрессия клетками рецепторов CCR4 была подтверждена с помощью прямой иммунофлуоресценции (окрашивание антителами к CCR4, меченными фикоэритрином, eBioscience) и проточной цитометрии.

Миграционный ответ клеток оценивали в системе Трансвелл с диаметром пор 8 мкм для 24-луночных планшетов (Corning, NY). Для проведения эксперимента использовали среду RPMI-1640 с добавлением 1% сыворотки плода коровы. В нижнюю часть системы Трансвелл вносили 5 нМ раствор хемокина TARC (R&D Systems) в среде, либо среду без TARC (контроль). Пептид вносили в нижнюю часть системы Трансвелл до конечной концентрации 100 мкМ. 100 мкл суспензии клеток (10 млн/мл) помещали в верхнюю часть системы. Планшеты инкубировали в атмосфере 5% CO2 при 37°С в течение 18 часов. Клетки, промигрировавшие в нижнюю часть системы Трансвелл, подсчитывали в камере Горяева. Количество промигрировавших клеток выражали в относительных единицах (О.Е.), принимая за 1 О.Е. уровень спонтанной миграции клеток в контрольных образцах.

Для межгрупповых сравнений использовали U-критерий Манна-Уитни. Данные выражали как медиана (25; 75 процентили). Для обработки данных использовали программный пакет Statistica 7. Различия считали статистически значимыми при p<0,05.

В использованной модельной системе TARC стимулировал миграцию лимфоидных клеток. Количество клеток в нижней части Трансвелл было в 7-8 раз выше по сравнению с контролем. Полученный пептидный фрагмент хемокина TARC подавлял миграцию, индуцированную TARC, примерно в 2 раза, но не оказывал влияния на спонтанную подвижность клеток. Указанный пептид не оказывал влияния на миграцию клеток, стимулированную другими хемокинами, в частности, SDF-1 (данные не представлены).

На фиг. 1. показано влияние пептида H-Gly-Ala-Ile-Pro-Leu-Arg-Lys-Leu-Lys-Thr-Trp-Tyr-OH на миграцию клеток Т-лимфобластного лейкоза линии CEM.NKR, стимулированную хемокином TARC. Вдоль оси X расположены точки эксперимента. В верхнюю часть системы Трансвелл вносили суспензию клеток в среде RPMI-1640 с добавлением 1% сыворотки плода коровы. В нижнюю часть: такую же среду (контроль) (точка 1); хемокин TARC (5 нМ) (2); хемокин TARC (5 нМ) и пептид H-Gly-Ala-Ile-Pro-Leu-Arg-Lys-Leu-Lys-Thr-Trp-Tyr-OH (100 мкМ) (3); пептид H-Gly-Ala-Ile-Pro-Leu-Arg-Lys-Leu-Lys-Thr-Trp-Tyr-OH (100 мкМ) (4). По оси Y приведено количество промигрировавших клеток, выраженное в относительных единицах (О.Е.) 1 О.Е. - количество промигрировавших клеток в контрольных образцах.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Imai Т., Yoshida Т., Baba М., Nishimura М., Kakizaki М., Yoshie О. // J. Biol. Chem. 1996. V. 271. P. 21514-21521.

2. Bonecchi R., Bianchi G., Bordignon P.P., D'Ambrosio D., Lang R., Borsatti A., Sozzani S., Allavena P., Gray P.A., Mantovani A., Sinigaglia F. // J. Exp. Med. 1998. V. 187. P. 129-134.

3. Sallusto F., Lenig D., Mackay C.R., Lanzavecchia A. // J. Exp. Med. 1998. V. 187. P. 875-883.

4. Imai Т., Nagira M., Takagi S., Kakizaki M., Nishimura M., Wang J., Gray P.W., Matsushima K., Yoshie O. // Int. Immunol. 1999. V. 11. P. 81-88.

5. Mosmann T.R., Sad S. // Immunol. Today. 1996. V. 17. P. 138-146.

6. Fujisawa, Т., Fujisawa, R., Kato, Y., Nakayama Т., Morita A., Katsumata PL, Nishimori H., Iguchi K., Kamiya H., Gray P.W., Chantry D., Suzuki R., Yoshie O. // J. Allergy Clin. Immunol. 2002. V. 110. P. 139-146.

7. Horikawa, Т., Nakayama, Т., Hikita, I., Yoshie O. // Int. Immunol. 2002. V. 14. P. 767-773.

8. Sekiya Т., Yamada H., Yamaguchi M., Ishii A., Yamamoto K., Morita A., Sano Y., Yoshie O., Matsushima K., Hirai K. // Allergy. 2002. V.57. P. 173-177.

9. Campbell, J.D., Stinson, M.J., Simons, F.E., HayGlass, K.T. // Int. Immunol. 2002. V. 14. P. 1255-1262.

10. Yoshie O, Fujisawa R, Nakayama T, Harasawa H., Tago H., Izawa D., Hieshima K., Tatsumi Y., Matsushima K., Hasegawa H., Kanamaru A., Kamihira S., Yamada Y. // Blood. 2002. V. 99. P. 1505-1511.

11. Ferenczi K., Fuhlbrigge R.C., Pinkus J., Pinkus G.S., Kupper T.S. // J. Invest. Dermatol. 2002. V. 119. P. 1405-1410.

12. Pease J.E. and Horuk R. // Expert Opin. Drug Discov. 2014. V. 9. P. 467-483.

13. Niwa, R., Shoji-Hosaka, E., Sakurada, Shinkawa Т., Uchida K., Nakamura K., Matsushima K., Ueda R., Hanai N., Shitara K. // Cancer Res. 2004. V. 64. P. 2127-2133.

14. Fmoc solid phase peptide synthesis. 2001. Ed. Chan, W.C., White, P.D. Oxford University Press, New York, USA. 346 p.

1. Пептид формулы H-Gly-Ala-Ile-Pro-Leu-Arg-Lys-Leu-Lys-Thr-Trp-Tyr-ОН, обладающий способностью ингибировать миграцию клеток, стимулированную хемокином TARC.

2. Способ получения пептида по п. 1 твердофазным методом с использованием Fmoc-аминокислот.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к композициям с высокой степенью проникновения или пролекарствам с высокой степенью проникновения на основе пептида или родственного пептиду соединения, которые содержат функциональную единицу, линкер и транспортную единицу.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к новым пептидным структурам, обладающим антибактериальными свойствами, и может быть использовано в медицине.

Изобретение относится к связывающему гиалуроновую кислоту синтетическому пептидогликану, который содержит синтетический пептид, конъюгированный с хондроитинсульфатом, где синтетический пептид содержит аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 80% идентичность последовательности GAHWQFNALTVRGG.

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к области доставки противоопухолевых средств в клетки млекопитающих. Изобретение позволяет получить конъюгат происходящего из апротинина полипептида Angiopep-2 с тремя молекулами таксола, который может быть использован в терапии пациентов, страдающих раком мозга.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к идентификации ключевой области ND2, ответственной за взаимодействие с Src, и может быть использовано в медицине.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к модифицированным полипептидам остеопонтина, и может быть использовано в косметологии и медицине. Получают модифицированный остеопонтин, в котором RGD домен инактивирован.

Настоящее изобретение относится к биохимии, в частности к циклическому пептиду, обладающему антинеопластической и антиангиогенной активностями, имеющему одну из SEQ ID NO:1-76.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к новым пептидам на основе лактоферрина человека, и может быть использовано в медицине. Синтезируют пептиды, характеризующиеся последовательностью CFLWRRLMRKLR (SEQ ID NO: 74);CWLWRRAMRKVW (SEQ ID NO: 76); LRLWRRLMRKVW (SEQ ID NO: 77);RRLWRRWMRKVL (SEQ ID NO: 78); CRLWRRRMRKVW (SEQ ID NO: 79); LRLWRRSMRKVW (SEQ ID NO: 81); KKLWRRWWRKVL (SEQ ID NO: 90); RWCKLWRRLMRKVRRL (SEQ ID NO: 85);RWCFLWRRLMRKHRRL(SEQ ID NO: 86); WCKLWRRLMRKVRR(SEQ ID NO: 87); WRRWLRKSVKRL(SEQ ID NO: 93); WCRWLRKMVKAL(SEQ ID NO: 94) или WRRWLRKMVKRL(SEQ ID NO: 95).

Изобретение относится к генной инженерии. Описан способ доставки нуклеиновой кислоты в митохондрию и генетической модификации клетки, включающий воздействие на клетку композицией, содержащей по меньшей мере одну нуклеиновую кислоту и по меньшей мере один органоидно-направленный наноноситель, где наноноситель доставляет по меньшей мере одну нуклеиновую кислоту сквозь клеточную мембрану в митохондрию.

Изобретение относится к новым пептидам, сконструированным на основании аминокислотной последовательности, соответствующей последовательности зрелого человеческого лактоферрина с 13 по 30 аминокислотный остаток, обладающим улучшенной противомикробной и/или противовоспалительной активностью, и их применению, в частности для лечения и/или предотвращения инфекций, воспалений, ран или рубцов.

Изобретение относится к новым бициклическим соединениям пиперазина формулы I, , а также к их фармацевтически приемлемым солям. Технический результат: получены новые соединения формулы I, обладающие модулирующей активностью в отношении тирозинкиназы Брутона (Btk), которые могут быть использованы для приготовления фармацевтических композиций, а также для лечения иммунных расстройств, таких как воспаление, опосредованное киназой.

Изобретение относится к соединению, имеющему систематическое название 4-(4-{[2-(4-хлорфенил)-4,4-диметилциклогекс-1-ен-1-ил]метил}пиперазин-1-ил)-N-({3-нитро-4-[(тетрагидро-2Н-пиран-4-илметил)амино]фенил}сульфонил)-2-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-илокси)бензамид (соединение 1) в форме ангидрата свободного основания кристаллической формы, гидрата свободного основания кристаллической формы, сольвата кристаллической формы, гидрохлоридной соли кристаллической формы или сульфатной соли кристаллической формы.

Настоящее изобретение относится к новым пиридазинамидам формулы I, где все переменные заместители определены в формуле изобретения, и их фармацевтически приемлемым солям, а также к фармацевтической композиции на их основе.

Изобретение относится к новому соединению - (5-бром-2-гидроксифенил)метилиденгидразиду 2-[6-метил-4-(тиетан-3-илокси)пиримидин-2-илтио]уксусной кислоты формулы I. Соединение обладает антиоксидантной активностью и обладает стимулирующей защитной активностью фагоцитов.

Изобретение относится к соединениям формулы (I): ,где остатки R1, R1' и R1ʺ независимо друг от друга представляют собой водород, алкоксигруппу, галоген или группу -CF3, остаток R2 представляет собой С1-7 алкил или фенил, или его фармацевтически приемлемой соли.

Изобретение относится к способу повышения иммунитета. Способ предполагает вдыхание воздуха, обогащенного растворами биологически активного эфирного масла, распыленного в помещении до концентрации 0,05 – 0,25 мг/м3.

Изобретение относится к хиназолин-4-оновым соединениям формулы (I’) или их фармацевтически приемлемым солям, обладающим свойствами ингибирования дезубихитинирующего фермента.

Предложены соединения 8-фторфталазин-1(2H)-онов формулы II, где один из X1, X2 и X3 представляют собой N и остальные символы имеют значения, указанные в п.1 формулы изобретения, или их стереоизомеры, гаутомеры и фармацевтически приемлемые соли.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству, гинекологии и репродуктологии, и может быть использовано при лечении нарушений репродуктивной функции, связанных с хроническим эндометритом с аутоиммунными нарушениями, в том числе у пациенток с осложненным гинекологическим анамнезом.

Группа изобретений относится к области ветеринарии и предназначена для повышения неспецифической резистентности организма и обмена веществ у мясных цыплят. Заявленный состав включает левамизол в качестве иммуномодулятора, янтарную кислоту как биологически активное соединение, водорастворимые соли железа, меди, цинка, кобальта и воду при следующем соотношении компонентов, мас.

Изобретение относится к области органической химии, а именно к новому производному 1,5- и 1,7-нафтиридина формул (I-A) или (I-B), а также к его таутомерной или изомерной форме, и фармацевтически приемлемой соли, где X1 представляет собой N и X2 представляет собой CR3a или X2 представляет собой N и X1 представляет собой CR3a; каждый R2 независимо выбран из галогена и С1-4алкокси; Y представляет собой -E-D; D представляет собой 5- или 6-членный ароматический моноциклический гетероциклил, содержащий один или два атома N, где указанный гетероциклил может быть необязательно замещен одной или двумя группами R1; Е представляет собой связь; R1 представляет собой C1-6алкил; R3a представляет собой водород или хлор; R3 представляет собой С2-6алкинил, галогенС1-6алкил, гидроксиС1-6алкил, цианоС1-6алкил, С1-6алкоксиС1-6алкил, C1-6алкил, замещенный R9, C1-6алкил, замещенный -NR10R11, C1-6алкил, замещенный -С(=O)-NR10R11, R13; R9 представляет собой 5- или 6-членный насыщенный или ароматический моноциклический гетероциклил, содержащий один, два или три гетероатома, выбранных из N или О, где указанный 5- или 6-членный моноциклический гетероциклил необязательно и независимо замещен 1 или 2 заместителями, где каждый заместитель независимо выбран из =O, С1-4алкила, -S(=O)2-NR14R15 и фенилС1-6алкила; R10 и R11, каждый независимо, представляет собой водород, C1-6алкил, C1-6алкил, замещенный -NR14R15; R13 представляет собой насыщенный 6-членный моноциклический гетероциклил, содержащий один атом N; R14 и R15, каждый независимо, представляет собой водород или С1-4алкил; n независимо представляет собой целое число, равное 2, 3 или 4.
Наверх