Способ моделирования болезни гиршпрунга в эксперименте

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано при моделировании болезни Гиршпрунга. Способ моделирования включает в стенку толстой кишки 1% раствора глутамата натрия. Препарат вводят крысе через анальное отверстие инсулиновым шприцем. При этом вкол осуществляют в слизистую оболочку кишки на протяжении 1,5 см, выполняют 4 инъекции на 3, 6, 9 и 12 часов условного циферблата при общем объеме вводимого раствора в 1 мл. Способ безопасен, прост в исполнении и может быть осуществлен, в том числе студентами. Широкая доступность и низкая стоимость глутамата натрия создают условия для активного использования способа в различных исследованиях болезни Гиршпрунга в эксперименте.

 

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной медицине, и может применяться при моделировании болезни Гиршпрунга в эксперименте.

Известен способ моделирования болезни Гиршпрунга в эксперименте путем иссечения серозного и мышечного слоя дистального участка толстой кишки с замещением полихлорвиниловой трубкой. У крысы рассекают наружную оболочку толстой кишки, удаляют на необходимом протяжении серозную и мышечную оболочку вместе с ауэрбаховским нервным сплетением, а на подслизистую основу обнаженного участка наносят 5% раствор нитрата серебра (повреждая мейснеровское нервное сплетение). На внутренний футляр кишечной стенки накладывают, фиксируя, полихлорвиниловую трубку. (Чепурной Г.И., Морозов В.Г., Кивва А.Н., Панченко С.Н., патент РФ №2144699, 2000 г.)

Недостатками этого способа являются:

1. Высокая техническая сложность.

2. Несоответствие морфологии модели морфологии болезни Гиршпрунга (отсутствие у животного в зоне моделирования серозной и мышечной оболочек кишки).

3. Отсутствие возможности исследования на данной модели патогенетически обоснованных методов лечения на основе биотехнологий, в связи с несоответствием морфофизиологической картины указанной модели и болезни Гиршпрунга.

Ближайшим к заявляемому является способ моделирования болезни Гиршпрунга в эксперименте с использованием HgCl2 (Imamura et al,.. Pathophysiology of aganglionic colon segment: An experimental study on aganglionosis produced by a new method in the rat. Journal of Paediatric Surgery 10, 865-873, 1975).

Способ заключается в инъекционном введении в стенку толстой кишки крысы 0,01% раствора HgCl2.

Недостатками способа, выбранного в качестве прототипа, являются:

1. Низкая избирательность воздействия раствора HgCl2 вызывает повреждение не только нервной, но и других тканей (мышечной, эпителиальной и др.), что не соответствует морфофизиологической картине болезни Гиршпрунга и ограничивает возможности по исследованию новых методов лечения.

2. Высокая токсичность сухого HgCl2, что исключает возможность активного привлечения студентов младших курсов высших учебных заведений к научной деятельности, а также приводит к необходимости использования специального лабораторного оборудования.

Задачей настоящего изобретения является создание условий для исследований новых, патогенетически обоснованных методов лечения болезни Гиршпрунга с применением биотехнологий в эксперименте повышения безопасности способа.

Технический результат поставленной задачи достигается тем, что в способе моделирования болезни Гиршпрунга в эксперименте, включающем введение препарата в стенку толстой кишки, в качестве препарата используют 1% раствор глутамата натрия, который вводят крысе через анальное отверстие инсулиновым шприцем в стенку кишки, при этом вкол осуществляют в слизистую оболочку кишки на протяжении 1,5 см, выполняют 4 инъекции на 3, 6, 9 и 12 часов условного циферблата при общем объеме вводимого раствора в 1 мл.

При разработке модели болезни Гиршпрунга, пригодной для исследования новых, патогенетически обоснованных методов лечения на основе биотехнологий, основным требованием является соответствие морфофизиологической картины, наблюдаемой у модельного животного, морфофизиологической картине, наблюдаемой у пациентов, страдающих болезнью Гиршпрунга, а именно:

1. Наличие всех оболочек кишки (серозной, мышечной и слизистой).

2. Отсутствие в пораженном участке кишки нервных сплетений (Мейснеровского и Ауэрбаховского).

3. Полная морфологическая и функциональная сохранность в пораженном участке кишки всех тканей, кроме нервной.

Использование 1% раствора глутамата натрия вызывает избирательное поражение нервных клеток в зоне введения, приводящее к их гибели, путем апоптоза за счет использования эффекта эксайтотоксичности. Рецепторы к глутамату натрия присутствуют только на мембранах нервных клеток, соответственно, для других клеток глутамат натрия безвреден и может быть метаболизирован ими в качестве протеиногенной аминокислоты. Таким образом, введение глутамата натрия в стенку толстой кишки животного приводит к получению денервированного участка кишки, без повреждения тканей другой гистологической принадлежности, что соответствует морфофизиологической картине болезни Гиршрунга, и обеспечивает условия для исследования патогенетически обоснованных методов лечения на основе биотехнологий. Хирургическое иссечение оболочек кишки при воспроизведении предложенной модели также не выполняют.

Работа с глутаматом натрия, в том числе в сухом виде, не связана с риском для сотрудников и не требует использования специального оборудования, так как он не токсичен и свободно распространяется, в том числе как изделие пищевой промышленности.

Способ осуществляется следующим образом. Крысу линии Wistar вводят в ингаляционный эфирный наркоз. Фиксируют лигатурами в положении на спине. После подготовки операционного поля к краям анального отверстия крысы подшивают 4 лигатуры на 3, 6, 9 и 12 часов условного циферблата. Затем фиксируют лигатуры зажимами Бильрота и выполняют девульсию ануса. Далее через анальное отверстие инсулиновым шприцом в стенку кишки вводят 1% раствор глутамата натрия. Вкол осуществляют в слизистую оболочку кишки, затем продвигают ее глубже, инфильтрируя подслизистый слой и мышечную оболочку кишки на протяжении 1,5 см. Таким образом, выполняют 4 инъекции на 3, 6, 9 и 12 часов условного циферблата. Общий объем 1% раствора глутамата натрия, введенного одному животному, составляет 1 мл. Далее лигатуры снимают, животное выводят из наркоза.

Способ позволяет воспроизводить моделирование болезни Гиршпрунга в рамках доклинических исследований новых методик лечения, в том числе с применением биотехнологий.

Способ безопасен для исследователей, прост в исполнении и, соответственно, может быть осуществлен специалистами, не обладающими высокой квалификацией, в том числе студентами. Широкая доступность и низкая стоимость глутамата натрия создают условия для активного применения метода в исследованиях.

Способ моделирования болезни Гиршпрунга в эксперименте, включающий введение препарата в стенку толстой кишки, отличающийся тем, что в качестве препарата используют 1% раствор глутамата натрия, который вводят крысе через анальное отверстие инсулиновым шприцем в стенку кишки, при этом вкол осуществляют в слизистую оболочку кишки на протяжении 1,5 см, выполняют 4 инъекции на 3, 6, 9 и 12 часов условного циферблата при общем объеме вводимого раствора в 1 мл.

.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к медицине, биологии и ветеринарии и может быть использовано для определения кинетики биодеградации полимерных скаффолдов in vivo, используемых в тканевой инженерии и регенеративной медицине при пластике или замещении дефектов тканей организма.
Изобретение относится к медицине и может быть использовано для моделирования аваскулярного некроза головки бедренной кости. Для этого лабораторному животному выполняют разрез кожных покровов в проекции заднего края большого вертела и разводят мышцы до тазобедренного сустава.

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для моделирования кровообращения, а при тестировании взаимодействия фармацевтических препаратов с потоком крови.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и касается моделирования тяжелой хронической печеночной недостаточности. Способ включает подкожное введение крысе 60% масляного раствора CCl4.

Изобретение относится к области экспериментальной хирургии и касается способа формирования экспериментальной модели костного дефекта. Сущность способа заключается в том, что на уровне диафиза трубчатой кости формируют ряд каналов поперечно оси кости на глубину одной из стенок кости, костномозгового канала.
Изобретение относится к экспериментальной биологии и медицине и может быть использовано для моделирования миопатии у животных. Для этого крысе в течение двух месяцев ежедневно один раз в день перорально вводят водную суспензию препарата Симвастатин из расчета 12 мг/кг массы.
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной хирургии, и может быть использовано для моделирования спаечного процесса в брюшной полости. Для этого лабораторной крысе производят срединную лапаротомию.

Изобретение относится к экспериментальной хирургии и может быть применимо для экспериментального анатомо-хирургического обоснования оперативного доступа к тазобедренному суставу при чрезвертлужных переломах костей таза.

Изобретение относится к моделированию в медицине и может быть применимо для создания модели для изучения эффектов введения объем-образующих веществ у лабораторных животных.

Изобретение относится к области экспериментальной медицины, а именно к патологической физиологии, радиобиологии, хирургии, реаниматологии. Для моделирования комбинированного радиационно-механического поражения животных подвергают общему равномерному облучению в дозе, вызывающей развитие острой лучевой болезни средней степени тяжести.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, и может быть использовано для моделирования разлитого гнойного перитонита у крыс. Для этого под ингаляционном фторотановым наркозом крысам линии Wistar выводят из брюшной полости купол слепой кишки. Некроз слепой кишки осуществляют путем наложения лигатуры на купол. Одновременно вводят 2 мл свежей отфильтрованной каловой аутовзвеси в просвет лигированного участка слепой кишки. Способ характеризуется 100% результатом развития перитонита, простотой моделирования, выживаемостью лабораторных животных в 60,6% случаев более 7 суток, что важно для разработки новых способ лечения и изучения основных патофизиологических механизмов заболевания. 1 табл.

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии, и касается повышения уровня работоспособности у лабораторных животных в эксперименте. Для этого за час до проведения тестов Порсолта и вертикального экрана-сетки животным перорально с помощью пипетки добровольно дают раствор, содержащий 4 г креатин моногидрата и 5 г меда на 100 мл дистиллированной воды, в дозе 5 мл на 1 кг массы тела. Способ обеспечивает расширение арсенала средств актопротекторного действия при минимизация боли и страданий лабораторных животных в эксперименте. 2 табл., 2 пр.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для создания новых биомедицинских технологий предупреждения постинфарктного ремоделирования сердца. Способ включает перевязку верхней трети левой коронарной артерии и введение биопрепарата Аллоплант в бассейн стенозируемой артерии. Введение осуществляют путем внутримиокардиальной инъекции 3,0 мг биопрепарата, разведенного в физиологическом растворе. Инъекции выполняют сразу после стенозирования артерии в 6 точек, по 0,5 мг в каждую. Способ обеспечивает эффективное стимулирование эндогенных механизмов регенерации миокарда, предупреждая постинфарктное ремоделирование сердца. 2 табл., 1 пр.

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной торакальной хирургии, и может быть использовано для изучения механизмов образования остаточных плевральных полостей и разработки новых методов ликвидации остаточных полостей при хронической эмпиеме в условиях эксперимента. Для моделирования остаточной полости при хронической эмпиеме плевры крысам самцам линии Вистар создают асептическую ограниченную полость путем имплантации стерильного латексного шарика диаметром 0,8-1,0 см, заполненного воздухом и обработанного снаружи 70% раствором этилового спирта с тальком. Шарик фиксируют викриловой лигатурой к грудной стенке. К началу 4-й недели шарик удаляют и инфицируют созданную полость путем введения 0,5 мл взвеси суточной культуры Klebsiella pneumonia 105 КОЕ. Для обеспечения хронизации процесса в течение 10 дней с момента инфицирования проводят терапию, включающую пункции инфицированной полости, промывание ее 1% раствором диоксидина и внутримышечное введение субтерапевтической дозы антибиотика цефазолина в дозе 20 мг/кг 2 раза в сутки. На 38-42 сутки животных выводят из эксперимента. Способ обеспечивает создание модели ограниченной хронической эмпиемы плевры путем хронизации воспалительного процесса при высокой частоте выживаемости животных. 4 ил., 1 табл.

Изобретение относится к экспериментальной медицине, физиологии, патологической физиологии. Устройство для фиксации изолированных мышечных препаратов содержит держатель и бранши в виде крючков, к которым крепятся мышечные препараты, причем бранши представляют собой V-образное окончание держателя и фиксируются между собой кольцом для получения нужного зазора между браншами. Использование изобретения позволит надежно фиксировать мышечный препарат, не нарушая при этом диффузию. 1 ил.

Группа изобретений относится к оборудованию для проведения исследований в области медицины и физиологии. Коннектор для хронической стимуляции электровозбудимых клеток содержит основание и крышку, выполненные с возможностью герметичного соединения друг с другом, микроэлектродную матрицу, выполненную в виде массива из металлических микроэлектродов, сформированных на подложке, с чашей для культуры клеток и с контактными площадками по периметру, соединенными посредством токопроводящих дорожек с микроэлектродами, и плату с отверстием, с выступом, с прижимными пружинными контактами, соединенными токопроводящими дорожками. Основание выполнено с отверстием для выступа платы, крышка выполнена с отверстием, покрытым фильтрующей мембраной, микроэлектродная матрица установлена на дно основания. Над микроэлектродной матрицей установлена плата. Чаша с культурой клеток выполнена выступающей сквозь отверстие платы. Выступ платы выполнен выходящим за периметр основания через отверстие для выступа платы и соединен с внешним разъемом. Прижимные пружинные контакты платы расположены соосно контактным площадкам микроэлектродной матрицы с возможностью взаимодействия с ними. Раскрыта установка для хронической стимуляции электровозбудимых клеток, в которой используется коннектор. Технический результат состоит в обеспечении управления стимуляцией электровозбудимых клеток в стерильных условиях их развития. 2 н. и 10 з.п. ф-лы, 5 ил.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и касается диагностики гипоксии плода в модели общей пренатальной гипоксической гипоксии. Моделируют общую пренатальную гипоксическую гипоксию у беременных крольчих породы Шиншилла на сроке 27-28 суток. Для этого их помещают в гипоксическую камеру, содержащую 10±2% кислорода и 90±2% азота на 60 минут. Затем забивают животных и через 15 минут проводят гистерэктомию, вскрывают плодные мешки, забирают образцы амниотической жидкости. В этих образцах определяют концентрацию лактата и мочевины с вычислением отношения лактат/мочевина. При величине отношения лактат/мочевина более 2,0-2,5 ммоль/л диагностируют гипоксию плода. Способ обеспечивает повышение точности диагностики гипоксии плода, что является ключевой задачей в решении проблемы создания и оценки эффективности терапевтических стратегий при перинатальной гипоксии плода. 5 ил.

Изобретение относится к нейрофизиологии, конкретно к направленному обучению биологической нейронной сети. Способ включает использование микроэлектродной матрицы для выращивания культуры диссоциированных нейрональных клеток, стимуляцию высокочастотными электрическими импульсами двух участков нейрональных клеток на основе правила зависящей от времени импульса синаптической пластичности и оценку эффективности обучения биологической нейронной сети. Используют микроэлектродную матрицу, совмещенную с двухкамерным микрожидкостным чипом, содержащим микроканалы для культивирования двух связанных аксонами популяций диссоциированных нейрональных клеток. Стимуляцию высокочастотными электрическими импульсами двух участков нейрональныхных клеток осуществляют на основе правила зависящей от времени импульса синаптической пластичности, при которой импульс направляется по аксонам в микроканалах от популяции-источника в популяцию-приемник. Стимулируют участки нейронной сети, соответствующие расположению пре- и постсинаптических нейронов в сконструированной связи. Оценку эффективности обучения биологической нейронной сети проводят по прямому показателю заданной функциональной связи и косвенным показателям. Изобретение позволяет направленно изменять функциональные связи в культуре диссоциированных клеток и детектировать вызванный эффект на основе их функциональной активности. 2 ил., 2 пр.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может найти применение в космонавтике для поддержания на высоком уровне операторской деятельности космонавтов в условиях не прогнозированного воздействия радиации, а также реабилитации пациентов после протонной терапии опухолей головного мозга. Для профилактики психоневрологических нарушений в эксперименте животному после однократного неравномерного протонного облучения в дозах, способных вызвать острую лучевую болезнь, интраназально вводят препарат Семакс 0,1% капли назальные. Семакс вводят по 1 капле в каждую ноздрю три раза в день с 1-х по 7 сутки после воздействия радиации. Способ обеспечивает сохранение на нормальном уровне ориентировочно-исследовательской реакции, эмоционального статуса, соотношения процессов возбуждения и торможения ЦНС, нарушенных протонным облучением. 2 пр., 1 табл.

Изобретение относится к медицине, в частности к онкологии, и касается оценки эффективности влияния химиотерапевтических препаратов на опухоль. Способ включает использование ксенотрансплантатной модели in vivo. В качестве трансплантата используют фрагменты опухоли, выделенные у больного. Трансплантацию проводят в переднюю камеру глаза кролика. В качестве химиотерапевтических агентов используют доксорубицин или цисплатин. Проводят постоянную визуальную оценку реакции трансплантированных клеток на действие цитостатиков, в частности постоянный анализ фотографий трансплантированной опухоли. Способ позволяет в режиме реального времени отслеживать процессы, идущие в опухоли, и оперативно реагировать на них корректировкой лечения. 9 ил., 1 табл.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано при моделировании болезни Гиршпрунга. Способ моделирования включает в стенку толстой кишки 1 раствора глутамата натрия. Препарат вводят крысе через анальное отверстие инсулиновым шприцем. При этом вкол осуществляют в слизистую оболочку кишки на протяжении 1,5 см, выполняют 4 инъекции на 3, 6, 9 и 12 часов условного циферблата при общем объеме вводимого раствора в 1 мл. Способ безопасен, прост в исполнении и может быть осуществлен, в том числе студентами. Широкая доступность и низкая стоимость глутамата натрия создают условия для активного использования способа в различных исследованиях болезни Гиршпрунга в эксперименте.

Наверх