Способ получения l-a-глицерофосфорилхолина фармакопейного качества



Способ получения l-a-глицерофосфорилхолина фармакопейного качества
Способ получения l-a-глицерофосфорилхолина фармакопейного качества
Способ получения l-a-глицерофосфорилхолина фармакопейного качества
Способ получения l-a-глицерофосфорилхолина фармакопейного качества

 


Владельцы патента RU 2635665:

Общество с ограниченной ответственностью "БИОН" (RU)

Изобретение относится к способу получения L-α-глицерофосфорилхолина фармакопейного качества и может быть использовано в фармацевтической промышленности. Предложенный способ включает этапы, на которых сорбируют L-α-глицерофосфорилхолин из метанольного обезжиренного раствора L-α-глицерофосфорилхолина, полученного переэтерификацией лецитина, на катионите в среде безводного растворителя, элюируют его с катионита обессоленной водой, обесцвечивают элюат активированным углем, очищают от минеральных и органических солей на ионообменных смолах и концентрируют, при этом сорбцию и элюирование с катионита проводят при пониженной температуре 0÷5°C, а перед концентрированием применяют фильтрацию через стерилизующий фильтр. Предложен новый эффективный способ получения ценного вещества с высоким выходом и чистотой. 2 з.п. ф-лы, 3 табл., 3 пр.

 

Изобретение относится к области химико-фармацевтической промышленности, а именно к методам выделения целевого компонента, обладающего фармацевтической активностью, из продуктов переработки растительного сырья.

Целью изобретения является способ получения L-α-глицерофосфорилхолина со степенью чистоты, соответствующей фармакопейным требованиям (международное непатентованное название активной фармацевтической субстанции - холина альфосцерат гидрат).

Из уровня техники известны следующие решения

Известен способ получения L-α-глицерофосфорилхолина и L-α-глицерофосфорилэтаноламина из соевого или яичного лецитина, включающий алкоголиз лецитина, последующее формирование нерастворимого осадка в виде комплекса с солями цинка, отделение осадка, разрушение комплекса органическими основаниями, такими, как пиридин, лутидин и т.п., и финальную очистку целевого продукта на ионообменных смолах (Европейский патент №0217765, "Process for the preparation of L-α-glycerylphosphorylcholine, L-α-glycerylphosphorylethanolamine from crude and/or deoleated lecithins", опубликован 16.08.1990).

Недостатками этого решения является применение токсичных солей цинка и органических оснований, затрудняющих очистку продукта до фармакопейного уровня, и наличие отходов, вызывающих повышенную нагрузку на окружающую среду.

Также известен способ получения L-α-глицерофосфорилхолина (Патент США №8658401 «Method for Preparing High Purity L-alpha-Glycerylphosphorylcholine», опубликован 25.02.2014), в котором лецитин подвергают ферментативному гидролизу с использованием фермента фосфолипазы, дальнейшая обработка включает обессоливание продукта на ионообменных смолах и финишную очистку от примесей на колонне с силикагелем.

Недостатками этого решения является использование для очистки силикагеля, обладающего невысокой емкостью по нагрузке, что вызывает увеличение размеров оборудования и повышенный расход растворителей, нуждающихся затем в регенерации. Кроме того, в методе не предусмотрены меры обеспечения микробиологической чистоты продукта и его апирогенности (отсутствия бактериальных эндотоксинов).

Наиболее близким аналогом предлагаемого решения является способ получения L-α-глицерофосфорилхолина, описанный в патенте США №5250719 «Process for the preparation of L-α-glycerylphosphorylcholine and of L-α-glycerylphosphorylethanolamine», опубликованном 05.10.1993, включающий нанесение на катионообменную смолу в Н+-форме в безводном растворителе спиртового экстракта переэтерифицированного лецитина, промывку смолы спиртом или водно-спиртовым раствором, выделение очищенной смеси L-α-глицерофосфорилхолина и L-α-глицерофосфорилэтаноламина путем промывки смолы водой, разделение смеси на анионите в ОН--форме с получением чистых L-α-глицерофосфорилхолина и L-α-глицерофосфорилэтаноламина.

Недостатком прототипа является неудовлетворительная для фармакопейного качества чистота продукта, вызванная присутствием бактериальных эндотоксинов, продуктов разложения L-α-глицерофосфорилхолина и L-α-глицерофосфорилэтаноламина, катализируемого катионитом, а также возможное микробиологическое загрязнение водных растворов сверх допустимых норм.

Техническим результатом предлагаемого решения является повышение качества продукта до уровня фармакопейного.

Указанный технический результат достигается за счет способа получения L-α-глицерофосфорилхолина, включающего сорбцию L-α-глицерофосфорилхолина из метанольного обезжиренного раствора L-α-глицерофосфорилхолина, полученного переэтерификацией лецитина, на катионите в среде безводного растворителя, последующее элюирование его с катионита обессоленной водой, обесцвечивание элюата активированным углем, финишную очистку от минеральных и органических солей на ионообменных смолах и концентрирование, при этом с целью достижения фармакопейного качества сорбцию и элюирование с катионита проводят при пониженной температуре, а перед концентрированием применяют фильтрацию через стерилизующий фильтр.

Температура процессов сорбции и элюирования с катионита поддерживается в интервале 0÷5°C за счет охлаждения потоков в теплообменнике холодильной машиной, либо другим методом.

С целью достижения микробиологической чистоты и одновременного удаления бактериальных эндотоксинов для фильтрации применяют стерилизующий фильтр с Z-потенциалом поверхности.

Повышение качества получаемого продукта до фармакопейного достигается за счет уменьшения разложения целевого продукта при очистке его на катионите при пониженной температуре, стерилизующей фильтрации раствора продукта через фильтр с рейтингом фильтрации 0,20÷0,22 мкм и заряженной поверхностью фильтра (так называемый фильтр с Z- или Zeta-потенциалом).

Разложение (гидролиз) L-α-глицерофосфорилхолина и L-α-глицерофосфорилэтаноламина на катионите в Н+-форме происходит из-за снижения величины рН (процесс происходит в кислой среде). В кислой среде, по литературным данным, процесс гидролиза идет в две стадии: на первой стадии происходит отщепление холина или этаноламина с образованием глицерофосфорной кислоты, на второй стадии проходит отщепление глицерина с образованием фосфорной кислоты (G. Shmidt, M.J. Bessman, S.J. Thannhauser. J.Biol. Chem. 1953, 203, 849-853).

Отщеплению холина или этаноламина предшествует изомеризация молекулы α-формы в β-форму через промежуточное циклическое соединение, что дает равновесную смесь α- и β- глицерофосфорных кислот (Lecithins: Sources, Manufacture & Uses (Ed: B.F. Szuhaj), AOCS monograph, Illinois 1989)

В статических условиях заявителем установлено влияние температуры на разложение L-α-глицерофосфорилхолина при контакте с катионитом в Н+-форме (см. Пример 1).

Пример 1

Суспензию из 100 мл 5% водного раствора L-α-глицерофосфорилхолина (GPC) и 100 мл влажного сильнокислотного макропористого катионита в Н+-форме перемешивают в колбе роторного испарителя, находящейся на водяной бане с температурой 40°C, периодически отбирая пробу жидкости для анализа на содержание GPC методом ВЭЖХ. Наблюдаемое снижение концентрации GPC с течением времени приведено в Таблице 1.

Аналогичную суспензию из 100 мл 5% водного раствора L-α-глицерофосфорилхолина (GPC) и 100 мл влажной влажного сильнокислотного макропористого катионита в Н+-форме перемешивают магнитной мешалкой в стеклянном закрытом стакане, находящемся в бане со льдом (температура реакционной смеси составляет 2°C), периодически отбирая пробу жидкости для анализа на содержание GPC методом ВЭЖХ. Наблюдаемое снижение концентрации GPC с течением времени приведено в Таблице 2.

Из данных таблиц 1 и 2 видно, что скорость разложения GPC, определяемая по убыли его концентрации в растворе, контактирующем с катионитом, в 6 раз ниже при температуре 2°C, нежели при температуре 40°C. Соответственно и скорость накопления примесей продуктов разложения, наиболее трудноудаляемой из которых является глицерин, существенно меньше при низких температурах.

Положительный технический эффект предлагаемого решения, а именно - очистка L-α-глицерофосфорилхолина на катионите при пониженной температуре в сочетании с фильтрацией получаемого продукта на фильтре с Z-потенциалом виден из примеров 2 и 3.

Пример 2

Метанольный раствор, полученный при переэтерификации лецитина в присутствии метилата натрия с последующим отделением жирных кислот, содержащий 3.19 г GPC при его концентрации в растворе около 11%, прокачивают перистальтическим насосом через колонку с 85 см3 макропористым сильнокислотным катионитом в Н+-форме, уравновешенной метанолом, при температуре +23°C. Отмывают колонку метанолом температурой 22÷23°C. После отмывки метанолом пропускают через колонку дистиллированную воду температурой 22÷23°C, собирают фракции, содержащие элюированный L-α-глицерофосфорилхолин. По результатам анализа в полученном элюате содержится 2.49 г GPC, то есть выход составляет 78%.

Полученные фракции обесцвечивают перемешиванием с активированным углем, отфильтровывают на фильтре с пористостью 40 мкм, фильтрат прокачивают перистальтическим насосом последовательно через колонки со слабоосновным анионитом в форме свободного основания, сильноосновным анионитом в ОН--форме и слабокислотным катионитом в Н+-форме. Полученный обессоленный и обесцвеченный раствор концентрируют в вакуумном роторном испарителе роторного испарителя до концентрации 84% по сухому веществу. Получают продукт, в котором содержание примесей 5%, что превышает норму. Продукт также содержит сверхнормативное количество микроорганизмов и эндотоксинов (см. Таблицу 3).

Пример 3

Метанольный раствор, полученный при переэтерификации лецитина в присутствии метилата натрия с последующим отделением жирных кислот, содержащий 4.5 кг GPC при его концентрации в растворе около 12%, прокачивают плунжерным насосом после охлаждения в теплообменнике холодильной машины через колонну со 120 л макропористого сильнокислотного катионита в Н+-форме, уравновешенной метанолом, при температуре +5°C. Отмывают колонку метанолом температурой +5°C. После отмывки метанолом прокачивают через колонну охлажденную обессоленную воду температурой 1÷5°C, собирают фракции, содержащие элюированный L-α-глицерофосфорилхолин. По результатам анализа в полученном элюате содержится 4.43 кг GPC, то есть выход составляет 94%.

Полученные фракции обесцвечивают перемешиванием с активированным углем, отфильтровывают на нутч-фильтре с фильтротканью. Фильтрат прокачивают плунжерным насосом последовательно через колонки со слабоосновным анионитом в форме свободного основания, сильноосновным анионитом в ОН--форме и слабокислотным катионитом в Н+-форме. Полученный обессоленный и обесцвеченный раствор фильтруют через капсульный фильтр с с рейтингом фильтрации 0,22 мкм, в котором фильтрующий материал (например, Nylon-66) несет поверхностный Z-потенциал. Фильтрат концентрируют в вакуумном роторном испарителе роторного испарителя до концентрации 84,5% по сухому веществу. Получают продукт, в котором содержание примесей менее 4%,

Продукт также соответствует фармакопейным требованиям по микробиологической чистоте и содержанию бактериальных эндотоксинов (см. Таблицу 3).

1. Способ получения L-α-глицерофосфорилхолина фармакопейного качества, характеризующийся тем, что включает этапы, на которых сорбируют L-α-глицерофосфорилхолин из метанольного обезжиренного раствора L-α-глицерофосфорилхолина, полученного переэтерификацией лецитина, на катионите в среде безводного растворителя, элюируют его с катионита обессоленной водой, обесцвечивают элюат активированным углем, очищают от минеральных и органических солей на ионообменных смолах и концентрируют, отличающийся тем, что сорбцию и элюирование с катионита проводят при температуре 0÷5°C, а перед концентрированием применяют фильтрацию через стерилизующий фильтр.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что температуру процессов сорбции и элюирования с катионита поддерживают в интервале 0÷5°C за счет охлаждения потоков.

3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что для фильтрации применяют стерилизующий фильтр с Z-потенциалом поверхности.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к соединению формулы (I), его энантиомерам и фармацевтически приемлемым солям и композициям на их основе, которые могут применяться в онкологии: где X и Y представляют собой С или N, но не могут быть одинаковыми, A1 и А2 вместе с атомами, несущими их, образуют гетероцикл Het, выбранный из 5,6,7,8-тетрагидроиндолизина или индолизина, или A1 и А2 представляют собой Н, (С1-С6)полигалогеналкил или (С1-С6)алкил, Т представляет собой Н, (С1-С6)алкил, необязательно замещенный одним-тремя атомами галогена, (C1-C4)алкил-NR1R2, или (С1-С4)алкил-OR6, R1 и R2 представляют собой Н или (С1-С6)алкил, или R1 и R2 с атомом азота, несущим их, образуют гетероциклоалкил, R3 представляет собой циклоалкил, гетероциклоалкил, арил или гетероарил, R4 представляет собой фенил, замещенный в пара-положении группой -ОРО(ОМ)(ОМ'), -ОРО(ОМ)(O-М1+), -OPO(O-M1+)(O-M2+), -ОРО(O-)(O-)М32+, -ОРО(ОМ)(O[CH2CH2O]nCH3), или -ОРО(O-М1+)(O[CH2CH2O]nCH3), где М и М' представляют собой Н, (С1-С6)алкил, (С2-С6)алкенил, (С2-С6)алкинил, циклоалкил или гетероциклоалкил из 5 или 6 членов, тогда как М1+, М2+ и М32+ представляют собой фармацевтически приемлемые катионы, n равен от 1 до 5, при этом атомы углерода предыдущих групп или их возможных заместителей могут быть дейтерированными, R5 представляет собой Н или галоген, (С1-С6)алкил или (C1-С6)алкокси, R6 представляет собой Н или (С1-С6)алкил, Ra, Rb, Rc и Rd представляет собой R7, галоген, (С1-С6)алкокси, гидрокси, NR7R7'-CO-(C0-C6)алкил-O-, или заместители пары (Rb,Rc) вместе с атомами углерода, несущими их, образуют кольцо из 5-7 членов с 1 или 2 гетероатомами, выбранными из О и S, при этом один или несколько атомов углерода кольца могут быть дейтерированными или замещенными 1-3 группами, выбранными из галогена и (С1-С6)алкила, R7 и R7' представляют собой H, (С1-С6)алкил, или R7 и R7' вместе с атомом азота, несущим их, образуют гетероцикл, состоящий из 5-7 членов, "арил" означает фенил, нафтил, бифенил или инденил, "гетероарил" означает моно- или бициклическую группу, состоящую из 5-10 членов c по меньшей мере одним ароматическим фрагментом и 1-4 гетероатомами, выбранными из O, S и N, "циклоалкил" означает моно- или бициклическую, неароматическую, карбоциклическую группу из 3-10 членов, "гетероциклоалкил" означает моно- или бициклическую, неароматическую, конденсированную или спирогруппу из 3-10 кольцевых членов с 1-3 гетероатомами, выбранными из О, S, SO, SO2 и N, причем арильные, гетероарильные, циклоалкильные и гетероциклоалкильные группы, алкил, алкенил, алкинил и алкокси могут быть замещены посредством 1-3 групп, выбранных из (С1-С6)алкила, (С3-С6)спиро, (С1-С6)алкокси, (С1-С6)алкил-S-, гидрокси, оксо или N-оксида, нитро, циано, -COOR', -OCOR', NR'Rʺ, (С1-С6)полигалогеналкила, трифторметокси, (С1-С6)алкилсульфонила, галогена, арила, гетероарила, арилокси, арилтио, циклоалкила, гетероциклоалкила, необязательно замещенного одним или несколькими галогенами или алкилами, R' и Rʺ представляют собой Н или (C1-С6)алкил, Het группа может быть замещена 1-3 группами, выбранными из (C1-С6)алкила, гидрокси, (С1-С6)алкокси, NR1'R1ʺ и галогена, при этом R1' и R1ʺ принимают значения, определенные для групп R' и Rʺ.

Изобретение относится к электрохимическому способу получения трис(2-хлорэтил)фосфата из красного фосфора. Способ характеризуется тем, что процесс электролиза проводят в непрерывном режиме путем постоянной подачи порошкообразного красного фосфора и смеси этиленхлоргидрина, воды и электропроводящей добавки в циркуляционный контур проточного бездиафрагменного электролизера фильтр-прессного типа, где суспензию подвергают электролизу, с отводом части электролизуемой смеси из циркуляционного контура через фильтр, после которого из отфильтрованного раствора выделяют трис(2-хлорэтил)фосфат отгонкой электролита, который вместе с отфильтрованным красным фосфором возвращают на электролиз.

Изобретение относится к производному дифенилсульфида, которое может применяться в медицине в качестве антагониста S1P3 рецептора, общей формулы (1) где R1 представляет собой С1-6-алкоксигруппу, R2 представляет собой пропил или аллил, X представляет собой метилен или атом кислорода и Z представляет собой атом галогена.
Настоящее изобретение относится к способу получения раствора диалкилфосфата гадолиния, который может быть использован при производстве синтетических каучуков, цис-1,4-гомополимеров и цис-1,4-сополимеров изопрена и бутадиена.
Группа изобретений относится к применению О,О-диметил-О-[(1-метакрилокси)-3-хлорпропил-2]фосфата в качестве замедлителя горения винилэфирных смол, а также способу его получения, которые могут использоваться при производстве полимеров.

Изобретение относится к способу получения лантаноидной соли ди-(2-этилгексил)фосфорной кислоты, который может быть использован в химической промышленности. Предложенный способ состоит в контактировании водного раствора хорошо растворимой соли лантаноида и органического раствора ди-(2-этилгексил)фосфорной кислоты в разбавителе в виде двухслойной системы, в межфазном слое которой синтезируют и удерживают лантаноидную соль ди-(2-этилгексил)фосфорной кислоты, отличающийся тем, что на межфазный слой с помощью виброэлемента, установленного на межфазной поверхности, оказывают локальное колебательное механическое воздействие.

Изобретение относится к новым соединениям структурной формулы (I) , которые могут быть использованы для лечения или профилактики заболеваний или нарушений, ассоциированных с воспалением.

Изобретение относится к новым омега-3 липидным соединениям общей формулы (I) или к их любой фармацевтически приемлемой соли, где в формуле (I): R1 и R2 являются одинаковыми или разными и могут быть выбраны из группы заместителей, состоящей из атома водорода, гидроксигруппы, С1-С7алкильной группы, атома галогена, C1-С7алкоксигруппы, С1-С7алкилтиогруппы, С1-С7алкоксикарбонильной группы, карбоксигруппы, аминогруппы и С1-С7алкиламиногруппы; Х представляет собой карбоновую кислоту или ее карбоксилат, выбранный из этилкарбоксилата, метилкарбоксилата, н-пропилкарбоксилата, изопропилкарбоксилата, н-бутилкарбоксилата, втор-бутилкарбоксилата или н-гексилкарбоксилата, карбоновую кислоту в форме триглицерида, диглицерида, 1-моноглицерида или 2-моноглицерида, или карбоксамид, выбранный из первичного карбоксамида, N-метилкарбоксамида, N,N-диметилкарбоксамида, N-этилкарбоксамида или N,N-диэтилкарбоксамида; и Y является С16-С22 алкеном с двумя или более двойными связями, имеющими Е- и/или Z-конфигурацию.

Изобретение относится к соединениям формулы , которые могут использоваться в способе синтеза предшественников иммунологического адъюванта Е6020. В формуле (3) R1, R2, R3 представляют собой C5-C15 алкильную группу, C5-C15 алкенильную группу или C5-C15 алкинильную группу.

Изобретение относится к аминосоединению формулы (I), его фармацевтически приемлемым аддитивным солям, гидратам или сольватам, обладающим иммунодепрессивным действием где R - Н или Р(=O)(ОН)2; Х - О или S; Y представляет собой -СН2СН2 - или -СН=СН-; Z представляет собой C1-5-алкилен, С2-5-алкенилен или C2-5-алкинилен; R 1 представляет собой СF3, R2 представляет собой С1-4алкил, замещенный ОН или галогеном; R 3 и R4 независимо представляют собой Н или C 1-4-алкил; А представляет собой необязательно замещенные С6-10-арил, гетероарил, содержащий 5-10 атомов в кольце, где 1 или 2 атома выбраны из N, О и S, С3-7-циклоалкил, необязательно конденсированный с необязательно замещенным бензолом, или гетероциклоалкил, содержащий 5-7 атомов в кольце, где 1 или 2 атома выбраны из N и О, где указанные заместители выбирают из С1-4-алкилтио, С1-4-алкилсульфинила, С1-4-алкидсульфонила, С2-5-алкилкарбонила, галогена, циано, нитро, С3-7-циклоалкила, С6-10 -арила, С7-14-аралкилокси, С6-10-арилокси, необязательно замещенных оксо или галогеном С2-3-алкиленокси, С3-4-алкилена или С1-2-алкилендиокси, необязательно замещенных галогеном C1-4-алкила или C1-4 -алкокси.
Наверх