Способ оптической оценки концентрации микробных клеток в суспензии



Владельцы патента RU 2636620:

Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Тюменский научный центр Сибирского отделения РАН" (ТюмНЦ СО РАН) (RU)
Симонов Олег Анатольевич (RU)
Симонова Екатерина Олеговна (RU)
Мальчевский Владимир Алексеевич (RU)

Изобретение относится к области анализа материалов путем определения их физических свойств и может быть использовано в микробиологии, а также в биотехнологическом производстве. Это достигается тем, что выполняется определение значения волнового экспонента (n) для суспензии микроорганизмов в двух дисперсионных средах с различными показателями преломления, на основе полученных его значений вычисляется для данного штамма микроорганизмов в данных конкретных условиях показатель преломления бактерий (μb) и средний радиус (Rcp) микробных тел, затем, применяя асимптотическое приближение, находится коэффициент светорассеяния (Кs), с использованием которого по измеренной оптической плотности суспензии определяется концентрация микроорганизмов (N). Изобретение может быть использовано для определения концентрации микробных клеток в суспензии в микробиологических исследованиях и биотехнологическом производстве.

 

Техническое решение относится к области анализа материалов путем определения их физических свойств, а именно к способу определения концентрации микробных клеток в суспензии, и может быть использовано в микробиологии, а также в биотехнологическом производстве.

Известен способ определения общего числа микробных клеток в 1 мл суспензии путем их подсчета под микроскопом с использованием счетной камеры Горяева [1]. Счетная камера Горяева представляет собой специальное предметное стекло, в центральной части которого имеется углубление, глубина которого во всех своих частях одинакова. На дне этого углубления выгравирована сетка, разделенная на квадраты определенной площади. По обе стороны от центрального углубления расположены две другие площадки с уровнем на 0,1 мм выше. Их плоскости служат для притирания покровного стекла до появления так называемых Ньютоновских колец. После притирания покровного стекла создается камера, закрытая с двух боковых сторон, а с двух других имеющая капиллярные пространства, через которые камеру заполняют разведением взвеси микроорганизмов с помощью пастеровской пипетки.

Подсчет клеток проводят под микроскопом, который настраивают таким образом, чтобы была видна нанесенная на камеру сетка и клетки микроорганизма, равномерно распределенные на ней. Считают число клеток в 5 горизонтальных и 15 диагональных ячейках, после чего по формуле определяют число клеток в 1 мл исследуемой взвеси.

, где:

x - число клеток в 1 мл исследуемой взвеси;

а - число клеток в 20 квадратах;

b - разведение исходной взвеси микроорганизма.

Недостатком данного способа подсчета является его не высокая точность и большая трудоемкость.

Известен способ турбидиметрии для определения общего числа клеток в 1 мл суспензии путем измерения оптической плотности взвесей микроорганизмов при определенной длине волны [2]. Действие турбидиметра основано на сопоставлении интенсивности света, рассеянного средой, с интенсивностью рассеяния эталона. При испытании пробу освещают, а затем измеряют интенсивность прошедшего излучения или излучения, рассеянного под определенным углом. Для определения количества клеток в среде используют калибровочную кривую, отображающую зависимость между величиной светорассеяния и числом клеток в единице объема взвеси. Для построения калибровочной кривой измеряют величину светорассеяния в ряде проб с известным содержанием клеток. Калибровочные кривые индивидуальны для каждого микроорганизма.

Недостатком данного способа подсчета является длительная подготовка к его использованию. Необходимо выполнить калибровку для каждого микроорганизма, что достаточно трудоемко и долго. Кроме этого, для калибровки необходимы образцы с известным количеством клеток в единице объема, что может быть определено достаточно неточными методами, допустим, с использованием метода последовательных разведений или камеры Горяева. Еще одним недостатком данного метода является его зависимость от условий, в которых проведена калибровка, действительно, если калибровка проведена при одних условиях, а измерения проводятся при других (температура, свойства растворителя и пр.), то точность измерений будет очень невысокой.

Задачей технического решения является совершенствование способа оценки концентрации микробных клеток в суспензии, направленного на увеличение скорости анализа, снижение его трудоемкости и себестоимости, а также уровня погрешности.

Поставленная задача решается благодаря тому, что способ оптической оценки концентрации микробных клеток в суспензии включает в себя определение значения волнового экспонента (n) для суспензии микроорганизмов в двух дисперсионных средах с различными показателями преломления, индивидуальный расчет показателя преломления бактерий (μb) данной конкретной суспензии и вычисление среднего радиуса находящихся в ней микробных тел (Rcp), затем, применяя асимптотическое приближение, находится коэффициент светорассеяния (Кs), с использованием которого по измеренной оптической плотности суспензии определяется концентрация микроорганизмов (N).

В предлагаемом способе оценки концентрации микробных клеток в суспензии предусмотрены следующие отличия от существующих, а именно проводится определение значения волнового экспонента (n) для суспензии микроорганизмов в двух дисперсионных средах с различными показателями преломления, на основе полученных его значений вычисляется для данного штамма микроорганизмов в данных конкретных условиях показатель преломления бактерий (μb) и средний радиус (Rcp) микробных тел, затем, применяя асимптотическое приближение, находится коэффициент светорассеяния (Кs), с использованием которого по измеренной оптической плотности суспензии определяется концентрация микроорганизмов (N).

Между совокупностью существенных признаков заявляемого объекта и достигаемым техническим результатом существует причинно-следственная связь, которую можно продемонстрировать на примере 1.

Пример 1

Нами был проведен сравнительный эксперимент по определению концентрации микроорганизмов в суспензии способом с использованием камеры Горяева и "Способом оптической оценки концентрации микробных клеток в суспензии". Для эксперимента выбран из коллекции ТюмНЦ СО РАН штамм 10-50-TS2, определенный до вида Achromobacter spanius с помощью анализа генов, кодирующих 16S РНК. Род Achromobacter являются аэробными гетеротрофами, представляют собой грамотрицательные, не спорообразующие удлиненные палочки. Бактерии высевали на в пробирки на скошенный мясопептонный агар (ТУ 9385-001-64786015-2012, г. Углич) и культивировали 24 часа в термостате при температуре 26°C, после чего микроорганизмы смывали с поверхности питательной среды дистиллированной водой в объеме 5 мл. В камеру Горяева помещалась суспензия, полученная методом последовательных разведений, концентрацией 1/10000 от концентрации смыва. Далее проводилась фотофиксация сеток камеры, подсчет количества микроорганизмов на полученных снимках и обработка данных по методике [1]. Размеры бактериальных клеток не оценивались, так как на снимках они были очень малы. По полученным данным можно было лишь констатировать, что их средний размер значительно меньше 1 мкм. Точность этого метода определяется точностью серийных разведений (она невысока при использовании пипетки Пастера), аккуратностью подготовки камеры Горяева к работе, жизнедеятельностью микроорганизмов в процессе длительного эксперимента, а также точностью подсчета микроорганизмов в камере. Для штамма 10-50-TS2 концентрация микроорганизмов в неразбавленной суспензии составила x=(5,3±0,1)⋅1011. Трудоемкость составила четыре чел./дня.

При использовании "Способа оптической оценки концентрации микробных клеток в суспензии" аналогичный объем материала был обработан нами, с использованием рефрактометра RL3 и спектрофотометра ПЭ - 5400УФ, в течение часа. Значение показателя преломления бактерий определено μb=1,46, средний размер оценен Rcp=0,37 мкм, концентрация составила x=2×1011.

Предлагаемый нами способ «Способ определения концентрации микробных клеток в суспензии» увеличивает скорость определения концентрации микробных клеток в суспензии почти в 32 раз по сравнению с применяемым сегодня способами и не требует наличия для его выполнения специализированного дорогостоящего оборудования.

Нами предлагается следующий "Способ оптической оценки концентрации микробных клеток в суспензии".

Подготавливаются две дисперсионные среды с различными показателями преломления, а именно 10% и 40% раствор глюкозы (применяются в медицине и фармацевтике). Подготавливается суспензии микроорганизмов. Для этого в 9 частей дисперсионной среды помещают одну часть микробной суспензии. Суспензию хорошо перемешивают. Далее, измеряем показатели преломления полученных суспензий с использованием рефрактометра Аббе по методике, изложенной в инструкции по эксплуатации. Получаем значения μs1 и μs2.

Помещаем полученные суспензии в кюветы спектрофотометра и устанавливаем их в измерительную камеру спектрофотометра. В качестве базы в третью кювету помещаем дистиллированную воду.

Проводим измерения оптической плотности суспензий (относительно базовой кюветы) на двух длинах волн λ1=450 нм и λ2=600 нм, получаем значения Dλ1 и Dλ2. Используя определение волнового экспонента [5], можем записать: n=-(lgDλ1-lgDλ2)/(lgλ1-lgλ2), и по этой формуле рассчитываем волновые экспоненты для исследуемых суспензий n1 и n2.

Далее, применяя асимптотическое приближение, определяем безразмерный параметр ρ [5] для каждой из двух дисперсионных сред, используя формулы [4]:

ρ(n)=a/(b+n-2)+c, для 2≤n≤3,5

ρ(n)=3⋅(y+n⋅q/(h+у))1/2, для -1≤n≤2

в этих формулах y, a, b, c, d, e, q, h определяются следующим образом (m1=m-1; m=μb/μs) [3]:

y=2-n-(2-n)2/20

a=b⋅d

b=1,5⋅(d/e-1)

q=m1⋅(1-0,8⋅exp(-11⋅m1))/3

h=(2⋅q)1/3

c=3⋅h-d

d=e⋅(3⋅h-ρ1)⋅(1,5-ρ1)/(1,5⋅(3⋅h-ρ1)-e⋅ρ1)

e=3⋅h-2⋅m1⋅(0,22+0,58⋅m)

ρ1=0,1+m1⋅(3,9-5⋅m1+0,5/(1+1000⋅(m1-0,05)2))

To есть по известным n1 и n2 рассчитываем значения ρ(n1) и ρ(n2).

Так как, по определению, ρ=4⋅π⋅Rcp⋅μs⋅(μb/μs-1)/λ [4], при одинаковой длине волны этот параметр зависит только от соотношений показателей преломлений бактерий и среды, то по известным значениям ρ(n1) и ρ(n2) можно однозначно определить значение показателя преломления бактерий:

ρ(n1)/ρ(n2)=(μb-μs1)/(μb-μs2), откуда находим

μb=μs2⋅(ρ(n1)/ρ(n2)-μs1/μs2)/(ρ(n1)/ρ(n2)-1),

где μs1 - показатель преломления первой дисперсионной среды; μs2 - показатель преломления второй дисперсионной среды; ρ(n1) - безразмерный параметр ρ для первой дисперсионной среды, определенный по волновому экспоненту n1; ρ(n2) - безразмерный параметр ρ для второй дисперсионной среды, определенный по волновому экспоненту n2; μb - показатель преломления бактерий.

Используя значение параметра ρ и найденный показатель преломления бактерий, для любой из дисперсионных сред можно оценить средний размер бактерий исходя из определения ρ [5]: Rcp=ρ-λ/(4⋅π⋅(μb-μs)),

Далее, используя асимптотическое приближение [4], находим коэффициент светорассеяния:

Кs=K2⋅{1+(0,3724-0,2974⋅m)/[α+4⋅(α-0,8)3-0,744]}, для 2≤n≤3,3

Ks=Q(ρ)⋅(m-m12)/[1+(0,3⋅m-0,28)⋅(3h/ρ)3], для -1≤n≤2,

где К2=А⋅α⋅[(3,25m+1,55)⋅α-3,4], и А=[(m2-1)/(m2+2)]2,

α=2⋅π⋅Rcp⋅μs/λ

Затем определяем концентрацию микроорганизмов в исследуемой суспензии, для чего, используя формулу τ=π⋅r2⋅Ks(r,λ,m)⋅N [3], запишем: N=τπ⋅Rcp2⋅Ks, где мутность суспензии τ либо измеряется на спектрофотометре, либо вычисляется по ранее измеренной оптической плотности среды (для используемого спектрофотометра равняется τ=2,3⋅D (1/см)). Проведя вычисления, оцениваем концентрацию микроорганизмов в исследуемой суспензии - N.

Концентрацию микроорганизмов в неразведенной суспензии рассчитываем по формуле: x=10⋅N.

Следует отметить, что предлагаемый нами способ не требует точного совпадения концентраций микроорганизмов в двух исследуемых суспензиях с различными показателями преломления и позволяет, используя определенные значения показателя преломления бактерий, применять турбодиметрические методы определения концентраций с большей точностью.

Технико-экономическая эффективность предлагаемого способа определения концентрации микробных клеток в суспензии обусловлена увеличением почти в 32 раза скорости анализа по сравнению с применяемыми сегодня способами, отсутствием необходимости наличия для его выполнения специального дорогостоящего оборудования, что безусловно существенно снизит себестоимость получаемого биотехнологического продукта и увеличит его количество.

Используемые обозначения:

- x - число клеток в 1 мл исследуемой суспензии;

- Rcp - средний размер микроорганизмов в суспензии;

- μb - показатель преломления микроорганизмов;

- μs1, μs2 - показатели преломления первой и второй дисперсионных сред;

- D - оптическая плотность суспензии;

- λ - длина волны светового излучения;

- Кs - коэффициент светорассеяния;

- N - концентрация микроорганизмов в исследуемой на спектрофотометре суспензии;

- τ - мутность исследуемой на спектрофотометре суспензии.

Источники информации

1. Государственная Фармакопея Российской Федерации, XIII издание, М., 2015. - Т. 2. - С. 624-627. Определение концентрации микробных клеток ОФС.1.7.2.0008.15 [электронный ресурс]: - Режим доступа: http://femb.ru/feml?1850324. Федеральная электронная медицинская библиотека Министерства здравоохранения Российской Федерации. - (Дата обращения 12.08.2016).

2. Государственная Фармакопея Российской Федерации, XIII издание, М., 2015. - Т. 2. - С. 628-629. Определение концентрации микробных клеток ОФС.1.7.2.0008.15 [электронный ресурс]: - Режим доступа: http://femb.ru/feml?1850324. Федеральная электронная медицинская библиотека Министерства здравоохранения Российской Федерации. - (Дата обращения 12.08.2016).

3. Нестеров А.Н. Кинетика и механизм гидратообразования газов в присутствии поверхностно-активных веществ: дис. … д-ра хим. наук: 02.00.04 / Нестеров Анатолий Николаевич. - Тюмень, 2006. - 279 с.

4. Характеристические функции светорассеяния полидисперсных систем [Текст] / К.Р. Рамазанов [и др.] // Коллоидный журнал. - 1983. - Т. XLV, №3. - С. 473-479.

5. Щеголев С.Ю. Определение параметров сложных дисперсных полимерных систем из спектра мутности [Текст] / С.Ю. Щёголев, В.И. Кленин // Высокомолекулярные соединения. - 1971. - Т. А13, №12. - С. 2809-2015.

Способ оптической оценки концентрации микробных клеток в суспензии, отличающийся тем, что проводится определение значения волнового экспонента (n) для суспензии микроорганизмов в двух дисперсионных средах с различными показателями преломления, на основе полученных его значений вычисляется для данного штамма микроорганизмов в данных конкретных условиях показатель преломления бактерий (μb) и средний радиус (Rcp) микробных тел, затем, применяя асимптотическое приближение, находится коэффициент светорассеяния (Кs), с использованием которого по измеренной оптической плотности суспензии определяется концентрация микроорганизмов (N).



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и описывает способ диагностики дисбиоза влагалища путем исследования вагинальной жидкости. Способ характеризуется тем, что производится смыв содержимого верхней трети влагалища физиологическим раствором и исследуется методом газовой хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием на состав моносахаридов и при содержании во влагалищной жидкости глюкопиранозы 0,1543-0,3850 мг/мл, D-глюкозы 0,1232-0,6818 мг/мл, D-галактопиранозы 0,0723-0,2571 мг/мл, D-маннопиранозы 0,2432-0,4186 мг/мл диагностируется дисбиоз влагалища на этапе доклинических проявлений у женщин репродуктивного возраста.

Группа изобретений относится к области биохимии. Предложены способ и система для клеточного анализа.

Изобретение относится к области химии, а именно к аналитической химии, электрохимии и биохимии, и предназначено для идентификации пептидов и выявления аминокислотных замен в их структурах.

Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ прогнозирования риска развития быстрорастущей миомы матки, заключающийся в том, что исследуют ультразвуковые параметры матки с подсчетом количества миоматозных узлов, методом краевой дегидратации менструальных выделений (МВ) определяют наличие параллельных и волокнистых структур и рассчитывают коэффициент Р: где z рассчитывают по формуле:z=b1×x1+b2×x2+b3×х3+а,где b1 - коэффициент, равный 2,172; x1 - волокнистые структуры в MB: наличие «2»; отсутствие «1»; b2 - коэффициент, равный 2,238; x2 - параллельные структуры в MB: наличие «2»; отсутствие «1»; b3 - коэффициент, равный 1,568; x3 - количество узлов; а - константа, равная –10,915; и при значении Р>0,5 дополнительно методом иммуноферментного анализа исследуют уровни лигандов APRIL и TRAIL, и при значении APRIL более 11,1 нг/мл, TRAIL менее 22,5 пг/мл прогнозируют риск развития быстрорастущей миомы матки.

Группа изобретений относится к медицине и предназначена для неинвазивного мониторинга свойств биологической ткани. Последовательно проводят следующие этапы: сбора данных импеданса и вспомогательных данных от участка тела пользователя; предварительной обработки полученных данных, причем предварительная обработка заключается в фильтрации полученных данных и удалении артефактов из полученных данных импеданса путем обнаружения не относящихся к пище физиологических факторов на основе вспомогательных данных; восстановления динамики кривой глюкозы путем применения обученного алгоритма машинного обучения, оценивания гликемического индекса из динамики кривой глюкозы, предоставления пользователю результатов оценки и автоматического мониторинга привычек питания на основе упомянутых результатов оценки для определенного периода времени.

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, репродуктологии, эмбриологии, и может быть использовано для определения in vitro перспективных эмбрионов для последующей имплантации в матку при проведении процедуры экстракорпорального оплодотворения (ЭКО).
Изобретение относится к области медицины и касается способа диагностики микробного фактора при хроническом неспецифическом эндометрите. Сущность способа заключается в том, что у больной на 7-9-й день менструального цикла берут бактериологический посев из полости матки и цервикального канала с помощью внутриматочной цитощетки.

Изобретение относится к медицине, хирургии, интраоперационной дифференциальной диагностике объемных образований щитовидной железы (ЩЖ). В режиме реального времени проводят конфокальную лазерную микроскопию ткани ЩЖ.

Настоящее изобретение относится к области медицины, а именно к ветеринарии, и предназначено для оценки готовности иммунной системы к вакцинации. Для оценки функциональной зрелости иммунной системы молодняка сельскохозяйственной птицы в брюшную полость цыплят в возрасте 3, 7, 12, 17 и 28 суток инъецируют маркер "Трипановый синий" в дозе не более 0,5 мл.
Изобретение относится к медицине, в частности гастроэнтерологии, и касается способа диагностики тяжести течения хронического гастрита у детей. Сущность способа заключается в изучении клинических, морфологических и иммуногистохимических показателей слизистой оболочки желудка на наличие антигенов простого герпеса, цитомегаловируса и вируса Эпштейн-Барр.

Изобретение относится к области медицины, в частности к стоматологии, медицинской микробиологии. Способ прогнозирования негативных последствий в полости рта при ортодонтическом лечении зубочелюстных аномалий несъемной техникой, включающий инструментальное и микробиологическое обследование, отличающийся тем, что у пациентов перед установкой несъемной техники после оценки индексных показателей стоматологического статуса проводят забор биоматериала зубной бляшки и устанавливают количественное содержание оральных стрептококков S. mutans и S. Sanguis в КОЕ/г, при выявлении в биотопе обоих видов стрептококков или отдельно каждого в содержании 104 и более КОЕ/г в зубной бляшке, определении индекса КПУ более 1,9 и индекса Green-Wermillion более 1,4 прогнозируют негативные последствия в полости рта, выраженные в кариозной активности в процессе лечения. Использование способа обеспечивает возможность прогнозирования и, соответственно, предупреждения негативных последствий при ортодонтическом лечении зубочелюстных аномалий несъемной техникой в виде кариеса зубов. 2 ил., 3 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу комплексной диагностики состояния зубов при воздействии компьютерного излучения. Способ комплексной диагностики состояния зубов при воздействии компьютерного излучения, заключающийся в том, что проводят диагностику слюны по форме микрокристаллов и при наличии деформации формы кристаллов ротовой жидкости у обследуемого пациента проводят дополнительные исследования состояния эмали зубов, при котором на эмаль зуба наносят электролит в виде 10% раствора хлорида кальция в контролируемые точки, проводят измерение силы тока с помощью двух электродов, первый пассивный из которых располагают в полость рта и обеспечивают контакт с мягкими тканями, второй активный электрод погружают в электролит, снимают показания и при значении тока 0-0,2 мкА диагностируют интактную минерализованную эмаль, при значении тока 0,3-3,8 мкА диагностируют предкариозное состояние эмали, при значении тока 3,9-7,9 мкА диагностируют начальный кариес, при значении тока 8,0-27,7 мкА диагностируют поверхностный кариес, при значении тока 27,8-50,0 мкА диагностируют средний кариес, при значении тока более 50,0 мкА диагностируют глубокий кариес. Вышеописанный способ позволяет на ранних стадиях диагностировать предкариозные процессы. 3 ил., 3 табл., 2 пр.

Группа изобретений относится к области медицины, а именно к диагностике. Для оценки риска рака желудочно-кишечного тракта создают в базе данных множество классификаторов в соответствии с множеством соответствующих результатов проведенных ранее анализов крови у множества подвергнутых анализу индивидуумов. Проводят оценку с использованием аппаратного процессора риска рака желудочно-кишечного тракта у указанного целевого индивидуума с помощью указанной комбинации, по меньшей мере, 10 различных характеристик анализа крови с использованием указанного, по меньшей мере, одного классификатора. Проведенные ранее и текущие анализы крови включают результаты, по меньшей мере, одного из следующих анализов крови: анализ на эритроциты (RBC), гемоглобин (HGB) и гематокрит (НСТ), и, по меньшей мере, один результат из следующих анализов крови: анализ на среднее содержание гемоглобина в эритроците (МСН) и среднюю концентрацию гемоглобина в эритроците (МСНС). Количественный показатель риска рака желудочно-кишечного тракта выводят на клиентский терминал. Группа изобретений позволяет с высокой точностью автоматически рассчитать количественный показатель риска рака желудочно-кишечного тракта на основании набора результатов анализов крови. 2 н. и 13 з.п. ф-лы, 13 ил.

Изобретение относится к области медицины, а именно к методам экспериментального моделирования патологических процессов, протекающих в мочевой системе. Предлагаемый способ моделирования процесса образования оксалатного мочевого камня основан на выращивании камня в искусственно созданной модельной среде мочи человека, при этом для приготовления раствора используют: CaCl2⋅2H2O - 7 ммоль/л, MgSO4⋅7H2O - 4 ммоль/л, NH4Cl - 8 ммоль/л, K2SO4 - 6 ммоль/л, (NH4)2C2O4⋅H2O - 2÷4 ммоль/л, (NH4)3PO4 - 10 ммоль/л, K2CO3 - 7 ммоль/л, KCl - 24 ммоль/л, NaCl - 140 ммоль/л, и дистиллированную воду. Синтез проводят при значениях рН 4,00±0,05 в течение 72 ч при температуре 25°С. Использование заявляемого способа позволяет выявить параметры, которые вызывают образование оксалатного мочевого камня, и создать модельную систему, с помощью которой можно изучать эффективность воздействия лекарственных препаратов для профилактики возникновения и роста оксалатных мочевых камней. 1 табл., 2 ил.

Изобретение относится к области ветеринарии и связано с разработкой копрологического метода диагностики кишечных паразитов птиц и яиц клещей. Метод заключается в том, что берут пробу фекалий весом 1-2 г, помещают в копрологический стакан, заливают 10 мл дистиллированной воды, размешивают, доливают 20-30 мл воды, процеживают через металлическое сито в чистый стакан, дают взвеси отстояться в течение 5 мин, верхнюю часть сливают, оставшуюся часть переливают в центрифужную пробирку объемом 13 мл, центрифугируют в течение 3 мин при 1500 g, после сливают жидкость до осадка на дне пробирки, к осадку добавляют флотационную жидкость, состоящую из насыщенного раствора хлористого цинка - 1750 г на 1 л, и насыщенного раствора сахара - 1333 г на 1 л, взятых в соотношении 1,5:1 соответственно, размешивают и центрифугируют 3 мин при 1500 g, после чего микроскопируют поверхностную пленку. Способ является быстрым, позволяет выявить яйца и личинки кишечных паразитов птиц, их личинок, а также яйца клещей, и обладает высокой диагностической эффективностью. 3 табл., 1 пр.

Изобретение относится к экологии, в частности к оценке экологического состояния лугов по биохимическим показателям растительности. Для этого определяют содержание пигментов в клеточном соке растения просо куриное, а также рН клеточного сока. Экологическое состояние лугов оценивается при сравнении биологических показателей проса куриного на загрязненном и экологически благоприятном участках. Экологическое состояние лугов считается благоприятным, если соответствие содержания пигментов в клеточном соке проса куриного составляет 91-100% при рН 5,2-5,7; относительно экологически благополучным - при 81-90% при рН 4,8-5,1 и повышенным экологическим риском при содержании вышеуказанных пигментов <80% при рН<4,7. Изобретение обеспечивает повышение точности и информативности оценки экологического состояния луга. 2 з.п. ф-лы, 2 табл., 1 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии, и может быть использовано для диагностики синдрома послеоперационной когнитивной дисфункции (ПОКД) у женщин после экстирпации матки в периоперационном периоде. Проводят ряд исследований в предоперационном периоде исходного когнитивного статуса СР1 и рассчитывают СР1 по формуле CP1=O+CHP+FR+FW+DH+Sβ+Wc, где О - тест «ориентация», СНР - тест «наличие длительного болевого синдрома», FR - тест «узнавание фигур», FW - тест «запомнить 5 слов», DH - тест «рисования часов», Sβ - определение сывороточного протеина S100β, Wc - методика «слова на с». Проводят ряд исследований когнитивного статуса в раннем послеоперационном периоде СР2 и рассчитывают СР2 по формуле CP2=O+AP+FR+FW+DH+Sβ+Wc, где О - тест «ориентация», АР - выраженность болевого синдрома после операции, FR - тест «узнавание фигур», FW - тест «запомнить 5 слов», DH - тест «рисования часов», Sβ - определение сывороточного протеина S100P, Wc - методика «слова на с». После чего рассчитывают соотношение СР1 к СР2, и если оно меньше или равно 1, ПОКД отсутствует, если соотношение СР1 к СР2 больше 1, то диагностируют раннюю ПОКД. Способ позволяет своевременно назначить лечение и предотвратить прогрессирования когнитивных нарушений за счет определения информативных нейропсихологических и лабораторных показателей. 2 пр.

Изобретение относится к медицине. Предложен способ моделирования алкогольной кардиомиопатии, заключающийся в принудительной алкоголизации животных 10%-ным водным раствором этанола в течение 13 недель, последующем отборе животных с высоким предпочтением к алкоголю и продолжении алкоголизации до конца 24 недели от начала алкоголизации. Технический результат: к концу 24-й недели формируется дилатационная алкогольная кардиомиопатия, которая характеризуется значительным угнетением сократительной функции и статистически значимой дилатацией левого желудочка; по окончании 24-й недели алкоголизации крыс порог электрической фибрилляции желудочков сердца снижался на 47%; уровень гамма-глутамилтрансферазы в плазме крови алкоголизированных животных был в три раза выше, чем у контрольных. Таким образом, предложенная модель кардиомиопатии достаточно полно отражает ситуацию, наблюдаемую в клинике у пациентов, страдающих алкогольной кардиомиопатией, и может рассматриваться как трансляционная модель этого заболевания. 3 ил., 3 табл., 4 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии, и может быть использовано для определения эффективности жевательного процесса. Для этого проводят исследования образца, представляющего собой частицы пищевого продукта размером менее 1 мм, которые получают с помощью мокрого просеивания через сито с размером ячеек менее 1 мм. После чего проводят анализ дифракции лазерного излучения на частицах дисперсной фазы на лазерном анализаторе в интервале определяемых показателей с эффективным диаметром от 0,10 до 1000 мкм. Для этого готовят суспензию исследуемого образца. Затем проводят измерение величины интенсивности фона, наполняя измерительную кювету 12 мл жидкости и помещая ее в ячейку прибора. Необходимую концентрацию суспензии в кювете подбирают по данным световой интенсивности рассеянного света, так чтобы световая интенсивность находилась в пределах 35-75% от размера шкалы. Полученные результаты анализируют. При выявленном размере частиц от 100 мкм до 1000 мкм судят о снижении эффективности жевательного процесса. Изобретение позволяет ускорить определение эффективности жевательного процесса при повышении точности измерения. 3 ил., 1 пр.

Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано при определении содержания свободной абсцизовой кислоты в вегетативных органах растений. Для этого проводят экстракцию свободной абсцизовой кислоты из биологического материала с использованием диэтилового эфира, упариванием эфирного экстракта досуха и последующим разстворением остатка в 60%-ном водном растворе ацетона. Определение содержания свободной абсцизовой кислоты проводят методом капиллярного электрофореза в кварцевом капилляре с эффективной длиной 0,5 м и внутренним диаметром 75 мкм. Анализ проводят в водном ведущем электролите, содержащем 0,33 мас.% борной кислоты, 0,05 мас.% тетрабората натрия и 0,5 об.% изопропанола при положительной полярности напряжения. Длина волны детектирования - 254 нм. Изобретение обеспечивает упрощение процедуры пробоподготовки при количественном определении свободной абсцизовой кислоты. 1 табл., 2 ил., 4 пр.
© Патентный поиск, поиск патентов на изобретения - FindPatent.RU 2012-2024
Политика конфиденциальности 2016-10-25 2017-11-30T11:48:00
Наверх