Способ прогнозирования эффективности неоадъювантной химиотерапии у больных с диссеминированными формами рака яичников

Авторы патента:

Юнусова Наталья Валерьевна (RU)

Виллерт Алиса Борисовна (RU)

Спирина Людмила Викторовна (RU)

Коломиец Лариса Александровна (RU)

Кондакова Ирина Викторовна (RU)

G01N33/48 - биологических материалов, например крови, мочи (G01N 33/02-G01N 33/14,G01N 33/26,G01N 33/44,G01N 33/46 имеют преимущество; определение всхожести семян A01C 1/02); приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) (подсчет клеток крови, распределенных по поверхности, путем сканирования этой поверхности G06M 11/02)

Владельцы патента RU 2637410:

Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр" Российской академии наук ("Томский НИМЦ") (RU)

Изобретение относится к области медицины, а именно к онкологии, и может быть использовано для прогнозирования эффективности неоадъювантной химиотерапии (НАХТ) у больных диссеминированным раком яичников. Определяют объем асцитической жидкости, уровень инсулиноподобного фактора I типа (IGF-I) и металлопротеиназы РАРР-А в асцитической жидкости до лечения, а также уровень РАРР-А в гомогенате опухоли, рассчитывают значение регрессионой функции F по формуле: F=-27,4-28,6⋅Х₁+13,8⋅Х₂+44,9⋅Х₃ -7,46⋅Х₄, где X₁ - количество асцитической жидкости до лечения (1 - в количестве до 1000 мл; 2 - в количестве 1000 мл и более); Х₂ - уровень металлопротеиназы РАРР-А в ткани опухоли в нг/мг белка; Х₃ - уровень IGF-I в асцитической жидкости в нг/мг белка; Х₄ - уровень металлопротеиназы РАРР-А в асцитической жидкости в нг/мг белка. Затем рассчитывают вероятность Р наступления клинического ответа на НАХТ по формуле: где е - основание натурального логарифма =2,718, и при значении Р≥0,5 констатируют эффект от НАХТ, при значении Р<0,5 - отсутствие эффективности НАХТ. 1 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области медицины, онкологии и может быть использовано для прогнозирования эффективности неоадъювантной химиотерапии у больных с диссеминированными формами рака яичников.

Ввиду крайне агрессивного течения рака яичников (РЯ) III-IV стадия заболевания устанавливается у большинства пациенток. Летальность на первом году с момента установления диагноза составляет 23,7% [1]. По современным представлениям патогенез РЯ представляет собой сложный процесс, поскольку в нем задействовано большинство известных в настоящее время сигнальных путей, и это приводит к затруднению при выборе мишеней для воздействия. В соответствии с данными, представленными в мультицентровом исследовании Verhaak R.V. et al. (2013), серозные низкодифференцированные карциномы составляют до 80% всех эпителиальных злокачественных опухолей яичника [2].

Система прогнозирования при диссеминированном РЯ окончательно не разработана, также до сих пор дискутируется вопрос о последовательности химиотерапии и циторедуктивной операции. Возможность выполнения оптимальной циторедукции в настоящее время рассматривается как наиболее значимый прогностический фактор для больных РЯ. При отсутствии условий для выполнения оптимальной первичной циторедуктивной операции у больных диссеминированным РЯ возможно проведение неоадъювантной химиотерапии (НАХТ), что в последующем связано с возможностью выполнения большего процента оптимальных циторедукций, меньшей кровопотерей, лучшим качеством жизни [3, 4].

Анализ уже предложенных ранее способов оценки эффективности неоадъювантной химиотерапии при РЯ выявил ряд работ, в которых авторы предлагают определять тот или иной показатель в сыворотке крови, однако способов определения эффективности на основании комплекса клинических и молекулярно-генетических параметров не обнаружено,

В другой работе (2015) Де ла Абородригес X. и Санчес-Ровира П. предложили определять уровень экспрессии рецептора ангиотензина II типа 1 в качестве предиктора эффективности комбинированной терапии РЯ с использованием бевацизумаба. Метод предполагает взятие биологического образца (ткани опухоли) до лечения и оценку в нем экспрессии данного белка, а также сравнение ее с контрольным уровнем. Повышенный уровень экспрессии указывает на то, что пациентка должна реагировать на данное лечение [заявка на патент 2013131168/15, дата публикации заявки 20.01.2015]. Метод понятен и прост в исполнении, имеет предиктивную ценность, однако бевацизумаб (моноклональные гуманизированные антитела к VEGF) достаточно редко используется в комбинированных схемах НАХТ у больных РЯ.

В работе Городновой Т.В. (2014) на примере 160 больных с диссеминированными формами РЯ был проведен многокомпонентный сравнительный анализ эффективности НАХТ у больных - носительниц мутаций в гене BRCA1/2 в сравнении с BRCA-негативными пациентками. Наличие мутации BRCA1 538insC, 415delA и 185del AG может использоваться в качестве предикторного маркера, ассоциированного с выраженным патоморфологическим ответом, повышенным процентом выполнения оптимальных циторедукций (до 71%) и повышенным процентом полных клинических ответов при включении в схему лечения платиносодержащей НАХТ [5]. Ограниченность применения этой технологии обусловлена тем, что больные с герминогенными мутациями гена BRCA1 составляют не более 9-12% от всех больных РЯ.

В 2005 году Avril N. с соавторами в качестве предиктора эффективности НАХТ предложили использовать FDG-позитронно-эмиссионную томографию. Метод заключается в том, что пациентке до НАХТ, после первого и третьего цикла НАХТ (больных получали не более трех циклов НАХТ) выполняли количественную FDG-позитронно-эмиссионную томографию органов брюшной полости и малого таза, оценивали метаболический ответ опухоли на терапию. Метаболический ответ после 1 курса НАХТ четко коррелировал с эффективностью НАХТ в целом [6]. К недостаткам метода можно отнести его малую доступность вследствие необходимости применения сложного и дорогостоящего оборудования и необходимость выполнения хотя бы одного цикла НАХТ.

Наиболее близким к предлагаемому является способ, предложенный Сидоренко Ю.С. с соавторами (2010), в котором проводят оценку эффекта неодъювантной химиотерапии по уровню плазминогена и плазмина в опухолевой ткани. Далее по соотношению первого ко второму авторы предлагают оценивать клинический эффект: при повышении этого показателя прогнозировать наступление клинического эффекта от проводимого лечения, а в случае снижения показателя, либо его неизмененности, прогнозировать отсутствие клинического эффекта. Способ позволяет выявить пациенток с эффектом от лечения и хорошим прогнозом и больных без эффекта, с плохим прогнозом, которым необходимо агрессивное адъювантное лечение, позволяет определить индивидуальную чувствительность или резистентность злокачественной опухоли больных к конкретным схемам химиотерапии [патент РФ №238339, опубликован 10.03.2010]. Однако недостатком способа является определение показателей в динамике (на этапах до и после НАХТ), таким образом, обоснование схем химиотерапии определяется не всегда своевременно, а после апробации эмпирически выбранного лечения.

Таким образом, все представленные способы обладают рядом существенных недостатков, их показатели нуждаются в дополнительном подтверждении, валидации высокотехнологичными методами, либо не в полной мере отвечают на поставленные вопросы, вследствие того, что выявленные маркеры не могут быть рассмотрены в качестве предикторов. Предикторы могут быть рекомендованы только для весьма ограниченной группы больных РЯ.

Новый технический результат - повышение точности, информативности и доступности способа.

Для решения поставленной задачи в способе прогнозирования эффективности неоадъювантной химиотерапии у больных с диссеминированными формами рака яичников путем определения предикторного маркера, ассоциированного с выраженным патоморфологическим ответом, причем в качестве предикторных маркеров используют объем асцитической жидкости до лечения, а также уровни белков-компонентов системы ИФР - IGF-I и РАРР-А в опухолевой ткани и в асците до начала лечения, далее рассчитывают значение регрессионной функции F по формуле:

F=-27,4-28,6⋅Х₁+13,8⋅Х₂+44,9⋅Х₃-7,46⋅Х₄,

где

X₁ - количество асцитической жидкости до лечения (1 - до 1000 мл; 2 - в количестве 1000 мл и более);

Х₂ - уровень металлопротеиназы РАРР-А в ткани опухоли в нг/мг белка;

Х₃ - уровень IGF-I в асцитической жидкости в нг/мг белка;

Х₄ - уровень металлопротеиназы РАРР-А в асцитической жидкости в нг/мг белка, далее определяют значение вероятности наступления клинического ответа Р по формуле:

где

е - основание натурального логарифма, равное 2,718,

и при значении Р≥0,5 констатируют эффективную НАХТ, а при значении Р<0,5 его отсутствие.

Данные существенные признаки не выявлены в научно-медицинской литературе. Способ апробирован на базе клиники НИИ онкологии Томского НИМЦ РАН. Данное техническое решение соответствует критериям «новизна», «изобретательский уровень», «промышленно применимо».

Способ осуществляют следующим образом. Количество асцита определяют клинически по данным ультразвукового исследования, лапароцентеза. Для получения бесклеточной фракции аликвоту (около 10 мл) асцитической жидкости центрифугируют при 4°С и 3000 об/мин в течение 10 минут. Жидкую фракцию отбирают, замораживают и хранят при -20°С до выполнения исследований. Для получения осветленных гомогенатов ткань опухоли (около 100 мг) гомогенизируют в жидком азоте, затем ресуспендируют в 300 мкл 50 мМ трис-НСl-буфера (рН 7.5). Гомогенат центрифугируют в течение 60 мин при 10000 g и 4°С. В образцах осветленных гомогенатов опухолей и бесклеточной части асцитической жидкости определяют тотальный пул IGF-I и РАРР-А с использованием наборов для иммуноферментного анализа. Содержание белка в осветленном гомогенате и асцитической жидкости определяют по методу Лоури. Результаты выражают в нг/мг белка.

Такой подход к прогнозированию эффективности НАХТ у больных с диссеминированным РЯ обусловлен рядом предпосылок.

На клеточных линиях показано, что химиорезистентность при РЯ может быть ассоциирована с экспрессией белков системы инсулиноподобных факторов роста (ИФР) или компонентами ИФР-опосредованного сигнального пути. Гиперэкспрессия рецептора ИФР первого типа и фосфатидилинозитол-3-киназы ассоциирована с платинорезистеностью клеточных линий РЯ [7]. Показано, что клеточная линия РЯ, резистентная к таксанам, имела высокий уровень ИФР-II, а снижение уровня ИФР-II восстанавливало чувствительность клеток к таксанам [8]. В связи с доступностью асцита для исследования и высоким уровнем экспрессии отдельных маркеров в ней представляется перспективным исследование белков экссудата с диагностической и прогностической целью. Ранее было показано, что высокий уровень IGFBP-3 до химиотерапии и высокий уровень ИФР-II после химиотерапии в асците у больных раком яичников коррелировал с низкой общей выживаемостью [9]. Белок, ассоциированный с беременностью - (pregnancy-associated plasma protein - РАРР-А), является металлопротеиназой и принимает активное участие в гидролизе белков системы IGFs. В работе Bold (2011) показано, что в клеточной линии овариального рака с генетически детерминированной повышенной экспрессией РАРР-А наблюдалась усиленная клеточная пролиферация, повышенная васкуляризация и клеточная инвазия в Матригель по сравнению с аналогичной клеточной линией с низкой экспрессией РАРР-А [10]. Ранее была выявлена более высокая экспрессия РАРР-А в перитонеальных метастазах рака яичника по сравнению с первичной опухолью [11]. По-видимому, опухолевые клетки РЯ с повышенной экспрессией РАРР-А обладают не только повышенной способностью к метастазированию по сравнению с клетками рака с низкой экспрессией РАРР-А, но и устойчивостью к традиционным химиопрепаратам. Таким образом, хотя белки системы ИФР ранее не изучались в качестве предикторов НАХТ, существуют объективные предпосылки для их исследования при раке яичников.

В настоящее время получены данные о различном молекулярном профиле низкодифференцированных серозных аденокарцином с малым (до 200 мл) и большим (свыше 1000 мл) объемом асцита. Эти различия в основном касались экспрессии генов и соответствующих протеинов, ассоциированных с регуляцией иммунного ответа. Для пациенток с серозными низкодифференцированными аденокарциномами яичников (наиболее часто встречающийся тип РЯ) количество асцита на момент выполнения первичного хирургического вмешательства ассоциировали с частотой выполнения оптимальных циторедукций и общей выживаемостью [12]. По-видимому, количество асцита связано и с химиорезистентностью.

Информативность отобранных критериев обусловлена существованием множественных корреляционных связей между параметрами системы ИФР в опухоли и асците у больных РЯ (Табл. 1). Данные получены на 50 больных с диссеминированными формами РЯ.

*Примечание: в таблице приведены коэффициенты корреляции Спирмена только с уровнем значимости р<0,05. Все корреляционные взаимосвязи получены на основе 50 парных измерений показателя в опухоли и асците.

Объем асцитической жидкости определяли у больной клинически, по данным ультразвукового исследования и лапароцентеза. Опухолевую ткань забирали при выполнении диагностической лапароскопии. Из асцита получали бесклеточную фракцию, аликвотировали и немедленно замораживали. Ткань опухоли замораживали и хранили в жидком азоте. Затем в асците определяли уровень IGF-I и РАРР-А, а в ткани опухоли - уровень РАРР-А. Уровень значимости регрессионной модели (р) составил 0,047. Эффективность НАХТ в данном способе будет оцениваться как наличие объективного клинического ответа по критериям RECIST (больные имели частичный или полный клинический ответ) либо его отсутствие, в случае если у больной прогнозируется стабилизация или прогрессирование. При этом в данном способе использовалась следующая схема химиотерапии: паклитаксел 175 мг/м²+карбоплатин AUC 6 в 1-й день каждые 3 нед., 3 курса. В исследование были включены больные с серозными и эндометриоидными карциномами низкой степени дифференцировки III-IVA стадии по FIGO BRCA-негативные (у всех больных приводилось определение мутации BRCA I 5382ins С, BRCA I 185delAG, BRCA I T300G, BRCA 14153 delA, BRCA 2 6174delT). Оценку качества полученной модели проводили на 12 больных РЯ, не включенных в основную выборку. Чувствительность составила 92%, специфичность - 83%.

Достигнутые показатели чувствительности и специфичности свидетельствуют о высокой информативности заявляемого способа. Выделение группы больных диссеминированным РЯ, характеризующейся высокой вероятностью неэффективности НАХТ, позволяет индивидуализировать тактику лечения больных РЯ, избежать назначения потенциально неэффективных схем химиотерапии. Применение данного способа позволяет снизить риск индуцированной химиорезистентности.

Клинические примеры

Пример 1. Больная Р., 57 лет, обратилась в Томский НИИ онкологии, где по результатам комплексного обследования у нее был диагностирован РЯ, стадия Т3сТ×Мо, канцероматоз брюшины, асцит. Было проведено обследование согласно предлагаемому способу. Для этого проводилась оценка объема асцитической жидкости, в ней определяли уровень инсулиноподобного фактора I типа (IGF-I) и металлопротеиназы РАРР-А. В образце ткани опухоли, полученной при выполнении диагностической лапароскопии, определяли уровень РАРР-А. Объем асцитической жидкости составил 2 литра (категория 2-1000 мл и более). Уровень IGF-I в асцитической жидкости составил 0,41 нг/мг белка, а экспрессия РАРР-А не выявлялась. В осветленном гомогенате опухоли экспрессия РАРР-А также отсутствовала. Значение регрессионной функции составило: F=-66,19. Значение вероятности наступления клинического ответа (Р) составило 0,64, т.е. более 0,5. Данный клинический случай был классифицирован как случай с высокой вероятностью эффекта от НАХТ. Больной назначена НАХТ в объеме 3 курсов по схеме доцетаксел + карбоплатин. После окончания терапии клинический эффект по критериям RECIST расценен как частичная регрессия. В последующем больной была выполнена оптимальная циторедукция. Период динамического наблюдения за больной составил 32 месяца, рецидивов не выявлено.

Пример 2. Больная З., 56 лет, обратилась в Томский НИИ онкологии, где по результатам комплексного обследования у нее был диагностирован рак яичников, стадия T3bN1M0. Канцероматоз брюшины. Асцит. Было проведено обследование согласно предлагаемому способу. Для этого проводилась оценка объема асцитической жидкости, в ней определяли уровень инсулиноподобного фактора I типа (IGF-I) и металлопротеиназы РАРР-А. В образце ткани опухоли, полученной при выполнении диагностической лапароскопии, определяли уровень РАРР-А. Объем асцитической жидкости составил 5 литров (категория 2-1000 мл и более). Уровень IGF-I в асцитической жидкости составил 4,47 нг/мг белка, а экспрессия РАРР-А не выявлялась. В осветленном гомогенате опухоли экспрессия РАРР-А составила 0,22 нг/мг белка. Значение регрессионной функции составило: F=118,4. Значение вероятности наступления клинического ответа (Р) составило менее 0,5. Данный клинический случай был классифицирован как случай с низкой вероятностью эффекта от НАХТ, однако вследствие невозможности выполнения оптимальной циторедукции больной назначена НАХТ. Использование препаратов 1-линии XT в неоадъювантном режиме сопровождалось увеличением размеров опухоли более чем на 25%. Эффект от НАХТ расценен как прогрессирование. В последующем пациентке была выполнена циторедуктивная операция в неоптимальном объеме, с размером остаточных опухолевых масс более 2 см. В адъювантном режиме схема химиотерапии изменена на оксалиплатин + циклофосфан (2 курса), а далее гемцитабин + доцетаксел (6 курсов).

Таким образом, предлагаемый способ позволяет с высокой эффективностью прогнозировать эффективность неоадъювантного лечения у больных с диссеминированными формами РЯ, индивидуализировать тактику лечения больных и оптимизировать назначение химиотерапевтических препаратов в адъювантном режиме. Применение данного способа позволяет снизить риск индуцированной химиорезистентности.

Источники информации:

1. Каприн А.Д., Старинский В.В., Петрова Г.В. Состояние онкологической помощи населению России в 2014 году. - М.: ФГБУ «МНИОИ им. П.А. Герцена» Минздрава России, 2015. - 235 с.

2. Verhaak R.G.W., Tamayo P., Yang J-Y. et al. Prognostically relevant gene signatures of high-grade serous ovarian carcinoma // J. Clin. Invest.- 2013. - Vol. 123 (1). - P. 517-525.

3. Morimoto A., Nagao S., Kogiku A., et al. A preoperative low cancer antigen 125 level (<25.8 mg/dL) is useful criterion to determine the optimal timing of interval debulking surgery following neoadjuvant chemotherapy in epithelial ovarian cance // Jpn. J. Clin. Oncol. - 2016. pii:hyw029 (Epub ahead of print).

4. Weinberg L.E., Rodriguez G., Hurteau J.A. The role of neoadjuvant chemotherapy in treating advanced epithelial ovarian cancer// Journal of Surgical Oncology. - 2010. - Vol. 101. - P. 334-343.

5. Городнова Т.В. Оценка эффективности неоадъювантной платиносодержащей химиотерапии у больных распространенным раком яичников носительниц мутаций в гене BRCA1/2: автореф. дис… канд. мед. наук. / Т.В. Городнова. - Спб, 2014. - 23 с.

6. Avril N., Sassen S., Schmalfeldt В., et al. Prediction of response to neoadjuvant chemotherapy by sequential F-18-fluorodeoxyglucose positron emission tomography in patients with advanced-stage ovarian cancer // J. Clin. Oncol. - 2005. - Vol. 23(30). - P. 7445-7453.

7. Eckstein N., Servan K., Hilderbrandt B. et al. Hyperactivation of the insulin-like growth factor receptor I signaling pathway is an essential event for cisplatin resistance of ovarian cancer cells // Cancer Res. - 2009. - Vol. 69(7). - P. 29996-3003.

8. Huang G.S., Brouwer-Visser J., Ramirez M.J. et al. Insulin-like growth factor 2 expression modulates taxol resistance and is a candidate biomarker for reduced disease-free survival in ovarian cancer. // Clin. Cancer Res. - 2010. - Vol. 16 (11). - P. 2999-3010.

9. Slipicevic A., Oy G.F., Askidt I.C. et al. diagnostic and prognostic role of the insulin growth factor pathway members insulin-like growth factor-II and insulin-like growth factor binding protein-3 in serous effusions // Hum. Pathol. - 2009. - Vol. 40(4). - P. 527-537.

10. Bold H.B., Conover C.A. Overexpression of pregnancy-associated plasma protein-A in ovarian cancer. Endocrinology. 2011; 152(4): 1470-1478.

11. Юнусова H.B., Кондакова И.В., Коломиец Л.А., Виллерт А.Б. Система инсулиноподобных факторов роста при метастазировании рака яичников: связь с р45 SER β-катенином // Молекулярная медицина.-2015.-М4.-С.17-22.

12. Feigenberg Т., Clarke В., Virtanen С. Molecular profiling and clinical outcome of high-Grade serous ovarian cancer presenting with low-versus high-volume ascites // ВMR International. - 2014, - Article ID367103.

Приложение

Способ прогнозирования эффективности неоадъювантной химиотерапии у больных с диссеминированными формами рака яичников путем определения предикторного маркера, ассоциированного с выраженным патоморфологическим ответом, отличающийся тем, что в качестве предикторных маркеров используют объем асцитической жидкости до лечения, а также уровни белков-компонентов системы ИФР - IGF-I и РАРР-А в опухолевой ткани и в асците до начала лечения, далее рассчитывают значение регрессионной функции F по формуле:

F=-27,4-28,6⋅X₁+13,8⋅X₂+44,9⋅X₃-7,46⋅X₄,

где

X₁ - количество асцитической жидкости до лечения (1 - до 1000 мл; 2 - в количестве 1000 мл и более);

X₂ - уровень металлопротеиназы РАРР-А в ткани опухоли в нг/мг белка;

X₃ - уровень IGF-I в асцитической жидкости в нг/мг белка

X₄ - уровень металлопротеиназы РАРР-А в асцитической жидкости в нг/мг белка,

далее определяют значение вероятности наступления клинического ответа P по формуле:

где

е - основание натурального логарифма, равное 2,718,

и при значении P≥0,5 констатируют эффективную НАХТ, а при значении P<0,5 его отсутствие.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для прогнозирования степени вероятности выполнения циторедуктивной операции в оптимальном объеме у больных диссеминированным раком яичников.

Способ прогнозирования рисков развития осложнений пневмонии // 2637169

Изобретение относится к медицине, а именно к пульмонологии, и может быть использовано в клинической лабораторной практике при определении активности системы нейтрофилов.

Способ оценки состояния гуморального гомеостаза у онкологических больных // 2637107

Изобретение относится к средствам исследования физических свойств биологических тканей. Способ исследования гуморального гомеостаза у онкологических больных включает выделение зондирующими и измерительными электродами локальных зон исследования организма человека, после чего на измерительных электродах в зоне исследования задают выбранную частоту в диапазоне от 800 Гц до 1,2 МГц и значение величины зондирующего тока от 0,8 до 1,5 мA, при этом исследование проводят при различных значениях частоты ƒ, но при постоянном значении выбранного зондирующего тока i.

Коннектор и установка с этим коннектором для хронической стимуляции электровозбудимых клеток // 2636890

Группа изобретений относится к оборудованию для проведения исследований в области медицины и физиологии. Коннектор для хронической стимуляции электровозбудимых клеток содержит основание и крышку, выполненные с возможностью герметичного соединения друг с другом, микроэлектродную матрицу, выполненную в виде массива из металлических микроэлектродов, сформированных на подложке, с чашей для культуры клеток и с контактными площадками по периметру, соединенными посредством токопроводящих дорожек с микроэлектродами, и плату с отверстием, с выступом, с прижимными пружинными контактами, соединенными токопроводящими дорожками.

Способ оценки эндогенной интоксикации при психологическом консультировании // 2636771

Изобретение относится к медицине, в частности к психотерапии, и раскрывает способ оценки эндогенной интоксикации при психологическом консультировании. Способ характеризуется тем, что перед психологическим консультированием и утром следующего дня проводят определение в крови молекул средней массы, при этом если их содержание утром следующего дня в 2,5 раза и более превышает показатели, зарегистрированные до психологической коррекции, выявляют наличие эндогенной интоксикации.

Микробиома корня языка как прогностическая модель дисбиотического состояния генитального тракта у беременных // 2636623

Изобретение относится к медицине, а именно медицинской микробиологии, акушерству, гинекологии и стоматологии. Способ исследования микробиома корня языка как прогностической модели дисбиотического состояния генитального тракта у беременных осуществляют следующим образом.

Способ оптической оценки концентрации микробных клеток в суспензии // 2636620

Изобретение относится к области анализа материалов путем определения их физических свойств и может быть использовано в микробиологии, а также в биотехнологическом производстве.

Способ ранней диагностики дисбиоза влагалища // 2636528

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и описывает способ диагностики дисбиоза влагалища путем исследования вагинальной жидкости. Способ характеризуется тем, что производится смыв содержимого верхней трети влагалища физиологическим раствором и исследуется методом газовой хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием на состав моносахаридов и при содержании во влагалищной жидкости глюкопиранозы 0,1543-0,3850 мг/мл, D-глюкозы 0,1232-0,6818 мг/мл, D-галактопиранозы 0,0723-0,2571 мг/мл, D-маннопиранозы 0,2432-0,4186 мг/мл диагностируется дисбиоз влагалища на этапе доклинических проявлений у женщин репродуктивного возраста.

Способ прогнозирования развития рецидива инфильтративного эндометриоза малого таза на основании результата экспрессии иммуногистохимического маркера musashil в эндометриоидной ткани // 2636506

Изобретение относится к области медицины, в частности к гинекологии, и предназначено для прогнозирования рецидива инфильтративного эндометриоза малого таза. Определяют экспрессию Musashil в ядрах эпителиальных и стромальных клеток очагов эндометриоза и аутологичного эндометрия.

Аллерген, содержащий комбинацию последовательностей белков, кодируемых генами esxa, esxb, espj, espk m.tuberculosis complex, и способ его применения для диагностики инфекции m.tuberculosis complex // 2636490

Изобретение относится к медицине и касается способа диагностики инфекции M. tuberculosis complex путем внутрикожного введения препарата аллергена, способного вызывать специфическую аллергическую реакцию замедленного типа у сенсибилизированных M.

Способ определения атеросклеротического поражения сосудистой стенки у пациентов с абдоминальным ожирением и неалкогольной жировой болезнью печени (варианты) // 2637412

Группа изобретений относится к медицине и может быть использована для определения атеросклеротического поражения сосудистой стенки у пациентов с абдоминальным ожирением и неалкогольной жировой болезнью печени. Для этого проводят in vitro диагностику патологических изменений в печени Стеатоскрин и определение значения Стеатоскрин. При этом среднюю толщину интима-медиа сонной артерии У у пациента определяют по формуле У=0,64+0,34 Стеатоскрин, и если У≥0,86 мм, то у пациента определяют ранние признаки атеросклероза. Также предложен способ диагностики с использованием пиковой систолической скорости кровотока во внутренней сонной артерии у пациента. Группа изобретений позволяет диагностировать патологию печени и развитие атеросклеротического поражения сосудистой стенки без использования инвазивных методик. 2 н.п. ф-лы, 10 ил, 1 пр.

Способ микроскопического исследования биологических образцов, маркированных фосфоресцентными зондами in vitro // 2637630

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для микроскопического исследования биологических образцов, маркированных фосфоресцентными зондами in vitro. При этом проводят мультиплексное маркирование биологического образца фосфоресцентным материалом, их визуализацию и определение времени жизни фотолюминесценции с использованием лазерной сканирующей микроскопии. Для мультиплексного маркирования биологического образца используют наноразмерные антистоксовые фосфоры (НАФ), имеющие размер, не превышающий 200 нм. НАФ возбуждают непрерывным ИК-лазером с длиной волны 980 нм. Полученное с использованием лазерного сканирующего микроскопа изображение обрабатывают в два этапа. На первом этапе обработку осуществляют вдоль медленной оси сканирования. На втором этапе обработку осуществляют вдоль быстрой оси сканирования. Изобретение позволяет увеличить чувствительность при визуализации фосфоресцентных наночастиц, увеличить точность определения локализации и времени жизни фотолюминесценции дискретных фосфоресцентных наночастиц и их агрегатов, нанесенных на биологические образцы. 3 ил.

Способ и реагент-индикатор для рн-метрии вагинальной жидкости // 2637649

Группа изобретений относится к медицине, а именно к гинекологии, и может быть использована для для рН-метрии вагинальной жидкости. Для этого проводят забор биоматериала вагинальной жидкости с формированием контактного слоя с реагентом, при этом контактный слой получают смешиванием образца биоматериала с предварительно размещенной каплей реагента-индикатора на предметном стекле. рН определяют путем сравнения окраски слоя материала с цветом стандартной шкалы. Реагент-индикатор для определения рН вагинальной жидкости включает следующие компоненты, вес.%: Метиловый желтый 0,0166 Метиловый красный 0,0055 Бромтимоловый синий 0,022 Фенолфталеин 0,022 Тимолфталеин 0,022 Этанол 44,47 Вода Остальное Группа изобретений обеспечивает упрощение диагностики при сохранении ее точности и информативности. 54 ил., 8 табл., 2 пр.

Способ определения митогениндуцированной адгезивности лейкоцитов // 2637652

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для определения митогениндуцированной адгезивности лейкоцитов. Для этого проводят отбор проб крови, выделение лейкоцитов, инкубирование, фиксацию и окраску клеток. Также проводят учет адгезивности клеток по их агрегабельности между собой, по месторасположению и составу взаимодействующих клеток. Дополнительно определяют жизнеспособность лейкоцитов. Для этого клетки инкубируют с фитогемагглютинином и без него. Затем в препаратах подсчитывают число агрегированных клеток, образующих клеточные агрегационные агломераты. Определяют лейкоцитарные индексы митогениндуцированной адгезивности в процентах и сравнивают количественные значения лейкоцитарных индексов митогениндуцированной адгезивности у больных с контрольными значениями этих показателей у практически здоровых лиц. Изобретение позволяет оценить митогениндуцированную адгезивность лейкоцитов у пациентов. 1 табл., 2 пр.

Способ прогнозирования риска формирования суб- и декомпенсированной плацентарной недостаточности в семьях с тромбофилией обоих родителей // 2637873

Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству и гинекологии, предназначено для врачей гемостазиологов, акушеров-гинекологов и перинатологов акушерских стационаров, перинатальных центров. На основании определения наиболее информативных сочетаний патологических полиморфизмов супружеской пары: генов ITGB3 (1565Т>С) и MTHFR (677С>Т) у матери и генов PAI-1 (5G>4G) и MTHFR (677С>Т) у отца, с учетом акушерского анамнеза вычисляют прогностический индекс D по формуле D=D=2,64×Х1+0,95×Х2+0,44×X3+0,55×Х4+1,28×Х5-1,67, где D - прогностический индекс; X1 - наличие у женщины отягощенного акушерского анамнеза: если есть - 1, если нет - 0; X2 - наличие у женщины в генотипе полиморфного варианта 1565 ТС/СС гена ITGB 3 Т 1565 С: если есть - 1, если нет - 0; X3 - наличие у женщины в генотипе полиморфного варианта 677 СТ/ ТТ гена MTHFR С677Т: если есть - 1, если нет - 0; X4 - наличие у мужчины генотипа 675 4G4G гена PAI-1 5G6754G, если есть - 1, если нет - 0; X5 - наличие у мужчины генотипа 677 ТТ гена MTHFR С677Т.: если есть - 1, если нет – 0 и при значении D<0 делают заключение о низком риске развития суб- и декомпенсированной плацентрарной недостаточности, а при D≥0 - о высоком риске развития. 3 пр.

Устройство и установка для разделения компонентов биологических жидкостей и способы их работы // 2638656

Группа изобретений относится к устройствам и способу разделения компонентов биологических жидкостей и может быть использовано в биотехнологии, для препаративных целей в промышленности, в лабораторной или исследовательской практике, в частности для отделения осадка при центрифугировании с непрерывной подачей биологической жидкости для разделения. Согласно первому варианту устройство для разделения компонентов биологических жидкостей включает корпус с крышкой, патрубки ввода и вывода жидкости. Устройство также содержит делительную камеру, образованную двумя усеченными конусами, расположенными основаниями друг к другу симметрично относительно центральной оси устройства, по меньшей мере два вертикальных патрубка, закрепленных на держателе вне делительной камеры параллельно центральной оси устройства, нижние концы которых находятся внутри делительной камеры и соединены т-образными переходами с по меньшей мере двумя горизонтальными патрубками, расположенными перпендикулярно центральной оси устройства, так, что не касаются стенок делительной камеры. Наружные концы вертикальных патрубков соединены с магистралями для подачи биологической и отмывающей жидкости, снабженными запорными клапанами. На концах одних из горизонтальных патрубков под углом 90° расположены впускные инжекторы для подачи биологической жидкости в виде аэрозоля, а на концах других - под углом 90° и в противоположном направлении к инжекторам, расположены выпускные сопла для струйной подачи отмывающей жидкости. Штуцер для вывода жидкости в дне делительной камеры через конический участок соединен с центральным штуцером, расположенным во внутреннем пространстве накопителя, не касаясь его стенок. Накопитель установлен на неподвижном внешнем держателе и имеет в нижней части конический скос, переходящий в тройник с магистралями вывода жидкости, отделенной от осадка, и отмывающей жидкости с осадком, снабженными запорными клапанами. Штуцер соединен с держателем внутри подшипника, расположенного в основании корпуса, а также с приводом вращения. Согласно другому варианту устройство для разделения компонентов биологических жидкостей содержит по меньшей мере три вертикальных патрубка, закрепленных на держателе внутри корпуса над делительной камерой параллельно центральной оси устройства, при этом наружный верхний конец одного из вертикальных патрубков, расположенного по центру устройства, соединен с магистралями для вывода жидкости, отделенной от осадка, и отмывающей жидкости с осадком, снабженными запорными клапанами. Устройство содержит втулку в дне делительной камеры с коническим участком, входящую в муфту, установленную внутри подшипника, расположенного в основании корпуса, соединенную с приводом двигателя. В установке для разделения компонентов биологических жидкостей в магистрали для подачи жидкостей и в магистрали для вывода жидкостей встроены по меньшей мере два устройства по одному из указанных вариантов. Согласно способу работы устройств для разделения компонентов биологических жидкостей биологическую жидкость для разделения подают внутрь устройства со скоростью 520 мл/м, вращение устройства осуществляют со скоростью 400 об/м, разделение ведут при температуре внутри устройства в интервале -1° +36°С до заполнения устройства осадком в количестве 4547 г, прекращают подачу биологической жидкости, затем подают жидкость для отмывки осадка в течение 5070 с. При этом цикл повторяют многократно. Согласно способу работы установки для разделения компонентов биологических жидкостей одновременно работают два устройства по одному из указанных вариантов, при этом одно из двух устройств работает в режиме разделения, а другое - в режиме отмывания осадка, а затем режимы автоматически переключают. Техническим результатом группы изобретений является обеспечение качества разделяемых компонентов, повышение надежности, непрерывности и долговечности заявленных устройств и установок. 5 н. и 3 з.п. ф-лы, 9 ил.

Устройство для взятия биоматериала при перипротезной инфекции коленного сустава // 2638786

Изобретение относится к медицинской технике, используемой в общей хирургии, травматологии, ортопедии и гнойной хирургии, и может быть использовано для взятия проб биоматериала для исследований. Устройство для взятия биоматериала при перипротезной инфекции коленного сустава состоит из полой цилиндрической трубки с центральным сквозным каналом и рукояткой на проксимальном конце, стилета и упругого проволочного элемента с рабочим участком в виде цилиндрической щетки на дистальном его конце. Со стороны входного отверстия на проксимальном конце трубка переходит во втулку с осевым каналом, образующим с центральным каналом трубки единый сквозной канал с обеспечением поочередного введения в него стилета и проволочного элемента с выходом острия стилета и рабочего участка проволочного элемента за пределы дистального конца трубки. Внутренний диаметр втулки соответствует геометрическим размерам соединительных элементов шприца для возможности осуществления посредством последнего эвакуации суставного аспирата через единый сквозной канал. Стилет с проксимального конца имеет рукоятку, адаптированную по форме под рукоятку трубки в виде пары выступ - отверстие с возможностью их плотного соединения. На проксимальном конце упругого проволочного элемента выполнена ручка в виде кольца для обеспечения его перемещения вдоль единого сквозного канала в направлении вперед-назад с целью снятия микробной биопленки с внешней поверхности эндопротеза внутри коленного сустава. Изобретение обеспечивает возможность взятия двух видов биоматериалов из коленного сустава, отличающихся по физическим характеристикам, через один инструментальный доступ в условиях активации инфекционного процесса. 1 пр., 4 ил.

Способ лабораторной оценки эффективности экстракорпоральной мембранной оксигенации у взрослых пациентов с острой сердечной недостаточностью после операций на открытом сердце // 2638808

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиохирургии и кардиореаниматологии, и может быть использовано для лабораторной оценки эффективности экстракорпоральной мембранной оксигенации у взрослых пациентов с острой сердечной недостаточностью после операций на открытом сердце. Способ лабораторной оценки эффективности экстракорпоральной мембранной оксигенации у взрослых пациентов с острой сердечной недостаточностью после операций на открытом сердце заключается в том, что у взрослых пациентов, находящихся на экстракорпоральной мембранной оксигенации по поводу острой сердечной недостаточности после операций на открытом сердце, ежедневно в сыворотке крови определяют высокочувствительный тропонин Т и при значениях высокочувствительного тропонина Т от 635 нг/л до 4330 нг/л оценивают экстракорпоральную мембранную оксигенацию эффективной, при значениях высокочувствительного тропонина Т от 4331 нг/л и выше оценивают экстракорпоральную мембранную оксигенацию неэффективной, необходима коррекция терапии. 2 пр.

Способ определения цист лямблий и ооцист криптоспоридий в клиническом материале, смывах с объектов окружающей среды, в почве // 2638810

Изобретение относится к медицине и ветеринарии и представляет собой способ определения в одной постановке цист лямблий и ооцист криптоспоридий в биологическом материале - кале, в смывах объектов окружающей среды и в почве, заключающийся в подготовке пробы, внесении в пробу иммуномагнитных частиц, иммунохимическом связывании, в результате чего образуются агрегаты цист и ооцист с магнитными частицами, улавливании агрегатов цист и ооцист в магнитном поле, отмывке зафиксированных агрегатов цист и ооцист буферным раствором, диссоциации меркаптоэтанолом или соляной кислотой, разделении цист, ооцист и магнитных частиц в магнитном поле, переносе выделенных цист и ооцист на предметное стекло для последующего иммунофлуоресцентного мечения и последующей оценки микроскопированием с применением насадки «Опти-Люм» на микроскоп, где результат учитывают исходя из того, что цисты лямблий представляют собой сверкающие и флюоресцирующие яблочно-зеленым светом объекты, от округлых до овальных от 8 до 14 мкм в длину на 7-10 мкм в ширину, с ярко подсвеченными краями, ооцисты же криптоспоридий представляют собой сверкающие и флюоресцирующие яблочно-зеленым светом объекты, от овальных до сферических от 3 до 5 мкм в диаметре, с ярко подсвеченными краями. Изобретение обеспечивает повышение эффективности определения в одной постановке цист лямблий и ооцист криптоспоридий в биологическом материале - кале, в смывах с овощей и объектов окружающей среды, в почве и сокращение временных затрат на исследование одной пробы исследуемого материала адаптированным до 15 минут. 7 пр., 7 табл., 1 ил.

Способ диагностики степени тяжести гиперандрогении // 2638813

Изобретение относится к медицине, в частности к гинекологии и эндокринологии, и представляет собой способ диагностики степени тяжести гиперандрогении, включающий определение индекса свободного тестостерона (ИСТ) на основе глобулина, связывающего половые стероиды, и тестостерона крови, отличающийся тем, что ИСТ рассчитывают по формуле где Тобщий – уровень общего тестостерона, нмоль/л, ГСПС – уровень глобулина, связывающего половые стероиды, нмоль/л, и при величине ИСТ от 31 до 36 и наличии клинических проблем, выбранных из гирсутизма, дермопатии и нарушений менструального цикла, диагностируют легкую степень тяжести заболевания, при величине ИСТ от 36 до 100 диагностируют среднюю степень тяжести заболевания, а при величине ИСТ более 100 диагностируют тяжелую степень тяжести заболевания. Изобретение обеспечивает точность и эффективность метода диагностики степени тяжести гиперандрогении и, соответственно, снижения фертильности. 1 табл., 3 пр.