Антипролиферативное средство

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к средству природного происхождения, обладающему антипролиферативной активностью. Средство, обладающее антипролиферативной активностью, представляющее собой белковый экстракт Toxocara canis, полученный путем экстрагирования гомогентата гельминтов Т. Canis фосфатно-солевым буферным раствором с рН 7,2 в соотношении 1:10 в течение 36-48 ч при температуре 4°С, центрифугирования. Вышеописанное средство обладает выраженной антипролиферативной активностью. 1 з.п. ф-лы, 1 табл.,2 пр.

 

Изобретение относится к области медицины и ветеринарии, в частности к новому средству природного происхождения, оказывающему антипролиферативное действие.

Современная медицина располагает достаточно обширным арсеналом лекарственных препаратов для химиотерапии опухолей. В основном химиотерапевтические средства представлены группами алкилирующих антинеопластических препаратов, антиметаболитов, противоопухолевых антибиотиков, противоопухолевых гормональных препаратов, иммуномодуляторов и некоторых других с иным механизмом действия. Большинство указанных противоопухолевых препаратов очень токсичны, и поэтому схемы и продолжительность химиотерапии выбирают с учетом проявления побочных эффектов, что отражается на эффективности лечения в целом.

Известны природные противоопухолевые препараты растительного происхождения (алкалоиды барвинка розового (винбластин, винкристин); алкалоиды тисового дерева (таксаны) (паклитаксел, доцетаксел); подофиллотоксины, выделяемые из подофилла щитовидного (этопозид, тенипозид) и алкалоиды безвременника великолепного (демекольцин (колхамин), колхицин)) и бактериального происхождения (рубромицин и др.), которые имеют ограниченное применение также из-за высокой токсичности и узкого терапевтического спектра действия (лечение некоторых разновидностей опухолей, преимущественно с экзофитным ростом).

Следовательно, существует необходимость в новых, высокоэффективных противоопухолевых препаратах природного происхождения, которые имели бы широкий спектр действия и были бы менее токсичными.

Гельминты - общее название паразитических червей, обитающих в организме человека, других животных и растений, вызывающих гельминтозы.

К гельминтам относят представителей ленточных червей, или цестод, сосальщиков, или трематод (обе эти группы относятся к плоским червям) и круглых червей, или нематод.

К числу последних относятся токсокары (в частности, Toxocara canis). Т. canis представляет нематоду, паразитирующую в кишечнике плотоядных, например собак; вызывающую инвазию, известную как токсокароз.

Во время паразитирования гельминты продуцируют и высвобождают различные продукты метаболизма. Секреторно-экскреторные продукты жизнедеятельности гельминтов являются для организма хозяина неестественными веществами в его физиологически процессах.

Известно, что возбудители инвазий могут оказывать модулирующее влияние на течение многих заболеваний самой различной этиологии, в том числе, злокачественных (например, Vasilev S. et al. (2015). В частности, имеются сообщения о том, что заражение мышей нематодой Trichinella spiralis (воспроизведение трихинеллеза) приводит к подавлению роста злокачественных клеток и повышению выживаемости животных после прививки клеток меланомы В-16 в условиях in vivo (Molinari J.A., Ebersole J.L., 1977; Pocock D., Meerovitch E., 1982; Kang Y.L. et al., 2013). Также имеются данные по испытанию продуктов метаболизма Т. spiralis с ингибирующим эффектом в отношении роста и выживаемости опухолевых клеток в условиях in vitro (Vasilev S. et al., 2015; Wang X.L. et al., 2009; Wang X.L. et al., 2013).

Исследования по оценке противоопухолевой активности Т. canis или продуктов метаболизма этих гельминтов ранее не проводились.

Целью изобретения является получение белковых экстрактов из тканей Т. canis, оценка их антипролиферативного действия на моделях опухолевых клеток различных линий и обеспечение их возможного применения в дальнейшем в качестве эффективного противоопухолевого средства.

Сущность изобретения заключается в том, что средство, обладающее антипролиферативной активностью, представляет белковый экстракт гельминтов, в частности экстракт Toxocara canis. Необходимо отметить, что условия получения экстракта из гомогената гельминтов, в том числе, Т. canis, зависят от используемого биологического материала, и существенными признаками получения белковых экстрактов является экстракция фосфатно-солевым буфером с рН=7,2.

Экстракт оказывает выраженное антипролиферативное и цитостатическое действие на моделях опухолевых клеток человека in vitro. Как уже указывалось выше, экстракт токсокар ранее не испытывался на моделях опухолевых клеток человека in vitro.

За счет природного происхождения предлагаемое антипролиферативное средство может быть менее токсичным при наличии высокой противоопухолевой эффективности широкого спектра действия.

Примеры конкретного исполнения

Пример 1. Приготовление белкового экстракта Т. canis.

В качестве средства, предположительно обладающего антипролиферативной активностью, использовали белковый экстракт из половозрелых Т. canis, предварительно очищенный от низкомолекулярных соединений.

Тщательно промытые дистиллированной водой, затем физиологическим раствором свежезамороженные половозрелые гельминты - Toxocara canis подвергали измельчению ножницами, гомогенизации в фарфоровой ступке, помещенной в посуду со льдом. В процессе гомогенизации полученный биоматериал подвергали многократному (3-5 раз) замораживанию и оттаиванию с одновременным растиранием для полного разрушения структуры сырья с целью получения однородной гомогенной массы. В качестве экстрагента белков из полученного гомогената Т. canis использовали фосфатно-солевой буферный раствор pH 7,2, который готовили по прописи (натрий хлористый - 8,5 г; двузамещенный фосфорнокислый натрий - 1,15 г; однозамещенный фосфорно-кислый калий - 0,2 г в 1 л дистиллированной воды) в соотношении 1:10. Экстрагирование проводили в условиях холодильной камеры при +4°C в течение 48 ч при постоянном перемешивании на магнитной мешалке. По истечении времени экстрагирования полученный биоматериал центрифугировали при 15000 об/мин в течение 20 мин в центрифуге с охлаждением Optima TLX (настольная центрифуга, контролируемая микропроцессором Becman Coulter Herneshal, S.A.). Полученный после центрифугирования белковый экстракт из Т. canis освобождали от низкомолекулярных белков путем диализа против фосфатно-солевого буферного раствора, разбавленного дистиллированной водой в соотношении 1:10.

Полученный белковый экстракт хранили при -20°С. Методом электрофореза в полиакриламидном геле определили, что белковый экстракт из Т. canis содержит более 20 белковый фракций различной электрофоретической подвижности и молекулярной массы.

Пример 2. Оценка влияния белкового экстракта Т. canis на культуры опухолевых клеток молочной железы человека (MCF-7) и ободочной кишки человека (Сасо-2) в зависимости от концентрации экстракта.

Целью настоящего опыта была оценка влияния белкового экстракта Т. canis на пролиферацию опухолевых клеток человека двух линий.

Материалы и методы

Клетки-мишени. В работе были использованы две эпителиальные клеточные линии: MCF-7 (аденокарцинома молочной железы человека) и Сасо-2 (аденокарцинома ободочной кишки человека). Клетки, вне периода постановки эксперимента, хранили в жидком азоте. Перед проведением исследований ампулы с клетками размораживали и культивировали по стандартной методике в культуральных флаконах (CORNING, Flask, 25 cm2, США) в ростовой среде DMEM GlutaMAX (Gibco) с добавлением 10% FBS и антибиотика/антимикотика (Gibco, ×100) в условиях повышенной влажности СО2-инкубатора (New Brunswick, Galaxy 170R) при Т=37°C в атмосфере 5% CO2.

Исследуемый белковый экстракт. Исследуемый белковый экстракт Т. canis (приготовление смотри в примере 1) представляет экстракт в фосфатно-солевом буфере, не стерильный. Концентрация белка в стоковом растворе составляла 10,9 мг/мл. До проведения исследований раствор хранился при температуре -70°C.

Описание исследования

Перед работой пробирку с белковым экстрактом размораживали при комнатной температуре. В эксперименте in vitro белковый экстракт испытывали в следующих концентрациях по белку: 12,5, 25, 50, 100, 250, 500, 1 и 2 мг/мл. Для приготовления разведений использовали ростовую среду DMEM GlutaMAX (DGIBCO) с 2% FBS и антибиотиком.

Перед проведением опыта готовили рабочий раствор с концентрацией 2 мг/мл, после его стерилизации через миллипоровый фильт-насадку (0,22 μ) были приготовлены разведения экстракта Т. canis: 1, 500, 250, 100, 50, 25 и 12,5 мкг/мл с использованием ростовой среды DMEM GlutaMAX (DGIBCO) с 2% FBS и антибиотиком.

Для проведения эксперимента клетки MCF-7 и Сасо-2 инкубировали по стандартной методике до получения субконфлуэнтного монослоя. В стадии активного роста клеточный монослой диспергировали раствором трипсин/версена, полученные клетки ресуспендировали в ростовой среде DMEM GlutaMAX (Gibco) с 10% FBS и антибиотиком стандартной концентрации. Свежеприготовленную суспензию клеток высевали в 24-луночные планшеты (SARSTEDT, Германия) по 35×103 клеток в лунку для клеток MCF-7 и по 30×103 клеток в лунку для клеток Сасо-2. После чего планшеты ставили в СО2-инкубатор на 3 ч до полного распластывания клеток. Затем из лунок удаляли среду с не прикрепившимися клетками и в опытные лунки вносили ростовую среду с исследуемыми концентрациями вещества (в 4 повторах на каждую исследуемую концентрацию). В качестве контроля оставили четыре лунки с клетками, которые культивировали в полной ростовой среде с 2% FBS без исследуемого вещества. Конечный объем ростовой среды в контрольных и опытных группах по 500 мкл на лунку.

В ходе эксперимента проводили ежедневное светооптическое наблюдение за клетками с использованием инвертированного микроскопа Olympus CK 40 (Japan), оценивая наличие или отсутствие изменений морфологии клеток в опытных лунках по сравнению с контролем. Пролиферативный ответ опухолевых клеток на действие исследуемого экстракта Т. canis оценивали по плотности и жизнеспособности сформированного монослоя после 96-часовой инкубации клеток в присутствии исследуемого экстракта.

Жизнеспособность клеток определяли, используя стандартную процедуру подсчета клеток в камере Горяева с предварительным окрашиванием клеточной суспензии раствором трипанового синего. Для этого монослой диспергировали раствором трипсин/версена, клетки ресуспендировали в ростовой среде и готовую клеточную суспензию красили 0,4% раствором Trypan Blue (SIGMA). После этого клетки считали в камере Горяева. Для этого в каждой лунке подсчитывали общее (тотальное) количество клеток и количество окрашенных (нежизнеспособных) клеток.

% жизнеспособных клеток (Nж) рассчитывали по формуле

Nж=[1,00-(Nо/Nт)]×100%,

где Nт - тотальное (общее) количество клеток в лунке;

Nо - количество окрашенных (нежизнеспособных) клеток в лунке.

Влияние исследуемого экстракта Т. canis на пролиферативную активность опухолевых клеток MCF-7 и Сасо-2 оценивали через 96 ч, сравнивая общее количество клеток в опытных лунках относительно контроля.

Результаты

В ходе эксперимента по оценке влияния исследуемого экстракта Т. canis в указанных концентрациях на эпителиальные культуры опухолевых клеток молочной железы человека (MCF-7) и ободочной кишки человека (Сасо-2) проводили ежедневный визуальный контроль за характером роста и морфологией растущих колоний клеток. Через 24 и 48 ч во всех опытных лунках с клетками MCF-7 и Сасо-2 плотность колоний сопоставима с контролем. Морфологических изменений не обнаружено. Детрит полностью отсутствовал.

Через 72 ч в клетках MCF-7 и Сасо-2 при концентрации 2 мг/мл наблюдали заметное отставание в росте. Отмечено, что в опытных лунках при 2 мг/мл размер колоний был меньше, чем в контрольной группе; также в поле зрения заметно снизилось количество митотически делящихся клеток, при этом морфологических изменений не отмечено. В лунках с клетками MCF-7 и Сасо-2 при 1 и 500 мкг/мл наблюдали незначительное отставание в росте по сравнению с контролем. В опытных лунках с концентрацией 12,5, 25, 50 и 250 мкг/мл отличий в сравнении с контрольной группой К не обнаружено.

Через 96 ч культивирования в клетках MCF-7 и Сасо-2 при концентрациях 2, 1 и 500 мкг/мл в поле зрения наблюдали значительно меньше пролиферирующих колоний, с меньшим количеством клеток, в сравнении с колониями клеток контрольной группы. Морфологические изменения отмечены в клетках MCF-7 только при максимальной концентрации 2 мг/мл. В этой опытной группе видны отдельные колонии, в которых наблюдали клетки без четких и ярко выраженных контуров с потерей характерного рисунка. Количество митотически делящихся клеток в поле зрения снижено. При этом детрит в среде отсутствовал.

После завершения эксперимента, через 96 ч, клетки трипсинизировали, полученную клеточную суспензию красили 0,4% раствором трипановым синим и количество клеток подсчитали в камере Горяева. Результаты подсчета клеток представлены в таблице 1.

Из данных, представленных в таблице 1, следует, что исследуемый экстракт Т. canis не оказывал существенного влияния на количество жизнеспособных клеток Сасо-2 через 96 ч инкубации. Так, при концентрациях 2, 1 и 500 мкг/мл количество жизнеспособных клеток ободочной кишки человека составляело 90,0, 88,5 и 88%, что сопоставимо с контрольной группой клеток, где жизнеспособность равна 96%. В тоже время, при этих же значениях концентрации наблюдалось значительное снижение тотального количества клеток в сравнении с контрольной группой. Так, общее количество клеток Сасо-2 в контрольной группе через 96 ч культивирования составляло 116,7×103 кл/лунку, а при 500, 1 и 2 мг/мл были значения 72,0×103, 63,3×103 и 65,9×103 кл/лунке соответственно. При концентрациях экстракта от 12,5 до 250 мкг/мл общее количество клеток сопоставимо с контрольной группой и колебалось от 94,0×103 до 106,0×103 кл/лунку. Исходя из этого можно заключить, что высокие концентрации экстракта Т. canis от 500 до 2 мг/мл ингибируют пролиферативную активность опухолевых клеток Сасо-2.

При сравнении полученных результатов (таблица 1) по влиянию экстракта Т. canis на культуру опухолевых клеток молочной железы человека и ободочной кишки человека можно предположить, что клетки MCF-7 более чувствительны к негативному действию исследуемого вещества. Так, из данных таблицы 1 следует, что количество жизнеспособных клеток MCF-7 постепенно снижалось с 95,2% при минимальной дозе от 12,5 до 79,5% при максимальном значении 2 мг/мл, по сравнению с контрольным значением 96,8%. Незначительное ингибирующее действие исследуемого экстракта на пролиферативную активность клеток MCF-7 проявлялась при уже в концентрации 50 мкг/мл, где общее количество клеток составляло 151,9×103 кл/лунке, в сравнении с контрольным значением 181,3×103 кл/лунке. С увеличением концентрации от 100 мкг/мл и выше ингибирующее действие экстракта усиливалось пропорционально концентрации и достигало максимальных значений при 2 мг/мл, где тотальное количество клеток снизилось в три раза по сравнению с контролем и составляло 60,0×103 кл/лунку.

На основании результатов, полученных в данной работе, можно заключить следующее.

1. Исследуемый экстракт Т. canis обладает выраженным антипролиферативным действием на клетки MCF-7 в концентрациях 100, 250, 500, 1 и 2 мг/мл, которое проявляется к 96 ч инкубации.

2. Влияние экстракта на клетки MCF-7 носит дозозависимый характер.

3. Ингибирующее действие экстракта Т. canis на пролиферативную активность культуры клеток Сасо-2 проявляется в меньшей степени и в более высоких концентрациях 500, 1 и 2 мг/мл.

4. Культура клеток MCF-7 обладает более высокой чувствительностью к антипролиферативному действию экстракта Т. canis по сравнению с клетками Сасо-2 в модели in vitro через 96 ч культивирования.

Литература

1. Kang Y.J., Jo Jo, Cho M.K. et al. Thrichinella spiralis infection reduces tumor growth and metastasis of B16-F10 melanoma cells // Vet. Parasitol. - 2013. - V. 196(1-2). - P. 106-113.

2. Molinari J.A., Ebersole J.L. Antineoplastic effects of long-term Trichinella spiralis infection on B-16 melanoma // Int. Arch. Allergy Appl. Immunol. - 1977. - V. 55(1-4). - P. 444-448.

3. Pocock D., Meerovitch E. The anti-neoplastic effect of trichinelosis in syngeneic murine model // Parasitology. - 1982. - V. 84 (Pt. 3). - P. 463-473.

4. Vasilev S., Ilic N., Gruden-Movsesijan A. et al. Necrosis and apoptosis in Trichinella spiralis-mediated tumour reduction // Cent. Eur. J. Immunology. - 2015. - V. 40(1). - P. 42-53.

5. Wang X.L., Fu B.Q., Yang S.J. et al. Trichinella spiralis - a potential antitumor agent // Vet. Parasitol. - 2009. - V. 159(3-4). - P. 249-252.

6. Wang X.L., Liu M.Y., Sun S.M. et al. An anti-tumor protein produced by Trichinella spiralis induces apoptosis in human hepatoma H7402 cells // Vet. Parasitol. - 2013. - V. 194(2-4). - P. 186-188.

1. Средство, обладающее антипролиферативной активностью, представляющее собой белковый экстракт Toxocara canis, полученный путем экстрагирования гомогентата гельминтов Т. Canis фосфатно-солевым буферным раствором с рН 7,2 в соотношении 1:10 в течение 36-48 ч при температуре 4°С, и центрифугирования.

2.Средство по п.1, отличающееся тем, что оно обладает антипролиферативной активностью на моделях опухолевых клеток человека in vitro.



 

Похожие патенты:

Группа изобретений относится к фармакологии и медицине. Предложено применение композиции, включающей эйкозапентаеновую кислоту в количестве от 1 до 3000 мг/100 мл и/или докозапентаеновую кислоту в количестве более 50 мг/100 мл, которая имеет содержание белка больше чем 10 en% и содержание лейцина больше чем 5 масс.

Изобретение относится к медицине, в частности к фотодинамической терапии опухолей. Для этого изготавливают микрочастицы из сополимера молочной и гликолевой кислот, содержащие фотосенсибилизатор.
Изобретение относится к медицине, онкологии, предназначено для комбинированного лечения немелкоклеточного рака легкого (НМРЛ) II-III стадии. Проводят 2 курса химиотерапии по схеме паклитаксел 175 мг/м2 и карбоплатин AUC 6 в 1-й и 20-й дни.

Изобретение относится к соединению формулы 2, или его фармацевтически приемлемой соли, где независимо для каждого случая R1 представляет собой водород; каждый из R2 и R3 независимо выбран из группы, состоящей из водорода; (C1-С6)алкила, необязательно замещенного ОН; гетероарила, содержащего 6 атомов в кольце, из которых 1 атом является N, а остальные представляют собой атомы С (пиридин); гетероциклила, содержащего 5 или 6 атомов в кольце, из которых 1 атом является N, а остальные представляют собой атомы С (пиперидин или пирролидин), необязательно замещенного группой, выбранной из метила, фенила, пиридинилметила, хинолинилметила, пирродинилметила, пиперидинилметила или азетидинилметила; арил(C1-С6)алкила, где арил содержит 6 атомов в кольце, необязательно замещенного амино или CH2NH2, где (С1-С6)алкил необязательно замещен ОН; гетероарил(C1-С6)алкила, где гетероарил содержит 5-9 атомов в кольце, из которых 1-2 атома являются гетероатомами, выбранными из N и S, а остальные атомы представляют собой атомы С (индол, пиридин, тиофен, бензимидазол, пиразол), где гетероарил необязательно замещен этилом; гетероцикло(C1-С6)алкила, где гетероцикл содержит 6 атомов в кольце, из которых 1 атом является N, а остальные представляют собой атомы С (пиперидин), необязательно замещенный метилом; и -[C(R4)2]p-R5, или R2 и R3 соединены друг с другом с образованием необязательно замещенного гетероциклического кольца, содержащего 5-10 атомов, из которых 1-2 атома являются гетероатомами, выбранными из N и О, а остальные представляют собой атомы С; R20 выбран из группы, состоящей из водорода; гетероциклила, содержащего 6 атомов в кольце, из которых 1 атом является гетероатомом, выбранным из N, а остальные атомы представляют собой атомы С (пиперидинил); галоген(C1-С6)алкила; трифторметила; фтор(C1-С6)алкила; -О-[C(R4)2]p-R5; -OR16, где R16 представляет собой метил; и амино, представляющего собой -N(R50)(R51), где каждый из R50 и R51 независимо представляет собой водород, (C1-С6)алкил, необязательно замещенный метокси, или -(CH2)m-R61, где R61 представляет собой арил, содержащий 6 атомов в кольце, и m равен целому числу от 1 до 8.

Изобретение относится к области органической химии, а именно к полиморфной форме А соединения формулы I. Технический результат: получена новая полиморфная форма соединения I, имеющая улучшенные свойства, например такие, как стабильность, гигроскопичность, полезная при лечении mTOR-ассоциированного нарушения.

Изобретение относится к способам получения альфа-гликосфинголипидов и новым альфа-гликосфинголипидам, фармацевтическим композициям на их основе, применимым в фармацевтической промышленности.

Настоящее изобретение касается фталазиноновых производных, представленных формулой I, в которой радикалы и символы имеют определения, указанные в формуле изобретения.

Изобретение относится к новым соединениям, выбранным из группы соединений, указанных ниже, или их фармацевтически приемлемым солям, которые обладают свойствами ингибиторов активности киназы, выбранной из BTK, ErbB1, ErbB2, ErbB3, ErbB4, TEC, ITK, ВМХ, или мутанта указанной киназы.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к иммунологии, и может быть использовано в медицине для индуцирования противоопухолевого иммунитета против экспрессирующего Lck, WHSC2, SART2, SART3, UBE2V, EGFR, PTHrP или MRP3 рака.

Изобретение относится к области иммунологии. Предложены варианты антител, связывающих опухолеассоциированный антигенный полипептид ТАТ425.

Настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для лечения ран, осложненных повреждением кости. Фармацевтическая композиция для лечения ран, осложненных повреждением кости, которая состоит из от 4% вес.

Изобретение относится к области фармакологии, а именно к средству, обладающему антипролиферативным действием. Средство, обладающее антипролиферативным действием, представляющее собой продукт жизнедеятельности гельминтов - жидкость пузырей Echinococcus multilocularis, отобранную от зараженных крыс.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу приготовления низкомолекулярной биологически активной субстанции на основе вермикультуры.
Изобретение относится к медицине, а именно к травматологии и ортопедии, артрологии и физиотерапии, и может быть использовано для безоперационного лечения асептического некроза головки бедренной кости.
Изобретение относится к области медицины, а именно к клинической иммунологии - аллергологии, и предназначено для лечения среднетяжелой атопической бронхиальной астмы бытовой этиологии у пациентов с иммунодефицитным состоянием, страдающих частыми острыми респираторными инфекциями.
Изобретение относится к области медицины, конкретно к фармацевтической композиции, обладающей противотромботическим, тромболитическим, иммуномодулирующим, противовоспалительным действиями, нормализующей липидный и углеводный обмен, конкретно к фармацевтической композиции на основе субстанции «пиявит» (далее пиявит), изготовленной из лиофилизированной медицинской пиявки.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к средству, обладающему антиоксидантной активностью, содержащему в качестве действующего вещества 5-аминосалициловую кислоту, кверцетин и 5% спиртовой экстракт прополиса, а в качестве основы содержит лутрол F127, кремофор RH-40 и глицерин, при определенном соотношении компонентов.
Изобретение относится к медицине, а именно к способам лечения заболеваний различной этиологии и травм различных органов. Предварительно при электропунктурном обследовании определяют общий потенциал тела пациента и потенциала в точке, расположенной на поверхности тела на минимальном расстоянии от органа, требующего лечения, либо в его ближайшей проекционной зоне Захарьина-Геда на коже.
Изобретение относится к медицине, а именно к терапии, и может быть использовано для лечения хронических заболеваний. Для этого проводят курс процедур точечного массажа и гирудотерапии.
Изобретение относится к медицине, в частности к офтальмологии и эндокринологии, и может быть использовано для лечения эндокринной офтальмопатии. .
Изобретение относится к медицине, а именно к оториноларингологии и физиотерапии, и может быть использовано для лечения обонятельной дисфункции у больных острым риносинуситом. Способ включает использование местных деконгестантов, ирригационную, противовоспалительную и муколитическую терапию. После стихания острых проявлений заболевания дополнительно проводят многоканальную электростимуляцию на области жевательных мышц, мышц крыльев носа, круговой мышцы рта и трапеции с двух сторон. Электростимуляцию проводят биполярно-импульсным током с трапециевидной огибающей посылкой и паузой по 2 с частотой 20-120 МГц, силой тока до слабой вибрации мышц под электродами. Время воздействия составляет 10-15 минут. После этого осуществляют постановку пиявки на латеральную стенку преддверия носа с одной стороны на 10-12 минут. Курс физиотерапевтического лечения составляет 4-5 сочетанных еженедельных процедур. Способ обеспечивает повышение эффективности лечения обонятельной дисфункции у пациентов с острым риносинуситом за счёт многофакторного последовательного воздействия на все звенья обонятельного анализатора и вегетативную нервную систему. 1 пр.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к средству природного происхождения, обладающему антипролиферативной активностью. Средство, обладающее антипролиферативной активностью, представляющее собой белковый экстракт Toxocara canis, полученный путем экстрагирования гомогентата гельминтов Т. Canis фосфатно-солевым буферным раствором с рН 7,2 в соотношении 1:10 в течение 36-48 ч при температуре 4°С, центрифугирования. Вышеописанное средство обладает выраженной антипролиферативной активностью. 1 з.п. ф-лы, 1 табл.,2 пр.

Наверх